REAL-TIME PCR技术与传统培养法检测肠道沙门菌和志贺菌的比较

志贺氏菌的危害程度评估报告

志贺氏菌的危害程度评估报告 一、生物学特性 志贺氏菌属（Shigella）的细菌（通称痢疾杆菌），是细菌性痢疾的病原菌人类对痢疾杆菌有很高的易感性。在幼儿可引起急性中毒性菌痢，死亡率甚高。 志贺氏菌和大肠杆菌都属于肠杆菌科，根据DNA杂交研究结果表明，志贺氏菌属的四个种和大肠杆菌属在生化上是难以区分的，因为有产气的志贺氏菌，也有乳糖阴性、不产气、不运动的大肠杆菌，有些大肠杆菌也能引起痢疾状的腹泻。 志贺氏菌属细菌的形态与一般肠道杆菌无明显区别，为革兰氏阴性杆菌，长约2-3μm ,宽0.5-0.7μm 。不形成芽胞，无荚膜，无鞭毛，不运动，有菌毛。 志贺氏菌需氧或兼性厌氧。营养要求不高，能在普通培养基上生长，最适温度为37℃，最适pH为6.4-7.8。37℃培养18-24小时后菌落呈圆形、微凸、光滑湿润、无色、半透明、边缘整齐，直径约2nm，宋内氏菌菌落一般较大，较不透明，并常出现扁平的粗糙型菌落。在液体培养基中呈均匀浑浊生长，无菌膜形成。根据抗原构造的不同，按最新国际分类法，将本属细菌分为四个群、39个血清型。 二、危害程度分类 根据中华人民共和国卫生部制定《人间传染的病原微生物名录》该菌危害程度为第三类。 三、致病性和感染剂量 志贺氏菌引起的细菌性痢疾，主要通过消化道途径传播。根据宿主的健康状况和年龄，只需少量病菌（至少为10～100个细胞）进入，就有可能致病。致病因素：志贺氏菌的致病作用，主要是侵袭力、菌体内毒素个别菌株能产生外毒素。志贺氏菌引起的细菌性痢疾可分为两类一类是急性细菌性痢疾：又分急性典型、急性非典型、急性中毒性菌痢三型；二类是慢性细菌性痢疾：又分慢性迁延型、慢性隐伏型、慢性急性发作型三型。病后有一定的免疫力，但免疫期短，也不稳定。 四、暴露的潜在后果 暴露后可能引起感染，菌量大时可使实验人员显性感染，菌量很少时常呈暂时的带菌状态。被感不染后，成为传染源，可能对周围及环境造成污染，应及时得到控制。

抗菌药物临床合理应用考试公共课程(答案最全)华医

1.最常见的真菌性疾病是（）A、皮肤念珠菌病 2.乳胶凝集试验是隐球菌病最快速和最有诊断价值的诊断方法,敏感性可高达: D.99% 3.抗菌药物的联合应用指征不包括:.单一抗菌药物即能有效控制的严重感染 4.肾功能减退者不宜应用的抗菌药物为:.四环素、呋喃妥因 5.引起瓣膜异常患者出现亚急性细菌性心内膜炎最常见的致病菌是:.草绿色链 球菌 6.克雷伯菌属是条件致病菌，临床感染中以哪种细菌多见:.肺炎克雷伯菌 7.对血液和无菌体液培养均应以急诊报告对待，实行三级报告制度，第一级报 告应在初始培养出现阳性报告后:.60～120min 8.对CAP可选择的药物主要有哪三大类:.β内酰胺类、大环内酯类、新型喹诺 酮类 9.机械通气相关性肺炎（V AP）是指气管插管机械通气多长时间后并发的肺 炎:.48～72h 10.流行性出血热发热期发生毛细血管损害，出现“三痛”，即:.头痛、腰痛和眼 眶痛 11.HFRS最有效最基本的治疗措施是:.综合液体疗法 12.狂犬病从临床发病到死亡的平均持续时间为:.7天 13.利福喷汀为长效利福霉素衍生物，其消除半衰期约:.30h 14.以下哪些药物不易保留于血浆D.喹诺酮类 15.白血病化疗后粒缺感染没有明确的临床表现，什么常常为唯一的临床体征:. 发热 16.哌拉西林、头孢哌酮和头孢曲松在胆汁中的浓度均可达到血药浓度的:.10倍 以上 17.肝移植后早期深部曲霉病较少发生，但一旦发生，死亡率达:.60％～70％ 18.盆腔感染或盆腔炎症性疾病最常见的是:.输卵管炎 19.MOF病人的死亡率随着受累器官或系统数目的增多而升高，二个器官功能 衰竭死亡率为:.60％ 20.新型隐球菌脑膜炎抗真菌治疗应首选:.两性霉素B 21.流行性出血热多尿期多发生于病程的:.第9～14天 22.我国哪种细菌引起的痢疾为常见:.福氏志贺菌 23.头孢吡肟和头孢匹罗属于:.第4代头孢菌素类 24.治疗衣原体感染的主要药物不包括:.氨基糖甙类 25.我国存在的新生隐球菌以哪一型最多见:.A型 26.以下不能通过血脑屏障的抗菌药物是:多粘菌素 27.以下属于Ⅲ类（污染）切口的是:.新鲜开放性创伤手术 28.有厌氧菌参与的胆道感染多见于曾接受过胆道手术的患者，厌氧菌中以哪种 细菌占多数:.拟杆菌 29.急性胆囊炎首选的检查方法是:.B超 30.自发性腹膜炎最常见的致病菌是:.革兰阴性杆菌 31.艾滋病患者发生弓形体感染首选的治疗方案为:.乙胺嘧啶+磺胺嘧啶 32.胎传梅毒系母体的梅毒螺旋体通过胎盘进入胎儿体内，多发生于:.妊娠4月 后 33.以下不属于β内酰胺类抗菌药物的是:.氨基糖甙类 34.关于葡萄球菌的形态和培养特性，以下说法错误的是:.有鞭毛、有芽孢，除

沙门菌属和志贺菌属检验

清于载玻片一端，再取少许待测菌与之混合，同时在玻片另一端取待测菌与生理盐水混合对照。结果：对照呈均匀混浊，待检菌与志贺菌四种多价血清混合后，数分钟内出现肉眼可见的颗粒状凝集物即为阳性。继之用A、B、C、D群最常见的单价血清凝集定种。 结果判断、解释和报告： ①分离培养未见可疑菌落或经鉴定不符合志贺菌属鉴定依据者可报告“未分离到志贺菌属细菌”。 ②经分离鉴定后符合鉴定依据者，可报告“分离出××志贺菌”，若进一步做多种生化反应及因子血清分型后，可报告：“分离出××志贺菌×型”。 (2)沙门菌属的分型鉴定：如果生化反应及形态学检查疑为沙门菌，可选用沙门菌的多价诊断血清进行玻片凝集。首先选用A～F组多价“O”诊断血清做玻片凝集试验。在试验时应以生理盐水作对照。血清凝集试验在5～10min内不出现凝集者可确定为阴性。但若生化反应比较典型，应考虑选用Vi凝集试验。若凝集，则用无菌生理盐水将菌洗下，制成浓厚的悬液，加热100℃、30min，再与A～F组多价“O”诊断血清做凝集试验。若与A～F组多价“O”血清发生凝集，应再与沙门菌单价因子血清分别做玻片凝集试验，以确定该菌株属于哪一组。一般先选用本地区检出率最高菌型的相应血清做玻片凝集反应。 若已确定哪一沙门菌种后，再分别先用H因子血清检查第I相抗原，然后检查第Ⅱ相抗原，最后确定该菌种属于哪一型沙门菌。 结果判断、解释和报告： ①分离培养未发现可疑菌落或经鉴定不符合沙门菌属细菌鉴定依据者，可报告“未分离出沙门菌”。 ②生化反应符合沙门菌、玻片凝集试验结果阳性，可初步报告为：“分离到××沙门菌”，或“×群沙门菌”。 5．肥达试验 (1)原理：用已知的伤寒沙门菌O、H抗原，甲、乙型副伤寒沙门菌的H抗原(PA、PB)与肠热症患者血清做定量试管凝集试验，以出现“2+”凝集的最高血清稀释度为效价，测定相应抗体含量，用以辅助诊断肠热症。 (2)试验方法：为单管稀释法。准备4排小试管，每排7支并标记，另取中号试管1支，加生理盐水3．8ml及被检血清O．2ml，混匀，即为1：20稀释，总量为4ml。然后取出2ml按每管分别放人各排小试管中的第1支试管中。再于上述中号试管内加生理盐水2ml混匀，此种血清即为1：40稀释，吸取此稀释度血清2ml，按每管分别加到各排小试管中的第2支试管中。以此类推连续稀释到各排小试管第6支试管为止，第7支小试管只加入生理盐水做阴性对照。然后按表2-5操作。 表2-5血清学试验(肥达试验)方法

沙门菌属和志贺菌属检验

沙门菌属和志贺菌属检验 步骤和方法 1 .形态观察 (1)革兰染色：沙门菌属细菌为革兰阴性细长杆菌。志贺菌属细菌为革兰阴性杆菌，散在分布。 (2)观察鞭毛染色标本片：镜下可见沙门菌属细菌具有周鞭毛。志贺菌属细菌无鞭毛。 2?菌落观察 (1)沙门菌属：将本菌接种在SS MAC平板上经35 'C孵育18?24h。由于本菌不分解乳糖并产碱，故在SS和MAC 平板上形成无色、半透明、光滑湿润、凸起的小菌落，产生H2S的菌落可在SS平板上形成中心带黑褐色的小菌落。 (2)志贺菌属：将本菌接种在SS和MAC平板上经35C孵育18?24h。由于志贺菌不分解乳糖，宋内志贺菌某些菌株可迟缓发酵乳糖，故其在SS平板和MAC平板上形成无色透明的、中等大小的菌落。除宋内志贺菌菌落外均为光滑型菌落。 3.生化反应氧化酶试验：方法同大肠埃希菌。沙门菌属和志贺菌属细菌氧化酶试验均为阴性。初步试验鉴定：挑取志贺菌和沙门菌的单个菌落分别接种在KIA、MIU和硝酸盐培养基上，经35C孵育18?24h，同时做触酶试验。其结果见表2—4。 最终鉴定：须做全面生化反应和血清学试验。 4 .血清学试验 (1)志贺菌属的分型鉴定：凡生化反应符合志贺菌属者均需做血清学鉴定。取1环志贺菌四种多价血清于载玻片 一端，再取少许待测菌与之混合，同时在玻片另一端取待测菌与生理盐水混合对照。结果：对照呈均匀混浊，待检菌 与志贺菌四种多价血清混合后，数分钟内出现肉眼可见的颗粒状凝集物即为阳性。继之用 A B、C D群最常见的单价 血清凝集定种。 结果判断、解释和报告： ①分离培养未见可疑菌落或经鉴定不符合志贺菌属鉴定依据者可报告“未分离到志贺菌属细菌”。 ②经分离鉴定后符合鉴定依据者，可报告“分离岀XX志贺菌”，若进一步做多种生化反应及因子血清分型后，可报告：“分离岀XX志贺菌X型”。 (2)沙门菌属的分型鉴定：如果生化反应及形态学检查疑为沙门菌，可选用沙门菌的多价诊断血清进行玻片凝集。 首先选用A?F组多价“ O诊断血清做玻片凝集试验。在试验时应以生理盐水作对照。血清凝集试验在5?10min内不 岀现凝集者可确定为阴性。但若生化反应比较典型，应考虑选用Vi凝集试验。若凝集，则用无菌生理盐水将菌洗下， 制成浓厚的悬液，加热100 C、30min，再与A?F组多价“ O诊断血清做凝集试验。若与A?F组多价“ O血清发生凝集，应再与沙门菌单价因子血清分别做玻片凝集试验，以确定该菌株属于哪一组。一般先选用本地区检岀率最高菌型的相应血清做玻片凝集反应。 若已确定哪一沙门菌种后，再分别先用H因子血清检查第I相抗原，然后检查第H相抗原，最后确定该菌种属 于哪一型沙门菌。 结果判断、解释和报告： ①分离培养未发现可疑菌落或经鉴定不符合沙门菌属细菌鉴定依据者，可报告“未分离岀沙门菌”。 ②生化反应符合沙门菌、玻片凝集试验结果阳性，可初步报告为：“分离到XX沙门菌”，或“X群沙门菌”。 5 ?肥达试验 （1）原理：用已知的伤寒沙门菌O H抗原，甲、乙型副伤寒沙门菌的H抗原（PA、PB）与肠热症患者血清做定量

传染病学重点笔记——传染病学填空题

㈠填空题㈡填空题 1. 慢性肝炎可分为: 轻度，中度，重度。 2. 急性肝炎可分为2个类型：黄疸型，无黄疸型。 3. 重型肝炎可分为3个类型：急性重型肝炎，亚急性重型肝炎，慢性重型肝炎。 4. 乙型肝炎病毒复制及传染性的最直接、特异和敏感的指标是HBV DNA。 5. 在我国最常见的丙型肝炎病毒基因型是1b型。 6. 各型肝炎的基本病理改变表现为肝细胞变性、坏死，同时伴有不同程度的炎症细胞浸润，间质增生和肝细胞再生。 1.痢疾杆菌释放的内毒素是引起全身反应如发热、毒血症及休克的重要因素。A群痢疾志贺菌还可产生外毒素，具有神经毒、细胞毒与肠毒素作用，而引起更严重的临床表现。 2. 中毒性菌痢分为休克型、脑型、混合型三型。 3. 痢疾杆菌分为四个群，即A群痢疾志贺菌、B群福氏志贺菌、C群鲍氏志贺菌、D群宋内志贺菌。目前我国流行以B群福氏志贺菌为主。 4. 慢性菌痢临床分为3型即慢性迁延型、慢性隐匿型、急性发作型。 ㈡填空题 1. EHFV基因L编码聚合酶, M编码膜蛋白,Ｓ编码核衣壳蛋白。 2. 我国EHFV主要有两种血清型即Ｉ型汉滩病毒和Ⅱ型汉城病毒，分别由野鼠和家鼠传播。 ★EHF病程可分为发热期，低血压休克期，少尿期，多尿期，恢复期等五期。 ★EHF少尿期的治疗原则为稳定内环境，促进利尿, 导泻和放血疗法及透析治疗。 ㈠填空题 ★流脑的潜伏期为1～10天，一般为2～3天。 ★暴发败血症休克型流脑的病原治疗首选青霉素。 ★确诊流脑的依据是血液、脑脊液或其它未污染的体液中分离到奈瑟葡萄球菌。

4. 密切接触流脑者医学观察7天。 ㈡填空题 ★伤寒的临床特征包括：①持续发热；②相对缓脉；③神经系统中毒症状与消化道症状；④玫瑰疹；⑤肝脾肿大；⑥白细胞减少。 ★伤寒极期的典型表现包括：①发热；②消化系统症状；③循环系统症状； ④循环系统症状；⑤皮疹；⑥肝脾肿大。 3. 能培养分离到伤寒杆菌的标本可来自：①血液；②骨髓；③粪便；④尿液；⑤玫瑰疹。 ㈡填空题 1. 狂犬病毒含五种主要蛋白即糖蛋白，核蛋白, 聚合酶，磷蛋白和膜蛋白。 ★被犬咬伤后的处理，首先应用20%肥皂水或0.1%新洁尔灭反复冲洗。 ★狂犬病的确诊可通过分离病毒，检测组织内的病毒抗原，RT-PCR检测病毒核酸及脑组织染色找内基小体。 4. 狂犬病毒的糖蛋白蛋白决定了其嗜神经性。 ★我国目前主要采用地鼠肾细胞疫苗用于狂犬病预防接种。 ㈡填空题 1. 霍乱的发病机制主要是由霍乱肠毒素引起的分泌性腹泻。 2. 病人和带菌者是霍乱的主要传染源，在霍乱的传播中，以水的作用最为突出。 3. 霍乱的最常见的严重并发症为急性肾功能衰竭。 4. 霍乱的治疗原则为严格隔离、及时补液、辅以抗菌和对症治疗。 5. 对霍乱病人应隔离治疗，直至症状消失后6天，并隔日粪便培养一次，连续3次阴性方可解除隔离。对接触者应严密检疫5天。 ㈡填空题 1. 钩体病的主要传染源是野鼠和猪。 2. 钩体病的基本病理损害是毛细血管损伤所致的严重功能紊乱。 3. 钩体病临床表现类型和严重程度与感染钩体的类别、毒力、数量有较大关系。 4. 钩体病病原治疗首选抗生素是青霉素。

20041126_志贺氏菌属

志贺氏菌属 志贺氏菌属（Shigella）的细菌（通称痢疾杆菌），是细菌性痢疾的病原菌。临床上能引起痢疾症状的病原生物很多，有志贺氏菌、沙门氏菌、变形杆菌、大肠杆菌等，还有阿米巴原虫、鞭毛虫、以及病毒等均可引起人类痢疾，其中以志贺氏菌引起的细菌性痢疾最为常见。人类对痢疾杆菌有很高的易感性。在幼儿可引起急性中毒性菌痢，死亡率甚高。 一、生物学性状 志贺氏菌属细菌的形态与一般肠道杆菌无明显区别，为革兰氏阴性杆菌，长约2-3μm ,宽 m 。不形成芽胞，无荚膜，无鞭毛，有菌毛。DNA的G+C为49-53克分子%（Tm法）。 需氧或兼性厌氧。营养要求不高，能在普通培养基上生长，最适温度为37℃，最适pH为。37℃培养18-24小时后菌落呈圆形、微凸、光滑湿润、无色、半透明、边缘整齐，直径约2nm，宋内氏菌菌落一般较大，较不透明，并常出现扁平的粗糙型菌落。在液体培养基中呈均匀浑浊生长，无菌膜形成。 本菌属都能分解葡萄糖，产酸不产气。大多不发酵乳糖，仅宋内氏菌迟缓发酵乳糖。靛基质产生不定，甲基红阳性，VP试验阴性，不分解尿素，不产生H S。根据生化反应可进行初步分类。 2 志贺氏菌属的细菌对甘露醇分解能力不同，可分为二大组。 A、不分解甘露醇组：主要为志贺氏菌。又根据能否产生靛基质，进一步分靛基质阳性（1、3、4、5、6、9、10型）和靛基质阴性（2、7、8型）的志贺氏痢疾菌。 B、分解甘露醇组：包括福氏、鲍氏、宋内氏菌。再按乳糖分解情况，分为迟缓分解乳糖的宋内氏和不分解乳糖的福氏和鲍氏菌。后者进一步再根据靛基质产生与否，分靛基质阳性（福氏菌1、2、3、4、5型和鲍氏菌5、7、9、11、13、15型）和靛基质阴性（福氏菌6型和鲍氏菌1、2、3、4、6、8、10、12、14）二类（见表一） 表一志贺氏菌属生化反应的分类 葡萄糖（+） 甘露醇（-）甘露醇（+） 志贺氏菌志贺氏菌乳糖（-）乳糖（+）（1、3、4、（2、7、8型） 5、6、9、10型）靛基质（-）靛基质（+）靛基质（-） 福氏菌6型福氏菌（1、2、宋内氏菌 鲍氏菌（1、2、 3、4、5型）， 3、4、6、8 鲍氏菌（5、7、9、 10、12、14型） 11、13、15型） 抗原构造与分型：志贺氏菌属细菌的抗原结构由菌体抗原（O）及表面抗原（K）组成。主要抗原有三种。 型特异性抗原：型多糖抗原为菌体抗原的一种，是光滑型菌株所含有的重要

从业人员健康体检沙门氏菌、志贺氏菌检测操作程序(讨论稿)

从业人员健康体检沙门氏菌、志贺氏菌检测操作程序 一、目的 本程序用于对从业人员健康体检进行沙门氏菌、志贺氏菌检测等致病菌检测的方法，以规范操作程序，保证检测数据的有效性。 二、适用范围： 本方法适用于从人体粪便中沙沙门氏菌、志贺氏菌的分离、鉴定及保存的梯相关操作。 三、生物安全要求 标本及相应的致病菌操作必须在BSL-2生物安全实验室的生物安全柜中进行。 四、试剂及仪器设备 4.1试剂 采便盒、Cary-Blair运送培养基、亚硒酸增菌液（SF）、改良亚硒酸盐磺绿增菌肉汤（SBG）、沙门志贺培养液、木糖-赖氨酸-脱氧胆酸琼脂（XLD）、麦康凯琼脂、沙门显色培养基、结晶紫沙门培养基（YS）、三糖铁（TSI）、动力-吲哚-尿素培养基（MIU）、沙门氏菌属诊断血清、志贺氏菌属诊断血清、API20E生化试剂条、磁珠菌种保存管 4.2 仪器设备 恒温培养箱、微生物鉴定仪 五、采样方法 5.1 标本应为新鲜的或转移至Cary-Blair运送培养基的粪便或肛拭子，最优标本是转移到Cary-Blair运送培养基的粪便拭子。肛拭子

不是最佳标本，仅在病人无粪便标本时采用。 5.2 粪便标本：应采集自然排出的新鲜粪便，取稀水样、粘血样、脓血样，黏液样部分。盛于清洁、干燥、无吸水性的无菌容器，避免混入尿液、水和其他物质。 5.3肛拭标本：若无法获得粪便（如排便困难或婴幼儿），也可以采用肛拭子，即无菌棉拭子用生理盐水湿润后，插入肛门内4-5cm 处〈儿童约2-3cm），同一方向轻轻旋转2-3周。以目测能见到粪便为准。插入Cary-Blair运送培养基。 5.4 标本采集后立即送至实验室进行检测，若室温保存，不能超过1h；如不能立即送检，应放入Cary-Blair运送培养基中冷藏条件下24小时内送检。 六、检验程序 七、操作步骤

志贺菌属

志贺菌属细菌是引起人类细菌性痢疾的主要肠道病原菌之一。 一、分类 志贺菌属可用特异性抗血清将其分为4个血清群(种)：A群为痢疾志贺菌，B群为福氏志贺菌，C群为鲍特志贺菌，D群为宋内志贺菌。1989年CDC分类系统将生化反应特性相近的A、B，C群归为一群，统称为志贺菌A、B、C血清群；而将生化反应特征与之相异，鸟氨酸脱羧酶和β-半乳糖苷酶均阳性的宋内志贺菌单列出来。DNA G+C含量为49~53mol％。 二、临床意义 志贺菌属细菌的致病主要与细菌的侵袭力、内毒素和外毒素有关，志贺菌属细菌因菌毛的作用，细菌黏附于肠黏膜的表面，并侵入上皮细胞内生长繁殖，形成感染病灶，引起炎症反应。本菌属各菌株均有强烈的内毒素，由于内毒素的释放可造成上皮细胞死亡及黏膜下发炎，并形成毛细血管血栓，导致坏死、脱落和溃疡，患者出现典型的脓血便；另一方面可引起全身中毒症状(内毒素血症)，导致发热、意识障碍，甚至中毒性休克。A群志贺菌1型和2型产生的志贺毒素，ST对Vero细胞有毒性作用也称为Vero毒素VT对小鼠有强烈的致死毒性，有VT1和VT2两种。ST属VT1型。 志贺菌属细菌主要引起人类细菌性痢疾，简称菌痢，一年四季均可发病，以夏秋季节发病率最高，典型的急性菌痢表现为腹痛、腹泻、黏液脓血便、里急后重，发热等症状。小儿常可引起中毒性菌痢，患儿常无明显的消化道症状而表现为全身中毒症状，若抢救不及时，往往造成死亡。四种志贺菌中，痢疾志贺菌引起的菌痢较为严重，其他志贺菌引起的感染则相对较轻，具有自限性且很少致死。我国以福氏志贺菌和宋内志贺菌引起的菌痢最为多见。多数菌痢为散发病例，可引起人与人之间的传播。偶可因食用了被污染的水和食物而引起暴发流行。 三、生物学特性 为革兰阴性短小杆菌，菌体大小(1~3μm×(0.7~1.0)μm，无芽胞，无荚膜，无鞭毛，有菌毛。 培养特性为兼性厌氧，最适生长温度为35℃，最适pH为7.2~7.4。营养要求不高，能在普通琼脂培养基上生长，且生长良好。在肠道选择培养基上可形成乳糖不发酵、中等大小、无色透明或半透明菌落，宋内志贺菌常形成粗糙型菌落。 志贺茵属菌种有O抗原，无H抗原，部分菌种有K抗原。O抗原是分类的依据，有群特异性和型特异性两种抗原，根据生化反应和O抗原的不同，将志贺菌属分为4个血清群(A、B、C、D)和40余个血清型。O抗原耐热，加热100℃ 60分钟不被破坏。K抗原存在时能干扰O抗原与相应抗血清的凝集作用。加热100℃ 60分钟可消除K抗原对O抗原的干扰作用。

志贺氏菌检测

志贺氏菌的检验（国标法） 一、增菌 称取检样25g，加入装有225mLGN增菌液的500mL广口瓶内，固体食品用均质器以8000-10000r/min打碎1min，或用乳钵加灭菌砂磨碎，粉状食品用金属匙或玻璃棒研磨使其乳化，于36℃培养6~8h。 培养时间视细菌生长情况而定，当培养液出现轻微混浊时即应中止培养。 二、分离和初步生化试验 取增菌液1环，划线接种于HE琼脂平板或SS琼脂平板1个；另取1环划线接种于麦康凯琼脂平板和伊红美蓝琼脂平板各1个，于36℃培养18~24h。 志贺氏菌在这些培养基上呈现无色透明不发酵乳糖的菌落。 挑取平板上的可疑菌落，接种三糖铁琼脂和葡萄糖半固体各1管。一般应多挑几个菌落，以防遗漏，经36℃培养18~24h，分别观察结果。 下述培养物可以弃去： a. 在三糖铁琼脂斜面上呈蔓延生长的培养物； b. 在18~24h内发酵乳糖、蔗糖的培养物； c. 不分解葡萄糖和只生长在半固体表面的培养物； d. 产气的培养物； e. 有动力的培养物； f. 产生硫化氢的培养物。 凡是乳糖、蔗糖不发酵，葡萄糖产酸不产气(福氏志贺氏菌6型可产生少量气体)，无动力的菌株，可做血清学分型和进一步的生化试验。 三、血清学分型 挑取三糖铁琼脂上的培养物，做玻片凝集试验。 先用4种志贺氏菌多价血清检查，如果由于K抗原的存在而不出现凝集，应将菌液煮沸后再检查； 如果呈现凝集，则用A1、A2、B群多价和D群血清分别试验。 如系B群福氏志贺氏菌，则用群和型因子血清分别检查。福氏志贺氏菌各型和亚型的型和群抗原见表1。可先用群因子血清检查，再根据群因子血清出现凝集的结果，依次选用型因子血清检查。 4种志贺氏菌多价血清不凝集的菌株，可用鲍氏多价1、2、3分别检查，并进一步用1~15各型因子血清检查。如果鲍氏多价血清不凝集，可用痢疾志贺氏菌3~12型多价血清及各型因子血清检查。 四、进一步的生化试验 在做血清学分型的同时，应做进一步的生化试验，即： 葡萄糖铵 西蒙氏柠檬酸盐 赖氨酸和鸟氨酸脱羧酶 pH7.2尿素 KCN生长 水杨苷和七叶苷的分解 除宋内氏菌和鲍氏13型为乌氨酸阳性外，志贺氏菌属的培养物均为阴性结果。。必要时还应做革兰氏染色检查和氧化酶试验，应为氧化酶阴性的革兰氏阴性杆菌。生化反应不符合的菌株，即使能与某种志贺氏菌分型血清发生凝集，仍不得判定为志贺氏菌属的培养物。

细菌性痢疾

细菌性痢疾 慈禧 73岁大寿第5天时 高烧、寒战、水样便、脓血粘液便、腐肉血便，不愿离开厕所 御医鸦片缓解症状“关门留寇” 一周后丧命 概述 卫生部《2012年我国卫生事业发展情况简报》 2012年度全国法定传染病疫情概况，中国内地报告传染病发病数居前5位的是病毒性肝炎、肺结核、梅毒、细菌性阿米巴性痢疾、淋病 熟悉:传染源、传播途径 概念:细菌性痢疾，简称菌痢，是一种由痢疾杆菌引起的常见急性肠道传染病。以腹痛、腹泻、里急后重、粘液脓血便为特征，部分病例可出现发热等症状。 概述 命名：细菌性痢疾＝志贺菌病(shigellosis ） 法定传染病乙类 终年散发，夏秋季可流行 直肠、乙状结肠炎症与溃疡 腹痛、腹泻、黏液脓血便及里急后重 发热及全身毒血症 感染性休克、中毒性脑病 多数急性自愈。少数迁延呈慢性或反复发作。 病原学 生物学性状:志贺菌属于肠杆菌科志贺菌属（Shigella）。G－短小杆菌。有菌毛，无鞭毛、荚膜及芽胞，无动力。兼性厌氧，但最适宜于需氧生长。 1.病原体痢疾杆菌 属肠杆菌科志贺菌属，G–杆菌，无鞭毛 2.抗原分型目前分为4群47个血清型 痢疾志贺菌A（病情最重）12 ——外毒素 福氏志贺菌B（我国主要，易转慢性）16 鲍氏志贺菌C（我国较少）18 宋内志贺菌D（病情最轻）1 我国流行主要为福氏志贺菌（B群） 次为宋内志贺菌（D群） （一）抗原结构 1. 根据生化反应和O抗原的不同，分为4个血清群（即痢疾志贺菌、福氏志贺菌、鲍氏志贺菌、宋内志贺菌，又依次称为A、B、C、D群）。

痢疾杆菌有两种抗原：O抗原和K抗原志贺氏菌属的抗原有菌体(O)抗原、表面（K）抗原和菌毛抗原。根据O抗原结构的不同可分成A、B、C、D四个群，现有39个血清型。临床以福氏菌2a型、宋内菌为多见。 按O抗原的不同可以分为4群，47个血清型 病原菌流行类型不断变迁 3.致病力包括三方面 ——侵袭力 志贺菌侵入上皮细胞后，可在细胞内繁殖并播散到临近细胞，由毒素作用引起细胞死亡。细菌侵袭肠粘膜，引起肠粘膜炎症 ——内毒素（各型志贺菌死亡裂解后→脂多糖)。 引起发热、毒血症和休克 ——外毒素（志贺毒素Shiga toxin）由痢疾志贺菌Ⅰ型产生→A群、个别D群,抑制蛋白质合成，致细胞死亡.与HUS相关。 神经毒（产生神经系统症状） 细胞毒（肠粘膜细胞坏死） 肠毒素（类似霍乱肠毒素，水样泻） 4.抵抗力：

志贺氏菌检测

志贺氏菌检测

3.12 西蒙氏柠檬酸盐培养基：见附录中12。 3.13 粘液酸盐培养基：见附录中13。 3.14 蛋白胨水、靛基质试剂：见附录中14。 3.15 志贺氏菌属诊断血清。 3.16 生化鉴定试剂盒。 4 操作步骤 4.1 增菌 以无菌操作取检样25g（ml），加入装有灭菌225ml志贺氏菌增菌肉汤的均质杯，用旋转刀片式均质器以8000r/min～10000r/min均质；或加入装有225ml 志贺氏菌增菌肉汤的均质袋中，用拍击式均质器连续均质1min～2min，液体样品振荡混匀即可。于41.5℃±１℃，厌氧培养16h～20h。 4.2 分离 取增菌后的志贺氏增菌液分别划线接种于XLD琼脂平板和MAC琼脂平板或志贺氏菌显色培养基平板上，于36℃±1℃培养20h～24h，观察各个平板上生长的菌落形态。宋内氏志贺氏菌的单个菌落直径大于其他志贺氏菌。若出现的菌落不典型或菌落较小不易观察，则继续培养至48h再进行观察。志贺氏菌在不同选择性琼脂平板上的菌落特征见表1。 表1 志贺氏菌在不同选择性琼脂平板上的菌落特征 选择性琼 脂平板 志贺氏菌的菌落特征 MAC琼脂无色至浅粉红色，半透明、光滑、湿润、圆形、边缘整齐或不齐 XLD琼脂粉红色至无色，半透明、光滑、湿润、圆形、边缘整齐或不齐 4.3 初步生化试验 4.3.1 自选择性琼脂平板上分别挑取2个以上典型或可疑菌落，分别接种TSI、半固体和营养琼脂斜面各一管，置36℃±1℃培养20h～24h，分别观察结果。

4.3.2 凡是三糖铁琼脂中斜面产碱、底层产酸（发酵葡萄糖，不发酵乳糖，蔗糖）、不产气（福氏志贺氏菌6型可产生少量气体）、不产硫化氢、半固体管中无动力的菌株，挑取其4.3.1中已培养的营养琼脂斜面上生长的菌苔，进行生化试验和血清学分型。 4.4 生化试验及附加生化试验 4.4.1 生化试验 用4.3.1中已培养的营养琼脂斜面上生长的菌苔，进行生化试验，即β-半乳糖苷酶、尿素、赖氨酸脱羧酶、鸟氨酸脱羧酶以及水杨苷和七叶苷的分解试验。除宋内氏志贺氏菌、鲍氏志贺氏菌13型的鸟氨酸阳性；宋内氏菌和痢疾志贺氏菌1型，鲍氏志贺氏菌13型的β-半乳糖苷酶为阳性以外，其余生化试验志贺氏菌属的培养物均为阴性结果。另外由于福氏志贺氏菌6型的生化特性和痢疾志贺氏菌或鲍氏志贺氏菌相似，必要时还需加做靛基质、甘露醇、棉子糖、甘油试验，也可做革兰氏染色检查和氧化酶试验，应为氧化酶阴性的革兰氏阴性杆菌。生化反应不符合的菌株，即使能与某种志贺氏菌分型血清发生凝集，仍不得判定为志贺氏菌属。志贺氏菌属生化特性见表2。 表2 志贺氏菌属四个群的生化特征 生化反应A群：痢疾 志贺氏菌 B群：福氏 志贺氏菌 C群：鲍氏 志贺氏菌 D群：宋内 氏志贺氏 菌 β-半乳 糖苷酶 －a－－a+ 尿素－－－－赖氨酸 脱羧酶 －－－－鸟氨酸 脱羧酶 －－－b+

细菌各论总结

细菌各论总结

补充：1、葡萄球菌分类：金黄色葡萄球菌—金黄色；表皮葡萄球菌—白色；腐生葡萄球菌—白色或柠檬色 2、葡萄球菌A蛋白：（SPA）：存在于细胞壁上的表面抗原，可与IgG的Fc段结合，可进行协同凝集，并具有抗吞噬、促细胞分裂、引起超敏反应、损伤血小板等生物学活性。 3、肺炎链球菌主要应与甲型溶血性链球菌鉴别，方法：胆汁容菌试验、菊糖发酵试验、荚膜肿胀试验。

补充：1、肠杆菌的共同特点： （1）形态结构：中等大小的G-菌，大多有菌毛、鞭毛，少数有荚膜，没有芽胞。 （2）培养：兼性厌氧或无氧，营养要求不高 （3）生化反应：乳糖发酵试验可初步鉴别志贺菌、沙门菌等致病菌和大部分非致病肠道杆菌，前二者不发酵乳糖。 （4）抗原结构：O抗原：存在于细胞壁脂多糖(LPS)最外层，具有属特异性。H抗原：菌体失去鞭毛后发生H-O变异。荚膜抗原：具有型特异性。 （5）抵抗力：外界生存能力强，对理化因素抵抗力不强 （6）变异：最常见耐药性变异。 2、埃希菌的分类 3、大肠菌群指数：是指每1000(g)ml水中大肠菌群数。我国卫生标准：在每1000ml饮水中不得超过3个。 4、志贺菌的分群：痢疾志贺菌、福氏志贺菌（我国最常见）、鲍氏志贺菌、宋内志贺菌 5、肥达反应：是指用已知伤寒杆菌菌体抗原、H抗原及甲、乙副伤寒杆菌H抗原测定可疑病人血清中特异性抗体含量的定量凝集试验。（肥达反应阳性开始于病程的第2周） （1）原理：伤寒杆菌有三种抗原：分别为菌体抗原（O抗原）、鞭毛抗原（H抗原）、体表抗原（Vi抗原）。其中以O抗原及H抗原的抗原性较强，而Vi抗原的抗原性不强，且相应抗体效价低且为时短暂，随细菌的消除而消失，故不列为肥达试验的检测项目。当抗原遇到特异性抗体时，便会发生凝集反应，通过对凝集物量多少来推算病人体内抗体的多少，以协助诊断、治疗及判断预后。 （2）方法：试管凝集法（定量）：当TO≥1：80，TH≥1：160，PA、PB均≥1：80才有意义 （3）动态观察：双份血清抗体四倍升高有诊断意义 （4）临床意义：辅助诊断伤寒和副伤寒。 O抗体（IgM）， H抗体（IgG） O 、H抗体均升高，患伤寒的可能性大； O 、H抗体不升高，患伤寒的可能性小；只有H升高，则可能是预防接种过或非特异性回忆反应；只

志贺氏菌检测

志贺氏菌检测 1 设备和材料除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下：1.1恒温培养箱：36C±「C； 1.2冰箱：2C?5C； 1.3 膜过滤系统； 1.4 厌氧培养装置：41.5C±1C； 1.5 电子天平：感量0.1g； 1.6显微镜：10X?100X； 1.7 均质器； 1.8 振荡器； 1.9无菌吸管：1ml （具0.01ml刻度）、10ml （具0.1ml刻度）或微量移液器及吸头； 1.10 无菌均质杯或无菌均质袋：容量500ml； 1.11 无菌培养皿：直径90mm； 1.12 pH计或pH比色管或精密pH试纸； 1.13 全自动微生物生化鉴定系统。 2 培养基和试剂 3.1 志贺氏菌增菌肉汤-新生霉素：见附录中1。 3.2 麦康凯（MAC ）琼脂：见附录中2。 3.3 木糖赖氨酸脱氧胆酸盐（XLD ）琼脂：见附录中3。 3.4三糖铁（TSI）琼脂：见附录中4。 3.5 营养琼脂斜面：见附录中5。 3.6 半固体琼脂：见附录中6。 3.7 葡萄糖铵培养基：见附录中7。 3.8 尿素琼脂：见附录中8。 3.9 B -半乳糖苷酶培养基：见附录中9。 3.10 氨基酸脱羧酶试验培养基：见附录中10。 3.11 糖发酵管：见附录中11。

3.12西蒙氏柠檬酸盐培养基：见附录中12。 3.13粘液酸盐培养基: 见附录中13。 3.14蛋白胨水、靛基质试剂：见附录中14。 3.15志贺氏菌属诊断血清。 3.16生化鉴定试剂盒。 4操作步骤 4.1增菌 以无菌操作取检样25g （ml），加入装有灭菌225ml志贺氏菌增菌肉汤的均质杯，用旋转刀片式均质器以8000r/min?10000r/min均质；或加入装有225ml志贺氏菌增菌肉汤的均质袋中，用拍击式均质器连续均质1min?2min，液体样品振荡混匀即可。于415C±1C，厌氧培养16h?20h。 4.2分离 取增菌后的志贺氏增菌液分别划线接种于XLD琼脂平板和MAC琼脂平板或志贺氏菌显色培养基平板上，于36C±1C培养20h?24h，观察各个平板上生长的菌落形态。宋内氏志贺氏菌的单个菌落直径大于其他志贺氏菌。若出现的菌落 不典型或菌落较小不易观察，则继续培养至48h再进行观察。志贺氏菌在不同选择性琼脂平板上的菌落特征见表1。 表1志贺氏菌在不同选择性琼脂平板上的菌落特征 4.3初步生化试验 4.3.1自选择性琼脂平板上分别挑取2个以上典型或可疑菌落，分别接种TSI、半固体和营养琼脂斜面各一管，置36C±1C培养20h?24h，分别观察结果。 4.3.2凡是三糖铁琼脂中斜面产碱、底层产酸（发酵葡萄糖，不发酵乳糖，蔗糖）、不产气（福氏志贺氏菌6型可产生少量气体）、不产硫化氢、半固体管中无动力的菌株，挑取其4.3.1中已培养的营养琼脂斜面上生长的菌苔，进行生化试验和血 清学分型。 4.4生化试验及附加生化试验

从业人员健康体检沙门氏菌、志贺氏菌检测操作程序(讨论稿)教学文案

从业人员健康体检沙门氏菌、志贺氏菌检测操作程序(讨论稿)

从业人员健康体检沙门氏菌、志贺氏菌检测操作程序一、目的 本程序用于对从业人员健康体检进行沙门氏菌、志贺氏菌检测等致病菌检测的方法，以规范操作程序，保证检测数据的有效性。 二、适用范围： 本方法适用于从人体粪便中沙沙门氏菌、志贺氏菌的分离、鉴定及保存的梯相关操作。 三、生物安全要求 标本及相应的致病菌操作必须在BSL-2生物安全实验室的生物安全柜中进行。 四、试剂及仪器设备 4.1试剂 采便盒、Cary-Blair运送培养基、亚硒酸增菌液（SF）、改良亚硒酸盐磺绿增菌肉汤（SBG）、沙门志贺培养液、木糖-赖氨酸-脱氧胆酸琼脂（XLD）、麦康凯琼脂、沙门显色培养基、结晶紫沙门培养基（YS）、三糖铁（TSI）、动力-吲哚-尿素培养基（MIU）、沙门氏菌属诊断血清、志贺氏菌属诊断血清、API20E生化试剂条、磁珠菌种保存管 4.2 仪器设备 恒温培养箱、微生物鉴定仪 五、采样方法

5.1 标本应为新鲜的或转移至Cary-Blair运送培养基的粪便或肛拭子，最优标本是转移到Cary-Blair运送培养基的粪便拭子。肛拭子不是最佳标本，仅在病人无粪便标本时采用。 5.2 粪便标本：应采集自然排出的新鲜粪便，取稀水样、粘血样、脓血样，黏液样部分。盛于清洁、干燥、无吸水性的无菌容器，避免混入尿液、水和其他物质。 5.3肛拭标本：若无法获得粪便（如排便困难或婴幼儿），也可以采用肛拭子，即无菌棉拭子用生理盐水湿润后，插入肛门内4-5cm 处〈儿童约2-3cm），同一方向轻轻旋转2-3周。以目测能见到粪便为准。插入Cary-Blair运送培养基。 5.4 标本采集后立即送至实验室进行检测，若室温保存，不能超过 1h；如不能立即送检，应放入Cary-Blair运送培养基中冷藏条件下24小时内送检。 六、检验程序

2016继续教育抗菌药物应用

抗菌药物的联合应用指征不包括:.单一抗菌药物即能有效控制的严重感染 肾功能减退者不宜应用的抗菌药物为:.四环素、呋喃妥因 引起瓣膜异常患者出现亚急性细菌性心内膜炎最常见的致病菌是:.草绿色链球菌 克雷伯菌属是条件致病菌，临床感染中以哪种细菌多见:.肺炎克雷伯菌 对血液和无菌体液培养均应以急诊报告对待，实行三级报告制度，第一级报告应在初始培养出现阳性报告后:.60～120min 对CAP可选择的药物主要有哪三大类:.β内酰胺类、大环内酯类、新型喹诺酮类 机械通气相关性肺炎（VAP）是指气管插管机械通气多长时间后并发的肺炎:.48～72h 流行性出血热发热期发生毛细血管损害，出现“三痛”，即:.头痛、腰痛和眼眶痛 HFRS最有效最基本的治疗措施是:.综合液体疗法 狂犬病从临床发病到死亡的平均持续时间为:.7天 利福喷汀为长效利福霉素衍生物，其消除半衰期约:.30h 以下哪些药物不易保留于血浆D.喹诺酮类 白血病化疗后粒缺感染没有明确的临床表现，什么常常为唯一的临床体征:.发热 哌拉西林、头孢哌酮和头孢曲松在胆汁中的浓度均可达到血药浓度的:.10倍以上 肝移植后早期深部曲霉病较少发生，但一旦发生，死亡率达:.60％～70％ 盆腔感染或盆腔炎症性疾病最常见的是:.输卵管炎 MOF病人的死亡率随着受累器官或系统数目的增多而升高，二个器官功能衰竭死亡率为:.60％ 新型隐球菌脑膜炎抗真菌治疗应首选:.两性霉素B 流行性出血热多尿期多发生于病程的:.第9～14天 我国哪种细菌引起的痢疾为常见:.福氏志贺菌 头孢吡肟和头孢匹罗属于:.第4代头孢菌素类 治疗衣原体感染的主要药物不包括:.氨基糖甙类 我国存在的新生隐球菌以哪一型最多见:.A型 以下不能通过血脑屏障的抗菌药物是:多粘菌素 以下属于Ⅲ类（污染）切口的是:.新鲜开放性创伤手术 有厌氧菌参与的胆道感染多见于曾接受过胆道手术的患者，厌氧菌中以哪种细菌占多数:.拟杆菌 急性胆囊炎首选的检查方法是:.B超 自发性腹膜炎最常见的致病菌是:.革兰阴性杆菌 艾滋病患者发生弓形体感染首选的治疗方案为:.乙胺嘧啶+磺胺嘧啶 胎传梅毒系母体的梅毒螺旋体通过胎盘进入胎儿体内，多发生于:.妊娠4月后 以下不属于β内酰胺类抗菌药物的是:.氨基糖甙类 关于葡萄球菌的形态和培养特性，以下说法错误的是:.有鞭毛、有芽孢，除少数菌株外一般不形成荚膜 以下哪种病毒又称卫星病毒:.拟病毒 关于便标本采集，以下说法错误的是:.因粪便标本本身含很多细菌可不必用无菌容器 对革兰阳性球菌，以下哪种抗菌药物呈中度PAE:.喹诺酮类 出生20天后各年龄期小儿CAP的首位病原菌是:.肺炎链球菌 关于肺结核病合并妊娠的化学治疗，以下说法错误的是:.妊娠伴结核性脑膜炎者应积极治疗，不可轻易终止妊娠 特异性骨与关节感染主要是:.结核菌感染 临床上艾滋病患者最常见的真菌感染是:.白念珠菌感染和新型隐球菌感染

志贺氏菌属诊断血清说明书

志贺氏菌属诊断血清学试验操作程序 1.目的 制定标准化的志贺氏菌属诊断血清操作程序，指导对志贺氏菌属的检测2.原理 用志贺氏菌属的代表菌株制成灭活菌抗原分别或混合免疫家兔所得的血清，经吸收出去非特异性凝集素后制成，通过凝集试验原理诊断各型志贺氏菌。3.试剂及实验设备 3.1志贺氏菌属诊断血清：宁波天润生物药业有限公司生产的规格为22种的志 贺氏菌属诊断血清 3.2试剂保存：2~8°C避光保存，防止冻结，在有效期内使用。 3.3实验设备：玻片、吸样枪、接种环、水浴箱、玻璃管、血平板、营养琼脂、 电热高温接种灭菌器。 4.程序步骤 4.1将诊断血清于冰箱取出后平衡至室温。 4.2选择符合志贺氏菌属培养特性，并经初步生化检测符合志贺菌属生物特性的 疑似菌落。 4.3菌群分析 将经18~24h血平板上纯培养的待检菌，分别用志贺氏菌属4种多价血清做玻片凝集试验，凝集阳性时，再分别用群多价血清做玻片凝集试验，群多价血清凝集阳性时，再分别与相应的单价血清做玻片凝集试验，最终确定其血清分型。如果志贺氏菌属4种多价血清做玻片凝集试验均为阴性，可能有以下3种可能性：①K抗原的存在，处理方法：取待检菌的纯菌落于生理盐水中制成浓度约2麦氏单位的菌悬液，置于100°C水浴中煮沸30min，泠却至室温后再用诊断血清进行玻片凝集试验；②非典型菌落，处理方法：通过在营养琼脂平板上的传代让其恢复抗原性，再用诊断血清进行玻片凝集试验；③诊断血清型以外的可送市或省CDC检测。 4.4玻片凝集试验法取18~24h血平板上纯培养的待检菌，用生理盐水制成2麦 氏单位的菌悬液，取诊断血清20μL于洁净玻片上，然后取20μL待检菌悬

传染病题库7-1-8

传染病题库7-1-8

问题： [单选,A1型题]我国细菌性痢疾主要流行菌群是（）。 A.宋内志贺菌 B.痢疾志贺菌 C.福氏志贺菌 D.鲍氏志贺菌 E.产志贺毒素大肠杆菌 痢疾杆菌属肠杆菌科志贺菌属，分为4群47个血清型。我国以B群福氏志贺菌为主要流行菌群。其次D群宋内菌。近年来少数地区有A群痢疾志贺菌之流行。

问题： [单选,A1型题]患者，女，33岁，昨晚吃街边烧烤后于今晨3时突然畏寒、高热、呕吐、腹痛、腹泻，腹泻共4次，开始为稀水样便，继之便中带有黏液和脓血。在未做实验室检查的情况下，该患者可能的诊断是（）。 A.急性轻型细菌性痢疾 B.急性普通型细菌性痢疾 C.中毒型细菌性痢疾 D.慢性细菌性痢疾急性发作 E.慢性迁延型细菌性痢疾急性发作 该患者表现为急性起病，畏寒高热，呕吐、腹痛、腹泻，腹泻共4次，开始为稀水样便，继之便中带有黏液和脓血，首先考虑普通型痢疾。轻型一般表现为低热或不发热。腹泻有黏液而无脓血。中毒型一般有休克或神志改变等情况。

问题： [单选,A2型题]患者，女性，35岁，手术后2个月出现腹胀，乏力，ALT200UL，手术时输血800ml。化验甲型肝炎抗体（-），HBsAg（-），抗HBc（+），抗HBs（+），抗HCV（+）。诊断应考虑（）。 A.术后引起中毒性肝炎 B.甲型肝炎 C.乙型肝炎 D.输血后肝炎 E.急性丙型肝炎，输血所致 急性丙型肝炎的诊断。该中年女性患者2个月前手术时输过血，2个月后出现消化道症状和转氨酶升高，同时丙型肝炎抗体阳性，一般急性丙型肝炎的潜伏期50日（15～150日），输血引起的肝炎主要是丙型肝炎，所以答案是E。患者虽然抗HBc（+）和抗HBs（+），只是说明过去感染过乙型肝炎病毒；甲型肝炎抗体（-），故也不是甲型肝炎。 (走势娱乐资讯网 https://www.360docs.net/doc/c09222075.html,)

志贺菌及三糖铁原理

志贺氏菌的检验 发布日期：2010-09-01 浏览次数：4375 核心提示：一、增菌称取检样25g，加入装有225mLGN增菌液的500mL广口瓶内，固体食品用均质器以8000-10000r/min打碎1min，或用 一、增菌 称取检样25g，加入装有225mLGN增菌液的500mL广口瓶内，固体食品用均质器以8000-10000r/min打碎1min，或用乳钵加灭菌砂磨碎，粉状食品用金属匙或玻璃棒研磨使其乳化，于36℃培养6～8h。 培养时间视细菌生长情况而定，当培养液出现轻微混浊时即应中止培养。 二、分离和初步生化试验 取增菌液1环，划线接种于HE琼脂平板或SS琼脂平板1个；另取1环划线接种于麦康凯琼脂平板和伊红美蓝琼脂平板各1个，于36℃培养18～24h。 志贺氏菌在这些培养基上呈现无色透明不发酵乳糖的菌落。 附：HE琼脂平板原理及照片 SS平板原理及照片 麦康凯琼脂平板照片 伊红美蓝琼脂平板照片 在沙门氏菌的检验中，有时也使用HE、SS平板进行初步筛选。 SN 0332-94 出口食品中沙门氏菌(辛酯酶荧光)检验方法

挑取平板上的可疑菌落，接种三糖铁琼脂和葡萄糖半固体各1管。一般应多挑几个菌落，以防遗漏，经36℃培养18～24h，分别观察结果。 附：葡萄糖半固体原理及结果。 三糖铁琼脂现象及原理分析 下述培养物可以弃去： a. 在三糖铁琼脂斜面上呈蔓延生长的培养物； b. 在18～24h内发酵乳糖、蔗糖的培养物； c. 不分解葡萄糖和只生长在半固体表面的培养物； d. 产气的培养物； e. 有动力的培养物； f. 产生硫化氢的培养物。 凡是乳糖、蔗糖不发酵，葡萄糖产酸不产气(福氏志贺氏菌6型可产生少量气体)，无动力的菌株，可做血清学分型和进一步的生化试验。 三、血清学分型 挑取三糖铁琼脂上的培养物，做玻片凝集试验。 先用4种志贺氏菌多价血清检查，如果由于K抗原的存在而不出现凝集，应将菌液煮沸后再检查； 如果呈现凝集，则用A1、A2、B群多价和D群血清分别试验。 如系B群福氏志贺氏菌，则用群和型因子血清分别检查。福氏志贺氏菌各型和亚型的型和群抗原见表1。可先用群因子血清检查，再根据群因子血清出现凝集的结果，依次选用型因子血清检查。 4种志贺氏菌多价血清不凝集的菌株，可用鲍氏多价1、2、3分别检查，并