常用生物化学检验技术一 PPT课件
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生物化学检验常用技术(共66张PPT)
4、Lambert-Beer定律的偏离现象
单色光 均匀介质 吸收物质无相 互作用
5、空白溶液的选择
在分光光度法中，为消除显色剂及样品中各种共存有色物质产生的干扰、抵消比色皿和 试剂对入射光的影响而用来调节仪器百分透光率为100%的溶液。
不
蒸 馏 水
试
样
含 待
剂
品
测
元
不
显 色
素
1、溶剂空白：不加样品和任何试剂，用纯溶剂（如蒸馏水或其他有机溶剂）作参比溶液。 选择原则：当显色剂及其它试剂均无色，被测试样中又无其他有色离子时，选用溶剂参比。
常用的固定化技术有：吸附、试剂交联、共价键合、
包埋法(酶与载体聚丙酰胺混合后直接包在电极 敏感部分形成酶凝胶层)。
几种酶电极的品种与性能
测定物质
酶
检测物 测定范围(mol/L)
葡萄糖 葡萄糖氧化酶
尿素(脲)
脲酶
胆固醇 胆固醇氧化酶
L－谷氨酸 谷氨酸脱氢酶 L－赖氨酸 赖氨酸脱羧酶
O2 NH3 H2O2 NH4+ CO2
单色器
滤光片
棱镜
光栅
吸收池
检测器
玻璃比色皿
石英比色皿
显示器
4
(一)、分光光度技术的基本原理
1、吸光度与透光度
当光线通过均匀、透明的溶液时可出现三种情况：一部分光被散射，一部分光 被吸收，另有一部分光透过溶液。设入射光强度为I0，透射光强度为I，I和I0之比称为透 光度，即：
入射光 I0
透射光 I
T = I/I0
10-4～2*10-2 10-5～10-2 10-5～10-2 10-4～10-1 10-4～10-1
离子选择性电极的分析方法
单色光 均匀介质 吸收物质无相 互作用
5、空白溶液的选择
在分光光度法中，为消除显色剂及样品中各种共存有色物质产生的干扰、抵消比色皿和 试剂对入射光的影响而用来调节仪器百分透光率为100%的溶液。
不
蒸 馏 水
试
样
含 待
剂
品
测
元
不
显 色
素
1、溶剂空白：不加样品和任何试剂，用纯溶剂（如蒸馏水或其他有机溶剂）作参比溶液。 选择原则：当显色剂及其它试剂均无色，被测试样中又无其他有色离子时，选用溶剂参比。
常用的固定化技术有：吸附、试剂交联、共价键合、
包埋法(酶与载体聚丙酰胺混合后直接包在电极 敏感部分形成酶凝胶层)。
几种酶电极的品种与性能
测定物质
酶
检测物 测定范围(mol/L)
葡萄糖 葡萄糖氧化酶
尿素(脲)
脲酶
胆固醇 胆固醇氧化酶
L－谷氨酸 谷氨酸脱氢酶 L－赖氨酸 赖氨酸脱羧酶
O2 NH3 H2O2 NH4+ CO2
单色器
滤光片
棱镜
光栅
吸收池
检测器
玻璃比色皿
石英比色皿
显示器
4
(一)、分光光度技术的基本原理
1、吸光度与透光度
当光线通过均匀、透明的溶液时可出现三种情况：一部分光被散射，一部分光 被吸收，另有一部分光透过溶液。设入射光强度为I0，透射光强度为I，I和I0之比称为透 光度，即：
入射光 I0
透射光 I
T = I/I0
10-4～2*10-2 10-5～10-2 10-5～10-2 10-4～10-1 10-4～10-1
离子选择性电极的分析方法
生物化学检验ppt课件
酶类CK-MB,α-AMY等。
底物/代谢产物类：包括TG，TC，HDL-C，LDL-C，UA， UREA，Cr，Glu，TP，Alb，T-Bil，D-Bil，NH4+,CO2 等。
无机离子类：包括Ca，P，Mg，Cl 等。
认识到了贫困户贫困的根本原因，才 能开始 对症下 药，然 后药到 病除。 近年来 国家对 扶贫工 作高度 重视， 已经展 开了“ 精准扶 贫”项 目
吸收曲线
波长从200nm-400nm 的电磁波，称为紫外光，波长从400nm-760nm 的电磁波，称为可见光。以波长(λ)为横坐标，以吸光度为纵坐标而绘 制出的一条曲线称为吸收曲线，在一段波长范围内，有最大吸收波长 λmax 和最小吸收波长λmin，在最大吸收波长处测定可获得最大的测 定灵敏度。
认识到了贫困户贫困的根本原因，才 能开始 对症下 药，然 后药到 病除。 近年来 国家对 扶贫工 作高度 重视， 已经展 开了“ 精准扶 贫”项 目
二、连续监测法
连续监测法属于动态法检测的一种，适用于酶活性测 定和代谢物检测，多有酶的参与。该法是通过适当的 仪器，连续测定酶促反应过程中某一反应产物或底物 的浓度随时间变化的情况。原理是：在酶反应的最适 条件下，用物理、化学或酶促反应的分析方法，在反 应速度恒定期（零级反应期）来连续观察和记录一定 时间内底物或产物量的变化，以单位时间酶反应初速 度计算出酶活力大小代谢物的浓度。计算方法有：1） 绝对法：酶活力（U/L）=△A×（反应液体积/样品体 积）×（1000/消光系数）；2）相对法：酶活力 （U/L）=〔 △A （测定）/ △A （标准） 〕标准物的 活力或浓度。
两点终点法
两点终点法也称因定时间法，它可以用一种试剂或两 种试剂。这种方法是近年来，可加双试剂的生化分析 仪问世后，才被广泛应用。优点是可以消除样品、试 剂的颜色、浊度，以及一些干扰物对测定的干扰。原 理是：加入样品→试剂1 →读取A1 →试剂2 →读取 A2，其中要读取两次吸光度值，第一次相当于读出样 品空白的值，加入试剂2至第二次读数才是实际呈色 反应，因此A=A1-A2。比浊法也是一种终点法，不过 是一种浊度测定，而不是比色测定。比浊法可分为化 学比浊法与免疫比浊法，免疫比浊法又分为透射比浊 法和散射比浊法。免疫比浊法目前主要用于血清特种 蛋白的测定，如载脂蛋白(apoAI,apoB 等)、补体类(C3、
底物/代谢产物类：包括TG，TC，HDL-C，LDL-C，UA， UREA，Cr，Glu，TP，Alb，T-Bil，D-Bil，NH4+,CO2 等。
无机离子类：包括Ca，P，Mg，Cl 等。
认识到了贫困户贫困的根本原因，才 能开始 对症下 药，然 后药到 病除。 近年来 国家对 扶贫工 作高度 重视， 已经展 开了“ 精准扶 贫”项 目
吸收曲线
波长从200nm-400nm 的电磁波，称为紫外光，波长从400nm-760nm 的电磁波，称为可见光。以波长(λ)为横坐标，以吸光度为纵坐标而绘 制出的一条曲线称为吸收曲线，在一段波长范围内，有最大吸收波长 λmax 和最小吸收波长λmin，在最大吸收波长处测定可获得最大的测 定灵敏度。
认识到了贫困户贫困的根本原因，才 能开始 对症下 药，然 后药到 病除。 近年来 国家对 扶贫工 作高度 重视， 已经展 开了“ 精准扶 贫”项 目
二、连续监测法
连续监测法属于动态法检测的一种，适用于酶活性测 定和代谢物检测，多有酶的参与。该法是通过适当的 仪器，连续测定酶促反应过程中某一反应产物或底物 的浓度随时间变化的情况。原理是：在酶反应的最适 条件下，用物理、化学或酶促反应的分析方法，在反 应速度恒定期（零级反应期）来连续观察和记录一定 时间内底物或产物量的变化，以单位时间酶反应初速 度计算出酶活力大小代谢物的浓度。计算方法有：1） 绝对法：酶活力（U/L）=△A×（反应液体积/样品体 积）×（1000/消光系数）；2）相对法：酶活力 （U/L）=〔 △A （测定）/ △A （标准） 〕标准物的 活力或浓度。
两点终点法
两点终点法也称因定时间法，它可以用一种试剂或两 种试剂。这种方法是近年来，可加双试剂的生化分析 仪问世后，才被广泛应用。优点是可以消除样品、试 剂的颜色、浊度，以及一些干扰物对测定的干扰。原 理是：加入样品→试剂1 →读取A1 →试剂2 →读取 A2，其中要读取两次吸光度值，第一次相当于读出样 品空白的值，加入试剂2至第二次读数才是实际呈色 反应，因此A=A1-A2。比浊法也是一种终点法，不过 是一种浊度测定，而不是比色测定。比浊法可分为化 学比浊法与免疫比浊法，免疫比浊法又分为透射比浊 法和散射比浊法。免疫比浊法目前主要用于血清特种 蛋白的测定，如载脂蛋白(apoAI,apoB 等)、补体类(C3、
临床常用生物化学容检测课件
22
糖尿病病人HbA1c检测时间频度
糖尿病类型/治疗
推荐频度
1型糖尿病、最小量或常规治疗
每年3~4次
1型糖尿病
每月1~2次
加强治疗2型糖尿病
稳定的代谢条件下每年2次
糖尿病孕妇
每1~2个月1次
妊娠期糖尿病
每1~2个月1次
23
【临床意义】 1、比血糖检测稳定性好，精确度高，可反映过去 6~8周的平均
4
实验室检查
随机血糖:23.6mmol/L； 肾功能:BUN：13mmol/L; Cr：158µmol/L 尿常规：尿酮体(+++) 血常规:WBC 11.0*109/L，N 75%，RBC 4.0*1012/L 1、根据检查结果，初步诊断是什么？ 2、还应该做哪些实验室检查？ 3、分析其病因可能是什么？ 4、应该与哪些疾病进行鉴别诊断？
【参考值】 ■ FPG<6.1mmol/L，２hPG≤7.8mmol/L
15
【临床意义】
1.诊断糖尿病:临床上有以下条件者， 即可诊断糖尿病
①具有糖尿病症状，FPG＞7.0mmol/L ②OGTT血糖峰值＞11.1mmol/L，
OGTT 2hPG＞11.1mmol/L ③具有临床症状，随机血糖＞11.1mmol/L，且伴
21
【样本采集】静脉抗凝血（EDTA、草酸盐、氟化钠）, 4-8℃稳定5天
影响因素 1、血红蛋白分子病、地中海贫血、溶血性贫血、怀孕等红细胞寿命
缩短，从而糖化血红蛋白的量降低； 2、肾功能不全、慢性酒精中毒等减慢HB的代谢，使其寿命延长，
从而使糖化血红蛋白的量增加。 方法学：HPLC（4.2%-6.2 %）-金标准； 电泳法（5%-9%）；亲和层析法：（5.0%-8.0%）
糖尿病病人HbA1c检测时间频度
糖尿病类型/治疗
推荐频度
1型糖尿病、最小量或常规治疗
每年3~4次
1型糖尿病
每月1~2次
加强治疗2型糖尿病
稳定的代谢条件下每年2次
糖尿病孕妇
每1~2个月1次
妊娠期糖尿病
每1~2个月1次
23
【临床意义】 1、比血糖检测稳定性好，精确度高，可反映过去 6~8周的平均
4
实验室检查
随机血糖:23.6mmol/L； 肾功能:BUN：13mmol/L; Cr：158µmol/L 尿常规：尿酮体(+++) 血常规:WBC 11.0*109/L，N 75%，RBC 4.0*1012/L 1、根据检查结果，初步诊断是什么？ 2、还应该做哪些实验室检查？ 3、分析其病因可能是什么？ 4、应该与哪些疾病进行鉴别诊断？
【参考值】 ■ FPG<6.1mmol/L，２hPG≤7.8mmol/L
15
【临床意义】
1.诊断糖尿病:临床上有以下条件者， 即可诊断糖尿病
①具有糖尿病症状，FPG＞7.0mmol/L ②OGTT血糖峰值＞11.1mmol/L，
OGTT 2hPG＞11.1mmol/L ③具有临床症状，随机血糖＞11.1mmol/L，且伴
21
【样本采集】静脉抗凝血（EDTA、草酸盐、氟化钠）, 4-8℃稳定5天
影响因素 1、血红蛋白分子病、地中海贫血、溶血性贫血、怀孕等红细胞寿命
缩短，从而糖化血红蛋白的量降低； 2、肾功能不全、慢性酒精中毒等减慢HB的代谢，使其寿命延长，
从而使糖化血红蛋白的量增加。 方法学：HPLC（4.2%-6.2 %）-金标准； 电泳法（5%-9%）；亲和层析法：（5.0%-8.0%）
常用实验室检查生化ppt课件
2. 临床意义 （1）急性心肌梗死：主要 用于急性心肌梗死的早期诊断，发病后2小 时内Mb开始升高，3～ 15小时达峰值， 18 ～ 30小时恢复到正常水平，但特异性 较差。（2）其他疾病：挤压综合征、肾衰 竭、心力衰竭和某些肌病。
四、血清脂类测定（一Fra bibliotek血清总胆固醇测定
总胆固醇( TC )包括其中30%的游离胆 固醇( FC )和70%的胆固醇酯( CE )，主要 结合场所是肝脏。胆固醇是合成胆汁酸、 肾上腺皮质激素、性激素及维生素等生理 活性物质的重要原料，也是构成细胞膜的 主要成分。
3. 参考值 血糖浓度：空腹<6.1 mmol/L；服糖后：0.5 ～ 1小时为7.8 ～ 9.0 mmol/L(应<11.1 mmol/L)，2小时为 ≤7.8 mmol/L，3小时时应恢复至空腹血糖 水平。各时间尿糖测定结果均为阴性。
4. 临床意义
（1）诊断糖尿病 服糖后2小时血糖值 ≥11.1 mmol/L。
2. 参考值 ELISA法：cTnT为0.02 ～ 0.13μg/L，诊断临界值为﹥0.2μg/L；cTnI 为﹤0.02μg/L，诊断临界值为﹥1.5μg/L。
3. 临床意义 cTnT、cTnI增高和变化，对 急性心肌梗死、不稳定型心绞痛、围手术期 心肌损伤等疾病的诊断、病情监测、疗效观 察及预后判断，具有较高的临床价值。用于 急性心肌梗死的诊断，其灵敏度、特异度均 高。见表6-3-1。
参考值 3.5 ～ 5.5 mmol/L
3. 临床意义
（1）低血钾见于 ①摄入不足：营养不 良、胃肠功能紊乱、长期无钾饮食；②丢 失过多：频繁呕吐、长期腹泻、瘘管引流， 肾小管功能障碍导致大量钾随尿丢失，长 期使用强利尿剂使钾大量排出，肾上腺皮 质功能亢进促进钾的排泄；③葡萄糖与胰 岛素同时使用、碱中毒等，使钾过多转入 细胞内。
常用生物化学检验技术
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常用生物化学检验技术
目 录
• 生物化学检验技术概述 • 常用生物化学检验技术 • 生物化学检验技术的应用领域 • 生物化学检验技术的挑战与解决方案 • 生物化学检验技术的前景展望
01 生物化学检验技术概述
定义与特点
定义
生物化学检验技术是通过生物学 、化学等手段，对生物体或生物 样品进行检测和分析的技术。
详细描述
为了确保检测结果的准确性和可靠性，必须建立完善的标准化体系和质量控制体系。这包括制定统一 的检测标准和方法、建立完善的质控流程和质控标准、加强实验室管理等措施。同时，还需要加强国 际合作和交流，推动生物化学检验技术的标准化和质量控制。
05 生物化学检验技术的前景 展望
高通量自动化检测技术
签提供数据支持。
食品添加剂检测
02
通过检测食品中的添加剂种类和浓度，确保食品添加剂使用符
合国家规定。
食品中有害物质检测
03
利用生物化学检验技术检测食品中的有害物质，如农药残留、
重金属等，保障食品安全。
环境监测
水质检测
利用生物化学检验技术检 测水体中的有害物质，如 重金属、有机污染物等， 评估水质状况。
利用物质在紫外可见光激发下产生的 荧光特性，通过测量荧光信号，用于 检测物质的存在和含量。
气相色谱法
利用不同物质在色谱柱上的吸附或溶 解性能不同，通过测量各组分的保留 时间和峰高或峰面积，用于检测混合 物中各组分的存在和含量。
微生物学检验技术
01
02
03
细菌培养与鉴定
通过培养、分离、鉴定微 生物，用于检测感染性疾 病的病原体。
大气污染监测
通过检测大气中的有害气 体和颗粒物，了解大气污 染状况，为环境治理提供 依据。
常用生物化学检验技术
目 录
• 生物化学检验技术概述 • 常用生物化学检验技术 • 生物化学检验技术的应用领域 • 生物化学检验技术的挑战与解决方案 • 生物化学检验技术的前景展望
01 生物化学检验技术概述
定义与特点
定义
生物化学检验技术是通过生物学 、化学等手段，对生物体或生物 样品进行检测和分析的技术。
详细描述
为了确保检测结果的准确性和可靠性，必须建立完善的标准化体系和质量控制体系。这包括制定统一 的检测标准和方法、建立完善的质控流程和质控标准、加强实验室管理等措施。同时，还需要加强国 际合作和交流，推动生物化学检验技术的标准化和质量控制。
05 生物化学检验技术的前景 展望
高通量自动化检测技术
签提供数据支持。
食品添加剂检测
02
通过检测食品中的添加剂种类和浓度，确保食品添加剂使用符
合国家规定。
食品中有害物质检测
03
利用生物化学检验技术检测食品中的有害物质，如农药残留、
重金属等，保障食品安全。
环境监测
水质检测
利用生物化学检验技术检 测水体中的有害物质，如 重金属、有机污染物等， 评估水质状况。
利用物质在紫外可见光激发下产生的 荧光特性，通过测量荧光信号，用于 检测物质的存在和含量。
气相色谱法
利用不同物质在色谱柱上的吸附或溶 解性能不同，通过测量各组分的保留 时间和峰高或峰面积，用于检测混合 物中各组分的存在和含量。
微生物学检验技术
01
02
03
细菌培养与鉴定
通过培养、分离、鉴定微 生物，用于检测感染性疾 病的病原体。
大气污染监测
通过检测大气中的有害气 体和颗粒物，了解大气污 染状况，为环境治理提供 依据。
生化检验课件.ppt
敏感的指标，其血清水平与冠心病发病率呈负相 关。急性心肌梗塞时，Apo-A 1 水平降低。Ⅱ 型糖尿病Apo-A 1 值常偏低，其心血管并发症 的发生率增高。脑血管病变，肾病综合征、肝衰 竭以及Apo-A 1 缺乏症时Apo-A 1 水平也降低。
二）载脂蛋白 B测定
[参考值] ELISA法：男为1.01±0.21g/L；女 为1.07±0.23g/L
血钾症，高于5.5mmol/L为高血钾症。
2、低血钾症见于： (1)摄取不足： (2)丢失过多： (3)葡萄糖与胰岛素同时使用，周期性麻痹
和碱中毒等，钾过多转入细胞内。
3、高血钾症见于： (1)摄入过多； (2)排泄困难； (3)细胞内钾大量释出； (4)细胞外液因失水或休克而浓缩，使血钾
[临床意义] 血清Apo-B水平升高与动脉粥样硬化、 冠心病发病呈正相关，Apo-B的上升较LDL-C和 CHO的上升对冠心病风险度的预测更有意义，此 外，家族性高胆固醇血症、对胰岛素有抵抗的Ⅱ 型糖尿病、胆汁淤积、肾病综合征和妊娠时， Apo-B也升高，Apo-B降低见于低β-脂蛋白血症、 Apo-B缺乏症、肝硬化。
[临床表现]
1、增高 见于动脉粥样硬化性心脏病、原发性高脂血症、 肥胖症、阻塞性黄疸、糖尿病、肾病综合征等。
2、降低 见于甲状腺功能减退、肾上腺功能减退及严重 肝衰竭。
二、血清脂蛋白检测
一 ) 脂蛋白电泳测定
[参考值]
电泳法：乳糜微粒（ CM）为阴性，HDL为30%～40%， LDL为50%～60%，VLDL为13%～25%。
旁腺功能亢进症
(3)服用VitD过多 (4)骨病 (5)某些肿瘤：肾癌，肺癌，急性白血病等 (6)长期制动引起骨脱钙
二）载脂蛋白 B测定
[参考值] ELISA法：男为1.01±0.21g/L；女 为1.07±0.23g/L
血钾症，高于5.5mmol/L为高血钾症。
2、低血钾症见于： (1)摄取不足： (2)丢失过多： (3)葡萄糖与胰岛素同时使用，周期性麻痹
和碱中毒等，钾过多转入细胞内。
3、高血钾症见于： (1)摄入过多； (2)排泄困难； (3)细胞内钾大量释出； (4)细胞外液因失水或休克而浓缩，使血钾
[临床意义] 血清Apo-B水平升高与动脉粥样硬化、 冠心病发病呈正相关，Apo-B的上升较LDL-C和 CHO的上升对冠心病风险度的预测更有意义，此 外，家族性高胆固醇血症、对胰岛素有抵抗的Ⅱ 型糖尿病、胆汁淤积、肾病综合征和妊娠时， Apo-B也升高，Apo-B降低见于低β-脂蛋白血症、 Apo-B缺乏症、肝硬化。
[临床表现]
1、增高 见于动脉粥样硬化性心脏病、原发性高脂血症、 肥胖症、阻塞性黄疸、糖尿病、肾病综合征等。
2、降低 见于甲状腺功能减退、肾上腺功能减退及严重 肝衰竭。
二、血清脂蛋白检测
一 ) 脂蛋白电泳测定
[参考值]
电泳法：乳糜微粒（ CM）为阴性，HDL为30%～40%， LDL为50%～60%，VLDL为13%～25%。
旁腺功能亢进症
(3)服用VitD过多 (4)骨病 (5)某些肿瘤：肾癌，肺癌，急性白血病等 (6)长期制动引起骨脱钙