毒力回归方程计算公式.xls
农药生物测定实验指导
农药生物测定实验指导（研究生）实验一培养基的制作、灭菌和病原菌的接种、培养一、实验目的：1、熟悉并掌握微生物用培养基的制作及灭菌的原理及使用；2、熟悉并掌握微生物的接种、培养及保存方法。
二、实验原理：培养基是供微生物生长的基物，分液体和固体两种。
按成分又可分为天然培养基、半组合培养基和组合培养基。
培养真菌所用的培养基一般用马铃薯培养基，它是半组合培养基，制作比较简单，且能够完全满足微生物的营养要求。
灭菌是杀死所有微生物，保证培养基不被杂菌污染的重要手段之一。
灭菌的方法有四种：热力灭菌、过滤灭菌、化学灭菌和物理灭菌。
热力灭菌在微生物灭菌中占主要地位，分干热灭菌和湿热灭菌。
干热灭菌是利用热空气来灭菌，将玻璃器皿等放入烘箱中加热，一般用160-170℃处理1小时或150℃处理2小时，适用于经高温处理不易损坏的干燥物质。
湿热灭菌，即高压蒸汽灭菌，是将灭菌物放入灭菌锅内，维持一定的蒸汽压力，一般为1公斤/cm2左右（相当于121℃），维持半小时，以确保杀死所有微生物，适用于高温高压下不易分解变质的物质和玻璃器皿。
湿热灭菌比干热灭菌效率高。
病原菌接种培养是杀菌剂毒力测定经常进行的工作之一，因培养基性状不同，可采用不同的接种方法。
本实验是练习在固体培养基上接种。
固体培养基的接种方法分倾注和斜面两种接种方法。
接种后的菌种，必须放在适温下培养，在培养期间注意观察菌种的生长情况和有无杂菌污染，温度要保持恒温，培养成熟的菌种必须很好地保存。
三．主要仪器及试材：1、实验器皿：培养皿、容量瓶、移液管、无菌水、PDA培养基[注：以上器皿须经灭菌。
]2、实验仪器：超净工作台、灭菌锅、培养箱、打孔器、酒精灯等。
四．实验方法与步骤：（一）、培养基的制作：1、培养基的组成（PDA）：去皮马铃薯块200克葡萄糖（或蔗糖）10-20克琼脂17-20克水1000ml2、步骤：（1）、在大烧杯中加入1000ml的水，作上标记；（2）、称取去皮马铃薯200克，切成小块，放入盛有水的烧杯中，煮沸30分钟左右，将薯块捞出，留下汁液；（3）、称取17-20克琼脂（事先用水浸泡），加入烧杯中，煮溶后，称取葡萄糖（或蔗糖）10-20克，加入汁液中溶解。
杀虫剂触杀毒力测定(点滴法)
2、根据上一步预备试验结果，可用溴氰菊酯稀释如下浓度：
500、1000、2000、4000、8000、12000、和 16000ppm。可设7组，共选择4龄玉米螟幼虫210头，分 别放入垫有滤纸的培养皿中（滤纸预先加湿），每皿放10 头，每种浓度设3个重复。
3、用微量点滴器盛装药液，从低浓度到高浓度点滴，每头
虫点滴1μl (或通过标定容量的点滴器）于幼虫胸部背板处， 待药液挥发后，添加适量人工饲料于皿中。对照虫仅点滴 丙酮，其他处理与上相同。
4、试验观察及结果整理
试验期间记录温湿度，施药后24 小时检查每一处理的生或死虫数，统计各浓度幼虫的死亡 率和校正死亡率％。计算如下：
最后采用绘图法或直线回归方程求出 LD50 ，并用方差分 析法检定其可靠性程度 例如：供试药剂（溴氰菊酯）对玉米螟幼虫触杀 LD50 毒 力测定结果及检验。 1、溴氰菊酯对玉米螟幼虫触杀结果（见表1）
校正死 校正死 亡率机 亡率 率值（y） （％）
9.9 17.1 37.7 44.3 59.9 71.9 82 3.7 4.0 4.6 4.8 5.3 5.6 5.9
0.942 1.243 1.544 1.845 2.146 2.322 2.447 丙酮
124 124 124 124 124 123 124 124
+
— (m －x )2 — ∑nw (x － x )2
}
（∑nwx）2 － 2 ∑nw(x － x ) ＝ ∑nwx2 － ∑nwx = （837.35）2 1652.52 － 452.59 1652.52 －1549.21 103.31 1 ∑nw + ( m －－ x )2 － 2 ∑nw ( x － x ) ｝
此方法以剂量对数作横坐标，机率值作纵坐标，绘制直角坐标 系。在直角坐标系中找出该次试验的坐标点，并用一直线连接起 来，该直线称“剂量对数—死亡率机率直线”。从机率值“5”处 引一与横坐标平行的直线与“剂量对数—死亡率机率直线”相交， 以相交点引一线垂直于横轴，此垂线与横坐标的交点，即为溴氰 菊酯对玉米螟LD50的剂量对数值，再查反对数表，即为LD50值 （见下图） 因为 ㏒X＝1.86 所以 X＝72 因为 ㏒X×10 所以 X＝72／10＝7.2μg/头
毒力回归方程计算用表.xls
CK R Y= lgLC50= LC50= LC95=
浓度对数 #NUM! #NUM! #NUM! #NUM! #NUM! #NUM!
#NUM! #DIV/0! #DIV/0! #DIV/0! #DIV/0!
毒力方程计算
菌落直径(mm)
对照菌落直径-处理菌落直 径
0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00
66.00 62.00 52.00 39.00 28.00 9.00 0.00
抑制率 %
88.00 82.67 69.33 52.00 37.33 12.00 0.00
校正抑制率 %
0.8800 0.8267 0.6933 0.5200 0.3733 0.1200
Y=
3.2894
+
1.0898
X
lgLC50=
1.5697
lgLC95=
3.0790
1.57
LC50=
37.13
SE=
0.00
0.05置信限
37.13
LC95=
1199.56
#DIV/0! #DIV/0! #DIV/0! #DIV/0! #DIV/0! #DIV/0!
校正死亡率
机率植
#DIV/0! #DIV/0! #DIV/0! #DIV/0! #DIV/0! #DIV/0!
1.57 37.13
抑制率 %
#DIV/0! #DIV/0! #DIV/0! #DIV/0! #DIV/0! #DIV/0! #DIV/
lgLC95=
#DIV/0!
SE=
#DIV/0!
0.05置信限
校正抑制率 %
#DIV/0! #DIV/0! #DIV/0! #DIV/0! #DIV/0! #DIV/0!
毒力回归计算方法及相应软件使用介绍
毒力回归计算方法及相应软件使用介绍作者：武怀恒万鹏黄民松来源：《安徽农业科学》2014年第27期摘要介绍了概率对数变换进行的毒力回归计算过程；应用Excel软件编写计算过程进行毒力回归分析，计算了半致死浓度（LC50）、a、b、相关系数（r）、标准误（SE）、LC50的95%置信区间；利用实例和SPSS10.0软件上的Probit过程，介绍了概率单位分析，并对主要输出结果进行了解释。
关键词概率单位回归分析；LC50；毒力回归；Excel；SPSS中图分类号 S433 文献标识码 A 文章编号 0517-6611（2014）27-09335-04Toxicity Regression Calculation Method and Introduction of Corresponding Software Utilization WU Huaiheng， WAN Peng， HUANG Minsong*（Key Laboratory of Integrated Pest Management on Crops in Central China， Ministry of Agriculture/ Hubei Key Laboratory of Crop Diseases， Insect Pests and Weeds Control / Institute of Plant Protection and Soil Science， Hubei Academy of Agricultural Sciences， Wuhan， Hubei 430064）Abstract The process of calculating toxicity regression using probabilitylogarithmic transformation was introduced. Then the Excel method of calculating toxicity regression， LC50，a，b， correlation coefficient r， SE， 95% limited distance of LC50 was introduced. At last， the probit analysis was illustrated with an example using Probit procedure of SPSS10.0 software， with interpretation of the major outputs.Key words Probit regression analysis； LC50； Toxicity regression； Excel； SPSS对于研制新杀虫剂或者从现有杀虫剂中筛选高效低毒药剂而言，生物筛选是十分重要的研究手段，而杀虫剂毒力筛选则是其中尤为重要的环节。
毒力回归方程计算用表
CK R Y= lgLC50= LC50= LC95=
浓度对数 #NUM! #NUM! #NUM! #NUM! #NUM! #NUM!
#NUM! #DIV/0! #DIV/0! #DIV/0! #DIV/0!
毒力方程计算
菌落直径(mm)
对照菌落直径-处理菌落直 径
0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00
浓度
500.00 250.00 100.00 50.00 10.00
5.00 CK R
浓度对数 2.6990 2.3979 2.0000 1.6990 1.0000 0.6990
0.9794
菌落直径(mm)
9.00 13.00 23.00 36.00 47.00 66.00 75.00
对照菌落直径-处理菌落直 径
66.00 62.00 52.00 39.00 28.00 9.00 0.00
抑制率 %
88.00 82.67 69.33 52.00 37.33 12.00 0.00
校正抑制率 %
0.8800 0.8267 0.6933 0.5200 0.3733 0.1200
Y=
3.2894
+
1.0898
X
lgLC50=
抑制率 %
#DIV/0! #DIV/0! #DIV/0! #DIV/0! #DIV/0! #DIV/0! #DIV/0!
+
#DIV/0!
X
lgLC95=
#DIV/0!
SE=
#DIV/0!
0.05置信限
校正抑制率 %
#DIV/0! #DIV/0! #DIV/0! #DIV/0! #DIV/0! #DIV/0!
毒力回归方程b值的毒理学意义及剂量死亡曲线坡度度量的探讨
关 键 词 毒力 回归 方程
剂量 死亡 曲线
坡度
Ｌ Ｄ。
Ｏ ｎ ｔ ｅ Ｔｏ ｉｏｌ ｇｉａｌＭ ｅ ｎｉ ｇ ｏｆｂ ｏ ｈ ｎ ａ ｇｒ ｓ ｉｎ Ｅｑｕ ｔｏ ｄ ｈ ｘｃ ｏ ｃ ａ ｎ ｆ ｔ ｅ Ｌｉ ｅ ｒ Ｒｅ ｅ ｓｏ ａ ｉｎ ａｎ ｔ ｅ ｓ ｅ ｅ ｆｔ ｅ Ｓｌ ｅ ｏ ） ｅ／ ｅ ｈ ｌ ｈｅ Ｍ ａ ｕｒ ｍ ｎｔｏ ｈ ｏｐ ｆ Ｉｏｓ ｌ ｔ ａ Ｃｕ ｖ ｒｅ
ＤＤ ｎ Ｍ Ｆｅ ｇｍａ Ｚｈ ： ａ ｎ ｏｕ Ｙｉ ｈ ａ ａ ｌ
（ ｅＨ ｅ ｌｈａ ｄ ＡｎｉＥｐｄ ｍｋ ＆ａ ｉ 。 ｈ ｎ ｄ （ｈｎ ｕＳ￣ ｕ ｎ ６ ０ ２ ） Ｔｈ ａｔ ｎ ｔ— ｉｅ ｔ ｎ 厂Ｃ ｅ ｇ ｕ．’ｅｇｄ ｈ ａ 】 ０ １ ｏ
本 文 就 此 方 法 进 行 讨 论 。剂 量 取 对 数 后 作 为 ｘ ，死 亡率 转 换 成机 值 （ 率单 位 ） 作 为 Ｙ 概 后 ，将 ｘ Ｙ拟 合 ， 成 一 直 线 回 归 方 程 即 毒 力 回归 方 程 ：
ｍｅ ｓ ｄ ｂ ｈ ｃ ｔ ｔ ｘ ｃｔ ｃ ｉ ｎ ｚ ｎ ，ａ ｄ ｔ ｅ １ ｈ ｃ ｄ ｎ ［ｂ ｈ ｒ ｃｓｏ ｎ ｅ ｆｔ ｅ ｔｓ ｏ ． Ｔｈ ｌ ｐ ｆ ａ ｕ ｅ ｙ ｔ ｅ ａ ｕ ｅ ｏ ｉｉ ａ ｔ ｏ ｅ ｎ ｈ ／ ａ ｏ ｅ ｔ ｅ ｐ ｅ ｉｉ ｎ ｉｄ ｚ ｏ ｈ ｅ ｔｔ ｏ ｒ ｙ ｏ ｅｓ ｅｏ ｏ
、
ｂ值 的 毒 理 学 意 义
致 死量 的标 准差 与 Ｌ 一 样也 是 表示 化 学 品 毒 性 Ｄ。
的 指 标 比 较 由 剂 量 死 亡 曲线 转 换 成 的 回归 直 线 的 斜 率 可 以 更 好 地 理 解 致 死 量 标 准 差 的 毒 理 学 意 义 。两 种
共毒系数计算公式以及举例
共毒系数计算公式以及举例(专业植物保护知识)毒力评判采用孙云沛法，计算共毒系数(co-toxicity coefficient,CTC)，以CTC 值评判两种药剂的联合毒力作用。
CTC 值小于80为拮抗作用，大于120为增效作用，80-120之间时为相加作用。
实际毒力指数× 100%毒力指数× 100%理论毒力指数 TTI = 标准药剂毒力指数 × 标准药剂在混合组配中所占百分比 + 供试药剂毒力指数 × 供试药剂在混合组配中所占百分比共毒系数× 100%应用举例例如螺螨酯与马拉硫磷 4:3混配，螺螨酯LC50=80 马拉硫磷LC50=100 4:3混配LC50=60 设螺螨酯为标准药剂，则螺螨酯TI = 螺螨酯LC50/螺螨酯LC50 *100=100马拉硫磷TI = 螺螨酯LC50/马拉硫磷LC50 * 100= 100/80 *100= 1254:3混配ATI = 螺螨酯LC50/4:3混配LC50 * 100= 80/60 *100= 133.334:3混配TIT = 标准药剂毒力指数×标准药剂在混合组配中所占百分比 + 供试药剂毒力指数×供试药剂在混合组配中所占百分比= 螺螨酯TI * 4/7 + 马拉硫磷TI * 3/7= 100 * 4/7 + 125 * 3/7= 57.1429 + 53.5714= 110.71434:3混配共毒系数 CTC = 4:3混配ATI/4:3混配TIT *100= 133.33/110.7143 *100= 120.4271再用CTC判断增效、相加和拮抗。
2012-10-11注：文档质量没问题，请让我上传，我自己写的，文库管理员。
2012-10-11 8:06:54。
Excel 2000计算毒力回归线和卡方表
nwx2 402.0684 360.1957 306.9780 221.8473 109.8897 1400.9790
nwxy 827.6345 795.5001 712.3112 548.0071 273.2810 3156.7339
X
2 0.05
(df=3)
3.5005
符合
当百分比浓度带入本程序时，应× 10000倍 ），在B3中输入250即可；药剂浓度为毫克/ 入。C3公式中的点滴器体积改为相应的体
供试真菌： 死亡虫数 79 71.5 56.5 41 19.5 5 m 2.1809 100 100 100 100 100 100 b 1.4449
Байду номын сангаас
日期： 0.7900 0.7150 0.5650 0.4100 0.1950 0.0500 LD50 151.6733
剂量对数 x 总试虫数
634.5 317.25 158.625 79.3125 39.65625
毒力测定与卡方检验计算表 编号 1 2 3 4 5 CK 求和 计算结果 X均值 2.2139 Y均值 5.0477 浓度（μ
g/ml）
药剂： 剂量 634.5000 317.2500 158.6250 79.3125 39.6563 2.8024 2.5014 2.2004 1.8993 1.5983 11.0019 a 1.8488
nwy 295.3273 318.0217 323.7231 288.5248 170.9811 1396.5780
nwy2 1703.6376 1756.8794 1652.8458 1353.6871 679.6134 7146.6634
理论机率值 理论死亡率 理论死虫数 校正死虫数 5.8980 5.4631 5.0281 4.5932 4.1582 0.8154 0.6783 0.5112 0.3421 0.2000 81.5415 67.8345 51.1217 34.2065 19.9953 77.8947 70.0000 54.2105 37.8947 15.2632
Excel在杀菌剂复配研究中的应用
算 出杀菌剂复配研 究中药剂毒力 回归方程 、抑制中浓度 。相关系数和共毒系数等数据。该程序操作较 Ｄ Ｐ Ｓ软件简
便 ，结果较传统手工计 算更加准确 ，其有助于在杀菌剂 复配研究 中更加高效地进行数据处理。
关键 词 ：Ｅ ｘ ｃ ｅ ｌ ； 农药 复配 ；抑 制 中 浓 度 ；共 毒 系 数
，
同样嵌套 于 Ｉ Ｆ 函 数 中 ， 输 入 公 式 为
“ ＝ Ｉ Ｆ （ Ｊ ２ ＞ ＝ １ ０ ０ ， ” ” ， Ｉ Ｆ （ Ｊ ２ ＞ ０。 ０ ６ 格 为 回 归 方 程 ａ 值 ， 输 入 公 式 为
１基本程序 的编 写
（ Ｊ ２ ／ １ ０ ０ ） ＋ ５ ， ４ ） ， ” ” ’ 。 Ｌ ２ ～ Ｌ ６ 为药剂 浓度对 数 ，与机率 值计 算结 果统
一
剂 二元 复配试 验 为例 ， 将 实现 只需 要输 入原始 数据 ，
就 可 以快速得 到 Ｅ Ｃ ５ ｏ 值 、回 归方程 、相 关系 数及共 毒 系数 值 。本 文 以杀菌 剂 为例进 行阐述 。
上 述缺 陷，并 且加 入计 算共 毒系 数 的公式 。以杀菌
Ｊ ２ － Ｊ ６ 格 为 抑 制 率 （ ％）， 输 入 公 式 为
“ ＝ （ Ｉ ５ ８ 一 Ｉ ２ ） ／ （ Ｉ ￥ ８ — ０ ． ６ 、 １ ０ ０ ” 。 Ｋ ２ ￣ Ｋ６ 格 为机率值 ，在实际试 验时有时会 出现抑
（ １化 工研 究 院国家农 药创制 工程技 术研 究 中心 长沙 ４ １ ０ ０ １ ４ ， ２ 农用化 学 品湖 南省 重 点 实验 室 ，长 沙 ４ １ ０ ０ １ ４）
摘要 ：农药复配在 农药研究 中的重要性越来越突出。以杀菌剂为例 ，根据机率值分析法 原理及共毒系数法原则，利 用Ｅ ＸＣ Ｅ Ｌ编制 了数据处理程序，实现 了用户只需输入药剂浓度 、菌落直径及 药剂配 比比例 ，即可快速 、准确地计
生态毒理学 (13)
因作用点位或模式不同，化学品作用于不同生物体系 或对同样生物系统影响不同。响应相加模式基于相关 系数的三种取值(1，0，+1)，以个体生物的敏感性表 征两化学品浓度/剂量的相似性。
负相关不能应用于两个以上化学品混合物，多个化学 品混合物的相关系数介于0和1之间。
当 = +1，种群对混合物的响应与对其中最毒成份的响 应没有显著不同，则当任一组分的最大毒性单位等于1 时，会出现标准响应。
认为两者为相加作用，高值意味着加强，低值为拮 抗作用。
非相容性抑制剂 竞争性抑制剂，相互发生各种排斥作用，描述方程：
1/V1,2 = 1/ V1 + 1/V2 1/V0 联合作用速率V1,2，单独作用速率V1和V2，初始速率 V0。 若干化学物同时作用：
1/V1,2,…n = 1/Vi (n 1)/V0 转化为化学物浓度或作用速度Vi。 利用半效应图可区分相容性和非相容性抑制剂作用：
MTUc = TUmax+(MTUmax) TU：毒性单位(toxicity unit) M：混合物产生的标准响应(如LC50) 校正因子 = (1TUmax)/(MTUmax) AEE：外推误差分析(analysis of extrapolation error)
>1
经验相 关系数
Hale Waihona Puke 浓度相加与响应/反应相加浓度相加(简单相似作用)
化学物独立作用产生相似的生物效应，从而混合物中 某一成份的浓度可以由另一成份表示。如果标准响应 (如96h混合物暴露存活概率=0.5)出现，即毒性单位之 和等于1，则混合物组分联合作用可定义为浓度相加。 浓度相加据认为是非交互联合作用最常见的形式。主 要工业化学品(来自有毒物质控制行动清单TSCA)和地 表水中工业污染物的主体大多表现为浓度相加作用模 式。