体重监测下硫代乙酰胺诱导豚鼠肝纤维化模型
体重监测下硫代乙酰胺诱导豚鼠肝纤维化模
型
作者：王小平，赖远辉，许峰峰，甄宇洋
【摘要】目的根据体重变化监测硫代乙酰胺(TAA)诱导豚鼠肝纤维化过程中个体反应差异,探索硫代乙酰胺诱导豚鼠肝纤维化模型的可行性。方法健康雄性豚鼠50只，随机分成三组：对照组10只;实验组40只(TAA六周组20只，TAA九周组20只)。实验组予浓度为0.03%TAA+750 mg/L Vit C饮用水诱导并不限量供应。肝组织用HE染色，Masson三色染色、Gomori银染色法。据肝组织内纤维组织增生状况分为5级：(S0，S1，S2，S3，S4);统计各个体肝纤维化程度。结果体重比较使用TAA第七周：TAA六周组vs. TAA九周组，P>0.05，实验组间差异无统计学意义。各实验组内个体体重变化存在差异。纤维化形成统计：S0：(对照组10例)，S1：TAA六周组4例，S2:TAA 六周组14例，TAA九周组5例，S3:TAA六周组1例，TAA九周组9例，S4:TAA九周组2例。结论本实验表明硫代乙酰胺可以诱导豚鼠肝纤维化模型。体重监测是一种无创、简便、安全、有效的监测手段。
【关键词】肝纤维化;硫代乙酰胺;豚鼠
[Abstract] Objective To observe guinea pig’s hepatic and systemic responses to thioacetamide (TAA) during induction of hepatic fibrosis were monitored by weekly-weight changes,to explore the feasibility of inducing hepatic fibrosis model in guinea pigs.Methods Fifty healthy male guinea pigs were divided
randomly into three groups:control group(n=10); experimental group(n=40):the six-weeks group(n=20) and the nine-weeks group(n=20) received continuous administration of 0.03% (w/v) TAA+ 0.75% Vit-C in the drinking water.Control group (n=10) received the same concentration of 0.75% Vit-C in the drinking water.The body weights were measured weekly once at same time.Sections of liver about 5 μm thickness were stained with HE and Masson trichrome and Gomori staining method.Fibrosis was classified as:S0，S1，S2，S3，S4.Statistics of all individuals in each group in the degree of hepatic fibrosis were done.Results After in-taking TAA,there was non-significant difference between experimental groups weekly,P> individual’s body-weight has significant difference in experimental groups.S0:control group were 10 cases;S1:TAA six-weeks group 4 cases;S2:TAA six-weeks group 14 cases,TAA nine-weeks group 5 cases;S3:TAA six-weeks group 1 cases,TAA nine-weeks group 9 cases;S4:TAA nine-weeks group 2 cases.Conclusion This experiment showed that thioacetamide can induce hepatic fibrosis model in guinea pigs; Weight monitoring is a non-invasive,simple,safe and effective means of monitoring.
[Key words] hepatic fibrosis;thioacetamide;guinea pigs
本实验拟以硫代乙酰胺(TAA)诱导豚鼠肝纤维化，通过体重变
化监测结合肝脏病理的改变观察此模型的动态变化，初步分析豚鼠肝纤维化诱导过程中体重变化监测的作用，初步探索建立豚鼠肝纤维化模型的可行性、稳定性，寻找简便、有效、成模过程干扰少的监测手段。
1 材料与方法
1.1 实验分组与饲养硫代乙酰胺(thioacetamide,TAA)分析纯(沈阳市试剂五厂，批号595181)。取体重在250～300 g(约3～4周龄)健康雄性豚鼠50只，随机分成两组：对照组10只;实验组40只(其中按TAA持续作用时间分为：TAA六周组20只，TAA九周组20只)。5只/笼，分笼饲养。室温控制在22 ℃左右，12 h明、12 h暗照明。对照组、实验组均予豚鼠基础饲料，不限量供应。对照组不限量供应750 mg/L Vit C[1]饮用水;实验组予含浓度为0.03%TAA+750 mg/L Vit C饮用水诱导并不限量供应，各组饮用水每天配制更换。对照组、实验组均适应性饲养1周。
1.2 肝纤维化模型的制作 1周后实验组始予含浓度为0.03% TAA+750 mg/L Vit C饮用水，不限量供应，配制后饮用水pH值应为6.7～7.2，保证TAA的化学稳定性。
1.3 体重监测按每周同一天同一时段同一体重计测体重。
1.4 取材方法及处理饲养第七周末、第十周末用同法处理TAA六周组、TAA九周组与对照组，利用乙醚吸入麻醉后，剖腹后完整取出肝脏及胆囊，放血处死。离体肝组织取自肝右外侧叶1.5 cm×1.5 cm×0.3 cm大小固定在10%甲醛固定液中，用于常规HE染色、Masson
银屑病药效学动物模型及其在中药新药研究中应用的思考
006111 7 栏目中药药物评价>>非临床安全性和有效性评价 标题银屑病药效学动物模型及其在中药新药研究中应用的思考 作者韩玲 部门 正文内容 审评一部韩玲 摘要：本文综述了银屑病药效学动物模型的进展，对治疗银屑病中药新药 药效学研究方面存在的问题进行了分析，提出了应结合银屑病发病机制的 研究进展完善药效学方法学研究的建议。 银屑病是一种慢性复发性皮肤病，其发病机制复杂，至今尚未明了。可能是一种具有基因遗传特性的疾病，也与感染、内分泌机能障碍、免疫功 能紊乱等有关。中医学认为以风湿毒邪内侵为标，血虚、血燥为根源，血 热、血虚、血瘀是本病的基本病机，故清热解毒、凉血、活血化瘀、祛风 除湿成为治疗本病的基本法。 银屑病的组织病理学主要表现为角质形成细胞过度增生、炎症细胞聚集和真皮乳头部血管增生扩张三大特征，从而出现角化过度、角化不全、颗 粒层消失、棘细胞层增厚等。尽管许多不同的动物模型能复制银屑病的某 个方面的病理特征，并能解释部分病因，但长期以来仍缺乏一种能够研究 所有有关的潜在因素的动物模型。即-缺乏理想的动物模型。 一、银屑病药效学动物模型 银屑病动物模型是根据银屑病的特征，人为建立的一种与之相似的模型。 有人总结了银屑病动物模型的建立过程，包括以下4个不断完善的阶段： 1．诱发性动物模型 该模型是通过工方法在动物，如豚鼠、大鼠等皮肤上诱发银屑病样增生。
其方法包括紫外线照射、化学刺激剂外涂或药物外涂、缺乏必须脂肪酸的饲料喂养等。这些方法均为过度增殖模型，可引起表皮增生加快。但这些方法仅是针对表皮损伤的一种迟发反应，持续时间较短。 如缺乏必须脂肪酸饲料喂养的大鼠模型，因缺乏必须脂肪酸，故可使大鼠皮肤逐渐出现角化过度、棘层肥厚、基底细胞有丝分裂加快，DNA合成增加等变化，表皮细胞呈慢性增生状态，与药物诱发的急性表皮增生相比，其与银屑病更为相似。 如心得安诱导银屑病动物模型，是利用心得安特有的药理作用，即心得安可阻断角阮细胞的β-肾上腺能受体而降低了细胞内cAMP水平所致。应用后可出现动物表皮角化过度、角化不全和棘层肥厚等类似银屑病的组织病理改变，其皮损并非是刺激性皮炎。黄畋[1]和Gaylarde[2]等分别用心得安成功地在豚鼠背部和耳部皮肤上制备了银屑病样皮肤模型，并发现药物可抑制其所致的表皮异常角化与增殖、角化不全等。 已有研究[3-4]发现IL-20是与银屑病密切相关的细胞因子，在体外可明显促进角质形成细胞增殖；IL-20的转基因鼠可出现皮损，其组织病理学改变与人类银屑病有相似之处；此外，IL-20受体在银屑病皮损处有高表达。有人在心得安造模的基础上，利用原位杂交等方法检测了动物皮损中IL-20 及角蛋白的K14,K16，K17表达水平的变化情况，发现正常皮肤IL-20的表达仅限于基底层，且为低表达，但模型动物皮损中基底层及棘层均有高表达，且显著高于正常组。应用IL-20反义寡核苷酸外涂皮肤后，可使其明显好转。也观察到皮损中角蛋白K14,K16表达水平明显增高。提示心得安所致的豚鼠银屑病样动物模型不仅在组织病理学，而且在分子水平上与人类银屑病皮损一致。从而在分子水平上证实了此动物模型的可行性。 上述这些方法的优点是可在短时间内复制出某些方面与银屑病相似的动物模型，方法简便、易行、重复性较好，可用于表皮增殖动力学、药物筛选等研究，但这些模型只是模拟了银屑病中的部分组织病理特征，在许多方面与诱发或自然产生的疾病毕竟存在差异。 2．裸鼠-皮损移植模型 该模型是将银屑病人皮损组织移植到裸鼠背部。其具体方法是，选择经组织学证实，2周内未经任何治疗的寻常型银屑病患者的典型皮损，麻醉后取全层皮肤，裸鼠背部麻醉后切除部分圆形皮肤至肌肉筋膜，将皮损间段缝合到移植点。因裸鼠是先天性无胸腺小鼠，其免疫缺陷，在一定情况
白疕软膏对豚鼠银屑病样模型影响的研究
白疕软膏对豚鼠银屑病样模型影响的研究 杨川 1 陈明岭 1 陶春蓉 2 (1.成都中医药大学，四川成都610075;2.成都市第二人民医院，四川成都610061) 摘 要:目的:探讨白疕软膏治疗银屑病的药效及作用机理。方法:采用5%心得安乳剂建立豚鼠银 屑病样模型，观察白疕软膏对豚鼠银屑病样模型组织病理改变的影响;采用放射免疫法检测豚鼠银屑病样 模型皮损中细胞因子IL-2、IL-6、IL-8的水平，观察白疕软膏对豚鼠银屑病样模型皮损中细胞因子的影响。结果:白疕软膏对豚鼠银屑病样模型组织病理改变有治疗作用。结论:白疕软膏对豚鼠银屑病样模型的治疗作用机理可能是通过对角质形成细胞增殖的抑制及对细胞因子的调节而发挥作用。白疕软膏是治疗 银屑病的有效外用制剂，值得进一步研究和推广。 关键词:银屑病;白疕软膏;豚鼠银屑病样模型;角质形成细胞;细胞因子 中图分类号:R285.5;R758.63文献标识码:A 文章编号:1004- 0668(2011)01-0055-03基金项目:成都中医药大学科技发展基金资助项目 作者简介:杨川，男，1972年生，讲师，研究方向:中医外科学基础与临床;通讯作者:陈明岭，男，1967年生，教授， 研究方向:中医药防治皮肤病基础与临床。 Effect of Baibi Ointment to Psoriasis Guinea Pig Model YANG Chuan ，CHEN Ming-ling ，TAO Chun-rong (Chengdu University of Traditional Chinese Medicine ，Chengdu ，610075) ［Abstract ］Objective :The aim of this study is to investigate the effects and mechanisms of Baibi ointment for treating Psoriasis.Methods :5%propranolol emulsion was applied externally on the back of a guinea pig＇s ear to produce the poriasis-like der-matitis model to observe the effects of Baibi ointment on the histopathological changes of the model.Radioimmunoassay was used to ob-serve the levels of cytokines like IL-2、IL-6and IL-8，and the effects of the ointment to the cytokines.Results :Baibi ointment has therapeutical effects on the histopathological changes of the models of poriasis-like dermatitis in guinea pigs.The mechanism is proba-bly by inhibiting the multiplication of the Malpighian cell and regulating the cytokines.Thus ，Baibi ointment is an effective external preparation to treat psoriasis ，and is worthy of deeper reasearch and generalization. ［Key words ］:Psoriasis ;Baibi ointment ;psoriasis-like dermatitis models of guinea pig ;malpighian cell ;cytokine 银屑病是一种临床常见的病因不明的有特征性 红斑、丘疹及鳞屑的慢性复发性炎症性皮肤病。在其治疗过程中，外治占有相当重要的地位。白疕软膏是我院皮肤科治疗银屑病的外用院内中药制剂，疗效显著、剌激性轻微、可长期使用。本课题研究的目的拟通过豚鼠银屑病样模型及细胞培养，探讨白疕软膏治疗银屑病的疗效及作用机理。1材料与方法 1.1动物 健康成年豚鼠40只，体重350 400g ，雌雄不限，雌雄分养，由成都中医药大学实验动物中心提供。豚鼠标准颗粒饲料喂养，并每日供给足量新鲜蔬菜。40只豚鼠随机分成4组，每组10只。1组空白对照组，2组模型组，3组白疕软膏组，4组喜树碱软膏组。1.2 主要试剂及器材
二十种常见实验动物模型
二十种常见实验动物模型 一、缺铁性贫血动物模型 缺铁性贫血（iron deficiency anemia，IDA）是体内用来合成血红蛋白（HGB）的贮存铁缺乏，HGB合成减少而导致的小细胞低色素性贫血，主要发生于以下情况：（1）铁需求增加而摄入不足，见于饮食中缺铁的婴幼儿、青少年、孕妇和哺乳期妇女。（2）铁吸收不良，见于胃酸缺乏、小肠粘膜病变、肠道功能紊乱、胃空肠吻合术后以及服用抗酸和H2受体及抗剂等药物等情况。（3）铁丢失过多，见于反复多次小量失血，如钩虫病、月经量过多等。 IDA是一种多发性疾病，据报道，在多数发展中国家，约2/3的儿童和育龄妇女缺铁，其中1/3患IDA，因此，研究IDA的预防和治疗具有重要的意义。在这些研究中，缺铁性贫血的动物模型（Animal model of IDA），又是实施研究的基础工具。常见的IDA动物模型的构建技术如下： 实验动物：一般选用SD大鼠，4周龄，雌雄不拘，体重65g左右，HGB≥130g/L。 建模方法：低铁饲料加多次少量放血法。低铁饲料一般参照AOAC 配方配制，采用EDTA浸泡处理以去除饲料中的铁，饲料中的含铁量是诱导SD大鼠形成缺铁性贫血模型的关键，现有研究表明，饲喂含铁量<15.63mg/Kg的饲料35天，SD大鼠出现典型IDA表现，而饲喂
含铁40.30mg/Kg的饲料SD大鼠出现缺铁，但并不表现贫血症状。建模时一般采用去离子水作为动物饮水，以排除饮水中铁离子的影响。少量多次放血主要用于模拟反复多次小量失血导致的铁丢失，还可以加速贫血的形成。放血一般在低铁饲料饲喂2周后进行，常用尾静脉放血法，1～1.5ml/次，2次/周。 模型指标：（1）HGB≤100g/L；（2）血象：红细胞体积较正常红细胞偏小，大小不一，中心淡染区扩大，MCV减小、MCHC降低；（3）血清铁（SI）降低，常小于10μmol/L，血清总铁结合力（TIBC）增高，常大于60μmol/L。 需要指出的是，以上模型不能用于铁吸收不良相关IDA的防治研究。根据具体的研究需要，也可以适当调整建模方法。 二、白血病动物模型 用免疫耐受性强的人类胎儿骨片植入重症联合免疫缺陷病(SCID)小鼠皮下，出于人类造血细胞与造血微环境均植入小鼠，建立具有人类造血功能的SCID小鼠模型称为SCID－hu小鼠。再将髓系白血病患者的骨髓细胞植入SCID－hu小鼠皮下的人类胎儿骨片内，植入的髓系白血病细胞选择性生长在SCID－hu小鼠体内的人类造血微环境中，即为人类髓系白血病的小鼠模型。SCID小鼠是由于其scid所致。T、B淋巴细胞功能联合缺陷，这种小鼠能接受人类器官移植物。 造模方法：
氧化苦参碱对银屑病样小鼠模型氧化应激的拮抗作用
氧化苦参碱对银屑病样小鼠模型氧化应 激的拮抗作用 (作者：___________ 单位： __________ 邮编：____________) 【摘要】目的研究氧化苦参碱对银屑病样小鼠模型氧化应激的拮抗作用，探讨其防治银屑病的机制。方法采用注射雌激素刺 激小鼠阴道上皮组织增生的方法复制银屑病小鼠动物模型，同时给予 不同剂量的氧化苦参碱干预，实验10d后，取小鼠血清测定超氧化物歧化酶(SOD)总抗氧化能力(T-AOC)、丙二醛(MDA)谷光甘肽(GSH) 及一氧化氮(NO)水平的含量，并观察氧化苦参碱对小鼠阴道上皮细胞有丝分裂的影响。结果氧化苦参碱80、40和20mg? kg-1均可抑制小鼠阴道上皮的有丝分裂(P0.01);氧化苦参碱80mg - kg-1可升高雌激素周期小鼠血清SOD和T-AOC的含量(P0.05，P0.01)，降低MDA GSH和NC含量(P0.01);氧化苦参碱40mg?kg-1可降低雌激素周期小鼠血清MDA和NC 含量(P0.05，P0.01)。结论氧化苦参碱对实验性银屑病具有保护作用，该作用可能与其抑制表皮细胞增殖并降低血清 MDA GSH及NO含量，升高SOD和T-AOC的含量有关。 【关键词】氧化苦参碱；银屑病;有丝分裂指数；超氧化物歧化酶；丙
二醛;谷光甘肽 氧化苦参碱（Oxymatrine , OMT是苦豆子生物碱的一种，具有抗炎、抗增殖、改善机体免疫功能等作用［1］。银屑病（psoriasis）是一种以皮肤组织为主要病理改变的慢性炎症性皮肤病。近年来研究表明，银 屑病患者体内释放大量的超氧阴离子自由基，对生物膜的结构造成广 泛损伤，引起皮肤炎症的发生［2-3］。作者通过给小鼠注射己烯雌酚的方法复制银屑病样小鼠模型［4］，观察氧化苦参碱对银屑病小鼠血清超氧化物歧化酶（SOD）总抗氧化能力（T-AOC）、丙二醛（MDA）谷光甘肽（GSH）及一氧化氮（NO）水平及阴道上皮组织细胞有丝分裂的影响，探讨了其防治银屑病的机制。 1材料与方法 1.1实验材料 1.1.1实验动物昆明种雌性小鼠，体重18?22g，宁夏医科大 学实验动物中心提供，合格证SYXK （宁2005- 0001）。 1.1.2药品氧化苦参碱（宁夏制药厂，批号64041201）;甲氨蝶呤（Methotrexate ，MTX浙江海正药业股份有限公司，批号080903A）; 己烯雌酚（Diethylstilbestrol ，DES上海通用药业股份有限公司，批号090203）;秋水仙碱（Colchicin ，CLC昆明制药厂，批号841201）。 1.1.3 试剂和主要仪器SOD MDA GSH T-AOC和NO测试盒（南 京建成生物工程研究所，批号20091115）;752N紫外可见分光光度计（上海精密科学仪器有限公司）。
大鼠肝纤维化模型的制备
中文摘要 目的本文通过对SD大鼠腹腔注射四氯化碳以诱导大鼠肝纤维化动物模型。 方法取15只SD大鼠，180—220g，分为A组10只，B组5只，A组为模型组：40%CCL4橄榄油混合液按0.12ml/100g腹腔注射，一周两次，共八周。B组为对照组：纯橄榄油按0.12ml/100g腹腔注射，一周两次，共八周，八周后，禁食12小时处死全部大鼠，解剖取肝组织。病理学检测：HE染色，MASSON染色,PAS染色。基因学检测：1.3.4型胶原蛋白 结果八周试验期间B组大鼠全部存活，肝组织标本结构清晰，无异常情况；A组大鼠出现明显的病态，肝组织标本均已达到肝纤维化S3以上，多数标本可见小叶被纤维结构分割包围，假小叶形成，干细胞可见脂肪变性； 结论该方法肝损伤明显，死亡率低，周期短，能够成功作为慢性肝损伤，肝纤维化的模型。 关键词肝纤维化，四氯化碳，动物模型 Abstract Objective: Established animal model of hepatic fibrosis in rats induced by carbon tetrachloride. Methods: Take 15 SD rats,180-220g, divided into 10 group A, group B 5 只, A group of model group: 40% CCL4 0.12ml/100g by abdominal injection of a mixture of olive oil, twice a week, a total of eight weeks. Group B was the control group: pure olive oil press 0.12ml/100g abdominal injection twice a week, a total of eight weeks, eight weeks later, all rats were fasted for 12 hours were sacrificed, dissected liver tissue. Pathology: HE staining, MASSON staining, PAS staining. Genetics testing: 1.3.4 collagen Results: During the eight-week test group B rats survived, liver tissue specimens clear structure, no exceptions; significant morbidity A rat liver tissue fibrosis S3 have reached above, the majority of samples are split fiber structure visible lobular surrounded pseudo lobule formation, stem cell degeneration visible fat. Conclusion: This method obviously liver injury mortality, the period is short, to be successful as chronic liver damage, liver fibrosis model. Key words: Fibrosis, carbon tetrachloride, animal model 前言
FibroTouch无创肝纤维化诊断系统
FibroTouch无创肝纤维化诊断系统 FibroTouch 是全球首台影像引导的肝纤维化和脂肪肝程度的集成检测系统，提供了对肝脏组织形态、肝脏纤维化程度和肝脏脂肪变性的一体化检测和全方位评估方案。 FibroTouch是一种完全无创的肝脏健康检测设备，在一次检测中能够同时为用户提供： 肝纤维化度：肝脏纤维化程度的定量结果； 脂肪度：肝脏脂肪变性程度的定量结果。 肝脏组织形态：超声影像检测的肝脏形态 【F ibroTouch在临床上有哪些用途】 FibroTouch可以实现对如下病症的诊断、筛查、跟踪、监测等 1.慢性乙型肝炎 2.慢性丙型肝炎 3.非酒精性脂肪肝 4.寄生虫感染所导致的肝病 5.胆道疾病 6.长期饮酒引发的酒精性肝病 7.长期药物治疗所造成的肝损伤 8.长期抽烟引发的原发性胆汁性肝硬化 FibroTouch可以应用于如下领域： 1.用于进行普通人群的肝脏情况状况筛查 2.用于进行慢性肝病患者的肝纤维化程度快速测量 3.用于对慢性肝病治疗效果的全过程跟踪 4.用于各类肝硬化并发症的预测 5.用于评估长期药物治疗所造成的肝损伤
6.用于评估各类代谢综合症（糖尿病、高血压、高血脂）所引起的肝脏损伤 FibroTouch为各类肝脏健康问题的早诊断、早预防、早治疗、早康复提供了有力的支持。 【F ibroTouch与传统方法相比，有哪些不同】 传统临床检测肝纤维化的金标准是肝穿刺活检，与之相比较， FibroTouch带来肝纤维化检测的技术革新： 无创无痛：无需采血、无需肝穿，快速安全，可多次重复；而肝穿刺活检会给病人带来巨大的痛苦，同时容易引发出血等并发症。 准确直观：通过量化的数字直接反应肝脏的纤维化程度，采样的肝脏组织体积比肝穿样本大 100 倍，能更全面地反映肝脏健康程度； 低频恒定：采用第三代瞬时弹性成像技术，不同时间的测定结果具有可比性，便于慢性肝病的全过程跟踪监测； 快速简便：全过程只需要约两分钟，检查结果立即呈现； 适用范围广：可用于所有的慢性肝病的病情监测、诊断、筛查 传统的肝功化验转氨酶，无法提供肝纤维化的信息。转氨酶不能反应肝纤维化的指标。 与现有的 B 超检测相比， B 超仅能够提供肝脏的组织形态学信息，而无法提供关于肝脏硬度的信息。因而，只有当肝硬化发展到晚期，肝脏的组织形态已经发生变化时， B 超才能够检测得到。而此时的肝硬化已经无法逆转。 同样，现有的检测脂肪肝的技术，也仅能提供肝脏脂肪化的定性结果，如轻度脂肪肝、重度脂肪肝，而无法提供直观量化的结果，来反应患者脂肪肝的程度。FibroTouch则可以给出肝脏脂肪化程度的定量结果，从而使患者能够更直观地评 估自己的脂肪肝病变程度，从而使得对其治疗效果的跟踪成为可能。
肝纤维化动物模型的研究概况
肝纤维化动物模型的研究概况 摘要：建立一个与人类肝纤维化的发生机制相似的肝纤维化的动物模型对于肝病的预防与治疗有十分重要的意义；总结阐述目前常用的肝纤维化模型的造模方法，并比较各种方法的优缺点，以期对实践产生指导意义。 关键词：肝纤维化；动物模型 肝纤维化是细胞外基质在肝内过度沉积的病理改变，也是许多肝病的中间环节。建立一个与人类肝纤维化的发生机制相似的肝纤维化的动物模型一直是科学研究的难点。选择适当的肝纤维化动物模型是深入研究肝纤维化发病机制的重要基础，也是筛选防治肝纤维化药物的有效手段。近年来，肝纤维化动物模型的研究也取得了可喜的进展。现将目前常用的造模方法及其原理、特点综述如下。 1 中毒性肝损伤模型 1.1 四氯化碳法 四氯化碳（carbon tetochloride，CCL4）是最广泛使用的化学肝毒物。CCL4法造模的途径包括口服、腹腔注射和皮下注射，造模时间由途径和剂量决定，一般为8周至4月不等［1］。如，40％CCL4油溶液，按2mL/kg体重的剂量，予Wistar大鼠腹腔注射，每周2次，共8周，可成功复制肝纤维化模型［2］。 CCL4是氯化烷烃类化合物，可选择性损害肝、肾功能。CCL4进入体内后可直接进入肝细胞，溶解肝细胞膜上的脂质成分；也可以通过影响肝细胞细胞色素P450依赖性混合功能氧化酶的代谢，生成活泼的三氯甲基自由基和氯甲基自由基，启动脂质过氧化作用，致肝细胞损伤，变性，坏死，长期反复刺激可诱导肝纤维化形成。 CCL4致肝纤维化动物模型造模途径多样，简便，费用低廉，病理特征稳定可靠，复制时间短。CCL4诱导的肝纤维化动物模型在形态学、病理生理学的某方面与人肝纤维化相似［3］。该模型的原始启动机制显然是毒性化学物质对肝脏的损伤作用，比较适合药物性肝炎方面的研究。但是能否准确反映病原微生物感染人体后导致肝纤维化的机理，尚待进一步探讨。其缺点在于CCL4肝毒性作用剧烈、动物死亡率高，不适合于周期较长的实验研究。 1.2 二甲基亚硝胺法 1％二甲基亚硝胺（DMN）生理盐水稀释液，按10mL/kg体重的剂量腹腔注射，第1周连续3次，第2、3、4周各1次，6、7周各连续2次，8周可诱导大鼠肝纤维化动物模型［4］。
咪喹莫特诱导的银屑病样小鼠模型的组织学及免疫学特征初步探究
【引文格式】黄钟洲，陈小彦，徐敏，等．咪喹莫特诱导的银屑病样小鼠模型的组织学及免疫学特征初步探究［J］．皮肤性病诊疗学杂志，2019，26（2）：61－66．DOI：10．3969/j．issn．1674－8468．2019．02．001． 通信作者：郭庆，E-mail：guoqingzsy@163．com ·论著· 咪喹莫特诱导的银屑病样小鼠模型的组织学及免疫学特征初步探究 黄钟洲，陈小彦，徐敏，艾雪忱，唐增奇，郭庆 （中山大学孙逸仙纪念医院皮肤科，广东广州510120） ［摘要］目的：研究咪喹莫特诱导的银屑病样小鼠模型的皮肤组织学及免疫学特征。方法：将20只BALB/c小鼠随机分为造模组和对照组，每组10只。所有小鼠背部剃毛后，造模组小鼠于背部皮肤及单侧耳部每日涂抹共计62.5mg的5%咪喹莫特乳膏1次，连续7d，空白组小鼠涂抹等量凡士林。每日记录小鼠PASI评分及耳部厚度，并于末次涂药24h后处死，取背部皮肤进行多聚甲醛固定，行HE 染色及Ki-67免疫组化分析。取脾脏称重，以流式细胞术检测脾脏中的Th细胞亚群。结果：造模组小鼠于第二天逐渐出现红斑、鳞屑、皮肤增厚及耳部肿胀，其PASI评分随造模时间延长而增加。造模组小鼠皮损出现银屑病样病理改变，其表皮厚度明显增加（t=15.12，P＜0.001），且Ki-67阳性率明显上升，每个高倍镜视野下阳性细胞数目明显增加（t=10.50，P＜0．001）。造模组小鼠脾脏重量和细胞计数较对照组明显增加，且Th1、Th17细胞亚群的比例及绝对计数较对照组明显上升（P值均＜0.05），Th2细胞比例及计数无明显变化（P值均＞0．05）。结论：咪喹莫特诱导的银屑病样小鼠模型可较好地模拟寻常型银屑病的临床、组织病理和免疫学特征，是一种有效的银屑病模型。 ［关键词］银屑病动物模型；咪喹莫特；Ki-67；Th1细胞；Th17细胞 ［中图分类号］Ｒ758.63［文献标识码］A DOI：10．3969/j．issn．1674－8468．2019．02．001 Histopathologic and immunological features of Imiquimod induced psoriatic mouse model HUANG Zhong-zhou，CHEN Xiao-yan，XU Min，AI Xue-chen，TANG Zeng-qi，GUO Qing （Department of Dermatology，Sun Yat-sen Memorial Hospital，Sun Yat-sen University，Guangzhou 510120，China） Corresponding author：GUO Qing，E-mail：guoqingzsy@163．com ［Abstract］Objective：To investigate the dermatopathologic and immunological features of Imi-quimod induced psoriatic mice model．Methods：Twenty BALB/c mice were grouped in IMQ-mod-el group and control group randomly，each had10mice．The IMQ-model mice received a daily top-ical dose of62.5mg of IMQ cream（5%）on the shaved back and left ear for7consecutive days．The control group mice were treated similarly with vaseline．The Psoriasis Area and Severity Index score and thickness of left ear were measured daily．The dorsal skin samples were evaluated using H＆E section and immunohistochemistry test of Ki-67．The spleens were weighed and the spleno-cyte were counted．Flow cytometry was used for detection of T-helper-cell subsets．Ｒesults：Ery-thema，scaling，skin thickening and ear swelling appeared on day2and deteriorated gradually．The cumulative score kept increasing by day7．Histologically，the skin of IMQ-model mice showed 16 皮肤性病诊疗学杂志2019年4月第26卷第2期
常用疾病动物模型
常用疾病动物模型 上海丰核可以为广大客户提供各种疾病动物模型定制服务，同时提供相关疾病模型的药物敏感性实验分析服务。 客户只需要提供疾病模型的用途及建模方法的选择，我们会根据客户的具体要求量身定做各种动物模型服务。
小鼠或裸 鼠 加贴近实际（八）心血管疾病模型 1. 动脉粥样硬化（高脂高胆固醇+维生素D喂养）兔高脂、高胆固醇饲喂兔造模，成 膜后血脂变化显著，为伴高血脂 症的动脉粥样硬化 4月血管组织病 理切片染色 2. 主动脉粥样硬化（高脂高胆固醇+主动脉球囊损伤）兔此模型用大球囊损伤加高脂饲 养方法成功建立兔主动脉粥样 硬化狭窄的动物模型，为相关基 础研究提供可靠模型。 2月动物实验模型病理切片展示 一、CCl4诱导的肝脏纤维化 简介：肝纤维化是肝细胞坏死或损伤后常见的反应，是诸多慢性肝脏疾病发展至肝硬化过程中的一个中间环节。肝纤维化的形成与坏死或炎症细胞释放的多种细胞因子或脂质过氧化产物密切相关。CCl4为一种选择性肝毒性药物，其进入机体后在肝内活化成自由基，如三氯甲基自由基，后者可直接损伤质膜，启动脂质过氧化作用，破坏肝细胞的模型结构等，造成肝细胞变性坏死和肝纤维化的形成。通过CCl4复制肝纤维化动物模型通常以小鼠或大鼠为对象，染毒途径主要为灌胃、腹腔注射或皮下注射。 动物模型图. 经过3个月的CCl4注射造模，小鼠的肝脏在中央静脉区形成了比较明显的肝纤维化，中央静脉之间形成了纤维桥接。（Masson染色） 二、CXCL14诱导的急性肝损伤动物模型
简述：CCl4是最经典的药物性肝损伤造模毒素之一，其在肝内主要被微粒体细胞色素P450氧化酶代谢，产生三氯甲烷自由基和三氯甲基过氧自由基，从而破坏细胞膜结构和功能的完整性，引起肝细胞膜的通透性增加，可溶性酶的大量渗出，最终导致肝细胞死亡，并引发肝脏衰竭。根据CCl4代谢和肝毒性机制可复制不同的肝损伤模型，其中给药剂量和给药方法是其技术关键。对于复制急性肝衰竭动物模型，往往采用大剂量一次性灌胃或腹腔注射给药。 图. (A) CCl4注射后0.5 d的HE染色表明CXCL14过表达增加了肝脏组织的嗜酸性变性面积(在照片中用虚线标记)(p < 0.05)。 (B) 1.5天组织样本的HE染色表明CXCL14过表达造成了比对照组更大面积的细胞坏死(p < 0.05)。 (C)同时还造成了中央静脉周围肝细胞中明显的脂肪滴积累。图中P和C分别表示动物模型的门静脉和中央静脉。KU指凯氏活性单位。 细胞凋亡检测结果 TUNEL标记没有显示CXCL14免疫中和小鼠和对照小鼠在凋亡细胞数量上的差异。C0, C1和C2分别是对照组0 d，1 d,和2 d样本，T1
雷公藤内酯醇改善IMQ诱导的银屑病样小鼠模型症状的初步
勘误 DOI:10.13232/https://www.360docs.net/doc/8612087071.html,ki.jnju.2018.05.015 雷公藤内酯醇改善IMQ诱导的银屑病样小鼠模型症状的初步探究 南京大学学报，2018, 54(5), 992-1000 The symptomatic improvement of IMQ-induced psoriasiform mouse model after the treatment with triptolide Journal of Nanjing University, 2018, 54(5), 992-1000 图5 Triptolide抑制TNF-α和IL-17A的表达 A: IHC染色检测TNF- α和IL-17A表达水平（200X）。B: RT-PCR检测TNF- α的表达水平。C: RT-PCR检测IL-17A的表达水平( ***P < 0.001, **P < 0.01, *P < 0.05,mean ± SEM; n = 5) Fig.5 Triptolide inhibit the expression level of TNF- α and IL-17A A: IHC stain detect the expression level of TNF- α and IL-17A(200X). B: RT-PCR detect the mRNA expression level of TNF-α. C: RT-PCR detect the mRNA expression level of IL-17A ( ***P < 0.001, **P < 0.01, *P < 0.05,mean ± SEM; n = 5)
银屑病动物模型_袁媛
2008年2月 第16卷 第1期 中国实验动物学报 ACT A LABORAT ORIUM ANI M A LIS SCIE NTIA SINICA February,2008 V ol.16 N o.1 研究进展 银屑病动物模型 袁媛1,朱健平1,陈系古2 (11广东医学院药理学教研室,湛江 524023;21中山大学实验动物中心,广州 510080) 【摘要】 银屑病是一种长期困扰人类的疾病,具有病程长、易复发、难治愈的特点,其病因及发病机制至今尚未完全清楚。银屑病动物模型的建立对揭示该病遗传背景、发病机制及开发新药等都有极大的促进作用。因此,国内外学者在该领域进行了大量的研究。本文就银屑病动物模型的研究状况作一综述。 【关键词】 银屑病;动物模型 【中图分类号】R394111 【文献标识码】A 【文章编号】100524847(2008)0120070204 Animal Models of Psoriasis Y UAN Y uan1,ZH U Jian2ping1,CHE N X i2gu2 (11Department of Pharmacology,G uangdong Medical C ollege,Zhanjiang524023,China; 21Experimental Animal Center of Sun Y an2Sen University,G uangzhou510080) 【Abstract】 Ps oriasis is a comm on chronic relapsing disease ass ociated with profound im paired quality of life.Until now, the fundamental pathophysiology of the disease still has not been fully elucidated.The establishment of appropriate animal m odels of ps oriasis will be helpful to reveal the genetic background and pathogenesis of this disease,and can prom ote the development of new drugs.Recently,many scientists have been w orking a lot on researches in the field.This review summarized the recent findings about animal m odels of ps oriasis. 【K ey w ords】 Ps oriasis;Animal m odels 银屑病俗称“牛皮癣”,是一种多诱因导致的皮肤慢性炎性病变,临床症状以皮疹上覆盖银白色鳞屑、剥开后有薄膜现象和点状出血为主要特征,部分患者伴有关节病变;病理学改变为皮肤角质细胞过度增生及分化不全、炎症细胞浸润、真皮血管扩张等[1]。银屑病属于高发病种,据不完全统计,全球范围内该病患者数量近2000万,国内已逾300万,且发病率近年来仍呈继续升高趋势[2,3]。银屑病治愈率低、易反复发作,严重影响了患者的生活质量[4]。迄今为止,银屑病的病因尚不完全清楚,根治性治疗仍是一个难题,这除了与其发病机制复杂有关外,理想的动物模型的缺乏也是制约对该病深入研究的一个重要原因。银屑病为人类特有性疾病,动物自然发生该病的病例罕见,因此,银屑病动物模型大多依赖人工构建。国内外学者在该领域做了大量工作,现就其研究状况做一综述。 1 生物医学型动物模型 利用部分动物的局部组织在特定情况下自行产生的类似银屑病的组织学变化作为动物模型,称为生物医学型动物模型。如鼠尾鳞片表皮天然缺乏颗粒层而呈现出角化不全的特征,可模拟银屑病角化不全的特点,Jarrett[5]和S pearman[6]最早利用此模型评价了药物促进颗粒层形成的作用,并认为药物如能促进鼠尾颗粒层形成,则可能具有抗银屑病作用。小鼠阴道上皮细胞可因雌激素刺激而发生周期性增殖活跃、上皮细胞转换加快等变化,若药物能抑制细胞过度增生,则认为该受试物对有丝分裂有抑制作用,可用于银屑病的治疗。Van[7]最早利用该模型评价了药物的抑制作用。 此类模型可部分模拟银屑病表皮动力学紊乱的特点,且经济易得,故作为筛选抗银屑病药物的常用模型沿用至今。 2 诱发性动物模型 该模型是通过人工方法在动物,如豚鼠、大鼠、裸鼠等皮肤上诱发银屑病样增生来建立。使用的方法包括紫外线照射、化学刺激剂或药物外涂等。Du[8]用紫外照射裸鼠后发现其表皮细胞更新加快,角化过度,与银屑病皮肤外观相似;G aylard[9]将普萘
《肝纤维化诊断及治疗共识(2019年)》要点
《肝纤维化诊断及治疗共识（2019年）》要点 肝纤维化或肝硬化在国际疾病分类-11（ICD-11）为DB9.30。肝纤维化是指肝细胞外基质（即胶原、糖蛋白和蛋白多糖等）的弥漫性过度沉积与异常分布，是肝脏对慢性损伤的病理性修复反应，是各种慢性肝病向肝硬化发展过程中的关键步骤和影响慢性肝病预后的重要环节。肝纤维化进一步发展可引起肝小叶结构紊乱，肝细胞结节性再生，形成假小叶结构即肝硬化，临床上可见肝功能减退和门静脉高压症表现。肝纤维化在组织学上是可逆的，而肝硬化逆转较为困难，但仍有少部分可逆转。 目前，肝活组织检查（以下简称肝活检）仍然是肝纤维化诊断的“金标准”。尽管一些血清学诊断模型和瞬时弹性成像等无创性检测方法对肝纤维化有较高的诊断价值，但仍有待进一步完善。肝纤维化治疗方面，尚未有公认特异有效的化学药物和生物制剂。 1 肝纤维化诊断和评估 1.1 肝活检组织病理 目前，肝活检组织病理学检查仍是肝纤维化诊断的“金标准”。 【推荐意见1】：肝组织病理学检查是肝纤维化诊断的金标准（A1）。
肝组织标本长度须1.0cm以上（1.5～2.5cm），至少在镜下包括６个以上汇管区（B1）。 【推荐意见2】：临床上肝组织炎症和纤维化病理学诊断采用Scheuer 评分系统，药物治疗前后肝纤维化疗效评估应采用Ishak评分系统（B1）。必要时应用图像分析对肝组织进行纤维化定量评估（B2）。 1.2 肝静脉压力梯度（HVPG） HVPG是肝静脉楔压和肝静脉自由压之间的差值，反映了门静脉与腔静脉之间的压力差；对于窦性原因导致的门静脉高压，HVPG可以间接反映门静脉压力。基于HVPG指导的肝硬化危险分层和个体化治疗是目前该领域的前沿热点。此外，HVPG能够反映肝脏整体结构和功能的改变，避免了肝活检的取样误差，可作为肝活检的有效补充。 【推荐意见３】：HVPG与进展期肝纤维化程度相关，是肝硬化门静脉高压诊断和危险分层的金标准，其标准化检测及无创替代技术在肝硬化治疗目标评估中具有重要价值（B１）。 1.3 血液生物化学指标 目前，尚缺乏血清特异性肝纤维诊断指标。
实验动物心肌肥厚模型
III.实验动物心肌肥厚模型 A、压力超负荷/主动脉缩窄 压力超负荷引起的心脏肥厚常用的手术方法是主动脉缩窄（i.e.缩窄升主动脉）。 小鼠行主动脉缩窄（TAC）可以引起心脏机械性的压力超负荷，最终导致心肌肥厚、心衰（20,84）。TAC通常诱导方法采用在近胸骨端行小切口, 缩窄主动脉的这样的开胸手术。TAC模型虽然不能完全模拟人类的心室重构，但该模型可以用于肥厚发病过程中多种基因学的研究。主动脉缩窄模型能很好的模拟血流动力学超负荷引起左心室肥厚的发生发展。该动物模型在主动脉缩窄造成心肌肥厚几个月后会导致心衰。 B、容量超负荷 在静脉回流适当的情况下，心脏不能排出足够的血液满足全身组织代谢的需要就会引起CHF（充血性心力衰竭）。心内檐沟血或回心血量增加导致瓣膜闭锁不全就会引起心室容量超负荷。在慢性动脉和/或二尖瓣瓣膜回流疾病中的容量超负荷，我们会观察到“舒张期压力-容积曲线”整体右移,说明心脏僵硬度增加，即发生LVH (可见于主动脉瓣狭窄、高血压、肥厚性心肌病)（36）。通常情况下，容量超负荷CHF模型制备方法是腹主动脉-下腔静脉分流术。即于肾动脉上方分离出下腔静脉和腹主动脉，用血管夹在近肾动脉端夹闭主动脉阻断血流；用0.6-mm的针头由主动脉远端刺入，继续进针刺入下腔静脉，使动静脉联合。退针后，缝合血管壁伤口。4-5周后，就能复制出心肌肥厚模型，并具有左心室收缩力增强、舒张末期压力增加的特点（257）。 C、冠状动脉结扎 冠状动脉结扎常用于复制心衰动物模型。冠脉左前降枝（LAD）结扎后会阻断心脏的供养和营养输送，这种情况类似于人类心脏病发作时伴随的症状。血氧和营养供输阻断后，心肌细胞死亡，心脏整体功能受影响，最终导致心功能紊乱。由于这种动物模型非常接近临床心衰疾病的发生发展，研究证明该模型是心衰发病机制研究的重要手段（13）。 D、转基因型心脏肥大模型 几十年以来，一些心脏肥大和心力衰竭的转基因小鼠模型被学者们用于心肌肥厚和心衰这些致命疾病的可能的分子机制研究。受条件限制，在此不能针对于所有模型作一全面的综述，但在此文中，我们介绍一种转基因小鼠模型，该模型能成功模拟心肌肥厚的发生发展以及最终演变为心衰的过程。表1列举的是截止目前，研究学者们发现的较成熟的心肌肥厚/心衰模型。 表1：小鼠心衰模型 转基因小鼠模型代谢转变模型ECM紊乱转基因模型 肌侵蛋白，TNFα，G i，Gαq，PKCβ，PKA，β1AR, 磷酸化蛋白, 肌集钙蛋白, 钙调磷酸酶, L-型Ca2+ 通道 线粒体功能紊乱 氧化应激 脂肪酸氧化(FAO) 通路的受损 基质金属蛋白酶2/MMP2 基质金属蛋白酶9/MMP9 组织金属蛋白酶抑制剂 1/TIMP1
漫谈脂肪肝肝纤维化的无创诊断
漫谈脂肪肝肝纤维化的无创诊断 顾名思义，无创诊断就是没有创伤地获取疾病诊断所需的重要信息，而这些信息传统上只能通过有创的手段来获得。肝活检全名叫做肝脏穿刺活体组织学检查，这个名词对很多慢性肝病朋友可能并不陌生，因为在肝科就诊时经常可以听到进行这一检查以获取准确诊断的建议，取上整个肝脏约1/50000大小的一点组织进行切片观察，借以判断肝脏的炎症程度、纤维化分期以及脂肪变等情况，可以直观地将诊断明确到病理学水平。无创诊断就是不进行这种有创伤的检查而获得与其价值相近的疾病信息。 肝纤维化无创诊断的现实需要 非酒精性脂肪性肝病( NAFLD)是一种以肝细胞弥漫性脂肪变性为特征但无过量饮酒史的临床病理综合征，根据病理改变进一步分为单纯性肝脂肪变、脂肪性肝炎/肝纤维化和脂肪性肝炎相关肝硬化。众所周知，本病与肥胖和代谢综合征密切相关，随着病毒性肝炎等其他常见慢性肝病的控制和肥胖发病的迅速增加，NAFLD已成为西方发达国家引起肝酶(ALT)异常和慢性肝病的最常见原因，著名脂肪肝专家范建高教授10年前进行的人群调查显示，上海成人NAFLD的患病率已高达15%，并且还在随肥胖的增加而逐年攀升。但这么庞大的发病人群我们临床如何处置? NAFLD自然病程相对温和，总体进展不快。足够证据表明，NAFLD的预后主要取决于其肝脏组织学类型。尽管心血管相关和全因死亡以及代谢相关肿瘤较正常人群有一定增加，单纯性肝脂肪变并不增加肝病相关死亡;脂肪性肝炎尤其是伴有显著或进展性肝纤维化(分别 定义为组织学上的2或3期以上纤维化)患者的肝病相关死亡和肝硬化发生率则明显增高，这一人群在总的NAFLD疾病谱中仅占15—20%，及时准确识别这一人群进行肝病进展的定期监测具有重要意义。但说易行难，除了肝活检，目前尚无其它可靠的手段对此进行准确诊断，因而肝活检仍是NAFLD诊断获取纤维化分期等信息的金标准，也是我们开发无创的替代手段赖以参照的对象。但肝活检的局限显而易见：姑且不论潜在导致出血甚至死亡(发生率低于万分之一)的创伤性、医疗成本和费用、患者对检查尤其是重复检查的接受度，肝活检本身的含金量也一直是个无法解决的问题，如前所述，以总体的1/50000去反映整个肝脏的病理情况将不可避免地存在取样误差、病理学家进行诊断时存在的观察者间的差异也很难避免，因此肝活检只能算是在有限选择下最佳的诊断方法。如此庞大的人群不加选择地进行肝活检既不现实也不必要，趋利避害的本能促使研兖者主动寻求那些可方便地对疾病诊断、病情监测和疗效评估的无创方法，并且希望获得更真实的疾病全貌。 血清标志物：肝纤维化无创诊断的可行之路 无创诊断一直是慢性肝病诊断领域的研究热点，NAFLD的无创诊断包括肝脂肪变、炎症和纤维化三个方面，考虑到纤维化对肝病进展的强提示意义，研究者对纤维化的无创评估热情更高，限于篇幅，本文仅对部分有前景的血清标志物做一简要介绍，深入了解有关问题可咨询有经验的肝病医师。 血清标志物又被称为生物标记，即那些反映疾病内在机制的血清标志，对这些反应肝纤维化病生理机制的标志物和通过NAFLD临床病理特征分析获得的与进展性肝纤维化相关的临床参数如年龄、身体质量指数(BMI)、糖尿病有无等进行组合和加权赋值，就能得到目前