凝聚胺交叉配血标准操作规程修订稿
最新凝聚胺介质交叉配血试验操作规程
凝聚胺介质交叉配血试验操作规程凝聚胺介质交叉配血试验操作规程(SOP文件)1目的作为介质辅助用于完全抗体及不完全抗体的临床筛选检测及辅助用于临床交叉配血实验。
2检验原理红细胞表面带有大量的负电荷，以避免其产生自发性聚集，当红细胞悬浮在电解质时，阳离子会被红细胞的负电荷所吸引，此时红细胞则被扩散的双层离子云所围绕，而形成Zeta电位，Zeta电位决定红细胞之间的排斥作用。
凝聚胺技术首先利用低离子溶液（LIM)，降低介质的离子强度，减少红细胞周围的阳离子云，以促进红细胞和血清（血浆）中的抗体结合。
其后，加入凝聚胺（Polybrene)溶液，它是一种高价阳离子多聚物、肝素中和剂，溶解后能产生很多正电荷，可以中和红细胞表面带有的负电荷，使红细胞Zeta电位降低，缩短红细胞之间的距离，使红细胞产生非特异性的凝聚。
最后，加入悬浮液（Resuspending),Resuspending具有中和凝聚胺（Polybrene)阳离子的作用，使正常的红细胞非特异性凝聚散开，试验结果为阴性；但如果红细胞被相应的抗体致敏，则会被凝聚胺凝结，凝集就不会散开，试验结果为阳性。
3储存条件及有效期未开封试剂应贮存于2℃~25℃、相对湿度不大于80%，无腐蚀性气体的室内；已开封试剂应贮存于相对湿度不大于80%，无腐蚀性气体和通风良好的室温环境，试剂用后应及时拧紧瓶盖保存；未开封试剂的有效期为二年，在有效期内的已开封试剂应在开封后的6个月内使用完。
4样本要求4.1新鲜血清，含EDTA抗凝血浆、3%~5%的红细胞悬液。
4.2不能使用溶血标本及含枸橼酸钠、肝素抗凝血浆标本。
5检验方法辅助交叉配血试验5.1取试管二支，标主次侧，主侧管加病人血清（血浆）2滴，加供血者3%~5%红细胞悬液（洗涤或不洗涤均可）1滴，次侧管反之。
5.2各加LIM0.65ml,混合均匀后，再各加Polybrene溶液2滴，并混合均匀。
5.3用离心机3400转/min(相当于1000g离心力）离心10秒，然后把上清液倒掉，不要沥干，让管底残留约0.1ml 液体。
S014交叉配血试验标准化操作规程(聚凝胺法)
交叉配血试验标准化操作规程(聚凝胺法)一、目得为保证临床输血得相容性,确保临床输血安全,对全血、红细胞悬液、洗涤红细胞、浓缩红细胞、少白细胞红细胞、冰冻红细胞、机采浓缩白细胞悬液等血液成分进行交叉配血试验。
二、方法采用聚凝胺介质试管法;三、原理聚凝胺法第一步采用低离子强度溶液降低红细胞与抗体反应介质得离子强度,从而减少了红细胞周围得阳离子云,促进带正电荷得IgG抗体与带负电荷得红细胞发生反应,这样大大加快了抗原与抗体反应得速率。
第二步通过加入聚凝胺来促使红细胞产生可逆性得非特异性凝聚、聚凝胺就是一种多价阳离子溴化己二甲胺多聚物,可以中与红细胞表面得负电荷,使红细胞得Zetａ电位降低,从而产生红细胞可逆性得聚集,缩短红细胞之间得距离,让IgG抗体可直接引起红细胞凝聚、第三步加入重悬液,重悬液可中与聚凝胺得作用。
可区分由聚凝胺诱发得红细胞之间得非特异性凝聚与由抗原抗体反应所致得特异性凝聚。
四、适用范围适用于输血前需进行交叉配血试验得血液及血液成分。
五、仪器设备普通离心机;血型专用离心机;六、试剂1、试剂名称:快速聚凝胺试剂盒2、试剂生产厂家:珠海贝索生物技术有限公司;３、批准文号:国食药监械(准)字2009第3400076号;4、包装规格(盒):4。
１低离子强度溶液(ＬＩM) 49ml×2;4、2聚凝胺溶液(Pｏlybreｎe Ｓoｌutｉon) 15ｍl×1;4、3重悬液(Resｕｓpendｉng Ｓolutiｏn) 15ml×１;4、贮藏条件;2－8℃避光保存。
5、有效期:自检定合格之日起2年;七、检测样本要求1、标本类型:静脉血(ＥDＴA抗凝剂:血液=1:１0)。
2、标本采集:见输血科标本管理标准化操作规程。
3、标本储存与运输:新鲜血2~８℃贮存时间不超过72小时、4、标本拒收状态:标识不准确、标本稀释、细菌污染,严重溶血等不能测定。
八、操作步骤1、收集标本,严格进行查对无误后,分离血清(浆)、2、取1０mｍx60mm洁净小试管2支,分别标明主(次)侧管。
s014交叉配血试验标准化操作规程(聚凝胺法)
红细胞外表的负电荷，使红细胞的 Zeta 电位降低，从而产生红细胞
可逆性的聚集，缩短红细胞之间的距离，让 IgG 抗体可直接引起红细
胞凝聚。第三步参加重悬液，重悬液可中和聚凝胺的作用。可区分由
聚凝胺诱发的红细胞之间的非特异性凝聚与由抗原抗体反响所致的
特异性凝聚。
四、适用范围
适用于输血前需进展穿插配血试验的血液及血液成分。
采用聚凝胺介质试管法；
三、原理
聚凝胺法第一步采用低离子强度溶液降低红细胞和抗体反响介
质的离子强度，从而减少了红细胞周围的阳离子云，促进带正电荷的
IgG 抗体与带负电荷的红细胞发生反响，这样大大加快了抗原和抗体
反响的速率。第二步通过参加聚凝胺来促使红细胞产生可逆性的非特
异性凝聚。聚凝胺是一种多价阳离子溴化己二甲胺多聚物，可以中和
五、仪器设备
ห้องสมุดไป่ตู้
普通离心机；血型专用离心机；
六、试剂
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文件名
穿插配血试验标准化操作规程〔聚凝胺法〕
编制人
审核人
批准人
批准日期
修改日期
签字
修改日期
签字
复审日期
签字
复审日期
签字
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穿插配血试验标准化操作规程〔聚凝胺法〕
一、目的
为保证临床输血的相容性，确保临床输血平安，对全血、红细胞 悬液、洗涤红细胞、浓缩红细胞、少白细胞红细胞、冰冻红细胞、机 采浓缩白细胞悬液等血液成分进展穿插配血试验。 二、方法
凝聚胺法交叉配血标准操作规程
凝聚胺法交叉配血标准操作规程1.目的规范凝聚胺法交叉配血标准操作程序。
2.原理红细胞表面带有大量的负电荷，以避免其产生自发性聚集，当红细胞悬浮在电解质时，阳离子会被红细胞的负电荷所吸引,此时红细胞则被扩散的双层离子云所围绕,而形成Zeta电位， Zeta电位决定红细胞之间的排斥作用。
凝聚胺技术首先利用低离子溶液（LIM），降低介质的离子强度，减少红细胞细胞周围的阳离子云，以促进红细胞和血清（血浆）中的抗体结合。
其后，加入凝聚胺(Polybrene)溶液，它是一种高阶阳离子多聚物、肝素中和剂，溶解后能产生很多正电荷，可以中和红细胞表面带有的负电荷，使红细胞Zeta电位降低，缩短红细胞之间的距离，使红细胞产生非特异性的凝聚。
最后加入悬浮液（Resuspending）， Resuspending具有中和凝聚胺(Polybrene)的作用，使正常的红细胞非特异性凝聚散开，试验结果为阴性；但如果红细胞被相应的抗体致敏，则会被凝聚胺凝结，凝集就不会散开，试验结果为阳性。
3.试剂由珠海贝索生物技术有限公司生产的凝聚胺法试剂盒，其组成：3.1低离子介质(LIM) 2×130ml。
3.2凝聚胺(Polybrene)溶液2×20ml。
3.3 Resuspending溶液2×20 ml4.仪器4.1 80-2离心机：上海医疗器械有限公司4.2电热恒温水浴箱：上海精宏实验设备有限公司4.3 OLYMPUS显微镜：日本5.操作步骤及结果判断按照试管法血型鉴定检验标准操作程序进行受血者血型鉴定, 并将鉴定结果写于申请单，并签名。
以“同型输注”为原则，取相对应的成分血源进行交叉配血。
5.1取洁净小试管2支,分别标明主、次侧管。
5.2于主侧管中加入受血者血浆2滴和供血者3-5%红细胞悬液1滴,次侧管中加入供血者血浆2滴和受血者3-5%红细胞悬液1滴, 轻轻混匀离心1000r/分钟, 仔细观察有无凝集,无凝集则可进行下一步骤,若有凝集则查找原因。
用凝聚胺做交叉配血试验的操作程序
用凝聚胺做交叉配血试验的操作程序
1.目的：检出和鉴定意外抗体；红细胞血型抗原定型
2.原理：凝聚胺溶解后产生的阳离子中和红细胞表面的唾液酸使红细胞间距缩短，发生由IgG直接搭桥的可逆的非特异性凝集，当非特异性凝集回复时，只剩下由抗原抗体搭桥的特异性凝集。
3.适用范围：交叉配血、免疫性抗体检查
4.所需材料：聚凝胺试剂、洁净试管、滴管、离心机
5.操作程序：（以交叉配血为例）
5.1以生理盐水洗涤受血者和献血者红细胞1—3次，配成3-5%的悬液。
5.2交叉配血试验：
主侧：2滴患者血清加1滴供者3-5%的RBC悬液。
次侧：2滴供者血清加1滴患者3-5%的RBC悬液。
5.3每只试管加600微升低离子液，混合放置1分。
5.4分别加2滴Polybrene应用液，混合放置15秒。
5.5离心3400转/分15秒，弃上清，控干。
5.6观察管底有无聚凝物，如果没有则需重做。
5.7每管各加2滴解聚液，轻轻混合10秒，观察结果并做记录。
5.8结果判定：10秒内若为Polybrene引起的聚合应该会散开，判为阴性。
若为抗原抗体引起的凝聚则不会散开，判为阳性。
6.注意事项：
6.1可以用EDTA血浆代替血清
6.2加入解聚液后应该在3分钟之内观察结果
6.3解聚液不可多加，以免降低试验灵敏度。
凝聚胺法交叉配血标准操作规程
凝聚胺法交叉配血标准操作规程1.原理凝聚胺（polymatching）法首先利用低离子介质降低溶液的离子强度，减少红细胞周围的阳离子云，促进血清（浆）中的抗体与红细胞相应抗原结合，再加入带亚电荷的高价阳离子多聚物-凝聚胺溶液，中和红细胞表面的负电荷，缩短细胞间距，形成可逆的非特异性聚集，并使IgG型抗体直接凝集红细胞。
加入中和液后，仅由凝聚胺引起的非特异性聚集，会因电荷中和而分散，而由抗体介导的特异性凝集则不会分散。
2.标本采集：2.1标本种类：抽取静脉血3-4ml待凝固后分离血清，将细胞配成5％盐水悬液将供血者血样以同样方法分离血清(浆)和红细胞悬液。
2.2标本要求：抗凝和干燥管均可，如用抗凝血主张用EDTAK2（mg/dz）抗凝标本应无溶血，切标签齐全。
3.标本储存：急诊标本30分钟内完成操作，标本应至4℃冰箱保存7天。
4.标本运输：室温运输。
5.标本拒收标准：细菌污染。
溶血标本，标签不齐全不能作测定。
6.试剂：6.1试剂名称：凝聚胺试剂(polymatching)6.2试剂生产厂家：(台资)xxxx生物技术有限公司。
6.3试剂组成：试剂1.低离子介质(LowLonicMedium，LIM).试剂打开使用后，可置室温贮存，未开封者2-10度贮存，有效期为2年。
试剂2.凝聚胺溶液(PolybreneSolution).贮存及有效期同上。
试剂3.重悬液(ResuspendingSolution).贮存及有效期同上。
试剂4.8.5％生理盐水。
7.仪器：7.1血型血清xx离心机：XTL-4.7xx离心机械研究所7.2离心机：xx手术器械厂7.3电热恒温水箱：xx长源实验设备厂7.4xx：OLYMPUS(xx)8.操作步骤及结果判断：8.1供受者红细胞用生理盐水配成3-5％的细胞悬液。
加样量均为：血清2滴，红细胞悬液1滴。
主管：受血者血清+供者红细胞悬液;次管：受者红细胞悬液+供者血清;(阴阳对照管另设)。
交叉配血操作规范(凝聚胺法)
交叉配血操作规范（凝聚胺法）【操作人员】经批准人授权的同志【部门主管】【质量控制员】【目的】保证测试结果的准确性。
【适用仪器范围】双目显微镜、普通离心机。
【该SOP变动程序】该标准操作程序的更改，可由任一使用本程序的操作人员提出并报请专业主管及科主任签字后生效。
【应用范围】交叉配血（凝聚胺法）的手工操作。
【标本采集和处理】1．由临床科室采用真空负压EDTA K2抗凝管采集3ml-5ml，作好标记，立即送检。
备血使用的受血者标本必须是输血前三天之内的血样。
采血时要防止溶血及多量组织液混入（多发生在静脉穿刺不顺利勉强抽血时），在病人输液时采集标本，必须从未输液的一侧肢体抽取，绝不允许在输液管接头处采集。
2．非急症病人输血前，应事先采取血标本作血型鉴定，填写申请单配血单上，以便核对。
急症抢救输血，未能事先采血检测血型，则要求由专人核对、贴标签、采取血标本送检。
3. 检验人员认真核对患者姓名、性别、床号、检验目的以及标本是否与申请单一致。
确认无误后用专用记号笔在试管与申请单上编写对应数字序号。
并按日期索引进行登记。
4. 将标本置于台式离心机内，放置保证平衡，以1500转/min离心10分钟。
保证血浆于血球有效分离。
溶血标本应重采取、乳糜血及标本量不足应加以登记，溶血性疾病应注明。
【方法学原理】凝聚胺试验是利用低离子溶液促进红细胞抗原与血清（浆）中的抗体反应，再利用凝聚胺引起红细胞间非免疫性的凝集，让已有抗体（IgG）反应的红细胞间的距离缩短。
距离缩短后更能引起已反应的抗体和别的红细胞产生反应形成免疫性的凝集。
而由凝聚胺所引起的非免疫性红细胞凝集反应可被后来加入的复悬液所中和而散开，如有免疫反应，凝集就不会散开，为阳性反应。
如没有免疫反应，凝集就会散开，为阴性反应。
交叉配血试验是在盐水介质的基础上加入凝聚胺，检测供患之间是否相合，患者血清（浆）中是否含有具临床意义的红细胞异体抗体。
【试剂和材料】1．供血者血清（血浆）；2．受血者血清（血浆）；3．BASO凝聚胺（Polybrene）试剂盒。
交叉配血操作规程凝聚胺法
交叉配血操作规程（凝聚胺法）一．目的规范交叉配血试验操作；保证临床用血的安全性和有效性。
二．适用范围适用于临床配血标本。
三．职责血库技术人员负责交叉配血试验四．所需材料和设备材料：凝聚胺试剂盒、患者血标本、生理盐水、小试管、滴管、献血者标本。
设备：普通离心机、血型血清学专用离心机、37℃恒温水浴箱、显微镜五．操作步骤1.凝聚胺法（1）以生理盐水配制供、受者3％～5％红细胞悬液。
（2）取试管3支，标记主、侧和自身对照主侧加受血者血浆（血清）2滴，献血者3%～5%的红细胞悬液1滴；次侧加献血者血浆（血清）2滴，受血者3%～5%的红细胞悬液1滴；自身对照管加患者血浆（血清）2滴和患者3%～5%的红细胞悬液1滴混匀。
（3）以1000r/分钟离心1分钟，观察盐水介质实验结果。
（4）每管各加低离子介质（LIM）溶液0.7ml,混合均匀，室温孵育1min。
（5）每管各加2滴凝聚胺溶液，混匀后静置15s。
（6）1000r/分钟离心1分钟，倾去上清液，不要沥干。
（7）轻轻摇动试管，目测红细胞有无凝集，如无凝集，必须重复步骤（3）-（6）（8）加入2滴重悬液，并轻轻混合，观察结果。
（9）结果判定如凝聚散开，则为凝聚胺引起的非特异性凝集，判为阴性结果，配血相合；如凝聚不散开，则为抗原抗体结合的特异性反应，判为阳性结果，配血不相合，如肉眼观察凝集强度弱，可进一步在显微镜下观察有无凝集。
结果判定要求在1min内完成，最长不要超过3min，因为弱凝集的阳性结果，超过1min 可能变为阴性。
六．注意事项1.配血技术①常规配血技术：选择的技术不仅要能检查出不配合的IgM抗体，还必须能检查出尽可能多的不配合的IgG抗体，最大限度地减少抗体的漏检。
目前认为盐水法交叉配血是输血前检查必不可少的试验，首先采用盐水法进行交叉配血，再采用能够检出IgG类抗体的方法进行交叉配血；②特殊配血技术，如：预温配血技术：主要用于解决无临床意义的冷抗体引起的交叉配血不配合。
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凝聚胺交叉配血标准操
作规程
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凝聚胺交叉配血标准操作规程
一、目的：
为规范交叉配血试验的技术操作，保证临床输血安全有效，特制定本规程。
二、适用范围
适用于输血科进行交叉配血试验
三、职责
输血科技术人员负责交叉配血试验。
四、测定原理：
红细胞表面带有大量的负电荷，凝聚胺是一种高效价阳离子季胺盐多聚物，溶解后产生较多正电荷，可以中和红细胞表面的唾液酸带有的负电荷，使红细胞之间的距离减少。
若是未被抗体致敏的红细胞，加入悬浮液它具有中和凝聚胺的作用，使正常的红细胞非特异性凝集散开，试验结果为阴性；但如果红细胞被相应的抗体所致敏，则会被凝聚胺凝集，凝块就不会散开，试验结果为阳性。
五、试剂及材料
(一)聚凝胺试剂盒(合肥天一生物技术研究所)
成分：低离子介质溶液、聚凝胺溶液、重悬液、阴性及阳性对照液；
保存条件：2~8℃贮存2年，试剂盒打开使用后可置于室温
(二)材料：玻璃试管、微量移液器、离心机、载玻片、显微镜等
六、标本要求：
(一)抽取受血者抗凝（抗凝剂为）静脉血2-3ml（注意核对病人信息）, 在3000r/min条件下离心5分钟备用。
(二)标本保存：血液样本必须密封，2~8℃保存7天。
(三)用于交叉配血必须是2~8℃保存3天以内的标本。
七、操作程序：
(一)将受血者红细胞配成3%盐水悬液，鉴定ABO血型及Rh血型。
(二)将供血者血样配制3%红细胞悬液，鉴定ABO血型及Rh血型。
(三)取洁净小试管2支，1支标明受血者血清（PS）+供血者细胞（DC）或“主侧”；另1支标明供血者血清（DS）+受血者细胞(PC)或“次侧”。
（四）主侧管：受血者血清100ul+供血者红细胞悬液50ul。
次侧管：供血者血清100ul+受血者红细胞悬液50ul。
各加低离子介质溶液ml，混匀后静置1分钟，再各加聚凝胺溶液2滴，静置15s。
(五) 混合均匀后，在1000g条件下离心15s，然后倒掉上清液。
(六) 轻轻侧动试管里的细胞扣，目测红细胞有无凝集，如无凝集，则必须重做。
(七) 最后加入重悬液2滴，轻轻转动试管混合，并同时观察结果，必要时在显微镜下观察结果。
八、结果判定：
(一)阴性：60秒内凝块散开，代表由聚凝胺溶液引起的非特异性凝集，配血结果相合。
(二)阳性：60秒内凝块不散开，代表红细胞抗原抗体结合的特异性反应，配血结果不相合。
(三)如反应可疑，可进一步倒在玻片上用显微镜观察。
九、注意事项：
(一)若病人血浆（血清）含肝素，须多加双倍量的聚凝胺溶液以中和肝素。
(二)冬季室温较低，应将试管保温，以防冷凝集素引起的凝集反应，影响结果判断。
(三)加入血清量应严格按照操作方法，多加血清会提高离子强度，降低致敏效果。
(四)抗原抗体比例适当。