血细胞分析仪检测原理
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血细胞分析仪检测原理
乐家新 周建山 兰亚婷
传统的血细胞检查完全采用手工方法,不仅操作繁琐费时,而且由于多种原因,计数结果的准确性和精密度难以保证。1958年,库尔特采用电阻率变化与电子技术相结合的方法,发明了性能比较稳定的电阻抗法血细胞计数仪,开创了血细胞分析的新纪元。20世纪90年代以来,随着各种高新技术在血细胞分析仪中的应用,使其检测原理不断完善,检测水平不断提高,测量参数不断增加,各种类型的血细胞分析仪已在国内外各医院广泛使用。但从根本上讲,其检测原理大致分为两部分,即电阻抗法与光散射法。
图1 细胞计数电阻抗原理
作者单位:100853北京,解放军总医院临床检验科
一、电阻抗法血细胞分析技术
(一)电阻抗法白细胞计数和分类原理
电阻抗法白细胞计数原理是根据血细胞非传导性的性质,以对电解质溶液中悬浮颗粒在通过计数小孔时引起的电阻变化进行检测为基础,进行白细胞计数和体积测定。在等渗电解质溶液(稀释液)中,有一个用于细胞计数的小孔管,其内侧充满了稀释液,并有一个内电极,其外侧细胞悬液(稀释液)中有一个外电极,小孔两侧的电极之间有稳定的电流。细胞为相对不良导体,其导电性质比稀释液低,当有一个细胞通过小孔时,于瞬间引起了电压变化而出现一个脉冲信号。脉冲的数量与细胞的数量成正比,脉冲的高度与细胞的体积成正比。脉冲信号经放大、阈值调节、甄别、整形后,送入计数系统进行处理,得出被测细胞的数量。图1显示出血细胞计数仪应用电阻抗原理进行细胞计数及体积分析的方
法及过程。
目前,许多仪器除给出细胞数外,还同时提供可以表示细胞群体分布情况的图形———直方图。可显示出某一特定细胞群的平均细胞体积、细胞分布情况和是否存在明显的异常细胞群,由脉冲累积得到。如图2所示,左图为示波器显示的所分析细胞的脉冲大小,右图为相应的体积分布直方图,横坐标为体积,纵坐标为相对数量。
在进行白细胞分析时,仪器将体积范围从35～450fl 分为256个通道,每个通道约为1164fl ,并将每个白细胞的脉冲根据其体积大小分类并储存在相应的体积通道中。再由计算机拟合成一条平滑曲线,从而得到白细胞体积分布直方图(见图3),其纵坐标表示白细胞的相对数量(REL No 1),横坐标表示白细胞体积(单位:fl )。
电阻抗法得到的白细胞分类值是根据各群细胞在白细胞直方图上所占面积的大小计算得来的(见图4)。白细胞计数池中除加入一定量的稀释液外还加入了溶血剂,此溶血剂一方面使红细胞溶解;另一方面使白细胞浆经胞膜渗出,胞膜紧裹在细胞核或存在的颗粒周围,使白细胞成为“膜包核”。仪器将体积在35～450fl 的这种颗粒认定为白细胞,并根据其体积大小在直方图上从左至右初步确认其相应的三个细胞群。在正常白细胞直方图上,小细胞群是位于左侧又高又陡的峰,分布在35～90fl 范围,以成熟淋巴细胞(L YM )为主要特征细胞;大细胞群是位于右侧较低且分布宽的峰,
跨越160～450fl ,以中性粒细胞为主要特征细胞;位于大、小细胞群之间的较平坦的区域,分布在90～160fl 范围,是单个核细胞(MONO ),也被称为中间细胞(MID ),以单核细胞为主要特征细胞。仪器根据各细胞群占总体的比例计算出相应的百分比,如果与该标本的白细胞总数相乘,即得到各类细胞的绝对值
。
图2
脉冲信号与直方图的关系
图3
白细胞体积分布直方图
图4
白细胞分类计数计算方法示意图
图5 电阻抗法血小板测试原理
(二)电阻抗法红细胞检测原理
根据各参数的检测原理不同,大致分为3个部分。
11红细胞(RBC )计数和红细胞比容测定原理:其原理
同白细胞检测相同。即当RBC 通过小孔时,形成相应大小的脉冲,脉冲的多少代表RBC 的数量,脉冲的高度代表单个
细胞的体积。脉冲高度叠加,经换算即可得HCT 。有的仪器先以单个细胞高度计算出红细胞平均体积(MCV ),再乘以红细胞数,得出HCT 。仪器根据所测单个细胞体积及相同体积细胞占总体的比例,可打印出红细胞体积分布直方图。
尽管计数红细胞的血样中含有白细胞,但由于正常血液中红细胞∶白细胞约为750∶1,故白细胞因素可忽略不计。在某些病理情况下(如白血病),白细胞数明显增加而又伴严重贫血时,可使所得红细胞各项参数产生明显误差,需要校正后方可发出检验报告。
21血红蛋白测定原理:在稀释的血液中加入溶血剂后,
红细胞被溶解,释放出血红蛋白(Hb ),后者与溶血剂中有关成分结合形成Hb 衍生物,进入Hb 测试系统,在特定波长
(一般在530～550nm )下比色,吸光度的变化与液体中Hb
含量成正比,仪器便可显示其浓度。不同系列血细胞分析仪配套溶血剂配方不同,形成的Hb 衍生物亦不同,其吸收光谱各异但最大吸收均接近540nm 。校正仪器必须以HiCN 值为标准。大多数系列血细胞分析仪溶血剂内均含有氰化钾,与Hb 作用后形成氰化Hb (注意不是HiCN ),其特点是显色稳定,最大吸收接近540nm ,但吸收光谱与HiCN 有明显不同。此点在仪器校正时应十分注意。
31各项红细胞指数的检测原理:根据仪器检测的RBC 、HCT 和Hb 的数据,经仪器内存程序换算出红细胞平均体积
(MCV )、红细胞平均血红蛋白的含量(MCH )和红细胞平均
血红蛋白浓度(MCHC )。
红细胞体积分布宽度(RDW )由血细胞分析仪在检测红细胞数量的过程中,同时测量红细胞体积大小的差异获得,是反映外周血红细胞体积异质性的参数。RDW 能直接、客观、及时地反映红细胞大小不等的程度,对贫血的诊断有重要意义。
(三)血小板检测原理
血小板随红细胞一起在一个系统中进行检测,根据不同的域值,计算机分别给出血小板与红细胞数目(见图5)。血小板分别贮存于64个通道内,其体积分布直方图范围通常为2～30fl 之间。平均血小板体积(MPV )是血小板直方图曲线所含的群体算术平均体积,正常人的MPV 值与血小板数量呈非线性负相关。
二、光散射法血细胞分析技术
(一)光散射法白细胞计数与分类原理
利用多项技术(如射频、细胞化学染色和流式细胞术)联
合同时检测一个白细胞,综合分析实验数据,得出较为准确的白细胞五分类结果,主要有4种类型。
第一类,光散射与细胞化学技术联合的白细胞分类法:根据各类白细胞的过氧化物酶活性不同,将血液经过氧化物酶染色后,用光散射法测量白细胞的酶反应强度和体积大小,测量数据经计算机处理后得出白细胞总数和分类值。
第二类,容量、电导、光散射(VCS )白细胞分类法:血液
经特殊溶血剂处理后,白细胞仍保持与体内形态相同的自然状态,使用鞘流技术使白细胞单个通过检测器,接受容量、电导、光散射三种技术的同时检测。检测的数据经计算机处理后得出各种白细胞分类结果。
第三类,阻抗与射频技术联合的白细胞分类法:在特定的作用温度和时间内,用各自专一的溶血剂将非己细胞溶解后,利用电阻抗法在不同的系统内分别计数嗜酸性粒细胞和嗜碱粒细胞。根据淋巴细胞、单核细胞及粒细胞的结构特点,采用电阻抗与射频联合检测方式,计数这三类细胞的比例。再利用幼稚细胞膜上脂质较成熟白细胞少,结合的硫化氨基酸多,形态不受溶血剂破坏的特性,通过电阻抗法检测出幼稚细胞的数量。
第四类,多角度偏振光散射白细胞分类法:利用嗜碱粒细胞颗粒具有吸湿的特性和红细胞经低渗鞘流液处理后不干扰白细胞计数的特点。利用鞘流技术,使细胞单个通过测量区,仪器从四个角度分别测定散射光的密度,所得的数据计算机处理后得到白细胞分类结果。
(二)光散射法红细胞检测原理
在测试系统中,全血与红细胞/血小板稀释液混合,使自然状态下双凹盘状扁平圆形的红细胞成为球形并经戊二醛固定(RBC体积不变)。使得红细胞无论以何种方位通过测量区时,被激光束照射后所得的信号是相同的。激光束以低角度前向光散射和高角度光散射同时测量一个红细胞,根据低角度光散射转换能量大小,测量单个红细胞体积与总数;根据高角度光散射得出单个红细胞内血红蛋白浓度,测量数据经计算机处理后得出RBC、MCV和HCT等参数值。
(三)光散射法血小板检测原理
血小板与红细胞在一个系统中测量,其原理是:根据同质性球体光散射的Mie理论,当球形化的血小板单个通过激光照射区时,仪器在两个角度测定激光的散射强度:高角度主要测细胞的折射指数(RI),它与细胞的密度有关;低角度主要测细胞体积的大小。血小板的体积在1～30fl,RI在1135～1140之间。由于红细胞含有高浓度的血红蛋白,其折射系数较高(RI在1135～1144),因此,大血小板虽然可能与小红细胞、红细胞碎片、红细胞残骸以及其他细胞碎片的体积相似,但因其内容物不同,RI相差较大,在血小板二维散射图上可区别并分别计数。
三、血细胞分析仪检测的质量保证
血细胞分析仪虽然提高了检验结果的准确性和精密度,但欲获得准确的检测结果,必须做好分析前、分析中和分析后的质量控制。
11分析前质量控制:包括(1)做好操作人员上岗前的培训,选择高素质的专业技术人员,这是获得准确结果的关键。
(2)按仪器说明书的要求,做好仪器的安装和校正。(3)按照ICSH公布的评价方案,对仪器测试标本的总变异性、精密度、携带污染率、线性范围、可比性和准确性进行测试、评价。
(4)注意标本的采集和贮存要求:选用ICSH推荐用EDTA 二钾(115～2mg/ml血)作为静脉血的抗凝剂,抗凝血在室温下,WBC、RBC、PL T可稳定24h,白细胞分类可稳定6～8 h,Hb可稳定数日,但2h后粒细胞形态即有变化,故需作镜检下分类者,应及早推血片。
21分析中质量控制:包括(1)了解试剂与仪器白细胞分类的关系,选用原装试剂和经国家鉴定的合格试剂;(2)注意测试时试剂的温度和溶血剂的用量及溶血时间对结果的影响;(3)了解仪器不完全堵孔对检测结果的影响;(4)做好室内质控,注意冷球蛋白和高脂血症等病理因素对仪器检测结果的影响。
31分析后质量控制:包括(1)根据白细胞直方图及参数变化确定白细胞分类是否需要显微镜检查;(2)注意分析实验结果各参数之间的关系;(3)注意与临床资料进行相关分析;(4)经常听取临床医生的意见,及时纠正潜在引起实验偏差的趋势,不断改进实验室的工作,提高检验质量。
思考题
11下列哪项是血细胞分析仪法抗凝血的首选抗凝剂?
A1肝素;B1草酸钾;C1EDTA22K;D1枸橼酸钠;E1 EDTA22Na
21属于血细胞分析仪红细胞参数的是(多选)
A1RDW;B1MPV;C1HCT;D1HG B;E1PDW
31电阻抗法血细胞分析仪,与脉冲的高低成正比的是A1细胞移动的速度;B1细胞体积的大小;C1细胞的数 量;D1细胞的比积;E1细胞是否有核
41根据ICSH对血细胞分析仪的评价方案,鉴定仪器需测试 (多选)
A1总变异性;B1线性范围;C1携带污染率;D1敏感性; E1可比性
51电阻抗法血细胞分析仪是由下列哪位发明的?
A1莫尔德蓝;B1拉格克蓝茨;C1库尔特;D1法拉第; E1 麦克斯韦
61关于电阻抗法血细胞分析仪红细胞比容测定下列哪项是 错误的
A1直接叠加脉冲的高度获得;B1不受稀释液渗透压变 化的影响;C1严重贫血的慢性粒细胞白血病标本, 其HCT结果需要校正;D1由红细胞平均体积乘以 红细胞数获得;E1白细胞数明显增加而又伴严重 贫血时,检测结果需要校正
71关于血细胞分析仪测定血红蛋白的叙述,下列错误的是 (多选)
A1血红蛋白衍生物的最大吸收峰均接近540nm;B1溶 血剂含氰化钾时其反应终产物为HiCN;C1测定结 果的校正必须以HiCN为标准;D1能直接根据吸光 度进行计算;E1羟基血红蛋白法不适用于电阻抗法 血细胞分析仪
81输液时同侧肘静脉采集的血标本不会影响电阻抗法血细 胞分析仪哪些检测结果(多选)
A1白细胞分类值;B1血红蛋白测定;C1RDW;D1红细 胞比容测定;E1血小板计数
91电阻抗法血细胞分析仪不完全堵孔时,下列哪项不受影 响
A1白细胞直方图;B1红细胞计数;C1红细胞比容测 定;D1血红蛋白测定;E1MPV
101关于光散射与细胞化学技术联合进行白细胞分类的叙
述中,下列哪些是错误的(多选)
A1嗜碱粒细胞有很强的过氧化物酶活性;B1中性粒细胞有较强的过氧化物酶活性;C1单核细胞有弱过氧化物酶活性;D1淋巴细胞和嗜酸粒细胞无此酶;E1光散射数据代表酶反应强度
正确答案可点击https://www.360docs.net/doc/1111979134.html,查询
(收稿日期:2003211221)
(本文编辑:唐栋)
基金项目:1998年度广东省重点攻关项目资助
作者单位:510630广州,中山大学附属第三医院皮肤性病科?经验交流?
聚合酶链反应-单链构象的多态性技术在解脲脲原体生物群和基因型鉴定中的应用
陆春 朱国兴 刘毅
本研究通过对解脲脲原体(UU)的14个标准血清型的聚合酶链反应2单链构象的多态性(PCR2SSCP)电泳分析,直接鉴定UU生物群和基因型。
一、对象和方法
1.对象:(1)标准菌株:UU标准菌株1～14型由广东省江门市皮肤性病防治研究所转赠。(2)临床菌株:60株耐药性UU临床菌株均来自我科确诊为非淋菌性尿道炎/宫颈炎患者的泌尿生殖道,经液体培养和固体培养鉴定为UU。其中男性12例,女性48例。年龄20～65岁。
2.试剂与仪器:UU液体和固体(A7琼脂)培养基均购自生物梅里埃公司;(PCR)扩增仪(PE2400型)为美国PE公司产品。设计PCR扩增引物,并由华美生物工程公司合成,浓度均配成10pmol。
3.标本收集:对上述患者,常规取样后立即将标本洗入预先配置好的液体培养基,置37℃温箱中培养,并进行菌种鉴定,阳性标本记录结果后立即置-70℃低温冰箱编号备用。
4.菌株DNA提取:将菌株自低温冰箱中取出,自然解冻,吸取50μl菌液,加入DNA提取液50μl,充分混匀,沸水浴10min。再12000r/min离心10min,取上清液2μl做PCR模板,其余置-20℃备用。
5.扩增产物琼脂糖电泳:经2%琼脂糖电泳,阳性扩增产物分别为173bp和217bp。出现阳性条带者继续取扩增产物进行SSCP分析。
6.PCR产物的SSCP分析:(1)灌胶:取8%的聚丙烯酰胺胶液50ml,加入饱和的过硫酸胺36μl、TEMED300μl,混匀后灌入玻璃板中,胶凝1～2h后,取出梳子,将带有凝胶的玻璃固定在电泳槽上。(2)变性:在012ml离心管中加入10μl变性剂(Marker不加),PCR产物8μl,充分混匀后顺势离心,97℃变性6min,立即冰浴5min。(3)电泳:冲净凝胶孔后,上样,在015×TBE电泳,电压30V,过夜12h。(4)银染:10%乙醇浸泡5min,1113%硝酸浸泡3min,01012mol/ L硝酸银浸泡20min,0128mol/L碳酸钠并01019%甲醛振摇至显出条带,10%乙酸3min,每步间隔均用单蒸水清洗2～3次,0128mol/L碳酸钠并01019%甲醛需现配。
二、结果
1.首先建立UU标准菌株1～14型基因分型模式,以便作为标准对照。结果显示,生物群1(包括血清型1、3、6和14)经2%琼脂糖电泳产生1个173bp的PCR产物,并从此可获得3个构象异构体的SSCP条带模式,血清1型和6型有明确的模式,而3型和14型是同一模式。生物群2(包括其余10个血清型)经2%琼脂糖电泳产生一个217bp的PCR产物中,并获得2个SSCP模式,其中一个模式含血清型2、5、8和9,另一个模式含血清型4、7、10、11、12和13。因此,通过PCR2SSCP分析,将UU标准菌株共划分成两大生物群、5个基因型。生物群1包括基因型1(对应于血清型1)、基因型3(对应于血清型3和14)以及基因型6(对应于血清型6);生物群2包括基因型4(对应于血清型4、7、10、11、12和13)和基因型8(对应于血清型2、5、8和9)。
2.60株临床菌株PCR2SSCP分析结果简述:在本研究60株UU临床菌株中,生物群1共44株(44/60,73133%),生物群2共16株(16/60,26167%)。各个基因型所占比例如下:基因型1共21株(21/60,35100%),基因型3共13株(13/60,21167%),基因型6共10株(10/60,16167%),基因型4共11株(11/60,18113%),基因型8共5株(5/60, 8133%)。
该方法在UU基因分型中尚处于初步研究阶段,加之UU血清型多达14个,有待进一步完善,以达到一步法鉴定出所有UU的14个血清型。
(收稿日期:2003205216)
(本文编辑:毛家都)
血细胞分析仪
深圳大学实验报告 课程名称：体外诊断仪器原理与实践 实验项目名称：血细胞分析仪 学院：医学院 专业：医疗器械工程 指导教师： 报告人：学号：班级： 实验时间： 2014-05-09 实验报告提交时间： 教务部制
方法、步骤： 实验仪器: 三分类血细胞分析仪: 一、简要操作指南及注意事项 1、开机前的准备 检查试剂是否足量，有无浑浊变质，试剂管道有无扭结，并倒空废液瓶2、开机
综上可知: 不同脉冲波的大小表示细胞体积的不同. 不同脉冲波的数量即为细胞的个数 库尔特原理主要由测量杯、小孔管、内外电极等组成。其中 , 小孔管（主要是红宝石孔）下图 是整个测量系统的主要部分 , 它决定了血球分析仪的测量准确度。小孔越小(大概100
μ米那样) , 测量准确度越高 , 但易造成堵孔 ; 小孔越大 ,测量准确度越低 , 但不易堵孔。目前市场上销售的利用电阻抗法设计的血球分析仪的竞争焦点就在于把小孔做得小而不易堵孔 ,为了实现细胞逐个通过可采用鞘流法,根据两侧鞘流的流速不同使细胞一个个的进入孔内从而不造成堵孔和细胞并排进入的误差的问题(如下图): 其排堵方法大致有反冲法和电灼烧法两种 , 或二者兼而有之。测量系统得到的电平信号经放大、阈值调节、甄别、整形后进行计数 , 得到 RBC、WBC、PLT 的数量。但三者的计数原理又略有不同。白细胞计数时 , 机内微型计算机按体积大小将白细胞从 30～45fl 分为 256 个通道 , 每个通道为1164fl。根据细胞大小被分别放在不同的通道中得到白细胞体积的直方图 , 根据体积大小可分为不同的细胞群 , 第一群主要是淋巴细胞 , 第二群主要是单核细胞 , 第三群为粒细胞 , 这就是“三分群法”也就是常说的三分类。 红细胞计数原理同白细胞计数原理大致相同。在红细胞计数的同时 , 把各脉冲幅度相加 , 得到红细胞的总体积 , 经计算得到红细胞的平均体积。血红蛋白的测量通常用比色法得到。红细胞的平均体积 (MCV) , 红细胞平均血红蛋白含量 (MCH) , 平均血红蛋白浓度 (MCHC) , 红细胞体积分布宽度(RDW) 都是通过计算得来的。血小板计数时 , 微型计算机按体积分成 64 个通道 , 范围为 2～28fl 之间 , 血小板的平均体积(MPV) 是计算得来的
ACT.5 diff AL血液细胞分析仪操作规程
ACT.5 diff AL血液细胞分析仪操作规程1 目的 此程序用于ACT 5DIFF AL全自动血液分析仪的操作与维护。 2 适用范围 适用于ACT 5DIFF全自动血液分析仪。 3 检测项目 ACT-5DIFF AL各检测参数的方法见表1。 表1. Coulter ACT-5DIFF AL各检测参数的方法
4 检测原理 ACT 5DIFF AL可以提供完整的WBC五项分类，这是由A C V（吸光率细胞化学和体积）技术和WBC/BASO方法同时决定的。 A C V技术使用吸光率、细胞化学和聚焦流阻抗原理。WBC/BASO方法则使用了差别溶解、阻抗技术及差别阈值的原理。 5 运行条件 1．工作环境温度：+15℃～+30℃ 2. 工作环境相对湿度：≤85% 3. 仪器工作场所：水平放置在清洁、干燥、无尘、无腐蚀性气体、无阳光直射、无强磁场的工作台上。 6 开关机程序 （一）开启电源并登录/关闭电源并退出 开机之前请检查电源线是否连接，试剂是否足够，废液桶是否需要倾倒，打印纸是否足够。 1、打开电源并登录 ①打开工作站电脑以及显示器，等待完全电脑启动； ②打开分析仪电源，将电源开关置于“ON”的位置（a），并检查红色的LED是否点亮（b）。
③登录系统：选择登录名称（Login Name），输入密码， 点击。 ④如果启用“自动启动”，那么“启动”会自动运行；如果禁用了“自动启动”，将会闪烁，点击它运行“启动”。 ⑤启动完成，出现如下主菜单（Main Menu）。根据相关设定，可能会打印启动的本底报告。 ⑥如果本底结果合格――“Pass”，表明“启动”成功；如果结果失败――“Failed”，点 击，再点击查看本底报告。重新点击，再次进行“start up启动”操作。如果本底仍然失败，请联系Beckman－Coulter代表。 说明：启动（Start Up）过程大约耗费3分钟时间。 本底限值: WBC≤0.3 ×109/L RBC≤0.03 ×1012/L Hgb≤0.3 ×g/dL
血细胞分析仪检测原理
?继续教育园地? 血细胞分析仪检测原理 乐家新 周建山 兰亚婷 传统的血细胞检查完全采用手工方法,不仅操作繁琐费时,而且由于多种原因,计数结果的准确性和精密度难以保证。1958年,库尔特采用电阻率变化与电子技术相结合的方法,发明了性能比较稳定的电阻抗法血细胞计数仪,开创了血细胞分析的新纪元。20世纪90年代以来,随着各种高新技术在血细胞分析仪中的应用,使其检测原理不断完善,检测水平不断提高,测量参数不断增加,各种类型的血细胞分析仪已在国内外各医院广泛使用。但从根本上讲,其检测原理大致分为两部分,即电阻抗法与光散射法。 图1 细胞计数电阻抗原理 作者单位:100853北京,解放军总医院临床检验科 一、电阻抗法血细胞分析技术 (一)电阻抗法白细胞计数和分类原理 电阻抗法白细胞计数原理是根据血细胞非传导性的性质,以对电解质溶液中悬浮颗粒在通过计数小孔时引起的电阻变化进行检测为基础,进行白细胞计数和体积测定。在等渗电解质溶液(稀释液)中,有一个用于细胞计数的小孔管,其内侧充满了稀释液,并有一个内电极,其外侧细胞悬液(稀释液)中有一个外电极,小孔两侧的电极之间有稳定的电流。细胞为相对不良导体,其导电性质比稀释液低,当有一个细胞通过小孔时,于瞬间引起了电压变化而出现一个脉冲信号。脉冲的数量与细胞的数量成正比,脉冲的高度与细胞的体积成正比。脉冲信号经放大、阈值调节、甄别、整形后,送入计数系统进行处理,得出被测细胞的数量。图1显示出血细胞计数仪应用电阻抗原理进行细胞计数及体积分析的方 法及过程。 目前,许多仪器除给出细胞数外,还同时提供可以表示细胞群体分布情况的图形———直方图。可显示出某一特定细胞群的平均细胞体积、细胞分布情况和是否存在明显的异常细胞群,由脉冲累积得到。如图2所示,左图为示波器显示的所分析细胞的脉冲大小,右图为相应的体积分布直方图,横坐标为体积,纵坐标为相对数量。 在进行白细胞分析时,仪器将体积范围从35～450fl 分为256个通道,每个通道约为1164fl ,并将每个白细胞的脉冲根据其体积大小分类并储存在相应的体积通道中。再由计算机拟合成一条平滑曲线,从而得到白细胞体积分布直方图(见图3),其纵坐标表示白细胞的相对数量(REL No 1),横坐标表示白细胞体积(单位:fl )。 电阻抗法得到的白细胞分类值是根据各群细胞在白细胞直方图上所占面积的大小计算得来的(见图4)。白细胞计数池中除加入一定量的稀释液外还加入了溶血剂,此溶血剂一方面使红细胞溶解;另一方面使白细胞浆经胞膜渗出,胞膜紧裹在细胞核或存在的颗粒周围,使白细胞成为“膜包核”。仪器将体积在35～450fl 的这种颗粒认定为白细胞,并根据其体积大小在直方图上从左至右初步确认其相应的三个细胞群。在正常白细胞直方图上,小细胞群是位于左侧又高又陡的峰,分布在35～90fl 范围,以成熟淋巴细胞(L YM )为主要特征细胞;大细胞群是位于右侧较低且分布宽的峰,
迈瑞-5380血球仪操作规程
1 仪器设备检验项目 适用于血液白细胞计数及分类，红细胞计数，血红蛋白，血小板计数，红细胞压积，红细胞体积分布宽度，平均红细胞血红蛋白含量，平均红细胞血红蛋白浓度，平均红细胞体积，血小板体积分布宽度、平均血小板体积和血小板压积等检验。 2 仪器设备试剂 BC-5380血液细胞分析仪专用试剂：M-53D稀释液；M-53LEO(I) 溶血剂；M-53LEO(II) 溶血剂；M-53LH 溶血剂；M-53 清洁液；M-53P 探头清洁液。所有试剂应参照试剂的使用说明进行保存。变质、超过效期的所有试剂不能使用。 3 仪器设备标本 原始样品采集、制备、处理、检验和存放见检验科相关规范。 4 仪器设备性能参数 BC-5380血液细胞分析仪一般资料见附件1；BC-5380血液细胞分析仪性能指标见附件2。 5 仪器设备环境要求，使用安全措施 5.1 仪器设备环境要求 5.1.1 空间安装要求 仪器应安装在稳固工作台上。在仪器两侧各保留至少1米的空间，以方便维护和保养。后部至少要有0.50米的空间，以防止阻碍热气的排放并保证主机后的液路管道不受挤压。将BC-5380血液细胞分析仪安放在通风良好、灰尘少的地方。避免在过热或过冷以及日光直射的环境中使用BC-5380血液细胞分析仪。保证操作台面以及主机下方有足够的空间放置稀释液、废液桶。 5.1.2 运行条件 环境温度要求：10℃～40℃。 环境相对湿度要求：10%～90%。 电源电压要求：100～240VAC，50/60Hz。 仪器设备周围应尽可能无尘、无机械振动、无污染、无大噪音源和电源干扰；仪器附近无强电磁干扰源以及电刷型电机、闪烁荧光灯和经常开关的电接触性设备；不应放在通风条件差、阳光直射的环境中，或热源及风源前。 5.2 仪器安全 在仪器设备上面和周围不要使用可燃性危险品，避免引起火灾和爆炸。 在电源打开状态下，禁止打开仪器前上面、侧面及背面面板，以免损害线路板；禁止触摸BC-5380血液细胞分析仪外壳里面的电子元件，尤其避免湿手触摸，以免造成电击。
迈瑞血细胞分析仪
迈瑞血细胞分析仪 Document number：WTWYT-WYWY-BTGTT-YTTYU-2018GT
BC-3000PLUS血细胞分析仪工作原理及故障分析 摘要：本文主要介绍了BC-3000PLUS血细胞分析仪的工作原理和其常见的一些故障分析与处理方法。 前言 目前我国大型医院在血常规检查时多采用五分类血球仪，但其机器及试剂成本过高，在医院大型体检和乡镇医院，三分类的血细胞分析仪任占有不可取代的地位，迈瑞BC-3000PLUS血细胞分析仪以其价格合理，性能稳定，重复性好等优势，成为市场上占有率最高的三分类血球仪。现将其工作原理和使用过程中可能遇到的问题与分享，介绍如下。 工作原理：该仪器采用库尔特.贝克曼原理对血液中的WBC、RBC、PLT进行计数，并对WBC分类，利用朗伯.比尔定律对HGB进行测量。 常见故障：该血球仪常见的故障主要分为机械故障、液路故障、结果异常等 一机械故障 BC-3000PLUS机械运动部分主要有采样针组件，用其实现标本采集、稀释、混匀等功能；注射器及注射器电机组件，用其实现样本和试剂的定量及机器管路的清洗； 1升降/偏转电机故障 BC3000PLUS血细胞分析仪采用德国进口步进电机，（）上下各一个，上面的控制升降，下面的控制偏转，在工作时，功率驱动板接受CPU板的控制信号，给电机提供驱动电压，带动采样针的上下左右的动作。在特定的位置，装有光耦，用来确定采样针的位置，上面一个长线的为升降电机光耦，下面两个短线
的为偏转电机光耦。若在规定的时间，光耦没有被触发，或者光耦没在规定时间就被触发，则机器报相对应的电机故障。 故障处理方法：若出现这样的报警，先进入服务菜单进行自检，其步骤如下，“菜单——服务——系统检测——升降/偏转电机检测”，如果结果正常，则故障消除。若故障无法消除，检测1温度是否太低2丝杆脏，阻力大3运动过程中是否有东西阻挡运动部件4上下光耦故障5电机故障6驱动板坏。另外，由于升降电机的运动优先于偏转电机，当升降电机故障时可能会导致机器报“偏转电机故障”的警。 维修案例 现象采样针无法正确偏转到计数池上方机器，机器报“偏转电机故障” 处理过程及故障分析进入维修菜单，做偏转电机自检，正常，但是再做标本，故障依旧。因为可以完成自检过程，而且上下左右的运动都比较流畅，可以排除电机自身故障、阻力过大故障、阻挡、驱动板供电不足故障，而且光耦能传递位置信号。再仔细观察计数过程，发现给偏转定位并控制采样针搅拌的那个小孔（在偏转电机上方的一个两层塑料环上）通过右光耦时机器没能控制偏转电机停下，判定是该光耦的问题，拆下擦拭后机器正常。 2注射器电机故障 BC-3000PLUS一共有三个注射器、两个电机，其中10ml注射器由一个电机推动、另外50ul和的注射器由同一个电机推动。电机工作原理跟升降/偏转电机原理相同，每个电机对应一个光耦。当光耦没有按规定被触发时，机器报相应的电机故障。
血细胞分析仪发展史
血细胞分析仪50年的发展历史和展望 中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院检验科张时民 1590 年荷兰人米德尔堡和詹森设计制造了最原始的显微镜（图1），1610 年伽利略使用望远镜观察小的物体并将其放大，后来被列文霍 克改进成为原始的显微镜。1658 年意大利人马尔皮基应用最 原始的显微镜首先观察到了红细胞，他是第一个见到红细胞 的人，开始进行红细胞计数则是200 年后的事情了。而设计 并生产出第一台血细胞计数仪则又过了近100 年。 自从发明了显微镜以后，人们从微观世界中了解和观察到 了血液的组成，并根据他们的特点分别将它们称为红细胞和 白细胞和血小板。在以后的研究中，人们发现许多疾病的发 生和发展与血液中的细胞数量之间存在一定的关系。依据对 疾病诊断的需求，人们开始寻求对血液中细胞的数量进行计数。1852 年就有人开始设计对红细胞的计数办法，1855 年发明了用于计数血细胞的计数板，目前仍然使用的改良Neubauer 计数板就是应用最为广泛和持续时间最为长久的 经典一种，虽然各种类型的血细胞计数仪已在广泛使用，但血细胞计数板法仍然是最为可靠和最为经典的计数技术，它不仅适用于血细胞计数，还可用于其他细胞、动物血细胞、微小粒子及需要在显微镜下计数的各种样品，因此计数板仍然是检验工作者应该掌握的基本技能，是不应该忘记和放弃的手段。 随着对血细胞计数和分析需求的不断增加，对血细胞计数的方法进行改进，实现自动化、高速度、准确性、标准化和智能化的要求也越来越高，现代的血液细胞分析技术与50 年前的发明虽然有着本质上的相同或相似，但已经有了显著的飞跃。作者力图通过有限的资料对细胞计数和分析技术的发展进程进行回顾，并对最新的进展进行介绍和展望，期望对关注这一领域和从事血细胞分析工作的同行有所帮助。 一、血细胞计数仪的发展历史 谈到血细胞计数仪的发展史，在这个领域首开先河的人是1912 年出生在美国阿肯色州一个小城的人Wallance H. Coulter （图2a，b），他年青时对电子学
血细胞分析仪操作规程
DIRUI迪瑞 BF-6700 全自动无分类血细胞分析仪操作规程 一、开机程序 1.1开机前的检查、准备 （1）试剂：检查稀释液、溶血剂是否充足，有无过期；试剂管路是否弯折，连接是否可靠。（2）废液桶：废液桶是否有足够的空间盛装废液，如废液桶满，应及时倒掉并清理。（3）打印机：检查打印机是否正确安装，打印纸是否充足。 （4）供电电源：检查电源线是否正确连接。 （5）连接：检查分析仪与计算机主机之间通讯电缆是否正确连接；外置条码扫描仪的电缆线是否与计算机连接就绪。 1.2开机 （1）打开分析仪右侧的电源开关，电源指示灯亮。 （2）打开电脑电源后启动分析仪软件。输入用户名和密码，登录软件。（初始用户名为Admin，初始密码为1。） （3）自检过程结束后，系统进入操作界面。 二、校准 分析仪提供三种校准方式：人工校准、校准物校准和新鲜血校准。 2.1人工校准 在“人工校准”界面直接更改校准系数，点击“保存”键。 2.2校准物校准与新鲜血校准 在校准物校准和新鲜血校准中，所有与校准相关的数学计算都由分析仪自动完成，同一次校准物校准测试需用同一批号的校准物，测试3—5次，建议5次。新鲜血校准测试需3—5各样本，每个样本测5次。校准后得到的校准系数自动保存在“人工校准”界面。 校准物校准步骤： 在校准物校准界面点击【开始计数】键后，封闭进样器仓门自动打开，将校准物放置在封闭进样器3号位上，关闭进样仓门，按分析仪前面板右侧的计数键进行测试，测试结构自动保存，测试5次后点击【保存】键，校准系数自动存入“人工校准”界面的“校准系数”中。
新鲜血校准的操作步骤与上述相同。 三、质控程序 每天开机后要先进行质控测试。 3.1质控设置 在“质控”的设置界面下，设置质控品信息。 3.2质控测试 在“质控计数”界面进行质控测试。点击【开始计数】键后，封闭进样器仓门自动打开，将质控品放置在1号位上，关闭进样仓门，按分析仪前面板右侧计数键进行质控测试。可在“质控图”及“质控列表”中查询质控结果。 四、常规操作程序 4.1试剂注册 4.1.1自动扫描 在分析仪软件上点击【服务】，在“维护”栏中点击【试剂注册】，用手持条码阅读器扫描试剂条形码，软件提示“注册成功”。 4.1.2手动输入 如果条形码由于脏污、脱落等原因不能被扫描时，可手工输入条形码信息：在输入框中录入正确的条码信息，点击【确定】键，试剂条码注册成功。 注：更换整瓶/整桶试剂时，注册成功后，在“服务”→“维护”→“更换/灌注”界面下点击【更换】键，软件提示“正在更换……”，当软件提示“操作完成”时，点击【确定】键，即完成试剂的更换。 4.2样本登记 （1）在分析仪软件上点击【样本登记】，然后点击【设置】，可以设置患者信息的输入项目。设置完成后可按此设置内容作为默认项目类型进行样本信息输入。 （2）点击【新增】，在界面左侧编辑区可直接输入样本编号、条码号、病历号、患者姓名、年龄、床号；采样/送检时间可在其右侧的下拉框中直接选择时间；参考值、性别、科室、送检医生均可在其右侧的下拉框中选择，或直接输入预先在“设置”中设置的代码。编辑后点击【保存】键或者按键盘回车键即可进行下一样本的编辑。 注：也可先进行样本测试，测试后在“数据浏览”界面编辑样本信息。
血细胞分析仪的工作原理
血细胞分析仪也就是我们所说的血液细胞分析仪，也被叫做血球仪、血球计数仪等。是临床检验中较为常见的检验分析仪器，它可以检查红细胞,白细胞,血小板计数. 该仪器提高了实验结果的准确性，还提供了许多实验指标，对疾病的诊断和鉴别诊断起了重要的作用。了解血细胞分析仪的工作原理可以让我们更好的使用该设备。 选择一款好的血细胞分析仪我们需要考虑很多，像品牌、质量、口碑、价格等等。综合看来国产血细胞分析仪的性价比相对较高，而如今也已有越来越多的医院开始选用国产设备了。可见国产设备也是很好的选择。 （普朗医疗品牌-- XFA6100A型血液细胞分析仪） XFA6100A型血液细胞分析仪，该设备是三分类双通道二十二项，全部中文（或英文）菜单显示，设备采用嵌入式、触屏式双操作系统以及成熟稳定的管路设计和精确的丝杆传动方式。 XFA6100A特点： 1、采用嵌入式、触屏式双操作系统对测量数据和图形自动进行运算、分析、处理保证测量准确、可靠。 2、TFT 显示各种测量参数和直方图、全部中文（或英文）菜单显示。 3、由中文打印机直接打印测量结果，八种报告单打印模式。还可外接打印机。 4、仪器具有自检和维护功能，开、关机时自动清洗取样器和管路，在待机状态时自动定时清洗。
5、具有自动和手动排堵方式，采用智能化瞬时高压电蚀和正压反冲双功能排堵，有效避免堵孔。 6、采用时间计数和先进的波形分析技术，配合高速数据采集和强大的数据处理系统，保证测量准确有效 7、成熟稳定的管路设计结合先进的扫流技术，，精确的丝杆传动方式，保证系统的稳定和可靠 8、浮动界标算法和异常提示功能，可有效帮助用户识别和筛选异常血样 9、系统可进行通用、成男、成女、儿童和新生儿参考值设定和编辑 10、仪器具有RS232接口、USB、PS2、并口接口。
血球仪操作规程
BC-5380五分类血液细胞分析仪简易操作规程 1.主要内容与适用范围 本规程规定了BC-5380五分类血液细胞分析仪操作程序及日常维护保养。 本规程适用于BC-5380五分类血液细胞分析仪的日常使用。 2.参考文件：BC-5380五分类血液细胞分析仪使用说明书。 3.操作程序 3.1开机前的准备 检查试剂是否足量，有无浑浊变质，试剂管道有无扭结，与主机的连接是否可靠。 3.2开机和用户登录 将主机左侧的“O/I”电源开关置于“I”以开启主机电源。启动外置计算机，进入操作系统后，双击桌面上终端软件的图标，运行已安装的终端软件。在弹出的登录对话框中，输入用户名和密码后，进入主界面，并执行开机初始化程序。开机初始化结束后，可进入“图形回顾”界面，以查看开机本底的检测结果。3.3本底检查 在主界面点击快捷按钮区的“图形回顾”按钮，检查显示在“图形回顾”界面的本底结果是否满足以下要求： WBC≤0.3?109/L RBC≤0.03?1012/L HGB≤1g/L HCT≤0.5% PLT≤10?109/L 3.4每日质控 在进行样本分析前，每日需对分析仪进行质控分析（详见使用说明书第8章质量控制）。 3.5选择工作模式 在样本分析前，操作者可在主界面点击快捷按钮区的“工作单”按钮，录入或修改第一条待分析样本的完整工作单信息，以选择工作模式。 3.6全血测量 A 混匀用K2EDTA（1.5～2.2mg/mL血）抗凝的样本，放到采样针下，确保采样针插入足够深度的血样内；
B按吸样键，采样针自动吸入样本，听到蜂鸣器响后，直接移开样本管，分析仪自动执行样本分析。 3.7预稀释测量 A 在主界面点击快捷按钮区的“加稀释液”按钮，按照界面提示，取一个干净的离心管，开盖后将采样针竖直顶到离心管底部； B 按吸样键，让分析仪自动排出稀释液。在稀释液排出的过程中，需小心避免产生气泡、挂液或溅出。听到蜂鸣器响后，移开离心管。操作者也可使用移液器移取180μL稀释液到离心管中； C 加稀释液完毕，点击“取消”按钮，关闭并退出加稀释液的操作； D 人工采集20μL血样注入盛有稀释液的离心管中，盖好盖子后混匀； E 将该预稀释血样放置3分钟后，再次混匀，放于采样针下，按吸样键，采样针自动吸入样本，听到蜂鸣器响后，移开样本，分析仪自动执行样本分析。3.8休眠 液路相关操作停止的时间超出设定的时间间隔后，分析仪会自动进入休眠状态。此时，仍可以执行与液路无关的任意操作。操作者也可在主界面点击“菜单”按钮，在弹出的菜单中，选择“关闭仪器”→“仪器休眠”，使分析仪进入休眠状态。 分析仪处于休眠状态时，可按吸样键取消休眠，也可在主界面上点击“菜单”按钮，在弹出的菜单中选择“关闭仪器”→“取消休眠”，使分析仪退出休眠状态。 3.9关机 每日工作完毕，在主界面点击快捷按钮区的“关闭仪器”按钮执行关机，并按照界面的提示将主机左侧的“O/I”电源开关置于“O”以关掉主机电源。 4.维护保养注意事项 4.1根据仪器自身的定时、定量维护功能进行维护保养。 4.2根据实际使用情况，按需进行清洗。 桐妇保院检验科制
五分类血球原理总结
血细胞分析仪五分类检测技术与原理 血细胞分析仪是医院临床检验应用非常广泛的仪器之一，随着近几年计算机技术的日新月异的发展，血细胞分析的技术也从三分类转向五分类，从二维空间进而转 向三维空间，而且我们也注意到现代血细胞分析仪的五分类技术许多采用了和当今非 常先进的流式细胞仪相同的技术，如散射光检测技术、鞘流技术、激光技术等等。本 文重点就五分类血细胞分析仪器的检测方法及其应用加以阐述 1、电阻抗、高频电导及激光散射联合检测法 这是Coutler公司1987年推出的新技术，血球悬浮在电解液中，用一定的电流通过传感器的内外两个电极，由于血细胞电阻抗很大，当血细胞通过两个 电极时，电极间阻抗瞬间增大，形成幅度与血细胞体积成正比的电脉冲，根据 脉冲的大小可测出细胞的体积。在测量红细胞时，利用一个脉冲甄别器，将幅 度较小的血小板脉冲去掉，保留红细胞和白细胞脉冲，因血液中白胞的数量不 及红细胞的1/500，故其总数据近似认为是对红细胞计数。在测量白细胞时， 利用溶血素，使红细胞溶解，再对剩下的白细胞计数。在对血小板计数时，调 低脉冲甄别器的阈值，计出总数，再减去红细胞的计数（其中已包括白细胞的 计数），即为血小板计数。由于不同类型但体积相同的细胞产生的脉冲幅度相 同，故仅靠体积是不能完全区分，利用高频电导法和激光散射分析白细胞内部 结构可以弥补这一缺陷。虽然细胞壁不能使低频电流通过，但能通过高频电流，细胞核的大小和密度不同，它们对高频电流的阻抗也不同，因此可以用来区分 白细胞。激光散射技术主要用来检查细胞膜表面特征和内部结构。激光散射对 细胞颗粒的结构和密度的区分能力强，粗颗粒产生的光散射比细颗粒强，借此 可将粒细胞区分开来，美国COULTER公司的STKS、MAXM系列血细胞分 析仪五分类就是利用电阻法、高频电导及激光散射联合检测法 2、光散射和细胞化学染色联合检测法 它利用激光散射和过氧化物酶染色技术进行细胞分类。嗜酸性粒细胞有很强的过氧化氢酶活性，中性粒细胞浆内含有较为丰富的过氧化氢酶，单核细胞 次之，原始细胞则极少，而淋巴细胞和嗜碱性细胞则缺管此酶。使用微量血液 经与含有清洗剂和甲醛的高渗液体进行适当稀释并孵育几十秒钟，此时细胞被 清洗剂所破坏，白细胞浆内酶固定，此后继续再进行第二次反应，加入过氧化 氢和四氢一萘酚加热，此时待测细胞中过氧化氢酶分解过氧化氢产生氧，后者 使四氯一萘酚显色并沉淀定位于含酶的颗粒中，此类细胞经激光束，由于光散 射及细胞大小不同而被分类。显然暑碱性细胞、淋巴细胞、原始细胞由于不含
i-STAT1血液分析仪标准操作规程
i-STAT? 1 System SOP 床旁血液分析仪标准操作规程
目录 一、系统概述 (1) ●使用目的 (1) ●CDS及CDS PLUS数据管理系统 (2) 二、分析仪、卡片及质控存储要求 (2) ●分析仪安装环境 (2) ●测试卡 (2) ●质控品（如采用卡片配套质控品，请参照以下注意事项） (2) 三、样本要求 (2) ●各种卡片适合的血液类型及采集方法 (3) ●注意事项：避免出现以下情况 (3) ●合适的测试时间 (3) 四、系统检测 (4) 五、样本检测 (4) ●准备卡片 (4) ●样品测试 (4) 六、质控检测（如采用卡片配套质控品，请参照以下操作流程） (5) 七、结果分析 (5) ●显示结果 (5) ●取消的结果 (5) ●打印多个结果 (6) ●传输结果到CDS数据管理系统 (6) 八、日常维护 (6) 九、附录 (7) ●参考范围 (7) ●危急值结果范围 (9) ●干扰物质 (10) ●临床意义 (12) ●测量原理 (15)
一、系统概述 i-STAT1 血液分析仪由以下主要部件组成：分析仪、充电底座、打印机及模拟器 ●使用目的 i-STAT1血液分析仪可以用于血气、生化、血凝、心脏标记物项目的监护。 ●分析时间 ?ACT测试卡：检测终点-最高1000秒（16.7分钟） ?PT/INR测试卡：检测终点-最高300秒（5分钟） ?cTnI和BNP测试卡：600秒（10分钟） ?CK-MB测试卡：300秒（5分钟）
?其他测试卡：通常为130至200秒 ●CDS及CDS plus数据管理系统 CDS系统为血液分析仪提供了信息管理功能，可对数据进行存储、分析、编辑以及连接医院的LIS/HIS系统。 CDS结合CDS plus系统可以打印中文报告，绘制质控数据图，绘制动态曲线。 i-STAT1 血液分析仪通过充电底座，可以把数据传输到CDS以及CDS plus系统。 二、分析仪、卡片及质控存储要求 ●分析仪安装环境 ●测试卡 测试卡封存在独立包装袋中。存储在温度介于2-8℃的环境中。 请勿冷冻测试卡。测试卡可以在室温18至30℃下储存。 一旦在室温放置，不能再将测试卡放还至冷藏箱，而且不能置于超过30℃的温度下。 如果包装袋被刺破，就不能再使用该测试卡。请勿在标明的失效期之后使用。 ●质控品（如采用卡片配套质控品，请参照以下注意事项） ●血气、生化、ACT和PT/INR 的i-STAT质控品 ●储存于2至8℃。质控品可以在室温18至30℃下储存5天。 ●用于cTnI和BNP 的i-STAT质控品 ●储存于≤-18°C的无霜冷冻库中。解冻后，开封或未开封1.0ml小瓶在盖着盖子的情况 下于2至8℃可以稳定4小时。请勿冷冻。 ●电子模拟器，室温储存并且在使用后通过将塑料盖和电子模拟器置于保护罩内来防止接 触垫被污染。 三、样本要求
BC-6800血液细胞分析仪标准操作程序-
BC—6８00血液细胞分析仪标准操作程序 1 仪器得检测原理及检验项目 BC-６800采用鞘流阻抗法、激光散射法、结合荧光染色得流式细胞技术进行细胞分类、计数;采用比色法进行血红蛋白测定.输出３3项测量参数加14项研究参数；两个直方图、六个二维散点图、三个三维散点图。 ２仪器设备试剂 ＢC-6８00血液细胞分析仪专用试剂:Ｍ-68DS稀释液、Ｍ—68DR稀释液；Ｍ－６8FD 染色液、M—６8FＮ染色液、M—６8FR染色液;M—６8LD 溶血剂、Ｍ—６8LB 溶血剂、M—６8ＬH 溶血剂、M－６8LN溶血剂；探头清洁液。所有试剂应参照试剂得使用说明进行保存。变质、超过效期得所有试剂不能使用。 3 仪器设备标本 原始样品采集、制备、处理、检验与存放见检验科相关规范。 4 仪器设备性能参数 BC—68００血液细胞分析仪一般资料见附件1;BC—68００血液细胞分析仪性能指标见附件２。 5 仪器设备环境要求，使用安全措施 5、１仪器设备环境要求 5。1。１空间安装要求 仪器应安装在稳固工作台上。在仪器两侧各保留至少1米得空间，以方便维护与保养.仪器与气源后部分别至少要有0。50米得空间，以防止阻碍热气得排放并保证主机后得液路管道不受挤压.将BC-６８00血液细胞分析仪安放在通风良好、灰尘少得地方.避免在过热或过冷以及日光直射得环境中使用BＣ—６8００血液细胞分析仪.保证操作台面以及主机下方有足够得空间放置稀释液、废液桶。 ５。1。2 运行条件 环境温度要求：15℃~32℃. 环境相对湿度要求:30%～85%。 电源电压要求: 主机:（220V/23０V）±10％，50Hz／60Hz±2Hｚ。 气源：(220Ｖ)±10％，5０Ｈｚ±1Hz. 仪器设备周围应尽可能无尘、无机械振动、无污染、无大噪音源与电源干扰；远离强电磁场干扰源；不要靠近电刷型电机、闪烁荧光灯与经常开关得电接触性设备；建议在运行设备之前对实验室得电磁环境进行评估；避免强光直接照射；避免置于热源及风源前;选择一个通风良好得位置;具有良好得接地环境；不要将主机放置在斜面上;室内使用。 5、2 仪器安全 在仪器设备上面与周围不要使用可燃性危险品，避免引起火灾与爆炸。 在电源打开状态下,禁止打开仪器前上面、侧面及背面面板,以免损害线路板；禁止触摸BC-6800血液细胞分析仪外壳里面得电子元件,尤其避免湿手触摸，以免造成电击。 仪器设备使用前,必须认真检查设备之间连接及外接线（件）就是否正确（连接方法见BC—６8００使用说明书4、３节）、正常，电源插头就是否正确插接，设备就是否处于正常状态。实验过程中如遇水、电故障或中断，应立即关闭影响仪器设备安全得有
自动血细胞分析仪操作规程
自动血细胞分析仪操作规 程 Prepared on 22 November 2020
4．操作程序 开机启动 首先开启仪器主机侧面板的电源开关，然后开电脑主机，仪器主机前面板状态指示灯变为橙绿闪烁，仪器主机初始化后开始自检，自检时仪器会自动灌注稀释液、清洗液及溶血剂，并清洗液路。自检完成后，仪器进入血液细胞分析窗口。 本底测试 4.2.1放置洁净的空试管于采样针下，应确保采样针轻挨试管底部。在血液细胞分析窗口，点击“排液”图标，仪器通过采样针排出稀释液到试管中。 4.2.2在血液细胞分析窗口，点击“编号”图标，进入下一个编号操作，输入“0”，再点击“确定”按钮返回血液细胞分析窗口。（注意：仪器系统软件将本底测试的顺序号设定为0，试测试数据将不存储在仪器中，但禁止将血液样本的顺序号设定为0）。 4.2.3将盛有稀释液的试管放在采样针下，按仪器前面板的“RUN”键，待听到“滴”的一声后，方可移走试管。仪器开始自动计数、测量。 4.2.4计数过程中，在窗口的右下方有WBC、RBC的计数计时器，显示WBC、RBC的计数时间。当计数时间过长或过短时，仪器会发出故障报警，并给出报警提示。若出现报警提示，即参照说明第9章《故障处理》进行处理。 质量控制 首次装机或在每天进行血液样本测试之前必须对仪器进行质控，具体参照说明第5章《质量控制》进行处理。 4．4标定 若本底测试，质控结果达不至要求，且某些参数漂移变化较大，则必须对仪器进行重新标定，具体参照说明第6章《标定》进行处理。 4．5血液样本的采集 4．5．1由于所有的临床样本、质控物、标定物均可能含有人血或人的血清，具有潜在的传染性，因此在处理这些物品时必须遵守已建立的实验室或临床操作规程，穿好工作服，戴好医用手套及安全眼镜。
电阻抗法血液分析仪检测原理
电阻抗法血液分析仪检测原理 电阻抗 电阻抗法血液分析仪检测原理 2009-8-7 9:52 【大中小】电阻抗法血细胞计数原理又名库尔特原理。 1. 红细胞检测原理：将等渗电解质溶液稀释的细胞悬液置入不导电的容器红细胞检测原 理中，将小孔管（也称传感器）插进细胞悬液中。小孔管内充满电解质溶液，并有一个内电极，小孔管的外侧细胞悬液中有一个外电极。当接通电源后，位于小孔管两侧电极产生稳定电流，稀释细胞悬液从小孔管外侧通过小孔管壁上宝石小孔（直径 <100um，厚度约75um）向小孔管内部流动，使小孔感应区内电阻增高，引起瞬间电压变化形成脉冲信号，脉冲振幅越高，细胞体积越大，脉冲数量越多，细胞数量越多，由此得出血液中血细胞数量和体积值。 三分类血球分析仪工作原理示意图 2. 白细胞分类计数原理根据电阻抗法原理，经溶血剂处理的、脱水的、不同体积的白细胞通过小孔时，脉冲大小不同，将体积为35～450fl 白细胞，分为256 个通道，其中，淋巴细胞为单个核细胞、颗粒少、细胞小，位于35～90fl 的小细胞区，粒细胞（中性粒细胞）的核分多叶、颗粒多、胞体大，位于160fl 以上的大细胞区，单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、原始细胞、幼稚细胞等，位于90～160fl 的单个核细胞区，又称为中间型细胞。仪器根据各亚群占总体的比例，计算出各亚群细胞的百分率，医学教育网整理并同时计算各亚群细胞的绝对值，显示白细胞体积分布直方图。 3.血红蛋白测定原理当稀释血液中加入溶血剂后，红细胞溶解并释放出血红蛋白，血红蛋白与溶血剂中的某些成分结合形成一种血红蛋白衍生物，在特定波长（530～550nm）下比色，吸光度变化与稀释液中Hb 含量成正比，最终显示Hb 浓度。不同类型血液分析仪，溶血剂配方不同，所形成血红蛋白衍生物不同，吸收光谱不同，如含氰化钾的溶血剂，与血红蛋白医学教育网整理作用后形成氰化血红蛋白，其最大吸收峰接近540nm。
自动血细胞分析仪操作规范流程
4．操作程序 4.1开机启动 首先开启仪器主机侧面板的电源开关，然后开电脑主机，仪器主机前面板状态指示灯变为橙绿闪烁，仪器主机初始化后开始自检，自检时仪器会自动灌注稀释液、清洗液及溶血剂，并清洗液路。自检完成后，仪器进入血液细胞分析窗口。 4.2本底测试 4.2.1放置洁净的空试管于采样针下，应确保采样针轻挨试管底部。在血液细胞分析窗口，点击“排液”图标，仪器通过采样针排出稀释液到试管中。 4.2.2在血液细胞分析窗口，点击“编号”图标，进入下一个编号操作，输入“0”，再点击“确定”按钮返回血液细胞分析窗口。（注意：仪器系统软件将本底测试的顺序号设定为0，试测试数据将不存储在仪器中，但禁止将血液样本的顺序号设定为0）。 4.2.3将盛有稀释液的试管放在采样针下，按仪器前面板的“RUN”键，待听到“滴”的一声后，方可移走试管。仪器开始自动计数、测量。 4.2.4计数过程中，在窗口的右下方有WBC、RBC的计数计时器，显示WBC、RBC的计数时间。当计数时间过长或过短时，仪器会发出故障报警，并给出报警提示。若出现报警提示，即参照说明第9章《故障处理》进行处理。 4.3质量控制 首次装机或在每天进行血液样本测试之前必须对仪器进行质控，具体参照说明第5章《质量控制》进行处理。 4．4标定 若本底测试，质控结果达不至要求，且某些参数漂移变化较大，则必须对仪器进行重新标定，具体参照说明第6章《标定》进行处理。 4．5血液样本的采集 4．5．1由于所有的临床样本、质控物、标定物均可能含有人血或人的血清，具有潜在的传染性，因此在处理这些物品时必须遵守已建立的实验室或临床操作规程，穿好工作服，戴好医用手套及安全眼镜。 4．5．2采血过程避孕必须干净、无污染，必须使用合格的抗凝剂。严禁剧烈摇动采血管。在室温下，静脉血只能保存4个小时，若在短时间内不能将血样处
血细胞分析仪五分类检测技术及原理
血细胞分析仪五分类检测技术及原理 血细胞分析仪是医院临床检验应用非常广泛的仪器之一，随着科学技术日新月异的发展，血细胞分析的技术也从几年前的三分类转向现在的五分类，从二维空间进而转向三维空间，同时现代血细胞分析仪的五分类技术许多采用了先进的技术，如鞘流技术、激光技术等。下面就五分类血细胞分析仪器的检测方法及其应用加以说明。 1 采用阻抗、激光散射和荧光染色技术检测法 直流电阻抗法（DC）用于测量细胞体积大小。激光散射产生的前向散射光、侧向散射光和侧向荧光可用于探测白细胞体积大小、细胞内含物的情况（细胞核以及颗粒情况），侧向荧光则可以反映细胞内脱氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA）的含量，特有的嗜酸性粒细胞检测溶血剂Str-matolyzer-EO可将除了嗜酸细胞以外的所有细胞溶解或萎缩，含有完整嗜酸细胞的液体通过小孔可以按照电阻法计数技术进行计数。在嗜碱细胞通道中，使用特殊溶血剂Strmatolyzer-BA可将除了嗜碱细胞以外的所有细胞溶解或萎缩，含有完整嗜碱细胞的液体通过小孔可以按照电阻法计数技术进行计数。幼稚细胞检查通道（IMI）可以根据幼稚细胞膜比成熟细胞膜表面含有脂质较少的现象，在细胞稀释悬液中加入硫化氨基酸，由于占位不同，结合在幼稚细胞表面的氨基酸较多，对溶血剂有抵抗作用，当加入溶血剂后成熟细胞易被溶解，而幼稚细胞不易被破坏，可通过电阻法检测出来。综合各个测量方法，得到白细胞五分类的图形和数据。这种技术主要应用在Sysmex研制和开发的SE-9000、SE-9500、XE-2100、XT-1800等系列血液分析仪中。 2 电阻抗和射频电导联合检测法 这种方法是分别采用四个检测系统来检测不同类型的细胞:（1）淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞检测系统:在细胞悬浮液中加入溶血剂使红细胞溶解，而使白细胞保持完整，细胞浆及核形态近似于生理状态，当这些细胞通过检测系统时，对白细胞进行电阻抗法（测量细胞体积）和射频电导法（检测细胞核和颗粒密度）的联合检测，结果将细胞分成淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞三个群体。（2）嗜酸性细胞和嗜碱性细胞两种检测系统:在细胞悬浮液中加入特殊的溶血剂，除嗜酸性细胞和嗜碱性细胞外，其他细胞均被溶解或萎缩，再对保持完整的嗜酸性细胞或嗜碱性细胞进行计数。（3）幼稚细胞检测系统:在细胞悬浮液中加入硫化氨基酸，由于占位不同，结合在幼稚细胞的氨基酸比成熟细胞多，且对溶血剂有抵抗作用，当加入溶血剂时，成熟细胞被溶解，只保留着可能存在的幼稚细胞用来计数。目前日本东亚公司的NE1500、SYSNEX公司的SE9000血细胞分析仪就是采用这种方法进行五分类的。 3 多角度激光偏振光散射检测法
血细胞计数仪操作规程
血细胞计数仪操作规程 （SOP）
血细胞计数仪操作规程 一．仪器性能 1.操作简便 一旦标本经过吸氧管吸样后，其他的所有操作都自动完成，包 括稀释和价溶血剂等步骤。 所有操作功能菜单，例如校正、改变设置和数据确定，都可通 过按屏幕上的触摸按钮完成。 2.高精密度和良好的重复性 该仪器在低稀释比例的情况下（WBC200：1；RBC40，000：1； 稀释样本360ul），提供了高精密度和良好的重复性。内置式电 路能自动补偿液体温度的变化，和纠正由于细胞同时通过引起 的细胞计数错误。计数孔能避开外部噪音。 3.可选择但计数和双计数模式。当选择双计数模式时，屏幕将显 示每个参数二次测定的平均数。 4.自动自检 当仪器打开后，会自动注入液体管道，进行一次校正自检。如 发现问题，LCD会显示出错误信号，例如气泡、无稀释剂、堵 孔，使操作着能迅速地确认和解决问题。 5.内置式质控程序 仪器内安装有内置式质控程序，可对 WBC,RBC,PLT,HGB,HCT(MCV),PLT,LY%.MO%,RDW和MPV 标准，正常范围设置，平均数和CV值校正和X-R，X B，X D.CV
控制。 6.数据储存和读取功能 仪器可储存400个标本数据和20个标本的图谱，只需触摸屏幕按钮就可随时取出储存的数据。 7.自动充液和清洗 仪器打开后，管道内自动注入液体。仪器关闭后仪器自动清洗管道。 8.吸样管自动清洗 仪器自动清洗残留在吸样嘴上的血液。使操作者在测定过程中无需接触血样。 9.自动排除堵孔 仪器在每次计数完毕后，从小孔周围中去除血液蛋白或杂质颗粒，以防止堵孔。即便发生堵孔，也能自动排除堵孔，bongo 重新计数标本。 10.自动处理废液 清洁剂（标准附件）含有次氯酸盐，可溶解废液中的氰化钾（KCN）。每测定10分样品后，用DH-620清洗自动清洗液体管道。 二．准备工作 1. 环境要求：不要在阳光直射出安装仪器 仪器必须在下列条件中使用 温度15~30℃
迈瑞BC—3000三分类血液分析仪操作规程
迈瑞BC—3000三分类血液分析仪操作规程 1.原理 BC—3000用阻抗法测量WBC、RBC和PLT的体积分布和数目。电极插在液体中计数孔的两边，在计数孔的两边周围建立了一个电场环境，根据血细胞非传导性的性质，当有细胞通过计数孔时，将引起阻抗变化，阻抗变化的大小与细胞体积成正比。 2.标本的采集与处理2.1标本的采集 静脉血标本：推荐用K2EDTA抗凝剂，含量规定为1.5-2.2mg/ml血。静脉采集血样。 稀释标本：a、用20ul的采血管采集血样，注意，不要用力捏挤指尖使组织液混入血样造成分析结果不准。b、用棉球擦拭干净附着在血管外壁的血。c、立即把血样注入盛有 1.6ml稀释液的样品杯。d、立即将样品杯摇匀。 2.2标本的处理 采集后的标本立即送检，不能立即送检的在4~8℃冷藏（不超过4h）如分析冷藏样品，应先在室温下放置30 min . 3.操作步骤3.1打开电源前的检查 3.1.1试剂的检查：检查当天检测样品所需的试剂量，如果不够，应更换试剂，更换试剂后，进行几次空白检查，当空白计数结果低于标准才能开始检测样品。 3.1.2检查废液桶、液体管路、电缆、记录仪、打印机 3.2打开电源，按下机器后部的开关键，电源指示灯亮。 3.3自我检测，检测系统硬件工作是否正常，有无溶血试剂、稀释液、冲洗液。约一分钟后出现计数界面。 3.4质控：分析样品前按质控操作程序进行质控，如出现问题应检查仪器，标本，试剂等有无错误，并排除问题。 3.5样品分析：混匀标本，看标本是否合格。如标本不合格应重抽。将标本编号并将标本信息输如系统，选择分析模式进行样本分析。 全血测量：按“菜单”选择“模式”项，将模式设置为“全血”。用EDTA-K2作抗凝标本，混匀抗凝血，让采样针插入抗凝血，按“开始”键测量样本。 末梢血测量：按“菜单”选择“模式”项，将模式设置为“稀释液”。将稀释血样置采样针下，按“开始”键测量样本。 4.结果审核：标本分析后，对标本结果进行审核，并打印。如结果异常，根据情况做血涂片进行镜检，以确定结果是否可靠。但以下几种情况必须进行镜检：a:WBC、RBC、PLT、Hb任何一项明显异常b:WBC分类异常或者任何一个直方图或散点图异常c:仪器显示警示信号 5临床意义5.1白细胞计数