高速逆流色谱法纯化制备辛弗林

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高速逆流色谱法分离纯化丹参并尝试制订中药指纹图谱

19卷6期2003年11月生　物　工　程　学　报Chinese Journal o f Biotechnology V ol.19　N o.6N ovember 2003收稿日期:2003204210,修回日期:2003207224。

3通讯作者。

T el :86210282627061;Fax :86210262558174;E 2mail :rainbow gm @高速逆流色谱法分离纯化丹参并尝试制订中药指纹图谱顾　铭3　欧阳藩　苏志国(中国科学院过程工程研究所生化工程国家重点实验室,北京　100080)摘　要　用国产高速逆流色谱(HSCCC )分离纯化中草药———丹参,选用正己烷2乙醇2水体系,固定相保留率达到7818%。

采用分步洗脱,3个产地丹参各分离得到12个洗脱组分,经高效液相色谱仪和紫外光谱仪检测证明3张HSCCC 洗脱图谱中对应洗脱峰为同一组分。

HSCCC 洗脱图谱不包含非共有峰,并且对应洗脱峰保留时间的相对标准偏差RS D <3%,符合国家标准关于制订指纹图谱方法学考察资料的技术参数。

因此,HSCCC 作为制订指纹图谱的方法之一具有可行性。

关键词　高速逆流色谱(HSCCC ),中药指纹图谱,丹参中图分类号　R917 文献标识码　A 文章编号100023061(2003)0620740205 高速逆流色谱(High 2S peed C ounter 2Current Chro 2matography ,HSCCC )是一种基于液2液多级逆流萃取建立的色谱体系,没有固相载体,避免了待分离样品与固相载体表面产生化学反应而变化和不可逆吸附[1];高速逆流色谱可以直接纯化粗制样品;尤其适于分离极性较大的组分[2];HSCCC 的仪器及试剂成本明显低于高效液相色谱(High Performance Liquid Chromatography ,HP LC ),适用于制备高纯度、高附加值的化合物。

高速逆流色谱PPT课件

.
12
2 溶剂体系选择的步骤
（1）预测要分离物质的极性，粗选一个溶剂体系；
（2）取少量样品于上下相各2毫升的溶剂体系中，用
TLC进行检验，可加入甲醇、乙醇、醋酸乙酯等来调节
溶剂体系的极性，直到样品在上下相中的分配比K为
0.5~2为止；
（3）用HPLC测定K值；
（4）用分析型HSCCC进行预分离，再用制备型高速
氯仿-甲醇-水木脂素和香豆素正己烷-乙睛-醋酸乙酯-水
正己烷-甲醇-水
氯仿-甲. 醇-水
17
四、应用
溶剂系统
两相溶剂系统：正己烷-乙酸乙酯-乙醇-水（6：3： 2：5），在分液漏斗中充分混合，临用前将其分开。
.
18
分离条件：室温下，上相为固定相，下相为流动相，流速为 0.7ml/min；洗脱方式：由首端向尾端洗脱；主机：正转，流速为800r/min
高速逆流色谱
.
1
一、概述高速逆流色谱（High-Speed Countercurrent Chromatography,HSCCC）是一种连续高效的液液分配色谱分离技术。该技术不需要固体支撑体，主要依据物质在两相中分配系数的不同对物质进行分离，相对其他常用色谱（如柱色谱、高效液相色谱等）来说，具有无不可逆吸附和回收率高的特点，特别适合于天然活性成分的分离。
柱温等
.
5
检测器
紫外-可见光检测器
蒸发光散射检测器
质谱检测器等
.
6
/v/b/18605037-1585286663.html /v/b/18615566-1585286663.html
.
7
与其它色谱分离技术相比，高速逆流色谱具有

高速逆流色谱法分离制备辛夷中的表木兰脂素A

准确称取辛夷粗提物５ｍ０ｇ溶解于体系的下相中，超
声溶解后得到１ｍ／Ｌ的样品溶液，０ｇｍ备用。
１４ＨＣＣ分离纯化方法．ＳＣ将两相溶剂系统中已超声脱气的上相（固定相）２Ｌｍｉ以０ｍ／ｎ的速度泵入ＨＳＣＣＣ分离管中，上相充满整个分离管后，慢调节主机转速至待缓８０／ｉ，时针旋转，时以１２ｍＬｍｎ的速度将下相８ｒｍｎ顺同．／ｉ
安徽农学通报，ｎｕＡｒＳｉＢｌ２１１（５Ａｈｉｇｉｃ．ｕ１０２，８０）．．
高速逆流色谱法分离制备辛夷中的表木兰脂素Ａ
刘宗红于波
１６２）０９１（辽宁师范大学生命科学学院，辽宁大连
１５ＨＬ．ＰＣ条件
色谱柱：ｔｒ１柱。流动相：为Ｘｅａ８ｒＣＡ相
１实验部分
１１实验材料．Ｗａｒ公司高效液相色谱仪和质谱仪；ｔｓｅ高速逆流色谱仪（海同田生化技术有限公司）５０ｚ上；０Ｈ
炎、敏和降压等药理作用 … 。表木兰脂素具有杀昆虫抗过作用，当饲料中含本品＞１ｇｍｍ／Ｌ时，著抑制黄猩猩果显蝇幼虫的生长。对于木脂素成分的分离国内外已有很多
报道且采用的分离手段也多为硅胶和凝胶柱层析法，尚而缺乏用现代分离技术对辛夷中木脂素成分的分离。

高速逆流色谱操作步骤

高速逆流色谱操作步骤高速逆流色谱（High-Performance Counter-Current Chromatography，HPCCC）是一种液-液色谱技术，通过在两种不同的不溶溶剂相之间的弯曲螺旋柱中建立逆流运动，实现分离和纯化化合物。

以下是一般的高速逆流色谱的操作步骤：1.系统准备：•确保逆流色谱系统（HPCCC系统）处于良好状态，所有连接都紧固，管路无泄漏。

•根据实验需要选择合适的溶剂相，并准备好两相的溶液。

2.填充柱体：•将两相的溶液分别注入到弯曲螺旋柱的两个相对侧。

柱内建立液-液平衡。

3.样品加载：•在逆流色谱系统中加入待分离的混合物样品。

4.逆流运行：•开始逆流运行，通过外部离心力或其他手段，让两相的流动方向相反。

这样，溶液就会在弯曲螺旋柱中形成逆流。

5.分离：•样品成分在两相中根据其在两相之间的分配系数进行分离。

相对溶剂流动的方向，样品在柱内依次进入高和低浓度的相中，实现分离。

6.收集分离产物：•根据需要，通过调整逆流色谱系统的操作参数，收集某个时间点或某个分离峰的产物。

7.监测：•监测分离过程，可以使用检测器如紫外可见光谱仪（UV-Vis）等进行在线监测。

8.系统维护：•在实验过程中，注意监测溶剂消耗情况，必要时进行补充。

对于柱体的维护和清洗也需要定期进行，以保证仪器的正常运行。

需要注意，高速逆流色谱是一种相对复杂的色谱技术，具体的操作步骤可能会因为使用的设备和实验条件而有所不同。

在进行高速逆流色谱实验时，建议参考具体的仪器操作手册和相关文献，确保按照正确的步骤进行操作。

高速逆流色谱操作

高速逆流色谱操作步骤和要点操作步骤：1 配液。

超声脱气约20 min，脱气后静置冷却至室温后泵液。

2 打开恒温水浴，将温度升至设定温度。

3 泵固定相。

以10-20 mL/min流速泵入固定相，检测器出口端流出固定相约20-50 mL后停泵。

4 平衡。

打开紫外检测器开始预热，正转转动主机至900 rpm（FWD为正转，REV 为反转），同时以3 mL/min流速泵入流动相，至出口端流出流动相且此时紫外信号稳定，体系基本己平衡。

5 进样。

以体系的上、下相溶解一定量的样品，超声溶解均匀后，在装样注射器中倒入样品溶液，将进样六通问切换至load，推排气泡后吸液至样品全进入进样圈中，将load切换至inject，检测器、工作站调零开始记录。

6 接收流分。

工作站记录，设备运行时间为如5 min，保存后采集数据，保存。

7清洗。

断开泵与主机的连接，将主机进口与气管出口连接，吹气；将主机中溶剂吹出后，泵入约50 mL清洗液，吹气，重复此过程2~3次；最后一次长时间（1小时左右直至吹干）吹气时将主机内液体吹尽。

8 关机。

操作要点：本仪器适用于有机溶剂，316L不锈钢及PTFE材料可耐受的酸碱溶液。

1 本设备可承受的压力限制为2 MPa，请勿泵入不可溶解的固体颗粒。

2 设备运行前先检查连接管路是否正确，是否紧密；检测器波长是否正确。

3 配液时溶剂应混合均匀，自然分层澄清后可超声脱气，脱气时间不宜过长，脱气后如溶剂有温热则最好冷却静置至室温后使用。

4 样品溶解可为体系上相或下相，或同时两相溶解；不可以单一的溶剂来溶解进样，以免破坏主机内的体系平衡。

5 每次做完实验请及时清洗设备，一般清洗液为甲醇、乙醇等，如体系内含有酸、碱、盐等溶剂，建议先以纯净水清洗l~2次后，再以清洗液清洗。

6 日常清洗完设备后；如需继续进行实验，请设备放置2小时后重新平衡。

7 操作中如有气泡、流失或其他异常现象，可致电上海同田生物技术有限公司技术支持部2附件1：仪器性能检验苯酚、间苯二酚的分离体系：正已烷：乙酸乙酯：乙醇：水=1：1：1.2：0.8把溶剂按比例配制好，混合均匀后分相，上相用作固定相，下相用作流动相，分别超声脱气约20 min。

高速逆流色谱操作

高速逆流色谱操作高效逆流色谱方法整理分离苯酚与间苯二酚（254nm）1、分体式溶剂：正己烷:乙酸乙酯:无水乙醇:超纯水=1:1:1.2:0.8（均为分析氢铵）所有试剂都不断扩大400倍体积，分液圆柱形：先搅拌、乙酸乙酯、正己烷、无水乙醇搅匀，换气，静置，分层，针对本实验，上层并作紧固二者，下层并作流动二者（水+乙醇做为下二者）中间部分弃置。

用瓶子坏掉后超音波平移变换5～10min，不必过长时间。

原理：萃取每1s17次，分配系数k=0.5～2之间为宜。

2、预演检测器30min以上（时长7-4h），选不好波长（6个，215～405nm），收集时间应当尽量短，流动适当尽量多分体式。

（压力max=2mpa、r=1000转回、流速max=40ml/min、入样量=30～300mg，max=500mg）样品预处理：只能用分离系统中的溶剂，一般用流动相溶）3、泵满上二者，并作紧固二者泵入固定相，白色接d打开，一端放入量筒中，调流速30～40ml/min，再按泵的power，再按run，当固定相流到白色接d处即泵满。

再按stop，上相不流入转轴部分。

4、均衡（40～50min）白色d接好，泵放入流动相，废液管放入量筒。

调所需波长、吸光值、流速。

（流速不高于3ml/min，一般1.5-2之间，否则固定相被冲出去。

）先上开转轴部分的power，阳入输出功率为900转回再按泵的run，看看废液的分层or喷光度变化or基线的均衡去推论与否已达至均衡。

总体积=285ml柱体积+20ml进样器+10ml柱外=315ml紧固二者留存率为=总体积-紧固二者流入的量100%（通常40%～50%即可）柱体积（285ml）手动调节吸光度为0，按load，再用针推进去气泡，进样管放入样品中，再用针拉以便进样。

再按inject，再按电脑图谱中的绿色图标，即可记录图谱。

测定完全后，再按红色按钮。

测量时存有气泡：则表示压力下降，化解用夹子卡住管，用湖南金证制止气泡步入拆分系统（压力可以下降，但不必大于0.3～0.5mpa）定量分析：>20ml即可，用30ml定容样品，全注入，进样圈容量为20ml，另外剩下的样品用针拉出，丢弃。

高速逆流色谱分离纯化天然产物中生物碱类成分应用进展-杨莹莹,张广晶,张舒媛,等

100第16卷第8期 2014 年 8 月辽宁中医药大学学报JOURNAL OF LIAONING UNIVERSITY OF TCMVol. 16 No. 8 Aug .，2014高速逆流色谱分离纯化天然产物中生物碱类成分应用进展杨莹莹1，张广晶1，张舒媛2，徐雅娟3，徐暾海4，5，6，刘铜华5，6（1.长春中医药大学，吉林长春 130117；2.北京中医药大学管理学院，北京 100029；3.吉林省中医药研究院，吉林长春130021；4.北京中医药大学中药学院，北京 100029；5.北京中医药大学中医养生学教育部重点实验室，北京 100029；6.北京中医药大学中医养生学北京市重点实验室，北京 100029）摘要：高速逆流色谱（hight-speed counter current chromatography，HSCCC）技术是国际上较新型的液-液分配色谱技术，近几年被广泛应用于天然产物的分离纯化和研制方面，在分离纯化天然产物中生物碱类化合物尤为突出。

该文对高速逆流色谱技术在分离纯化天然产物生物碱类化学成分、活性成分；pH-区带精制逆流色谱在分离纯化生物碱的应用状况；以及高速逆流色谱与其他分析检测技术的联用进行了综述。

关键词：高速逆流色谱；生物碱；分离；纯化；天然产物中图分类号：R284.2 文献标志码：A 文章编号：1673-842X (2014) 08- 0100- 04收稿日期：2014-02-26基金项目：国家科技部国际科技合作项目（2010DFB33260）；北京中医药大学创新团队项目（2011-CXTD-19）作者简介：杨莹莹（1988-），女，吉林通化人，2012级硕士研究生，研究方向：中药活性成分提取工作。

通讯作者：徐暾海（1969-），男，吉林长春人，教授，博士研究生导师，博士，研究方向：中药干预糖尿病及其并发症活性成分研究。

Application of High-Speed Counter-Current Chromatography inSeparation Andpurification for Alkaloids in Natural ProductsYANG Yingying 1，ZHANG Guangjing 1，ZHANG Shuyuan 2，XU Yajuan 3，XU Tunhai 4，5，6，LIU Tonghua 5，6（1. Changchun University of Chinese Medicine，Changchun 130117，Jilin，China；2. Beijing University of Chinese Medicine School of Management，Beijing 100029，China；3. Jilin Institute of Traditional Chinese Medicine，Changchun 130021，Jilin，China；4. Beijing University of Chinese Medicine Institute of Traditional Chinese Medicine，Beijing 100029，China；5. Beijing University of Chinese Medicine of Traditional Chinese Medicine Health Ministry of Education Key Laboratory，Beijing 100029，China；6. Beijing University of Chinese Medicine of Traditional[ 8 ] 朱翠，丁丽华，蓸宪垠，等.TGF-β/Smads 信号转导通路的研究进展[ J ] .生物技术通讯，2008，19 ( 4 )：604-607.[ 9 ] Tang W B，Ling G H，Sun L，et al.Smad anchor for receptoractivation（SARA）in TGF-beta signaling[ J ] .Front Biosci（Elite Ed），2010，1 ( 2 )：856-860.[ 10 ] Derynck R，Zhang Y E.Smad-dependent and Smad-independentpathways in TGF-beta family signalling[ J ] .Nature，2003，15 ( 1 )：1-11.[ 11 ] Ding Z Y，Jin G N，Liang H F，et al.Transforming growth factor βinduces expression of connective tissue growth factor in hepatic progenitor cells through Smad independent signaling[ J ] .Cell Sigal，2013，25 ( 10 )：1981-1992.[ 12 ] 高建，刘干，李俊，肺成纤维细胞在肺纤维化进程中的作用[ J ] .中国病理学通报，2010，26 ( 9 )：1125-1128.[ 13 ] Gurujeyalashmi G，Giri SN.Molecular mechanisns of antifibroticeffects of interferon gamma in bleomycin-mouse model of lung fibrosis：Down regulation TGF-β and procollagenⅠandⅢ gene expyes Sion[ J ] .Exp Lung Res，1995，21 ( 11 )：791.[ 14 ] 赵亚滨，佟振月，许丽彦，等.转化生长因子β1单克隆抗体干预成纤维细胞增殖的体外研究[ J ] .中华结核和呼吸杂志，1999，22 ( 2 )：101-103.[ 15 ] Bienkowaki RS，Gotkin MG.Immune mechanis in interstitial lungdisease[ J ] .Proc Soc Exp Biol Med，1995，209 ( 2 )：118-140.[ 16 ] 邓长柏，杨作成.阻断Smad3表达对转化生长因子β1诱导肌成纤维细胞增殖的影响[ J ] .中国动脉硬化杂志，2008，16 ( 4 )：281-283.[ 17 ] 于珊玲.TGF-β1、MMP-2、TIMP-1在百草枯染毒大鼠肺组织中的表达及丹参单体IH764-3对其表达的影响[ D ] .石家庄：河北医科大学，2007.[ 18 ] 杨坤禹，胡豫，刘莉，等.TGF-β1转基因小鼠肺组织中基质金属蛋白酶和基质金属蛋白酶组织抑制物的表达[ J ] .华中科技大学学报：医学版，2006，35 ( 6 )：744-747.[ 19 ] Jiandong Yang，Jin Zheng，Lin Wu，et al.NDRG2 AmelioratesHepatic Fibrosis by inhibiting the TGF-β1/Smad Pathway and Altering the MMP2/TIMP2 Ratio in Rats[ J ] .PLOS One，2011，6 ( 11 )：e27710.[ 20 ] 吴述光，郭悦鹏.转化生长因子β1与肺纤维化的研究进展[ J ] . Medical Information Section of Operative Surgery，2008，21 ( 11 )：1022-1025.[ 21 ] Roberts AB，Tian F，Byfield SD，et al.Smad3 is key to TGF-beta-meiated epithelial to mesenchymal transition fibrosis，tumorsuppression and metastasis[ J ] .Cutokine Growth Factor REV，2006，17 ( 1/2 )：19-27.[ 22 ] Gu L，Zhu YJ，Yang X，et al.Effect of TGF-beta/Smad signalingpathway on lung muofibroblast differentiation[ J ] .Acta Pharmacol Sin，2007，28 ( 3 )：382-391.[ 23 ] Jonathan K Alder，Julian JL Chen，Lisa Lancaster，et al.Shorttelomeres are a risk factor for idopathic pulmonary fibrosis[ J ] . PNAS，2008，105 ( 35 )：13053.[ 24 ] Nozki Y，Liu T，Hatano K，et al，Induction of temerase activity infibroblasts from bleomycin-injured lungs[ J ] .Am J Respir Cell Mol Biol，2000，23 ( 4 )：460-465.[ 25 ] He Li，Dakangxu，Jinhua Li，et al. Transforming growth factor betasuppresses human telomerase reverse transcriptase（h TERT）by Smad3 interaction with c-Myc and h TERT gene[ J ] .J Biol Chem，2006，281 ( 35 )：25588-25600.[ 26 ] 杨雅茹，黄艳，李俊.TGF-β1介导的Smads与ERK通路在肺纤维化中的作用及相互关系[ J ] .中国药理学通报，2010，26 ( 5 )：561-563.[ 27 ] Zhao H P，Wang S C，Hu Y B.Effects of Wu Ling capsules onTGF-β/Smad and Ras/ERK signal pathway protein in liver tissue of liver fibrosis rats[ J ] .Chin J Gastroenterol Hepatol，2009，18 ( 5 )：392-396.DOI：10.13194/j.issn.1673-842x.2014.08.03216卷辽宁中医药大学学报生物碱（alkaloids）是广泛存在于自然界植物中的一类重要的化合物，大多数具有生物活性。

高速逆流色谱技术分离纯化天然产物中黄酮类化合物的研究进展

江南卷柏 Selaginella
dorffii
moellen-
穗花杉双黄酮、扁柏双黄酮、竹柏双黄酮 A、银杏黄酮 Amentoflavone， hinokiflavone， podo-
carpusflavone A，ginkgetin
正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水 n-hexane-ethyl acetate-methanol-
1． 5
（ 1∶ 1∶ 2）
草珊瑚 Sarcandra glabra
异秦皮定 Isofraxidin
正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水
n-Hexane-ethyl acetate-Methanol-
2． 0
water （ 1∶ 2∶ 1∶ 2）
800
［12］
800
［13］
800［14］ຫໍສະໝຸດ 苹果树皮 Apple tree bark
木蝴蝶 Oroxylum indicum
黄芩素、白杨黄素 Fbaicalein，chrysin
石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水
Petroleum ether-ethyl acetate-
2． 0
Methanol-water （ 5∶ 5∶ 5∶ 5）
陈皮 Pericarpium Citri
Reticulatae
苷 Quercitrin，quercetin，hyperoside，iso-
quercitrin， miquelianin， epigallocate-
乙酸乙酯-甲醇-水 Ethyl acetate-methanol-water
（ 10∶ 1∶ 10）
chin，avicularin
2． 0
800
［7］
MTBE-n-butanol-MeCN-water

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［］０ｄＴｃｎｌｇ，９９４（）０ —１Ｊ’ ０ｅｈｏｏｙ１９，４３：１０１７Ｆ
［］ＤＤＭ，５ＯＤＨＨＡＯＺＩｐｏｅｅｉｍｒａｔｔｐｏｏｃｓｄ．ｍｒｖｄｍｄｕｆｃｉｓｅｔｃｃｕｏｌｃｒｎａ
ｍａｏｒｐｙａｄｈｇ — ｐｅｏｎｅｃｒｅｔｈｏｔｇａｈ（ＣＣ）ＴｅＨＳＣｅａａｉｎｕｅｔｙａ－ｔｇａｈｎｉｈｓｅｄｃｕｔｒｕｒｎｒｍａｏｒｐｙＨＳＣ．ｈＣＣｓｐｒｔｓｄｅｈｌｃｃｏ
２通过单因素试验，）确定了最适碳源、氮源、金属离子及其浓度或配比，分别为：．２５％葡萄糖、％酵母１膏＋％蛋白胨＋％牛肉膏、．４ｌ。３１００／Ｍ０ｍｏＬ通过单因素试验也确定了装液量、接种量、起始ｐＨ和培养温度的最适参数指标：液量２０、装５接种量５％、ｍＬ起始ｐＨ
７０培养温度３．、７℃。
［］张刚．酸细菌— —基础、３乳技术和应用［．Ｍ］北京：化学工业出版
社，０６３５３０２０：１— ２［］ＤＬＳＢＯＵＨＯＮＪＮｉｎａｄｉｓｓｓｏｒｓｒａｖ４ＥＶＥＲＧＴ．ｓｔｕｅｆｄｐｅｅｖｔｅｉｎｓａａｏｉ
ＡｂｔａｔＡｅｍｅｈｄｆｒｐｅａａｉｅｐｒｆｃｔｎｏｙｅｒｎｓｅｔｂｉｈｄｂｓｎｏｘｈｎｅｃｒ－ｓｒｃ：ｎｗｔｏｏｒｐｒｔｖｕｉａｉｆｓｎｐｈｉｅｗａｓａｌｓｅｙｕｉｇｉｎｅｃａｇｈｏｉｏ
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作者简介：张良华（９３）（）在读硕士研究生，方向：１８一，汉，男研究天然产物提取与分离。通讯作者：博士生导师。
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ｒ与生长量的变化趋势基本一致。其抑菌活性高峰表
辛弗林是柑橘中的一种生物活性物质其化学结构式见图1具有收缩血管扩张气管和减肥作用151在日本美国等国作为保健食品添加剂对辛弗林的纯化制备可以很好的提高柑橘落果疏果的利用价值变废为宝
维普资讯
科研学究
囊饼究毫嚣
第０第期２８６０年６２月９卷
ｔｅｒａｔｉｐａｅ［．ｐ１ｎｉｎＭｉｒｂｏ．１９，（１：６３ｈｉｂｅｏｈｇｓ】Ａｐ．ｖｒ．ｃｏｉ１９２８１）３８ — ｃｒＪＥｏ，
３９６３
ｗｉｕｔｆ９．ｔａｐｒｙｏ５２％ｗａｂａｎｄｆｏａｘｒｃｏＣｉｚｕａｔｕｗｉ０％ｏｙｅｈｉｅｈｉｓｏｔｉｅｍｎｅｔａｔｍｔａａｒｎｉｍｔ１ｒｒｆｒｓｈｆｎｐｒｎ．ｓＫｅｒ：ｈｇ－ｐｅｏｎｅｃｒｅｔｃｒｍａｏｒｐｙｉｎｅｃａｇｈｏｏｏｒｐｙｓｎｐｒｎｙｗｏｄｓｉｈｓｅｄｃｕｔｒｕｒｎｈｏｔｇａｈ；ｏｘｈｎｅｃｒｍａｔｇａｈ；ｙｅｈｉｅ
现在ｐＨ为４～．．３２７的范围内。
ｌｃｉａｉａｔｒｏｒｖｍｎｓｎｆｏａｅｎｕｉ［．ａｔｃｄｂｃｅｉｆｒｉｏｅｅｔｉｏｄｓｆｔａｄｑａｔＪｃａｍｐｙｌｙ］
Ｂｉｃｉｅ，０２，４：９－０ｏｈｍｉ２０８５３６４
４５
高速逆流色谱法纯化制备辛弗林
张良华。琪珍杜
（浙江工商大学食品与生物工程研究所，浙江杭州３０１）１０２
摘
要：建立了离子交换柱色谱一高速逆流色谱法纯化制备辛弗林的方法。高速逆流色谱溶剂系统为乙酸乙酯一正丁
醇一三氟乙酸（：：：．３体积比）下相为固定相，水一１２００，３０，上相为流动相，从含辛弗林１０％的枳实粗提物中纯化制备出
ＺＡＧＬａｇｈａＤｉｚｅＨＮｉ — ｕ，ＵＱ—ｈｎｎ（ｎｔｕｆｄｎｉｏｉｌｎｉｅｎ，ｈｊｎｏｇｈｎｎｖｒｔ，ａｇｈｕ１０２ＺｅｉｇＣｉａＩｓｔｔｏｏｄＢｏｇｃｇｅ６ｇＺｅａｇＧｎｓａｇｉｓｙＨｎｚｏ０１，ｈｊｎ，ｈｎ）ｉｅｆｏａｌａＥｎｉＵｅｉ３ａ
辛弗林产品，经高效液相色谱分析纯度为９Ｉ５２％。
关键词：高速逆流色谱；离子交换纯化；弗林辛
ＰＲＥＰＡＲＡＴＩＶＥＵＲＩＩＡＴＩＰＦＣＯＮＹＮＥＰＯＦＳＨＲＩＮＥＧＨ－ＳＥＥＤＢＹＨＩＰＣＯＵＮＴＥＲＣＵＲＲＥＮＴＣＨＲＯＭＡＴＯＧＲＡＰＨＹ