用复合PCR检测淋球菌、沙眼衣原体和解脲支原体的感染研究
女性怎么检查支原体衣原体感染
女性怎么检查支原体衣原体感染 支原体感染目前已成为性传播疾病的重要病原体而日益引起人们的重视。但支原体感染常无症状或无特异症状而容易被人们所忽视，建立一种快速、敏感、特异的检测方法就显得非常重要。所以诊断支原体感染单靠临床表现是不够的，必需经过一定的实验室检查，才能够确诊。那么女性怎么检查支原体衣原体感染呢？ 常用的检查方法是支原体培养、直接荧光抗体检测、酶标免疫反应和DNA探针与聚合酶链式反应(PCR)。 (1)支原体培养由于沙眼衣原体是在细胞内寄生，所以它只能在组织中培养。支原体的培养取材一般应在男性的尿道深入0.5cm以上，培养法的方法较复杂，但极少有假阳性，所以诊断率高。 (2)直接荧光抗体检测这是非培养法中应用最多的检测方法。此法操作容易，特异性好，特别是在检测子宫内膜和输卵管等部位的感染时较培养法敏感。它还可以用于精液、直肠标本以及因运输或保存等原因使支原体失活的标本的检测。不足之处是其结果易受主观因素的影响，因而需要有经验的检验师。 (3)酶标免疫反应这是目前应用最广的检测方法。该法的优点是快速、方便、廉价和检测批量化。
(4)PCRPCR将标本数目有限的目标DNA或RNA序列成百万倍放大，使敏感性大大提高。本法对实验室的要求较严格，您千万不要相信一些打着PCR的招牌行骗的门诊部。 支原体感染是一种性传播疾病，如果能够明确原发感染,同时进行治疗,是完全可以治愈的疾病。但是支原体感染是很容易反复发作的，治疗的时候一定要深入彻底的杀菌治疗避免后期病菌的复发，女性朋友可以配合中药妇炎丸来调理支原体引起的宫颈炎、子宫内膜炎、盆腔炎等妇科并发症。 支原体是是非淋菌性尿道炎的特殊类型，对人体的泌尿生殖系统的危害严重，而且发病后治疗复杂难愈，因此一旦发现支原体、衣原体感染是需要及时治疗的。以上就是有关女性怎么检查支原体衣原体感染的介绍，希望可以帮到大家。
1医学检验毕业论文 (三种肺炎支原体检测法的临床应用分析)
毕业论文 题目：三种肺炎支原体检测法的临床应用分析 地市: 学校: 准考证号: 考生姓名: 王莹 指导老师: 二〇一八年八月十四日
三种肺炎支原体检测法的临床应用分析 摘要 目的探讨肺炎支原体（MP）咽拭子快速液体培养法、咽拭子聚合酶链反应（PCR）法和血清MP被动凝集法（MP-Ab）等方法在儿童MP感染诊断治疗过程中的敏感性方法采用3MP检测法对362例临床拟诊呼吸道（非细菌性）感染的患儿的咽拭子和血清标本进行配对研究，每患儿取咽拭子做快速培养和PCR，同时取血清做MP-Ab检测，对3种方法的检测结果与临床诊断治疗病例进行回顾性分析。结果回顾临床病例诊断MP感染患儿152例。MP快速培养法检出阳性78例，阳性率为51.3%，病程为（4.5±2.6）天；PCR法检测出阳性103例，阳性率为67.8%，病程为（6.2±3.5）天；MP-Ab法检测出阳性127例，阳性率83.5%，病程（8.1±4.5）天。结论 3种MP检测法的敏感性与病程有相关性，临床医生应根据患儿病程选取检测方法，以提高阳性检出率和敏感性。 关键词肺炎支原体，快速培养法，咽拭子聚合酶链反应，血清抗体，配对研究
目录 前言 (4) 第一章文献综述 (5) §1.1 肺炎支原体的定义 (5) §1.2 肺炎支原体的发病机制 (5) §1.3 肺炎支原体的分类 (5) §1.4 肺炎支原体的临床表现 (5) §1.5 肺炎支原体的临床诊断 (5) §1.6 肺炎支原体的实验室检查 (6) 第二章材料和方法 (7) §2.1 样本 (7) §2.2方法概述 (7) §2.3临床诊断MP感染的诊断标准 (7) §2.4实验方法 (7) §2.5统计学方法 .................................................................... .. (8) 第三章结果 (9) 第四章讨论 (10) 结论 (11) 参考文献 (11) 附录 (12) 错误！未定义书签。
支原体检查
附录XIIB支原体检查法 主细胞库、工作细胞库、病毒种子批、对照细胞以及临床治疗用细胞进行支原体检查时，应同时进行培养法和指示细胞法（DNA染色法）。病毒类疫苗的病毒收获液、原液采用培养法检查支原体，必要时，亦可采用指示细胞法筛选培养基。也可采用经国家药品检定机构认可的其他方法 第一法培养法 推荐培养基及其处方 （1）支原体肉汤培养基 猪胃消化液 500ml 氯化钠2.5g 牛肉浸液（1:2）500ml 葡萄糖 5.0g 酵母浸粉5.0g 酚红0.02g pH值7.6±0.2。于121℃灭菌15分钟。 （2）精氨酸支原体肉汤培养基 猪胃消化液 500ml 牛肉浸液（1:2）500ml 葡萄糖 1.0g 酵母浸粉5.0g L-精氨酸2.0g 酚红0.02g 氯化钠2.5g pH值7.1±0.2。于121℃灭菌15分钟。 （3）支原体半流体培养基按（1）项处方配制，培养基中不加酚红，加入琼脂2.5～3.0g。 （4）支原体琼脂培养基按（1）项处方配制，培养基中不加酚红，加入琼脂13.0～15.0g。 培养基灵敏度检查（变色单位试验法）（1）菌种肺炎支原体（ATCC 15531）、口腔支原体（ATCC 23714），由国家药品检定机构分发。 （2）操作将菌种接种于适宜的支原体培养基中，经36℃±1℃培养至培养基变色，盲传2代后，将培养物接种到待检培养基中，做10倍系列稀释，肺炎支原体稀释至10-7～10-9，接种在支原体肉汤培养基内；口腔支原体稀释至10-3～10-5，接种在精氨酸支原体肉汤培养基
内。每个稀释度接种3支试管，置36℃ 士1℃ 培养7～14天，观察培养基变色结果。 ( 3 )结果判定以接种后培养基管数的2 / 3以上呈现变色的最高稀释度为该培养基的灵敏度。 液体培养基的灵敏度：肺炎支原体（ATCC 15531 )应达到10-8，口腔支原体（ATCC 23714）应达到10-4。 检查法（1）供试品如在分装后24小时以内进行支原体检查者可贮存于2～8℃ ；超过24小时应置一20℃ 以下贮存。 ( 2 )检查支原体采用支原体半流体培养基和支原体肉汤培养基（或支原体琼脂培养基）。支原体半流体培养基（或琼脂培养基）在使用前应煮沸10～15分钟，冷却至56℃ 左右，然后加人灭能新生牛血清（培养基与血清体积比为8:2 )，并可酌情加入适量青霉素，充分摇匀。液体培养基除无需煮沸外，使用前亦应同样补加上述成分。 取每支装量为10ml的支原体半流体培养墓（已冷至36℃ 士1℃ ）和支原体肉汤培养基各4支，每支培养基接种供试品0.5～1.0ml，置36℃ 士1℃ 培养21天。于接种后的第7天从4支中取2支进行次代培养，每1支培养基转种支原体半流体培养基及支原体肉汤培养基各2支，置36℃ 士l℃ 培养21天，每隔3天观察1次． ( 3 )结果判定培养结束时，如接种供试品的培养基均无支原体生长，则供试品判为合格；如疑有支原体生长，可取加倍量供试品复试，如无支原体生长，供试品判为合格，如仍有支原体生长，则供试品判为不合格。 【附注】质量检定部门应会同培养基制造部门定期抽检支原体培养基灵敏度。 第二法指示细胞培养法（DNA染色法） 将供试品接种于指示细胞（无污染的Vero细胞或经国家药品检定机构认可的其他细胞）中培养后，用特异荧光染料染色。如供试品污染支原体，在荧光显微镜下可见附在细胞表面的支原体DNA着色。 试剂（1）二苯甲酰胺荧光染料浓缩液称取二苯甲酰胺荧光染料5mg，加人100ml不含酚红和碳酸氢钠的Hank 's平衡盐溶液中，室温下用磁力搅拌器搅拌30～40分钟，使完全溶解，-20℃ 避光保存。 （2）二苯甲酰胺荧光染料工作液无酚红和碳酸氢钠的Hank ' s溶液100ml中加人二苯甲酰胺荧光染料浓缩液lml，混匀。 （3）固定液醋酸:甲醉（体积比1:3）混合溶液。 （4）封片液量取0.1mol / L枸橼酸溶液22.2ml、0.2mol / L磷酸氢二钠溶液27.8ml、甘油50.0ml，混匀，调pH值至5.5。 培养墓及指示细胞（1） DMEM完全培养基。 ( 2 ) DMEM无抗生素培养基。
支原体感染的药物治疗
支原体感染的药物治疗 支原体感染的药物治疗。女性支原体感染，常会导致女性宫颈炎，从而引发白带异常、宫颈糜烂症状，继而向内感染，造成女性生囘殖系统支原体感染，并可能引起盆腔炎，从而导致女性不孕症。如果不注意卫生，极可能传染给自己的爱人。但也有部分患者支原体感染后，并没有明显症状，仅有白带异常，育龄期妇女则能发现不孕症状。那女性支原体感染怎么治疗呢? 食疗 食疗是治疗中的重要一环，像很多患者病情反复发作也和饮食不注意有一定关系。女性支原体衣原体患者要注意饮食调理，在饮食上注重加强营养，多吃蔬菜水果，补充必要的维生素。微量元素等，最好不要吃刺激、油煎、霉变、肥腻食物，禁止抽烟喝酒。 食疗方对于患者的病情是有一定效果的，不过，这种方法多是结合药物治疗一起使用。作为辅助疗法，帮助患者尽快恢复健康。 西药抗生素 传统的治疗方法主要是采用抗生素进行治疗。多种抗生素，如交沙霉素、克拉霉素、阿齐霉素、红霉素、罗红霉素、强力霉素、四环素、美满霉素、司巴沙星、氧氟沙星、洛美沙星、左氧沙星对于支原体衣原体的治疗是有一定效果的。患者可以在药敏试验后加以选择。 要提醒患者的是，由于抗生素具有一定的抗药性和耐药性，所以在女性支原体衣原体感染的长期治疗上就可能不是很理想。此外，建议大家也不要随便滥用抗生素以防机体菌群失调、免疫力降低。 中药 像一些柴胡、当归、白术、金银花中药成分，可以达到杀死细菌、病毒、支原体、衣原体的效果。但是中药讲究成分是完整性，所以单一成分是不行的，这个需要患者进行辨别，像中药妇炎丸这种完整方是可以的。具有清热解毒、疏肝理气的作用，能在3个月左右杀各种细菌、病毒、支原体、衣原体等，消除体内炎症。 要提醒患者的是，在服药期间要避免要禁食生发厚腻食物、注意生殖道清洁和外阴卫生。 支原体感染的药物治疗。为了促进病情治愈，在治疗之余，做好相关的护理工作也是很有必要的，为此，患者要讲究卫生，避免交叉感染，此外，患者可以
儿童支原体RNA检测及肺炎支原体抗体的比较
儿童支原体RNA检测及肺炎支原体抗体的比较 发表时间：2016-05-09T11:40:39.230Z 来源：《中国医学人文》(学术版)2016年1月第2期作者：王玉琪 [导读] 比较2种检测方法的优缺点。结论：MP-RNA、MP-IgM均是诊断MP感染的有效指标，为临床诊断及治疗提供了有力的依据。 王玉琪 浙江大学医学院附属儿童医院浙江杭州 310052 【摘要】目前：通过对肺炎支原体（MP）RNA检测及抗炎支原体抗体（MP-IgM）的研究，探讨两种检测方法在临床中的应用。方法：对208例肺炎住院患儿行呼吸道分泌物MP-RNA及血清MP-IgM测定，比较2种检测方法的优缺点。结论：MP-RNA、MP-IgM均是诊断MP感染的有效指标，为临床诊断及治疗提供了有力的依据。 【关键词】肺炎支原体；抗体检测；RNA检测 肺炎支原体是（MP）是小儿呼吸道感染常见的病原体之一，可引起上呼吸道及下呼吸道感染，尤其是社区获得性肺炎（CAP）的重要病原[1]。MP的实验室检测方法有很多，血清学检测是目前MP感染的常规实验室手段[1]，利用酶联免疫吸附试验，如检测持续高滴度MP-IgM或恢复期抗体滴度较急性期4倍或4倍以上变化可诊断。近年随着分子生物学技术的发展，RNA恒温扩增实时荧光检测（SAT）技术应用于临床，为MP感染的早期诊断提供了新的检测方法。本研究对本院208例疑似肺炎支原体肺炎患儿分别采集呼吸道分泌物及血清同时检测患儿的MP RNA及MP-IgM，现将结果报告如下。 1资料与方法 1.1 一般资料 选择2015年6月1日~2015年12月1日在本院住院的疑似MP呼吸道感染的患儿208例，其中男性106例，女性102例，年龄1个月~13岁。根据年龄分为两组，A组（0~3岁，n=128），B组（3~12岁，n=80）。两组患者的一般资料具有可比性（P<0.05）。 1.2 仪器与试剂 杭州……………… 1.3方法 采集患静脉全血，常规分离血清后检测肺炎支原体抗体（MP-IgM），同时用灭菌棉签采集受试者咽部样本（大于1岁患儿）或痰液（小于1岁）行MP RNA检测。操作方法均严格按照试剂盒说明书进行。 1.4 肺炎支原体肺炎临床诊断标准：持续咳嗽，可伴有发热，白细胞计数正常或稍高，X线提示两肺均匀一致改变的片状阴影或大叶性肺炎改变。 1.5 统计学处理采用SPSS 18.0软件对所得数据进行统计分析，资料采用χ2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。 2 结果 208例患中，MP-IgM阳性率34.1%（71/208），MP RNA检测结果阳性共率31.2%（65/208），两者比较差异无统计学意义 （P>0.05）。 3 讨论 肺炎支原体（MP）是引起儿童呼吸道感染，尤其是社区获得性肺炎的常见病原体之一，临床表现为干咳、发热，部分患儿可出现胸腔积液、肺纤维化，肺外损害，如皮肤、胃肠道、血液系统损害、骨关节肌肉、中枢神经系统、心血管系统等[2-4]。MP感染症状可持续或迁延数周或数月，常可引起慢性咳嗽和反复呼吸道感染，还可能引起喘息。MP感染患儿临床表现常不典型，常规抗生素治疗效果欠佳，因此，早期诊断对临床治疗有着重要意义。目前，多种检测方法针对MP-IgM，具有灵敏度高，特异性强，操作简便快速的特点，已作为早期诊断MP感染的客观指标而应用于临床。本研究结果显示，208例患儿中，痰液标本或咽拭子SAT法，MP RNA阳性率34.6%，ELASA法测定MP-IgM阳性率29.3%，两者比较有统计学意义（P<0.05），这可能与血清标本留取时间有关，MP感染后约7d可在血清中检测出MP-DNA抗体，疾病早期可呈假阴性[5]。同时，在组内两种检测手段也呈现了不同结果。A组中的MP RNA的阳性率高于MP-IgM的检测 （P<0.01），这可能由于婴儿免疫系统发育不完善，当MP感染后不能产生或产生效价较低的抗体而导致漏诊，提示MP RNA方法更适于年幼儿和免疫损害患儿的MP感染的早期诊断[5]；而核酸检测受年龄影响较小，故阳性率较高。B组中，两种检测方法阳性率分别相比较无统计学意义（P>0.05），说明咽拭子MP RNA检测方法同样具有较高的敏感性，但同时需结合MP-IgM检测结果，以除外假阳性结果。综上所述，MP-IgM检测及MP RNA检测在诊断MP感染均有较高的价值，二者联合应用可提高检测的准确性，为临床诊断提供有力的依据。 参考文献： [1]Vervloet LA，Marguet C，Camargos PA．Infection byMycoplasma pneumoniae and its importance as an etiologicalagent in childhoodcommunity-acquired pneumonias[J]．Braz J Infect Dis，2007，11（5）：507—514． [2]Gaillat J，Elahault A，deBarbeyrac B，et https://www.360docs.net/doc/ff13500119.html,munity epidemiology of Chlamydiaand Mycoplasma pneumoniae in LRTI in France over 29 months[J].Eur JEpidemiol，2005，20（7）：643-651. [3]Blasi F．Atypical pathogens and respiratory tract infee—tions[J]．Eur Respir J，2004，24（1）：171—181． [4]Hansbro PM，Beagley KW，Horvat JC，et a1．Role ofatypical bacterial infection of the lung in predisposition／protection ofasthma[J]．Pharnlaeol Ther，2004，101（3）：193-210． [5] Kim NH，Lee JA，Eun BW，et a1．Comparison of poly-merase chain reaction and the indirect particle agglutinationantibody test for
支原体衣原体的治疗方法大全
呼吸道隔离，休息，供给足量水分及营养。对症治疗：忌用水杨酸类药物以防溶血。一般选用具有缓慢而持久作用的解热镇痛药，如对乙酰基酚、卡巴匹林钙、赖氨比林、柴胡等，高热时辅以物支原体肺炎的传播途径 理降温。化痰止咳。清除鼻内分泌物，保持呼吸道通畅。必要时可雾化吸入。 2.抗菌治疗 临床首选红霉素30～50mg/(kg·d)，分4次口服，成人1.5g/d，分3次口服，疗程2～3周。大环内酯类新药，如罗红霉素，胃肠副作用少，体液浓度高，细胞穿透力强，半衰期长，用量小，5mg～10mg/(kg·d)，分2次口服。新药阿奇霉素胶囊首剂10mg/(kg·d)，以后5mg/(kg·d)，一次口服，5天为一疗程。因半衰期长，停药后药效尚可持续1周。也有选用诺氟沙星或环丙沙星每次0.4g，2次/d，疗程5～7天。 3.中医中药治疗 中医辨证，肺炎属于温热病范畴中的“肺热喘咳”、“风温犯肺”等症。常用中药有：麻黄、杏仁、生石膏、甘草、寒水石、银花、连翘、苏子等。发热有汗可加黄芩，或重用生石膏;发热无汗时可加鲜芦根;咳喘多痰加天竺黄、莱菔子等。 支原体肺炎自我速效疗法 方案一： ①百部２０ｇ，麦门冬２０ｇ，天门冬２０ｇ，桔梗２０ｇ，百合２０ｇ，紫菀２０ｇ，冬花２０ｇ，葶苈子１０ｇ，沙参１０ｇ，甘草５ｇ，水煎服，日服１剂； ②１０％葡萄糖液５００ｍｌ，０．９％氯化钠５００ｍｌ，红霉素注射液０．６ｇ，地塞米松５ｍｇ，静脉缓慢点滴； ③四环素０．５ｇ（２片），口服，日４次，增效联磺片１ｇ（２片），口服，日２次。以上３方同时应用。 方案二： ①浙贝母、川贝母、桔梗、杏仁各１０ｇ，红人参５ｇ（切成薄片），三七粉末２号（冲服），水煎服，日１剂； ②交沙霉素片２００ｍｇ，口服，日３次； ③按摩脊柱两侧，以皮肤发红为度，日１次。以上３方同时应用。 治疗方法 [1]阿奇霉素10mg/kg口服,1次/d; [2]盐酸氨溴索口服液(贝莱)按药物说明口服及地塞米松2mg加生理盐水8ml雾化吸入以袪
PCR法支原体检测
PCR法支原体测定PROTOCOL 生效日期（年-月-日） 有效期至（年-月-日） 分发部门：质量部
1.目的 规范PCR法支原体检测的操作方法。 2.范围 适用于项目研发过程样品、原液、成品及中间体的分析。 3.责任 质量分析人员熟悉并遵守该标准操作规程。 4.定义 N/A 5.设备、材料和试剂 5.1设备、材料 设备名生产商型号/货号备注PCR仪Thermo ARKTIK5020 N/A VORTEX IKA GENIUS 3 N/A 小型台式冷冻离心 机Thermo HERAEUS Fresco 21 N/A 单道移液器 (10ul,20ul,100ul) Eppendorf Research plus N/A 多功能水平电泳槽Tanon HE-120 N/A 凝胶成像系统BIORAD ChemiDoc? XRS+ System N/A 5.2试剂 试剂名称生产商货号TaKaRa PCR Mycoplasma Detection Set TaKaRa 6601 TaKaRa Ex Taq? TaKaRa RR001A Regular Agarose G-10 Biowest N/A Goldview 国产N/A
10×Loading Buffer TaKaRa 9157 DL5000 DNA Marker TaKaRa 3428A 内毒素检查用水厦门鲎试剂实验厂有限公司 6.溶液配制 6.1 50× TAE Buffer 称取242.0g Tris，37.2g Na2EDTA·2H2O于1L烧杯中，向烧杯中加入约800ml 超纯水，充分混匀，加入57.1ml冰乙酸，充分溶解，加入超纯水定容至1L，室温保存。有效期6个月。 6.2 1× TAE Buffer 量取10ml 50× TAE Buffer，加入490ml超纯水，充分混匀。有效期6个月。 7.操作步骤 用于检测支原体的样品是接种后进行3-6天细胞培养的培养上清液。如果使用常用的细胞培养基时，培养上清可直接加入到PCR反应液中，如果使用细胞悬浊液作为样品，则需要提取DNA，再进行PCR反应。如果样品中含有PCR 反应阻碍物，需要对DNA进行抽提，再添加到PCR反应液中，为了确认样品中是否含有反应阻碍物，在样品中加入Control Template进行正对照反应。 7.1 1st PCR反应 7.1.1按下表顺序配制反应混合液（50ul体系） 试剂用量（ul） 内毒素检查用水37.75~38.75 10× PCR Buffer 5 dNTP Mixture 4 MCGp F1 Primer 0.5 MCGp R1 Primer 0.5
肺炎支原体检测方法的选择
肺炎支原体检测方法选择的几个注意点 肺炎支原体（MP ），主要引起咽炎及支气管炎，少数累及肺。以其顶端结构与宿主细胞上受体结合粘附于上皮细胞上，一般为表面感染，除穿透支原体外（艾滋病人感染）大多不侵入血液。产生有毒代谢产物如外毒素或过氧化氢等引起发热及局部细胞损伤。 选择检测方法的注意事项： 1.临床常用全血（指尖血）或血清（橘黄管）检测IgM 来判定肺炎支原体的感染，但是，抗体检测只是各种实验室方法的一种，尚有其他方法可用，如培养及DNA 检测，每种方法各有利弊，对不同病程各有针对性。 2.每一种实验结果都需要另外一种实验结果来验证，正常人咽部或支气管可携带MP ，所以不能用一种实验数据来下诊断。 3.初次感染时， IgM 、IgG 都会产生，再次感染时，有时IgM 不产生。 4.儿童由于初次感染几率大，常能产生IgM ，成人由于机体可能感染过多次，常不产生IgM 。 5. 检测方法的选择需要根据病程确定： <6个月 6-12个月 1-9岁 IgM + IgM — 年龄对IgM 抗体产生的影响
抗体 抗原 MP感染不同时段产物的比较 由此图可以看出： a.感染早期，7天之内以检测抗原为主，宜培养或DNA检测： 培养为“金标准”，据国内文献显示，快速培养法阳性率为24%；PCR--DNA检测为96%。美国一篇文献显示，培养阳性率为5%，DNA为57%。 b.早期未产生抗体，导致延误治疗，后期抗体阳性，病原体消失，导致过用抗生素。 c.7天之后可检测IgM抗体； d.IgM可持续较长时间，感染后三个月抗体浓度依然较高，有的可以终生阳性，如果短时间内检测抗体，常不能分辨是否为MP现症感染或其他感染。 e.感染早期宜病原体筛查，此时抗体尚未产生，可导致延误治疗；中后期适宜抗体检测，主要用于回顾性验证试验，此时病原体消失，可导致过用抗生素。
支原体衣原体的规范治疗
支原体衣原体的规范治疗 由衣原体和支原体引起的泌尿生殖道感染若不积极治疗,症状可持续数月之久,并可能发生合并症,包括盆腔炎、前庭大腺炎或直肠炎。衣原体感染或(和)淋菌同时感染,甚至可能引起肝周围炎(per***titis),称为Fitz-Hugh-Cur-tis 综合征。因此,该病一旦确诊即应进行治疗。 1 衣原体感染的治疗 沙眼衣原体对四环素敏感,目前仍为治疗衣原体感染的首选药物,红霉素为次选药物,但可用于孕妇及儿童。此外,多西环素、米诺环素、环丙沙星及复方新诺明等对之也均有良好疗效[1, 2]。具体可供选择的方案如下[1, 2]。 1·1 盐酸四环素类 孕妇及儿童禁用。米诺环素(mino-cycline) 100mg,每日2次,连服10日。其抗菌作用较四环素稍强。多西环素(doxycycline) 100mg,每日2次,连服7~10日。其抗菌作用较四环素强4~10倍。 1·2 大环内酯类 阿奇霉素(azithromycin) 1g,单剂顿服。本药有极好的趋炎症组织能力,感染部位的药物浓度是血浓度的数十倍至上百倍。且本药半衰期长达40~60h,单次用药可维持有效浓度5日。红霉素(erythromycin) 250~500mg,每日4次,连服5~7日。琥乙红霉素(erythromycinethylsuccinate) 800mg,每日4次,连服7日。不能耐受大剂量红霉素时可用本药。罗红霉素(roxithromycin) 300mg,每日1次,连服7日。交沙霉素( josamycin) 400mg,每日4次,连服10日。 1·3 喹诺酮类 肝肾功能不良、孕妇及儿童禁用。环丙沙星(ciprofloxacin) 500mg,每日2次,连服7日。若有合并症存在,可适当加大剂量或延长疗程。 2 支原体感染的治疗 已证实支原体可以寄生在健康人群。因此,支原体被认为是克隆化,即它可与宿主共同生存而不表现感染征象,此时克隆数目多少于104/mL 。另一方面,它在某些条件下又可成为病原体引起感染。因此,支原体感染是一种致病力低的病原体所引起的机会感染。临床上对有症状的支原体感染,实验室检出支原体或血清抗体滴定度在4倍以上增长时,应予以治疗[1, 3]。 2·1 药物选择 支原体对作用于核蛋白体的抗生素如多西环素、红霉素、四环素、卡那霉素和链霉素等敏感,但对影响细胞壁合成的抗生素如青霉素不敏感[2]。性传播疾病中的生殖道支原体感染以解脲支原体(Ureaplasma Urealyticum, UU)、人型支原体 (Mycoplasmahominis, MH)和生殖支原体(Mycoplasma genitalium, MG)为主要病原体。由于不同型别的支原体感染对有些抗生素的敏感性不同,如红霉素对UU 有效,但对MH 无效;林可霉素对UU 无效,而对MH 有效。因此,治疗前最好查清型别,再选择药物[2, 4] 。
肺炎支原体两种检测方法的比对分析
肺炎支原体两种检测方法的比对分析 目的：探讨肺炎支原体（MP）咽拭子聚合酶链反应（PCR）法和血清间接免疫荧光法（IIFA）两种检测方法的不同。方法：将198例疑似MP感染的患儿根据年龄分为两组：A组（0～3岁，n=75）、B组（3～12岁，n=123），分别取咽拭子用PCR法测MP-DNA，取血清用IIFA法测MP-IgM，比较两种方法的阳性率。结果：MP-DNA检测阳性率为57.07%，MP-IgM检测阳性率为47.47%，两者比较差异有统计学意义（P＜0.01）。A组MP-DNA阳性率48.00%明显高于同组MP-IgM阳性率25.33%，差异有统计学意义（P＜0.01）；B组MP-DNA和MP-IgM阳性率分别为62.60%、60.98%比较差异无统计学意义（P>0.05）。结论：PCR与IIFA联合检测可以提高MP感染诊断的准确性。 标签：肺炎支原体；聚合酶链反应；间接免疫荧光法；肺炎支原体抗体 肺炎支原体（mycoplasma pneumoniae，MP）是小儿呼吸道感染的常见病原体之一，主要通过呼吸道传染，临床表现多种多样，以呼吸道感染最为多见，并可引起全身各脏器损害[1]。MP的实验室检测方法有很多，近年来发展的咽拭子聚合酶链反应（PCR）法和血清间接免疫荧光法（IIFA）法均具有快速、敏感性高的优点[2]。为了客观评价这两种方法的异同，本研究对198例疑似肺炎支原体肺炎患儿分别采集咽拭子和血清同时用咽拭子聚合酶链反应（PCR）法和血清间接免疫荧光法（IIFA）检测MP，现将结果报告如下。 1 资料与方法 1.1 一般资料选取本院儿科收治的疑似MP感染的急性呼吸道感染患儿198例，年龄0～12岁，根据年龄将其分为两组：A组（0～3岁，n=75）、B组（3～12岁，n=123）。两组患者一般资料比较差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。 1.2 仪器与试剂杭州博日line gene PCR扩增仪，ZEISS型荧光显微镜。PCR 法试剂盒由凯杰生物工程有限公司生产提供；IIFA法检测试剂盒由西班牙VIRCELL公司生产提供。 1.3 方法用灭菌棉签采集受试者咽部样本用PCR法检测MP-DNA，同时采集患儿静脉全血，常规分离血清后用IIFA 法检测MP-IgM。操作方法均严格按照说明书进行。 1.4 小儿肺炎支原体肺炎临床诊断标准持续剧烈咳嗽；全身症状比胸部体征明显；X射线所见较体征显著，胸片可见两肺均匀一致的片状阴影成似大叶性肺炎改变，肺门阴影增浓；白细胞计数正常或稍高，血沉多增快；应用大环内酯类效果好，其他抗生素如青霉素、头孢无效[3-4]。 1.5 统计学处理
肺炎支原体及其快速培养法概要
肺炎支原体及其快速培养法 支原体是一类缺乏细胞壁的原核细胞型微生物，它既不同于细菌，也不同于病毒，是介于细菌和病毒之间，能在无活细胞的人工培养基上生长繁殖的最小微生物。它广泛分布于自然界，与人类、nbsp;动植物的疾病有密切的关系。支原体的种类繁多，造成的危害非常广泛。 作者：罗三艳作者单位：412001 湖南株洲，株洲田心医院检验科支原体是一类缺乏细胞壁的原核细胞型微生物，它既不同于细菌，也不同于病毒，是介于细菌和病毒之间，能在无活细胞的人工培养基上生长繁殖的最小微生物。它广泛分布于自然界，与人类、动植物的疾病有密切的关系。支原体的种类繁多，造成的危害非常广泛。目前证明对人体有致病作用的支原体有肺炎支原体、解脲支原体、人型支原体、生殖支原体等几种，但临床以肺炎支原体最为常见［1］。肺炎支原体主要以飞沫传播，引起儿童、青少年呼吸道感染、咽炎、气管炎、肺炎等。近年肺炎支原体感染病例明显增多并有局部流行的趋势，早期诊断极为重要。 1 肺炎支原体的实验室检测方法目前，肺炎支原体的实验室检测方法有支原体分离培养、 PCR法检测质粒核酸、抗体检测、支原体快速培养法、分子生物学方法等。支原体细胞分离培养可获得肺炎支原体，可以确诊。由于支原体分离培养要求苛刻，一般医院实验室难以推广。此法阳性率低，需时3 周甚至更长时间，对临床快速诊断意义不大。PCR法检测质粒核酸快速、特异、敏感，但需昂贵设备，不易普及，且方法过于敏感，容易受污染。传统的冷凝集法检测肺炎支原体的IgM 抗体，方法简单、易行，但其敏感性和特异性均较差，易受病程影响。ELISA 检测支原体抗体法较为简便、可靠。由于发病初期，机体中尚未产生抗体不能被检出，发病时间较长此法才有意义。而快速培养法正以其简单、快速、经济、无创伤等优点，被越来越多的临床实验室所推广，也被越来越多的患者所接受。 2 肺炎支原体快速培养法肺炎支原体快速培养法是利用肺炎支原体的代谢产物使培养基液体中的指示剂颜色发生改变来判断其生长，标本中的其他支原体和细菌则被培养基中的青霉素和醋酸陀抑制［2］。此法操作简便、快速、无痛苦。先从冰箱中取出快速培养基，复温，按常规方法采集患者咽拭标本，将标本棉签浸入培养液，沿瓶壁挤压棉签，取出棉签、丢弃。旋紧瓶盖，登记标本号，35℃～37℃孵育24～ 48h，观察结果。培养基由红色变为绿色、黄色，且仍保持清晰透明，说明有肺炎支原体生长，明显混浊变色者不能视为阳性。培养液颜色不变，应判为无肺炎支原体生长。我院检验科是从2007年4月份开始展开此项检测，共检测293 例疑似肺炎支原体感染病例，阳性病例161 例，阳性率54.9%，及早为临床诊断、治疗肺炎支原体感染提供了依据。 3 讨论近年来，肺炎支原体感染明显上升，危害较大，其临床表现常无特异性，易与一般病毒性感冒相混淆。临床医生为了尽快缓解患者的症状，需根据患者症状、体征及肺炎支原体的相关检测，及早诊断、治疗。快速培养法不受病程影响，感染初期就可检测出肺炎支原体。有资料报道，在肺炎支原体检测的各种方法中，该法阳性病例病程最短，提示病程时间较短的患者选择此法检测的阳性率较高。快速培养法是诊断肺炎支原体的金标准 ［2］。肺炎支原体快速培养法采咽拭标本，采集标本前，用生理盐水漱口。所采集的标本应迅速接种，若不能及时接种，室温保存不超过2h。使用
肺炎支原体感染的血清学检验
肺炎支原体感染的血清学试验 参考范围： 补体结合试验(CF) <1:8 代谢抑制试验(M1) 阴性 问接血凝试验(PHA) 阴性 酶联免疫吸附试验(ELISA) 阴性 MG链球菌凝集试验<1:40 临床评价： 1．肺炎支原体（MP）是主要的病原性支原体之一，在临床上主要引起上呼吸道感染、气管艾气管炎及支原潍肺炎。过去称为“原发性非典型性肺炎”的病原体中，MP最为常见。约有80％的慢性支气管炎患者合并MP感染。肺炎病例中约有10％～20％由MP引起。MP感染后，可用各种血清学试验检测体内产生的特异性抗体，有助于疾病的诊断。 2．测定病人血清中特异性抗体，常用的方法有CF、MI、PHA和ELISA等，其中CF 试验是诊断支原体肺炎最常应用的方法。支原体有较强的补体结合反应，单份血清抗体效价>1：6 4或恢复期较急性期抗体滴度增加4倍以上即有诊断价值。一般补体结合抗体在感染后7～9天开始上升，3～4周达到高峰，维持4～6个月。问接血凝试验在MP感染的急性期即可出现阳性，血凝抗体可存在数年。代谢抑制试验可测定MP脂多糖胞膜抗原的相应抗体，方法敏感且特异性强。这种抗体的出现较上二者为迟。ELISA所用抗原为MP表面P蛋白，采用间接法检测特异IgM抗体，具有早期诊断意义。 MG链球菌凝集试验是检测患者血清中MG链球菌凝集素效价的一种方法。MG链球菌是从某些原发性非典型性肺炎病人的呼吸道或肺部分离出的一种非溶血性菌株，约有40％～50％的支原体肺炎患者恢复期血清中常产生MG链球菌凝集素，本试验呈阳性，故检测患者血清内凝集素效价对支原体肺炎有辅助诊断意义。本试验还有助于与病毒性肺炎的鉴别，病毒性肺炎不出现MG链球菌凝集反应。 3．采用分离培养的方法检测患者痰、咽拭等标本中的MP，对支原体肺炎具有病原确诊意义，但需要2周以上时间，且阳性率不等，在临床上不能早期、快速诊断。寒冷凝集试验是一种非特异性反应，在临床上常用作支原体肺炎的辅助诊断，约有50％以上病例可出现冷凝集抗体。应用PCR技术检测患者呼吸道分泌物和支气管肺泡冲洗物中MP的DNA，是敏感、特异且快速的实验室诊断方法。 4．影响本试验结果的因素 (1)CF试验的敏感性和特异性不高，所用的MP糖脂抗原可与许多微生物、植物及人体组织有交叉反应。 (2)MG链球菌凝集试验在某些严重感染性疾病也可呈阳性。 寒冷凝集试验 参考范围： 寒冷凝集试验 临床评价： 1．寒冷凝集素是由I抗原刺激机体产生的一种非特异性抗体，属IgM类，在0～10℃的寒冷情况下，能与O型人红细胞或自身红细胞的膜抗原结合，产生凝集现象。此种凝集反应具有可逆性，若将已凝集的红细胞再放置于37℃时，凝集现象即可消失。支原体肺炎患者血清中常可出现高效价的寒冷凝集素，寒冷凝集试验可用于测定该抗体的效价，有助于支原体肺炎的诊断。 2．寒冷凝集素大多在发病后1～2周开始出现，以后继续增高，于病程3～4周达到
中药治疗支原体衣原体感染
中药治疗支原体衣原体感染 中药治疗支原体衣原体感染。随着生活节奏的加快以及社会发展速度的迅速，支原体衣原体感染已经是一种很常见的疾病了。正确了解支原体衣原体感染会有什么症状有利于及早发现支原体衣原体感染并及时的接受治疗，这样有利于支原体的更好治疗。那么感染了支原体衣原体会有哪些症状呢，平时该注意什么，又该怎么治疗呢? 感染了支原体衣原体会有哪些症状? 1：疼痛：亚急性期常合并前列腺感染患者常出现会阴部胀痛、腰酸、双股内侧不适感或在做提肛动作时会感觉到疼痛。 2：检查时，有的患者需由后向前按挤前尿道才可能有少许分泌物由尿道口溢出。有时病人有症状无分泌物，也可无症状而有分泌物。有时病人无任何自觉症状。初诊时很易被漏诊，所以一定要去正规医院检查治疗。 3：分泌物异常：症状比淋病轻表现为尿道刺痛，不同程度的尿急及尿频、排尿刺痛，特别是当尿液较为浓缩的时候明显。尿道口轻度红肿，分泌物稀薄，量少，为浆液性或脓性，多需用力挤压尿道才见分泌物溢出，常于晨起尿道口有少量粘液性分泌物或仅有痂膜封口，或见污秽裤裆。 日常注意事项： 1.配偶或性伴侣应到医院作检查和治疗; 2.禁酒、不吃辛辣食物，多饮水; 3.家庭中做好必要的隔离，浴巾、脸盆、浴缸、便器等分开使用，或用后消毒; 4.在没有治愈前避免性行为; 5.今后要注意安全性行为，高危时应正确使用避孕套; 在了解完支原体衣原体感染的症状及注意事项后，如何治疗呢?中医专家通过几十年的中医从业经验以及多年的临床经验，利用多种名贵中草药配置而成的中药妇炎丸帮助患者解决了治疗难题。 具有清热解毒、活血、消炎，抗纤维化等功效，杀菌力强，能够在3个月左右杀死各种细菌、病毒，从根本上治愈男女支原体衣原体感染，纯中药配方无副作用，效果显著得到了很多患者的认可。
支原体检测PCR方法
PCR法检测支原体 实验原理： 通过对支原体特定的序列设计引物，当存在支原体污染时通过PCR特异性扩增，会将目标DNA特异性的复制，然后通过琼脂糖电泳观检测，会跑出条带出现阳性结果。反之当没有支原体污染时，由于没有模板，PCR无法扩增，则琼脂糖电泳跑不出条带，出现阴性结果，为确保PCR法的精确性，故需要找到最优的PCR条件在进行检测。 实验目的： 检测培养的细胞是否有支原体污染。 实验材料： 0.5 ml EP管；PCR管；镊子；手套；口罩；EP管架；移液枪（100 ul，10 ul）及配套枪头(黄、白)；dd H2O；上下游引物（两组）；dNTPs；10 x Buffer；Easy Taq；冰盒；琼脂糖；锥形瓶（200ml）；量筒（50ml）；全套琼脂糖电泳设备（电泳槽，制胶槽，梳子，电源输出）；凝胶成像系统； PCR引物： LZY-5 Myco universal F：GGGGAATGGGTGAGTAACACG LZY-5 Myco universal R：CGGATAACGCTTGCGACCTATG 产物大小：500bp LZY-6 mycotest F ：GGGAGCAAACAGGATTAGTATCCCT LZY-6 mycotest R ：TGCACCATCTGTCACTCTGTTAACCTC 产物大小：250bp 实验步骤： 1、取样： 直接取培养细胞的培养基上清。 2、PCR（为25ul体系） 1、配制反应体系，根据检测样本数+1个阴性对照（水）+1个阳性对照，算出PCR 样本的个数，在此基础上增加几管的量，把除检测培养基外的其他组分按计算好的量加到一起，混匀后分装，最后加入检测培养基。
肺炎支原体检测的SOP内容
HQBJS/MYXM-9-2015 SOP文件B9.1【检验目的】 肺炎支原体是人类原发性支原体肺炎的病原体，经呼吸道感染。多发生于儿童、青年，发病初期临床症状不明显，隐性感染和轻型感染较多，也可致严重肺炎，出现头痛、发热、咳嗽等，本试验用胶体金法定性检测人血清中的肺炎支原体IgM 抗体。 B9.2【检验原理】 用肺炎支原体抗原固相硝酸纤维素膜，应用渗滤式间接法原理，检测血清中肺炎支原体抗体。 B9.3【样本要求】 血清样品不能溶血，应为新鲜血清或2℃～8℃条件保存不超过3天。高脂血症血清不能使用。 B9.4【样本采集】 不抗凝血2ml，避免溶血、混浊、或脂血标本 B9.5【试剂盒主要组成成份】 斑点反应板：40块（或20块） 试剂A： 1瓶, 约10ml 试剂B: 1瓶,约8ml, 胶体金标记物 B9.6【储存条件及有效期】 产品应储存在2℃～8℃条件中，不能冷冻；有效期8个月。
HQBJS/MYXM-9-2015 SOP文件 B9.7【检验方法】 滴入二滴试剂A于反应板中央孔中，待完全渗入； 滴入100μl血清于反应板孔中，待完全渗入； 滴加三滴试剂B于反应板孔中，待完全渗入； 渗入三滴试剂A于反应板孔中，待完全渗入。 B9.8【结果解释】 阳性：反应板孔中出现红色圆斑和清晰的红色质控线，为肺炎支原体抗体阳性； 阴性：反应板孔中只显现清晰的红色质控线，为肺炎支原体抗体阴性；失效: 反应板孔中未显现红色质控线，为操作失误或试剂失效。 B9.9【检验方法的局限性】 本试剂试验仅用于检测肺炎支原体抗体而非直接检测肺炎支原体，因而阳性结果并不能确诊是肺炎支原体感染。对患者状况的诊断应结合患者临床体征与症状和试验结果的综合分析。 抗体含量低的血清样品，不能被检测出来是可能的。部份肺炎支原体感染的患者，不产生抗体或产生少量的抗体。此时，可能显示阴性结果。 试验结果可疑时，应用培养基进行培养确诊。
中医如何治疗衣原体支原体
中医如何治疗衣原体支原体 社会的发展越来越迅速，生活节奏也在变快，生活不规律等原因很容易导致一些病症的发生，衣原体支原体感染就是很常见的，不过不管是很么病症，都不能讳疾忌医，要了解症状早发现早治疗，想要达到好的效果也可以选择衣原体支原体中医治:：随着生活节奏的加快以及社会发展速度的迅速，支原体衣原体感染已经是一种很常见的疾病了。正确了解支原体衣 寻找治疗方法，首先要辨别病症 出现衣原体支原体感染会有一些症状，比如疼痛，很多患者会出现阴部疼痛甚至会伴随着腰酸的症状，也会出现小便困难的现象，有很多患者需要挤压前尿道才可以达到排便的效果，如果仔细观察还会发现尿道口会出现红肿现象，而这些都是帮助大家辨别是否出现衣原体支原体感染的症状之一。 衣原体支原体感染，中医治疗有办法 中医在解决很多问题方面都有不错的效果，是对症下药的一种办法，只是花费时间相对较长，现在有一种通过中草药配置而成的中药妇炎丸，可以解决衣原体支原体感染，而且还可以起到活血、解读的效果，杀菌力是比较强的，在3 个月左右就可以治愈衣原体支原体感染，而且是纯中药配方制成的，因此大家不用担心会出现副作用。 患有衣原体支原体感染，细节不能忽视 患了衣原体支原体还应该要特别注意生活中的习惯，在发现之后配偶双方都需要到医院做检查，情况严重就要采取一定的治疗措施，在平常的生活中，饮食习惯要纠正，不能吃辛辣的东西，平常也要多喝水，而且日常卫生用品要分开，比如浴巾、浴缸等，而在没有治好之前，要避免夫妻生活，注意佩戴避孕套。 衣原体支原体中医治有不错的办法，因此不用担心，不管是什么疾病，都一定要保持乐观的心态，好的心理是对抗一切疾病的良药，患者一定要从心态上调整起来才后。
肺炎支原体抗体检测试剂盒(胶体金法)
B19病毒抗体检测试剂盒（胶体金法） 说明书 【产品名称】B19病毒抗体检测试剂盒（胶体金法） 【包装规格】24人份/盒 48人份/盒 【预期用途】用于检测试验血清中的B19病毒抗体(IgM/IgG) 【检验原理】用B19病毒抗原固相硝酸纤维素膜，应用渗滤式间接法原理，检测血清中B19病毒抗体。 【主要组成成份】 1、反应板 24份或48份 2、试剂Ⅰ 1瓶 0.02mol/L PH 7.4 PBS 3、试剂Ⅱ 1瓶胶体金标记物 【储存条件及有效期】产品应储存在2℃～8℃条件中，不能冷冻；有效期24个月。 【样本要求】 1、血清样品不能溶血，应为新鲜血清或2℃～8℃条件保存不超过一周。 2、高脂血症血清不能使用。 【检验方法】 1、滴入二滴试剂Ⅰ于反应板中央孔中，待完全渗入； 2、滴入100μl血清于反应板孔中，待完全渗入； 3、滴加三滴试剂Ⅱ于反应板孔中，待完全渗入； 4、渗入三滴试剂Ⅰ于反应板孔中，待完全渗入。 【结果解释】 阳性：反应板孔中C端出现红色圆斑，T端出现红色圆斑，为B19病毒抗体阳性； 阴性：反应板孔中C端出现红色圆斑，T端不出现红色圆斑，为B19病毒抗体阴性。 失效：反应板孔中C端不出现红色圆斑，或C端、T端均不出现红色圆斑，为试剂盒失效。 【检验方法的局限性】 1、本试剂试验仅用于检测B19病毒抗体而非直接检测B19病毒抗原,因而阳性结果并不能确诊是B19病毒感 染。对患者状况的诊断应结合患者临床体征与症状和试验结果的综合分析。 2、抗体含量低的血清样品，不能被检测出来是可能的。部份B19病毒感染的患者，不产生抗体或产生少量 的抗体。此时，可能显示阴性结果。 3、试验结果可疑时，应用PCR法确诊。 【产品性能指标】 1、批内精密度：阳性符合率和阴性符合率均应≥95%，反应斑点颜色深浅程度应接近。 2、批间精密度：阳性符合率和阴性符合率均应≥95%。 【注意事项】 1、本产品尚未获得产品注册证号，仅供研究，不用临床诊断。 2、试验一旦开始操作，应按操作步骤连续进行，直至结束。 3、试剂盒从冰箱取出时，应使试剂恢复至室温。