细菌形态结构观察实验报告
微生物实验报告(微生物形态观察、分布、灭菌消毒)
微生物实验微生物实验细菌形态观察细菌分布消毒灭菌细菌形态观察一、实验目的1.掌握光学显微镜（油镜）的使用及日常维护2.掌握细菌的三种形态3.掌握临床常见细菌的形态及染色4.掌握细菌的特殊结构5.了解支原体、衣原体、立克次氏体、螺旋体及真菌的结构特点二、实验原理1. 普通光学显微镜（油镜）的使用1. 在标本欲检部位滴一滴香柏油，然后转换油镜头2. 从侧面观察并慢慢转动粗调节器，使油镜头浸没在油滴内，当油镜头几乎接触玻片时停止转动，以免碰撞玻片，用双眼观察目镜，同时调节细调节器，直至细菌清晰3. 根据需要调节显微镜亮度2. 普通光学显微镜的维护1.移动显微镜时，用右手持镜壁，左手托镜座，平端于胸前2.油镜用毕后，要立即用擦镜纸擦去香柏油；再用滴有二甲苯的擦镜纸擦油镜头；最后，用干净擦镜纸将镜头上的二甲苯擦去，以免损伤油镜头3.镜头擦净后，降低接物镜并将其转成八字形，罩好镜罩放入柜内4.做好使用记录3．微生物知识1．细菌按形态分类：球菌：球形（包括双球菌、四联球菌、八叠球菌、葡萄球菌、链球菌等）杆菌：杆状（包括单杆菌、双杆菌、链杆菌、分枝杆菌、双歧杆菌等）螺旋菌：螺旋状（包括螺旋菌、弧菌等）2．细菌的基本结构细胞壁、细胞膜、细胞质、核质、核蛋白体3．细菌的特殊结构荚膜：如肺炎双球菌鞭毛：又分单毛菌、双毛菌、丛毛菌、周毛菌。
如：变形杆菌为周毛菌菌毛芽胞：如破伤风梭菌、炭疽芽胞杆菌、肉毒梭菌4．微生物是一切肉眼看不见或看不清的微小生物的总称，包括原核类、真核类和非细胞类。
原核类：细菌、放线菌、蓝藻、衣原体、支原体、立克次氏体真核类：真菌、原生动物、显微藻类非细胞类：病毒、亚病毒5．真菌单细胞：圆形、芽生孢子。
如：酵母菌多细胞：菌丝及孢子、孢子出芽。
如：霉菌6．白假私酵母菌（白念）生物学性状：G+单细胞真菌、芽生孢子、类酵母型菌落厚膜孢子、假菌丝有助于鉴定致病性：皮肤粘膜——鹅口疮、内脏感染、CNS感染微生物学检查：直接涂片、染色后镜检——菌体、芽生孢子、假菌丝7．新型隐球菌生物学性状：圆形酵母型菌、外周有厚荚膜（比菌体大1-3倍）致病性：吸入后侵犯皮肤、粘膜等——慢性炎症和脓肿；侵袭CNS——亚急性或慢性脑膜炎微生物学检查：脑脊液离心后取沉淀、痰和脓标本直接检查；墨汁负染见出芽菌体外围有宽厚荚膜为阳性三、实验材料记号笔：1支；大镊子：1支；火柴：1盒；蜡笔：1支；试管架：1个；酒精灯：1个；接种环：1支；Olympus显微镜：1台；显微镜使用记录本：1个四、实验内容1. 观察细菌三种形态1）球菌链球菌、葡萄球菌、肺炎双球菌（子弹形）、脑膜炎双球菌（蚕豆形）、四联菌2）杆菌破伤风杆菌、白喉杆菌（异染颗粒）、绿脓杆菌、伤寒杆菌、变形杆菌3）螺形菌弧菌——霍乱弧菌；螺菌；螺杆菌——幽门螺杆菌；弯曲菌2. 观察细菌的特殊结构芽胞、鞭毛、荚膜、异染颗粒、钩端螺旋体、幽门螺杆菌3. 绘图葡萄球菌(staphyloccocus)；肺炎双球菌(pneumo coccus)；脑膜炎球菌(meningococcus)；破伤风杆菌（Clostridium Tantenus）；霍乱弧菌（vibrio cholera)；芽胞(spore)；鞭毛（flagellum)；荚膜(capsule)；钩端螺旋体(leptospira)五、实验结果绘8幅细菌镜下图，已交。
细菌形态结构观察实验报告
细菌形态结构观察实验报告实验目的本实验旨在观察和描述细菌的形态结构。
实验材料•高倍显微镜•目镜•细菌样本实验步骤步骤一：样本制备1.取一支细菌样本，并将其放置在玻璃片上。
2.用一根铁丝将细菌样本均匀涂抹在玻璃片上，确保细菌分布均匀。
步骤二：显微镜调整1.将玻璃片放置在显微镜载物台上。
2.将目镜放置在载物台下方的物镜孔上。
3.调整目镜的位置，使其与细菌样本对齐。
步骤三：观察细菌形态结构1.通过显微镜的调焦轮，将细菌样本的图像调至清晰可见。
2.通过调整显微镜的放大倍数，使细菌图像适合观察。
3.观察细菌的形态结构，包括形状、大小和排列方式等。
实验结果经过观察，我们发现细菌样本具有不同的形态结构。
根据观察结果，我们将细菌分为以下几类：球菌球菌是一类呈球形的细菌，它们通常单独存在或呈链状排列。
球菌的直径通常在1至5微米之间。
杆菌杆菌是一类呈棒状的细菌，它们的形状类似于一根细长的棒子。
杆菌的长度通常在2至10微米之间。
弯曲菌弯曲菌是一类形状呈弯曲或螺旋形的细菌。
它们通常具有较长的形态，长度可达20微米以上。
其他形态结构除了上述常见的形态结构外，我们还观察到了一些其他形态结构的细菌，如分枝菌和纤维菌等。
这些细菌的形态结构多样，需要进一步的研究和分类。
结论通过本实验，我们成功观察和描述了细菌的形态结构。
细菌样本表现出了各种不同的形状和大小，如球菌、杆菌、弯曲菌等。
这些观察结果对进一步研究细菌的特性和功能具有重要意义。
细菌的形态结构不仅与其功能和生存环境密切相关，还对细菌的分类和鉴定起到重要的作用。
进一步研究细菌的形态结构有助于我们更好地理解和探索微观世界中最小生物的奥秘。
参考文献[1] 张三. 细菌形态结构与分类鉴定研究. 生物科学前沿, 20XX(XX): XX-XX.。
实验一：细菌基本形态与结构
操作原则：无菌操作（烧灼灭菌）
Aseptic area 10-20cm
外焰 内焰 焰芯
细菌涂片的制备
器具：接种环（上）和接种针（下）
2—5mm
柄约22cm
5—8cm
金属柄约14.5cm
绝缘柄 约7.5cm
安装环(针)的螺口(约8mm)
细菌涂片的制备
菌液采取法
三、实验器材
示教玻片、显微镜、擦镜纸、 香柏油、二甲苯
四、实验步骤
（一）普通光学显微镜 的使用
显微镜的构造 （1）支持部分：镜臂、镜筒、精细调节 （2）放大部分：接目镜、接物镜 （3）照明部分：反光镜、取光器、滤光
镜
（一）普通光学显微镜的使用
1、油镜的使用方法 （1）低倍镜观察 （2）光圈调最大 （3）标本上滴加香柏油0.5-1滴 （4）转换油镜头浸入油滴中
幽门螺杆菌
（三）细菌的特殊结构观察
芽胞示教片：破伤风梭菌。 鞭毛示教片：变形杆菌。 荚膜示教片：肺炎双球菌。
产芽芽孢胞细菌的种类
芽孢 菌体 （营养细胞）
破伤风梭菌×1000
鞭毛
变形杆菌鞭毛×1000
细菌荚膜示意图
荚膜的观察：
负染色
细菌标本染色检查法
细菌染色
活菌染色
死菌染色
（一）普通光学显微镜的使用
2、使用完毕显微镜及标本片的处理 （1）油镜用过后，应立即用擦镜纸
将镜头和玻片擦拭干净 （2）如油渍已干，须用擦镜纸蘸少
许二甲苯溶液拭去油渍，再用干擦镜 纸拭净镜头
油镜的使用与保护
1.原理 2.方法
（二）细菌的三种基本形态
球菌：双球菌、链球菌、葡萄球菌 杆菌：球杆菌、链杆菌、分支杆菌 螺形菌：霍乱弧菌、螺杆菌
纯培养形态观察实验报告
纯培养形态观察实验报告通过观察不同微生物的纯培养形态，了解其形态特征和生长规律，进一步了解微生物的基本特性。
实验步骤：1. 选择待观察的微生物，如细菌或真菌等。
根据实验目的，选择适合的培养基。
2. 准备培养基，如琼脂平板、液体培养基等。
将培养基分装到培养皿或试管中。
3. 进行无菌操作，以避免外界微生物的污染。
使用无菌技术将待观察的微生物接种到培养基中。
4. 将接种好的培养皿或试管密封，放置于恒温箱或培养箱中，以适合微生物生长的温度进行培养。
5. 观察培养基上微生物的生长情况。
可以通过肉眼或放大镜进行观察，也可以使用显微镜进行观察。
6. 打开培养皿或试管，仔细观察微生物的形态特征。
可以观察其颜色、形状、大小等。
7. 记录观察到的微生物形态特征，并与已知的标准形态进行对比。
可以用图像或文字描述形态特征。
8. 观察微生物生长规律，如生长速度、生长方式等。
记录生长的时间和观察到的变化。
9. 实验结束后，进行消毒处理，以防止微生物的传播和污染。
实验结果：在观察微生物纯培养形态时，应注意以下几个方面：1. 形状：观察微生物的外形特征，包括圆形、椭圆形、菌丝状等。
2. 颜色：观察微生物的颜色特征，如无色、白色、黄色、绿色等。
3. 大小：观察微生物的大小特征，可以通过目测或显微镜下测量。
4. 生长方式：观察微生物的生长方式，如点状、斑状、涂片状等。
5. 生长速度：观察微生物的生长速度，可以通过观察生长的时间和观察到的变化来判断。
6. 特殊结构：观察微生物是否有特殊结构，如胞囊、孢子等。
7. 产生的代谢产物：观察微生物是否产生代谢产物，如气泡、颜色变化等。
通过实验观察，我们可以得到以下结论：1. 不同微生物有不同的形态特征，如形状、颜色、大小等，这些特征有助于鉴定微生物种类。
2. 微生物的生长速度和生长方式也各不相同，可以通过观察这些特征来了解微生物的生长规律。
3. 一些微生物具有特殊结构，如孢子和胞囊，这些结构对微生物的繁殖和传播起到重要作用。
细菌的形态观察实验报告
一、实验目的1. 掌握显微镜油镜的使用方法。
2. 通过观察细菌的形态结构，了解细菌的基本特征。
3. 熟悉细菌的分类方法，为后续的细菌鉴定工作打下基础。
二、实验原理细菌是微生物的一种，具有个体微小、结构简单、繁殖迅速等特点。
细菌的形态结构主要包括细胞壁、细胞膜、细胞质、核质体等基本结构，以及鞭毛、荚膜、芽孢等特殊结构。
通过观察细菌的形态结构，可以初步判断其种类，为后续的细菌鉴定工作提供依据。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：革兰氏阳性球菌、革兰氏阴性球菌、革兰氏阳性杆菌、革兰氏阴性杆菌。
2. 仪器：显微镜、载玻片、盖玻片、无菌操作台、无菌试管、酒精灯、火柴、镊子、滴管、染色液（结晶紫、碘液、番红）等。
四、实验步骤1. 细菌涂片制作（1）取无菌试管，加入适量的细菌培养液。
（2）用无菌镊子取少量细菌培养液，滴于载玻片上。
（3）用无菌盖玻片轻轻压在细菌培养液上，使细菌均匀分布。
（4）用酒精灯对载玻片进行轻微加热，使细菌固定。
2. 细菌染色（1）用滴管滴加适量的结晶紫染液于载玻片上的细菌涂片上。
（2）染色约1分钟，然后用滴管滴加适量的碘液。
（3）染色约1分钟，用蒸馏水冲洗载玻片上的染色液。
（4）用番红染液复染约1分钟，用蒸馏水冲洗载玻片上的染色液。
3. 细菌观察（1）将载玻片置于显微镜下，调整光圈和焦距，使视野清晰。
（2）观察革兰氏阳性球菌、革兰氏阴性球菌、革兰氏阳性杆菌、革兰氏阴性杆菌的形态结构。
（3）记录观察结果，包括细菌的大小、形状、排列方式、染色特性等。
五、实验结果与分析1. 革兰氏阳性球菌：呈球形，直径约1～2微米，排列成单行、双行或链状。
染色后，菌体呈紫色。
2. 革兰氏阴性球菌：呈球形，直径约1～2微米，排列成单行、双行或链状。
染色后，菌体呈红色。
3. 革兰氏阳性杆菌：呈杆状，直径约0.5～1微米，长度约为2～5微米，排列成单行、双行或链状。
染色后，菌体呈紫色。
4. 革兰氏阴性杆菌：呈杆状，直径约0.5～1微米，长度约为2～5微米，排列成单行、双行或链状。
小学六年级上册科学实验报告单用显微镜观察细菌
实验结论：细菌是生物的一种，只不过由于它太小，肉眼根本看不见，因此在生活中并没有引起大家的注意。其实细菌与我们的生活紧密相关。
小学六年级上册科学实验报告单
年级
姓名
时间
实验名称
用显微镜观察细菌ห้องสมุดไป่ตู้
小组成员
实验目的
学会使用显微镜观察物体
实验器材
显微镜、细菌玻片等。
实验过程
1、熟悉显微镜的使用方法（五年级学过，进一步熟悉）。
2、把细菌玻片放在显微镜下进行观察。
3、把观察结果记录下来，供学习使用。
实验现象或实验结论
实验现象：
1、在显微镜下能够观察到平时肉眼看不到的细菌；
观察细菌的结构实验报告单
观察细菌的结构实验报告单一、实验目的1.了解细菌的基本结构；2.学习光学显微镜的使用方法；3.掌握观察细菌的技术。
二、实验器材和试剂1.光学显微镜2.培养皿3.移液管4.无菌培养基5.碘酒6.盖玻片7.碘液8.青霉素盘（可选）三、实验步骤1.取一块无菌培养基，用移液管吸取一根细菌试管内细菌悬液，分别在培养基的中心和四周涂抹细菌，封上盖玻片，置于恒温箱中培养。
2.根据培养时间（通常为24小时）取出培养皿。
3.取少量碘酒滴于盖玻片上，将细菌涂物加碘，保持1-2分钟后用蒸馏水冲净盖玻片。
4.将盖玻片置于显微镜下，用10倍或40倍物镜进行观察。
5.如果有青霉素盘，则将青霉素盘放入培养皿中，保持恒温箱中培养24小时后进行观察。
四、实验结果通过观察，我们可以看到细菌在显微镜下的结构。
细菌包括细胞膜、细胞壁和细胞质。
在细菌的涂片中，我们可以看到细菌的形状和排列方式。
有些细菌呈圆形或椭圆形，称为球菌；有些细菌呈短杆状，称为短杆菌；还有些细菌呈长杆状，称为长杆菌。
其中，球菌排列可为单个、成对、链状等形式，而短杆菌和长杆菌通常呈链状或单个排列。
五、实验讨论1.细菌在显微镜下的结构是由于显微镜的放大能力。
根据实验结果，我们可以看到细菌的形状、排列和数量等结构特征，进一步了解细菌。
2.青霉素是抗生素之一，它可以抑制细菌的生长。
如果实验中使用了青霉素盘培养，我们可以观察到细菌对青霉素的反应情况，从而评估其对青霉素的敏感性。
六、实验结论通过本次实验，我们成功地观察到了细菌在显微镜下的结构。
细菌的形状、排列和数量等结构特征对于进一步了解细菌的生物学特性和病原性具有重要意义。
同时，本实验也提供了一种基本的技术方法，可以用于细菌的观察和鉴定。
七、实验感想通过观察细菌的结构，我对微生物的丰富性和多样性有了更深入的认识。
在以后的学习中，我将进一步学习和掌握更多的观察微生物的技术，以便更好地认识和理解微生物的世界。
细菌的形态结构观察实验报告思考题
细菌的形态结构观察实验报告思考题细菌的形态结构观察实验报告引言：细菌是一种微生物，它们广泛存在于自然界中。
了解细菌的形态结构对于研究微生物学和医学等领域具有重要意义。
本实验旨在通过显微镜观察不同种类细菌的形态结构，深入了解它们的特征和分类。
材料与方法：1. 细菌样本：大肠杆菌、葡萄球菌、链球菌、变形杆菌。
2. 显微镜、载玻片、染色剂（甲基蓝）。
3. 操作步骤：（1）将载玻片用火焰消毒并晾干。
（2）用无菌棉签将细菌样本涂抹在载玻片上。
（3）将涂有细菌样本的载玻片放入甲基蓝溶液中染色，静置2分钟。
（4）用滴水器滴少量水在载玻片上，并用纸巾轻轻吸干水分。
（5）将载玻片放到显微镜下进行观察。
结果与讨论：1. 大肠杆菌大肠杆菌是一种革兰阴性杆菌，通常生长在肠道中。
观察其形态结构可发现，其细胞为长杆状，约2-3微米长，0.5微米宽。
在染色后可见其细胞质为深蓝色，周围有一层较浅的薄壳。
2. 葡萄球菌葡萄球菌是一种革兰阳性球菌，常见于皮肤和黏膜表面。
观察其形态结构可发现，其细胞为球形或卵圆形，直径约1微米。
在染色后可见其细胞呈紫色。
3. 链球菌链球菌是一种革兰阳性链状细菌，常见于喉咙和皮肤表面。
观察其形态结构可发现，其细胞为链状排列的小球体，直径约0.5微米。
在染色后可见其细胞呈紫色。
4. 变形杆菌变形杆菌是一种革兰阴性弯曲杆菌，在水中广泛分布。
观察其形态结构可发现，其细胞为弯曲的杆状体，长度约1-5微米，宽度约0.2微米。
在染色后可见其细胞呈深蓝色。
结论：通过本实验观察，我们可以了解到不同种类细菌的形态结构特征。
大肠杆菌为长杆状，葡萄球菌为球形或卵圆形，链球菌为链状排列的小球体，变形杆菌为弯曲的杆状体。
这些特征对于细菌的分类和鉴定具有重要意义。
思考题：1. 什么是革兰染色？为什么要进行革兰染色？革兰染色是一种常用的细菌染色方法，用于区分细菌的壁层结构。
其原理是将细胞在紫晶中着色后，在碘液中固定着色物质，然后用酒精洗去多余着色物质，在红粉中再次着色。
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篇一：培养基的制备与灭菌实验报告陕西师范大学远程教育学院生物学实验报告报告题目培养基的制备与灭菌姓名刘伟学号专业生物科学批次/层次指导教师学习中心培养基的制备与灭菌一、目的要求1. 掌握微生物实验室常用玻璃器皿的清洗及包扎方法。
2. 掌握培养基的配置原则和方法。
3. 掌握高压蒸汽灭菌的操作方法和注意事项。
二、基本原理牛肉膏蛋白胨培养基：是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基，有时又称为普通培养基。
由于这种培养基中含有一般细胞生长繁殖所需要的最基本的营养物质，所以可供细菌生长繁殖之用。
高压蒸汽灭菌：主要是通过升温使蛋白质变性从而达到杀死微生物的效果。
将灭菌的物品放在一个密闭和加压的灭菌锅内，通过加热，使灭菌锅内水沸腾而产生蒸汽。
待蒸汽将锅内冷空气从排气阀中趋尽，关闭排气阀继续加热。
此时蒸汽不溢出，压力增大，沸点升高，获得高于100℃的温度导致菌体蛋白凝固变性，而达到灭菌的目的。
三、实验材料1. 药品：牛肉膏、蛋白胨、nacl、琼脂、1mol/l的naoh和hcl溶液。
2. 仪器及玻璃器皿：天平、高压蒸汽灭菌锅、移液管、试管、烧杯、量筒、三角瓶、培养皿、玻璃漏斗等。
3. 其他物品：药匙、称量纸、ph试纸、记号笔、棉花等。
四、操作步骤（一）玻璃器皿的洗涤和包装1．玻璃器皿的洗涤玻璃器皿在使用前必须洗刷干净。
将三角瓶、试管、培养皿、量筒等浸入含有洗涤剂的水中．用毛刷刷洗，然后用自来水及蒸馏水冲净。
移液管先用含有洗涤剂的水浸泡，再用自来水及蒸馏水冲洗。
洗刷干净的玻璃器皿置于烘箱中烘干后备用。
2．灭菌前玻璃器皿的包装（1）培养皿的包扎：培养皿由一盖一底组成一套，可用报纸将几套培养皿包成一包，或者将几套培养皿直接置于特制的铁皮圆筒内，加盖灭菌。
包装后的培养皿须经灭菌之后才能使用。
（2）移液管的包扎：在移液管的上端塞入一小段棉花(勿用脱脂棉)，它的作用是避免外界及口中杂菌进入管内，并防止菌液等吸入口中。
塞入此小段棉花应距管口约0.5cm左右，棉花自身长度约1~1.5cm。
塞棉花时．可用一外围拉直的曲别针、将少许棉花塞入管口内。
棉花要塞得松紧适宜，吹时以能通气而又不使棉花滑下为准。
先将报纸裁成宽约5cm左右的长纸条，然后将已塞好棉花的移液管尖端放在长条报纸的一端，约成45℃角，折叠纸条包住尖端，用左手握住移液管身，有手将移液管压紧．在桌面上向前搓转，以螺旋式包扎起来。
上端剩余纸条，折叠打结，准备灭菌。
（二）液体及固体培养基的配制过程1．液体培养基配制（1）称量（假定配制1000ml培养基）按培养基配方比例依次准确地称取3.0g牛肉膏、10.0 g蛋白胨、5.0gnacl放入烧杯（或1000ml 刻度搪瓷杯）中．牛肉膏常用玻棒挑取，放在小烧杯或表面皿中称量，用热水溶化后倒入烧杯。
（2）溶化在上述烧杯中先加入少于所需要的水量（如约700ml），用玻棒搅匀，然后，在石棉网上加热使其溶解，将药品完全溶解后，补充水到所需的总体积（1000ml）；如果配制固体培养基时，将称好的琼脂放人已溶的药品中，再加热溶化，最后补足所损失的水分。
（3）调ph调ph：一般用ph试纸测定培养基的ph。
用剪刀剪出一小段ph试纸，然后用镊子夹取此段ph试纸，在培养基中蘸一下，观看其ph范围，如培养基偏酸或偏碱时，可用1mol/l naoh 或1mol/l hcl溶液进行调节。
调节ph时，应逐滴加入naoh或hci溶液，防止局部过酸或过碱，破坏培养基中成分。
边加边搅拌，并不时用ph试纸测试，直至ph达7.4-7.6。
反之，用1mol／lhcl进行调节。
2．固体培养基的配制配制固体培养基时，应将已配好的液体培养基加热煮沸，再将称好的琼脂(1.5~2％)加入，并用玻棒不断搅拌，以免糊底烧焦。
继续加热至琼脂全部融化，最后补足因蒸发而失去水分。
（三）培养基的分装根据不同需要，可将已配好培养基分装入试管或三角瓶内，分装时注意不要使培养基沾污管口或瓶口，造成污染。
如操作不小心，培养基沾污管口或瓶口时，可用镊子夹一小块脱脂棉，擦去管口或瓶口的培养基，并将脱脂棉弃去。
1．试管的分装取一个玻璃漏斗，装在铁架上，漏斗下连一根橡皮管，橡皮管下端再与另一玻璃管相接，橡皮管的中部加一弹簧夹。
分装时，用左手拿住空试管中部，并将漏斗下的玻璃管嘴插入试管内，以右手拇指及食指开放弹簧夹，中指及无名指夹佐玻璃管嘴，使培养基直接流入试管内。
装入试管培养基的量视试管大小及需要而定，若所用试管大小为15×150 mm时，液体培养基可分装至试管高度1／4左有为宜；如分装固体或半固体培养基时，在琼脂完全融化后，应趁热分装于试管中。
用于制作斜面的固体培养基的分装量为管高1／5(约3—4mi)，半固体培养基分装量为管高的1／3为宜。
2．三角瓶的分装用于振荡培养微生物时，可在250 m1用于制作平板培养基用时，可在250 m1三角瓶中加入150ml粉(按2％计算)，灭菌时瓶中琼脂粉同时被融化。
（四）棉塞的制作及试管、三角瓶的包扎为了培养好气性微生物，需提供优良通气条件，同时为防止杂菌污染，则必须对通入试管或三角瓶内空气预先进行过滤除菌。
通常方法是在试管及三角瓶口加上棉花塞等。
1．试管棉塞的制作制棉塞时，应选用大小、厚薄适中的普通棉花一块，铺展于左手拇指和食指扣成的团孔上，用右手食指将棉花从中央压入团孔中制成棉塞．然后直接压入试管或三角瓶口。
也可借用玻璃棒塞入，也可用折叠卷塞法制作棉塞。
制作的棉塞应紧贴管壁，不留缝隙，以防外界微生物沿缝隙侵入，棉塞不宜过紧或过松，塞好后以手提棉塞，试管不下落为准。
棉塞的2／3在试管内，1／3在试管外。
目前也有采用硅胶塞代替棉塞直接盖在试管口上。
将装好培养基并塞好棉塞或硅胶塞的试管捆成一捆，外面包上一层牛皮纸。
用记号笔注明培养基名称及配制日期，灭菌待用。
2．三角瓶棉塞制作通常在棉塞外包上一层纱布，再塞在瓶口上。
有时为了进行液体振荡培养加大通气量，则可用8层纱布代替棉塞包在瓶口上，目前也有采用硅胶塞直接盖在瓶口上。
在装好培养基并塞好棉塞或包扎八层纱布或盖好硅胶塞的三角瓶口上，再包上一层牛皮纸并用线绳捆好，灭菌待用。
（五）培养基的灭菌将上述培养基以0.103mpa，l21℃，20min高压蒸气灭菌。
灭菌过程：1. 加水：首先将内层锅取出，再向外层锅内加入适量的水，使水面没过加热蛇管，与三角搁架相平为宜。
切勿忘记检查水位，加水量过少，灭菌锅会发生烧干引起炸裂事故。
2. 装料：放回内层锅，并装入待灭菌的物品。
注意不要装得太挤，以免妨碍蒸汽流通而影响灭菌效果。
装有培养基的容器放置时要防止液体溢出，三角瓶与试管口端均不要与桶壁接触，以免冷凝水淋湿包扎的纸而透入棉塞。
3. 加盖：将盖上与排气孔相连的排气软管插入内层锅的排气槽内，摆正锅盖，对齐螺口，然后以对称方式同时旋紧相对的两个螺栓，使螺栓松紧一致，勿使漏气，并打开排气阀。
4. 排气：打开电源加热灭菌锅，将水煮沸，使锅内的冷空气和水蒸汽一起从排气孔中排出。
一般认为当排出的气流很强并有嘘声时，表明锅内的空气已排尽，沸腾后约需5分钟。
5. 升压：冷空气完全排尽后，关闭排气阀，继续加热，锅内压力开始上升。
6. 保压：当压力表指针达到所需压力时，控制电源，开始计时并维持压力至所需的时间。
如本实验中采用0.1mpa，121.5℃，20分钟灭菌。
灭菌的主要因素是温度而不是压力，因此锅内的冷空气必须完全排尽后，才能关闭排气阀，维持所需压力。
7. 降压：达到灭菌所需的时间后，切断电源，让灭菌锅温度自然下降，当压力表的压力降至“0”后，方可打开排气阀，排尽余下的蒸汽，旋松螺栓，打开锅盖，取出灭菌物品，倒掉锅内剩水。
压力一定要降到“0”后，才能打开排气阀，开盖取物。
否则就会因锅内压力突然下降，使容器内的培养基或试剂由于内外压力不平衡而冲出容器口，造成瓶口被污染，甚至灼伤操作者。
（六）斜面和平板的制作1．斜面的制作将已灭菌装有琼脂培养基的试管，趁热置于木棒或玻棒上，使成适当斜度，凝固后即成斜面。
斜面长度不超过试管长度l／2为宜。
如制作半团体或固体深层培养基时，灭菌后则应垂直放置至凝固。
2．平板的制作将装在三角瓶或试管中已灭菌的琼脂培养基融化后，待冷至50℃左右倾入无菌培养皿中。
温度过高时，皿盖上的冷凝水太多；温度低于50℃，培养基易于凝固而无法制作平板。
平板的制作应在火旁进行，左手拿培养皿，右手拿三角瓶的底部或试管，左手同时用小指和手掌将棉塞打开，灼烧瓶口，用左手大拇指将培养皿盖打开一缝，至瓶口正好伸入，倾入10~15ml培养基，迅速盖好皿盖，置于桌上，轻轻旋转平皿，使培养基均匀分布于整个平皿中，冷凝后即成平板。
（七）培养基的灭菌检查灭菌后的培养基，一般需进行无菌检查。
最好取出1~2管(瓶)，置于37℃温箱中培养1~2天，确定无菌后方可使用。
篇二：微生物实验报告脓汁和粪便标本中病原菌的检测专业：学号：姓名：一、实验目的探究检测其病原菌的类型并通过一系列的观察与鉴定从而确定其病原菌的名称和性质。
在实践中学习培养基的制备、消毒和灭菌，细菌的分离与培养，细菌群体和个体形态特征的观察，细菌生化反应鉴定等技巧。
从而掌握微生物实验的各种操作方法，培养对微生物实验的兴趣。
二、实验材料器材打火机、油性笔、酒精灯、接种环、接种针、污物盘、普通冰柜、隔水式电热恒温培养箱、奥林巴斯cx21型生物显微镜、电炉、试管（带棉塞）、称量纸、药勺、牛皮纸、硫酸纸、橡皮筋、尺子、锥形瓶、高压蒸汽灭菌器、镊子、玻片、吸水纸、拭镜纸试剂药品普通营养琼脂培养基、蒸馏水、脓汁标本、粪便标本、石蜡油、生理盐水、结晶紫、卢戈碘液、95%乙醇、稀释复红、葡萄糖微量发酵管（2支）、乳糖微量发酵管（2支）、青霉素抗菌素纸片、链霉素抗菌素纸片、庆大霉素抗菌素纸片、血浆、福氏志贺菌诊断血清三、方法与步骤干粉培养基→蒸馏水→加热溶化→分装→集中放在试管筐里→罩上硫酸纸、牛皮纸→用橡皮筋扎好→放入讲台边的灭菌桶或灭菌筐内→送到高压蒸汽灭菌室（洗刷室）→灭菌→（1）平板培养基：倾注平板10ml→琼脂完全凝固后，平板倒放→4℃冰箱保存备用。
（2）斜面培养基：培养基趁热斜放→琼脂凝固以后，4℃冰箱保存备用。
→贴上标签后灭菌使用。
①空气的细菌学检查每组1个营养琼脂平板，选择采样地点（实验室、卫生间或任选地点）→将平板盖打开，盖朝下放置在平板旁边→平板暴露于空气中15min→平板倒扣盖上→作标记→37℃温箱培养24h→观察结果。
②人体体表的细菌学检查甲乙常规洗手，丙丁标准洗手。
甲和乙、丙和丁共用1个平板按规定在普通平板上接种手指上的细菌。
第1格为洗手前，第2格为洗手后，第3格为消毒后，第4格空白对照。
接种环烧灼灭菌→分别取脓汁标本与粪便标本点在普通平板和依红美蓝平板上，各做两份，→烧掉接种环上多余的标本→冷却后，应用分区划线分离法，将脓汁标本接种于营养琼脂平板（2份），粪便标本接种于伊红美蓝平板（2份）→接种环烧灼灭菌→将平板倒置37℃培养18～24h→观察结果。