病料的取材及送检(最新整编)
病理标本采集及送检标准操作程序修订稿
病理标本采集及送检标准操作程序WEIHUA system office room 【WEIHUA 16H-WEIHUA WEIHUA8Q8-病理标本采集及送检标准操作程序一、目的规范标本的采集和送检，保证送检标本的质量，从而确保病理诊断的准确性，为病人的诊断及治疗提供正确指导二、适用范围组织学、细胞学标本的采集、固定、包装运输，申请单填写。
三、工作流程（一）组织活检标本1、病人知情同意:所有为了疾病的诊断而采取的有创组织活检，在活检前均应向患者和或其家属说明活检病理诊断的必要性。
特别向其说明，病理诊断并不是万能的，有时病理活检并不能得出明确诊断，使患者和/或其家属了解病理诊断的局限性，使其对活检不能明确诊断表示理解，必要时（根据各自医院的相关规定）和患者签署知情同意书2、申请单填写:根据检测要求填写本中心相应的专用申请单，病人信息对病理诊断非常重要，临床医师应认真、详细填写申请单各项内容（包括医生姓名、联系电话），特别要填写有意义的阳性体征、影像学检查及其它检验结果，以前做过病理学检查（包括细胞学和组织学）的，应填写检查结果，在本中心检查的应填写相应的病理号。
妇科标本应填写月经史、妊娠史。
字迹应清晰可辨。
3、样本获取（1）组织样本获取①对于病理诊断来说，组织越多，诊断成功率越高，因此临床医师在切取组织时，在病人状况允许的情况下，尽量多取组织。
②取材时应尽量获取未坏死组织，较大肿瘤中央区域常常坏死，做穿刺时应避开坏死区域。
③取材动作应轻柔，尽量避免挤压组织。
④肿瘤切除标本应标记标本的方位，并在申请单中记录清楚，以便在发报告时报告各切缘情况，建议对下述标本进行方位标记。
A.带皮肤的肿瘤在标本的十二点位用缝线标记。
B.不带皮肤的软组织肿瘤、乳腺肿瘤、甲状腺肿瘤切除标本分别在十二点位和前面用长度明显不同的缝线标记。
C.宫颈环切（leep术）标本在12点位用缝线标记；D.肠管切除标本于近断端用缝线标记E.肾切除标本分别用长度明显不同的缝线标记输尿管与肾血管切缘。
病料的采集与运送
病料的采集与运送一、病料的采集一般应在感染初期或发病急性期从死禽（死亡时间不超过一天）或症状明显的活禽采取。
死禽采取气管、肺脏、肝脏、肾脏、脾脏、法氏囊等组织样品。
要求：送检材料具有代表性，并有一定的数量；采集送检的病料要求做好登记，注明所采鸡的品种、年龄、发病日龄、发病情况（临床症状）、采集时间、采集地点、死亡量、养户、送检日期、采集部位、用药情况、需要检测的项目等。
二、病毒和病料的保存采集的病料若再48小时以内进行检测，可放4度保存；否则应放在低温条件下保存即：-20度以下。
细菌性疾病检测不能冷冻，病料不能放置时间太久。
二、具体疾病的采样部位新城疫禽流感：喉头、气管、肺、气囊、肝、脾如果有神经症状可以取脑部。
传染性支气管炎：气管、肺、肾传染性喉气管炎：喉头、气管、肺以上气管的含毒量最高。
取病料是务必要取传染性法氏囊：法氏囊、脾脏在不明原因导致疾病的情况下可以各个部位都采集一下，有病变部位和免疫器官可重点采集。
细菌性疾病可带整只鸡（带回来时可用消毒药把表层浸泡消毒），一般取肝脏、肿胀关节液或肿胀部位。
球虫可以采集粪便或刮取感染鸡的肠内容物（也可带整个鸡到实验室）。
曲霉菌病可以采集病变部位（如肺脏），确证之后可以收集饲料，棉签刮去环境微生物帮助寻找治病原因。
具体可根据实际情况灵活调整。
三、现在耒阳实验室疾病诊断的方法简介：一、病毒性疾病：很多烈性传染病都具有凝集红细胞的作用，所以一般通过接种鸡胚分离病毒，通过血凝实验看是否具有血凝性缩小范围，看是否是血凝性病毒，在通过中和实验看是否是H9、H5、ND等，可以看鸡胚的病变来判断。
如传候会使绒毛膜形成豆斑。
未来也可以通过PCR来检测（具有准确快速的特点，也是总部常用的检测方法）。
二、细菌性疾病通过菌落特征、不同培养基的生长特性、显微镜的镜检及生化试验等来进行诊断。
四、球虫饱和盐水漂浮法和直接涂抹法等进行诊断五、环境微生物检测和水质检测。
病理材料的采集与送检
病理材料的采集与送检作者：胡全福１病料的采集１．１供检验用的病料必须是新鲜畜尸的各脏器或血液等。
已腐败变质的畜尸不能采取病料。
作细菌学培养的则应采用未使用过治疗药物的病畜。
所用器械容器事先要消毒。
１．２采取病料的部位应根据疫病情况而定。
一般应采肝，脾、肾、淋巴结、脑、脊髓等组织，如怀疑为口蹄疫则应采蹄部水疱皮或水疱液，分别装在灭菌容器内；需作病原检查的放在５０％甘油生理盐水中保存；作病理组织学检查的则放在福尔马林中保存。
血液如要作血清学检查，则应让其自然凝固后分离出血清；如作病原学检查需全血，应预先加入抗凝剂。
小家畜则可送全尸到实验室，依具体情况采取病料。
１．３对人畜共患病，在采病料时应戴手套、口罩等。
如疑似炭疽则不能剖检，而应采取局部皮肤或耳尖送检，如确实需要剖检，一定要严格做好消毒和防护，防止病原扩散。
２病料的保存及寄送２．１病料保存方法依据病料用途和病原特性选择保存方法。
一般需冷藏保存作病原检查的材料，应将病料分别装在小口瓶或青霉素瓶内加５０％甘油生理盐水，如作病毒分离还应加一定量的青霉素、链霉素。
如作细菌检验则不能加“双抗”，而且病料保存时间不宜过长，应尽快密封送检。
２．２作病理组织切片的病料，应选择好被检脏器的３ｃｍ３的组织块放在１０％的福尔马林溶液或９５％酒精中，保存液的量应为病料的８～１０倍。
２．３供细菌或病毒学检查的血液应加抗凝剂，以防凝固，但不可加防腐剂。
常用的抗凝剂为５％枸椽酸钠溶液，按１ｍＬ防凝剂加１０ｍＬ血液摇匀即可。
２．４送检的病料都应注明所采家畜的品种、年龄、发病情况、流行病学特点、采集时间、采集地点、畜主、送检目的、病料名称、保存液等细资料。
３几种主要传染病病理材料的采取方法３．１口蹄疫无菌采取新鲜、成熟、未破裂、无污染溃烂的水疱皮或水疱液。
水疱皮可保存在５０％甘油生理盐水中，供作反血凝及动物试验。
３．２猪瘟采死猪的整个脾、肾、淋巴结及有病变的消化道，分别装在容器中供病理检查，酶标试验及分离、培养动物接种，如需抗体检查则采血清。
病料的采取、保存、送检
实训目标
通过实训，使学生初步掌握动物传染病病 料的采取、包装和送检的方法
仪器材料
煮沸消毒器、外科刀、外科剪、镊子、试管、平 皿、广口瓶、包装容器、注射器、采血针头、脱 脂棉、载玻片、酒精灯、火柴、保存液、来苏儿， 新鲜动物尸体等
方法步骤
（一）病料的采取 （二）病料的保存 （三）病料的包装和送检方法
课后作业
1．写出实习报告 2．掌握常见病料的采集、包装、送检方法
（一）病料的采取
1．采取病料的时间 最好在动物死后立即采取，以不超过6h为宜。
2．采取病料器械的消毒 刀、剪、镊子等：可煮沸消毒30min； 玻璃器皿等：可高压灭菌或干热灭菌，或于0.5%～1%碳 酸氢钠水中煮沸30min；
软木塞和橡皮塞：于0.5%石炭酸水溶液中煮沸10～15min；
载玻片：在 1% ～ 2% 碳酸氢钠水中煮沸 10 ～ 15min。水洗 后用清洁纱布擦干，将其保存于酒精与乙醚等份液中备用。 注射器和针头：放于清洁水中煮沸30min即可。
3．各种组织脏器病料的采取
采取病料应无菌操作。 采取病料的种类，应根据不同的传染病，相应地采取 其脏器和内容物。 在无法估计是某种传染病时，应进行全面采取。 临床诊断应待采取病料完毕后进行。
淋巴结及内脏 有病变的部位各采取1～2cm3的小方块， 分别置于灭菌试管或平皿或小瓶中。 脓汁及渗出液 用注射器或吸管抽取，置于灭菌试管中。 血液 心血通常在右心房采取；血清的采取，以无菌操作 采取血液10ml，置于灭菌的试管中；全血的采取，在注射 器中先吸入5%柠檬酸1ml，再以无菌操作采取全血至10ml， 注入灭菌好的试管或小瓶中。
（二）病料的保存
病料应保存在新鲜状态，以免病料送达实验室时 已失去原来状态，影响正确诊断。
病料的采集、保存及运输制度
病料的采集、保存及运输制度l、病料的采集‘(1) 血样的采集A．根据动物种类确定采血部位。
选用真空管、无菌注射器、无菌采血瓶、毛细管等采血，采血量满足试验需要。
B．若需抗凝血，则视实验要求选择抗凝剂。
如需血清，则待血凝固后无菌分离血清并分装于灭菌瓶(管)中。
(2)粪样的采集将消毒拭子插入动物肛门或泄殖腔中，采取直肠粘液或粪便，放入装有缓冲液的试管或瓶中，尽快送到实验室；若检查消化系统寄生虫，则需采取5—10g 新鲜粪便。
(3)子宫阴道内分泌物或外生殖器包皮内分泌物的采集将消毒好的特制吸管插入子宫颈口或阴道内，向内注射少量营养液或生理盐水，用吸球反复抽吸几次后吸出液体，注入培养液中。
用软胶管插入公畜的包皮内，向内注射少量的营养液或生理盐水，多次揉搓，使液体充分冲洗包皮内壁，收集冲洗液注入无菌容器内。
(4)实质脏器的采集无菌采集脏器组织块，放入无菌容器内。
每块组织应单独放在无菌容器内，注明日期、组织和动物名称。
注意防止组织间相互污染。
供组织病理学检查的组织块的厚度不能超过0、5cm，切成1—2cm的方块，置于至少10倍于组织样品体积的中性缓冲10％福尔马林溶液中，作组织学检查的样品不能冷冻。
(5)皮肤样品的采集产生水泡或皮肤病变的疾病，应直接从病变部位采样。
病变皮肤的碎屑以及末破裂水泡液也可作为样品。
(6)奶样的采集清洗乳头后采样。
弃去头把奶液后采集奶液装满无菌试管。
(7)胚胎的采集选取力整、无腐蚀的胚胎置于冰桶中尽快送抵实验室。
如果在24小时内不能将样品送达实验室，只能冷冻运送。
2、病料的保存检查抗体用的血液，不加抗凝剂，待凝血后，分离血清放入小青霉素瓶中。
供细菌培养用的液体病料，同容器一起放入有冰的保温瓶或4℃冰箱内。
3、病料的运送供细菌检验用的病料，要防止腐败，必须及时送检。
一般可用有冰块的保温瓶或其他低温条件，以使病料不腐败。
最好由专人送检，并带好送检的有关病情、病例、剖检等记录，以供检验人员的参考。
病料的采集和运送(严选优质)
病料的采集和运送（一）、病料采集的注意事项1．解剖前检查凡发现患畜急性死亡时，绝不能随便解剖。
未解剖前，必须由末梢血管采血（或局部解剖）作涂片，检查是否患有炭疽杆菌。
操作时应特别注意，勿使血液污染他处，以防止传播和对人体的伤害。
当确定不是炭疽时，方可解剖。
剖检时，采取有病变的脏器或组织送往实验室，以便证明其病因。
2．采集病料的时间内脏病料的采取，须于患畜禽死后立即进行，最好不超过6h，夏季不超过4h，否则时间过长，由肠内侵入其它细菌，致使尸体腐败，有碍于病原菌的检验。
3．采集器械的消毒刀、剪、镊子等用具可煮沸30min，最好用酒精擦拭，并在火焰上烧一下。
器皿在高压灭菌器内或干烤箱内灭菌，或放于0.5％--1％的碳酸氢钠水中煮沸；软木塞或橡皮塞置于0.5％石炭酸溶液中煮沸10min。
载玻片应在1％—2％的碳酸氢钠溶液中煮沸10—15min，水洗后，再用清洁纱布擦干，将其保存于酒精、乙醚等分液中。
注射器和针头放于清洁水中煮沸30min即可。
4．采集病料的所有手续必须是无菌操作采取一种病料，使用一套器械。
并将取下的材料分别置于灭菌的容器中，绝不可将多种病料或多头畜禽的病料混放在一个容器内。
病变的检查应在病料采集后进行，以防所采的病料被污染，影响检查结果。
5．需要采取的病料，应按疾病的种类适当选择当难以估计是那种传染病时，应采取有病变的脏器、组织。
但心血、肺、脾、肝、肾、淋巴结等，不论有无肉眼可见病变，一般均应采取。
6．病料采集后，如不能立即进行检验，应立即保存于冰箱中。
（二）、病料的采集方法1．脓汁、渗出液用灭菌注射器无菌抽取未破溃的脓肿深部的脓汁，置于灭菌的细玻璃管中，然后将两端熔封，用棉花包好放于试管中，亦可直接用注射器采取后，放试管中，如系开放的化脓灶或鼻腔时，可用无菌的棉签浸蘸后，放在灭菌试管中。
也可直接用接种环经消毒的部位插入，提取病料直接接种在培养基上。
2．淋巴结及内脏将淋巴结、肺、肝、脾、肾等有病变的部位各采取1—2cm2的小方块，分别置于灭菌试管或平皿中。
病料的采集与运输
病料的采集与运输一、病料的采集1，新鲜，代表性，一定的数量，死尸上采集：夏天少于6h，冬天12-24h.2，减少污染，在做尸体剖检时，应将尸体浸泡在消毒剂溶液中，防止羽毛及皮屑飞扬对病料造成的污染。
3，尸体剖开腹腔时，第一时间采取病料，减少病料因暴露于空气中而造成的污染。
4，无菌操作（尽量）：病料采集时，对采集病料的器械及容器必须提前消毒，减少因器械或盛放病料的容器对病料的污染。
5，病料采集后，应先存放于冰箱中1-2小时后，再做微生物检验二、病料的采集方法1，组织和实质器官的采集病料的采集必须采用无菌操作。
剖开腹腔后，必须注意肠管的完整。
如需进行细菌的分离培养，要以烧红的手术刀片烫烙脏器表面，使用经火焰灭菌的接种针插入烫烙的部位，提取少量的组织或液体，作涂片镜检或接种于培养基上，进行培养。
2，液体病料的采集血液、胆汁、脓肿液、渗出物等液体病料，使用灭菌吸管或注射器，经烫烙部位吸取病变组织的液体，将病料注入灭菌的试管中，塞好棉塞送检。
3，全血的采集方法用灭菌注射器自鸡的心脏或翅静脉采血2-5毫升，注入灭菌试管中。
（一般在血液中加入少量的抗凝剂3.8%枸橼酸钠0.1-0.5毫升或柠檬酸钠液）红细胞保存液的配制：葡萄糖2.05g、柠檬酸钠0.8g、柠檬酸0.055g、氯化钠0.42g，加蒸馏水至100ml.高压灭菌10磅、10分钟。
4，血清的采集方法用灭菌注射器自鸡的心脏或翅静脉采血2毫升，注入灭菌试管中（青霉素瓶）摆成斜面，待血液凝固血清析出后，将血清吸出注入另一个灭菌试管中，备用。
5，肠道及肠内容的采集方法肠道：选择病变明显部位的肠道，将内容物弃掉，用灭菌生理盐水冲洗干净，然后将病料放入盛有灭菌的30%甘油盐水缓冲液中送检。
亦可将肠管切开，用灭菌生理盐水冲洗干净，然后用烧红的手术刀片烫烙粘膜表面，将接种针插入粘膜层，取少量病料接种于培养基上。
30%甘油盐水缓冲液的配制：甘油：300ml、Nacl 4.2g、Na2HPO4 3.1g、NaH2PO41.0g、0.02%酚红溶液1.5ml，加蒸馏水至1000ml.混匀。
病料的采取、保存、送检
精选.
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送检 单位 病畜 种类 死亡 时间 取材 时间 疫病流 行简况 主要临 床症状 主要剖 检变化 曾经何 种治疗
病料序 号名称
送检目 的
动物病理材料送检单
地址
发病 日期 送检 日期 取材
人
检验单 位
检验人
检验 名称
微生物 学检验
材料收 到日期 结果通 知日期
血清学 检查
病理组 织
学检查
处理 方法
精选.
9
胎儿、禽和小动物 将整个尸体包入不透水的塑料薄膜、 油布或数层油纸中，装入箱内送检。
脑、脊髓、管骨 可将脑、脊髓浸入50%甘油盐水中，或 将整个头割下，或将整个管骨包入浸过0.1%升汞溶液的纱 布或油布中，装箱送检。
供镜检的涂片 先将脓汁、血、黏液等病料置于玻片上， 再用一灭菌签均匀涂抹，或用另一玻片抹之。
精选.
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课后作业
1．写出实习报告 2．掌握常见病料的采集、包装、送检方法
精选.
20
精选.
10
（二）病料的保存
病料应保存在新鲜状态，以免病料送达实验室时 已失去原来状态，影响正确诊断。
精选.
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1. 常用的保存剂
病毒检验材料 一般用灭菌的50%甘油缓冲盐水或鸡蛋 生理盐水。
细菌检验材料 一般用灭菌的液体石蜡，或30%甘油缓 冲盐水，或饱和氯化钠溶液。
血清学检验材料 固体材料（小块肠、耳、脾、肝、 肾及皮肤等）可用硼酸或食盐处理。液体材料如血清 等可在每毫升中加入3%～5%石炭酸溶液1～2滴。
中性纯甘油
150.0ml
酸性磷酸钠
0.46g
中性蒸馏水
50.0ml
碱性磷酸钠