心肌细胞钙的影像观察三
心肌细胞钙波的影象观察Ξ
臧伟进1,于晓江1,臧益民2,Ch ristine L am on t3,GilW ier3
(11西安交通大学医学院药理学教研室,陕西西安710061;21第四军医大学生理学教研室;
31美国马里兰大学医学院)
摘要:目的:观察大鼠心肌细胞内钙波的影象及钙波在心肌细胞内及细胞间的传播。方法:采用激光共聚焦显微镜及细胞内钙荧光染色的观测方法。结果:①在激光共聚焦显微镜下观察了由钙荧光探针F luo23染色的心房肌及心室肌细胞的影象。②观察了心肌细胞内钙在某一区域瞬时性增高的现象即钙波在心肌细胞内传播的动态影象,钙波的发生与细胞外钙浓度大小有关。③观察了钙波在心肌细胞与细胞间连接处的传播动态影象。结论:心脏在静息时(尤其高钙负荷时)出现钙波是钙信号的一种调节机制。钙波具有在细胞内区域性、瞬时性增高,并较快在细胞内传播,亦可在细胞间传播。
关键词:心肌细胞;钙信号;钙波
中图分类号:Q257 文献标识码:A 文章编号:100927236(2001)0520337204
Observa tion of the i m age of ca lc iu m waves i n card i ac m yocytes
ZA N G W ei2j in1,YU X iao2j iang1,ZA N G Y i2m in1,L A M ON T Ch ristine3,W IER G il3
(11D ep artm en t of Pharm aco logy,X i’an J iao tong U n iversity,X i’an Shaanx i710061,Ch ina; 21D ep artm en t of Physi o logy,Fou rth M ilitary M edical U n iversity,X ian Shaanx i710032,Ch ina; 31D ep artm en t of Physi o logy,U n iversity of M aryland at B alti m o re,U SA)
Abstract:A I M:To investigate the fundam en tal natu re of calcium w aves and its p rop agati on in side cells o r in cell2cell juncti on s.M ETHOD S:W e w ere studied the calcium w aves in rat cardiac m yocytes loaded w ith the fluo rescen t calcium indicato r,fluo23u sing confocal laser m icro scop e. RESUL TS:①In the p resen t study,w e ob tained the i m ages of rat atrial and ven tricu lar m yocytes loaded w ith fluo23u sing confocal laser m icro scop e.②In the ven tricu lar m yocytes,there w ere local increases of in tracellu lar calcium,i.e.calcium w aves,w h ich cou ld be p rop agated w ith in the cells.T he occu rrence of calcium w aves related to ex tracellu lar calcium concen trati on.③W e also visualized the i m ages of p rop agati on of calcium w aves from cell to cell.CONCL USI ON:In the heart,w aves of calcium release(esp ecially in h igh ly loaded w ith calcium)are a no rm al m echan is m of cellu lar signaling.Calcium w ave is a regi onal increase of calcium tran sien t in side the cells,w h ich can p rop agated w ith in the cells,o r som ehow betw een the cells.
Key words:cardiac m yocytes;calcium signaling;calcium w ave
钙离子是动物、植物体内无处不在的信号因子,调控着细胞乃至机体的许多重要活动,如分泌、收缩及细胞增殖等。因而对细胞内钙信号的研究始终是探索生命科学机制的重要课题。传统的荧光显微镜实验观测,由于分辨率低,只能观察细胞内钙的大体改变,无法看到局限性的钙信号变化及清晰的细胞微管系统。然而运用激光共聚焦显微镜可以看到非常清晰、完整的细胞膜轮廓及微管系统,亦可以观察到细胞内局部或均一性的钙离子浓度的瞬时性增高[1～5]。本实验运用激光共聚焦显微镜观察了心肌
Ξ基金项目:国家自然科学基金资助课题(39970273,39870334)
细胞钙波的影象及其在细胞内、细胞间传播的动态特征。
1 材料与方法
1.1 标本制备[6,7] 选取健康大鼠,体重200±50 g,雌雄不拘。猛击动物头部致昏,开胸迅速取出心脏,依次用下列液体进行主动脉逆行心脏灌流:台氏液(2～5m in)、无钙台氏液(3～5m in)、含0.1～0. 15m g m l的胶元酶(Yaku lt)和0.5～0.6m g m l B SA(Sigm a)的无钙台氏液(5～8m in)、无钙台氏液(10m in)。在无钙台氏液中用眼科剪仔细游离出左、右心耳及心室肌,将心房肌、心室肌剪成碎块并过滤,逐渐置入复钙台氏液中,即可制备成单个大鼠心房肌细胞及心室肌细胞。
1.2 方法 激光共聚焦实验观测的方法同文献[6]报道。分离后的心肌细胞用5Λm荧光染色剂F luo2 3负载(load)至少30m in后置于倒置N ikon显微镜下,实验选用×60倍的油镜进行观察。荧光信号经激光共聚焦显微镜(B i oR ad M RC600型)通过B i oR ad及Pclam p软件系统(A xon In strum en ts)无间断记录后,用I DL软件(R esearch Syslem,Inc. U SA)进行分析和处理。
1.3 溶液与药品 心肌细胞灌流台氏液成份(mm o l L)为:N aC l136.9,KC l5.4,CaC l21.8, M gC l20.5,N aH2PO40.33,H EPES5.0,Gluco se 5.5,pH7.4(用HC l及N aO H调pH值至7.40±0.05)。钙荧光染色剂F luo23(M o lecu lar P robes, Inc)。
2结果
2.1 激光共聚焦显微镜观察的心房及心室肌细胞内荧光染色影象 首先使用激光共聚焦显微镜观察心肌细胞的形态。当荧光染料F luo23负载0.5h 后,用台氏液(0.5mm o l L)冲去荧光染料,分别将心房肌细胞或心室肌细胞置于灌流槽内,记录下其各自静息状态的影象(图1)。图1A为心房肌细胞的荧光染色影象,可见心房肌细胞呈细长梭形(n= 10)。图1B为心室肌细胞的荧光染色影象,与心房肌细胞相比,心室肌细胞呈长柱形,且细胞体较大,可见明显横小管(Z线附近)结构。观察还发现在此条件下,细胞处于静息状态,无钙波出现(n=25)。图1左侧条柱为细胞内钙分布大小的示意标尺,越向上白色的标尺则表明钙浓度越高。
2.2 钙波在心肌细胞内传播的影象观察 将大鼠心室肌细胞标本荧光负载稳定0.5h后,用正常台氏液冲去荧光染料然后记录心室肌细胞钙信号的变化。实验发现,当用正常台氏液(含1.8mm o l L CaC l2)灌注细胞时,钙波发生的频率很低只有约1 10的细胞可见偶发的钙波(n=30)。若提高台氏液中钙浓度达3mm o l L时,钙波发生频率明显增高,约40%的细胞可观察到钙波现象(n=25)。如图2A2D可以非常直观地看到细胞内钙局限性增高在细胞内(从左上角向右下方)传播的影象
。
图1 激光共聚焦显微镜观察心房及心室肌细胞的影象 A:心房肌影象;B:心室肌影象
。
图2 在同一心室肌细胞内钙波的传播
2.3 钙波在心肌细胞间传播的影象观察 图3A2 D所示的是在心室肌组织(用酶松散解离)邻近的四个细胞间邻接的不同时段的(相隔250m s)钙荧光染色的影象。细胞的边界用白色划出边界。其中图3A是直接按横轴方向钙波的传播,图3B是表示斜角细胞间连接的传导。图3C表示是斜角细胞间连
接的传导,图3D 表示钙波在上、下相邻细胞间的传导。实验发现在正常台氏液中只有13%的钙波可通过邻近的细胞界(n =12)。3 讨论
随着90年代中期激光共聚焦显微镜配合细胞内荧光染色技术运用于心血管方面的研究以来,由于其精确性、高分辩性等特征,大大提高了细胞内影象观测及三维重组的能力;为功能学研究提供了方便直观的活的细胞图象,使人们对细胞内钙信号调控机制的探讨向纵深跨进了一大步。作者运用激光共聚焦显微镜配合细胞内荧光染色技术观察了由F luo 23荧光探针染色的心房肌细胞及心室肌细胞的影象。因为心房肌细胞无明显的T 管结构,而且心室肌细胞钙通道分布较高,一般研究心肌细胞钙信号时常选用心室肌细胞[8]。作者观察了心肌静息状态下细胞内钙水平在某个区域瞬时性增高,
并以
很快的速度在细胞内传播的现象,即钙波(Calcium W ave )的影象。同时作者发现细胞内钙波的发生和传播在细胞钙负荷增高(如细胞外高钙)时增加。钙波与心脏细胞内钙在局部肌质网自发性释放增加有关。研究表明,钙波与在正常兴奋2收缩耦联时的钙释放不同,钙波的传播不受膜上钙通道离子流的控制,一但发生,就会传播到整个细胞。钙波一般认为与兴奋2收缩耦联关系不大,其频率取决于动物心脏种类、电活动形式、细胞外钙浓度及是否存在各种药物或激素[9]。在舒张期出现的钙自发性释放将会降低下次正常心跳时的钙释放量,亦可影响舒张期张力、此外经N a Ca 交换或非特异性钙通道排出过量的细胞内钙亦可产生去极化电流,引起心律失常[9,10]。一般认为钙波对细胞间传导不起重要作用[11],作者实验发现少量钙波亦有可能在细胞间进行不同方向的传导。钙波在细胞间的传播程度低与心肌细胞间通道对钙的通透性低等有关。
图3 在心室肌细胞与细胞间连接处钙波的传播
A ,
B ,
C ,
D 为同一组细胞(4个细胞)连接的不同时间段。细胞的边界用白色细线勾出,虚线圆圈表示的是细胞连接处钙波不同
的传播方式。
参考文献:
[1]臧伟进,于晓江,臧益民.心肌细胞钙信号研究进展[J ].生理科
学进展,1999,30(2):141-143.
[2]Cheng H ,L ederer W J ,Cannell ,M B .
Calcium spark s :
E lem entary events underlying excitati on 2contracti on coup ling in heart m uscle [J ].S cience ,1993,262:740-744.
[3]L ópez 2L ópez JR ,Shack lock PS ,Balke CW ,et al .L ocal ,
stochastic release of Ca 2+in vo ltage 2clamped rat heart cells:V isulizati on w ith confocal m icro scopy[J ].J P hy siol ,1994,480(1):21-29.
[4]L ópez 2L ópez JR ,Shack lock PS ,Balke CW ,et al .L ocal calcium
transients triggered by single L 2type calcium channel currents in cardiac cells [J ].S cience ,1995,268:1042-1045.
(下转第342页)
蛋白合成增加,引起心肌肥大,并呈量效关系
。
图2 肾上腺素及其受体阻滞剂对心肌细胞[3H ]2L eu 掺入量的影响
分组符号的意义与图1同。与对照组比较,b P <0.01。
用Α受体阻滞剂酚妥拉明和Β受体阻滞剂心得
安均能阻断肾上腺素增加心肌细胞表面积和增加心肌细胞的[3H ]2L eu 掺入量的作用,说明单独阻断Α和Β受体中的任何一种受体都能抑制肾上腺素诱导的心肌细胞蛋白合成,防止心肌肥大。
神经体液因素首先必须与心肌细胞膜的特异性受体结合,在相应的生物信号转导系统(如c AM P 系统、三磷酸肌醇2二酰甘油系统)的作用下,激活相应的蛋白激酶和Ca 2+的作用,导致心肌细胞DNA 复制、蛋白合成及细胞有丝分裂的增加,引起心肌肥大。因此,儿茶酚胺增多促进心肌肥大,其作用必须首先通过Α或Β受体。 肾上腺素可激动Α,Β受体,本实验中,Α,Β受体阻断滞剂任一种单独使用均能抑制肾上腺素诱导的心肌肥大,说明肾上腺素促进心肌肥大的作用可能是通过同时激动Α和Β受体的联合作用所致的。这对长期应用小剂量Β1受体阻滞剂改善部分扩张性心肌病患者的心功能提供新的佐证,也就是说,应用小剂量Β1受体阻滞剂除了提高Β1受体密度,并使其上调,提高心肌细胞对儿茶酚胺的敏感性以外[4],还
可能通过阻断Β受体对肾上腺素或异丙肾上腺素诱导心肌细胞肥大的作用来延缓心肌肥大的发展进程,进而改善了心功能。参考文献:
[1]Si m p son PC ,Kariya K ,Karns L R ,et al .A drenergic ho rmones
and contro l of cardiac m yocyte grow th [J ].M ol Cell B ioche m ,1991,104(1-2):35-43.
[2]L ah teenm ak i TA ,Sievi E ,V apaatalo H .A ntihypertensive drugs
reduce no radrenaline 2induced
hypertrophy
of
cultured
m yocardial cells [J ].J P har m P har m acol ,1996,48(3):323-
326.
[3]Bogoyevitch M A ,A ndersson M B ,Gillesp ie B row n J ,et al .
A drenergic recep to r sti m ulati on of the m itogen 2activated p ro tein k inase cascade and cardiac hypertrophy [J ].
B ioche m J ,1996,314(P t 1):115-121.
[4]陈国伟,伍贵富.心力衰竭[A ].杨惠玲,潘景轩,吴伟康,等.高
级病理生理学[M ].北京:科学出版社,1998.244.
(收稿日期:2000211213; 修回日期:2001201204)
(上接第339页)
[5]L i pp P ,N iggle E .Fundam ental calcium release events revealed
by two 2pho ton excitati on pho to lysis of caged calcium in guinea 2p ig cardiac m yocytes [J ].J P hy siol ,1998,508(3):801-809.[6]Parker I ,Zang W J ,W ierW G .Ca 2+‘spark s ’invo lving m ulti p le
Ca 2+release sites along Z 2lines in rat heart cells [J ].J P hy siol ,1996,497(1):31-38.
[7]Zang W J ,Yu XJ ,Boyett M R .Barium block of the m uscarinic
po tassium current in guinea 2p ig atrial cells [J ].Pf l üg ers A rch 2
E u ro J P hy siol ,1995,430:348-357
[8]Shack lock PS ,W ier ,W G ,Balke ,CW .L ocal Ca 2+transients
(Ca 2+spark s )o riginate at transverse tubules in rat heart cells
[J ].J P hy siol ,1995,487(3):601-608.
[9]W ier G W .[Ca 2+]I transients during excitati on 2contracti on
coup ling of m amm alian heart [A ].Fozzard HA .T he H eart and Cardi ovascular System [M ].
2ed .N e w Y ork :R aven P ress ,
L td ,1992.1223-1248.
[10]Cannell M B ,Chang H ,L ederer W J .T he contro l of calcium
release in heart m uscle [J ].Science ,1995,268:1045-1049.[11]D iaz M E ,
T raffo rd AW ,
O ’N eill
.M easurem ent
of
sarcop las m ic reticulum Ca 2+content and sarco lemm al Ca 2+fluxes in iso lated rat ventricular m yocytes during spontaneous Ca 2+release [J ].J P hy siol ,1997,501:3-16.
(收稿日期:2001201220; 修回日期:2001201230)
钙离子在调控细胞凋亡和细胞迁移中的作用综述
钙离子在调控细胞凋亡和细胞迁移中的作 用综述 中国农业大学植生071 薛永铭0702040118 摘要钙离子对生命活动具有重要作用。本文集中讨论钙离子在细胞凋亡与迁移的调控中所扮演的重要角色。亚细胞区室内钙离子分布的微妙变化可以有效地正调控或负调控细胞凋亡，这是钙离子参与四条信号通路来调控细胞凋亡的基础。程和平教授研究组最近发现钙闪烁在细胞定向迁移中的作用，对细胞迁移的研究有重要作用。 关键词钙离子信号通路细胞凋亡Caspase（半胱天冬酶）细胞迁移钙闪烁 一、钙离子对生命活动具有重要作用。 钙离子对多项生命活动具有重要作用。在动物生理的教科书中对其主要生理功能进行了总结： 1.钙离子是凝血因子，参与凝血过程； 2.参与肌肉（包括骨骼肌、平滑肌）收缩过程（内质网内钙库的释放）； 3.参与神经递质合成与释放、激素合成与分泌； 4.是骨骼构成的重要物质。 这些重要生理功能已经有了几十年的研究基础，然而近些年的研究却揭示了钙离子在细胞凋亡与迁移的调控中所扮演的重要角色，使人们得以钙离子的生理功能，所以我认为集中笔墨将这两个方面进行介绍也是很有意义的。 二、钙离子参与四条主要的凋亡信号通路。 长期研究表明，亚细胞区室内钙离子分布的微妙变化可以有效地正调控或负调控细胞凋亡，因此钙离子扮演着细胞生存的捍卫者或是无情的死刑执行者的双重角色。近年来，研究者发现并总结出了引起哺乳动物细胞凋亡的四条信号通路：外部
通路（死亡受体通路）、内部通路（线粒体通路）、依赖Caspase-2的通路、不依赖于Caspase的通路（GrA介导通路）。四条通路图示见图1。 图1 引发哺乳动物细胞凋亡的四条信号通路。（引自Sten Orrenius et al., 2003）1.钙离子与死亡受体通路 死亡受体（DR）通路是目前研究最多最清楚的凋亡诱导机制。死亡受体包括Fas、TRAILR2、TRAILR1等，都属于肿瘤坏死因子受体超家族。以Fas为例，Fas 触发的凋亡机制是通过升高钙离子浓度来实现的。钙结合蛋白对内质网腔内钙离子变化非常敏感，与Fas结合后使钙离子内流，启动细胞凋亡，激活Caspase-8。在I 型细胞中，Caspase-8激活Caspase-3，而Caspase-3是细胞凋亡的直接执行者之一；在II型细胞中，Caspase-8剪切Bid蛋白，而后依赖线粒体通路诱导凋亡。 2.钙离子与线粒体通路 线粒体是胞内重要的钙库，内质网与线粒体之间的钙离子交流对细胞命运有深刻地影响。在一些刺激作用下，内质网将其储存的钙离子释放，然后线粒体摄取钙离子，引起钙离子超载，导致线粒体的损伤。线粒体的损伤会导致细胞色素c的释放，引发凋亡体（apoptosome）的形成，apoptosome激活Caspase-9，Caspase-9又激活了细胞凋亡的直接执行者Caspase-3，诱导了细胞凋亡。线粒体通透孔的开放使
心肌细胞钙离子与心力衰竭
心肌细胞钙离子与心力衰竭 吴军舟，叶绽蕾，潘雪阳，曹群 摘要： Ca2 +是参与心脏兴奋-收缩耦联的重要环节，Ca2 +的正常调节是心脏正常工作的基础。心肌细胞游离的Ca2+ 浓度的调节包括L型钙通道，Ryanodine受体和钙泵，心力衰竭发生时，心肌细胞中Ca2+ 的调节机制发生障碍。针对Ca2+ 调节机制的治疗也在治疗心力衰竭中有广泛的应用。本文分析Ca2 +在心衰中的扮演的角色，寻找临床治疗心衰的方法。 关键词： L型钙通道，Ryanodine受体，心力衰竭 正文： 1.心肌细胞内游离的Ca2 +调节 兴奋-收缩耦联是心脏力学活动的基本机制, 在这个过程中, Ca2 +起关键作用。心肌细胞游离的Ca2+ 浓度的调节主要有以下3个途径： 1）L型钙通道： 钙通道在心肌细胞膜上有两种，根据其不同电流特性分为L型和T 型。与T型钙通道相比，L型钙通道具有大电导、高电压激活、长时间开 放，能和多种拮抗剂作用的特点。L型电压依赖性钙通道（L—VDCC） 存在于大多数可兴奋细胞膜上，是异四聚体多肽复合体，包含α1，β，α2/S 亚基，在某些组织中还有γ亚基，允许去极化介导的Ca2 +内流人胞。辅助 亚基β、α2/δ均与αl亚基以非共价方式紧密结合，调节其生物特性以及使 仅αl亚基锚定/镶嵌在细胞膜[15]。L型钙通道电流主要在快速去极化时引 起动作电位的传播，参与心肌动作电位平台期的形成和维持。每一次心 肌搏动都需要Ca2 + 经L型钙通道进人胞浆内，然后触发肌浆网释放大量
的Ca2 +，这个过程被Fabiato称为钙诱发的“以钙释钙”(calcium induced calcium release，CICR)，具体机制见下。 2）Ryanodine受体 RyR（Ryanodine receptor）是一种钙离子释放通道，由于和植物碱-Ryanodine呈高亲和力的结合，并受其调节而得名。根据不同的组织分 布和药理学作用，RyR可以分为三类：RyR1、RyR2、RyR3。在心肌细 胞中钙释放通道的主要类型是RyR2，RyR主要参与了心肌的兴奋收缩耦 连，心脏起搏和心率失常的过程，CICR（calcium-induced Ca2 + release，CICR）是心肌中基础钙离子释放（钙火花）的主要方式[18]。RyRs位于 肌质网终池并与由质膜内陷形成的T管上的二氢吡啶受体（DHPR）由 直接或间接的联系。RyRs的三维结构已经确定，三维重组图像显示RyR 由两部分组成：一个较大的四重对称的棱柱状胞内复合体，为29×29× 12nm和一个较小的跨膜复合体为7nm [17]。心肌的动作电位时，即T- 管上的L型DHPR在去极化作用下开放引起胞外少量钙内流，会激活SR 上的RyR2开放从而使SR内大量钙释放入胞将引起心肌收缩，即“以钙 释钙”（calcium-induced Ca2 + release，CICR）[16]。 3）钙泵，包括细胞膜钙泵（亦称Ca2 + -A TP酶），肌质网钙泵(sarcoendoplasmic reticulum calcium-ATPase2，SERCA2) 和Na+-Ca2 +交换 体(Na+-Ca2 + exchanger, NCX).Ca2 + -ATP酶在有Ca2 +和Mg2+的条件下每 水解一分子ATP可将细胞质内一个Ca2 +单向运出细胞。而SERCA2每 水解1分子ATP可转运2分子Ca2 +离开胞质。[1,2,3] 细胞膜去极化时Ca2 +内流，位于横小管处肌膜的L型钙通道被激活，Ca2 +内流激活通过“以钙释钙”(CICR)的方式触发肌浆网上RyR2 释放更多的Ca2 +，使胞浆Ca2 +的浓度从0.1–0.2 mM 上升到2–10 mM。[4] L型钙通道与邻近RyR2 通道偶联作为一个功能体被称作为“钙火花”（Ca2+ spark）。钙火花形态学包括钙火花峰值、空间尺度和存在时间而其动力学包括钙火花的上升相和衰减相。[5,6]细胞内Ca2 +浓度由10-7mol/L增至10-5mol/L左右时, 两个Ca2 +与肌钙蛋白C结合, 使其与肌纤蛋白的结合解除, 肌球蛋白头部与肌纤蛋白之间发生横桥结合；
动物细胞教案
第三节动物细胞教学设计案例 张建平 教学目标 ①进一步熟练制作临时装片和使用显微镜观察细胞，说明人口腔上皮细胞的基本结构，区别动植物细胞结构的主要不同点。 ②提高制作以及观察临时装片的技能。 ③设计实验、改革实验，开发自己的创新潜能，以此来体会科学探索的思想和方法是不断发展的；继续形成“胆大心细”的心理素质；在“模拟制作”活动中，提高学习生物学的兴趣。 重点和难点 重点：说明人口腔上皮细胞的基本结构，比较动植物细胞的相同点和不同点；提高实验能力和观察能力。 难点：制作临时装片过程中的刮取（首次观察自己身体上的细胞，学生感到既新鲜又好奇，取材关系到实验效果）；细胞结构的观察（与植物细胞相比不易观察，略有难度）；设计实验（应用以往的学习经验，是较高层次的学习）。 课前准备 学生：预习；3H铅笔，绘图纸；各种各样的果冻，彩色糖粒，果脯，小塑料食品袋，线等物品；上课前漱口。 教师：生理盐水，稀碘液，高锰酸钾溶液（质量分数为1％～5％），消毒牙签，滴管，纱布，镊子，吸水纸，载玻片，盖玻片，显微镜，清水，琼脂。 人口腔上皮细胞的结构挂图，不同种类的人体、动物体细胞挂图或投影片、投影仪或多媒体设备（若条件许可），提前制作临时装片、摆放示范镜。 教学设计
教学过程 复习：1．制作临时装片的“七字步骤”；（擦、滴、取、展、盖、染、吸）2．植物细胞的基本结构。（略）从而过度到本节。 师：上节课就有同学说：“老师，我真想看看自己身上的细胞呀，它和植物细胞一样吗?这节课就可以实现愿望了。 生：可是怎么看呢？ 师：出示实验题目──观察人的口腔上皮细胞，看到题目，你有什么疑问？ 生：口腔上皮细胞在什么部位？怎样取得？ 师：看着老师准备的用具，想一想？ 生：发现牙签，寻找解决问题的途径──在口腔侧壁上刮取（师引导、示范）。 师：再来认识一下其他的材料用具，有什么疑问？ 生：提问：关于生理盐水？（保持细胞的生理活性） 师：有了前两节课的经验，我们已经轻车熟路了，要想观察细胞，首先应做什么？ 生：制作临时装片。 师：利用这些材料用具，借鉴前面所学的方法，同学们自己设计一下制片的过程吧。 生：分组讨论、交流。设计方案如下： 1．方法步骤不变：擦→滴→刮→涂→盖→染→吸； 2．直接染色：擦→滴→刮→涂→染→盖→吸； 3．变化染色剂：使用高锰酸钾与碘液有何不同？ 4．变化取材部位：刮上颚与刮侧壁结果有何不同？ 选择一种方案制片，相邻同学尽量选择不同的方案，以增加对比性。 师：提示学生实验中的注意事项、规范操作。 生：观察。注意根据染色的结果区分细胞的结构，注意细胞数量的多寡、分散状况如何？分析原因。
第三节 动物细胞教案
第三节动物细胞 教学目标 ①进一步熟练制作临时装片和使用显微镜观察细胞，说明人口腔上皮细胞的基本结构，区别动植物细胞结构的主要不同点。 ②提高制作以及观察临时装片的技能。 ③设计实验、改革实验，开发自己的创新潜能，以此来体会科学探索的思想和方法是不断发展的；继续形成“胆大心细”的心理素质；在“模拟制作”活动中，提高学习生物学的兴趣。 重点和难点 重点：说明人口腔上皮细胞的基本结构，比较动植物细胞的相同点和不同点；提高实验能力和观察能力。 难点：制作临时装片过程中的刮取（首次观察自己身体上的细胞，学生感到既新鲜又好奇，取材关系到实验效果） 细胞结构的观察（与植物细胞相比不易观察，略有难度）； 设计实验（应用以往的学习经验，是较高层次的学习）。 教学方法：实验法 教学设计 学习内容学生活动教师活动 复习：临时装片的制作方法；植物细胞的基本结构。 明确学习目标 实验题目：观察人的口腔上皮细胞温故知新 提出问题： ①想看看自己身上的细胞吗？ ②人的细胞与植物细胞有什么相同和 不同之处？ 激起疑惑：口腔上皮细胞在哪儿？怎 样获得？ 解决心中的疑惑 承前启后，知识导入。 引导学生联系自身，提出问题， 创设学习情境。 出示题目，交流：“看到题目， 你有何疑问？ 示范取材部位。 材料用具提出疑问：生理盐水有什么作用？评价 引导、分析 方法步骤 一、制作人口腔上皮细胞临时装片①设计：根据已有的经验，设计实验 方案（注意取村、方法、染色剂的变化）； ②制作：同组同学尽量选择不同的方 案制作临时装片，增加对比性。 参与 引导 帮助 调查 二、用显微镜观察人的口腔上皮细胞观察自己制作的临时装片，然后同学 间交换观察。 借鉴老师摆放的示范镜。 巡视 提示 参与观察
成年SD大鼠心肌细胞分离及其胞内钙离子动态变化测定
成年SD大鼠心肌细胞分离及其胞内钙 离子动态变化测定 （作者： _________ 单位： ___________ 邮编：___________ ） 【摘要】目的：建立稳定的成年SD大鼠心肌单细胞分离方法，并对心肌细胞内Ca2+动态变化进行测定。方法：用改进的Langendoff装置，行大鼠主动脉插管逆向灌流（温度、pH、水质恒定），用混合液（0.6mg/mL胶原酶H+0.06mg/mL蛋白酶+1mg/mL牛血清白蛋白）消化心脏，经3次不同浓度含钙台式液复钙后得到钙稳态心肌细胞；室温静置1?2h后于激光共聚焦显微镜下测定Ca2+的动态变化。结果：得到70%?90%长杆状活细胞，钙稳态心肌细胞可占40%?60% ; fluo_4 AM负载染色后可记录到典型的诱发钙瞬变。结论：胶原酶和蛋白酶混合液主动脉逆向灌流方法可以得到具有正常生理功能的钙稳态心肌细胞，可用于心肌细胞内钙信号研究。 【关键词】大鼠心肌细胞细胞分离激光共聚焦显微镜 Cardiomyocyte Isolation from Adult SD Rat Heart for Con focal Microscopic In tracellular Ca2+ Imagi ng
[Abstract ] Objective: To develop a stable method for adult SD rat sin gle cardiomyocyte isolati on , and the n to determ ine the in tracellular Ca2+ sig nalli ng by con focal imagi ng. Methods: Rat heart was digested by aorta retrograde perfusion with mixture [collagenase 11(0.6 mg/mL), pronase(0.06 mg/mL)and bovine serum albumin(1 mg/mL) ] using a modified Langendorff system. The temperature, pH and water quality should be properly con trolled in the process of digested rat heart. Three times of re_calcificati on with differe nt concen trati on of Ca2+ Tyrode soluti on were used to procure calcium homeostasis ven tricular cardiomyocytes. Sin gle cell was used for con focal microscopic Ca2+ imaging after storage at room temperature for 1~ 2 hours. Results: There were about 70% ~ 90% rod_shaped fresh viable cells, in which 40% ~ 60% were calcium homeostasis cells. In single calcium homeostasis cardiomyocytes calcium transients could be evoked by a stimulator and recorded with an LSM510 con focal microscopic system after in cubati on with fluo_4 AM. Conclusion: Aorta retrograde perfusion with collagenase II and pron ase is a proper method to procure sin gle calcium homeostasis cardiomyocytes from adult SD rat with normal physiological features, and fit for con focal microscopic Ca2+ imagi ng.
二、心脏各部分心肌细胞的动作电位及其离子流的基础
1 、慢反应细胞：如窦房结细胞和房室结细胞。 它们的共同特点是细胞膜上的快钠通道比较稀少，动作电位去极化由 I Ca-L 引起，幅值小，去极化速率慢；由于 I K1 通道贫乏，复极过程无平台，不存在 2 、3 期之分（见表 1 ）。 表 1 窦房结细胞和房室结细胞的动作电位特点 窦房结房室结 细胞直径 5 ～ 10 m m 5 ～ 10 m m 最大舒张电位－ 50 ～－ 60 mV － 60 ～－ 70 mV 最大去极速率 1 ～ 10 v / s 5 ～ 15 v / s 动作电位超射20 mV 20 mV 动作电位射程100 ～ 200 mS 100 ～ 300 mS 2 、快反应细胞：如工作心肌和浦肯野细胞。 细胞膜上 I K1 通道和 I Na 通道充分表达，动作电位去极化由 I Na 内流引起，幅值大，去极化速率快； I K1 通道的内向整流特性使心室肌和浦肯野细胞复极化过程呈现平台。心房肌 I to 通道比较发达， I to 影响到动作电位 2 期，使之不能形成平台。 I Na 通道密度在浦肯野细胞和心室壁中层 M 细胞高，所以它们的去极化速率比较快。延迟激活钾流的慢成份 I Ks 通道在室壁中层 M 细胞密度低，所以 M 细胞复极化慢，其动作电位时程长于心内膜下和心外膜下的心室肌细胞（表 2 ）。心脏各部分心肌细胞动作电位图形及其与心电图波形的时间关系见图 4-1 。 表 2 心房肌、心室肌、浦肯野细胞的动作电位特点 心房肌心室肌浦肯野细胞细胞直径10 ～ 15 m m 10 ～ 20 m m 为心室肌 3 倍 静息电位－ 80 mV － 80 ～－ 90 mV MDP － 90mV 最大去极速率100 ～ 200 v / s 100 ～ 200 v / s M 细胞 300 v / s 可达 800 v / s 动作电位超射30 mV 30 ～ 40 mV 40 mV 动作电位射程 100 ～ 200 mS 无平台，无 2 、 3 期之分 200 ～ 300 mS M 细胞最长，心内膜 下细胞次之，心外膜 下最短。 200 ～ 500 mS
钙离子对心脏节律性影响
钙离子对心脏节律性的影响 实验原理：蛙类，属于两栖纲，无尾目，品种甚多，是脊椎动物由水生向陆生过渡的中间类型。蛙类虽然较为低等，但在生理学实验中应用非常广泛，其循环系统、神经系统以及肌肉均为生理学常用的实验材料。诸如离体心脏灌流、下肢血管灌流、微循环的观察、心电图、脊髓休克、脊髓反射、谢切诺夫抑制、反射弧的分析实验以及坐骨神经-缝匠肌、腹直肌等均为生理学的重要实验的标本。 心脏的正常节律性活动必须在适宜的理化环境下才能维持，，一旦适宜的理化环境被干扰或破坏，心脏活动就会受到影响。心脏自动节律性是指心肌细胞能在没有外来刺激情况下具有自动发生节律性兴奋的能力或特性。因心脏具有自动产生节律性收缩的特性，即自动节律性，故在心脏离体后，如用人工灌流方法，可保证其新陈代谢的顺利进行，而心脏仍能有节律地自动收缩和舒张，并可维持较长的时间。离体心脏活动所需的条件应与动物内环境的理化性质保持基本相近，因此改变灌流液的理化因素，则可引起心脏活动的变化。故可以采用离体心脏灌流的方法来研究心脏活动的规律、特点及影响因素。 细胞外Ca2+浓度发生变化时，细胞与Ca2+内流与Na+内流相关的生物电活动都将受到影响。当细胞外Ca2+浓度在一定范围内升高，细胞外Ca2+内流速度增加，引起窦房结P细胞4期自动去极化速度加快，导致P细胞自律性增强，心肌收缩增强增快，心跳加速，即心率加快；当细胞外Ca2+浓度较高时，使得肌浆中的Ca2+浓度不断升高，钙离子与肌钙蛋白结合数量不断增加，甚至达到只结合不解离的程度，于是，心脏会停止在收缩状态，心肌出现钙僵直。 用理化特性近似于蟾蜍血浆的任试液灌流离体的蟾蜍心脏，在一定时间内可保持其节律性收缩和舒张。改变灌流液的组成成分，心脏跳动的频率和幅度会随之发生改变。 实验目的：○1观察不同浓度的Ca2+对离体蟾蜍心脏节律性活动的影响； ○2学习离体蛙心灌流的方法，了解离体器官的研究方法。 实验材料： 1. 动物：蟾蜍8只。 2. 试剂和药品：任氏液，含Ca2+的溶液 3. 装置和器材：蛙类手术器械一套。生物信号采集系统，张力换能器，铁支架，双凹夹，试管夹，蛙心插管，蛙心夹，滴管，细线。 实验步骤和观察项目： 一、动物分组：1个观察组 二、溶液配制方法：以标准任氏液中Ca2+离子浓度为"1"，分别配制：不含Ca2+的而其他离子与标准任氏液相同的任氏液，1/8倍，1/4 倍，1/2 倍，1倍，2倍，4倍，8倍Ca2+离子浓度的任氏液(以上配制溶液均保持标准任氏液其它离子浓度不变)。 三、离体蛙心与套管方法： （1）、离体蛙心的制备 1、取蟾蜍一只，用探针到会脑和脊髓，将其仰卧固定在蛙板上。用镊子夹起皮肤，然后将胸部剑突软骨下方的皮肤剪出一个“V”字形切口，暴露出剑突。用镊子夹住剑突下端，在肌肉层上剪出“V”形切口。再用粗剪刀沿正中线剪开胸骨，并把左右两侧胸骨完全剪掉，眼科剪仔细剪开心包膜，暴露心脏。 2、仔细识别心房、心室、动脉圆锥、主动脉、静脉窦、前后腔静脉等。 3、结扎血管在右主动脉下穿一根线并结扎，再在左右主动脉下穿一根线备用。用玻璃分针将心尖向上翻至背面，以备用线将前后腔静脉一起结扎（注意勿结扎住静脉窦）。将心脏
心脏试题
第十四章心功能不全 一、选择题： 1. 心力衰竭最特征性的血流动力学变化是： A.肺动脉循环充血 B.动脉血压下降 C.心输出量降低 D.毛细血管前阻力增大 E.体循环静脉淤血 2. 下列哪种疾病可引起低输出量性心衰 A．甲亢症 B．严重贫血 C．心肌梗死 D．脚气病（VitB1缺乏） E．动-静脉瘘 3. 下列哪种情况可引起右室前负荷增大 A．肺动脉高压 B．肺动脉栓塞 C．室间隔缺损 D．心肌炎 E．肺动脉瓣狭窄 4. 心肌缺血引起的心肌收缩性减弱与下列哪个因素无关 A．ATP生成减少 B．心肌细胞死亡 C．肌钙蛋白与Ca2+ 结合障碍 D．肌浆网Ca2+摄取能力降低 E．Ca2+ 复位延迟 （ 1 ）下述高输出量性心衰的描述，哪项是错误的 A. 造成这类心衰的原因是高功力循环状态 B. 此类心衰发生时心输出量较发病前有所增高 C. 发病时心输出量属正常或高于正常 D. 可见于甲亢、严重贫血 E. 主要由血容量扩大引起 （ 2 ）下列哪种肌节长度的心肌收缩力最强 A.1.8um B.2.0um C.2.2um D.2.4um E.2.6um （ 3 ）心衰时心肌收缩性减弱，与下列哪项因素无关 A.ATP 供应不足 B. 心肌细胞死亡 C. 肌浆网 .Ca 2 ＋摄取能力下降 D. 肌浆网 Ca 2 ＋释放能力下降 E. 肌钙蛋白活性下降 （ 4 ）下列哪项因素与心室舒张功能障碍无关 A. 甲亢症 B. 心室舒张势能减弱 C. 心肌顺应性降低 D. 心室僵硬度加大 E. 肌浆网 Ca 2 ＋释放能力下降 （ 5 ）下列哪种疾病可引起左室后负荷增大 A. 甲亢症 B. 严重贫血 C. 心肌炎 D. 心肌梗死 E. 高血压病 （ 6 ）下列哪项变化在急性心衰不会发生 A. 心率加快 B. 肺水肿 C. 心肌肥大 D. 血压下降 E. 皮肤苍白 （ 7 ）在血容量增加的代偿反应中起主要作用的脏器是 A. 心 B 肝 C. 脾 D. 肺 E. 肾 （ 8 ）下列哪项因素与心肌兴奋 - 收缩偶联障碍无关 A. 肌钙蛋白活性下降 B. 肌球蛋白 ATP 酶活性下降 C. 肌浆网 Ca 2 ＋释放能力下降 D. 肌浆网 Ca 2 ＋储存量下降 E. Ca 2 ＋内流障碍 （ 9 ）下列哪项不是心脏向心性肥大的特点 A. 肌纤维变粗 B. 室壁增厚 C. 心腔无明显扩大 D. 心肌纤维呈串联性增大 E. 室腔直径与室壁厚度比值小于正常 （ 10 ）下列哪项属于心衰时肺循环淤血的表现
分析讨论“钙离子对心脏节律性影响”的实验结果
分析讨论“钙离子对心脏节律性影响” 的实验结果 1.实验结果 在无Ca2+的任氏液作用下，心率明显变缓，当细胞外Ca2+浓度在一定范围内升高时，心跳加速，即心率会适当加快。在高Ca2+的作用下，可见心肌收缩力增强，但舒张不完全，以致收缩基线上移。当细胞外Ca2+浓度较高（8倍）时，心脏停止在收缩状态，即“钙僵直”。 2.结果分析 Ca2+是心脏活动不可或缺的离子，当肌细胞上有动作电位传来时，肌浆网释放Ca2+，引起肌浆中的Ca2+浓度升高，作为Ca2+受体的肌钙蛋白结合了足够数量的Ca2+，就会引起肌钙蛋白分子构象的某些改变，传递给原肌球蛋白，使后者的构象也发生改变，使原肌凝蛋白的双螺旋结构发生某种扭转，把安静时阻止肌动蛋白和横桥结合的阻碍因素除去，出现两者的结合。在横桥和肌动蛋白的结合扭动和解离等的过程中，细肌丝不断向暗带中央移动，使肌肉收缩。因此当任氏液中的Ca2+浓度在一定范围内升高时，也能使肌钙蛋白结合更多的Ca2+，从而增强心肌的收缩作用。 心肌的肌浆网不发达，储钙能力差，易受细胞外离子浓度的影响，当肌浆中的钙离子升高到10-5mol/L的水平时作为钙受体的肌钙蛋白结合了足够的钙离子，从而触发肌丝的滑行，肌纤维收缩。当肌浆中的钙离子下降到10-7mol/L时，钙离子与肌钙蛋白解离，心肌随之舒张。 当任氏液中的钙离子浓度逐渐升高时，结合钙离子的肌钙蛋白数量不断增加，心肌收缩增强，心律加快。当任氏液中的钙离子浓度较高时，肌浆中的钙离子浓度在未完全解离时便达到10-5mol/L，因此，出现心肌收缩力增强，舒张不完全，收缩基线上移。当任氏液中的钙离子浓度过高时，肌浆中的钙离子浓度在饱和状态下也无法达到10-7mol/L，因此钙离子无法与肌钙蛋白解离，心肌停搏于收缩状态，出现钙僵直。
《第三节 动物细胞》同步测试卷【初中生物人教版七年级上册】
《动物细胞》同步测试 1.小杨制作口腔上皮细胞临时装片时，在操作过程的第二步所滴的液体是（） A.清水 B.生理盐水 C.碘液 D.矿泉水 2.洋葱表皮细胞有，而人的口腔上皮没有的结构是（） A.细胞壁 B.细胞膜 C.细胞质 D.细胞核 3.鉴别一个细胞是动物细胞还是植物细胞，应检查它有无（） A.细胞核 B.细胞壁 C.线粒体 D.液泡 4.如图是植物细胞和动物细胞的结构示意图，请据图分析回答下列问题： （1）甲乙两图中，属于植物细胞的是图______ ，因为它具有______ （用图中数字作答）。（2）图中的细胞结构中，对细胞起到保护和支持作用的是[ ______ ] ______ ，DNA存在于细胞的[ ______ ] ______ 中。 （3）番茄在生长过程中，吸收含钙的无机盐较多，而对含硅的无机盐吸收却很少，这主要与甲图中[ ______ ] ______ 有关。 （4）洋葱通常呈紫色，紫色物质存在于[ ______ ] ______ 中。 （5）图中细胞结构中，植物细胞特有的能量转换器是[ ______ ] ______ ，它可以将太阳光能转变为储存在有机物中的______ 能。 5.请回答制作和观察人体口腔上皮细胞临时装片的几个问题： （1）如图中几个实验步骤，正确的操作顺序是______ （填标号）。 （2）如果要把位于视野右上方的物像移至视野的中央，应将载玻片向______ 移动；
（3）假若你所用的显微镜只有四个镜头，若想在视野中细胞数目最多，你认为应选用的镜头组合是______ 。 （4）某生按正确的操作步骤观察到口腔上皮细胞，非常激动地把显微镜推移到同桌面前看，结果视野变暗，要想在同桌面前看清物像，最应进行的操作是______ 。 （5）正确地盖盖玻片是成功制作临时装片的关键。如图所示制作临时装片时最不容易出现气泡的是（箭头代表盖盖玻片的方向）______ 。
六、心肌细胞的慢钙通道的生理功用
I Ca-L 通道普遍存在于所有心肌细胞，具有十分重要的生理意义。 慢反应心肌细胞动作电位去极化的离子流基础是 I Ca-L 的内流。快反应心肌细胞的 I Ca-L 内流又通过钙－钙释放机制（ CICR ）引起肌浆网释放 Ca 2+ ，是心肌兴奋－收缩耦联的重要环节，没有 I Ca-L 的内流，心肌停止收缩。 I Ca-L 通道的失活关闭取决于两个因素：一是细胞膜（肌膜）下的钙离子浓度，当肌浆网通过 CICR 机制释放 Ca 2+ 后，肌膜下 Ca 2+ 浓度激增，它会引起 I Ca-L 通道迅速失活关闭，这种钙诱导钙通道失活的机制在维持细胞内钙离子浓度相对稳定中十分重要，是一种负反馈机制。引起 I Ca-L 通道失活的另一个因素是膜电位的去极化，这种电压依赖性钙通道失活比较缓慢。在实验条件下，可以把这两种失活区别开来分别进行研究。 快反应心肌细胞由于缺血损伤等原因，静息电位除极，快钠通道失活，兴奋时动作电位的产生依赖 I Ca-L 的内流，动作电位幅值降低，最大去极化速率大大减
慢，因而传导速度也大为减慢，可以引起传导阻滞以及心律失常。 图 4－4 延迟后除极和触发活动 细胞膜钠－钾泵长期受抑制（如长期缺血使细胞内 ATP 缺乏、低血钾、钠－钾泵抑制药物洋地黄）可以使细胞内钠离子超载（ overload ），通过钠 / 钙交换机制引起细胞内钙超载；心率过快、大量儿茶酚胺会加重钙超载。细胞内钙超载是一个重要的致病因素，它可以诱发一种异常的内向电流——瞬时性内向电流（ transient inward current ， I TI ），后者在动作电位完成后，又诱发产生一个膜电位的除极波，称为延迟后除极（ delayed after-depolarization ，DAD ），当 DAD 的幅值达到细胞的阈电位，就可以诱发该心肌细胞 ( 心房和心室肌 ) 产生一个或几个异常的动作电位，叫做触发活动（图 4-4 ），成为异位节律的起源点，引起心律失常。
第三节观察动物细胞教案
第三节观察动物细胞课时：2课时课型：实验课 一、教学目标 1、进一步熟练制作临时装片和使用显微镜观察细胞，说明人口腔上皮细胞的基本结构，区别动植物细胞结构的主要不同点。 2、提高制作以及观察临时装片的技能。 3、设计实验、改革实验，开发自己的创新潜能，以此来体会科学探索的思想和方法是不断发展的；继续形成“胆大心细”的心理素质；在“模拟制作”活动中，提高学习生物学的兴趣。 二、重点和难点 重点：说明人口腔上皮细胞的基本结构，比较动植物细胞的相同点和不同点；提高实验能力和观察能力。 难点：制作临时装片过程中的刮取（首次观察自己身体上的细胞，学生感到既新鲜又好奇，取材关系到实验效果） 细胞结构的观察（与植物细胞相比不易观察，略有难度）； 设计实验（应用以往的学习经验，是较高层次的 三、课前准备学生：预习；铅笔，绘图纸；上课前漱口。 教师：生理盐水，稀碘液，消毒牙签，滴管，纱布，镊子，吸水纸，载玻片，盖玻片，显微镜，清水。人口腔上皮细胞的课件,不同种类的人体、动物体细胞投影片，提前制作临时装片、摆放示范镜。 四、教学过程
（一）先叫学生预习,明确预习的内容: 1 实验的步骤。2动物细胞的基本结构和特点。 （二）实验过程 1、复习：临时装片的制作方法；植物细胞的基本结构。 提出问题：①想看看自己身上的细胞吗？②人的细胞与植物细胞有什么相同和不同之处？激起疑惑：口腔上皮细胞在哪儿？怎样获得？ 2、明确学习目标 3、实验题目：观察人的口腔上皮细胞 材料用具：提出疑问：生理盐水有什么作用？ 实验中的注意事项： A取细胞时，一定先漱口，用消毒牙签的钝端 B视野的光线稍弱些，观察时选择单个的细胞进行观察 C实验完毕后，收拾好实验台 方法步骤： （1）制作人口腔上皮细胞临时装片 擦—滴—取—涂—盖—染—吸 （2）用显微镜观察人的口腔上皮细胞 观察自己制作的临时装片，然后同学间交换观察。借鉴老师摆放的示范镜。发现由于取材、染色的不同而出现的不同效果
七年级生物上册 第三节动物细胞教案
教案 初一年级生物学科主备人组长/主任签字 课题第三节动物细胞课型新授 教学目标1、认识动物细胞的基本结构。说明动物细胞与植物细胞的异同点。 2、制作人的口腔上皮细胞临时装片，并使用显微镜观察。 3、尝试制作动物细胞模型。 4、认同细胞学说是19世纪自然科学三大发现之一。 重点与难点1、制作人的口腔上皮细胞临时装片，并使用显微 镜观察。 2、动物细胞的基本结构。 教具 教学流程1、创设情境、激发动机；2、学生质疑、启发引导；3、合作探究、成果展示；4、巩固训练、拓展延伸；5、体验成功，多元评价。 教学 流程 教学内容设计教学调控目标达成评价 创设情境激发动机 1、知识检测: ⑴、植物细胞的基本结构包括： ⑵、制作洋葱鳞片叶内表皮细胞 临时装片的方法步骤？ 2、设计本节课相关预学知识的 引入： ⑴、书上P46〔想一想，议一 议〕。 ⑵、观察书上P48动物细胞模 式图并比较动植物细胞的区别？ 3、由问题引导学生思考导入新课： 你已经知道了植物细胞的结 构，那么动物细胞是什么样的 呢？想看看自己身上的细胞吗？ 对1和2设计以 小组合作解决 问题，在班班通 白板上呈现，并 以小组形式展 示、交流、评价 对1熟练 掌握，学 生互动； 对2，师生 互动；对 3，引起学 生学习兴 趣 对1和2 掌握情况 按小组表 现积分评 价
学生质疑启发引导 用语言表达方式告诉学生本 节课教学目标： 1、认识动物细胞的基本结构。说 明动物细胞与植物细胞的异同。 2、制作人的口腔上皮细胞临时装 片，并使用显微镜观察。 3、尝试制作动物细胞模型。 4、认同细胞学说是19世纪自然 科学三大发现之一。 在白板上展 现，学生读，教 师讲解 指导学 生读书， 划出相关 知识点， 教材中有 的教师不 讲 教师激励 性的语言 合作探究成果展示1、设计预学知识检测： ⑴、你还记得制作植物临时装片 的步骤吗？ ⑵、标出图中植物细胞的基本结 构： 2、设计基础知识归纳梳理： ⑴、[实验]观察人的口腔上皮细 胞. ⑵、动物细胞有哪些基本结构？ ⑶、比较动植物细胞的有什么相 同点和不同点？ 3、对基础知识进行自主学习： ⑴、[实验]观察人的口腔上皮细 胞. ⑵、动物细胞的基本结构。 ⑶、自读《科学家的故事》细胞 学说是19世纪自然科学三大发 现之一。 1、小组展示， 组与组点评。 2、小组代表、 教师共同归纳 总结。 3、教师用经典 性的语言、引领 性的过渡帮助 释疑。 达到教育 教学初级 目标，这 是课堂教 学的核心 部分，教 师要使这 节课的各 项目标让 绝大多数 学生掌握 教师激励 性的语 言，对小 组展示情 况积分评 价。