小鼠神经小胶质细胞使用说明
小胶质细胞ZEB1的上调改善急性缺血性卒中后的脑损伤
Cre／loxP系统来源于F1噬菌体，可以介导位点特异的DNA重组。该系统含有 两种成分：①一段长34bp的DNA序列，这段34bp序列是重组酶识别的位点， 被称为loxP位点。②Cre重组酶(cyclizationrecombination)，它是一种由343个 氨基酸组成的单体蛋白，可以引发loxP位点的DNA重组。任何序列的DNA， 当其位于两个loxP位点之间的时候，在Cre重组酶的作用下要么被缺失(两个 loxP位点的方向相同)，要么方向发生倒转(两loxP位点的方向相反)，如图所示。
发现ZEB1-KD小鼠ZEB1 mRNA和蛋白水平均下调。然而，脾单核细胞中 的ZEB1表达没有下调。
与ZEB1-KD小鼠不同，ZEB1-TG小鼠中的小神经胶质ZEB1表达与野生型 （WT）相比上调。 Z
EB1-KD和ZEB1-TG小鼠发育正常，没有明显的神经系统疾病，不育或行 为异常征象。大脑结构或星形胶质细胞，小胶质细胞和神经元的数量也没 有差异。流式细胞分析显示小胶质细胞ZEB1的差异表达不影响外周免疫 细胞亚型的数目。
最后，我评估小胶质细胞的细胞凋亡和增殖速率。 在这个实验中，小胶 质细胞被称为CD11b + CD45low。 检查小神经胶质细胞凋亡和增殖的程 度揭示WT，ZEB1-TG和ZEB1-KD小鼠之间无差异。
总体而言，这些数据表明，在缺血性中风后，ZEB1与具有更多分枝形 态和较少反应性表型的小胶质细胞相关联。
ZEB1过表达介导小胶质细胞反应，通过TGF-b1依赖途径抑制星形胶质细胞 CXCL1的产生。 CXCL1降低导致嗜中性粒细胞浸润入大脑减少，从而减少CNS炎 症。我们的研究结果表明了ZEB1在小胶质细胞神经炎症中的重要性，并提出了减 少中风引起的神经损伤的潜在手L1
BV-2 小鼠小胶质瘤细胞
BV-2 小鼠小胶质瘤细胞
简单介绍
BV-2 小鼠小胶质瘤细胞，ATCC细胞|细胞系|细胞株|肿瘤细胞株|细胞|贴壁细胞|悬浮细胞|；细胞库管理规范，提供的细胞株背景清楚，提供参考文献和最优培养条件；
BV-2 小鼠小胶质瘤细胞的详细介绍
BV-2 小鼠小胶质瘤细胞
培养条件：
完全培养基：RPMI 1640+10%胎牛血清
培养条件：37.0C carbon dioxide(CO2),5%
传代方法：
收到细胞后，取出培养瓶在倒置显微镜下观察细胞生长情况。
（一）如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，吸出培养液，仅留下10ml培养液在瓶内继续培养。
(二)如果细胞已长满，即可进行传代培养。
具体步骤如下：
1. 弃去培养液，用PBS（不含钙，镁离子）洗1-2次。
2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，倒转放于37度培养箱1-3分钟预热，然后又将培养瓶倒转大约30秒后，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆分散，轻敲几下培养培养瓶，细胞随即脱落下来。
3. 加入6-8ml完全培养基，吸出，分到新的培养瓶中。
一传二。
注意：传代后一半用我们的培养基，一半用你们的，以免细胞不适应而造
成生长不好。
冻存方法：冻存液：95%完全培养液，5%DMSO
储存：液氮储存。
小胶质细胞
小胶质细胞
一、简介
小胶质细胞是中枢神经系统的一类重要细胞，主要包括星形胶质细胞和少突胶质细胞两种类型。
它们在神经元周围形成支持和保护神经元的环境，具有重要的调节神经活动、清除代谢废物、维持离子平衡等功能。
二、星形胶质细胞
星形胶质细胞是中枢神经系统中最常见的胶质细胞，形状呈星形，有丰富的细胞突起。
它们主要在神经元细胞体周围形成星形胶质细胞区，通过支持和包裹神经元维持其结构完整性，参与形成血脑屏障，与神经元之间进行代谢物质交换等。
三、少突胶质细胞
少突胶质细胞是另一类重要的胶质细胞，与星形胶质细胞相比，它们的细胞体较小，细胞突起较短少，主要分布在低密度神经元区域，主要功能是调节神经元之间的联系、清除细胞外代谢产物和维持离子平衡等。
四、小胶质细胞的功能
1.支持神经元：小胶质细胞通过包裹和支持神经元，维持神经元的结
构完整性和稳定性。
2.清除代谢产物：小胶质细胞通过吞噬和分解细胞外代谢产物，保持
神经环境的清洁。
3.维持离子平衡：小胶质细胞参与调节神经元周围的离子浓度，保持
适当的神经兴奋性。
4.调节神经元活动：小胶质细胞通过释放神经递质和其他信号分子，
参与神经元之间的通讯和调节神经元活动。
五、结语
小胶质细胞作为中枢神经系统中的重要组成部分，扮演着支持、清除、调节等多方面的功能。
对小胶质细胞的深入研究有助于更好地理解神经系统的工作原理，为神经系统疾病的治疗提供新的思路。
希望通过本文的介绍，能使读者对小胶质细胞有更深入的了解。
小胶质细胞的研究方法
小胶质细胞的研究方法小胶质细胞是一类位于中枢神经系统的非神经元细胞，它们在神经发育、维持神经环境稳定以及参与神经传导等方面发挥着重要的作用。
因此，研究小胶质细胞的方法对于深入了解神经系统的功能和疾病机制具有重要意义。
本文将介绍几种常用的小胶质细胞研究方法。
一、细胞培养小胶质细胞的细胞培养是研究小胶质细胞的基础方法之一。
细胞培养可以提供一个受控的实验环境，使得研究者可以对小胶质细胞进行多种实验操作。
通常，从小鼠或人脑中分离小胶质细胞，然后将其培养在含有合适培养基和生长因子的培养皿中。
通过细胞培养，可以研究小胶质细胞的形态、生理功能以及对外界刺激的响应等方面的特性。
二、免疫组织化学免疫组织化学是一种常用的研究小胶质细胞的方法。
通过标记特定的抗体，可以检测和定位小胶质细胞中的蛋白质或其他分子。
例如，通过使用特异性抗体标记小胶质细胞的特定表面标志物，可以帮助研究者确定细胞的类型和分布情况。
此外，免疫组织化学还可以用于检测小胶质细胞在神经系统中的反应和功能改变。
三、转录组学分析转录组学分析是研究小胶质细胞基因表达的重要方法。
通过RNA 测序技术，可以全面地了解小胶质细胞中基因的表达水平和变化。
这种方法可以帮助研究者发现小胶质细胞在不同发育阶段、疾病状态或受到不同刺激时的基因表达差异，进而揭示小胶质细胞在神经系统功能和疾病中的作用。
四、原位杂交原位杂交是研究小胶质细胞基因表达和分布的重要方法之一。
通过标记适当的探针，可以检测和定位小胶质细胞中具体基因的mRNA。
这种方法可以帮助研究者确定小胶质细胞中不同基因的表达模式和分布情况，进一步了解小胶质细胞的功能和相互作用。
五、功能性研究为了研究小胶质细胞的功能和影响，研究者还可以使用多种功能性实验方法。
例如，通过细胞钙成像技术可以监测小胶质细胞中的钙离子浓度变化，从而研究其对于神经信号传导的调控作用。
此外，还可以利用细胞电生理技术记录小胶质细胞的膜电位变化，以及使用基因敲除或过表达等方法研究小胶质细胞中特定基因的功能。
小胶质细胞流式标记
小胶质细胞流式标记
小胶质细胞是中枢神经系统中的一类胶质细胞，它们在维持神
经系统正常功能、代谢调节和免疫反应中起着重要作用。
流式标记
是一种常用的细胞分析技术，通过使用特定的抗体对细胞表面或内
部分子进行标记，然后利用流式细胞仪进行分析和检测。
针对小胶质细胞的流式标记，可以选择特定的抗体来标记它们。
常用的小胶质细胞标记抗体包括CD11b、CD45、CD64等。
CD11b是
一种细胞表面标记，它通常用于标记单核细胞系的细胞，包括小胶
质细胞。
CD45则是一种白细胞常见的标记，用于区分白细胞和非白
细胞。
CD64是单核细胞的标记，也可以用于小胶质细胞的标记。
在流式标记实验中，首先需要对待测样本进行细胞表面标记，
然后使用流式细胞仪进行细胞分析。
通过流式细胞仪可以对细胞进
行高通量、高灵敏度的分析，得到细胞表面标记的情况，从而对小
胶质细胞进行定量和定性分析。
除了单一细胞表面标记外，还可以结合细胞内标记进行更全面
的分析。
例如，可以使用荧光染料或荧光蛋白标记小胶质细胞内部
的特定蛋白或分子，以实现对小胶质细胞功能和代谢状态的分析。
总的来说，小胶质细胞的流式标记是一种重要的细胞分析技术，通过选择合适的抗体和标记方法，可以全面、准确地分析小胶质细
胞的表面标记和内部特征，为进一步研究其功能和参与的生理过程
提供重要的实验手段。
小胶质细胞原代培养
小胶质细胞原代培养时间：15天试剂：出生后1-2天的新生C57BL/6小鼠（斯莱克）9只DF12培养基（GIBCO，C11330）90ml胎牛血清（FBS）(10%) （GIBCO，10099）5ml解剖液50ml1 x胰蛋白酶(0.25%)（Gibco，25200-072）10ml10mg/ml DNA酶70ul75%酒精200ml器材：酒精棉球1杯（20个）装有75%酒精的敞口容器1个原代解剖器械盒（2把中号镊子，1把中号剪刀，1把眼科弯镊，1把眼科直镊，1把眼科剪，2把显微镊，1把显微剪）洗净消毒后小瓶3个（带盖子）小平皿4个（带盖子）解剖镜+冷光源消毒后卫生纸12张1ml移液器1把+枪头1盒10ml玻璃离心管3个T75大培养瓶3个消毒后吸管3根紫外消毒白大褂1件试剂配制：中和胰蛋白酶用的完全培养基：DF12 45ml和FBS 5ml混合而成。
步骤：1、取出生后1-2天的新生C57BL/6小鼠9只，泡在酒精中消毒后取出大脑，置于放有解剖液的小平皿中，在解剖镜下剥离血管膜关键：注意无菌操作；剥离血管膜要完全2、将剥离完血管膜的大脑放入预置有1ml解剖液的青霉素小瓶中，用显微剪剪碎（<1mm3）关键：剪碎效果较用枪头吹吸好，要剪得尽量碎3、加入两滴DNA酶和1ml胰酶（胰酶终浓度为0.125%），于37℃孵箱中孵育15分钟关键：每5分钟可略微晃动一下以助于消化4、取出小瓶，将液体倒入离心管中，加5ml完全培养基，离心（1000rpm*5分钟），取出离心管，吸出上清，再加入5ml无血清培养基，吹打后静置沉降20分钟，将上清用吸管吸出，加入T 75大培养瓶中，放入孵箱中培养，3小时后换液。
关键：静置沉降后吸取上清液时吸取中层（最上层和最下层均不要），避免杂质吸入培养瓶中5、每7天换一次液，培养14天后取出，在摇床中培养6小时（200rpm ，37o C），取上清加入离心管中离心（400g*8分钟），弃上清，加入4ml无血清培养基轻轻吹打重悬，均匀滴加于24孔培养板的中央4个孔中，于孵箱中培养半小时使小胶质细胞贴壁，取出，吸出上清，再每个孔加1ml培养基，即得较纯净的小胶质细胞。
小胶质细胞在中枢神经系统的作用
小胶质细胞在中枢神经系统的作用中枢神经系统是人体最为重要的系统之一。
在中枢神经系统中，小胶质细胞扮演着重要的角色。
本文将从小胶质细胞的定义、结构、功能以及在疾病发展中的作用四个方面来详细介绍小胶质细胞在中枢神经系统的作用。
一、小胶质细胞的定义和结构小胶质细胞（oligodendrocyte）是一种主要存在于中枢神经系统（包括大脑、小脑、脊髓）的细胞，其主要功能是产生和维持神经元轴突的髓鞘。
其名称来源于希腊文中“oligo”意为“少量”，“dendron”意为“树”，即少量的树突状分支。
小胶质细胞是中枢神经系统中最丰富的种类之一，它们分布在脑胶质中，在成年人的大脑皮层中，每个小胶质细胞大约可以维护30个轴突。
小胶质细胞通常有多个分支，每个分支可以接触多个轴突。
每个细胞体一般有1-5个分支，而每个分支都能覆盖多个轴突，这使得单个小胶质细胞能够同步髓鞘化多个轴突。
二、小胶质细胞的功能1. 产生和维护髓鞘小胶质细胞的主要功能是产生和维护神经元的轴突的髓鞘。
髓鞘是由小胶质细胞形成的脂质层，包裹着神经元轴突的外部。
髓鞘是一种神经保护层，有助于提高神经冲动的传导速度。
在髓鞘中的脂质层充当着电绝缘体的作用，使得神经冲动能够快速传递。
2. 营养供应和废物清除小胶质细胞在中枢神经系统中还起着重要的代谢功能。
它们可以分泌和吸收有机物、真菌等物质，维护神经元的营养供应和废物清除。
此外，它们还可以分泌一些物质，如白介素-1（IL-1）、起源返祖细胞特异蛋白（SOX2）等，有一定的免疫调节作用。
3. 维持神经元连接神经元和神经元之间的连结需要依靠突触的形成，而小胶质细胞正是维持神经元和神经元之间的突触连接的重要角色之一。
此外，研究发现，小胶质细胞应用突触吞噬技术，维护着神经元之间的正常连接和稳定性。
三、小胶质细胞在疾病发展中的作用正常情况下，小胶质细胞能够很好地生产和维护正常的神经元髓鞘。
但是，当他们发生异常时，可能会对中枢神经系统的正常功能造成不良影响，还可能引发一系列疾病。
bv2小胶质细胞培养方法
bv2小胶质细胞培养方法bv2小胶质细胞是一种常用于神经科学研究中的细胞系，它是从小鼠大脑中的胶质细胞中分离出来并进行培养得到的。
在研究神经炎症、神经退行性疾病等领域，bv2小胶质细胞的培养方法非常重要。
本文将介绍一种常用的bv2小胶质细胞培养方法。
准备培养基和培养器具。
常用的培养基包括DMEM/F12、FBS、青霉素和链霉素等，可以根据实际需要添加其他补充物。
培养器具包括细胞培养板、离心管、移液器等。
接下来，收集小鼠大脑组织并分离胶质细胞。
可以选择小鼠的新生仔或成年小鼠进行实验。
将小鼠的大脑取出，去除外膜和血管，并切成小块。
将切好的组织块转移到含有消化酶（如胰蛋白酶）的消化液中，然后在37摄氏度的恒温培养箱中进行消化。
消化时间一般为30分钟至1小时，根据组织的大小和样本量进行调整。
消化结束后，用培养基停止消化反应，并用离心将细胞沉淀下来。
将沉淀的细胞用培养基重新悬浮，并通过筛网过滤掉组织碎片和大颗粒。
然后，将细胞计数，并根据实验需要进行稀释。
将细胞悬浮液均匀分配到预先涂有培养基的细胞培养板中，使其在培养基中均匀分布。
将细胞培养板放入培养箱中，调节温度为37摄氏度，湿度为95%，并提供适当的CO2气氛（一般为5%）。
每2-3天更换一次培养基，并观察细胞的生长情况。
当细胞达到80%的密度时，可以进行下一步的实验。
在培养过程中，需要注意细胞的健康状态。
细胞应该呈现出典型的胶质细胞形态，即星形或梭形，并有良好的附着性。
如果细胞呈现不正常的形态，或者细胞死亡较多，可能是培养条件不适合，需要进行调整。
培养过程中还需要注意细胞的污染问题。
保持培养器具的清洁和消毒，避免细菌、真菌等污染源的进入。
如果发现培养基出现异常，如呈现黄色或浑浊，可能是细菌污染，需要立即更换培养基。
在bv2小胶质细胞培养过程中，还可以进行相关实验，如细胞增殖实验、分化实验、细胞活力检测等。
这些实验可以进一步研究bv2小胶质细胞的生物学特性和功能。
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小鼠神经小胶质细胞
小鼠神经小胶质细胞产品说明：
为使能尽快开展实验，派瑞金发货的原代细胞均处于对数生长期，且每次发货为汇合率达到70%的细胞，收到细胞后即可开展实验。
派瑞金提供的小鼠神经小胶质细胞取自新鲜的组织，按照标准操作流程分离培养。
研发的小鼠神经小胶质细胞完全培养基能提供细胞最佳的生长条件，降低杂细胞污染，保证不同批次间细胞质量的稳定。
同时，派瑞金还建立了严格的细胞鉴定流程，所提供的原代细胞均需经过细胞类型特异性标记物、细胞形态学等检测，保证细胞纯度在90%以上；同时也需经过微生物检测，保证不含有HIV、HBV、HCV、支原体、真菌及其他类型的细菌。
注意事项：
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。
3. 请用相同条件的培养基用于细胞培养。
培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞传代时可以一定比例和自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件;建议使用派瑞金的完全培养基。
4. 建议收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态。
5. 该细胞只能用于科研，不得用于临床应用。
小鼠神经小胶质细胞产品简介：
1、产品名称：小鼠神经小胶质细胞
2、组织来源：小脑组织
3、产品规格：5×105cells / 25cm2培养瓶
小鼠神经小胶质细胞细胞简介：
小鼠神经小胶质细胞分离自正常小鼠小脑组织，主要功能：
（1）神经胶质出现在大脑发育早期向成熟阶段转化的过程中。
（2）当程序性细胞死亡时，或在大脑发育的过程中，中枢神经系统受损或受到病理损坏时，神经胶质可做为大脑的巨噬细胞。
（3）胶质细胞能在II类组织相容性复合体表达CD4阳性T细胞时表达抗原，能进行Fc介导的巨噬作用，并且与造血细胞和巨噬细胞组织共享抗原。
本公司生产的小鼠神经小胶质细胞，细胞总量约为5×105cells/瓶，细胞纯
度可达80%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
小鼠神经小胶质细胞培养基信息：
1）培养基类型：DMEM
2）添加因子：10% 优质胎牛血清、细胞生长因子等
小鼠神经小胶质细胞使用方法：
1. 取出冻存管，浸入37℃温水浴中，并不时摇动令其尽快融化，注意管口不要没入水面以下，以免造成污染。
2. 从37℃水浴中取出冻存管，打开盖子，吸出细胞悬液，转移到离心管并加入10倍以上培养液，混匀。
离心，1000rpm，5min。
3. 弃去上清液，加入含10%优质胎牛血清培养液重悬细胞，计数，调整细胞密度，接种培养瓶，37℃温箱静置培养。
次日更换一次培养基，继续培养。
4. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养：
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO
细胞培养箱中培养；
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4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。
之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。
小鼠神经小胶质细胞注意事项：
1. 在细胞培养过程中，请注意保持无菌操作。
2. 传代培养过程中，胰酶消化时间不宜过长，否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
3. 该细胞只可用于科研。
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