猪链球菌9型钦州株的分离及其cps9H基因序列分析
猪链球菌9型钦州株的分离及其cps9H基因序列分析
９ ．％； ９５ 与河 南 Ｈ 湖北 ＨＢ ２分别 为 ９ ．％和 ９ ． ； 广 Ｎ、 ２ ８ ２ ９２ 与 ％
州 Ｇ ０６ Ｚ ５ ５同 源 性 最 低 ， 为 ９ ． 。 仅 ７２ ％
２２ Ｐ ． ＣＲ 扩 增 结 果
的病料 进 行 细 菌分 离 、Ｃ Ｐ Ｒ扩 增 ， 并进 行 测 序 分析 ， 以期 为
Ｓ ９的分子流 行病 学提 供数 据 支持 。 Ｓ
１ 材 料 与 方 法
１１ 标 准 毒 株 及 主 要 试 剂 ．
扩增 产物 经 １ ／ 脂 糖凝 胶 电泳 ， 到单 一 的约 ３ ０ ０ｇＬ琼 得 ９ ｂ ｐ大小 的 目的 片段 （ １ 。 图 ）
１２ 引 物 ．
２０ ０ｂ ０ ｐ
根 Ｓ ９荷 兰 ５ １ Ｓ ２ ８株设 计扩 增 ｃ ｓＨ基 因 弓 物 ：ｐ９ ： ｐ９ １ ｃ ｓ Ｈ１
５一 ＧＧＣ ＴＡＣ ＡＴＡＴ ＡＡＴＧＧＡＡＧＣＣＣ一 ： ｐ ９ ３ ｃ ｓ Ｈ２： Ｃ ５ 一 ＣＧＡＡＧ
Ｔ Ｔ Ｔ Ｇ Ｃ Ａ Ｔ 一 预 期扩 增片段 长约 ３ ９ ｂ 。 Ａ Ｃ Ｇ Ｇ Ｔ Ｃ Ｇ ３， ８ ｐ
Ｇ ｃ Ａ Ａ Ａ Ａ Ｇ Ａ ０ ： Ｔ Ｔ Ｔ Ａ Ａ Ａ Ｃ Ｇ Ｔ Ｇ １ ’Ａ Ｔ Ｇ ＴＣＴＴ Ａ Ａ Ｇ 口 Ａ Ｔ Ａ ＡＴ Ａ Ａ Ａ Ｔ ＡＡ １ Ａ Ｃ Ａ Ｔ Ａ Ａ ０ ＡＣＡＧ６
Ｍｇ １ ２ ｏ ／） Ｌ 上下 游 引物 （５ｐ ｏ ／ Ｌ 各 ０５ Ｌ Ｃ２ ５ｍｍ ＬＬ １ ， （ ２ ｍ ＬＩ ） ． ｚ ， 加 ｄ Ｈ２ ｄ Ｏ补 至 ２ Ｌ， Ｐ Ｒ仪 中 ，５℃ 预 变性 ５ｍｉ ；４ ５ 置 Ｃ ９ ｎ ９
猪链球菌9型国内分离株毒力基因的检测及小鼠免疫试验
猪链球菌9型国内分离株毒力基因的检测及小鼠免疫试验修福晓;陆承平【期刊名称】《中国兽医科学》【年(卷),期】2008(38)2【摘要】通过检测7株猪链球菌9型(SS9)国内分离株的毒力基因,比对7株SS9荚膜合成基因cps9j的300 bp碱基序列,以及进行7株SS9对小鼠的毒力试验和免疫保护试验,初步探讨了国内SS9的毒力特性。
结果显示,7株SS9均缺失胞外因子(epf)和溶血素(sly)基因,溶菌酶释放蛋白基因(mrp)存在于GZ0665和GD0606株,orf2仅存于GZ0665株;病猪脑脊液分离株GZ0665与从健康猪扁桃体分离的6株SS9的cps9j同源性低;在7株SS9分离株和SS2分离株HA9801中,只有GZ0665和GD0606株能致死小鼠;用灭活的GZ0665菌株免疫的小鼠对同源菌株GZ0665及GD0606株攻击的保护率均为100%(10/10),用灭活的GD0606和未灭活的GD0627菌株免疫的小鼠对GD0606株攻击的保护率分别为80%(8/10)和50%(5/10),而对GZ0665株攻击的保护率分别为60%(6/10)和30%(3/10)。
证实,SS9病猪脑脊液分离株的毒力基因有别于SS9健康猪扁桃体分离株和SS2。
表明,小鼠可以用来区分SS9病猪脑脊液分离株与健康猪扁桃体分离株的致病力。
【总页数】4页(P97-100)【关键词】猪链球菌9型;毒力基因;cps9j基因;小鼠【作者】修福晓;陆承平【作者单位】南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室【正文语种】中文【中图分类】S852.611【相关文献】1.国内病猪中猪链球菌2型分离株溶血素基因的PCR检测及序列分析 [J], 倪艳秀;陆承平;何孔旺;俞正玉;温立斌;吕立新;张雪寒;郭容利;周俊明;茅爱华2.4株猪链球菌2型分离株主要毒力因子(MRP、EF)的全基因序列分析 [J], 倪艳秀;段志涛;何孔旺;陆承平3.猪链球菌2型安徽分离株毒力基因cps2J、mrp、epf、sly的检测及其序列分析[J], 许大文;魏建忠;孙裴;殷宗俊;赵洪武;李郁4.猪链球菌2型四川分离株毒力基因的检测及其序列分析 [J], 赵永刚;王伟伟;田晓灵;王君玮;王志亮;赵云玲;王清华;张维;陈义平;刘华雷;王华5.血清2型猪链球菌河南分离株毒力基因的鉴定及其cps2j全基因序列分析 [J], 张九州;李乔晶;郑逢梅;常洪涛;陈陆;杨霞;姚惠霞;王川庆;迪丽拜尔·阿木提因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
猪链球菌9型钦州分离株cps9H基因序列分析
链球 菌增 菌培 养基 购 自中 国进 出 口商 品技 术研 究 所 。质粒 Ｄ Ａ小量提 取试剂 盒 购 自杭 州博 日科 技 Ｎ
有 限公 司 。Ｌ 培 养 基 购 自 Ｇ Ｂ Ｏ Ｂ Ｉ Ｃ Ｌ公 司 ； Ｔ Ｂ ＣＡ （ 代 十六烷基 三 甲胺 ） 自 Ａ ｒｓｏ 司 。 溴 购 ｍ ｅｃ 公 １ ４ 液体 培 养 ． Ｄ Ａ抽 提前 ２ ４株 Ｓ ９钦州 分离 株接 种 Ｎ ４ｈ将 Ｓ 于含 １ Ｏ％ 马血 清 的链 球 菌 增 菌 培 养 基 内 培 养 ，
ＧＧＣＴＡＣＡＴＡＴＡＡＴＧＧＡＡＧＣＣＣ 一 ３、 ｐ ９Ｈ２：５、 ；ｃ ｓ 一
Ｃ Ｃ Ａ ＴＴＴ Ｇ ｃＡ Ｔ Ｃ Ａ Ｇ Ａ Ｃ Ｇ Ｇ Ｔ Ｃ Ｇ一３， 物 由宝生 物 工 、 引
程 （ 连 ） 限公 司合成 ， 大 有 预期 扩增 片段长 ３ ９ｂ 。 ８ ｐ
１ ３ 主 要 试 剂 ．
为 ９． ６ ７％ 一１０％ 和 ９ ． ％ ～１０％ 。 ｏ １５ ０
诊 断和预 防控 制提供科 学依 据 。 来自１ 材 料 与 方 法
１１ 细菌 、 ． 菌种 和克隆 载体 所用 ４株 Ｓ ９钦 州 分离株 Ｑ ２ ／ ８ Ｑ ２ ／ ８ Ｓ Ｚ４０ 、 Ｚ６０ 、 Ｑ ３／ Ｓ Ｑ ４ ／８均 由本 实 验 室 分 离 鉴 定 和 保 Ｚ００ 、 ｚ ９Ｏ
靶
３ ．广西大学动物科学技 术学 院 ， 南宁 ５ ０ ０ ） ３０ ５
中图 分 类 号 ：８ ８ ２ ５ １ ￥ ５ ． ８ ．１ 文献 标 识 码 ： Ｂ 文章 编 号 ：０ ２— ２ ５ ２ １ ）６— ３ ３ ４ １０ ５ ３ （０ ０ ０ ０ ２ 一ｏ
摘 要 ： 据 已发 表 的 猪 链 球 菌 ９型 （ Ｓ ） 兰 ５ １ 根 Ｓ９ 荷 ２８分
钦州地区猪链球菌的分离鉴定与药敏试验
钦州地区猪链球菌的分离鉴定与药敏试验摘要采集疑似链球菌病的猪病料进行细菌分离,根据培养特性、染色特点、形态观察、生化试验鉴定为1株猪链球菌;药敏试验表明,该分离菌株对氨苄西林、包孢他啶、万古霉素、头孢氨苄、克林霉素、恩诺沙星高度敏感,对多黏菌素、环丙沙星、卡那霉素中度敏感,对红霉素、青霉素低度敏感,而对土霉素、四环素、强力霉素、复方新诺明有明显耐药性。
关键词猪链球菌;分离鉴定;药敏试验;广西钦州猪链球菌病是现代养猪业中的一种重要传染病,主要引发猪脑膜炎、关节炎、心内膜炎和败血症[1]。
2型猪链球菌在全球范围内都是优势流行株。
2005年6—7月发生在四川省资阳、内江等地区的2型猪链球菌感染事件造成了极大的经济损失,引起社会广泛关注[2]。
另外,1型和9型是除2型外的流行株[3-4],也可使猪发病。
虽然理论上有很多药物能治疗猪链球菌病,但随着抗菌药物的广泛使用以及临床中不合理用药,使得病原菌的耐药现象日趋严重[5-6]。
本研究对地区猪场送检的疑似链球菌病病死猪的淋巴结、肺、脾、扁桃体等病变组织进行了细菌的分离鉴定,对分离菌进行了药敏试验,以期为该病的临床防治提供科学依据。
1材料与方法1.1试验材料试验病料为采自广西钦州地区某猪场疑似猪链球菌发病的仔猪淋巴结、肺、脾、扁桃体等病变组织。
试验试剂为:绵羊血琼脂平板、绵羊血琼脂斜面、普通琼脂培养基、营养肉汤、巧克力培养基等,均按常规方法制备,4 ℃冰箱保存备用;药敏纸片购自北京天坛药物生物技术开发公司;细菌微量发酵管购自杭州天和微生物试剂有限公司。
1.2细菌分离采用无菌法将采集的疑似链球菌病发病的仔猪淋巴结、肺、脾、扁桃体等病变组织,划线接种于含有8%绵羊血的琼脂平板、巧克力培养基和营养琼脂平板中,37 ℃培养24 h,观察细菌生长特性。
挑取绵羊血平板上针尖大小、表面光滑、灰白色、圆形、半透明、边缘整齐的单个菌落进行革兰氏染色。
革兰氏染色阳性、有链状排列或成对的球形细菌为可疑菌落,接种于葡萄糖肉浸液肉汤液体培养基内进行增菌培养,37 ℃纯培养24 h后再次进行革兰氏染色,对镜检为革兰氏染色阳性、成对、短链球菌,再做接触酶试验,结果为阴性者,即确定为猪链球菌,接种于绵羊血琼脂斜面上,置于4 ℃冰箱中保存备用。
猪链球菌的分离、16S rRNA鉴定及药敏试验
养猪 Ｓ ＷＩ Ｎ Ｅ Ｐ Ｒ Ｏ Ｄ Ｕ Ｃ Ｔ Ｉ Ｏ Ｎ ｆ ３ ３ １
２ ０ １ ５
猪链球菌 的分离 、 １ ６ Ｓ ｒ Ｒ Ｎ Ａ 鉴 定 及 药 敏 试 验
何 芳， 周 望平 ， 邱 美珍 ， 杨 俊 （ 湖南省畜牧 兽医研 究所 ， 湖南 长沙 ４ １ ０ １ ３ １ ）
作者简 介 ： 何 芳（ １ ９ ７ ３ 一 ） ， 女， 湖检 测和 测序
向为 动 物 疫 病 防控 ． Ｅ — ｍａ ｉ ｌ ： ７ ５ ｏ ０ ８ １ ７ ６ ＠ｑ ｑ ． ｃ ｏ ｍ
１ ． ５ ． １ 细 菌基 因组 Ｄ Ｎ Ａ的提取
猪链球菌病是一种人畜共忠 的急性、热性传 染 病料 。鲜血琼脂、 巧克力琼脂购 自江门市凯林贸易有 病， 可致猪脑膜炎、 关节炎 、 肺炎 、 心 内膜炎、 多发性浆 限公司， 即用型 Ｐ Ｃ Ｒ Ｍ ｉ ｘ 试剂盒购 白 北京天恩泽基因 膜炎［ １ 】 。 临床表现为急性 出血性败血症、 哺乳仔猪下痢 科技有 限公司， 药敏纸片购 自杭州微生物试剂公司。 和怀孕母猪流产等， 可致 生猪死亡 ， 危害较严重 。 据报 １ － ２ 试验 时 间 与 地 点 道， 猪链球菌血清型众多 ， 目前有 ３ ５ 个血清型 ， 而且 试验 时问为 ２ ０ １ ４年 ５ —７月，采样地 点为湖 南
中图分类号 ： ￥ ８ ５ ８ ． ２ ８ ２ ． ６ １ 文献标 志码 ：Ａ 文章编号 ： １ ０ ０ ２ — １ ９ ５ ７ （ ２ ０ １ ５ ） ０ ３ — ０ １ ０ ８ — ０ ２
摘 要 从湖南某猪场病猪组织中分离出６ 株细菌， 通过培养形态、 菌落特征、 细菌染色特性、 镜检、 １ ６ Ｓ ｒ Ｒ Ｎ Ａ基因扩增及序列 Ｂ Ｌ Ａ Ｓ Ｔ 分析等系统鉴定 ， 确定为猪链球菌， ６ 株分离菌的 １ ６ Ｓ ｒ Ｒ Ｎ Ａ基因序列与收录 菌株同源性为９ ９ ％； ２ 上。药物敏感性试验结果表 明， 分离细菌对头孢喹肟、 先锋霉素、 青霉素药物高度敏感。 关键词 猪链球菌 ； １ ６ Ｓ ｒ Ｒ Ｎ Ａ； 药敏试 验
猪链球菌的实验室分离与鉴定
将预处理的样品接种到选择的培养基上，在适宜的温度和环境下进行培养。观察 菌落的形态、颜色等特征进行初步鉴定，并进行生化试验、血清学试验等进一步 鉴定。
03
猪链球菌的鉴定
形态学鉴定
革兰氏染色
猪链球菌为革兰氏阳性菌，呈球形或 卵圆形，常呈链状排列。
培养特性
在血液琼脂平板上培养，形成圆形、 隆起、光滑、湿润的菌落，周围有完 全透明的溶血环。
生化鉴定
01
02
03
触酶试验
猪链球菌为阳性，可与其 他链球菌相鉴别。
氧化酶试验
猪链球菌为阴性，可与其 他链球菌相鉴别。
糖发酵试验
猪链球菌能发酵多种糖类 ，如葡萄糖、果糖、乳糖 等，可与其他链球菌相鉴 别。
分子生物学鉴定
01
16S rRNA基因ຫໍສະໝຸດ 列分析通过对猪链球菌的16S rRNA基因进行扩增和测序，可以确定其属、种
及亚种水平上的分类地位。
02
多位点序列分析（MLSA）
通过对多个基因位点的序列进行分析，可以更准确地鉴定猪链球菌的种
和亚种。
03
分子分型技术
如脉冲场凝胶电泳（PFGE）、多位点酶电泳（MLEE）等，可以用于研
究猪链球菌的分子流行病学特征，追踪其传播途径和溯源。
04
猪链球菌的致病性研究
致病机制研究
入侵机制
猪链球菌通过何种方式侵入机体，如通过呼吸道、消 化道等途径。
毒素作用
猪链球菌产生的毒素如何引起疾病，如溶血素、细胞 外酶等的作用。
免疫逃逸
猪链球菌如何逃避机体的免疫系统，如通过荚膜、鞭 毛等机制。
临床症状与病理变化
临床症状
猪链球菌感染后，猪可能出现的临床症状，如发热、咳嗽、 呼吸困难等。
猪链球菌的实验室分离与鉴定
猪链球菌的实验室分离与鉴定作者：李树民来源：《农家致富顾问·下半月》2015年第04期摘要：随着我国国民经济水平的进一步提高，人们对生活的质量以及健康的饮食也越来越关注了。
但是近些年来，相关部门在对很多地区的规模猪场进行防疫检查，发现有很多猪身上都带有猪链球菌，如果这些生猪流入市场，被人们所食用的话，那么其后果将会是不堪设想的，下面就对猪链球菌进行分离的细菌进行实验鉴定，以此来保证人们的饮食健康。
关键词：猪链球菌；实验室；分离与鉴定业内人士都应该知道，猪链球菌的危害是非常大的，而且其是一种人和兽可以共患的一种病原菌，在世界上的各个国家都有分布，从20世纪50年代以来，人们就一直受到猪链球菌的感染，不仅导致了大量猪的死亡，而且还深深的影响人们的生活健康。
下面就对这种猪链球菌做进一步的实验分析，希望可以给临床的防制工作提供有价值的参考作用。
一、实验中所使用的材料和研究方法探析1.1实验中所涉及到的材料病料在实际的实验中，所选择的疑似猪链球菌病的病料，都是从广东省的广州，韶关，还有增城以及湛江等地一些比较有规模的猪场选择的，一共对这些疑似猪链球菌病的病料平均分成了20份，同时也分别标注了1到20号，这样在实验分析中会非常的方便。
1.2实验中都需要用到的仪器主要有基因的扩增仪，是杭州的博日科技有限公司所生产的。
还有型号是DYY-Ⅲ4的稳压稳流电泳仪器，其生产厂家是北京市的六一仪器厂。
而型号为8823B的紫外线透射的分析仪，是生产于珠海的星马医学仪器有限公司生产。
这些仪器通过相关部门的检测，都是完全符合其实验要求的，所以在一定的程度上，实验的结果是有保证的。
1.3实验中所应用到的试剂主要有新生的牛血清，这种试剂是从北京的鼎国生物技术有限责任公司购买而来，还需要用到血平板试剂，以及一些可以用来对细菌微量进行生化反应的试管，同时还要用到托休二氏液体培养基以及托休二氏固体培养基，这些试剂都是从广东的环凯微生物科技有限公司购买而来的，因为这些都是比较知名的大企业，所以试剂的有效性是毋庸置疑的。
猪肺炎支原体不同毒力株黏附因子基因序列分析
各 地 。国 内外 对该 病 的病 原进 行 了大量 研 究 ， 目前
Ｍ ｐ 是引起猪气喘病的主要病原 ， ｈ） 广泛存在于世界
收 稿 日期 ：０ ９０ －９ ２ ０ －８２
对猪 肺炎 支原 体 的毒 力 因 子研 究 还不 是 特 别清 楚 ， 但是 Ｐ ７作 为黏 附 因子 的功 能 现 在 已经 确定 ， ９ 它在 猪肺炎支原体感 染猪过程 中起 重要作用 。因此 ， 研究
ＬＵ Ｍ ｏ ｕ Ｓ Ａ ｕ ．ｉｇ ， Ｚ Ａ Ｇ Ｙ ｎ Ｉ ａ － ｎ ， Ｈ Ｏ Ｇ ｏｑｎ ｊ Ｈ Ｎ ｉｇ
（．ｎｔｕ ｅ ｒ ａｙ Ｓｉ ｃ，ＪａｇｕＡａ ｅ ｙｏ ｇｉ ｌ ｒｌＳｉ ｃｓ ａｊ ｇ ２０ １ ，Ｃ ｉａ ． ｏｅｅｏ ｎｍ ｌＳｉ ｃ ｎ ｅｈ ｏ ｇ ， １Ｉｓｔｔ ｏ Ｖｔｉ ｒ ｃ ｎｅ ｉｎｓ ｃｄｍ Ａ ｒｕｔ ａ ｃ ｎｅ，Ｎ ｎｉ １０ ４ ｈｎ ；２ Ｃ ｌｇ Ａ ｉ ａ ｃ ｎｅａ ｄ Ｔｃｎｌ ｙ ｉ ｅｆ ｅ ｎ ｅ ｆ ｃ ｕ ｅ ｎ ｌ ｆ ｅ ｏ
物进行测序 ， 将猪肺炎支原体不 同毒力株的 Ｐ ７ 因序列 的碱 基组成 和推导 的氨基酸序 列进行 比较 ， ９基 分析猪 肺炎 支原体黏附因子 Ｐ ７基 因变化与致病性的关系 。结果表明 ， ９ 猪肺炎支原体黏附因子 Ｐ ７ 因与菌株致病性 有一定 ９基 关系 ， 但除 Ｐ ７基因之外 ， ９ 还有其他与致病 有关 的基 因存在 。 关键 词 ： 猪肺炎支原体 ；黏附因子 ；毒力 ；序列
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猪链球菌9型钦州株的分离及其cps9H基因序列分析
摘要对临床疑似猪链球菌9型(SS9)的病料进行实验室诊断。
通过实验室检测结果证实,分离菌属于SS9,将其命名为QZ49;扩增其cps9H目的基因长为389 bp;与GenBank上国内外SS9毒株核苷酸同源性介于97.2 %~99.5 %之间。
关键词猪链球菌9型;cps9H基因;分离;序列分析
近年来,猪链球菌9型的流行趋势逐渐上升,在我国各省(市)均有不同程度的发生和流行[1-2],SS9已逐渐成为危害我国养猪业发展的疫病之一。
本研究就钦州疑似SS9症状的病料进行细菌分离、PCR扩增,并进行测序分析,以期为SS9的分子流行病学提供数据支持。
1材料与方法
1.1标准毒株及主要试剂
猪链球菌9型标准毒株(Y142株)由广西动物疫病预防控制中心实验室提供。
dNTP、Taq酶、蛋白酶K、SDS、饱和酚等购自TaKaRa公司;LB培养基购自GIBCOL公司。
1.2引物
根SS9荷兰5218株设计扩增cps9H基因引物:cps9H1:5′-GGCTACATATAATGGAAGCCC-3′;cps9H2:5′-CCGAAG TATCTGGGCTACTG-3′,预期扩增片段长约389bp。
1.3细菌培养、纯培养及涂片镜检
采集某猪场疑似SS9型症状的病料接种鲜血琼脂培养基,37 ℃培养12 h后观察。
挑选可疑的单个菌落接种于链球菌增菌培养基中,37 ℃培养20 h收取细菌液体培养物,涂片、革兰氏染色镜检。
1.4细菌的涂片镜检与DNA的抽提
取细菌纯培养物,涂片、革兰氏染色镜检。
之后取液体培养物1.5 mL按传统DNA抽提方法抽提DNA,获得的DNA模板用于下一步操作。
1.5cps9H基因扩增
取抽提的DNA模板进行cps9H基因的扩增,反应体系总体积25 μL,内含模板
2.0 μL,加10×Reaction Buffer 2.5 μL,dNTP(2.5 mmoL/μL)2.0 μL,Taq DNA酶(5 U/μL)0.25 μL,MgCl2(25 mmoL/L)1 μL,上下游引物(25 pmoL/μL)各0.5 μL,加ddH2O补至25 μL,置PCR仪中,95 ℃预变性5 min;94 ℃变性45 s,56 ℃退火45 s,72 ℃延伸60 s,30个循环;72 ℃延伸10 min。
完毕后取PCR产物5 μL在10 g/L 琼脂糖凝胶上电泳,置凝胶成像系统中观察结果。
1.6cps9H基因序列分析
PCR阳性产物纯化后送宝生物工程(大连)有限公司测序。
应用DNAStar软件将测序获得的SS9毒株cps9H基因序列截短并进行整理,与国内外已发表的SS9 cps9H基因序列进行核苷酸同源性分析,建立系统发育树。
2结果与分析
2.1细菌培养特征
该细菌在鲜血培养基上菌落呈针尖大小,圆形隆起,湿润透明,灰白色,为β-溶血;在血清肉汤中管底混浊呈沉淀状。
革兰氏染色为G+菌。
初步证实该分离菌属于猪链球菌9型。
2.2PCR扩增结果
扩增产物经10 g/L琼脂糖凝胶电泳,得到单一的约390 bp大小的目的片段(图1)。
2.3测序结果及核苷酸同源性分析
通过测序,得到389 bp核苷酸序列(图2)。
用DNAStar软化进行同源性分析,QZ49株与荷兰5218株的同源性是98.7%;与广西Y142、南京HA070725、湖北HB21都为99.5%;与河南HN、湖北HB22分别为98.2%和99.2%;与广州GZ0565同源性最低,仅为97.2%。
3结论与讨论
在猪链球菌35个血清型中,cps9H与其他34个血清型的序列同源性都很低,是国内外目前利用PCR技术鉴别诊断猪链球菌9型引物的主要基因组。
SS9是继SS2型之后的主要流行血清型,主要流行于澳大利亚、德国、比利时和荷兰[3]。
近些年来,在我国各省(市)也有关于SS9的报道[4-6],研究证实了SS9毒株确实已在钦州市的猪群中存在。
序列分析结果显示,钦州分离株与国内外其他SS9毒株核苷酸同源性都较高。
研究结果表明,钦州市现在流行的SS9毒株与国内外的流行毒株基本一致,没有发生太大的变异,预示在临床上重视控制SS2感染的同时,还应该加强防控SS9,以防在钦州市猪群中形成大规模的流行。
4参考文献
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[2] 熊毅,刘棋,覃芳芸,等.猪链球菌亚种及1、2、9型四重PCR检测方法的建立[J].广西农业科学,2007,38(6):681-684.
[3] WISSELINK H J,SMITH H E,STOCKHOFE-ZURWIEDEN N,et al. Distribution of capsular types and production of muramidase-released protein(MRP)and extracellular factor(EF)of Streptococcus suis strains isolated from diseased pigs in seven European countries[J].Vet Microbiol,2000,74(3):237-248.
[4] 李立虎.猪链球菌病的研究进展[J].畜牧与饲料科学,2009(2):173-174.
[5] 陈炜,刘平,郭仕坤,等.六安地区猪链球菌分离鉴定及药敏学试验[J].畜牧与饲料科学,2009(2):183-184.
[6] 李鹏,刘军,祝令伟,等.猪链球菌2型新毒力相关基因lin缺失菌株的构建[J].中国兽医学报,2010,30(5):643-646.。