黄曲霉毒素检测
食品中黄曲霉毒素的检测2
黄曲霉毒素的检测
检测标准
其它
(1)WHO/FAO标准。国家卫生组（WHO）世界粮农组织 所属的食品法典委员（CAC）推荐食品、饲料中黄曲霉 毒素最大允许量标准为总量（B1+B2+G1+G2） 15ug/kg 牛奶中M1的最大允许量为0.5ug/kg
3.黄曲霉毒素B1标准应用液I（1ug/mL）：吸取1.0mL 10ug/mL的黄曲霉毒素B1标准贮备液于10mL容量瓶中，加苯乙腈混合溶液定容。
4.黄曲霉毒素B1标准应用液II（0.2ug/mL）：吸取1.0mL 1ug/mL的黄曲霉毒素B1标准应用液I于5mL容量瓶中，加苯-乙 腈混合溶液定容。
2.结构
B1
B2
G1
G2
M1
M2
黄曲霉毒素的性质
在紫外线下，黄曲霉毒素B1，B2发蓝色荧光，黄 曲霉毒素G1，G2发绿色荧光.
黄曲霉毒素的相对分子量为312-346.难溶于水， 易溶于油、甲醇、丙酮和氯仿等有机溶剂，但不溶 于石油醚、己烷和乙醚中.
一般在中性溶液中较稳定，但在强酸性溶液中稍有 分解，在pH9-10的强碱溶液中分解迅速.
黄曲霉毒素的种类及其结构
1.种类 黄曲霉毒素在紫外线照射下能产生荧光，根据
荧光颜色不同，将其分为B族（蓝色荧光）和G 族（绿色荧光）两大类及其衍生物 ，主要有 B1,B2,G1,G2以及B1的代谢产物M1和M2。 B1是最危险的致癌物，经常在玉米，花生，棉 花种子及一些干果中常能检测到，M1和M2 主 要存在于牛奶中 。
线上用微量注射器滴加样液和标准液 第一点：10uL 0.04ug/mL AFT B1 标液 第二点：20uL样液 第三点：20uL 样液 + 10uL 0.04ug/mL AFT B1 标液 第四点：20uL 样液 + 10uL 0.2ug/mL AFT B1 标液
黄曲霉的检测方法
黄曲霉的检测方法黄曲霉是一种常见的真菌，它能够在多种环境中生存并繁殖，包括食物、土壤和空气中。
黄曲霉产生的黄曲霉毒素对人体健康有一定的威胁，因此对黄曲霉的检测非常重要。
下面将介绍几种常用的黄曲霉检测方法。
1. 气相色谱法：气相色谱法是一种常用的检测黄曲霉毒素的方法。
该方法将样品中的黄曲霉毒素提取出来，然后使用气相色谱仪进行分析。
由于不同的黄曲霉毒素具有不同的化学性质，所以可以通过检测毒素的特定化合物来确定样品中是否存在黄曲霉毒素。
2. 高效液相色谱法：高效液相色谱法也是一种常用的检测黄曲霉毒素的方法。
该方法将样品中的黄曲霉毒素提取出来，然后使用高效液相色谱仪进行分析。
与气相色谱法相比，高效液相色谱法对样品的处理过程相对简单，分离效果较好。
3. 免疫学方法：免疫学方法是一种常用的检测黄曲霉的方法。
该方法使用特异性抗体与样品中的黄曲霉结合，然后通过标记物的信号来检测黄曲霉的存在。
常见的免疫学方法包括酶联免疫吸附试验（ELISA）和免疫荧光法。
免疫学方法具有操作简单、灵敏度高的特点，可以用于大规模的样品检测。
4. PCR法：PCR（聚合酶链式反应）是一种常用的检测黄曲霉的方法。
该方法利用黄曲霉的DNA进行扩增，并通过特定的引物和探针进行检测。
PCR法具有高灵敏度、高特异性和高快速性的特点，可以快速检测出样品中的黄曲霉。
5. 传统培养法：传统培养法是一种直接检测黄曲霉的方法。
该方法将样品培养在含有特定营养物质的培养基上，然后通过观察菌落形态、颜色和特点来确定是否存在黄曲霉。
尽管传统培养法操作相对简单，但其结果需要较长时间才能得到。
除了以上提到的方法，还有其他一些新兴的检测黄曲霉的方法，如纳米技术、蛋白质质谱法等。
这些方法在样品处理、快速性、灵敏度和特异性等方面都有所改进和突破，可以更好地用于黄曲霉的检测。
总之，对于黄曲霉的检测，可以选择适合的方法进行，根据需要和实际情况选择不同的方法。
不同的方法有其优缺点，需要根据实际应用需求进行选择。
《黄曲霉毒素检测》课件
2017：规定了食品中黄曲霉毒素 M1和M2的液相色谱-串联质谱测 定方法。
欧盟标准
EC 450/2009
规定了食品中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的限量要求和检 测方法。
EC 152/2013
规定了食品中黄曲霉毒素M1和M2的限量要求和检测方法。
中国标准
GB 5009.22-2016
致癌性
黄曲霉毒素是一种强烈的 致癌物质，可导致肝癌、 胃癌、肠癌等癌症的发生 。
急性中毒
摄入大量黄曲霉毒素可引 起急性中毒，出现恶心、 呕吐、腹痛等症状。
慢性影响
长期摄入低量的黄曲霉毒 素也可能对健康造成潜在 危害，如影响肝脏功能、 降低免疫力等。
02
黄曲霉毒素检测方法
薄层色谱法
总结词
一种经典、常用的黄曲霉毒素检测方法。
预防疾病是保障人类健康的重要途径，而黄曲霉毒素检测是预防疾病的重要手段 之一。加强黄曲霉毒素检测，有助于降低疾病的发生率，提高人民的健康水平。
维护人类健康
人类健康是社会发展的重要基石，而黄曲霉毒素检测是维 护人类健康的重要手段之一。通过检测，可以及时发现食 品中黄曲霉毒素的污染情况，采取有效措施防止其进入市 场，保护消费者的健康权益。
国际化
推动黄曲霉毒素检测方法的国际标准 化，加强国际间的交流与合作，促进 检测技术的发展和创新。
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荧光光度法利用荧光物质与目标化合物的特异性结合反应，通过荧光信号的检测和分析，对目标化合物进行定性 和定量分析。该方法可用于黄曲霉毒素的定量分析，具有高灵敏度、高选择性等优点，但需要特定的荧光物质和 操作技术。
03
黄曲霉毒素检测标准
黄曲霉毒素检测方法
黄曲霉毒素检测方法
一、黄曲霉毒素检测方法二、黄曲霉毒素的临床特征三、黄曲霉毒素中毒的急救措施
黄曲霉毒素检测方法1、生物鉴定法可检测黄曲霉素
其特点是待检样品不需很纯,主要用于定性,共有10种:抑菌试验;对微生物遗传因子影响试验;细菌发光试验;荧光反应;组织培养检测法;鸡胚试验;鸭胚试验;鳟鱼试验;植物试验;饲喂实验动物试验。
生物鉴定法是利用AFT能影响微生物、水生动物、家禽等生物体的细胞代谢,来鉴定AFT的存在。
其方法专一性差,灵敏度低,一般只作为化学分析法的佐证。
2、化学分析法可检测黄曲霉素
最常用的为薄层层析法(TLC),适用于粮食及其制品、调味品等AFB1的检测,主要是半定量。
利用AFB1具有荧光性的特点,提取和浓缩样品中的AFB1,用单向或双向展开法在薄层上分离后,在365nm紫外光照射下产生蓝紫色荧光,根据在薄层上显示荧光的最低检出量定量,其灵敏度为5μg/kg。
由于薄层层析法测定AFB1不是很专一,因此样品中其他荧光物质的干扰造成测定误差。
3、仪器分析法可检测黄曲霉素
高效液相色谱法(HPLC)是20世纪70年代初发展起来的一种以液体为流行相的新型色谱技术。
是分离分析各种AFT的好方法,如配以荧光检测器,则该法具有灵敏度高、分离能力强、特异性好、测定结果准确可靠等优点。
在国外己广泛地用于食品中AFT的测定。
但由于食物样品成分复杂,在进行液相色谱分离分析前,需对样品作彻底有效的净化处理。
常用的净化方法是柱色谱法,该法操作繁琐,且需使用大量有机溶剂。
饲料中黄曲霉毒素含量检测实验注意事项
饲料中黄曲霉毒素含量检测实验注意事项
1. 在进行饲料中黄曲霉毒素含量检测实验前，需要确保实验室环境清洁，并进行必要的消毒措施，以防止实验过程中的污染。
2. 提前准备好所有实验所需的试剂和设备，并检查其是否符合规定的要求和标准，确保实验的准确性和可靠性。
3. 在进行实验操作之前，要对样品进行必要的预处理，如研磨、溶解等，以获得准确的测试结果。
4. 在操作过程中，需要严格控制实验条件，如温度、湿度和
pH等，以保证实验的一致性和可重复性。
5. 在进行样品提取和净化时，要注意使用合适的试剂和方法，避免对待测物质造成干扰或破坏。
6. 在进行检测时，要按照检测方法的要求和操作步骤进行操作，确保操作的正确性和一致性。
7. 实验过程中要做好实验记录，包括实验条件、操作步骤、实验结果等，以备后续的数据分析和结果判定。
8. 尽量避免长时间暴露在样品和试剂等可能含有毒性的物质中，确保实验操作的安全性。
9. 实验结束后，要及时清理实验现场和设备，妥善处理实验废弃物，以保持实验室的整洁和环境的安全。
10. 在整个实验过程中，要严格遵守实验室安全规定，如佩戴实验手套、护目镜等个人防护设备，避免发生意外事故。
黄曲霉毒素检测标准方法汇总
流动相的梯度变化表（GBT 5009.23-2006 食品中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的测定）
标准方法检出限（GBT 23212-2008）
次氯酸钠溶液（消毒用）：
取100g漂白粉，加入500ml水，搅拌均匀。
另将80g工业用碳酸钠（Na2CO3·10H2O）溶于500ml温水中，再将两液混合、搅拌、澄清后过滤。
此滤液含次氯酸浓度约为25g/L。
若用漂粉精制备，则碳酸钠的量可以加倍。
所得溶液的浓度约为50g/L。
污染的玻璃仪器用10g/L次氯酸钠溶液浸泡半天或用50g/L次氯酸钠溶液浸泡片刻后，即可达到去毒效果。
（GBT 5009.22-2003 食品中黄曲霉毒素B1的测定）
AFT B1标准溶液配制
1 仪器校正，测定重铬酸钾溶液的摩尔消光系数，以求出使用仪器的校正因素f
2 标准溶液配制，配制AFT B1标准溶液，用紫外分光光度计测此溶液最大吸收峰的波长及该波长的吸光度值，计算AFT B1标准液浓度，后用苯-乙腈混合液调到标准液为10.0ug/ml，并用分光光度计核对浓度。
（GBT 5009.22-2003 食品中黄曲霉毒素B1的测定）。
农药及黄曲霉毒素的测定及安全处置
添加标题
测定方法：农药残留的测定方法主要包括气相色谱法、高效液相色谱法、质谱法等；黄曲霉毒素的 测定方法主要包括免疫分析法、薄层色谱法、高效液相色谱法等。
添加标题
测定流程：农药残留的测定流程主要包括样品采集、样品处理、仪器分析等步骤；黄曲霉毒素的测 定流程主要包括样品采集、提取、净化、仪器分析等步骤。
添加标题
测定意义：农药及黄曲霉毒素的测定对于保障食品安全、维护人类健康具有重要意义。通过对农药 残留和黄曲霉毒素的检测，可以及时发现食品中的安全隐患，有效预防和控制食品中毒事件的发生。
气相色谱法：适用于多种农药残留的测定，具有高分离效能、高灵敏度、高选择性等 优点。
液相色谱法：适用于极性强、分子量大的农药残留测定，具有高分离效能、高分辨率 等优点。
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美国：建立农药及黄曲霉毒素注册 登记制度，实施风险评估和安全管 理
中国：制定农药及黄曲霉毒素管理 法规，实施农药登记和残留限量标 准
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农药管理条例：规定了农药生产、经营、使用和监督管理的规定，确保农药的安全性和有效 性。
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农产品质量安全法：要求农产品生产者遵守农药使用规范，确保农产品的质量安全。
汇报人：
随着科技的发展，新型农药和黄曲霉毒素的防治手段将不断涌现，为食品安全提供更可靠的保 障。
政府将加强对农药及黄曲霉毒素的监管力度，制定更严格的法律法规，确保食品安全的可持续 性。
科研机构和企业将加强合作，共同研发更高效、环保、安全的农药及黄曲霉毒素的测定和防治 技术，推动农业可持续发展。
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避免食品在高温、高湿环境 下存放
保持食品干燥，避免食品受 潮
食用前检查食品的保质期， 避免食用过期食品
黄曲霉毒素检测方法国标
黄曲霉毒素检测方法国标
黄曲霉毒素检测方法国标是指按照中国国家标准制定的黄曲霉毒素检测方法。
目前，中国国家标准中规定的黄曲霉毒素检测方法主要有两种：液相色谱-质谱联用法和酶联免疫吸附测定法。
这两种方法都是目前应用较广泛且效果较好的检测方法。
液相色谱-质谱联用法是一种高灵敏度、高选择性的方法，能够同时检测多种黄曲霉毒素，包括黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2等。
该方法通过液相色谱分离，再通过质谱联用技术进行鉴定和定量，具有高精确度和准确性。
酶联免疫吸附测定法是一种简便快速的检测方法，该方法通过将黄曲霉毒素与特异性抗体结合，然后通过酶标记的二抗或底物发生染色反应来检测黄曲霉毒素的存在。
该方法速度快、操作简便，适用于快速筛查和初步定量。
需要强调的是，具体的黄曲霉毒素检测方法国标可能会因地区和标准的变化而有所差异，建议使用时查阅当地的相关标准或咨询专业机构进行确定。
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黄曲霉毒素检测
黄曲霉毒素(aflatoxin，简称为AF)是到目前为止所发现的毒性最大的真菌毒素。
它可通过多种途径污染食品和饲料，直接或间接进入人类食物链，威胁人类健康和生命安全。
黄曲霉毒素种类：
黄曲霉毒素主要有4种：即B1、B2、C1、G2，其中B1被认为是主要的有毒物质，有2种这些毒素的代谢产物M1和M2。
其中黄曲霉毒素B1主要存在于农产品，动物饲料，中药等产品中；黄曲霉毒素M1是动物摄入黄曲霉毒素B1后在体内经羟基化代谢的产物，一部分从尿和乳汁排出，一部分存在于动物的可食部分，如乳、肝、蛋类、肾、血和肌肉中，其中以乳最为常见。
黄曲霉毒素M1的毒性和致癌性与黄曲霉毒素B1的基本相似。
由于牛乳及其制品是人类、特别是婴儿的主要食品，所以其危害性更大。
自2003年8月1日起，凡在我国境内从事米、面、油、酱油、醋生产加工的企业，其产品须经检验合格后方可上市。
国家质检总局发布的《关于印发小麦粉等5类食品生产许可证实施细则的通知》中明确规定，黄曲霉毒素B1必须检测。
在第八期《中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局公报》中发布关于黄曲霉毒素检测方法的最新国标：
1、GB/T18979-2003《食品中黄曲霉毒素的测定??免疫亲和层净化高效液相色谱法和荧光光度法》
2、GB/T18980-2003《乳和乳粉中黄曲霉毒素M1的测定??免疫亲和层净化高效液相色谱法和荧光光度法》以上两项国标均在2003年8月1日开始实施。
中国及国际上对黄曲霉毒素的检测标准：
1、中国、美国及欧盟标准
玉米、花生、花生油，坚果和干果（核桃、杏仁）≤20μg/kg(ppb)≤20μg/kg
(ppb)≤2、4、5、8、10、15μg/kg(ppb)
玉米及花生仁制品（按原料折算）≤20μg/kg(ppb)≤20μg/kg(ppb)≤2、4、5、8、10、15μg/kg(ppb)
大米、其它食用油（香油、菜子油、大豆油、葵花油、胡麻油、茶油、麻油、玉米胚芽油、米糠油、棉籽油）≤10μg/kg
(ppb)≤10μg/kg(ppb)≤2、4μg/kg(ppb)
其它粮食（麦类、面粉、薯干）、发酵食品（酱油、食用醋、豆豉、腐乳制品）、淀粉类制品（糕点、饼干、面包、裱花蛋糕）≤5μg/kg(ppb)≤5μg/kg(ppb)不得检出
牛乳及其制品（消毒牛乳、新鲜生牛乳、全脂牛奶粉、淡炼乳、甜炼乳、奶油）、黄油、新鲜猪组织（肝、肾、血、瘦肉）≤0.5μg/kg(ppb)≤0.5μg/kg(ppb)≤0.05μg/kg(ppb)
2、WHO／FAO标准。
国际卫生组织(WHO)／世界粮农组织所属的食品法典委员会(CAC)推荐食品、饲料中黄曲霉毒素最大允许量标准为总量(B1+B2+G1+G2)小于15μg／kg；牛奶中M1的最大允许量为0．5μg ／kg
3、南非标准。
1990颁布了黄曲霉毒素的最大允许标准：食品中黄曲霉毒素总量小于10μg／kg，其中黄曲霉毒素B1小于5μg／kg。
4、其他标准。
印度标准是花生中黄曲霉毒素B1小于30μg／kg；越南和阿根廷的标准为黄曲霉毒素B1小于20μg／kg。
信标检测分析技术服务中心承接各种黄曲霉毒素检测服务。