反相高效液相色谱法测定烧伤病人血浆中谷氨酰胺含量

第十八章高效液相色谱法

第十八章高效液相色谱法 15.外标法测定黄芩颗粒剂中黄芩苷含量：色谱柱为 Zirchrom C8柱（20cm X 4.6mn , 5um ）；流动相为乙腈-甲醇-水（含0.5%三乙胺，磷酸调pH3.0）（28： 18： 54）;以黄芩苷 对 照品配成浓度范围为10.3?144.2ug/ml 的对照品溶液。进样，测得黄芩苷峰面积，以峰 面积和对照品浓度求得回归方程为： A=1.168 X 105C -1.574 X 103 , r=0.9998.精密称取黄芩 颗粒0.1255g ，置于50ml 量瓶中，用70%甲醇溶解并定容至刻度，摇匀，精密量取 1ml 于 10ml 量瓶中，30%甲醇定容到刻度，摇匀即得供试品溶液。平行测定供试品溶液和对照品溶 液 （61.8ug/ml ），得峰面积分别为 4250701，5997670. 16 .校正因子法测定复方炔诺酮片中炔雌醇的含量： ODS 色谱柱；甲醇-水（60:40）流动相；检测器UV280nm 对硝基甲苯为内标物。 （1）校正因子的测定：取对硝基甲苯（内标物） 、炔诺酮和炔雌醇对照品适量，用甲醇制成 10ml 溶液，进 样10ul ，记录色谱图。重复三次。测得含 0.0733mg/ml 内标物、0.600mg/ml 炔诺酮和0.035mg/ml 炔雌醇的对照 品溶液平均峰面积列于表 18-6。 （2）试样测定：取本品 20片，精密称定，求出平均片重（60.3mg/片）。研细后称取732.8mg （约相当于炔 诺酮7.2mg ），用甲醇配制成10ml 供试品溶液（含内标物 0.0733mg/ml ）。测得峰面积列于表 18-6。 表18-6复方炔诺酮片中各成分及内标物平均峰面积（ u v ? s ） 炔诺酮 炔雌醇 内标物 对照品溶液 1.981 X 106 5 1.043 X 10 5 6.587 X 10 供试品溶液 6 2.442 X 10 1.387 X 10 6.841 X 10 m 醇 /A 醇 0.035 10/(1.043 105 ) 302 m s /A s 0.0733 10/(6.587 105 ) 试样含炔雌醇的量： r A 醇 c cc " 1.387 105 c 八 c/ \ m 醇 f 醇 m s 3.02 0.0733 10 0.449(mg) A s 6.841 105 每片含炔雌醇的量： 0 449 , 0.449 60.3 (0.0369mg/ 片) 17.测定生物碱试样中黄连碱和小檗碱的含量，称取内标物、黄连碱和小檗碱对照品 解: c 样 /10 4250701 61.8 5997670 w% 50c 样 10 6 100% 17.4% 0.1255 A 样

人造血浆(人工血浆、代血浆、血浆代用品)

人造血浆（人工血浆、代血浆、血浆代用品） 人造血液的特点是：(1)性质稳定，溶解氧气的能力比人血大一倍，并能将二氧化碳等废物带走，排出体外。(2)人造血液没有血型之分，输入任何人的血液里都不会引起不良反应。 人造代血浆是一种含有6％的药用羟乙基淀粉HES的生理盐水注射液。人造血液的特点是：(1)性质稳定，溶解氧气的能力比人血大一倍，并能将二氧化碳等废物带走，排出体外。(2)人造血液没有血型之分，输入任何人的血液里都不会引起不良反应。 当然，人造血液还存在一些缺点。例如，人造血液中没有白血球，不具备抵抗外来病毒和病菌侵入人体的功能；人造血液中不含血小板，血液流出后便难以凝结。这些都有待进一步研究并加以解决。血浆代用品(Plasma substitute)是一种分子量接近血浆白蛋白的胶体溶液，输入血管后依赖其胶体渗透压而起到代替和扩张血容量的作用，在治疗失血性休克时可节约部分全血。 1. 理想的血浆代用晶的条件①无毒性、无抗原性、无热原及无致癌，致畸和致突变副作用；②输入血管后能存留适当时间，以期对血容量产生有效的替代作用；⑧利于排泄或被体内代谢，而无持久的蓄积作用；④在有效剂量范围内对血液有形成分和凝血系统无明显干扰，对机体重要脏器无明显损害，对机体内环境平衡无明显不良影响；⑤理化性能稳定，可长期保存。 2. 常用血浆代用品 (1) 右旋糖酐(Dextran) Dextran是一种由葡萄糖荃聚合成的多糖高分子物。临床上应用的有三种：中分子量(MW7万)，低分子量(MW4万左右)、小分子量(MW2万左右)。中分子右旋糖酐作用：① 防治各种类型的休克，如出血、创伤、烧伤、冻伤、中毒和感染，或手术麻醉期低血压，控制性低血压。②失血性休克：抢救急性大量出血，可快速输注中右500-1000m1，使血压上升至10.7kPa，但不宜输注过多，以免增加出血倾向。③内科肾脏疾病；每日500-1000ml，连续滴注7～10天。④妇产科妊娠毒血症。⑤体外循环预充剂。⑥麻醉填充剂：可延长神经阻滞作用。低分子右旋糖酐作用：①扩充血容量，造成血液稀释，降低血液粘滞性，改善微循环作用。②抑制血小板功能，出血时间延长，可抑制手术创伤所致血小板粘附和聚集力的增加，还可减少血小板第3因子的释放。如使用恰当，控制用量，一般不会影响凝血功能。 ③使红细胞表面覆盖一层右旋糖酐，增加表面电荷，使红细胞相互排斥，避免发生聚集。④增加红细胞变形能力，易于通过狭窄的毛细血管。⑤在循环中停留时间短，易于排出，故多作为微循环灌流的辅助治疗。（2）羟乙基淀粉近年来应用较多的是6%羟乙基淀粉的电解质平衡代血浆，其电解质与血浆相近，含有钠、钾、氯和镁离子，并含有HCO3-，能提供碱储备，是一种较好的血浆增量剂，它不仅具有补充血容量，维持胶体渗透压的作用，尚能补充功能性细胞外液的电解质成分，预防及纠正大量失血和血液稀释后可能产生的酸中毒。羟乙基淀粉输入体内后，在血中存留率4小时为80%，24小时为60%，24小时后血中浓度逐渐降低，并很快从尿排出。（3）明胶明胶是一种蛋白质，可从动物皮胶、骨骼、肌腱中的胶原经水解后提取，其中含有大量羟脯氨酸。明胶类代血浆自50年代以来不断改进，其胶体渗透压与人血浆白蛋白相近。但其扩容作用较右旋糖酐和羟乙基淀粉弱。近年来临床常用的有尿联明胶和琥珀明胶两种溶液。血浆代用品输用不当，将对机体带来不良影响，如①输用过量造成的凝血机能障碍及肾功能损害；②过敏反应。右旋糖酐发生率约为

高效液相色谱法简介

高效液相色谱法简介 “色谱”一词是由俄国科学家斯威特提出的。色谱法是基于补充物质在相对运动物的两相之间分布时，物理或物理化学性质的微小的差异而使混合物相互分离的一类分离或分析方法。发展与上世纪初，飞速发展于五十年代，有超过30位科学家家因为它而获得诺贝尔奖，其有自己的理论和研究方法，同时也有众多的应用领域。 色谱法常见的方法有：柱色谱法、薄层色谱法、气相色谱法、高效液相色谱法等。 柱色谱：柱色谱法是最原始的色谱方法，这种方法将固定相注入下端塞有棉花或滤纸的玻璃管中，将被样品饱和的固定相粉末摊铺在玻璃管顶端，以流动相洗脱。常见的洗脱方式有两种，一种是自上而下依靠溶剂本身的重力洗脱，一种是自下而上依靠毛细作用洗脱。收集分离后的纯净组分也有两种不同的方法，一种方法是在柱尾直接接受流出的溶液，另一种方法是烘干固定相后用机械方法分开各个色带，以合适的溶剂浸泡固定相提取组分分子。柱色谱法被广泛应用于混合物的分离，包括对有机合成产物、天然提取物以及生物大分子的分离。 薄层色谱：薄层色谱法是应用非常广泛的色谱方法，这种色谱方法将固定相图布在金属或玻璃薄板上形成薄层，用毛细管、钢笔或者其他工具将样品点染于薄板一端，之后将点样端浸入流动相中，依靠毛细作用令流动相溶剂沿薄板上行展开样品。薄层色谱法成本低廉操作简单，被用于对样品的粗测、对有机合成反应进程的检测等用途。

气相色谱：GC主要是利用物质的沸点、极性及吸附性质的差异来实现混合物的分离。待分析样品在汽化室汽化后被惰性气体（即载气，也叫流动相）带入色谱柱，柱内含有液体或固体流动相，由于样品中各组分的沸点、极性或吸附性能不同，每种组分都倾向于在流动相和固定相之间形成分配或吸附平衡。但由于载气是流动的，这种平衡实际上很难建立起来。也正是由于载气的流动，使样品组分在运动中进行反复多次的分配或吸附/解吸附，结果是在载气中浓度大的组分先流出色谱柱，而在固定相中分配浓度大的组分后流出。当组分流出色谱柱后，立即进入检测器。检测器能够将样品组分的与否转变为电信号，而电信号的大小与被测组分的量或浓度成正比。当将这些信号放大并记录下来时，就是气相色谱图了。气相色谱被广泛应用于小分子量复杂组分物质的定量分析。 高效液相色谱：高效液相色谱法是在经典色谱法的基础上，引用了气相色谱的理论，在技术上，流动相改为高压输送（最高输送压力可达4.9-107Pa）;色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填充而成，从而使柱效大大高于经典液相色谱（每米塔板数可达几万或几十万）；同时柱后连有高灵敏度的检测器，可对流出物进行连续检测。高效液相色谱（HPLC）是目前应用最多的色谱分析方法，高效液相色谱系统由流动相储液体瓶、输液泵、进样器、色谱柱、检测器和记录器组成，其整体组成类似于气相色谱，但是针对其流动相为液体的特点作出很多调整。HPLC的输液泵要求输液量恒定平稳；进样系统要求进样便利切换严密；由于液体流动相粘度远远高于气体，为了减低柱压高效

高效液相色谱的发展及其应用

高效液相色谱的发展及其应用 摘要：了解高效液相色谱[1]的发展历史，知道高效液相色谱的组成结构、操作 原理以及方法等等。掌握它的分类方法，通过比较得出高效液相色谱分析方法的优点与缺点。明确高效液相色谱的应用，最终分析结果。 关键词：高效液相色谱；发展历史；应用 高效液相色谱是以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。 1、高效液相色谱的发展历史 1.1高效液相色谱的历史 高效液相色谱作为色谱分析法的一个分支，是在二十世纪60年代末期，在经典液相色谱法和气相色谱法的基础上，发展起来的新型分离分析技术。1960年中后期，气相色谱理论和实践的发展，以及机械、光学、电子等技术上的进步，液相色谱开始活跃。到60年代末期把高压泵和化学键合固定相用于液相色谱就出现了高效液相色谱。 1.2高效液相色谱与其它色谱的比较[2] 1.2.1与经典液相色谱的比较 经典液相色谱法使用粗粒多孔固定相，装填在大口径、长玻璃柱管内，流动相仅靠重力流经色谱柱，溶质在固定相的传质、扩散速度缓慢，柱入口压力低，柱效低，分析时间冗长。 高效液相色谱法使用了全多孔微粒固定相，装填在小口径、短不锈钢柱内，流动相通过高压输液泵进入高柱压的色谱柱，溶质在固定相的传质，扩散速度大大加快，从而在短的分析时间内获得高柱效和高分离能力。 1.2.2与气相色谱法的比较 高效液相色谱法与气相色谱法有许多相似之处。气相色谱法具有选择性高、分离效率高、灵敏度高，分析速度快的特点，但它仅适于分析蒸气压低、沸点低的样品，而不适用于分析高沸点有机物、高分子和热稳定性差的化合物以及生物活性物质，因而使其应用受到限制。在全部有机化合物中仅有20%的样品适用于气相色谱分析。高效液相色谱法却恰可弥补气相色谱法的不足之处，可对80%的有机化合物进行分离和分析。 2、高效液相色谱 2.1高效液相色谱的特点 2.1.1高效液相色谱的优点 1.分辨率高于其它色谱法，可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果； 2.速度快，十几分钟到几十分钟可完成； 3.重复性高、样品不被破坏、易回收； 4.高效相色谱柱可反复使用； 5.自动化操作，分析精确度高；

肠内及肠外途径补充谷氨酰胺对重症烧伤患者临床预后的差异研究

肠内及肠外途径补充谷氨酰胺对重症烧伤患者临床预后的差异研究 发表时间：2015-07-16T15:33:24.837Z 来源：《中国耳鼻咽喉头颈外科》2015年5月第5期供稿作者：王宏宇王超胡建红彭曦[导读] 但肠内途径补充谷氨酰胺可能更加有利于患者改善肠道功能，维护肠粘膜屏障，缩短患者ICU住院时间。王宏宇王超胡建红彭曦（第三年军医大学西南医院烧伤研究所400038）【摘要】目的：研究不同途径补充谷氨酰胺对于重症烧伤患者临床预后的差异。方法：采用回顾性研究方法，将66名患者分为肠内补充Gln组和肠外补充Gln组。记录患者伤后1-4周能量摄入总量及比例、能量摄入/热量消耗比值、血糖控制情况及胰岛素使用量以及脏器损伤指标、死亡率、ICU住院时间和总住院时间等指标。结果：在伤后4周内肠内补充Gln组患者能量摄入总量高于静脉补充组，两组间糖、 脂肪、蛋白质的供能比无明显差异。此外ICU住院日明显低于肠外补充Gln组。结论：经肠内补充谷氨酰胺可能更利于改善烧伤患者的肠道功能，提高肠内营养的耐受程度并增加能量摄入，有利于改善患者预后。【关键词】谷氨酰胺；重症烧伤；肠内营养；肠外营养；能量摄入；预后中图分类号：R563.9文献标识码：A 1资料与方法 1.1一般资料 本研究回顾性观察2010年10月-2014年4月在本科室治疗的重症烧伤患者66例。肠外补充Gln组35例，肠内补充Gln组31例，纳入患者基本情况详见表1。纳入标准①年龄18-65周岁；②烧伤总面积50-90％；或Ⅲ°烧伤20-50％；③患者于伤后48小时内入院并接受正规治疗。休克期后给予外源性谷氨酰胺治疗，剂量在0.3-0.5g/kg?d，疗程在2周以上的患者；④纳入患者的烧伤原因为：热力烧伤，电烧伤，化学烧伤。 表1 两组患者基本情况 1.2分组通过查阅病例按患者谷氨酰胺补充途径，将66例患者分为肠外补充Gln组和肠内补充Gln组，其中，肠外补充Gln组35例，患者在伤后一直通过静脉给予谷氨酰胺二肽；肠内补充Gln组31例，患者经口服或鼻胃管管饲Gln，或先通过静脉给予谷氨酰胺二肽，伤后5天内开始通过肠道补充外源性谷氨酰胺，二组患者使用谷氨酰胺的剂量和疗程基本一致。 1.3患者基本治疗和用药情况患者入院后按国内通用公式予以液体复苏，浅Ⅱ度创面清创后予包扎或半暴露处理，深Ⅱ度及Ⅲ度创面于伤后3-4天实施自体皮移植或切削痂自体微粒皮移植、异种皮覆盖，后期自体皮植皮。肠外补充谷氨酰胺组加用静脉用谷氨酰胺0.3-0.4g/kg，肠内组使用谷氨酰胺颗粒 0.3-0.5g/kg口服或管饲，疗程均为2周以上。 1.4观察指标 收集患者伤后第1、2、3、4周相关指标：1）能量摄入总量及比例，实际补充热量/热量消耗估算值；2）血糖控制情况及胰岛素使用量；3）Cr、BUN、AST、ALT、TBIL、CK-MB、LDH）4）死亡率，ICU住院时间，总住院时间。 1.5统计学处理 采用SPSS 18．0对数据予以统计学处理，用均数±标准差(±s)表示数据，对计量资料统计使用t检验，计数资料统计用检验，以P≤0．05为差异有统计学意义。2结果 2.1能量摄入指标。两组不同途径补充谷氨酰胺的患者中，口服途径患者能量摄入量高于静脉途径补充患者（P值均小于0.05）。糖、脂肪、蛋白质等供能比例无明显差异（P值均大于0.05）。 2.2血糖控制情况及胰岛素使用量。如表2.3所示，肠外补充Gln组与肠内补充Gln组血糖控制情况及胰岛素用量无明显统计学差异（P值均大于0.05）。 表2 血糖控制情况

第16章高效液相色谱法

第16章高效液相色谱法 【16-1】从分类原理、仪器构造及应用范围，简述气相色谱及液相色谱的异同点。 答：二者都是根据样品组分与流动相和固定相相互作用力的差别进行分离的。 从仪器构造上看，液相色谱需要增加高压泵以提高流动相的流动速度，克服阻力。同时液相色谱所采用的固定相种类要比气相色谱丰富的多，分离方式也比较多样。气相色谱的检测器主要采用热导检测器、氢焰检测器和火焰光度检测器等。而液相色谱则多使用紫外检测器、荧光检测器及电化学检测器等。但是二者均可与MS等联用。 二者均具分离能力高、灵敏度高、分析速度快，操作方便等优点，但沸点太高的物质或热稳定性差的物质难以用气相色谱进行分析。而只要试样能够制成溶液，既可用于HPLC分析，而不受沸点高、热稳定性差、相对分子量大的限制。 【16-2】高效液相色谱仪由几大部分构成？各部分的主要功能是什么？ 答：高效液相色谱仪由高压输液系统，进样系统，分离系统，检测系统和记录系统五大部分组成。高压输液系统：主要是通过高压输液泵将溶剂储存器中的流动相以高压形式连续不断地送入液路系统，使试样在色谱柱中完成分离过程。 进样系统：把分析试样有效地送入色谱柱中进行分离。 分离系统：将试样各组分分离开来。 检测系统：对被分离组分的物理或物化特性有响应；对试样和洗脱液总的物理或化学性质有响应。记录系统：记录被分离组分随时间变化的信号。 【16-3】液相色谱中影响色谱峰展宽的因素有哪些? 与气相色谱相比其主要区别何在？ 答：液相色谱中引起色谱峰扩展的主要因素为涡流扩散、流动的流动相传质、滞留的流动相传质以及柱外效应。在气相色谱中径向扩散往往比较显著，而液相色谱中径向扩散的影响较弱，往往可以忽略。另外，在液相色谱中还存在比较显著的滞留流动相传质及柱外效应。 【16-4】何谓化学键合相色谱、正相色谱和反相色谱？ 答：化学键合相色谱是指在化学键合固定相上进行物质分离的一种液相色谱法。 正相色谱是采用极性键和固定相流的相用比键合相极性小的非极性或弱极性有机溶剂。 反相色谱采用非极性键和固定相流的相为强极性的溶剂。 【16-5】何谓化学键合固定相？它的突出优点是什么？ 答：利用化学反应将固定液的官能团键合在载体表面形成的固定相称为化学键合固定相。 优点: 固定相表面没有液坑,比一般液体固定相传质快的多；无固定相流失,增加了色谱柱的稳定性

血浆代用品的临床应用与研究进展

会。老龄卒中患者作为一个特殊的群体,躯体功能的协调性减退,理解接受能力减弱,对家人的依赖性增加,对恢复自理和活动能力的主观愿望减退;卒中后抑郁的发生也成为影响患者提高肌力和活动能力的重要因素[3]。因此,认为心理上的消极是影响患者康复治疗依从性的主要原因。由表2可以看出,试验组肢体肌力提高ò级以上者较为突出,充分说明本组病例通过护理干预,调动了患者自主配合锻炼的主观能动性,增强了康复治疗效果,提高了患者日常活动能力及生活质量。 研究中发现,健康教育在要提高患者的治疗依从性方面发挥了重要作用。脑卒中具有发病率高、反复发作、致残率高的特点,对患者进行健康教育让患者了解有关疾病知识,对康复治疗有一个正确的认识,使其改变不良的生活方式,自觉采纳有益于健康的行为和生活方式,主动参与康复治疗,从而促进和提高患者的生活质量。因此根据不同的康复阶段及个体情况制订针对性的健康教育计划,帮助患者真正达到/身心整体康复0,是我们以后研究的方向。 参考文献 [1]朱镰连.急性脑血管病早期康复,机不可失.中华内科杂志,1997, 36(12):840~8411 [2]梁志,赵超男,董云英,等.早期康复对脑卒中后患者日常生活活 动能力的影响.护理研究,2003,17(11):1249~12501 [3]蒋琪霞,朱剑萍,申萍.提高老龄卒中患者日常活动能力的护理研 究.中国实用护理杂志,2006,22(1):5~71 #综述# 血浆代用品的临床应用与研究进展 袁洪雨,董旭 (山东齐都药业有限公司,山东淄博255400) 摘要:随着新的输血观念引入医学实践,加之近年来血源供应紧张,血浆代用品在临床上的应用日趋广泛。近些年来全球对血浆代用品的研发突飞猛进,不断有新的产品问世。本文综述了近半个世纪以来血浆代用品的临床应用情况和研究进展。 关键词:血浆代用品全氟碳化合物缩合葡萄糖右旋糖酐明胶制剂羟乙基淀粉 中图分类号:R97718文献标识码:A文章编号:1672-7738(2010)01-0030-04 Recent advances in the research and clinical use of plasma substitutes YU AN H ong-y u,DON G Xu (Shando ng Q idu P harmaceut ical Co1,L td1,Z ibo255400) ABSTRAC T:In the recent years,plasma substit utes are incr easing ly widely used because o f the intro duction of modern con-cept of fluid r eplacement in clinical volume therapy and additio na lly the sho rtag e o f the human blood supply1In the past half century,a larg e number of no vel co lloids w ere develo ped as effectiv e plasma vo lume ex panders1T his review mainly repor ted the recent advances in t he r esear ch and clinical use of the artificial co lloids for intrav ascula r vo lume replacement1 KEY WORDS:Plasma subst itutes;per fluo rocar bo ns;po lyg lucose dex tr an;gelatins;hydro x y ethyl st arch 血浆代用品是一类高分子化合物的胶体溶液或被制成乳剂,适当浓度时具有近似或高于生理值的胶体渗透压,输入血管后在一定时间内维持乃至增加血容量。主要用于大量失血、失血浆及大面积烧伤等所致的血容量降低、休克等紧急情况,用以扩充血容量、改善微循环,对提高患者的生存率起着非常重要的作用。近年来,血源供应紧张,同种输血存在传播血源性疾病风险,血浆代用品在临床上的使用日益广泛。由于人体对血液稀释有相当的耐受性,血浆代用品作为自身输血和血液稀释的一种替代物使用亦日趋受到重视[1]。全球对血浆代用品的研究飞速发展,迄今已有十余个品种研发成功并相继投入临床应用。目前临床应用的血浆代用品主要分为全氟碳化合物(P erfluo rocar bo ns,P FC)、葡萄糖聚合物、明胶制剂和羟乙基淀粉四大类,其中全氟碳化合物应用较少,羟乙基淀粉类应用最为广泛,占据了血浆代用品大部分市场份额,并保持着持续增长的势头。 1全氟碳化合物类血浆代用品 全氟碳化合物是一种类环状或直链状碳氢化合物,其中的氢原子全部由氟原子替代;分子直径在012L m以下,是不溶于水的惰性物质;除了溶解一些气体和极少数物质外,对蛋白质、脂类、糖类、无机盐完全不溶,与血亦不相混合。化

2015年版药典高效液相色谱法、质谱法.doc

2015 年版药典高效液相色谱法、质谱法

2015 版药典 --- 高效液相色谱法、质谱法 0512 高效液相色谱法 高效液相色谱法系采用高压输液泵将规定的流动相泵入装有填充剂的色谱柱，对供试品进行分离测定的色谱方法。 注入的供试品，由流动相带入色谱柱内，各组分在柱内被分离，并进入检测器检测，由积分仪或数据处理系统记录和处 理色谱信号。 1.对仪器的一般要求和色谱条件 高效液相色谱仪由高压输液泵、进样器、色谱柱、检测器、积分仪或数据处理系统组成。色谱柱内径一般为 3.9 ～ 4.6mm，填充剂粒径为 3～lOμm。超高效液相色谱仪是适应小粒径（约 2μm）填充剂的耐超高压、小进样量、低死体积、高灵敏度检测的高效液相色谱仪。 （1）色谱柱 反相色谱柱：以键合非极性基团的载体为填充剂填充而成的色谱柱。常见的载体有硅胶、聚合物复合硅胶和聚合物 等；常用的填充剂有十八烷基硅烷键合硅胶、辛基硅烷键合硅胶和苯基键合硅胶等。 正相色谱柱：用硅胶填充剂，或键合极性基团的硅胶填充而成的色谱柱。常见的填充剂有硅胶、氨基键合硅胶和氰 基键合硅胶等。氨基键合硅胶和氰基键合硅胶也可用作反相色谱。 离子交换色谱柱：用离子交换填充剂填充而成的色谱柱。有阳离子交换色谱柱和阴离子交换色谱柱。 手性分离色谱柱：用手性填充剂填充而成的色谱柱。 色谱柱的内径与长度，填充剂的形状、粒径与粒径分布、孔径、表面积、键合基团的表面覆盖度、载体表面基团残 留量，填充的致密与均匀程度等均影响色谱柱的性能，应根据被分离物质的性质来选择合适的色谱柱。 温度会影响分离效果，品种正文中未指明色谱柱温度时系指室温，应注意室温变化的影响。为改善分离效果可适当 提高色谱柱的温度，但一般不宜超过 60℃。 残余硅羟基未封闭的硅胶色谱柱，流动相 pH 值一般应在 2～8 之间。残余硅羟基已封闭的硅胶、聚合物复合硅胶或聚 合物色谱柱可耐受更广泛 pH值的流动相，适合于 pH 值小于 2 或大于 8 的流动相。 （2）检测器最常用的检测器为紫外 - 可见分光检测器，包括二极管阵列检测器，其他常见的检测器有荧光检测器、 蒸发光散射检测器、示差折光检测器、电化学检测器和质谱检测器等。 紫外- 可见分光检测器、荧光检测器、电化学检测器为选择性检测器，其响应值不仅与被测物质的量有关，还与 其结构有关；蒸发光散射检测器和示差折光检测器为通用检测器，对所有物质均有响应，结构相似的物质在蒸发光散射 检测器的响应值几乎仅与被测物质的量有关。 紫外 - 可见分光检测器、荧光检测器、电化学检测器和示差折光检测器的响应值与被测物质的量在一定范围内呈 线性关系，但蒸发光散射检测器的响应值与被测物质的量通常呈指数关系，一般需经对数转换。 不同的检测器，对流动相的要求不同。紫外 - 可见分光检测器所用流动相应符合紫外 - 可见分光光度法（通则 0401）项下对溶剂的要求；采用低波长检测时，还应考虑有机溶剂的截止使用波长，并选用色谱级有机溶剂。蒸发光散射检测 器和质谱检测器不得使用含不挥发性盐的流动相。 （3）流动相反相色谱系统的流动相常用甲醇 - 水系统和乙腈 - 水系统，用紫外末端波长检测时，宜选用乙腈 - 水系统。流动相中应尽可能不用缓冲盐，如需用时，应尽可能使用低浓度缓冲盐。用十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱时，流动 相中有机溶剂一般不低于 5%，否则易导致柱效下降、色谱系统不稳定。

高效液相色谱法的应用

高效液相色谱法在药物分析中的应用与进展 摘要：主要介绍了高效液相色谱法在药物鉴别、药物杂质检查、药物含量测定等方面具体应用以及展望了高效液相色谱法在药物分析中的应用前景。 关键词：高效液相色谱法；HPLC；药物分析；联用技术 Abstract:Mainly introduced the high performance liquid chromatography in drug discrimination, drug impurity test, determination of the content and concrete application and the prospect of the high performance liquid chromatography in pharmaceutical analysis application prospect. Keywords: high performance liquid chromatography，HPLC ,pharmaceutical analysis，hyphenated techniques 引言： 高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography \ HPLC）又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等。高效液相色谱是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。该方法已成为化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中重要的分离分析技术。HPLC在国内和国外的药物分析领域的应用范围很广，发展速度也很快，尤其在我国，近十几年来HPLC方法越来越受到重视。HPLC 在药物的分析中的应用主要是鉴别、有关物质的检查、有效成分及含量的测定[1]；本文对高效液相色谱法（HPLC）技术在药物分析中的应用进行概述并展望其应用前景。 1 在药物分析中的应用 1.1 在药物鉴别中的应用 在HPLC 法中，药物组分的保留时间与其结构和性质有着直接的关系，不同的药物由于结构和性质的差异在色谱图上的出峰顺序不同，是定性的重要参数，

谷氨酰胺

谷氨酰胺在临床上的应用： 1.消化道溃疡 李氏等对59例PU患者随机分成验证组17例,口服谷氨酰胺；对照组22例；开放组20例进行研究,结果显示：验证组例、DU5例)治愈率35.3％、显效率58.8％、总 you xiao lu94.1％；对照组(GU11例、DU11例)治愈率9.1％、显效率36.4％、总 you xiao lu86.4％。研究证明：联合应用谷氨酰胺治疗PU疗效好,不良反应小。其可能机制为：L-谷氨酰胺能增加胃粘膜上皮成分己糖胺及葡萄糖胺的生化合成,而糖蛋白是胃上皮外粘液的重要组成部分,故能维持粘液层和粘膜屏障的功能和结构。 2.短肠综合征 等对1例因先天性腹腔裂开发展成坏死性小肠结肠炎,后又因多次手术和肠切除而发展成SBS男性病儿,观察其的代谢和治疗效应。在使用各种常规营养方法均未能使粪便量减少和体重增加的情况下,在TPN中试加了谷氨酰胺,共5周。结果发现血液中谷氨酰胺恢复至正常水平,病儿体重由12kg增至13.1kg，肠微绒毛上皮细胞和粘膜深部组织中,非特异性炎症反应明显减轻,甚至消失,粘膜萎缩减轻,隐窝变深,双糖酶活性增强,粪便中碳水化合物和脂肪量明显减少。其机制可能为外源性谷氨酰胺有利于小肠粘膜结构、粘膜屏障和吸收功能恢复,有利于剩余小肠功能发生适应性变化。 3.重症急性胰腺炎 何氏等对64例重症急性胰腺炎随机分为3组，1组传统保守方案，2组传统保守+TPN治疗，3 组在2组方案+丙氨酰－谷氨酰胺双肽治疗,结果显示：治疗两周后血清白蛋白，2、组较1组增加(p＜0.05) ；3组死亡率分别为34.8％(8/23)、％(3/21)和0％,并发症发生率分别为91.3％(21例次、47.6％(10例次/21)、20.0％(4例次/20)，3组较2组、组差异明显(p ＜0.01),其中3组未出现胰腺周围感染。上述研究说明,静脉输注谷氨酰胺可以增加蛋白质合成,减少死亡率及并发症发生率。谷氨酰胺通过降低血浆内毒素水平、显著减少异位细菌数量,从而保护肠黏膜屏障,改善肠道内微生态环境和预防肠源性细菌和内毒素异位甚至减低ARDS和MODS 发生率。4 瘀胆和胆石症等用雄性Wistar鼠观察了STD-TPN和谷氨酰胺-TPN对胆结石形成的影响,结果显示谷氨酰胺-TPN可使胆汁分泌量明显增加,显著大于STD-TPN和常规进食组(P均＜0.01),而胆汁中总胆红素、直接胆红素、总和游离较STD-TPN组显著下降,接近于正常水平,组织学检查提示STD-TPN组脂肪浸润明显增多,而谷氨酰胺-TPN组明显减少甚至消失。此外，组胰岛素/胰高血糖素比值明显降低,恢复至正常。证明提供外源性谷氨酰胺可明显改善肝细胞代谢,显著降低肝内胆汁淤积和减少脂肪浸润,增加胆汁分泌、降低胆囊内和胆红素水平,有效预防了TPN后胆汁淤积和胆石症的发生。 4.炎性肠道病变 等发现溃疡性结肠炎和Crohn's病患者内毒素的水平明显升高,并与炎症性疾病的严重程度密切相关,已证实是快速分化细胞如肠道细胞、淋巴细胞的主要能量底物,缺乏的营养与支持可引起肠粘膜萎缩和屏障功能损害,导致肠道内细菌和内毒素易位。Fujite等以1.5％降解的λ-爱兰苔胶

谷氨酰胺在危重症治疗中的作用

谷氨酰胺在危重症治疗中的作用 本报讯最近几年，谷氨酰胺在临床营养中的应用，特别是在危重症病人治疗中的作用，日益受到人们的关注，成为探讨热点。最近，瑞典斯德哥尔摩胡丁厄大学医院麻醉和重症医疗科Ｗｅｒｎｅｒｍａｎ回顾了近２年来谷氨酰胺在临床营养治疗中的研究进展，重点讨论了谷氨酰胺在危重症治疗中的新观点。 ＣｕｒｒＯｐｉｎＣｒｉｔＣａｒｅ２００３，９∶２７９ 对患者预后的影响 Ｗｅｒｎｅｒｍａｎ首先指出，在过去２年中最令人感兴趣的观点就是，建议将患者入ＩＣＵ时血液中谷氨酰胺浓度作为预后预测指标，并将其作为补充谷氨酰胺治疗的适应证。谷氨酰胺在ＩＣＵ病人营养支持中的应用也成为过去２年中的一大进步。有证据表明，在严重代谢性应激时，机体对谷氨酰胺的需要量增加，而日常食品中谷氨酰胺的含量并不够。 ＩＣＵ住院患者血浆谷氨酰胺浓度低是死亡的一个独立危险因素，这一发现具有里程碑意义，有助于理解缺乏谷氨酰胺对危重症患者的影响。研究者发现，当血浆谷氨酰胺浓度降低被作为一个因子加入ＡＰＡＣＨＥＩＩ预后评分系统后，这一指标改变了预计病死率。 近期一项前瞻性研究表明，住ＩＣＵ超过５天的病人中，当谷氨酰胺补充治疗超过９天时，５０％病人长期生存率得到改善。在另一项研究中，ＩＣＵ中接受谷氨酰胺治疗的全身炎症反应综合征（ＳＩＲＳ）病人的院内感染率降低。此外，在急性胰腺炎患者中，谷氨酰胺补充治疗减少了肠外营养时间；在ＩＩＩ度烧伤病人中，静脉补充谷氨酰胺联合肠内营养治疗，降低了感染率，特别是革兰阴性菌感染率。 谷氨酰胺对于缺血状态下的心肌是否有作用，是否和谷胱甘肽或心脏热休克蛋白的表达和产物有关，正在讨论之中。实验表明，在缺血／再灌注状态下，谷氨酰胺可以保护胃肠黏膜和提高心肌存活率，但没有导致更好的血液动力学表现。在一项小样本临床试验中，谷氨酰胺水平升至正常，使稳定型心绞痛患者运动试验后超声心动图缺血表现减少。 对免疫系统的影响

第十八章高效液相色谱法

第十八章高效液相色谱 法 Document number【SA80SAB-SAA9SYT-SAATC-SA6UT-SA18】

第十八章 高效液相色谱法 15.外标法测定黄芩颗粒剂中黄芩苷含量：色谱柱为Zirchrom C8柱（20cm ×，5um ）；流动相为乙腈-甲醇-水（含%三乙胺，磷酸调）（28：18：54）；以黄芩苷对照品配成浓度范围为～ml 的对照品溶液。进样，测得黄芩苷峰面积，以峰面积和对照品浓度求得回归方程为：A=××103，r=.精密称取黄芩颗粒，置于50ml 量瓶中，用70%甲醇溶解并定容至刻度，摇匀，精密量取1ml 于10ml 量瓶中，30%甲醇定容到刻度，摇匀即得供试品溶液。平行测定供试品溶液和对照品溶液（ml ），得峰面积分别为4250701，5997670. 解：标样标样 A A c =c 599767042507018.6110 /=样c %4.17%1001255.01050%6=??=-样c w 16．校正因子法测定复方炔诺酮片中炔雌醇的含量：ODS 色谱柱；甲醇-水（60：40）流动相；检测器UV280nm ；对硝基甲苯为内标物。 （1）校正因子的测定：取对硝基甲苯（内标物）、炔诺酮和炔雌醇对照品适量，用甲醇制成10ml 溶液，进样10ul ，记录色谱图。重复三次。测得含ml 内标物、ml 炔诺酮和ml 炔雌醇的对照品溶液平均峰面积列于表18-6。 （2）试样测定：取本品20片，精密称定，求出平均片重（片）。研细后称取（约相当于炔诺酮），用甲醇配制成10ml 供试品溶液（含内标物ml ）。测得峰面积列于表18-6。 表18-6 复方炔诺酮片中各成分及内标物平均峰面积（u v ·s ） 解：02.3) 10587.6/(100733.0)10043.1/(10035.0A /m A /m f 55s s =????==醇 醇醇 试样含炔雌醇的量：)mg (449.010841.610387.1100733.002.3A A m f m 55s s =?????=? ?=醇 醇醇 每片含炔雌醇的量：)/mg 0369.0(3.608 .732449.0片=? 17．测定生物碱试样中黄连碱和小檗碱的含量，称取内标物、黄连碱和小檗碱对照品各 0.2000g 配成混合溶液。测得峰面积分别为, 和4.04cm 2。称取0.2400g 内标物和试样0.8560g 同法配制成溶液后，在相同色谱条件下测得峰面积为, 和4.54cm 2。计算试样中黄连碱和小檗碱的含量。

血浆代用品

血浆代用品 扩容所用的胶体液，一般是指“血浆代用品”，输入血管后取其“胶体渗透压”效应，可产生暂时代替和扩张血浆容量的作用。详细介绍以下几种，供深入了解。 【中分子右旋糖酐 Dextran 70 , Macrodex】 【低分子右旋糖酐 Dextran 40】 【羟乙基淀粉 Hydroxyethyl starch, HES 贺斯】，国产制品为【706代血浆】 【明胶多肽注射液Polygeline】 ①尿素桥联明胶多肽—【海脉素】（Haemaccel）； ②琥珀酸明胶多肽—【血定安】（Gelofusine）； 3。聚明胶肽——【菲克雪浓注射液】。 ＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝ 【血浆代用品 Plasma subtitute】 又名【血浆容量扩充剂】，或【血浆增容剂】（Plasma expander），是一类高分子物质构成的胶体溶液，输入血管后取其胶体渗透压可产生暂时代替和扩张血浆容量（Plasma volume)的作用。 理想的血浆代用品应具备下列条件：①无毒性，无抗原性，无致热原；②能在血管内存留而产生暂时替代血容量的作用；③较易排出或被机体代谢，不蓄积；④在一定剂量范围内，不干扰血液有形成分和凝血系统，不损害脏器功能，不影响机体内环境稳定；⑤性质稳定，允许较长期保存。目前尚无完全符合上述条件的制剂。 【中分子右旋糖酐 Dextran 70 , Macrodex】 右旋糖酐为高分子葡萄糖聚合体（葡聚糖，Dextran），临床用其中分子溶液和低分子溶液。 1。临床常用的制剂为6%中分子右旋糖酐含0.9%氯化钠制剂，平均分子量为70 000（60 000~100 000），简称D70，分子量接近血浆蛋白的重量。其分子的大小范围较广，排出复杂，在血管内半衰期约6~8h，24h 时血管内还有17%。 2。性能：它能从组织中吸收水分，适用于补充血容量。1g右旋糖酐可增加血浆容量15~18ml，6%右旋糖酐500ml可增加血浆容量450~500ml，其扩容作用可持续4h（5~7h）。临床上主要用于防治低血容量性休克，失血量在总血容量20%以内者可全部用右旋糖酐作补充，不需输血。 3。注意事项和不良反应：对其输用量需有限制，每日量一般不能超过1L或20ml / kg，否则会产生一些不良反应：①降低血小板粘附力，降低Ⅷ因子活性，引起稀释性凝血因子减少，有可能导致凝血功能障碍。 ②能借助其聚合体与红细胞发生桥联，形成弱的分子链，在红细胞表面形成包裹，并使红细胞积聚，从而可干扰血型鉴定和血液交叉配伍。③可在网质内皮系统内蓄积，从而有可能引起过敏或类过敏反应，表现皮疹、寻麻疹、血管神经性水肿，甚至过敏性休克，但轻、中度反应的发生率仅0.032%，严重反应率仅0.008%。或有可能引起肾功能衰竭。对出血倾向或少尿病人应慎用。 【低分子右旋糖酐 Dextran 40】 1。临床常用其10%低分子右旋糖酐含5%葡萄糖的制剂，平均分子量为40 000（20 000~40 000），简称D40，是蛋白重量的1/2，pH 4.5，渗透压285 mOsm / L，胶体渗透压为78mmHg。 2。因其分子量小，排出相对较快，渗透压较D70高，输注后初期血容量增高较D70多，1g能吸收组织水40ml，易引起组织间液脱水，但血管内半衰期2h，大部分在6h内即经尿排出，因此扩容作用维持较短，仅持续1.5h，一般不超过3h，扩容效果较差。 3。临床上主要利用其抗凝集特性，防止血细胞凝集、降低血小板粘附性和降低血液粘滞性等作用，以产生改善微循环、增加组织脏器血液灌注、预防血管内微血栓形成以及改善心肌微循环等功效。 4。D40的每日使用量与D70一样，不超过1L或20ml / kg，否则可出现同样的副作用。 【羟乙基淀粉 Hydroxyethyl starch, HES，贺斯】

高效液相色谱法(HPLC)的概述

此帖与GC版的对应，是为了让大家更好的学习和了解LC 主要内容包括： 1.高效液相色谱法（HPLC）的概述 2. 高效液相色谱基础知识介绍（1——13楼） 3. 高压液相色谱HPLC发展概况、特点与分类 4. 液相色谱的适用性 5.应用 高效液相色谱法（HPLC）的概述 以高压液体为流动相的液相色谱分析法称高效液相色谱法（HPLC）。其基本方法是用高压泵将具有一定极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂泵入装有填充剂的色谱柱，经进样阀注入的样品被流动相带入色谱柱内进行分离后依次进入检测器，由记录仪、积分仪或数据处理系统记录色信号或进行数据处理而得到分析结果。 由于高效液相色谱法具有分离效能高、选择性好、灵敏度高、分析速度快、适用范围广（样品不需气化，只需制成溶液即可）、色谱柱可反复使用的特点，在《中国药典》中有5 0种中成药的定量分析采用该法，已成为中药制剂含量测定最常用的分析方法。 高效液相色谱法按固定相不同可分为液-液色谱法和液-固色谱法；按色谱原理不同可分为分配色谱法（液-液色谱）和吸附色谱法（液-固色谱）等。 目前，化学键合相色谱应用最为广泛，它是在液－液色谱法的基础上发展起来的。将固定液的官能团键合在载体上，形成的固定相称为化学键合相，不易流失是其特点，一般认为有分配与吸附两种功能，常以分配作用为主。C18（ODS）为最常使用的化学键合相。 根据固定相与流动相极性的不同，液-液色谱法又可分为正相色谱法和反相色谱法，当流动相的极性小于固定相的极性时称正相色谱法，主要用于极性物质的分离分析；当流动相

的极性大于固定相的极性时称反相色谱法，主要用于非极性物质或中等极性物质的分离分析。 在中药制剂分析中，大多采用反相键合相色谱法。 系统组成： （一）高压输液系统 由贮液罐、脱气装置、高压输液泵、过滤器、梯度洗脱装置等组成。 1.贮液罐 由玻璃、不锈钢或氟塑料等耐腐蚀材料制成。贮液罐的放置位置要高于泵体，以保持输液静压差，使用过程应密闭，以防止因蒸发引起流动相组成改变，还可防止气体进入。2.流动相 流动相常用甲醇-水或乙腈－水为底剂的溶剂系统。 流动相在使用前必须脱气，否则很易在系统的低压部分逸出气泡，气泡的出现不仅影响柱分离效率，还会影响检测器的灵敏度甚至不能正常工作。脱气的方法有加热回流法、抽真空脱气法、超声脱气法和在线真空脱气法等。 3.高压输液泵 是高效液相色谱仪的关键部件之一，用以完成流动相的输送任务。对泵的要求是：耐腐蚀、耐高压、无脉冲、输出流量范围宽、流速恒定，且泵体易于清洗和维修。高压输液泵可分为恒压泵和恒流泵两类，常使用恒流泵（其压力随系统阻力改变而流量不变）。 （二）进样系统 常用六通阀进样器进样，进样量由定量环确定。操作时先将进样器手柄置于采样位置（L OAD），此时进样口只与定量环接通，处于常压状态，用微量注射器（体积应大于定量环体积）注入样品溶液，样品停留在定量环中。然后转动手柄至进样位置（INJECT），使定量环接入输液管路，样品由高压流动相带入色谱柱中。 （三）色谱柱 由柱管和填充剂组成。柱管多用不锈钢制成。柱内填充剂有硅胶和化学键合固定相。在化学键合固定相中有十八烷基硅烷键合硅胶（又称ODS柱或C18柱）、辛烷基硅烷键合硅

高效液相色谱在生物制药中的应用

高效液相色谱在生物制药中的应用 高效液相色谱法是近35年发展起来的一项高效、快速的分离分析技术，是现代分离测试的重要手段[1]。高效液相色谱法已经被广泛用在各种领域，它是以经典的液相色谱为基础，引入气相色谱的理论与实验方法，将流动相改为高压输送，并采用高效固定相及在线检测等手段，发展而成的分析、分离方法。以其灵敏度高、选择性好，可分析微量组成甚至痕量样品等特点，成为医药分析领域发展最快、应用最广的现代分析技术之一。于此同时，高效液相色谱法成为环境污染物检测技术及化工产品质量检验中的标准方法。鉴于其简便、快速、灵敏、准确的特点，目前，在医药、卫生、食品、环保等各个领域已得到广泛应用。随着色谱技术的不断发展，在世界许多科学领域中，色谱法已成为世界许多科学领域中普及的一种分离分析手段，色谱仪也呈多样化、高精化、自动化、联用技术化等方向发展。高效液相色谱仪具有柱效高、分析速度快、流动相和被测组分的体积流量小等特点，广泛应用于临床工作[2]。 1.高效液相色谱的介绍 高效液相色谱仪一般都具备贮液器、高压泵、梯度洗提装置（用双泵）、进样器、色谱柱、检测器、恒温器、记录仪等主要部件。高效液相色谱法有以下五个特点：①高压：流动相为液体，流经色谱柱受到的阻力比较大，为了能够快速的通过柱子，必须对流动相加很高的高压。②高效：分离效能高。可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果，比工业精馏塔和气相色谱的分离效能高出许多倍。③高灵敏度：紫外检测器可达0.01ng，进样量在uL数量级。④应用范围广：百分之七十以上的有机化合物可用高效液相色谱分析，特别是强极性、热稳定性差、高沸点、大分子化合物的分离分析，显示出优势。⑤分析速度快、载液流速快：分析所需时间一般小于1小时，和传统经典液体色谱法相比速度快得多。高效液相色谱有5种类型： 1、吸附色谱（Adsorption Chromatography） 2、分配色谱（Partition Chromatography） 3、离子色谱（Ion Chromatography） 4、体积排阻色谱（Size Exclusion Chromatography）