南唐二陵墓室彩画上滋生藻类、苔藓与霉菌的种类鉴定

相 关鉴 定 方法 ， 菌株进 行 鉴定 。 】 对
２ ３ 藻 的分离 与纯 化 ．
经 鉴定 ， 室 中的 霉 菌还 有 ： 墓 曲霉 属 Ａｐｒｉｕ ｓｅ ｌｓ ｇ ｌ Ｍｉ ．ｘＬｎ ， 状 亚 属 Ｓ ｂｅ．Ｎｄｌｎｅ Ｇ ｍ ｔ ｃ ｅ ｉｋ 巢 ｈ ｕｇｎ ｉｕａｔ ａ ｓｅ ｓ
２ ）显 微 形 态 观 察 。将 分 离 出 来 的 单 菌 落 的 菌 株 固定 在 圆 形 的 载 玻 片 上 ， 金 后 在 扫 描 电 镜 喷 下 观 察 菌 丝 形 态 、 子 形 状 ， 录 观 察 结 果 并 拍 孢 记
照。
４）正 青 霉 属 Ｅ ｐｎｃ ｌ ｍ Ｌ ｄ ｉ 、 鲑 色 正 ｕｅｉ ｌｕ ｕ ｗｇ 赭 ｉｉ 青 霉 Ｅ ｃ ｒ ａｍ ｎｕ ｃｔ＆ Ｓ ｌ ．ｏｈｏ ｌ ｏ ｅｍ Ｓｏｔ ｔ ｋ ｓ ｏ
即得 到单种 藻 。 ２ 当培养基 呈 现藻 色时 ， ） 镜检 观察 。 ３ 制 作 培 养 液 的 水 封 片 ， 据 藻 体 个 体 形 ） 根 态 、 体 形 态 等 特 征 ， 显 微 镜 下 直 接 观 察 其 组 群 在
织形态 。
Ｐ Ａ培养 基 、 氏培 养 基 、 Ｇ １培 养 基 、 二 Ｄ 查 Ｂ１ 戊 醛 、 酸缓 冲液 、 酸 、 磷 锇 乙醇 、 醋酸 异戊 酯 、 容量 瓶 、 培 养 皿 、 品管 。 样
第 ３期
汪娟丽等 ： 南唐二陵墓室彩画上滋生藻类 、 苔藓与霉菌 的种类鉴定
７ ３
１ 实验材料与设备
１ １ 实验 材料 ．
取 １０ Ｌ培养 液 于 固体 Ｂ １培 养 基 上 涂 布 ， 长 ０￣ Ｇ１ 等
出藻丝 后挑 取 藻丝 转 接 ， 微 镜 镜 检 确认 无 其 它 藻 显
ｐ ７ ０的磷酸 缓 冲液 漂 洗 ， Ｈ． 固定 在 ３ 戊 二 醛 溶 液 ％
中， 泡置 ２ ， 酸缓 冲液 漂 洗样 品三 次 ， 次 １ ｍｉ。 ｈ磷 每 ５ ｎ 再将 样 品在 １ 的锇 酸溶 液 中 固定 ２ ， 缓 冲 液 漂 ％ ｈ用 洗样 品 ， ５ ％ 、０ 、０ 、０ 、５ 、０ ％ 梯 度 经 ０ ７ ％ ８ ％ ９ ％ ９ ％ １０ 浓度 不 同 的乙醇 溶 液 对样 品进 行 逐 级 脱 水 处理 ， 每
５ 篮 状 菌属 Ｔ ｌｒｍ ｃｓ ｅｊｍｉ 糙 刺 篮 状 ） ａａｏ ｙｅ Ｂ ｎａ ｎ、
菌 Ｔ ｌｒｍｙｅ ｒｃｙｐ ｒ ｓ （Ｓ ｅ ｒ Ｓｏｋ ＆ ａａｏ ｃｓ ａｈ ｓｅｍｕ ｔ ｈ ａ ） ｔｌ
Ｓ ａｍ ｍｓ ｎ． ｏ
３ 鉴 定 。综合 菌落 形态 和菌 株 显微 形 态 ， ） 参考
种：
１ ）根 霉属 Ｒ ｉｐ ｓ黑 根霉 Ｒ ｉｒ ａ ｓ ｈｚ ｕ 、 ｏ ．ｎｇｉ ｎ ｃ
２ 曲霉属 Ａｐｒｉｕ、 白 曲霉 Ａ ｃｎ ｉｕ ） ｓｅｇｌｓ亮 ｌ ．ａ ｄ ｓ ｄ
３ ）青 霉 属 Ｐ ｎｃ ｌ ｍ Ｌｎ 、 孢 青霉 ｐ ｎ ｉｉ ｅｉ ｌｕ ｉｋ 椭 ｉｉ ｅ ｉｌ． ｃ ｌ
２ ２ 霉 菌菌 落形 态观 察及 分 离鉴定 ． １ ）菌 落 形 态 观 察 。用 灭 菌 的 尖 细 接 种 针 取
一
在显 微 镜 与 扫描 电镜 下 观察 ， 分别 获 得 了 菌落
细胞 的形 态 特 征 （ ３ 图 ４） 图 、 。鉴 定 结 果 表 明南 唐
二陵墓 主 室 墓 室 彩 画上 滋 生 的 霉 菌 主要 有 以下 几
１ ｍｉ， 二氧 化碳 临界 点 干 燥 ， 金 后 在 扫 描 电 镜 ５ ｎ经 镀
下观 察 。
盐水 少量 ， 匀 。将 悬 液倒 入 培 养 基 中 ， 人 ２ ℃ 摇 放 ８
恒 温培养 箱 中 ， 养 ５天 。 培
３ 结果与分析
３ １ 分 离的 霉菌 菌落 形态观 察 ．
３ 纯 化 。在 菌 落 长 出后 ， 取 菌 落 ， 接 入 ） 挑 转 新 的培 养 基 中 ， 入 ２ ℃ 恒 温 培 养 箱 中 活 化 ， 放 ８ 培 养 ５天 。在 培 养 基 上 经 过 ４次 纯 化 ， 得 单 一 菌 获 落。
０． ｆ杂色 组 Ｓｃ ｅ ｉ ｌｒ ａ ｔ １ ： ｅ ．Ｖｒｃ ｏｅ Ｇ ｍｓ ． ｔ ｓｏ ｓ ｅａ
将 南 唐 二 陵墓 室 彩 画 滋生 的藻 ， 速 放 入无 菌 快
管 中， 密封 。在有 样 品 的无 菌 管 中加 入无 菌 生理 盐 水少 量 ， 摇匀 。将 悬液 倒 人 培养 基 Ｂ １ 培 养 液 中 ， Ｇ１
１ ２ 实验 设备 ．
ＡＩ Ｔ Ｃ 型 超 净 工 作 台 ， Ｘ 一２ ０ 灭 菌 ＲＥ Ｈ ＤＳ ８Ａ
２ ５ 苔藓 与藻 类扫 描 电镜形 态观 察 ． 将分离 出来 的苔藓 和藻类样 品， ０２／ ｏ 用 ．Ｌｔ ｌ ｏ
器 ，Ｐ Ｓ Ｘ型 智 能 生 化 培 养 箱 ，Ｐ 一 Ｃ型 显 微 镜 ， ＳＸ ２ Ｑ ａｔ ２ ０环 境 扫 描 电子 显 微 镜 ， 氧 化 碳 临 界 ｕ ｎａ ０ 二 点 干燥 仪 。
点 霉 菌 孢 子 ， 轻 点 在 培 养 基 上 ，８ 培 养 ， 轻 ２℃ 连
续 几 天 观 察 菌 落 外 观 形 态 、 色 、 丝 生 长Байду номын сангаас情 况 颜 菌
等。
ｕ ｌｐｏ ｅｓｏｕ ． ｎ ｍ ｅｉ ｉ ｏ ｒｍ Ｌ Ｗａｇ＆Ｈ ． 凡 刺糙 青霉 ｌｓ ｄ ｐ Ｚ ｇ、
Ｐ． ｃ ｉ ｕ ａ ｕ Ｒａ ｅ ｅ ｈ ｎ ｌ ｔ ｍ ｐ ｒ
２ 实 验 方 法
２ １ 霉 菌 的分 离 ．
具体 操 作步 骤如 下 ： １ 取样 。将 南 唐二 陵墓 室 彩 画 滋 生 的蓝 藻 与 ）
霉 菌 ， 速放 入无 菌 管 中 ， 快 密封 。 ２ ）转 接 。在 有样 品的无 菌 管 中加 入 无 菌 生 理
种浓 度 处 理 １ｍｎ 过 渡 到 醋 酸 异 戊 酯 中 处 理 ５ ｉ，