聚乙二醇的应用
聚乙二醇(PEG)修饰剂选择指南
性质 聚乙二醇(PEG)，又称聚氧乙烯(oxyethylene)或聚环氧乙烷(PEO)，是一种合成的亲水生物相容性聚合物。分子量＜100,000的通常被称为PEG，而分子量＞100,000的PEG聚合物被归类为PEO。聚乙二醇是通过环氧乙烷开环聚合反应合成的，PEG 可以聚合成线性、分支、y形或多臂等几何形状。PEG聚合物是两亲性的，可溶于水和许多有机溶剂(如二氯甲烷、乙醇、甲苯、丙酮和氯仿)。低分子量(Mw <1,000)的聚乙二醇是粘稠无色的液体，而高分子量的聚乙二醇是蜡质、白色的固体，熔点与分子量成正比，熔点的上限约为67℃。 应用 聚乙二醇无毒，通常无免疫原性，被FDA批准为可用于药物配方、食品和化妆品中作为辅料或载体。大多数分子量＜1000的PEG可快速从体内清除，清除率与聚合物分子量成反比。此外，PEG聚合物末端可连接多种官能团，使聚合物具有更多的功能。因此，PEG在生物医学研究中具有广泛应用:生物接合、药物传递、表面功能化、组织工程以及许多其他应用。 PEG偶联是药物靶点如肽、蛋白质或寡核苷酸等与PEG的共价生物偶联，进而优化药代动力学特性。在药物传递中，PEG可作为抗体-药物偶联物(ADCs)的连接物，或作为纳米颗粒的表面涂层，以改善系统药物传递。PEG水凝胶是一种水膨胀的三维聚合物网络，它能抵抗蛋白质的粘附和生物降解。PEG水凝胶是由PEG末端基团反应交联而成，通常用于组织工程和药物传递。 选择指南 功能 *单官能团聚乙二醇，包含一个化学反应端，可用于聚乙二醇化、表面接合和纳米粒子涂层 *双官能团聚乙二醇，含有两个活性末端的PEG，包括同双官能团PEG、异双官能团PEG，有利于水凝胶的接合和交联 反应 *共价偶联:具有活性末端基团额PEG，如n-羟基丁二酰亚胺酯、巯基或羧基等，可以共价偶联到相应的官能团。结合化学反应性质决定了每个分子的结合位点和PEG数量。 *链接化学需要带有叠氮或炔反应基团的PEG。链接化学是一种快速、选择性、生物正交的共轭或水凝胶形成方法 *在温和的反应条件下，末端连接丙烯酸酯的聚乙二醇可以快速聚合和光聚合 聚合物结构 *线性PEG通常用于PEG化、生物偶联和交联
聚乙二醇干扰素_研究的新进展_聚乙二醇化技术
新进展 聚乙二醇干扰素 研究的新进展:聚乙二醇化技术 刘昌孝 (天津药物研究院药代动力学与药效动力学重点实验室,天津 300193) Research Advance of Pegylated Interferon :Pegylation Technology 蛋白质药物是当前药物研究开发的热点,在临床治疗中的地位日益重要,如干扰素、白细胞介素以及重组的促红细胞生成素等,均是临床常用的重要药物。蛋白质药物最大的问题存在自身稳定性差、半衰期短及可能存在的免疫原性等限制。最近上市的一些新型蛋白质药物采用了聚乙二醇化技术,有望解决蛋白质药物的此类缺陷[1]。 聚乙二醇(polyethlene glycol,PEG)是一种安全无毒、无活性的聚合物,常用于蛋白药物修饰。Davis,Abuchow ski及其同事在20世纪70年代最先研究和开发出聚乙二醇化技术。研究显示聚乙二醇化能够改变药物动力学,进而可以改变治疗分子的药效学[2~4]。美国FDA目前批准了几种聚乙二醇化蛋白质药物,其中包括聚乙二醇化干扰素- 。大量临床研究表明它无论是单用还是与病毒唑合用治疗慢性丙型肝炎的疗效明显高于未经结构修饰的干扰素 。目前有两种聚乙二醇化干扰素- 可供临床应用,其中之一为聚乙二醇化干扰素- -2a(商品名派罗欣!(PEGASYS)。以下就以分子量为40kD的聚乙二醇修饰的干扰素 [简称PEG-IFN -2a(40kD)]为例介绍该技术对蛋白质药物带来的革命性影响。 1 聚乙二醇化对药代动力学的影响 干扰素- 对治疗丙型肝炎(HCV)的疗效受蛋白质性质,包括其稳定性、体内消除半衰期和免疫原性的影响。一般治疗采用未经结构修饰的干扰素- ,每周需要注射3次,即使这样,每次给药后浓度波动较大,发热、寒战、头痛等不良反应发生率较高,对病毒的抑制作用不稳定,导致病毒水平反跳。聚乙二醇化干扰素- -2a有利于克服这些问题,由于通过稳定的酰胺键与干扰素分子连接的支链大分子聚乙二醇,能保持药物浓度稳定,使H CV持续受到完全抑制,治疗有效时间延长,只需每周给药1次。就药代动力学而言,聚乙二醇化可产生以下变化[5~8]。1.1 延长半衰期 如上所述,作为蛋白质药物,普通干扰素 的一个重要局限性是半衰期短(4~ 16h),其血清浓度在注射24h后已经很低。而给药方案是每周注射3次,这就导致了较大的血药浓度波动。用PEG40kD修饰IFN 使血药浓度维持或接近于目标浓度的时间延长。注射后可维持血清峰浓度72~96h,维持治疗浓度168h。意味着每周1次给药可以维持有效的抗病毒效应。聚乙二醇技术延长半衰期的益处是通过持续的抗病毒压力阻止病毒的复制并且抑制耐药变异株的产生。此外,聚乙二醇化还能减少由于频繁给药造成的峰-谷血药浓度所带来的不良反应。 1.2 改变药物的分布特性 PEG IFN -2a (40kD)的分布容积为4~16L,与人体血浆和细胞外液的体积之和接近,比未修饰的IFN 低4倍。同时,PEG IFN -2a(40kD)主要分布在肝脏,少量分布在肾脏、骨髓和脾脏,能选择性地在肝脏发挥抗病毒疗效。分布容积较小还意味着不需按体重调整给药剂量,使给药方案更为简便。 1.3 代谢与排泄的变化 常规IFN 主要经肾脏代谢。但PEG IFN -2a(40kD)因分子量较大而又具有分枝状结构,因此肾脏代谢减少,主要通过非特异性蛋白酶在肝脏代谢,即在肾中的清除减少,延长药物在肝中的聚集时间。由于这种代谢特征,它可以提高药物的肝/血比例,对肝的抗病毒作用更有效,肾功能不全患者以及老年患者无需调整剂量。 2 聚乙二醇化减小药物的免疫原性 使用非人源化的蛋白质(包括普通干扰素)用于治疗目的存在的主要问题之一是存在免疫原性和抗原性反应的风险。这些反应能够中和生物学活性,增加蛋白质的清除并可导致过敏反应。当蛋白质由皮下给药时经常出现免疫原性反应。蛋白质的聚乙二醇化通过空间掩蔽潜在的抗原部位可能能够减少免疫原性反应。 294Clinical M edical Journal of China,2004.Vol.11,No.3 中国临床医学 2004年6月 第11卷 第3期
聚乙二醇合成操作规范
实验室合成聚乙二醇合成操作文件 1.引发剂的制备 方法一：醇与钾在四氢呋喃（THF）里直接反应 (一甲基二乙二醇醚+K，溶剂是精制的THF) （可以提前配好，需要时取用） 方法二：助引发剂二苯甲基钾（DPMK）+ 醇 (DPM+K=DPMK; DPMK+一甲基二乙二醇醚;溶剂是THF) （要求现配现用） 注意事项： a.THF必须经过精制才可使用。 精制方法为：在THF里加入二苯甲酮（指示剂）和金属钠，等THF变色后常压蒸出。 （注意：操作过程一定要避免与空气接触，不能有水，特别是不要让水进入蒸馏体系，否则会发生爆炸。） b.钾的切割必须全程浸泡在煤油里面。把表面氧化物切割完后放在 另一个干净的装有煤油的烧杯里称量。计量的表面干净的钾用 纸轻轻地吸一下煤油后放进装有四氢呋喃的制引发剂的烧瓶 中。 【注意：加钾的时候要通氮气保护。反应物加完后，停掉氮气，密闭反应（接液封）。】 c.制DPMK时需加热回流12小时。 【注意：DPM也需要精制（CaH2）。】 d.制好的引发剂通过双头针转移的方式，转移到安钵瓶中，用止血 钳封住，保持在干燥器中，置于暗处。 e.每次用时，用针筒（玻璃或一次性均可）抽取。 【注意：如果有剩余，还需保存，药用另一个止血钳封住针口一下，然后把原来的那个止血钳取下。】 f.一般单羟基的引发剂，是直接让它与钾反应（物质的量比为1： 1）；
如果是两羟基或更多的羟基，一般用DPMK+多羟基引发剂的形式。 具体操作为：在一干燥的烧瓶（盐水瓶也可以）里，放入计量的多羟基引发剂，再加入计量的THF/DMSO（体积比3：2）混合溶剂（溶剂总量一般为总体积为环氧乙烷体积的1.5倍-2倍（根据合成的PEG的分子量定，分子量越大，溶剂越多。 DPMK/OH为1/2.5。 g.DMSO需精制除水。 （注意，DMSO极易吸水，一定要注意不要接触空气，保存一定要严格密封。） h.所有用于反应的玻璃仪器、乳胶管、针管均需烘干，并放置于真 空烘箱里，随时取用。 2. 环氧乙烷的聚合物 a.聚合之前先把反应釜清洗干净，清洗办法为：先用水洗，再用乙 醇洗，最后用丙酮清洗。注意要把一些死角洗干净，如冷凝盘 管、搅拌桨、及进料口和出料口。清洗完后，让溶剂挥发干。 b.密封反应釜，分别试正压和负压，看会不会漏气。另外要检查一 下反应釜的部件会不会松了，注意保养。最小的那两个反应釜 要记得在密封前加入合适大小的菱形搅拌子。 c.试压完后，干燥反应釜：加入到100o C，在油泵抽真空下，连续 干燥1小时。 d.冷却反应釜到-10 o C-0 o C之间，通过双头针，分别加入溶剂、引 发剂及单体环氧乙烷。 e.加料完毕后，关上所有阀门，确保密封后，撤掉冷凝装置，开动 搅拌。慢慢升高温度，先升到30o C，等温度稳定后，再每次升 高5度，最终温度为60度。注意，如果合成分子量较小的 PEG，如5000一下，要注意聚合时的放热情况，当釜内温度升 到70度时，开动冷凝装置，当温度下降到50度时，停止冷 凝。如温度又上升到70度，再次开动冷凝装置。循环几次，知 道温度不再明显上升后，使其温度稳定在60度。
聚乙二醇
聚乙二醇 系列产品无毒、无刺激性，味微苦，具有良好的水溶性，并与许多有机物组份有良好的相溶性。它们具有优良的润滑性、保湿性、分散性、粘接剂、抗静电剂及柔软剂等，在化妆品、制药、化纤、橡胶、塑料、造纸、油漆、电镀、农药、金属加工及食品加工等行业中均有着极为广泛的应用。 中文名 聚乙二醇 英文名 Polyethylene glycol 别称 α-氢-ω-羟基(氧-1,2-乙二基)的聚合物等 化学式 HO(CH?CH?O)nH CAS登录号 25322-68-3 EINECS登录号 200-849-9
目录 .1不同名称 .2常用分类 .3物化性质 .?化学结构 .?化学性状 .?配伍性 .?配伍禁忌 .4产品分类 .5主要用途 .6常用规格 .7特别提示 .8安全信息 .9贮运 .10产品成员 .不同名称 中文名：聚乙二醇中文别名：α-氢-ω-羟基(氧-1,2-乙二基)的聚合物；乙二醇聚氧乙烯醚；聚氧化乙烯(PEO-LS)；聚乙二醇400；聚乙二醇12000；聚乙二醇6000；聚乙二醇2000;AC52 常用分类 Polymers；医药中间体；Optimization Reagents；Protein Structural Analysis；X-Ray Crystallography；Cosmetic Ingredients & Chemicals；Gas Chromatography；Packed GC； Stationary Phases；分散剂、载体、压片剂、成型剂；分离剂；食品添加剂；抄纸过程中的化学品；化工助剂；造纸化学品 物化性质
熔点64-66℃ 沸点>250℃ 密度 1.27 g/mL at 25℃ 蒸气密度>1 (vs air) 蒸气压<0.01 mm Hg ( 20℃) 折射率n 1.469 闪点270℃ 储存条件2-8℃ 溶解度H2O: 50 mg/mL, clear, colorless form waxy solid 敏感性Hygroscopic Merck 147568 稳定性Stable. Incompatible with strong oxidizing agents. NIST化学物质信息Polyethylene glycol(25322-68-3) EPA化学物质信息Poly(oxy-1,2-ethanediyl), .alpha.-hydro-.omega.-hydroxy- (25322-68-3) 化学结构 HO(CH2CH2O)n H，由环氧乙烷与水或乙二醇逐步加成聚合而成。 化学性状 依相对分子质量不同而性质不同，从无色无臭黏稠液体至蜡状固体。分子量200～600者常温下是液体，分子量在600以上者就逐渐变为半固体状，随着平均分子量的不同，性质也有差异。从无色无臭粘稠液体至蜡状固体。随着分子量的增大，其吸湿能力相应降低。本品溶于水、乙醇和许多其它有机溶剂。蒸气压低，对热、酸、碱稳定。与许多化学品不起作用。有良好的吸湿性、润滑性、粘结性。无毒，无刺激。平均分子量300，n=5～5.75，熔点-15～8℃，相对密度1.124～1.130。平均分子量600，n=12～13，熔点20 ～25℃，闪点246℃，相对密度1.13 (20℃)。平均分子量4000，n=70～85，熔点53～56℃。 在一般条件下，聚乙二醇是很稳定的，但在120℃或更高的温度下它能与空气中的氧发生作用。在惰性气氛中(如氮和二氧化碳)，它即使被加热至200～240℃也不会发生变化，当温度升至300℃会发生热裂解。加入抗氧化剂，如质量分数为0.25%～0.5%的吩噻嗪，可提高它的化学稳定性。它的任何分解产物都是挥发性的，不会生成硬壳或粘泥状的沉淀物。 聚乙二醇为环氧乙烷水解产物的聚合物，无毒、无刺激性，广泛应用于各种药物制剂中。低分子量的聚乙二醇毒性相对较大，综合来看，二醇类的毒性相当低。局部应用聚乙二醇特
DEAE Sephadex A-50使用说明
DEAE-Sephadex A-50柱层析纯化免疫球蛋白 原理 试剂和器材 操作步骤 注意事项 (一) 原理 DEAE-SephadexA-50(二乙基氨基乙基-葡聚糖A-50)为弱碱性阴离子交换剂。用NaOH将CL-型转变为OH-型后，可吸附酸性蛋白。血清中的γ球蛋白属于中性蛋白(等电点为PH6.85～7.5)，其余均属酸性蛋白。在PH7.2～7.4的环境中，酸性蛋白均被DEAE-Sephadex A-50吸附，只有γ球蛋白不被吸附。因此，通过柱层析γ球蛋白便可在洗脱中先流出,而其他蛋白则被吸附在柱上,从而便可分离获得纯化的IgG。DEAE-sephadexA-50柱层析是离子交换层析的一种。 (二)试剂和器材 1、试剂: (1)盐析提取的人γ球蛋白； (2)0.5N NaOH，0.5N HCl 2M NaCl，10％NaN3； (3)DEAE-Sephadex A-50，聚乙二醇(PEG)； (4)0.1M, PH7.4 PB(配制见盐析部分)； 2、器材: (1)层析玻璃柱(1.3×40cm)，滴定铁架，自由夹，螺旋夹，尼龙纱(200目)； (2)普通冰箱，751桮型紫外分光光度计，电导仪、抽滤装置(包括抽气机、干燥瓶、布氏漏斗、橡皮垫圈、抽滤瓶)，PH计； (3)透析袋、座标纸、滤纸、PH精密试纸； (4)量筒、烧杯、试管、吸管、滴管、灭菌小瓶等。 (三) 操作步骤 1、DEAE-Sephadex A-50预处理 称DEAE-Sephadex A-50(下称A-50)5克，悬于500ml蒸馏水，1小时后倾去上层细粒。按每克A-50加0.5N NaOH 15ml的比例，将A-50浸泡于0.5N NaOH中，搅匀，静置30分钟，装入布氏漏斗(垫有2层滤纸)中抽滤，并反复用蒸馏水抽洗至PH呈中性；再以0.5N HCl同上操作过程处理，最后以0.5N NaOH再处理一次。处理完后，将A-50浸泡于0.1M，PH 7.4 PB 中过夜。 2、装柱 (1)将层析柱垂直固定于滴定铁架上，柱底垫一园尼龙纱，出水口接一乳胶或塑料管并关闭开关。
聚乙二醇油酸酯
聚乙二醇油酸酯 【类型】非离子 【规格】 品种规格代号 聚乙二醇 400 单油酸酯 PEG400MO 聚乙二醇 400 双油酸酯 PEG400DO 聚乙二醇 600 单油酸酯 PEG600MO 聚乙二醇油酸酯聚乙二醇 600 双油酸酯 PEG600DO 聚乙二醇 4000 单油酸酯 PEG4000MO 聚乙二醇 6000 单油酸酯 PEG6000MO PEG-264 油酸酯 PEG-264 油酸酯 (特殊规格，可代为研制加工) 【技术指标】 PEG400MO 琥珀色液体 ? 5 75 , 95 ? 99% 11 , 12 100 , PEG400DO 琥珀色液体 ? 10 ? 99% 7 , 8 130 PEG600MO 琥珀色液体 ? 5 60 , 75 ? 99% 13 , 14 PEG600DO 琥珀色液体 ? 10 85 , 105 ? 99% 10 , 11 18 , PEG4000MO 黄色固体 ? 5 10 , 15 ? 99% 18.5 PEG6000MO 黄色固体 ? 5 5 , 10 ? 99% 19 PEG-264 油115 , 黄色液体 ? 2 ? 99% 酸酯 125 【性能与应用】 规格性能与应用 溶于苯、异丙醇中，水中呈分散状，作工业专用润滑剂、工业
去油垢剂、乙烯基塑料溶胶粘度稳定剂、纺织柔软剂、润滑剂，PEG400MO 配制干洗剂、油基切削液平衡乳化剂。塑料抗静电剂和分散剂。 可生物降解。 溶于矿、植物油，水中呈分散状，作 W/O 型乳化剂、增溶剂、PEG400DO 煤油乳化剂、工业润滑剂。 PEG600MO 1 、溶于水，具有良好的洗涤、乳化、润滑性能。 PEG600DO 2 、化妆品中作 O/W 乳化剂，纺织业中作匀染剂、分散剂、柔 软剂，金属加工中作润滑剂。农药中作杀虫剂的乳化剂，亦可PEG4000MO 用于水溶性涂料、印刷电路板的酸洗。 PEG6000MO 1 、易溶于油及有机溶剂，具有良好的平滑、乳化作用; PEG-264 油酸 2 、广泛用于制造合成纤维的乳化剂，具有凝固点低，粘温性酯 好，挥发性小，抗氧性好的特点。 【包装与贮运】 200Kg 铁桶、 50Kg 塑料桶包装。 按一般化学品贮存和运输。贮存于干燥通风处。 保质期二年。
聚乙二醇作用和用途
聚乙二醇作用和用途： 产品无毒、无刺激性、具有优良的水溶性、相溶性、润滑性、粘接性和热稳定性。因而，作为润滑剂、分散剂、粘接剂、赋型剂等，在医药、兽药及化妆品行业中作为软膏、栓剂的基质，滴丸、片剂的载体，成型剂和针剂中的溶剂等，均有着极为广泛的应用。 质量标准：CP2000标准 包装规格：液体产品用50公斤/塑料桶，固体片状和粉末状产品用20公斤/纸箱。 贮运：本品无毒、难燃，按一般化学品运输，密封贮存于干燥片。 药用聚乙二醇（PEG）400 外观（25℃）：无色粘稠液体凝点（℃）：— 溶液的澄清度与颜色：不浓、不深于2＃标准液 粘度40（m㎡/s）：37～45 平均分子量：380～420 PH值：4～7 乙二醇或二甘醇：≤% 炽灼残渣（%）：≤ 砷盐（ppm）：≤3 重金属（ppm）：≤5 包装规格：50公斤/塑料桶质量标准：cp2000 贮运：本品无毒、难燃，按一般化学品运输，密封贮存于干燥处。 主要用途：由于PEG400为液体、它具有与各种溶剂的广泛相容性，是很好的溶剂和增溶剂，被广泛用于液体制剂。当植物油不是合作活性物配料载体时，PEG则是首选材料。这主要是由于PEG稳定、不易变质，含有PEG的针剂被加热到150摄氏度时是很安全、很稳定的。针剂、滴眼液等液体制剂，此外PEG400的广泛的粘度范围、吸湿性使其在软胶囊的制作中应用也很广泛 药用聚乙二醇（PEG）600 外观（25℃）：无色粘稠液体或呈半透明蜡状软物凝点（℃）：— 溶液的澄清度与颜色：不浓、不深于2＃标准液 粘度40（m㎡/s）：56～62 平均分子量：570～630 PH值：4～7 乙二醇或二甘醇：— 炽灼残渣（%）：≤ 砷盐（ppm）：—
聚乙二醇在药剂学方面的应用
聚乙二醇在药剂学方面的应用综述 摘要本文就聚乙二醇在药剂学方面的近5年研究与应用方面的文献进行综述，同时深化个人对聚乙二醇在药剂学方面重要作用的理解与把握。 关键词聚乙二醇（PEG）药剂学应用 引言 聚乙二醇(polyethylene glycol，PEG)是一种pH中性，无毒，水溶性较高的亲水聚合物，其呈线性或支化链状结构。聚乙二醇是迄今为止已知聚合物中蛋白和细胞吸收水平最低的聚合物，由于聚乙二醇无毒及良好的生物相容性，聚乙二醇已被FDA批准可作为体内注射药用聚合物[1]。 目前，聚乙二醇已经广泛的应用于药剂学领域，本文主要对近5年聚乙二醇在药剂学领域研究与应用的相关文章进行综述。 聚乙二醇由于其聚合度差异，分子量通常在200～35 000之间，其化学通式为HOCH2(CH2 OCH2)n CH2OH。总的说来，在药剂学方面聚乙二醇主要可被用作为药物溶剂，药物附加剂或辅料，增塑剂和致孔剂，药物载体，修饰材料和渗透促进剂等[2，3]。由此我们就可以看出聚乙二醇的在药剂学上的广泛用途，不仅如此，聚乙二醇在其他领域也有广泛的应用，如临床、生化和药用植物等方面[4]。 下面就对聚乙二醇在药剂学各方面的应用分点举例阐述。 1．聚乙二醇用作药物溶剂 PEG200～PEG600不同浓度的水溶液是良好的溶剂，可提高难溶性药物的溶解度且对水不稳定的药物有稳定作用，故可用作为注射用溶剂[3]。如盐酸苄去氢骆驼莲碱注射液以PEG200作为溶剂，安全稳定，贮放2a保持性质不变。另有研究表明，以PEG400为溶剂制成的吲哚美辛滴眼剂，其稳定性优于Span80处方[2]。 2．聚乙二醇作为附加剂或辅料 2.1 潜溶剂 聚乙二醇在液体附加剂中可以与水形成潜溶剂，提高难溶性药物的溶解度，个人认为聚乙二醇水溶液的溶剂作用包含了潜溶作用，如聚乙二醇的水溶液可以溶解许多水不溶性有机药物[3]，也就提高了药物在水中的溶解度。 2.2 黏合剂和润滑剂 PEG4000、PEG6000是片剂中常用的水溶性黏合剂和润滑剂，用聚乙二醇作为黏合剂制得的颗粒，其成形性好，片剂不变硬，适合于水溶性与水不溶性物料的制粒[3]。饶光玲[5]等进
聚乙二醇
摘要 越来越多的蛋白质多肽类药物被应用于人类疾病的治疗，与其它合成化学药物相比，它们有易引起机体的免疫反应，体内半衰期短，在体内易水解、变性等缺点。化学修饰作为一种新兴技术，能改善上述不良特性。本文主要优化合成了一种PEG修饰剂——mPEG．NHs，采用牛血清白蛋白BsA和溶菌酶作为模式蛋白对其修饰条件进行了优化，并用层析法分离修饰后蛋白质。 mPEG．NHS的合成主要通过两个反应得到，第一步是mPEG同丁二酸酐之间的酯化反应，得到mPEG—SA，第二步是mPEG—SA同NHS(N．羟基硫代琥珀酰亚胺)反应，在脱水剂DCCI(N．N’一二己基碳二亚胺)的催化下得到mPEG．NHS。 通过优化反应条件使得mPEG的转化率和mPEG．NHs的纯度都得到提高。优化后反应条件分别为：n1酯化反应采用毗啶为催化剂，酸醇比为10：I，反应时间3 h；f2)脱水反应时间25h，温度400C反应物摩尔比mPEG．sA：NHS为1：2．5。优化后的两步反应的转化率分别为60．1％和56．O％。 mPEG—NHS修饰蛋白质在不同的反应条件下得到不同修饰率的蛋白质，优化反应条件后能得到更高氨基修饰率的修饰产物。最佳修饰反应条件为：反应时间10min，蛋白质和修饰剂质量比为1：5，采用pH=9．O的硼砂缓冲液，在优化条件下可得到修饰率为47．5％的产物。 由于修饰反应得到的蛋白质溶液中含有连接有修饰剂的蛋白质和未连接修饰剂的蛋白质，可通过层析的方法将它们分离开。溶菌酶修饰产物采用seDhadex G．75凝胶层析和Deae．sepharose CL-6B阳离子交换层析相结合的方法：BsA 修饰产物采用sephadex G．100和Q．SeDharose阴离子交换层析相结合的方法。用sDs．PAGE电泳检测分离产物，证明未修饰的蛋白质同被修饰的蛋白质被分离开来。 关键词：PEG修饰化学修饰合成优化分离层析
新编聚乙二醇(PEG)系列应用指南
聚乙二醇（PEG）系列应用指南 北京国人逸康科技有限公司是以生产药用聚乙二醇（PEG）为主的，专业生产厂家，在国内拥有最先进的高质量聚乙二醇（PEG）的聚合技术的所生产的药用聚乙二醇（PEG）系列产品，分子量准确，色泽无色或洁白。各项指标均达到国外、同类产品质量标准，其中高分子量药用聚乙二醇（PEG）（8000—20000）尚属国内独家产生。 北京国人逸康科技有限公司的药用聚乙二醇（PEG）系列包括十二个分子量从200到20000的标准牌号产品，同时，国人逸康也可根据用户的特殊要求生产各种特殊规格的产品，还可生产高数目药用聚乙二醇（PEG）100目—300目（适用于薄膜衣技术）。 无论单独使用、混合使用、以水溶液形式使用，还是在表面活性剂、润滑剂和增塑剂的生产中作为中间体，这些产品将是您得到最满意的选择。 一、聚乙二醇（PEG）的性质 聚乙二醇（PEG）最突出的特性是它具有与各种容积的广泛相容性，广泛的年度范围和吸湿性。 聚乙二醇（PEG）也具有良好的润滑性、热稳定性并以低毒性、难挥发性、很前的颜色深受欢迎。 低分子量聚乙二醇（PEG）的吸湿性和乙二醇差不多。但当分子量增加时其吸湿性很快降低，聚乙二醇（PEG）4000和聚乙二醇（PEG）6000得吸湿性很低，但对温度仍很敏感。为了得到广泛的吸湿性，可以通过聚乙二醇（PEG）间的混合或聚乙二醇（PEG）与乙醇的混合而得到。 聚乙二醇（PEG）在水中的溶解性很大，液体聚乙二醇（PEG）可以以任何比例雨水混溶，甚至高分子量聚乙二醇（PEG）在水中溶解度可达50%以上，聚乙二醇（PEG）溶液属非离子性。 聚乙二醇（PEG）可溶于乙醇、乙醛、烷醇酰胺、氨化物、胺、氯化烃、芳香烃、酯、乙二醇酯、乙二醇醚酯、酮、有机酸、酸酐和苯酚等多种有机溶剂中。一般来说，多高分子量聚乙二醇（PEG）其溶解度和溶解能力比较低，但随着温度的升高，其溶解度和溶解能力都得到提高，所以，中等加热可以迅速提高固体聚乙二醇（PEG）的溶解度。但是，聚乙二醇（PEG）不容于脂肪族碳氢化合物和石油醚中。 二、聚乙二醇（PEG）在工业中的应用 在很多应用场合，聚乙二醇（PEG）却被用作中间体或助溶剂来使用。 1．医药工业 聚乙二醇（PEG）由于无毒，可配成各种溶剂和润滑剂，他在医药工业中够广泛的应用。 聚乙二醇（PEG）在医药工业中的应用主要包括以下方面： （1）软膏基质 适当的聚乙二醇（PEG）混合物具有一定的膏状稠度（如等量聚乙二醇（PEG）300和聚乙二醇（PEG）1500混合），这些性质使他们在水中游比较好的的溶解性和良好的与药物相容性，可以作为软膏的基质。它的优点是： 聚乙二醇（PEG）不能引起皮肤过敏，而且稳定不变质。
聚乙二醇在蛋白质纯化中的应用
聚乙二醇在蛋白质纯化中的应用 摘要：本课题将对聚乙二醇在蛋白质纯化中的作用、优势、应用范围及对于性质鉴定的影响等方面进行研究，为从生物体中提取活性蛋白质组分提供更好的方法和思路，并为聚乙二醇在蛋白质纯化中的应用提供依据。 关键词：聚乙二醇;球蛋白; 清蛋白 Abstract: In this thesis, PEG used in protein purification will be studied it’s function, advantage , application scope and other aspects. From these facts , It can provide better way and better thinking in extracting protein alive ,and also offer basis of purification. Key words: polyethylene Glycol , globulin,albumin 1 材料和方法 1.1材料 5%卵清蛋白溶液（新鲜鸡蛋清：水=1：9）为自己所配制的溶液；紫外扫描光谱仪Lambda17型（PERKIN-ELMER公司）；荧光分光光度计LS50B型（HITACHI公司）；FTIR谱仪NEXUS670型（Nicolt公司）；其他试剂为国产分析纯。 1.2方法 1.2.1不同沉淀蛋白质方法的比较，即用硫酸铵的盐析法；用乙醇的有机溶剂沉淀法；用聚乙二醇的有机溶剂沉淀法和用5%三氯乙酸的有机酸沉淀法 1.2.2 产物性质鉴定用紫外光谱比较法和红外光谱比较法 2 结果与分析
聚乙二醇系列产品在生物医学领域的应用
聚乙二醇系列产品 中文名：聚乙二醇 中文别名：α-氢-ω-羟基(氧-1,2-乙二基)的聚合物；乙二醇聚氧乙烯醚；聚氧化乙烯聚乙二醇400；聚乙二醇12000；聚乙二醇6000；聚乙二醇2000 CAS：25322-68-3 EINECS号：203-473-3 分子式：HO(CH2CH2O)nH 分子量：697.611 聚乙二醇系列产品无毒、无刺激性，具有良好的，并与许多有机物组份有良好的相溶性。它们具有优良的润滑性、保湿性、分散性、粘接剂、抗静电剂及等，在化妆品、制药、化纤、、塑料、造纸、、电镀、农药、金属加工及食品加工等行业中均有着极为广泛的应用。分散剂、载体、压片剂、成型剂；分离剂；食品添加剂；抄纸过程中的化学品；化工助剂；造纸化学品聚乙二醇为环氧乙烷水解产物的聚合物，无毒、无刺激性，广泛应用于各种药物制剂中。低分子量的聚乙二醇毒性相对较大，综合来看，二醇类的毒性相当低。局部应用聚乙二醇特别是黏膜给药可导致刺激性疼痛。在外用洗剂中，本品能增加皮肤的柔韧性，并具有与甘油类似的保湿作用。大剂量口服可出现腹泻。在注射剂中，最大的聚乙二醇300浓度约为30%(V/V)，浓度大于40%(V/V)可出现溶血现象。 随着分子量的提高，其水溶性、蒸汽压、吸水性和有机溶剂的溶解度等相应下降，而凝固点、相对密度、闪点和粘度则相应提高。对热稳定，与许多化学品不起作用，不水解。 配伍性 聚乙二醇是非离子型的水溶性聚合物，它能与许多极性较高的物质配伍，对低极性的物质配伍性差，相对分子质量低的聚乙二醇配伍性较好。聚乙二醇可与蛋白、氧化淀粉、硝基纤维素、聚醋酸乙烯酯和玉米朊配伍或部分配伍。与蜂蜡、蓖麻油、明胶、阿拉伯胶，矿物油、橄榄油和石蜡等不互溶。 配伍禁忌 1、液态和固态级别的聚乙二醇和某些色素不能配伍； 2、可使抗菌素的活性降低，特别是青霉素和杆菌肽； 3、羟苯酯类的防腐剂可因聚乙二醇的络合使防腐效果减弱； 4、酚、鞣酸、水杨酸可使其软化和液化； 5、磺胺类和地蒽酚与其作用可变色； 6、与山梨醇配伍可生成沉淀。 产品分类产品可以分为医药级，化妆品级，食品级和工业级等几种系列。被广泛应用于食品、制药、饲料、个人护理品、化学等行业的生产，是业内闻名和值得信赖的品牌。 主要用途聚乙二醇和聚乙二醇脂肪酸酯在化妆品工业和制药工业中的应用很广泛。由于聚乙二醇兼有很多优良的性质：水溶性、不挥发性、生理惰性、温和性、润滑性和使皮肤润湿、柔软、有愉快用后感等。可选取不同相对分子质量级分的聚乙二醇改变制品的粘度、
复方聚乙二醇电解质散说明书
复方聚乙二醇电解质散说明书 【批准文号】国药准字H20030827 【中文名称】复方聚乙二醇电解质散 【产品英文名称】 Polyethylene Glycol Electrolytes Powder 【生产企业】深圳万和制药有限公司 【功效主治】术前肠道清洁准备；肠镜、钡灌肠及其它检查前的肠道清洁准备。【化学成分】 本品为复方制剂，其组分为：每盒由A、B、C各1包组成，A包含氯化钾0.74g，碳酸氢钠1.68g；B包含氯化钠1.46g，硫酸钠5.68g；C包含聚乙二醇4000 60g。 【药理作用】 本品通常在4小时内导致腹泻，快速清洁肠道。聚乙二醇4000的渗透活性和电解质的浓度不影响离子或水的吸收或排出。大量应用对液体或电解质的平衡无明显改变。 【药物相互作用】 服用本品前1小时口服的其它药物可能会从消化道冲走，从而影响人体对该药物的吸收。 【不良反应】 常见有恶心、饱胀感；少见有腹痛、呕吐、肛门不适等一过性消化道反应。另个别病例可能出现与过敏性反应有关的荨麻疹、流鼻涕、皮炎等。曾有个别文献报道，60岁以上患者偶可出现比较严重的并发症，如贲门撕裂出血、食道穿孔、心跳骤停、肺水肿引起的呼吸困难、呕吐和误吸引起胸部X线蝴蝶样浸润等。 【禁忌症】 肠梗阻、肠穿孔、胃潴留、消化道出血、中毒性肠炎、中毒性巨结肠或肠扭转病人。 【产品规格】 每包68.56g，其中第一袋含氯化钠1.46g与无水硫酸钠5.68g，第二袋含氯化钾0.74g与碳酸氢钠1.68g；第三袋含聚乙二醇4000 59g 【用法用量】 1 配制方法（每1000ml）：取本品1盒（内含A、B、C各1小包），将盒内各包药粉一并倒入带有刻度的杯（瓶）中，加温开水至1000ml，搅拌使完全溶解，即可服用。
PEG沉淀法-病毒提纯方法
1. Viruses such as baculovirus can be concentrated by polyethylene glycol precipitation. 2. Adjust the pH of the virus-containing supernatant to Polyethylene glycol (PEG, MW 6,000) is added to a final concentration of 8% (w/v). 3. Stir at 4℃for 2 hours. 4. Centrifuge at 10,000 x g for 2 hours. 5. Resuspend the pellet in a small volume of appropriate buffer ( ., RNase-free ddH2 for virus RNA prep). 沉淀法-病毒提纯方法 主要是从稀的悬浮液中浓缩病毒，有中性盐沉淀法、聚乙二醇(PEG)沉淀法、有机溶剂沉淀法、等电点沉淀法、皂土法和鱼精蛋白沉淀法等。 1.中性盐沉淀法：病毒一般在45%以上饱和度的硫酸铵溶液中沉淀，且保持其感染性。在含有病毒的组织培养液中加入等体积的饱和硫酸铵，可以很容易地沉淀某些病毒如狂犬病毒、鸡新城疫病毒等。 2.聚乙二醇沉淀法：聚乙二醇(PEG)为水溶性非离子型聚合物，具有各种不同的分子量，用于病毒沉淀的主要是分子量为2 000～6000的PEG。将PEG配成50%左右的溶液，或直接将固体PEG加于病毒悬液中，使其达到所需浓度，通常在4℃搅拌过夜，然后离心使病毒沉淀。Tanncock(1985年) 成功地用PEG浓缩了禽脑脊髓炎病毒。 3.有机溶剂沉淀法：甲醇、氯仿、正丁醇、氟碳化合物等都可用于提纯病毒，但乙醚、氯仿等脂溶剂对于具有脂质囊膜的病毒具有破坏和灭活作用，故不适于这类病毒的浓缩提纯。 4.等电点沉淀法：病毒粒子在等电点时，所携带的正电荷与负电荷相互中和，因而失去相互排斥的作用而发生沉淀。多数病毒的等电点在～之间，因此在pH3～6范围内均可沉淀，由于一部分细胞成份在等电点时亦发生沉淀，此法效果不太理想，但从感染的组织培养液中浓缩病毒，可以获得较好结果。应用酸性范围的等电点沉淀或分级沉淀病毒时，必须注意pH对病毒活性的影响及病毒粒子电荷与组织蛋白电荷的差异。 5.皂土法：Girin(1989年)应用皂土在酸性条件下(pH4～吸附轮状病毒SA-11，再在碱性条件下（），又使其洗脱下来，从而达到纯化目的。 6.鱼精蛋白沉淀法：鱼精蛋白为碱性蛋白，具有携带其它蛋白质共沉淀的作用，能和直径大于50nm的病毒共同沉淀而不影响病毒的感染力。当向这种沉淀物加入1mol/LNaCl时，病毒又重新释放到悬液中，而鱼精蛋白仍然沉淀。直径小于50nm的小型病毒则不与鱼精蛋白共同沉淀。因此，可利用鱼精蛋白去除病毒材料中直径大于50nm的异种蛋白质。 聚乙二醇HOCH2(CH2OCH2)nCH2OH(n＞4)( Polyethylene Glycol 简写为PEG)，它的亲水性强，溶于水和许多有机溶剂，对热稳定，有广泛围的分子量，在生物大分子制备中，用的较多的是分子量为6000～20000的PEG。 PEG 的沉淀效果主要与其本身的浓度和分子量有关，同时还受离子强度、溶液pH 和温度等因素的影响。在一定的pH 值下，盐浓度越高，所需PEG 的浓度越低，溶液的pH 越接近目的物的等电点，沉淀所需PEG 的浓度越低。在一定范围内，高分子量和高浓度的PEG 沉淀的效率高。以上这些现象的理论解释还都仅仅是假设，未得到充分的证实，其解释主要有：①认为沉淀作用是聚合物与生物大分子发生共沉淀作用。②由于聚合物有较强的亲水性，使生物大分子脱水而发生沉淀。③聚合物与生物大分子之间以氢键相互作用形成复合物，在重力作用下形成沉淀析出。④通过空间位置排斥，使液体中生物大分子被迫挤聚在一起而发生沉淀。 有机聚合物沉淀的优点是：①操作条件温和，不易引起生物大分子变性；②沉淀效能高，使用很少量的PEG 即可以沉淀相当多的生物大分子；③沉淀后有机聚合物容易去除。 水溶性非离子型聚合物沉淀法常用的聚合物为聚乙二醇（PEG）及硫酸葡聚糖。水溶性聚合物沉淀蛋白质的机制尚不清楚，大致有如下解释：①聚合物与蛋白质形成共沉物；①聚合物与蛋白质之间发生水的重分配；①聚合物与蛋白质形成复合物。此法受许多因素影响，主要是pH、离子强度、蛋白质浓度和PEG的分子量等。分子量为2000～6000的PEG皆适宜于做蛋白沉淀用。如若使用得当，效果甚为满意。一般认为，PEG浓度在3％～4％时沉淀免疫复合物，6％～7％可沉淀IgM，8％～12％可沉淀IgG，12％～15％可沉淀其他球蛋白，25％可沉淀白蛋白。最突出的应用是用3％～4％的PEG沉淀免疫复合物，未结合的抗原和抗体留在溶液中。按此原理设计了快速测定法和循环免疫复合物测定法 从网上搜索到得关于PEG沉淀提纯病毒的方法，先汇总至此贴，希望大家支持本版 1、用超声波或冻融的方法使细胞破碎释放出病毒； 2、慢慢搅动并加入NaCl终浓度是L,有助于病毒的沉淀，再等量加入10％PEG(一般使用的是PEG6000就可以了。
聚乙二醇在药物制剂中的应用
聚乙二醇在药物制剂中的应用 聚乙二醇别名聚氧乙烯醇或聚氧乙烯二醇，系环氧乙烷与单乙二 醇（或双乙二醇）在碱性催化剂催化之下聚合而成，分子质量因聚合度不同而异，通常在200～35 000之间，PEG 的性质随分子质量而变化，目前常见的PEG种类有PEG200、PEG300、PEG400、PEG600、PEG2000、PEG4000、PEG6000、PEG8000等。 药物溶剂 PEG200、PEG300、PEG400、PEG600 系无色、略有微臭的粘性液体，化学性质稳定，安全低毒，故常作为药物的溶剂。另外，为了增加难溶性药物的溶解度，常使用潜溶剂即乙醇、甘油、丙二醇、苯甲醇、聚乙二醇等与水组成的混合溶剂。 用于软胶囊剂 软胶囊剂的囊材多以一定比例的明胶、增塑剂和水等组成，因此对蛋白质性质无影响的药物和附加剂均可填充。如各种油类、液态药物、药物溶液、药物混悬液和固体药物等。由于低分子质量PEG 能与水混溶，故是水溶性药物和某些有机药物很好的溶剂，如硝苯地平软胶囊。目前，软胶囊剂多为固体药物粉末混悬在油性或非油性（PEG400 等）分散介质中包制而成。另有报道，水合氯醛应用聚乙二醇作为溶剂可大大降低它对明胶蛋白的分解作用 用于注射剂 由于PEG200～PEG600 可提高难溶性药物的溶解度且对水不稳定药物有稳定作用，故可作为注射用溶剂。单一以PEG 作为注射用溶剂的注射剂并不多见，如噻替哌注射液以PEG400 或PEG600作为溶剂，可避免噻替哌在水中的聚结沉降作用；盐酸苄去氢骆驼莲碱注射液以PEG200 作为溶剂，安全稳定，贮放2 a 保持不变。但一般多用混合溶剂（潜溶剂），如以V (PEG300): V(苯甲醇): V (丙二醇) = 80:5:15 时可作为质量分数为5 % 黄体酮或睾丸酮注射液的混合溶剂，此2 种注射液经肌肉注射后，与体液接触即在局部析出药物沉淀，形成药物仓库，逐渐从组织中释放，具有长效作用，售商品有病毒灵注射液、安乃近注射液、痢菌净注射液、穿心莲注射液、菌毒杀星注射液等。 用于滴眼剂 研究表明，以PEG400 为溶剂，可制成吲哚美辛滴眼剂。对此滴眼剂进行的稳定性研究结果表明，PEG400 处方优于Span80 处方。另外，PEG 可作为滴眼剂中的增稠剂，增加粘度，使药物在眼内停留时间延长，从而增加药效，减少刺激作用。 润滑剂与粘合剂 PEG4 000、PEG6 000是片剂中水溶性润滑剂的典型代表，在片剂处方中可直接加入适量聚乙二醇进行整粒，也可将其先配成醇溶液、混悬液或乳液进行制粒，润滑效果不变。利用聚乙二醇制得片剂的崩解和溶出不受影响，可提高主药在胃内的溶解性，最终有助于增加生物利用度。近年来，聚乙二醇在片剂中的使用越来越广泛，它们不仅可用作润滑剂，还可作为粘合剂，以PEG4 000最为常用。如以PEG4 000为粘合剂（熔点较低，在高速搅拌下呈熔融态），α -乳糖为填充剂，交联聚乙烯吡咯烷酮为崩解剂，硬脂酸镁为润滑剂，采用熔融制粒法可制备卡马西平速释片 另外对于热不稳定药物，若采用PEG4 000为粘合剂，可在干燥状态下进行粉末直接压片，效果较为理想。市售商品主要有痢菌净片、多钙片、钙中钙片、痢特灵片等。 药物载体 PEG 随分子量的增加则由液体逐渐呈半固体至固体，熔点也随之升高。由于PEG 对人体无毒无害，亦无致畸，致癌和基因突变等副作用，且可增加某些药物的溶出速率，提高药物的生物利用度，故是最常用的水溶性载体之一。 基质 PEG 是一类亲水性基质，其性质稳定，对皮肤无刺激性，而具有润滑性，故广泛应用于软膏剂、栓剂、凝胶剂、滴丸剂、乃至胶囊剂。如水硫软膏基质系由PEG300 与PEG4 000质量比为2:1 时于70 ℃水浴熔合而成。复方磺胺甲噁唑（SMZ）栓以m(PEG6 000) : m(PEG4 000):m(水)=57:33:10 为基质，其融变时限和体外药物溶出速率均优于可可豆酯、半合成脂肪酸酯等基质。以PEG 为基质，加入主药和一些药物赋形剂可制备水凝胶剂，如氯硝西泮水凝胶，擦在病人身体上可使药物快速透过皮肤进入血液循环从而发挥抗惊厥作用。另外，PEG400、1 500、4 000～20 000 均可作为半固体基质，将硬胶囊改装液体或半固体药液，如硝苯地平1 份、液体PEG 5 ～25份、PVP 0.4～10 份混合药液罐装的硬胶囊剂具有长效作用，可广泛用于心绞痛的治疗 聚乙二醇作为软膏剂水溶性基质， 市售的品种有百多邦（莫匹罗星）、环丙沙星霜等；作为栓剂基质，市售的品种有制霉菌素栓、甲硝唑栓、新霉素栓等。 固体分散材料 固体分散体系指药物以分子、胶态、无定型、微晶等状态均匀分散在某一固体载体物质中所形成的分散体系。PEG （分子质量为1 000～20 000 ）是一类常用的水溶性载体材料，可用于增加药物的溶出速率，如
沉淀技术
第五章沉淀技术 学习目标：了解蛋白质的基本性质 掌握蛋白质沉淀的基本原理 掌握沉淀技术的基本方法 能够正确进行蛋白质的沉淀分离方法 第一节蛋白质沉淀的基本原理 沉淀是溶液中溶质由液相变为固相析出的过程。 沉淀技术是通过加入试剂或改变条件,使溶液中的溶质离开溶液生成不溶性颗粒而沉降析出的技术. 第一节蛋白质沉淀的基本原理 沉淀是溶液中的溶质由液相变成固相析出的过程.此方法的基本原理是根据不同物质在溶剂中的溶解度不同而达到分离的目的. 一蛋白质的溶解性 蛋白质的溶解性是由其组成,构象以及分子周围的环境所决定.影响蛋白质溶解度的主要因素分成蛋白质性质和溶液性质两类. 蛋白质性质的因素有:分子大小,氨基酸序列,可离子化的残基数,极性/非极性残基比率,极性/非极性残基分布,氨基酸残基的化学性质,蛋白质结构,蛋白质电性,化学键性质. 溶液性质的因素有:溶剂可利用度,pH值,离子强度,温度. 二蛋白质胶体溶液的稳定性 蛋白质属于胶体分散系统.由于水化膜和双电层着两种稳定的因素,使蛋白质溶液成为亲水的胶体溶液.由于水化膜和双电层的存在,蛋
白质颗粒彼此不能接近,因而增加了蛋白质溶液的稳定性,阻碍蛋白质胶粒从溶液中沉淀出来. 三沉淀动力学 溶解度是一个平衡特性，但是溶解度的降低是一个动力学过程。当体系变得不稳定以后，分子互相碰撞并产生聚集作用。通常认为相互碰撞由下面几种运动引起:口热运动(布朗运动); 2对流运动，由机械搅拌产生:3差速沉降，由颗粒自由沉降速度不同造成的。其中D和@两种机理在蛋白质沉淀中起主导作用，而机理3在沉隆过程中起主导作用(如在废水处理中)。由布朗运动所造成的碰撞导致异向聚集，而由对流运动所造成的碰撞导致同 向聚集。 为了简化沉淀过程的动力学，可把沉淀过程分成下述6 个步骤: @初始混合，蛋白质溶液与沉淀剂在强烈搅拌下混合; @晶核生成，新相形成，产生极小的初始固体微粒; 3扩散限制生长，晶核在布朗扩散作用下生长，生成亚微米大小的核，这一步速度很快: @流动引起的生长，这些核通过对流传递(搅拌) 引起的碰撞进一步生长，产生絮体或较大的聚集体，这一步是在较低的速度下进行的; 5絮体的破碎，破碎取决于它们的大小、密度和机械阻力; 6 聚集体的陈化，在陈化过程中，絮体取得大小和阻力平衡。 第二节蛋白质沉淀技术实施 －、基本方法