试剂的配制
化学试剂配制

试剂配制1.乙醇制氢氧化钾试液可取用乙醇制氢氧化钾液(0.5mol/L)。
2.乙醇制氨试液取无水乙醇,加浓氨试液使100ml中含NH3 9~11g,即得。
本液应置橡皮塞瓶中保存。
3.乙醇制溴化汞试液取溴化汞2.5g,加乙醇50ml,微热使溶解,即得。
本液应置玻璃塞瓶内,在暗处保存。
4.二乙基二硫代氨基甲酸银试液取二乙基二硫代氨基甲酸银0.25g,加氯仿适量与三乙胺1.8ml,加氯仿至100ml,搅拌使溶解,放置过夜,用脱脂棉滤过,即得。
本液应置棕色玻璃瓶内,密塞,置阴凉处保存。
5.二硝基苯试液取间二硝基苯2g,加乙醇使溶解成100ml,即得。
6.二硝基苯甲酸试液取3,5-二硝基苯甲酸1g,加乙醇使溶解成100ml,即得。
二硝基苯肼乙醇试液取2,4-二硝基苯肼1g,加乙醇1000ml使溶解,再缓缓加入盐酸10ml,摇匀,即得。
7.二硝基苯肼试液取2,4-二硝基苯肼1.5g,加硫酸溶液(1→2)20ml,溶解后,加水使成100ml,滤过,即得。
8.三硝基苯酚试液(苦味酸?)本液为三硝基苯酚的饱和水溶液。
9.三氯化铁试液取三氯化铁9g,加水使溶解成100ml,即得。
10.三氯化铝试液取三氯化铝1g,加乙醇使溶解成100ml,即得。
11.三氯化锑试液本液为三氯化锑饱和的氯仿溶液。
12.水合氯醛试液取水合氯醛50g,加水15ml与甘油10ml使溶解,即得。
13.甘油醋酸试液取甘油、50%醋酸与水各等份,混合,即得。
14.甲醛试液可取用“甲醛溶液”。
15.四苯硼钠试液取四苯硼钠0.1g,加水使溶解成100ml,即得。
16.对二甲氨基苯甲醛试液取对二甲氨基苯甲醛0.125g,加无氮硫酸65ml与水35ml的冷混合液溶解后,加三氯化铁试液0.05ml,摇匀,即得。
本液配制后7日即不适用。
17.亚铁氰化钾试液取亚铁氰化钾1g,加水10ml使溶解,即得。
本液应临用新制。
18.亚硝基铁氰化钠试液取亚硝基铁氰化钠1g,加水使溶解成20ml,即得。
生化常用试剂配制

生物化学实验常用试剂的配制方法使用Ctrl+F 组合键可以快速的查找所需的配方。
1.0.5mol/L氢氧化钠溶液组份浓度0.5mol/L ;配制量2L配置方法1.准确称取氢氧化钠40g。
2.用去离子水溶解并稀释至2L。
2.0.5mol/L盐酸溶液组份浓度0.5mol/L ;配制量2L配置方法1.准确量取盐酸83.4mL。
2.用去离子水稀释至2L。
3.含0.5mol/L氯化钠的0.5mol/L氢氧化钠溶液组份浓度0.5mol/L氯化钠、0.5mol/L氢氧化钠;配制量1L配置方法1.准确量取氯化钠29.3g。
2.准确量取氢氧化钠20g。
3.用去离子水稀释至1L。
注意: 此溶液供回收纤维素时使用。
4、0.2%葡萄糖标准溶液组份浓度0.2%;配制量1L配置方法1.称取葡萄糖2.5g置于称量瓶中, 在70℃干燥2小时。
2.干燥器中冷却至室温, 重复干燥, 冷却至恒重。
3.准确称取葡萄糖2.000g。
4.用去离子水溶解并定容至1L 5.于4℃保存。
5.250μg/mL牛血清白蛋白标准液组份浓度250μg/mL ;配制量2L配置方法1.准确称取250mg标准牛血清白蛋白。
2.用0.03mol/LpH7.8的磷酸缓冲液溶解并定容至1L。
3.4℃保存。
6、Folin试剂.配置方.1.称取10g氢氧化钠溶于400mL去离子水中,加入50g无水碳酸钠,溶解,待用。
2.称取0.5g酒石酸钾钠,溶于80mL去离子水中,加入0.25g硫酸铜?5水,溶解。
3.将1:2:去离子水按20:4:1的比例混合即可.4.4℃保存,可用一周.7、Folin试剂乙配置方法:1.在500mL的磨口回流装置内加入钨酸钠?2水25.0359g, 钼酸钠?2水6.2526g, 去离子水175mL, 85%磷酸12.5mL, 浓盐酸25mL, 充分混合。
2.回流10小时, 再加硫酸锂37.5g, 去离子水12.5mL及数滴溴。
3.然后开口沸腾15min, 以驱除过量的溴, 冷却后定容到250mL。
试剂配制方法

试剂的配制1、酚酞指示剂:酚酞1g+无水乙醇100ml混合液0.5+50mL2、淀粉指示剂:淀粉0.5g + 100ml水(加热100℃保持2-3分钟),冷却至室温备用。
随配随用,6天失效。
3、冰乙酸氯仿(三氯甲烷)混合液:冰乙酸60ml + 三氯甲烷40ml4、树脂粉二硫化碳饱和溶液:纯净的树脂粉2-3g + 二硫化碳100ml,摇晃几分钟使其成为饱和溶液,再用滤纸过滤后即可。
5、碘化钾KI饱和溶液:碘化钾10g + 蒸馏水5ml6、乙醇乙醚混合液:无水乙醇100ml + 无水乙醚100ml + 5滴1%的酚酞指示剂7、KOH-甲醇溶液配制:K(OH)11.2 g + 甲醇100ml8、KOH配制:KOH称取14g + 2000ml蒸馏水,放置一个月标定KOH标准溶液的标定及浓度:清洗2个瓶子→称重(取平均值误差小于0.00005g)→邻苯二甲酸氢钾0.6g(烘105℃90分钟)→加蒸馏水80ml完全溶解→加2-3滴1%酚酞指示剂.用上面配制好的邻苯二甲酸氢钾溶液来滴定待标定的KOH标准溶液,滴加到变为微红色(30秒不变色)即可。
记下滴定体积V。
邻苯二甲酸氢钾重量MKOH标准溶液的浓度= 滴定体积V ×邻苯二甲酸氢钾分子量(0.2042)9、硫代硫酸钠溶液:硫代硫酸钠26g + 碳酸钠0.2g(或硼砂3.8g)+ 蒸馏水至1000ml ,放置一周标定。
标定:称取0.15g在120℃干燥的重铬酸钾,置于500ml碘量的瓶中,加入50ml蒸馏水使之溶解,加入2g碘化钾使之溶解,再加入(1+8)比例的硫酸溶液20ml(10ml的浓硫酸+80ml 蒸馏水),密塞摇匀。
放置阴暗处10分钟后加250ml蒸馏水。
用硫代硫酸钠的溶液滴至浅黄色,再加入0.5%的淀粉指示剂3ml,继续滴定滴至蓝色消失而显亮绿色。
重铬酸钾M硫代硫酸钠溶液的浓度= 滴定体积V ×重铬酸钾分子量(0.04903)4. 硫代硫酸钠滴定液(0.1mol/L)配制:取硫代硫酸钠26g与无水碳酸钠0.20g,加新沸过的冷水适量使溶解成1000mL,摇匀,放置1个月后滤过。
化学试剂配制方法

电厂化学试剂配制1、硬度:一种测定硬度大于0.5me/L的水样;二种测定硬度在1-0.5ue/L的水样。
⑴、氨-氯化铵缓冲溶液:称取20g氯化铵溶于500高纯水中,加150ml浓氨水,用高纯水稀释至1000ml混匀;取50ml按第二方法测定其硬度,根据测定结果往其余950ml缓冲溶液加所需EDTA溶液抵消其硬度。
⑵、(高硬度)氨-氯化铵缓冲溶液:称取67.5克氯化铵,加570ml浓氨水,加1gEDTA用高纯水稀释至1000ml混匀;⑶、硼砂缓冲溶液:称取40g硼砂溶于80ml高纯水中,加入10g氢氧化钠,溶解后用高纯水稀释至1000ml,按上述方法抵消硬度。
⑷、0.5﹪铬黑T指示剂(乙醇溶液):称取0.5g铬黑T 与4.5g盐酸羟胺在研钵中磨匀,混合后溶于100ml95﹪乙醇中,转入棕色瓶中。
使用期限不超过1个月。
⑸、酸性铬蓝K指示剂(乙醇溶液):称取0.5g酸性铬蓝K与4.5盐酸羟胺混合,加10ml氨-氯化铵缓冲溶液(硼砂也可)和40ml高纯水,溶解后用95﹪乙醇稀释至100ml. 使用期限不超过1个月。
2、磷酸盐:⑴、磷酸盐储备液(1ml=1mgPO4),称取在105℃干燥过的优级纯磷酸二氢钾1.433g溶于少量除盐水中,并稀释至1000ml。
⑵、磷酸工作溶液:(1ml=0.1mgPO4),取上述储备液10ml稀释至100ml⑶、钼酸铵-偏钒酸铵-硫酸显色液(酸性钼酸铵):(A)称取50g钼酸铵和2.5g偏钒酸铵,溶于400ml除盐水中;(B)取195ml浓硫酸,在不断搅拌下徐徐加入到250ml除盐水中,并冷却至室温。
将(B)配置的溶液倒入(A)配置的溶液中,用除盐水稀释至1000ml。
3、二氧化硅:⑴、酸性钼酸铵溶液:A.称取50g钼酸铵溶于500ml高纯水中;B.取42ml浓硫酸,在不断搅拌下加入到300ml高纯水中,并冷却至室温。
C.将A加入到B中,然后用高纯水稀释至1000ml。
⑵、10﹪酒石酸溶液(质量/体积)⑶、1、2、4酸还原剂:A.称取1.5g1、2、4酸和无水亚硫酸钠溶于200ml高纯水中B. 称取90g 亚硫酸氢钠,溶于600ml高纯水中。
常用试剂配制方法

1、裴林甲液:配制:称取五水合硫酸铜69.278g 加蒸馏水稀释到1000ml ,摇匀,即得。
标定:吸取甲液5.0ml 于250ml 碘量瓶中,加30%醋酸溶液2ml 和1.5g 碘化钾固体,充分混匀并溶解后,加盖避光放置5分钟,用装有蒸馏水的洗瓶将塞子和瓶内壁冲洗干净,之后,先用0.1mol/L 硫代硫酸钠标准溶液滴定至溶液呈淡黄色,加2ml0.5%淀粉指示剂,继续滴定至兰色消失出现乳白色沉淀即为终点,同时用5ml 蒸馏水做空白,裴林甲液的比值F 按下式计算:01748.05006357.0V ⨯⨯-=)(空白样品V F 0.5%淀粉指示剂配制:称取0.5000g 淀粉,放入烧杯中,先调成糊状,加入到热的沸水中,并沸腾几分钟,至溶液呈现透明,冷却至室温。
30%醋酸溶液:30ml 冰乙酸用蒸馏水稀释并定容至100ml 。
2、水中总磷的测定:钼酸铵溶液:称量6.0g 分析纯钼酸铵溶于500ml 水中,加入0.2g 酒石酸锑钾和83ml 分析纯浓硫酸,冷却后,稀释至1L 。
充分混匀后,存于棕色试剂瓶中,贮存期6个月。
硫酸溶液(C=0.5mol/L ):取30ml 分析纯浓硫酸缓缓加入适量蒸馏水中,冷却至室温,加蒸馏水稀释至1000ml ,摇匀。
24g/L 过硫酸铵溶液:称取24.0g 过硫酸铵固体,用蒸馏水溶解并稀释定容至1000ml ,充分混匀即可。
17.6g/L 抗坏血酸溶液:称取17.6g 抗坏血酸溶于适量蒸馏水中,加0.2g 乙二胺四乙酸二钠和8ml 甲酸,充分溶解和混匀后,用蒸馏水稀释并定容至1L ,混匀。
贮存于棕色瓶中,有效期为15天。
3、NaOH 标液(0.5mol/L ,0.1mol/L )配制:称取20.00g(4.00g)分析纯氢氧化钠固体,用蒸馏水溶解,并稀释定容至1000ml,混匀放置。
标定:取在105℃下烘干至恒重的邻苯二甲酸氢钾2g(0.4g),精密称定,加新沸过的冷水50ml,完全溶解,加2滴酚酞指示剂,用配好的该0.5mol/L(或0.1mol/L)NaOH标准溶液滴定至溶液显粉红色,其中每1ml的NaOH标液相当于102.1mg(或20.42mg)的邻苯二甲酸氢钾。
常用试剂配方

常用试剂配方常用试剂储存注意事项:储存于阴凉、通风的地方;远离火种、热源。
避免光照。
室温不超过30℃,相对湿度不超过80%。
包装必须密封,切勿受潮。
应与易(可)燃物、还原剂、碱类、醇类、食用化学品分开存放,切忌混储,储区应备有合适的材料收容泄漏物。
操作注意事项:尽量在通风橱操作,加强通风,避免粉尘扩散。
远离易燃、可燃物,避免与还原剂、碱类、醇类接触,防止包装及容器损坏。
使用后应留意剩余量,注意及时订购。
8M Urea(尿素)组份浓度:8mol/L Urea(MW:60.07)配制量: 1L配制方法: 1.称取尿素480g,置于1L的蓝盖瓶中。
2. 加水至1L,置于磁力搅拌器上充分搅拌。
3. 于棕色瓶中,4℃保存。
4.使用前,先在常温放置,使析出的尿素溶解。
0.25%AgNO(硝酸银)3(MW:169.87)组份浓度:0.25%(W/V)AgNO3配制量: 500ml配制方法: 1.准确称取硝酸银1.25g。
2.加入500ml的去离子水,充分溶解。
3.于棕色瓶中,常温保存。
0.5M EDTA(PH 8.0)组分浓度: 0.5 mol/L EDTA(MW:372.24)配制量: 500mlEDTA·2H2O置于500ml蓝盖瓶中。
配制方法: 1.称取93g Na22.加入400ml的去离子水,置于磁力搅拌器上充分搅拌。
3.用NaOH调节调节pH值至8.0(约需加入20g固体NaOH),当pH 接近8.0时, EDTA方可完全溶解,加入去离子水定容至1L。
4.高温高压灭菌后,室温保存半年。
5M NaCl组份浓度: 5mol/L NaCl (MW:58.5)配制量: 1L配制方法: 1.准确称取氯化钠292.5g,置于1L的蓝盖瓶中。
2.用去离子水溶解并稀释至1L。
3.高温高压灭菌后,常温保存。
50% 甘油组分浓度: 50%(V/V) glycerol配制量: 100ml配制方法: 1. 量取下列试剂,置于250ml蓝盖瓶中:100% glycerol 50ml2.加入50ml去离子水,充分搅拌溶解。
20几种常用试剂配置方法

20几种常用试剂配置方法一、常用试剂配置方法的介绍试剂配置是实验室中常见的一项工作,准确的试剂配置可以保证实验的准确性和可重复性。
本文将介绍20几种常用的试剂配置方法,帮助实验人员更好地进行实验。
二、体积分配法体积分配法是常见的试剂配置方法之一,通常使用量较小、浓度较高的试剂进行配置。
该方法可通过使用体积移液器、移液枪等实验设备,根据需要配置所需体积的试剂溶液。
三、质量分配法质量分配法适用于需要配置具有特定质量浓度的试剂溶液。
该方法通过称量固体试剂,并按照比例配制溶液浓度。
四、摩尔浓度计算法摩尔浓度计算法是根据化学反应的摩尔比例来计算试剂的浓度。
通过计算反应物的摩尔量和体积,然后以摩尔量除以体积得到摩尔浓度。
五、比例混合法比例混合法适用于需要按照特定比例混合两种试剂的情况。
通常将两种试剂按照比例称量,然后进行混合。
六、稀释法稀释法是指将浓度较高的试剂与溶剂按照一定比例混合来降低试剂的浓度。
通过稀释法可以得到不同浓度的试剂溶液。
七、溶液配制法溶液配制法是根据溶液的浓度公式,按照一定的配比计算所需试剂的质量、体积等,并通过称量和混合来配制出所需的试剂溶液。
八、体积比配制法体积比配制法是指按照特定的体积比例计算所需的试剂体积,并进行混合配制。
该方法常用于需要配制特定体积比例的溶液。
九、对数浓度计算法对数浓度计算法是一种根据试剂的对数浓度来计算所需试剂量的方法。
通过计算对数浓度和体积,然后反推得到所需试剂量。
十、酸碱溶液的配制方法酸碱溶液的配制方法通常是指根据酸碱中和反应的化学方程式,计算所需溶液的质量、体积,并进行配制。
十一、标准溶液配制方法标准溶液配制方法是指通过称量准确的标准溶液,并按照一定比例配制出所需的标准溶液。
十二、离子稀释法离子稀释法是通过稀释一定体积的离子试剂溶液来得到特定浓度的离子溶液。
十三、等效物浓度计算法等效物浓度计算法是根据试剂反应的化学方程和摩尔比例,计算所需试剂的质量或体积,并进行配制。
常用试剂配制方法

常用试剂配制方法氨试液取浓氨水200ml,置1000ml量杯中,加水稀释至500ml。
碱性酒石酸铜试液:配600ml。
(1)取硫酸铜结晶20.8g,置500ml量杯中,加水使溶解成300ml,转移至500ml试剂瓶中备用。
(可长期保存)(2)取酒石酸钾钠结晶103.8g与氢氧化钠30g,置500ml量杯中,加水使溶解成300ml,转移至500ml 试剂瓶中备用。
(需新鲜配制)临用前将两液等量混合,即得。
0.2%酚酞指示液:配500ml。
(可长期保存)粗称酚酞1g,置500ml量杯中,加95%乙醇500ml,使溶解,即得。
0.02mol/l氢氧化钠滴定液:配500ml。
(可长期保存)取氢氧化钠0.4g,置500ml量杯中,加水使溶解成500ml。
稀硝酸:配4000ml。
(可长期保存)取硝酸(16mol/L)210ml,置3000ml烧杯中,加水稀释至2000ml。
配2次。
标准氯化钠溶液(10ug/ml):配1000ml。
(可长期保存)精称氯化钠16.5mg,置100ml量瓶中,加水适量使溶解并稀释至刻度,摇匀,作为储备液。
(100μg/ml)临用前,精密量取储备液100.0mL,置1000ml量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,即得。
8.硝酸银试液:配500ml。
(需新鲜配制)取硝酸银8.75g,置500ml量杯中,加水溶解至500ml。
9.稀盐酸:配3000ml。
(可长期保存)取盐酸(12.5mol/L)702ml,置5000ml烧杯中,加水稀释至3000ml。
10.标准硫酸钾溶液(100ug SO4-2/ml):配500ml。
(可长期保存)精称硫酸钾90.5mg,置100ml烧杯中,加水溶解后,转移至500ml量瓶中。
11.25%氯化钡:配3000ml。
(可长期保存,第二年如混浊,过滤)粗称BaCl2750g,置5000ml烧杯中,加水超声溶解并稀释至3000ml(澄清)。
12.标准铅溶液(10ugPb/ml):配600ml 。
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附录实验材料与药品配制一、实验材料(一)实验菌种(表1)表1 实验菌种菌种名称菌种来源大肠杆菌(E. coli)DH5α北京鼎国公司大肠杆菌(E. coli)BL21 北京鼎国公司(二)实验载体表2 实验载体载体名称载体来源pMD 18-T Vector TaKaRa公司pET-28a(+)Vector Promege公司pZsGreen 1-1 Vector Promege公司二、实验常用试剂配制(1)LB(Luria-Bertani)液体培养基的配制(表3)表3 细菌LB培养基(100mL)配方试剂名称用量酵母提取物0.5g胰蛋白胨1gNaCl 1gdH2O 100mL用5mol/L NaOH(约120μL)调节pH值至7.4,加入dH2O至总体积为100mL,1.034×105Pa高压蒸汽灭菌15min,室温冷却至50℃,按需要加入抗生素。
(2)LB固体培养基的配制配制方法参照LB液体培养基的配制,高压灭菌前加入琼脂1.2g/100mL。
(3)30%丙烯酰胺的配制(表4)丙烯酰胺具有很强的神经毒性并可通过皮肤吸收,其作用具有累积性,称量丙烯酰胺时应戴手套和口罩。
表4 30%丙烯酰胺(100mL)配方试剂名称试剂等级用量最终浓度丙烯酰胺分析纯29g 29% N, N′-亚甲双丙烯酰胺分析纯1g 1%dH2O 无菌水100mL —配制时将已称量好的丙烯酰胺和N, N′-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为60mL dH2O中,加热至37℃使之溶解,加dH2O至终体积为100mL。
用孔径为0.45μm 的滤器过滤除菌,置于棕色瓶中室温保存。
(4)1mol/L CaCl2的配制(表5)表5 1mol/L CaCl2(100mL)配方试剂名称试剂等级用量最终浓度无水CaCl2分析纯11.1g 1mol/LdH2O 不需灭菌100mL —将11.1g CaCl2溶解于80mL dH2O中,加dH2O定容至100mL,用孔径为0.22μm 的滤器过滤除菌,分装成10mL小份,-20℃保存。
(5)10mg/mL溴化乙锭(EB)的配制(表6)溴化乙锭是一种非常强的诱变剂,有中度毒性。
使用含有这种染料的溶液时,要务必戴上手套,称量染料时要戴口罩。
表6 10mg/mL EB(500mL)配方试剂名称试剂等级用量最终浓度溴化乙锭(EB)分析纯5g 10mg/mLdH2O 无菌水500mL —将5g EB溶解于400mL dH2O中,溶解过程中需要用磁力搅拌器搅拌,加dH2O 定容至500mL,室温避光保存。
EB的使用浓度为0.5μg/mL,用时从母液稀释。
(6)1mol/L二硫苏糖醇DTT的配制(表7)表7 1mol/L DTT(20mL)配方试剂名称试剂等级用量最终浓度二硫苏糖醇(DTT)避免-SH氧化 3.09g 1mol/L0.1mol/L NaAc(pH5.2)不需灭菌20mL —将称量好的DTT溶解于20mL 0.1mol/L NaAc中,用孔径为0.22μm的滤器过滤除菌,分装成1mL小份,-20℃保存。
(7)0.5mol/L EDTA(pH8.0)的配制(表8)表8 0.5mol/L EDTA(pH8.0,250mL)配方试剂名称试剂等级用量最终浓度EDTA·Na·2H2O 分析纯46.5g 0.5mol/LdH2O 不需灭菌250mL —NaOH 分析纯5g —将46.5g EDTA·Na·2H2O(二水乙二胺四乙酸二钠)溶解于200mL dH2O中,在磁力搅拌器上剧烈搅拌,用NaOH调节溶液的pH值至8.0(约需要5g NaOH颗粒),然后用dH2O定容至250mL,1.034×105Pa高压蒸汽灭菌15min,备用。
(8)5mol/L醋酸钾的配制(表9)表9 5mol/L醋酸钾(100mL)配方试剂名称试剂等级用量最终浓度醋酸钾(KAc)分析纯49.1g 5mol/LdH2O 不需灭菌100mL —将49.1g醋酸钾(KAc)溶解于90mL dH2O中,加dH2O定容至100mL,1.034×105Pa高压蒸汽灭菌15min,备用。
(9)10mg/mL RNaseA的配制(表10)在4mL dH2O中加入50μL 1mol/L Tris-HCl(pH7.5)和15μL 5mol/L NaCl (pH7.5),再加入50mg RNaseA,沸水中加热15min使之完全溶解,缓慢冷却至室温,加dH2O至5mL,使最终浓度为10mg/mL,-20℃保存。
表10 10mg/mL RNaseA(5mL)配方试剂名称试剂等级用量最终浓度RNaseA Sigma type II A 50mg 10mg/mL 1mol/L Tris-HCl(pH7.5)不需灭菌50μL 10mmol/L5mol/L NaCl(pH7.5)不需灭菌15μL 15mmol/LdH2O 无菌水up to 5mL —(10)5mol/L醋酸钠(pH7.0)的配制(表11)表11 5mol/L醋酸钠(pH7.0,100mL)配方试剂名称试剂等级用量最终浓度醋酸钠(NaAc·3H2O)分析纯40.8g 3mol/LdH2O 不需灭菌100mL —冰醋酸分析纯128μL —将40.8g醋酸钠(NaAc·3H2O)溶解于90mL dH2O中,用128μL冰醋酸调节pH值至7.0后加dH2O定容至100mL,1.034×105Pa高压蒸汽灭菌15min,备用。
(11)5mol/L氯化钠的配制(表12)表12 5mol/L氯化钠(100mL)配方试剂名称试剂等级用量最终浓度氯化钠(NaCl)分析纯29.2g 5mol/LdH2O 不需灭菌100mL —将29.2g氯化钠(NaCl)溶解于90mL dH2O中,加dH2O定容至100mL,1.034×105Pa高压蒸汽灭菌15min,备用。
(12)10%十二烷基磺酸钠(SDS)的配制(表13)表13 10% SDS(100mL)配方试剂名称试剂等级用量最终浓度十二烷基磺酸钠(SDS)分析纯10g 10%dH2O 不需灭菌100mL —将10g十二烷基磺酸钠(SDS)溶解于90mL dH2O中,使之完全溶解,加dH2O定容至100mL,使最终浓度为10%,室温保存。
(13)1mol/L Tris-HCl的配制(表14)表14 1mol/L Tris-HCl(100mL)配方试剂名称试剂等级用量最终浓度Tris 分析纯12.11g 1mol/LdH2O 不需灭菌up to 100mL —浓盐酸分析纯 4.2mL pH8.0浓盐酸分析纯6mL pH7.6浓盐酸分析纯7mL pH7.4 将12.11g Tris溶解于90mL dH2O中,加入浓盐酸调节pH至所需值,加dH2O 定容至100mL,使最终浓度为1mol/L,1.034×105Pa高压蒸汽灭菌15min,备用。
(14)200mg/mL IPTG的配制(表15)表15 200mg/mL IPTG(10mL)配方试剂名称试剂等级用量最终浓度IPTG 北京鼎国2g 200mg/mLdH2O 不需灭菌10mL —将2g异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)溶解于8mL dH2O中,加dH2O定容至10mL,用孔径为0.22μm滤器过滤除菌,分装成1mL小份,贮存于-20℃。
(15)50×TAE的配制(表16)表16 50×TAE(1L)配方试剂名称试剂等级用量最终浓度Tris 分析纯242g 2mol/L冰醋酸分析纯57.1mL 2mol/L0.5mol/L EDTA(pH8.0)不需灭菌100mL 50mmol/LdH2O 不需灭菌up to 1000mL —(16)50mg/mL氨苄青霉素的配制(表17)将5g氨苄青霉素溶解于80mL dH2O中,加dH2O定容至100mL,用孔径为0.22μm滤器过滤除菌,分装成1mL小份贮存于-20℃。
在使用时,每100mL LB培养基加入贮存液100μL,使工作浓度为50μg/mL。
表17 50mg/mL氨苄青霉素(100mL)配方试剂名称试剂等级用量最终浓度氨苄青霉素(Amp)北京鼎国5g 50mg/mLdH2O 不需灭菌100mL —(17)10mg/mL卡那霉素的配制(表18)表25 10mg/mL卡那霉素(100mL)配方试剂名称试剂等级用量最终浓度卡那霉素(Kana)北京鼎国1g 10mg/mLdH2O 不需灭菌100mL —将1g氨苄青霉素溶解于80mL dH2O中,加dH2O定容至100mL,用孔径为0.22μm滤器过滤除菌,分装成1mL小份贮存于-20℃。
在使用时,每100mL LB培养基加入贮存液500μL,使工作浓度为50μg/mL。
(18)40%甘油的配制(表19)表19 40%甘油(100mL)配方试剂名称试剂等级用量最终浓度甘油分析纯40mL 40%dH2O 不需灭菌up to 100mL —将40mL甘油注入40mL dH2O中,混匀,加dH2O定容至100mL,使最终浓度为40%(M/V),1.034×105Pa高压蒸汽灭菌15min,备用。
(19)TE缓冲液的配制(表20)表20 TE缓冲液(100mL)配方试剂名称试剂等级用量最终浓度1mol/L Tris-HCl(pH8.0)分析纯1mL 10mmol/L0.5mol/L EDTA(pH8.0)分析纯200μL 1mmol/LdH2O 不需灭菌up to 100mL —80mL dH2O中加入1mol/L Tris-HCl(pH8.0)1mL和0.5mol/L EDTA(pH8.0)200μL,混匀,加dH2O定容至100mL,1.034×105Pa高压蒸汽灭菌15min,备用。
(20)20mg/mL蛋白酶K溶液的配制(表21)表21 20mg/mL蛋白酶K溶液(10mL)配方试剂名称试剂等级用量最终浓度蛋白酶K BBI 0.2g 20mg/mL 1mol/L Tris-HCl(pH8.0)分析纯500μL 50mmol/L1.5mol/L乙酸钙分析纯10μL 1.5mmol/LdH2O 不需灭菌up to 10mL —在8mL dH2O中加入1mol/L Tris-HCl(pH8.0)500μL和1.5mmol/L乙酸钙10μL,配制成溶剂,溶解0.2g蛋白酶K,加dH2O定容至10mL,使得蛋白酶K的最终浓度为20mg/mL。