盒子贴条

各种各样的盒子 教案

各种各样的盒子（科学） 活动目标： 1、认识各种各样的盒子，了解盒子的用途。 2、会按照盒子的一个共同特征进行分类，提高合作能力。 3、增强环保意识，能利废利旧参加游戏活动，提高跳跃能力。 活动准备： 各种各样的盒子若干（包括泡沐盒、纸盒、木盒、铁盒）；分类架三只 活动过程： 一、认识各种各样的盒子 1、师：小朋友你们看，这里都是什么呀？（盒子）那这些盒子叫什么名字？是什么样子的？请小朋友边看边讲。（探索一） 2、幼儿自由操作并讲述，教师巡回指导。（引导幼儿从盒子的形状、颜色、材料以及用途四方面来讲述。） 3、个别幼儿回答。 4、教师小结：小朋友真会动脑筋。知道这种盒子叫牙膏盒、这种叫饼干盒……这些盒子除了名字不一样，还有什么地方也是不一样的呢？可以用两种盒子进行比较。（探索二） 5、幼儿操作讲述，教师引导幼儿从多方面（形状、大小、颜色、质地、盒盖、用途）进行比较。 6、个别幼儿回答，教师对讲述完整，与别人不一样的给予奖励。

7、教师小结：大家讲得非常好！盒子与盒子相比，各不相同。有的大有的小；有的是正方体，有的是长方体；有的是木头制成的，有的是硬板纸做的，有的是塑料做的。种类真不少。就连盒盖也是品种繁多，有的是抽拉式的，有的是全掀式的，有的是半掀式的。这么多盒子都堆放在一块儿，很乱。下面请小朋友学习营业员阿姨将各类盒子分分类好吗？下面就以小组为单位，先讨论，再分类。要求按一个共同特征分类，看哪组小朋友想的办法多。 二、学习按盒子的一个共同特征进行分类 1、幼儿分组分类 2、提问：你们一组按什么来分的？你还会怎么分？ 三、增强环保意识，能运用盒子开展游戏 1、师：盒子到底有什么用？盒子是我们的好朋友，我们处处都要用到盒子。可是有的盒子象牙膏盒、牛奶盒用完了就扔掉了，很可惜。我们怎样来很好的利用它，使它变废为宝呢？（讨论） 2、 幼儿大胆想象、大胆讲述（做装饰品：小动物头饰、家用电器、机器人；玩游戏） 3、下面让我们一起来玩一个运盒子的游戏。要求双脚夹紧盒子往前跳，双手同时也搬运盒子。

人类K-ras基因突变检测试剂盒说明书

人类K-ras基因突变检测试剂盒（PCR-熔解曲线法）说明书 【产品名称】 通用名：人类K-ras基因突变检测试剂盒（PCR-熔解曲线法） 英文名：Diagnostic kit for Mutations of Human K-ras Gene (PCR-Melting Curve Analysis) 【包装规格】 20测试/盒 【预期用途】 K-ras基因位于12号染色体短臂上，是重要的癌基因之一，编码一种21kD 的kras蛋白，参与细胞内的信号传递，主要包括PI3K/PTEN/AKT 和 RAF/MEK/ERK信号转导途径，这些转导途径是当前肿瘤靶向药物研究的热点，靶向药物通过抑制这些途径发生药理作用。K-ras基因第12和13密码子发生突变，将导致kras蛋白变异并处于持续激活状态，使药物失效。。据中国2010版《肿瘤学临床实践指南》，在一项包含101例肺腺癌亚型细支气管肺泡癌患者的回顾性研究中，所有患者均接受厄洛替尼单药一线治疗。K-ras突变者无一例缓解（0/18），而无K-ras突变者则有20例缓解（20/62，32%），差别有统计学意义（P <0.01）。因此，指南建议，非小细胞肺癌和结直肠癌患者使用靶向药物前应进行K-ras基因突变状态的检测。 本试剂盒以人非小细胞肺癌、结直肠癌肿瘤组织切片提取的基因组DNA为检测样本，用于检测肿瘤组织K-ras基因第12，13密码子的12种体细胞突变（表1），提供突变状态的定性结果。为临床肿瘤靶向药物的个体化用药提供辅助诊断依据，本品适用于进入个体化靶向治疗疗程前的患者使用。 【检验原理】 本试剂盒基于实时PCR平台，结合了特异引物、荧光探针和熔解曲线技术，定性检测DNA样品中K-ras基因12，13密码子是否存在突变。用一对K-ras基因特异引物，该引物可

Annexin V-FITC PI细胞凋亡检测试剂盒

Annexin V-FITC/PI 细胞凋亡检测试剂盒 Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit 一、试剂盒说明 在正常细胞中，磷脂酰丝氨酸（PS ）只分布在细胞膜脂质双层的内侧，而在细胞凋亡早期，细胞膜中的磷脂酰丝氨酸（PS ）由脂膜内侧翻向外侧。Annexin V 是一种分子量为35~36kD 的Ca 2+依赖性磷脂结合蛋白，与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力，故可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。因此Annexin V 被作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。将Annexin V 进行荧光素FITC 标记，以标记了的Annexin V 作为荧光探针，利用荧光显微镜或流式细胞仪可检测细胞凋亡的发生。 碘化丙啶（Propidium Iodide, PI ）是一种核酸染料，它不能透过完整的细胞膜，但对凋亡中晚期的细胞和死细胞，PI 能够透过细胞膜而使细胞核染红。因此将Annexin V 与PI 匹配使用，就可以将处于不同凋亡时期的细胞区分开来。 本试剂盒可应用于培养细胞凋亡检测（不推荐用于检测组织样本）。 二、试剂盒组份 组份 (20 assays) (50 assays) (100 assays) 储存条件 AnnexinV-FITC 100 μL 250μL 500 μL Propidium Iodide 100 μL 250μL 500 μL Binding Buffer 10.0 mL 25 mL 50 mL 注：1、Annexin V-FITC 组份建议按需分装小份冻存于-20 ℃，避免反复冻融； 2、Propidium Iodide 和Binding Buffer 组份不用时可放置于4℃保存，Propidium Iodide 需要避光。 3、Store at -20℃ for 12 months 三、试剂盒以外自备仪器和试剂 流式细胞仪或荧光显微镜、低速离心机、微量移液器 1.5m L Microtube 、载玻片、盖玻片（荧光显微镜观察需用）、PBS 、不含EDTA 的胰酶消化液 四、使用注意事项 1. 微量试剂取用前请离心集液。 2. Annexin V-FITC ，Propidium Iodide （PI ）避光保存及使用。对于Annexin V-FITC 这个组份，建议您在收到产品之后，分装为小份避光保存于-20℃，即用即取。 3. Propidium Iodide （PI ）有毒，操作时要戴手套。 4. 本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不以应低于1×105，不推荐用于检测组织样本。 5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞，需用不含EDTA 的胰酶消化，如消化不当，可能引起假阳性，而 用细胞刮子会造成细胞粘连成团，而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中，防止进一步的损伤。 6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭，请不要固定样品。 7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同，因而流式检测的荧光补偿也不同，因此建议每 次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照，进行荧光补偿的调节。 五、 操作方法 1. 悬浮细胞离心（2000rpm 离心5min ）收集；贴壁细胞用不含EDTA 的胰酶消化收集（注：胰酶消化时间不 易过长，否则容易引起假阳性）； -20℃避光 4℃避光 4℃

一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒说明书

一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒说明书 货号：T2190 规格：20次 保存：-20oC保存，荧光标记液需避光保存。 产品简介： 细胞在发生凋亡时，会激活一些DNA内切酶，这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。细胞凋亡时抽提DNA进行电泳检测，可以发现180-200bp的DNA ladder。基因组DNA断裂时，暴露的3’-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase,TdT)的催化下加上绿色荧光探针荧光素(FITC)标记的dUTP(fluorescein-dUTP)，从而可以通过荧光显微镜或流式细胞仪进行检测，这就是TUNEL(TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling)法检测细胞凋亡的原理。 一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(One Step TUNEL Apoptosis Assay Kit)为您提供了一种高灵敏度又快速简便的细胞凋亡检测方法。对于经过固定和洗涤的细胞或组织，只要经过一步染色反应，洗涤后就可以通过荧光显微镜或流式细胞仪检测到呈现绿色荧光的凋亡细胞。 TUNEL法特异性检测细胞凋亡时产生的DNA断裂，但不会检测出射线等诱导的DNA断裂(和细胞凋亡时的断裂方式不同)。这样一方面可以把凋亡和坏死区分开，另一方面也不会把射线等诱导发生DNA断裂的非凋亡细胞判断为凋亡细胞。极少数细胞凋亡时没有DNA断裂，此时不适用TUNEL法检测。在个别类型的坏死细胞中也发现TUNEL检测呈阳性。在需要严格判断细胞凋亡的情况下，最好同时检测多个凋亡指标。产品内容： 1.TdT酶100μl 2.荧光标记液900μl 3.TdT酶稀释液(选用)500μl

自主游戏案例

盒子引发的游戏——看自主游戏活动 背景： 自从新《纲要》颁布以来，我们老师在一次又一次的学习新《纲要》后，把《纲要》的精神逐渐渗透在教育活动中。《纲要》总则“幼儿园应为幼儿提供健康、丰富的生活和活动环境，满足他们多方面发展的需要，使他们度过快乐而有意义的童年。”我们小班的孩子每天都有半个小时走进区域进行自主活动的时间。自活动开展以来，我们发现了自主游戏蕴涵的价值超出了我们的意料，孩子们从中得到了能够受益终生的宝贵经验，同时也促进了我们教师的成长。 案例描述： 在一天的自主游戏活动中，建构区里的孩子们围着一堆大大小小的盒子在玩游戏，有的在搭房子，有的在垒高，玩的不亦乐乎。依依小朋友还没有动手，她打量着这些盒子，只见她不断地打开盒子盖，往里面放小的盒子，越往里放，难度越大了，小班孩子的目测能力毕竟是有限的，她又拿来一个小盒子要放进盒子里，可是这次的盒子有点大放不进去，她看看其他的盒子换了一个更小的，嘿嘿，这次成功的放进去了，依依显然很开心，使劲的擦了擦双手，然后在小盒子里又放进两个火柴盒大小的盒子，最后一个个的把盒盖盖了起来。依依看到我在笑眯眯的看着她，就捧着大盒子来到我的面前，说“老师，这是送给你的礼物。”“是吗？你送给我的是什么礼物呀？”我赶紧接过盒子，惊喜的问她。“这里面有很多鱼呢！都是送给你的。”依依很神气的说。“是嘛，那我看看！”我蹲下来把盒子一层一层的打开了，当我打开最后一层的时候，依依笑眯眯的指着最小的两个盒子说：“这些就是送给你的小鱼。”“真的吗？谢谢你，依依！我喜欢你送的小鱼。”我抱着依依使劲的亲了她一下，我们两个抱在一起开心的笑了。 我把依依送我的礼物一层一层的打开，展示给小朋友看。小朋友们看了以后，在依依的带动下，有的孩子负责开盒盖，有的负责找大小不同的盒子，有的在装盒子，最后在我的指引下，把所有的“礼物”——盒子都整齐的叠放在了区角的柜子里了。看他们大家一起动手把盒子整理好了。我高兴的说：“今年过节不收礼，收礼还收脑白金。我收到了比脑白金还要好的礼物呢！”孩子们听到了，都围在了我的身边哈哈大笑起来。 分析与反思 只有与客观事物真实地接触，才能真正的接触知识。在自主活动中，孩子们往往会产生很多让我们成人意想不到的游戏活动来，不得不让我们佩服孩子们丰富的想象力和动手操作能力。 一、材料的投放与幼儿的自主游戏 《纲要》说要“引导幼儿利用身边的物品和材料开展活动，发现物品和材料的多种特性和功能”。小班的孩子的年龄特征决定了他们对熟悉的事物会产生兴趣，兴趣是一切活动的出发点，对于小班幼儿来说，兴趣就显得尤为重要，因此，老师必须了解幼儿的兴趣，然后从兴趣入手设计活动，选择内容。盒子是生活中常见的一种物品，孩子们对盒子都不会陌生，我们发动了家长和我们一起收集了各种各样的、大大小小的盒子投放在活动区里供幼儿游戏用。

B-raf基因突变检测试剂盒(PCR-毛细管电泳法)标准化操作流程

B-raf基因突变检测试剂盒(荧光PCR-毛细管电泳法) 标准化操作流程 1、预期用途 该产品用于定性检测确诊的结直肠癌患者石蜡包埋病理组织切片DNA的B-rafV600E 基因突变。B-raf 基因是一种癌基因，编码一种丝/ 苏氨酸特异性激酶，是RAS/RAF/MEK/ERK/MAPK 通路重要的转导因子，参与调控细胞内多种生物学事件，如细胞生长、分化和凋亡等。B-raf 基因位于7p34，长约190kb，转录mRNA 长2.5kb，编码783 氨基酸的蛋白，相对分子质量为94000-95000 Da。 研究表明，在多种人类恶性肿瘤中，如恶性黑色素瘤、结直肠癌、肺癌、甲状腺癌、肝癌及胰腺癌等均存在不同比例的B-raf 突变，B-raf 突变主要发生在Exon15 上的激活区的第1799 氨基酸上(T 突变为A)，导致编码的氨基酸由谷氨酸变成缬氨酸(V600E)，该突变能使B-raf 激酶活性提高，V600E 突变能模拟T598 和S601 两个位点磷酸化作用，使BRAF 蛋白激活。近来研究表明，对于野生型Kras、但存在B-raf 基因V600E 突变患者，抗EGFR 单抗治疗无效。2010 年版《NCCN 结直肠癌临床实践指南》中已明确指出“如K-ras 基因无突变时，需检测B-raf 基因突变，如果后者存在V600E突变，则不应该给予抗EGFR 单抗治疗。” 2、仪器配置要求 移液器，振荡器，微型离心机，生物安全柜，高速冷冻离心机，定性PCR仪，荧光定量PCR仪（ABI7500，LightCycler? 480，MX3000P，CFX-96等），微量紫外分光光度计，基因分析仪（ABI3130，ABI3500DX）。 3、耗材要求 无菌带滤芯吸头、吸水纸，离心管（1.5ml，0.5ml，0.2ml）、PCR反应管（配套荧光定量PCR仪型号）及无粉一次性乳胶手套，基因分析板。 4、责任人 基因扩增实验室室长负责技术指导和质量监督。 5、执行人 操作人员应经过专业培训，具有合格的操作技能的检验专业技术人员。 6、检测原理 本产品选取人类基因组B-raf 基因Exon 15 上设计特异性引物和探针，对扩增后的PCR 产物片段进行测序分析。使用尿苷酶(UNG)防污染体系，经加热可以选择性地降解U-DNA，以防止先前PCR 扩增产物的污染。 7、试剂来源 北京鑫诺美迪基因检测技术有限公司 8、样本要求 8.1用量：每例标本切5张(10μm)白片，连续切片，不漂洗脱蜡，直接封存于1.5ml EP管中； 8.2质量：为确保DNA提取成功率，必须选择2年以内的石蜡标本； 8.3标本收集方法：石蜡包埋病理切片样品应确定含有肿瘤病变细胞，为了保证切片组织中

凯基TUNEL细胞凋亡原位检测试剂盒

凯基TUNEL细胞凋亡原位检测试剂盒(通用)（BIOTIN标记POD法,适用于细胞、组织样本） 使用说明书 一、TUNEL制品说明 凯基TUNEL细胞凋亡检测试剂盒是用来检测细胞在凋亡过程中细胞核DNA 的断裂情况，其原理是生物素（biotin）标记的dUTP在脱氧核糖核苷酸末端转移酶（TdT Enzyme）的作用下,可以连接到凋亡细胞中断裂的DNA的3‘－OH末端，并可与连接了的辣根过氧化酶的链霉亲和素（Streptavidin-HRP）特异结合，在辣根过氧化酶底物二氨基联苯胺（DAB）的存在下，产生很强的颜色反应（呈深棕色），特异准确地定位正在凋亡的细胞，因而在普通显微镜下即可观察和计数凋亡细胞；由于正常的或正在增殖的细胞几乎没有DNA的断裂，因而没有3'-OH 形成，很少能够被染色。 本试剂盒适用于组织样本（石蜡包埋、冰冻和超薄切片）和细胞样本（细胞涂片）的凋亡原位检测。 本试剂盒特点 ●操作简便：使用Ready-to-Use型试剂，并配有Proteinase K 和DAB。 ●高灵敏度：可以单一检出初期的凋亡细胞。 ●高特异性：能特异性染色凋亡细胞。 ●快速操作：整体操作约需3小时。 ●用途广泛：可应用于组织切片、细胞样本等。 ●方便观察：使用光学显微镜观察实验结果。 ●高正确性：有阳性对照片的制备方法，可以确认试剂盒的有效性

使用注意事项 1．使用前请认真阅读本说明书，提前准备好相关试剂。 2．因本试剂盒中组分均为微量，使用前请离心集液。 3．为避免试验误差、降低试剂的损耗，建议使用精密度高的进口微量移液枪及枪头。 4． TdT 酶反应液最好在使用前根椐样本数量集中配制，再分别滴加于各样本片上，避免每个样本单独配制而产生的试剂损耗。 5. 为防止样本脱落，请使用硅烷（Silane）处理的载玻片或采用多聚赖氨酸铺片。 6. 固定好的样本可以在-20℃的70%乙醇中放置30分钟或至过夜，以改善细胞的渗透性。 7. 使用PBS清洗细胞样本时，不要直接加在细胞样本上，以防止细胞样本的脱落。 8. 进行PBS清洗时，以5分钟清洗3次为标准。 9. DAB为固体粉末，使用前加入PBS配制成20×DAB（10 mg/ml）后，按说明书显色使用。 二、TUNEL试剂盒组分 试剂盒以外自备仪器和试剂

CSS盒子模式(DIV布局)

CSS盒子模式（DIV布局） 前言 如果你想尝试一下不用表格来排版网页，而是用CSS来排版你的网页，也就是常听的用DIV 来编排你的网页结构，又或者说你想学习网页标准设计，再或者说你的上司要你改变传统的表格排版方式，提高企业竞争力，那么你一定要接触到的一个知识点就是CSS的盒子模式，这就是DIV排版的核心所在，传统的表格排版是通过大小不一的表格和表格嵌套来定位排版网页内容，改用CSS排版后，就是通过由CSS定义的大小不一的盒子和盒子嵌套来编排网页。因为用这种方式排版的网页代码简洁，更新方便，能兼容更多的浏览器，比如PDA 设备也能正常浏览，所以放弃自己之前钟爱的表格排版也是值得的，更重要的是CSS排版网页的优势远远不只这些，本人在这里就不多说，自己可以去查找相关信息。 理解CSS盒子模式 什么是CSS的盒子模式呢？为什么叫它是盒子？先说说我们在网页设计中常听的属性名：内容(content)、填充(padding)、边框(border)、边界(margin)，CSS盒子模式都具备这些属性。 CSS盒子模式 这些属性我们可以把它转移到我们日常生活中的盒子（箱子）上来理解，日常生活中所见的盒子也具有这些属性，所以叫它盒子模式。那么内容就是盒子里装的东西；而填充就是怕盒子里装的东西（贵重的）损坏而添加的泡沫或者其它抗震

的辅料；边框就是盒子本身了；至于边界则说明盒子摆放的时候的不能全部堆在一起，要留一定空隙保持通风，同时也为了方便取出嘛。在网页设计上，内容常指文字、图片等元素，但是也可以是小盒子（DIV嵌套），与现实生活中盒子不同的是，现实生活中的东西一般不能大于盒子，否则盒子会被撑坏的，而CSS 盒子具有弹性，里面的东西大过盒子本身最多把它撑大，但它不会损坏的。填充只有宽度属性，可以理解为生活中盒子里的抗震辅料厚度，而边框有大小和颜色之分，我们又可以理解为生活中所见盒子的厚度以及这个盒子是用什么颜色材料做成的，边界就是该盒子与其它东西要保留多大距离。 在现实生活中，假设我们在一个广场上，把不同大小和颜色的盒子，以一定的间隙和顺序摆放好，最后从广场上空往下看，看到的图形和结构就类似我们要做的网页版面设计了，如下图。 由“盒子”堆出来的网页版面 现在对CSS盒子模式理解多少了，如果还不够透彻，继续往下看，我会在后面举例，并延用盒子的概念来解释它。 转变我们的思路 传统的前台网页设计是这样进行的：根据要求，先考虑好主色调，要用什么类型的图片，用什么字体、颜色等等，然后再用Photoshop这类软件自由的画出来，最后再切成小图，再不自由的通过设计HTML生成页面，改用CSS排

幼儿园大班活动站立的盒子教案

幼儿园大班活动站立的盒子教案 设计意图： 在一次游戏中，一个男孩拼命想让一个头重脚轻的罐子站立起来，结果尝试了好几次都没有成功。交流的时候全班孩子帮他想办法，最后他们在罐子里灌入水，让罐子成功地站稳了。这件事给了我设计集体教学活动的灵感，并促使我进一步思考。思考之一是，在这个探索活动中幼儿最需要学习的是什么，即最重要的“核心概念”有哪些，这些核心概念应既能使幼儿理解科学的价值，又能为他们未来的科学学习做好准备。思考之二是，如何找到让幼儿感知科学概念的媒介。经过反复实验，我把一个长牙膏盒和一个短牙膏盒组合起来制作了L形小，让幼儿在玩中学，玩中悟，感知重心的作用及力的平衡。 目标：

1．尝试在L形盒子底部加入一定数量的沙袋，通过变换沙袋的位置，改变盒子的重心，观察盒子的静止稳定性。 2．通过实验学习合理预测及取材。 准备： 用废旧牙膏盒制作的两个末端分别标有红点、黑点的L形盒子(中空的、内有沙袋的各若干)，袋装细沙若干，可供幼儿站立操作的桌子若干。 过程： 一、出示盒子，导入活动 师(出示L形盒子)：看，老师带来了什么?它是什么样的? 师：它是用什么材料做的?生活中有很多废旧的东西可以再使用，今天我们就来和这个由牙膏盒变的L形盒子一起做游戏。 二、第一次探索：让空盒子站起来 师：你们觉得这个L形盒子能站起来吗?

(个别幼儿操作示范。) 师(小结)：你们真棒，发现L形盒子长的部分横躺在桌上，盒子站起来了；短的部分横躺在桌上，盒子站起来了；长的部分、 短的部分放置成人字形，盒子也站起来了。 师：现在盒子上的红点和黑点有点不服气了，它们也想朝下，让盒子站起来。你们有办法吗?如果让红点或黑点朝下，还能让盒子站立起来吗?(幼儿猜想后进行尝试。) 三、讨论：为什么红点、黑点朝下时盒子站不起来 师：你们的盒子站起来了吗?红点、黑点朝下时都不能吗? 师：你们看清楚它们是怎么倒下的吗?朝哪个方向倒的?为什么?(教师演示并尝试朝几个方向放置L形盒子，验证幼儿的猜想。)

Braf基因突变检测试剂盒说明书

人类B-raf基因V600E突变检测试剂盒（荧光PCR法）说明书 【产品名称】 通用名：人类B-raf基因V600E突变检测试剂盒（荧光PCR法） 英文名：Diagnostic kit for V600E Mutation of Human B-raf Gene(Fluorescence PCR Analysis) 【包装规格】 20测试/盒 【预期用途】 B-raf基因位于7号染色体长臂上，是一种癌基因，属RAF基因家族，有18个外显子，编码一种含783个氨基酸的B-raf蛋白，是EGFR通路RAS/RAF/MEK/MRK/MAPK中重要的转导因子，参与调控细胞生长、分化和凋亡等多种生理过程。 针对EGFR的肿瘤靶向药物通过抑制该途径发生药理作用。研究表明在非小细胞肺癌、结直肠癌等多种恶性肿瘤中存在B-raf基因突变，其中第15外显子上V600E点突变最常见，约占所有突变的90%以上，该突变导致B-raf蛋白被异常激活，从而使患者接受EGFR-TKI药物和EGFR单抗类药物治疗失效。据中国2010版《肿瘤学临床实践指南》建议，对K-raf基因检测正常的非小细胞肺癌和结直肠癌患者，应进一步检查B-raf基因的突变状态，以指导靶向药物治疗方案。 本试剂盒以人非小细胞肺癌、结直肠癌肿瘤组织切片提取的基因组DNA为检测样本，用于肿瘤组织B-raf 基因V600E点突变的定性检测，为临床肿瘤靶向药物的个体化用药提供依据。本公司尚无临床实例证实B-raf 基因突变与靶向药物的相关性，其相关性主要来自文献报道，因此本试剂盒检测结果仅用于辅助临床医生对肿瘤患者制定用药方案。 【检验原理】 本试剂盒基于实时荧光PCR平台，结合等位基因特异性扩增（ARMS）技术、野生型基因扩增抑制技术和多重PCR技术检测B-raf基因V600E突变。ARMS技术是指PCR引物的3’端末位碱基必须与其模板DNA互补才能有效扩增，通过设计特异性ARMS引物，对存在V600E突变的B-raf基因靶序列进行PCR扩增放大，并利用FAM基团标记的Taqman 探针对扩增产物进行检测。因为采用了野生型基因扩增抑制剂，使ARMS体系能够耐受更高浓度的背景野生型B-raf基因，降低了试剂盒对基因组样本的DNA浓度要求，提高了检测灵敏度。 为质控扩增体系的有效性，试剂盒设置了内质控和外质控，内质控基因是人类基因组的一个保守片段，长

自主游戏案例

自主游戏案例 LEKIBM standardization office【IBM5AB- LEKIBMK08- LEKIBM2C】

盒子引发的游戏——看自主游戏活动 背景： 自从新《纲要》颁布以来，我们老师在一次又一次的学习新《纲要》后，把《纲要》的精神逐渐渗透在教育活动中。《纲要》总则“幼儿园应为幼儿提供健康、丰富的生活和活动环境，满足他们多方面发展的需要，使他们度过快乐而有意义的童年。”我们小班的孩子每天都有半个小时走进区域进行自主活动的时间。自活动开展以来，我们发现了自主游戏蕴涵的价值超出了我们的意料，孩子们从中得到了能够受益终生的宝贵经验，同时也促进了我们教师的成长。 案例描述： 在一天的自主游戏活动中，建构区里的孩子们围着一堆大大小小的盒子在玩游戏，有的在搭房子，有的在垒高，玩的不亦乐乎。依依小朋友还没有动手，她打量着这些盒子，只见她不断地打开盒子盖，往里面放小的盒子，越往里放，难度越大了，小班孩子的目测能力毕竟是有限的，她又拿来一个小盒子要放进盒子里，可是这次的盒子有点大放不进去，她看看其他的盒子换了一个更小的，嘿嘿，这次成功的放进去了，依依显然很开心，使劲的擦了擦双手，然后在小盒子里又放进两个火柴盒大小的盒子，最后一个个的把盒盖盖了起来。依依看到我在笑眯眯的看着她，就捧着大盒子来到我的面前，说“老师，这是送给你的礼物。”“是吗你送给我的是什么礼物呀”我赶紧接过盒子，惊喜的问她。“这里面有很多鱼呢！都是送给你的。”依依很神气的说。“是嘛，那我看看！”我蹲下来把盒子一层一层的打开了，当我打开最后一层的时候，依依笑眯眯的指着

最小的两个盒子说：“这些就是送给你的小鱼。”“真的吗？谢谢你，依依！我喜欢你送的小鱼。”我抱着依依使劲的亲了她一下，我们两个抱在一起开心的笑了。 我把依依送我的礼物一层一层的打开，展示给小朋友看。小朋友们看了以后，在依依的带动下，有的孩子负责开盒盖，有的负责找大小不同的盒子，有的在装盒子，最后在我的指引下，把所有的“礼物”——盒子都整齐的叠放在了区角的柜子里了。看他们大家一起动手把盒子整理好了。我高兴的说：“今年过节不收礼，收礼还收脑白金。我收到了比脑白金还要好的礼物呢！”孩子们听到了，都围在了我的身边哈哈大笑起来。 分析与反思 只有与客观事物真实地接触，才能真正的接触知识。在自主活动中，孩子们往往会产生很多让我们成人意想不到的游戏活动来，不得不让我们佩服孩子们丰富的想象力和动手操作能力。 一、材料的投放与幼儿的自主游戏 《纲要》说要“引导幼儿利用身边的物品和材料开展活动，发现物品和材料的多种特性和功能”。小班的孩子的年龄特征决定了他们对熟悉的事物会产生兴趣，兴趣是一切活动的出发点，对于小班幼儿来说，兴趣就显得尤为重要，因此，老师必须了解幼儿的兴趣，然后从兴趣入手设计活动，选择内容。盒子是生活中常见的一种物品，孩子们对盒子都不会陌生，我们发动了家长和我们一起收集了各种各样的、大大小小的盒子投放在活动区里供幼儿游戏用。

人类EGFR基因突变荧光PCR检测试剂盒说明书

人类EGFR基因突变荧光PCR检测试剂盒说明书 【产品名称】 通用名称：人类EGFR基因突变荧光PCR检测试剂盒 英文名称：Shuwen? Human EGFR Gene Mutation Detection Kit for Real-Time PCR 【包装规格】 7测试/盒 【预期用途】 EGFR是一种细胞膜表面的糖蛋白受体，具有酪氨酸激酶（Tyrosine Kinase，TK）活性，是原癌基因c-erbB-1（HER-1）的表达产物。EGFR 的主要信号转导途径有：PI3K-PDK 通路，RAS-RAF-MEK-ERK-MAPK 通路，PLC-γ 通路，JAK-STAT 通路。通过这些途径，将胞外信号转化为胞内信号，从而有效应对外界的信号刺激，调节细胞的生长、增殖、分化，抑制细胞的凋亡。EGFR异常调节通过多种机制促进细胞恶性转化，包括受体的过度表达、突变、生长因子-受体自分泌环的活化以及特定的磷酸酶失活，其中涉及肿瘤发生和进展的机制中最常见的是EGFR的基因突变和过度表达。 EGFR基因位于7号染色体短臂7pl2-14区，由28个外显子组成。其突变主要发生在EGFR酪氨酸激酶的ATP结合位点的编码区（第18-20外显子），研究表明，EGFR酪氨酸激酶抑制剂（例如吉非替尼、厄洛替尼和埃可替尼等）疗效与EGFR基因的突变有密切的相关性。目前已经报道大约有30种突变与吉非替尼的药物反应相关，主要是19外显子上的缺失突变和21外显子上的L858R的点突变。外显子19上747-750位氨基酸的大约20种缺失约占所有突变的45%，其中以两种delE746-A750(2235_2249del15和 2236_2250del15)最为常见，占到外显子19缺失总数的75%；外显子21上L858R的点突变占所有突变的45%左右；外显子18的3种点突变（G719X）约占5%；外显子20的突变占1%左右。另外研究发现外显子20上的T790M突变与酪氨酸激酶抑制剂药物的耐药性相关。 本试剂盒以肿瘤DNA为检测样本，提供EGFR基因突变的定性检测。本试剂盒仅为临床医生肿瘤靶向治疗药物的选择提供参考，具体临床应用时须结合实际情况进行判断，不能以本试剂盒检测结果作为临床诊断的唯一依据。 【检测原理】 本试剂盒结合特异性引物和TaqMan探针技术，用实时荧光PCR方法检测DNA样品中的EGFR突变基因。利用特异性引物对突变靶序列进行扩增，同时阻滞野生型的扩增，通过TaqMan探针对扩增产物进行检测，使得突变基因得到扩增而野生型基本不扩增，从而达到高检测特异性和高灵敏度。 【主要组成成分】 本试剂盒具体包含组分如表1 表1

碧云天 细胞凋亡-一步法TUNEL检测试剂盒

一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒 产品简介： 碧云天生产的一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(One Step TUNEL Apoptosis Assay Kit)为您提供了一种高灵敏度又快速简便的细胞凋亡检测方法。对于经过固定和洗涤的细胞或组织，只要经过一步染色反应，洗涤后就可以通过荧光显微镜或流式细胞仪检测到呈现绿色荧光的凋亡细胞。 细胞在发生凋亡时，会激活一些DNA内切酶，这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。细胞凋亡时抽提DNA进行电泳检测，可以发现180-200bp的DNA ladder。基因组DNA断裂时，暴露的3’-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT)的催化下加上绿色荧光探针荧光素(FITC)标记的dUTP(fluorescein-dUTP)，从而可以通过荧光显微镜或流式细胞仪进行检测，这就是TUNEL(T dT-mediated d U TP N ick-E nd L abeling)法检测细胞凋亡的原理。 注：FITC是fluorescein isothiocyanate的缩写，实际上大多数情况下所谓的FITC即为fluorescein。 本试剂盒有如下优点。(1) 高灵敏度：可以在单细胞水平检测到细胞凋亡，同时由于凋亡早期就有DNA断裂，可以检测到早期的细胞凋亡。(2) 特异性：TUNEL检测时通常更容易标记凋亡细胞，而不容易标记坏死细胞。(3) 快速：仅需约1-2个小时即可完成。(4) 方便：只需一步染色反应，洗涤后即可观察，不必使用二抗等进行多步操作。(5) 应用范围广：可以用于检测冷冻或石蜡切片中的细胞凋亡情况，也可以检测培养的贴壁细胞或悬浮细胞的凋亡情况。 TUNEL法特异性检测细胞凋亡时产生的DNA断裂，但不会检测出射线等诱导的DNA断裂(和细胞凋亡时的断裂方式不同)。这样一方面可以把凋亡和坏死区分开，另一方面也不会把射线等诱导发生DNA断裂的非凋亡细胞判断为凋亡细胞。 极少数细胞凋亡时没有DNA断裂，此时不适用TUNEL法检测。在个别类型的坏死细胞中也发现TUNEL检测呈阳性。在需要严格判断细胞凋亡的情况下，最好同时检测多个凋亡指标。 本试剂盒足够检测20个样品。 保存条件： -20℃保存，荧光标记液需避光保存。 注意事项： 需自备用于洗涤细胞的PBS或HBSS，用于封片的抗荧光淬灭封片液(P0126)，用于固定的4%多聚甲醛或向碧云天订购免疫染色固定液(P0098)，同时需自备含0.1％ Triton X-100的PBS或向碧云天订购免疫染色洗涤液(P0106)。 如果用于石蜡切片的检测，需自备蛋白酶K，二甲苯。蛋白酶K(ST533)可以向碧云天订购。 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 使用说明： 1.对于贴壁细胞或细胞涂片： a.PBS或HBSS洗涤一次。 b.如果细胞贴得不牢，可以干燥样品使细胞贴得更牢。 c.用4%多聚甲醛或碧云天生产的免疫染色固定液(P0098)固定细胞30-60分钟。 d.用PBS或HBSS洗涤一次。 e.加入含0.1％ Triton X-100的PBS或碧云天生产的免疫染色洗涤液(P0106)，冰浴孵育2分钟。 f.转步骤5。 2.对于悬浮细胞或细胞悬液： a.收集细胞(不超过200万细胞)，PBS或HBSS洗涤一次。 b.用4%多聚甲醛或碧云天生产的免疫染色固定液(P0098)固定细胞30-60分钟。为防止细胞聚集成团，宜在侧摆摇床或 水平摇床上缓慢摇动的同时进行固定。 c.用PBS或HBSS洗涤一次。

4399游戏盒常见问题解答

4399游戏盒常见问题解答 返回首页 为什么下载的游戏不能玩？ 情况比较复杂，且听我慢慢道来：单机游戏，是有“门槛”的，当然，我们很少遇到这些门槛，即使遇到了，大多是游戏也会照顾最主流的用户，也就是不更换硬件的情况下，大多数游戏是可以正常运行的（古董电脑除外）；但硬件的性能终归是有上限的，当游戏的要求高于你电脑的这个上限，那就自然玩不成了...这是谁也无法逃避的问题，就像玩最新的极品飞车、星际争霸2、以及未来要面世的暗黑III为什么要买新机器的原因... 我知道原因了！我要下载单机游戏，点击这里 正视“门槛”，查明原因解决问题： 造成我们玩不了某个游戏的原因，主要有三个方面： 1、硬件限制：即您硬件的高低，众所周知，游戏运行需要耗用较高的系统资源，如果硬件配置过低、过老，例如不支持3D加速或3D机能较弱，部分游戏就会出现丢帧、跳帧、卡机、甚至黑屏无法运行的情况，如果确定硬件还说得过去，那接下来检查驱动是否有新版本也很重要，因为驱动在更新时也会不断修正用户使用时遇到的问题，新版驱动往往能更好的支持大型应用和游戏。 2、系统限制：Windows在爆发之后，历经很多版本，而游戏也是在不同环境下开发的，虽然每次升级Windows，微软官方都会宣称支持XXX款新硬件，向下兼容XXX版本，但每次总会有一部分软件在新版Windows中无法正常运行，反之，也会有新版的软件在旧版Windows下不能运行的情况，游戏也不例外，那我们能怎么做呢，把各种版本的Windows装全自然很不现实，那就选适合自己操作系统的游戏来玩吧。 3、环境限制：常玩游戏的朋友肯定听说过DirectX、Visual C++运行时组件、.NET Framework、openALwEAX……等等环境支持软件，很多游戏都需要上述中的一款或几款正确安装后才能运行，缺少的话，轻则影响游戏效果，重则根本无法运行游戏，下面我注意分析一下这几款软件的用途： 简单地说，是微软自家提供的加速程序，基本上用到3D效果的游戏都需要它的支持（不绝对，用不到3D效果的很多游戏也需要它支持音效部分）。它可以让windows为平台的游戏或多媒体程序获得更高的执行效率，是环境软件里最重量级的一款，通过安装新版DirectX可以解决您遇到的大部分问题，想了解详细可以看这里：https://www.360docs.net/doc/b24562077.html,/view/15762.html，目前最新版本为DirectX 11，创建在最新的Windows 7上。 立即下载(XP系统) | 立即下载(Win7/Vista) .NET Framework，这个很难用直白的语言表述用途了，是支持生成和运行下一代应用程序和XML Web services的内部Windows组件。是用于Windows的新托管代码编程模型。它强大功能与新技术结合起来，用于构建具有视觉上引人注目的用户体验的应用程序，实现跨技术边界的无缝通信，并且能支持各种业务流程。

细胞周期与细胞凋亡检测试剂盒(PI法)

细胞周期与细胞凋亡检测试剂盒(PI法) 产品简介： Leagene细胞周期与细胞凋亡检测试剂盒(Cell Cycle and Apoptosis Analysis Kit)是一种采用经典的碘化丙啶染色(PI staining)方法进行细胞周期与细胞凋亡分析的检测试剂盒。碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)是一种可以嵌合到双链DNA和RNA的碱基对中与直接和的荧光染料，无碱基特异性。碘化丙啶与双链DNA结合后可以产生荧光，并且荧光强度和双链DNA的含量成正比。细胞内的DNA被Propidium Iodide染色后，可以用流式细胞仪对细胞进行DNA含量测定，然后根据DNA含量的分布情况，可以进行细胞周期和细胞凋亡分析。 碘化丙啶染色后，假设G0/G1期细胞的荧光强度为1，那么含有双份基因组DNA的G2/M期细胞的荧光强度的理论值为2，正在进行DNA复制的S期细胞的荧光强度为1-2之间。凋亡细胞由于细胞核发生浓缩以及发生DNA片段化(DNA fragmentation)导致部分基因组DNA片断在染色过程中丢失，因此凋亡细胞碘化丙啶染色后呈现明显的弱染，即荧光强度小于1，在流式检测的荧光图上出现所谓的sub-G1峰，即凋亡细胞峰。 细胞凋亡时，流式细胞检测可呈现亚二倍体核型的特征，根据光散射的特点，PI染色可以区分细胞凋亡和细胞坏死的细胞峰型。细胞凋亡时，出现凋亡细胞皱缩、染色质浓缩、核碎裂，产生凋亡小体，使细胞的前向光散射低于正常。在细胞凋亡的早期，细胞对前向角光散射的能力显著降低，对侧向光散射的能力增加或没有变化。在细胞凋亡的晚期，前向和侧向光散射的信号均降低。细胞坏死时细胞多表现为细胞肿胀，因此前向光散射高于正常，对侧向光散射高于正常。 Leagene Cell Cycle and Apoptosis Analysis Kit经常用于培养的贴壁或悬浮细胞的细胞周期与细胞凋亡检测，亦可用于区分细胞凋亡和细胞坏死。该试剂盒检测细胞含量范围一般为0.1～1×106之间。 主要成分：

幼儿园中班语言教案：瓶罐盒子玩游戏

幼儿园语言新课程标准教材语言教案( 2019 — 2020学年度第二学期 ) 学校： 年级： 任课教师： 幼儿园教案 / 幼儿园中班 / 幼儿园中班游戏教案 编订：XX文讯教育机构

中班语言教案：瓶罐盒子玩游戏 教材简介:本教材主要用途为学习语言这门课程，可以让学生锻炼大脑思维、提高思维能力、增加自信心、提升自身魅力，并增加就业中的竞争力，本教学设计资料适用于幼儿园幼儿园中班语言科目, 学习后学生能得到全面的发展和提高。本内容是按照教材的内容进行的编写，可以放心修改调整或直接进行教学使用。 活动目标： 1.知道瓶罐盒子的用处，不随意丢弃。 2.体验边手工粘贴边念儿歌的乐趣； 3.乐意用普通话大胆、清楚地朗诵儿歌。 活动重点： 用普通话大胆、清楚的朗诵儿歌。 活动难点： 注意个别孩子在边手工粘贴边念儿歌的困难。 活动准备： 1.瓶子、罐子、盒子若干，瓶盖多个（贴好双面胶），海绵纸（剪成条状，把瓶盖贴在上面）,糖果，玩具，包装好的盒子，手工吉他。 2.教学cd，录音机。

3.字卡（盒子、糖果、门帘、吉他）。 4.轻快的音乐。 活动过程： 1.听轻快音乐入活动室 2.播放cd，请幼儿认真听。 3.学习儿歌,《瓶罐盒子玩游戏》。 ——糖果玩具分别装进瓶子里。 “瓶罐盒子别丢弃，装了糖果和玩具，” ——拿出穿好的瓶盖门帘，把盒子堆起来。 “穿成门帘真有趣，堆成城堡玩游戏，” ——拿出手工吉他，“哇，还可以做成吉他哦。” “做成吉他弹歌曲，” ——出示包装好的盒子，“盒子变成礼物哦，送给谁呀？”“包装礼物送给你。” 4.认读字卡，请小朋友把字卡正确地放到对应的物体上。 5.教小朋友学儿歌，播放cd请小朋友一起跟着录音机一起读。

细胞凋亡-Hoechst染色试剂盒

细胞凋亡-Hoechst 染色试剂盒 简介： 细胞凋亡-Hoechst 染色试剂盒(Hoechst Staining Kit)是一种采用经典的Hoechst33258进行细胞凋亡检测的快速简便的试剂盒。当细胞发生凋亡时，染色质会固缩，Hoechst33258染色后在荧光显微镜下观察，正常细胞的细胞核呈正常的蓝色，而凋亡细胞的细胞核会呈致密浓染，或呈碎块状致密浓染，颜色有些发白。Hoechst Staining Kit 经常用于培养的贴壁或悬浮细胞以及组织切片的细胞凋亡检测。该试剂盒检测细胞含量范围一般为0.1～1×106之间。 组成： 操作步骤(仅供参考)： (一)贴壁细胞 1、取洁净盖玻片在70%乙醇中浸泡5分钟或更长时间，无菌超净台内吹干或用无菌的PBS 或生理盐水洗涤3次，再用细胞培养液洗涤1次。 2、加入干预条件使细胞发生凋亡后，吸尽培养液，加入Hoechst 固定液0.5ml 。 3、去除固定液，用PBS 或生理盐水洗，吸尽液体。洗涤时宜用摇床，或手动晃动。 4、加入Hoechst 33258染色液0.5ml 孵育。也宜用摇床，或手动晃动数次。 5、弃染色液，用PBS 或生理盐水洗，吸尽液体。洗涤时宜用摇床，或手动晃动。 6、滴一滴抗荧封片剂于载玻片上，盖上贴有细胞的盖玻片，让细胞接触封片剂，尽量避免气泡。 7、荧光显微镜可检测到呈蓝色的细胞核。激发波长350nm 左右，发射波长460nm 左右。 (二)悬浮细胞 1、离心收集细胞样品于1.5ml 离心管内并弃液，加入Hoechst 固定液0.5ml ，缓缓悬起细胞固定。 2、低速离心去除固定液，用PBS 或生理盐水洗。洗涤时手动晃动数次。 3、低速离心离心后吸去大部分液体保留约50μl 液体，再缓缓悬起细胞，滴加至载玻片上， 编号 名称 DA0032 100T Storage 试剂(A): Hoechst 固定液 50ml RT 试剂(B): Hoechst 染色液 50ml -20℃ 避光 试剂(C): 荧光封片剂 5ml 4℃ 避光 使用说明书 1份

幼儿园大班健康活动：好玩的盒子教学设计

新修订幼儿园阶段原创精品配套教材 大班健康活动：好玩的盒子教材定制 / 提高课堂效率 /内容可修改 Big class health activities: fun boxes 教师：风老师 风顺第二幼儿园 编订：FoonShion教育

大班健康活动：好玩的盒子 活动目标: 1、发展幼儿的创造思维，在玩中感受健康活动的快乐。 2、训练幼儿有秩序地进行活动，在活动中提高幼儿的综合能力。 3、充分发挥幼儿的主动性，体现同伴间的合作精神。 活动准备：衫衣盒子人手一份。 活动过程：一、出示盒子 1、提问 师：小朋友，知道这是什么吗？ 幼：盒子 师：是的，这些盒子是装衣服用的，是衫衣盒子。 这些衫衣盒子想和我们小朋友玩游戏，看看哪个小朋友能想出更多好玩的办法来，好吗？ 2、幼儿自由玩 （1）教师在幼儿活动中观察幼儿的玩法，抓住一些新颖的玩法，让全体幼儿跟着学做。 （2）教师提醒幼儿除了一个人玩，还可以和同伴一起玩，

让幼儿想出更多的玩法，初步尝试同伴合作的愉快。 3、交待要求，幼儿进行场境设置。 集队，分四组。 师：刚才老师接到了个电话，是冬爷爷打来的。冬爷爷说他的服装店生意特别好，衣服快卖完了，冬爷爷年纪大了，想请我们小朋友帮他进货，你们愿意吗？ 在进货的路上，我们会沿着阶梯上山，再过一座独木桥，还要越过一条小河，才能到进货的地方。每组选出一位队长，先商量一下，然后用小朋友手里的盒子把进货的路用摆出来，看哪组摆得又快又好。 在幼儿摆放的过程中，教师重点指导摆放的方法，在教师的引导下，让幼儿自己摆出正确的路。在摆放不合理的情况下，让幼儿自己改过。讲评时重点指出一组，在修改合理后，提示其余三组幼儿参考这一组的摆法，达到路线统一。 4、交待游戏要求，有秩序地进行游戏。 师：经过小朋友的努力，已经把进货的路摆出来了，我们四组进行比赛，看哪组小朋友先帮冬爷爷把货进回来。在游戏前先听清进货的要求：在上山的过程中，我们要沿着阶梯，跳着上山，还要安全地走过独木桥，不踩湿鞋的情况下过小河，请你们想想，过河时怎么才能不把自己的鞋踩湿了呢？ 引导幼儿说出留两个盒子踩在脚底下过河。