第十一章-微生物的分类和鉴定

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章十 微生物的分类和鉴定

章十 微生物的分类和鉴定
1. 2. 3. 4. rRNA普遍存在,易于提取; rRNA重要恒定的生理功能; 在细胞中含量大,易于提取; 编码rRNA的基因在细胞中不像质粒DNA那样会转移,而是十 分稳定的 ; 5. rRNA的非常保守性--进化尺度; 6. 16S/18S rRNA 核苷酸数量适中, 信息量大,易于分析。在原 核生物核糖体所含的三种rRNA(23S,16S和5S,见图11-11) 中,其核苷酸数分别约为2900、1540和120个,其中的 16SrRNA不但核苷酸数适中,而且信息量较大且易于分析, 故是理想的研究材料。
亚种以下的分类单元
亚种(subspeciers):种的进一步细分,一般指其某 一民而稳定的特征与模式中不同的种常在种名、署名 的加词后写上subsp.然后再写具体亚种的加词; 变种( variety):容易引起混乱; 型 form:使用中用型作为后缀;表示细菌菌株,现已 作废; 类群(group):没有分类地位非正式地指定一组具有 某些共同性状的生物; 菌株(strain):表示任何由一个独立分离的单细胞繁 殖而成的纯种群体极其一切后代;实际上是一个微生 物达到遗传性纯的标志。 小种(race):涵义较乱,在不同分支学科中由不同 涵义; 相(phase):自然界存在的微生物交互变异的一定阶 段; 态(state):通常指微生物的菌落变异状态。
《伯杰氏系统细菌学手册》
1st ed, 1984-1989, 分为4卷;是在《伯杰氏鉴定细菌 手册》 8th ed 的基础之上增加了大量的分子生物学资料。 但由于当时细菌系统发育的资料仍较零碎,所以有相当一 部分类群未能科目级别分类,从实际需要出发,主要根据 表型特征将整个原核生物分为33组,33个组的划分见表。 国际上最为流行的版本。微生物分类技术和学术理论的发 展促进了生物科学的进步。 2ed ed, 2000开始出版,分为5卷,提出完整的系统分类, 将原核生物分为:古细菌界(2门、5组、8纲、11目、17科、 63属、208种);细菌界:(16门、26组、27纲、62目、 163科、814属、4727种);反映了人们对生物系统发育的 深刻认识。

微生物的分类和鉴定方法

微生物的分类和鉴定方法

定义:单细胞或多细胞, 无细胞壁,有细胞核和细
胞器
特点:形态多样,结构简 单,繁殖迅速
分类:纤毛虫、鞭毛虫、 孢子虫、肉足虫等
应用:环境监测、污水处 理、生物制药等领域
显微镜观察:观察微生物的形状、 大小、颜色等特征
培养特性:观察微生物在不同培 养基上的生长情况
生理生化反应:检测微生物的酶 活性、代谢产物等生理生化特性

蛋白质组学:通 过分析微生物的 蛋白质组成和功 能来鉴定其种类
和特性
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汇报人:XX
补体结合试验等
优点:快速、简 便、灵敏度高
Hale Waihona Puke 局限性:需要已 知的抗原或抗体,
且可能受到其他 因素的影响
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DNA序列分析: 通过比较DNA序 列来确定微生物 的种类和亲缘关

基因测序:通过 测序微生物的基 因来鉴定其种类
和特性
基因芯片技术: 利用基因芯片技 术快速检测微生 物的基因表达情
定义:具有细 胞壁、细胞膜、 细胞核等细胞 结构的微生物
分类:分为酵 母菌、霉菌和 蕈菌三大类
特征:生长缓 慢,形态多样, 可产生孢子进 行繁殖
应用:在食品、 医药、环保等 领域有广泛应 用
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定义:一类能进行光合作用的微生物,包括蓝藻、绿藻、红藻等 特点:具有叶绿素,能进行光合作用,产生氧气 分类:根据形态、结构、生理特性等进行分类 应用:可用于污水处理、生物燃料、食品添加剂等领域
血清学鉴定:利用抗原抗体反应 进行微生物的鉴定

微生物的分类

微生物的分类

不同的微生物往往有自己不同的重点鉴定指标。如:在鉴 定形态特征较丰富、细胞体积较大的真菌等微生物时,常以 形态特征为主要指标;在鉴定放线菌和酵母菌时,往往形态 特征与生理特征兼用;而在鉴定形态特征较单调的细菌时, 须使用较多的生理、生化和遗传等指标;在鉴定属于非细胞 生物类的病毒时,除使用电子显微镜和各种生化、免疫等技 术外,还要使用致病性等一些独特的指标和方法。
1980年代初起,该手册组织了国际上20余国的300多位专 家,合作编写了4卷本的新手册,书名改为《伯杰氏系统细菌 学手册》(Bergey’s Manual of Systematic Bacteriology),此书是 目前国际上最为流行的实用版本。
第三节 微生物分类鉴定的方法
一、微生物分类鉴定中的经典方法 1、微生物分类鉴定的工作步骤 (1)获得该微生物的纯培养物 (2)测定一系列必要的鉴定指标 (3)查找权威性的菌种鉴定手册
宿主种类,与宿主关系等
生活史,有性生殖情况 血清学反应 对噬菌体的敏感性 其他
3、国内外常见的自动快速鉴定系统
由于致人、畜疾病和植物病害的微生物种类的不断增加, 以及经济的发展,人们对食品、日化、环境等行业微生物要 求的不断提高,传统的用单个试验来鉴定微生物不仅工作量 十分浩大,而且对技术熟练度的要求也很高,因此,出现了 以数值分类为基础的鉴定系统,使细菌鉴定简易化、微量化 和快速化。
API系统已为国内外微生物学家所公认,并为许多实验室 普遍选用,适用于API系统鉴定的细菌有700多种,由于具 有自动、快速、高效的特点,可广泛应用于医药、临床、 兽医、食品、水质测定、环境保护、药物生产、发酵、生 物工程、动植物检疫、 生态学和土壤学等 研究,特别适合于 快速、大量的菌株 鉴定。
2、经典的鉴定指标

第十一章微生物的分类

第十一章微生物的分类


3.相似度系数的计算
相似度系数是被比较的OTU对偶间整体相似程度的量 度.最简单的方法是计算OTU对偶间相似性状的数目。其 计算公式如下: NS S%=—-------— NS+ND 式中的NS表示比较的OTU对偶有相同性状的数目.ND 表示被比较的OTU对偶有不同性状的数目。算出的相似度 以百分数或比例表示。
(二)生理生化特征




1.对营养或生长基质的要求 包括所能利用的碳源、能源、氮源、无机盐以及生长因子等。 2.生理生化反应 水解大分子的能力.如淀粉水解、油脂水解、明胶液化和酪素水 解等试验:糖或醇类发酵试验、甲基红试验、V.P.试验;吲哚 试验和H2S试验;硝酸盐还原试验、柠檬酸盐或丙酸盐利用试验 和丙二酸盐利用试验等;用作分类特征的酶如氧化酶、过氧化氢 酶、凝固酶、脲酶、氨基酸脱羧酶、精氨酸双水解酶、苯丙氨酸 脱氨酶以及B一半乳糖苷酶等;产色素、抗生素等次级代谢产物也 常是某些微生物的分类依据。 3.抗逆性 对噬菌体、抗生素、染料和化学药品等抗微生物因子 (antimicrobial agent)的反应等。
第一节微生物的分类单元



分类单元(taxon。复数taxa)是指某一个具体的 分类群,如原核生物界,大肠埃希氏菌属和枯 草杆菌等分别代表一个分类单元: 与其他生物一样,微生物分类的基本单元也是 种(species) 微生物种是显示高度相似性、亲缘关系极其接 近、与其他种有明显差异的一群菌株的总称。 在每个种中都有一个菌株被指定为模式菌株 (type strain),它是这个种名称的代表.是这 个种的永久的标准标本。
四、细菌分类和伯杰氏手册

《伯杰氏手册》最初由美国宾夕法尼亚大学 的细菌学教授伯杰(D.Bergey)(1860—1937) 及其同事为细菌的鉴定而编写的名为《伯杰氏 鉴定细菌学手册》沿用至今。

第11章微生物的进化、系统发育和分类鉴定

第11章微生物的进化、系统发育和分类鉴定

分类(classification):根据生物特征的相似程度 将其分群归类。
地球上的物种估计大约有150万,其中微生物超过10万种, 而且其数目还在不断增加。
生物分类的二种基本原则:
(参见P313)
a)根据表型(phenetic)特征的相似程度分群归类,这种 表型分类重在应用,不涉及生物进化或不以反映生 物亲缘关系为目标; b)按照生物系统发育相关性水平来分群归类,其目标 是探寻各种生物之间的进化关系,建立反映生物系 统发育的分类系统。
a)在两群生物中,如果同一种分子的序列差异很大时,
------------进化距离远,进化过程中很早就分支了。 b)如果两群生物同一来源的大分子的序列基本相同, ------------处在同一进化水平上。
2. 作为进化标尺的生物大分子的选择原则
1)在所需研究的种群范围内,它必须是普遍存在的。
2)在所有物种中该分子的功能是相同的。
上个世纪60-70年代:
(参见P314)
分析和比较生物大分子的结构特征,特别是
蛋白质、RNA和DNA这些反映生物基因组特征
的分子序列,作为判断各类微生物乃至所有 生物进化关系的主要指征。
分子计时器(molecular chronometers) 进化钟(evolutionary clock)
1. 生物大分子作为进化标尺依据 蛋白质、RNA和DNA序列进化变化的显著 特点是进化速率相对恒定,也就是说,分子 序列进化的改变量(氨基酸或核苷酸替换数 或替换百分率)与分子进化的时间成正比。
b 进化距离,即任意两个生物RNAs 间非同源序列的比例
(参见P317) 2. 特征序列或序列印记(signature sequence)
通过对r RNA全序列资料的分析比较(特别是采 用计算机)发现的在不同种群水平上的特异的 特征性寡核苷酸序列,或在某些特定的序列位 点上出现的单碱基印记。

微生物学 11第十一章 微生物系统学与分类 图文

微生物学 11第十一章 微生物系统学与分类 图文

亚种
型、菌株
变种
(一)属的命名规则
✓ 微生物命名与其他生物一样,采用Linnaeus氏双名法 ✓ 属名:用一个单数主格名词或当作名词用的形容词来表
示,斜体、首字母要大写。
Bacillus(芽孢杆菌属) Clostridium(梭菌属) Salmonella(沙门氏菌属)
属名可源自科学家、地名、微生物形态、生理或其他区别于 其他微生物的特征
四、三原界系统与内共生学说
1970年代以后,分子生物学的发展,尤 其是Woese(1977)等对原核生物的 16S rRNA 核苷酸序列进行测定与同源性 分析,开创了以16S rRNA为基础的分子 生物学分类新时代。后于1978年由 R.H.Whittaker和L.Margulis 又提 出了一个新的学说:三原界学说。
属名:消化链球菌
种名:恶臭
原命名者
改名者
3、泛指种名的 表示方法
✓当泛指某一属细菌而不特指该属中任何一个种(或未定种 名)时,可在属名后加sp.(1种)或spp.(多个种)表示,
如 : Streptomyces sp. ( 一 种 链 霉 菌 ) , Micrococcus
spp.(某些微球菌)。
种名可源自科学家、地名、微生物形态、生理或其 他区别于其他微生物的特征的形容词
海克尔(Haeckel)建议,生物 系统在原有动物界和植物界之外, 应加上一个由低等生物组成的第 三界——原生生物界 (Protista),它主要由一些单 细胞生物及“无核类” (Monera)组成。
二. 四界系统
1938年, Copeland 提出四界系统 的设想,至1956,其四个界定名为: 植物界、动物界(除原生动物外)、原 始生物界(原生动物、真菌、部分藻类) 和菌界(细菌、蓝细菌)。

微生物的分类与鉴定答案

微生物的分类与鉴定答案

一、填空:1.微生物菌种的命名采用"双名法",即由属名和种名加词构成。

2.来源于一个细胞在固体平板培养基上形成的群体称菌株。

3.1969年将生物界分成了五界,分别是动物界、植物界、原生生物界、真菌界、原核生物界。

4.细菌的分类单元分为七个基本的分类等级,由上而下依次为_界、_门__、纲、目、科、属、种。

5.生物分类的传统指标为形态特征、生理生化反应、和生态特性。

6.形态学特征始终被用作微生物分类和鉴定的重要依据之一,其主要原因为具有相对稳定性_和易观察。

7.分类学的内容包括_细菌分类_、放线菌分类和真菌分类_三部分,目前进行细菌分类和鉴定的重要参考书目是_《伯杰氏细菌鉴定手册》。

8.微生物分类和鉴定的特征包括_形态特征_和_生理生化反应_,其中__形态特征_对鉴定微生物的系统发育有决定性作用,而_生理生化反应_可作为判断亲缘关系的参考而且对以实用为目的的分类鉴定仍有重要价值。

9.核酸分子杂交_和_rRNA寡核苷酸编目分析__是目前通过直接比较基因组进行生物分类最常用的两种方法。

10.1978年,Woese等提出新的生物分类概念,根据16SrRNA的碱基序列将生物清晰地划分为三原界,即细菌域、古生菌域和真核生物域。

11.对微生物命定学名的表示方法分双名与三名两种。

12.在生物的界级分类学说研究中,1978年由R.H.whittake和“提出了一个崭新的三域学说。

13.填写以下10个数据:(1) 对牛奶等进行巴氏消毒时常用 63 ℃的温度;(2)用液氮保藏微生物的温度为 -196 ℃;(3)通常细菌的最适培养温度为 37 ℃:(4)用烘箱进行的干热灭菌温度一般为 150~170 ℃;(5)的代时一般为 17 min;(6)典型的酵母菌S.cerevisiae的代时一般为 120 min,其大小一般为~10 X ~21um 。

(7)至今已记载的微生物约 20万种(1995);(8)我国卫生部门规定自来水中所含的大肠菌群数不得超过 3个/L ;(9)细菌总数不得超过 100个/ml 。

微生物的分类和鉴定方法

微生物的分类和鉴定方法

农业废弃物资源化
利用
通过对农业废弃物中微生物的研 究和利用,可以实现农业废弃物 的资源化利用,促进农业可持续 发展。
食品领域:食品安全检测、食品添加剂研发等
食品安全检测
利用微生物分类鉴定技术,可以快速准确地检测食品中的有害微 生物,保障食品安全。
食品添加剂研发
通过对微生物产生的天然产物进行研究和改造,可以开发出新型、 安全的食品添加剂,提高食品的口感和营养价值。
要点三
显微镜检查
使用显微镜对染色后的微生物进行观 察和分析,记录其形态和结构特征。 在显微镜检查时应注意选择合适的放 大倍数和光源强度,以便更准确地观 察和分析微生物的特征。
05
微生物分类鉴定中常见问 题及解决方法
形态学特征模糊或易混淆问题
形态学特征模糊
某些微生物在形态上非常相似,容易造成混淆。解决方法包括使用高分辨率显微镜、电子显微镜等先 进技术进行更细致的观察,以及结合其他鉴定方法如生理生化特性、分子生物学技术等进行综合判断 。
免疫学鉴定方法
免疫荧光技术
利用特异性抗体与荧光染料结合,形成荧光抗体,再与待检微生物结合,通过荧 光显微镜观察荧光信号,从而鉴定微生物的种类。
酶联免疫吸附试验(ELISA)
将特异性抗体与固相载体结合,加入待检微生物后,再加入酶标记的二抗,最后 加入底物显色,通过比色法测定吸光度值,从而鉴定微生物的种类。
微生物的分类和鉴 定方法
汇报人:XX 2024-01-21
பைடு நூலகம்
目 录
• 微生物分类概述 • 微生物鉴定方法 • 微生物分类体系与命名规则 • 微生物鉴定实验设计与操作技巧 • 微生物分类鉴定中常见问题及解决方法 • 微生物分类鉴定在各个领域应用前景展望
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于提取; 16SrRNA普遍存在于真核生物和原核生物中(真核生物
中其同源分子是18SrRNA)。因此它可以作为测量各 类生物进化的工具。
Eubacteria (细菌域)
Archaea
Eukarya
(古生菌域) (真核生物域)
Carl Woese利用16SrRNA建立分子进化树
古生菌在进化谱系上与真细菌及真核生物相互并列,且与后者关 系更近,而其细胞构造却与真细菌较为接近,同属于原核生物。
缺点: a)由于微生物可利用的形态特征少,很难把所有生物 放在同一水平上进行比较; b)形态特征在不同类群中进化速度差异很大,仅根据 形态推断进化关系往往不准确;
生物大分子作为分类鉴定的依据
蛋白质、RNA和DNA序列进化变化的显著特点是进化速 率相对恒定,也就是说,分子序列进化的改变量(氨基酸 或核苷酸替换数或替换百分率)与分子进化的时间成正比。
生物分类就是通过研究生物的系统发育及其进化 历史,揭示各类生物的多样性及其系统关系,编 制分类系统,还原生物的自然历史位置。
化石资料、形态学、比较胚胎学
高等动植分类
较正确反映 其系统发育
微生物分类的难题: 绝大部分微生物个体小、形态简单、易受环境 影响而变异、缺少有性繁殖、缺乏化石资料。
生物分类的二种基本原则:
★微生物分类学的三个任务:分类、鉴定及命名
☆分类是根据微生物的相似性和亲缘关系,将微生物归入不同的 分类类群。 ☆鉴定是确定一个新的分离物属于已经确认的分类单元的过程。 ☆命名是根据国际命名法规给微生物分类单元以科学的名称。
有关学名的其他知识
属名:是一个表示该微生物主要特征的名词或用作名 词的形容词,单数,第一个字母大写。
种名加词:又称种加词,它代表一个物种的次要特征, 字母一律小写。
属名和种名都是由拉丁词、希腊词或其他拉丁化的外 来词或以组合方式拼成。
按规定,学名均应按拉丁字母发音规则发音。
由于细菌分类单元的划分缺乏一个易于操作的统一标准, 为了减少因采用不同标准界定分类单元所造成的混乱, 细菌系统分类也像其他生物分类一样采用“模式概念”
RNA作为分类鉴定的依据 16S rRNA被普遍公认为是一把好的谱系分析的“分子尺”:
rRNA具有重要且恒定的生理功能
在16SrRNA分子中,既含有高度保守的序列区域,又 有中度保守和高度变化的序列区域,因而它适用于进 化距离不同的各类生物亲缘关系的研究;
16SrRNA分子量大小适中,便于序列分析; rRNA在细胞中含量大(约占细胞中RNA的90%),也易
第十一章 微生物的分类和鉴定
第一节 微生物在生物界的地位 第二节 微生物的分类和命名 第三节 微生物分类鉴定的方法 第四节 微生物的分类系统 第五节 微生物的快速鉴定和自动化分析技术
生物界的分类
地球上的物种估计大约有150万,其中微生物 超过10万种,史过程中演化形 成生物种类和种群的多样性。
★血清学反应
常借助特异性的血清学反应来确定未知菌种、亚种 或菌株。
二、微生物分类鉴定中的现代方法
核酸的碱基组成和分子杂交 特点: 与形态及生理生化特性的比较不同,对DNA的碱
a)根据表型(phenetic)特征的相似程度分群归类, 这种表型分类重在应用,不涉及生物进化或不以反 映生物亲缘关系为目标;
b)按照生物系统发育相关性水平来分群归类,其 目标是探寻各种生物之间的进化关系,建立反映生 物系统发育的分类系统。
第一节 微生物在生物界的地位
一、生物的界级分类学说
★从两界系统经历过三界 系统、四界系统、五界系 统甚至六界系统,最后又 有了三原界(或三总界) 系统。(图10-2)
种和亚种指定模式菌株(type strain); 亚属和属指定模式种(type species); 属以上至目级分类单元指定模式属(type genus);
模式菌株应送交菌种保藏机构保藏,以便备查考和索取。
第三节 微生物分类鉴定的方法
表型特征: 形态结构、生理生化、少量的化石 资料、行为习性,等等
★传统的、为多数学者所 接受的是1969年魏塔克 (R.H.Whittaker)在 《Science》上提出的五界 学说。
二、三域学说的建立和发展
利用16S rRNA建立分子进化树的美国科学家Carl Woese
(1)古生菌域(Archaea) :包括产甲烷细菌、 极端嗜盐菌和嗜热嗜酸菌等
(2)细菌域(Bacteria) :包括蓝细菌和各种除 古细菌以外的其它原核生物
(3)真核生物域(Eukarya):包括原生生物、 真菌、动物和植物
第二节 微生物的分类和命名
经典分类学:按微 生物表型分类
发展
微生物系统学:按 亲缘关系和进化规 律分类
表型特征:形态学、生 理生化学、生态学等, 推断微生物的系统发育。
表型特征结合分子水平上比 较微生物的基因型特征(如 16S rRNA)探讨微生物进 化、系统发育和分类鉴定。

与微生物的酶和调节蛋白质的本质和活性直接相关; 酶及蛋白质都是基因产物; 对微生物生理生化特征的比较也是对微生物 基因组的间接比较;
测定生理生化特征比直接分析基因组要容易得多;
营养类型; 与氧的关系; 对温度的适应性; 对渗透压的适应性; 对pH的适应性; 代谢产物等
★生态特性
包括在自然界的分布情况,与其他生物有否寄生或共 生关系, 宿主种类及与宿主关系, 有性生殖情况, 生活 史等。
a)在两群生物中,如果同一种分子的序列差异很大时, ------------进化距离远,进化过程中很早就分支了。
b)如果两群生物同一来源的大分子的序列基本相同, ------------处在同一进化水平上。
大量的资料表明:功能重要的大分子、或者大分子中功能 重要的区域,比功能不重要的分子或分子区域进化变化速 度低。
微生物分类鉴定的指标和方法
1、 生物分类的传统指标: 形态学特征、生理学特征、 生态学特征
形态学特征 培养特征、 细胞形态及其染色特性、 特殊的细胞结构、 运动性等等、
微生物分类和鉴定的重要依据之一: a)易于观察和比较,尤其是真核微生物和具有特殊形 态结构的细菌; b)许多形态学特征依赖于多基因的表达,具有相对的 稳定性;
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