大鼠心肌缺血再灌注损伤过程中血流动力学及炎症因子的表达变化
心肌缺血再灌注损伤介绍和实验设计
心肌缺血再灌注损伤介绍和实验设计心肌缺血再灌注损伤介绍和实验设计Ⅰ.心肌缺血再灌注损伤：它是指缺血心肌组织恢复血流灌注时，导致再灌注区心肌细胞及局部血管网显著的病理生理变化，这些变化共同作用可促使进一步的组织损伤。
那这里的关键词就是缺血心肌组织。
那为什么会产生缺血的心肌组织呢？这就与临床上的疾病有关了。
一些心脏疾病，比如急性心肌梗死、冠心病等他们会使心脏发生缺血的症状，其基本的生理过程就是心肌缺血。
Ⅱ.心肌缺血的危害：心肌缺血：指单位时间内的冠脉血流量减少，供给组织的氧量也减少，缺血必定存在缺氧表明缺血缺氧。
心肌缺血比单纯性心肌缺氧无血流障碍要严重，因为前者除了缺氧的影响之外，缺血组织也不能获得足够的营养物质又不能及时清除各种代谢产物带来的有害影响。
一、心肌缺血的原因主要分为两种情况：1是冠脉血流量的绝对不足。
这种情况是由自身疾病产生的，主要包括冠状动脉阻塞，冠状动脉痉挛。
2是冠脉血流量的相对不足：包括供氧降低或耗氧增加，比如高原高空或通风不良的矿井吸入氧减少；肺通气或换气功能障碍，可致血氧含量降低红细胞数量和血红蛋白含量减少等。
二、缺血对心肌的危害主要包括以下几个方面：1是心肌收缩能力降低。
2是导致心肌舒张功能降低。
3是心肌组织的血流动力学发生改变，比如说血流的阻力增加等。
4是心肌电生理的变化，比如说静息点位降低，传导速度减慢；室颤阈降低等。
5是导致心肌形态学的改变。
当然还有其他的危害，在这里就不一一列举了。
由于心肌缺血存在这么多的危害，临床上针对这一疾病采取了再灌注治疗方法，但随之而来的又是另外一个临床问题：缺血再灌注损伤。
下面具体介绍一下心肌缺血再灌注损伤。
心肌缺血再灌注损伤英文缩写为MIRI，最早由詹宁斯等于1960年提出，发现其临床表现为再灌注心律失常、心肌顿抑、心肌能量代谢障碍等现象。
随后又有学者在临床手术中也证实了这一观点，发现在冠脉搭桥术完成后，心肌坏死进一步加重的现象。
接着布朗沃尔德教授在1985年提出了这样一个观点：心肌再灌注是一把双刃剑，既可以损伤心肌也能保护心肌。
心肌缺血再灌注损伤及药物治疗研究进展
·297·心肌缺血再灌注损伤及药物治疗研究进展吴 玉 邓小红 绵阳市人民医院 四川绵阳 621000摘 要：心肌缺血在治疗过程中可能会出现再灌注损伤，在损伤程度逐渐加重情况下，梗死面积会有所增大，这种现象发生与氧自由基增加、钙超载以及炎症反应之间联系紧密。
随着此病治疗技术的不断提高，针对缺血再灌注阶段展开治已经周围治疗心肌缺血重点，并药物研究也是应重点关注的问题。
关键词：心肌缺血 再灌注损伤 药物治疗心肌缺血近几年发病率呈现逐年上升趋势，发病原因为多种因素造成的冠状动脉在血流量方面有所减低，造成心肌血液在供应过程中受到阻碍，代谢产物未能得到有效清除，营养物整体供应存在不足，最终使心肌细胞被损伤，甚至是出现死亡问题。
一般情况下，再灌注能够使受损心肌结构得到恢复，促进心脏功能改善，但是也可能会造成损伤加重，出现大面积梗死情况，也就是再灌注损伤[1]。
1钙超载钙离子属于细胞中的信使，能够发挥促进细胞分裂、增殖、能量代谢作用，人体处于正常状态时，细胞外部钙离子实际数量为细胞的内部钙离子几万倍，能够使细胞正常功能得以维持，钙离子超载为细胞中的钙离子出现过度积蓄的情况。
一旦其出现超载问题，线粒体膜会开放通透性转换孔，并且出现ATP消耗量增大等多种问题，钙超载情况下会引发MIRI[2]。
心肌缺血问题发生时，心肌膜会出现结构损伤，相应的钙离子体现出的通透性也会有所增加，细胞外部钙离子会以浓度梯度形式进入到细胞中，导致钙超载出现。
同时钙超载也可能和钙离子以及钠离子的交换逆转相关。
正常状态下，钙离子以及钠离子交换蛋白会将细胞中钙离子向细胞外运输，肌浆网、NXC等能够对正常钙浓度进行维持，在出现心肌缺血时，ATP实际生成含量会有所减少，并且钠泵活性有所下降，细胞当中的钙离子在浓度上上升明显。
再灌注过程中，细胞外部PH值会快速恢复。
使用药物时可以使用NCT，NCT属于双向转运蛋白，由一个钙离子和三个钠离子构成，能够使细胞内部钙离子向细胞外部转移，心肌缺血情况下，细胞胞浆会出现内酸中毒，进而对NHE产生刺激，细胞中的钠离子在浓度上会有所升高，进而使NCT出现反向运转，造成细胞内部出现钙超载问题[3]。
心肌缺血-再灌注损伤大鼠心电图变化机制的研究
心肌缺血-再灌注损伤大鼠心电图变化机制的研究王彦;赵英男;邹丽琳;许莹平;王冬梅;赵赫男【摘要】[目的]探讨大鼠心肌缺血再灌注损伤过程中,氧自由基及心肌细胞凋亡与缺血再灌注性心律失常的关系.[方法]建立大鼠心肌缺血-再灌注模型,对比缺血期与再灌注期的心律失常发生率及平均持续时间、ST段改变、心肌丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力、心肌细胞凋亡情况.[结果]缺血期房室传导阻滞、室性早搏及室速的发生率分别为7.5%、15%及10%;再灌注后分别为30%、67.5%及32.5%,与缺血期相比,再灌注后上述指标均明显增高.室速的平均发作时间由缺血期的(40±14)s上升到(495±103)s(P<0.01);再灌注后室颤平均持续时间为(198±22)s.再灌注后心肌MDA含量高于缺血组(P<0.01),且有逐渐递增趋势;心肌SOD活力较缺血组降低(P<0.01),再灌注120 min后下降趋缓.再灌注组心肌细胞凋亡明显高于缺血组(P<0.05).缺血再灌注损伤过程中,心律失常发生率与SOD活力变化呈负相关,与MDA值变化及心肌细胞凋亡变化均呈正相关.[结论]氧自由基及心肌细胞凋亡很可能是造成心肌缺血再灌注后心律失常的重要因素.【期刊名称】《大连医科大学学报》【年(卷),期】2010(032)002【总页数】6页(P160-165)【关键词】心肌缺血再灌注;心肌凋亡;心电图;氧自由基;再灌注性心律失常【作者】王彦;赵英男;邹丽琳;许莹平;王冬梅;赵赫男【作者单位】大连医科大学附属第二医院,实验中心,辽宁,大连,116027;黑龙江省疾病预防控制中心,黑龙江,哈尔滨,150023;大连医科大学,临床医学2005级7年制,辽宁大连116044;大连医科大学,临床医学2005级7年制,辽宁大连116044;大连医科大学,机能学实验室,辽宁,大连,116044;大连医科大学,病理生理学教研室,辽宁,大连,116044【正文语种】中文【中图分类】R544.1急性缺血心肌的血流得以恢复后出现的心律失常被称为缺血再灌注性心律失常(reperfusion arrhythmia，RA)。
四君子汤对大鼠在体心肌缺血-再灌注性心律失常及抗氧化
四君子汤对大鼠在体心肌缺血-再灌注性心律失常及抗氧化摘要心肌缺血-再灌注损伤是心血管病最常见的并发症之一。
本文研究了中药四君子汤（SJST）在大鼠心肌缺血-再灌注（I/R）损伤中的心脏保护作用和抗氧化效应。
结果表明，SJST能减轻心肌I/R损伤导致的心律失常和心肌激酶（CK-MB）浓度升高。
此外，SJST可以显著增加超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化酶（GSH-Px）的活性，而减少丙二醛（MDA）的生成量。
这些结果表明SJST具有对心脏的保护作用，可能是通过增加机体抗氧化能力而实现的。
背景心肌缺血-再灌注（I/R）损伤是心脏血管疾病中最常见的并发症之一，其发病机制包括氧化应激、炎症反应和细胞凋亡等。
常用的治疗方法包括血管扩张剂、血小板抑制剂和抗凝剂等。
然而，这些方法的疗效不甚理想，因此有人开始研究中药在心肌I/R损伤中的保护作用。
四君子汤是中草药方剂之一，是由黄精、人参、白术和甘草组成的。
此外，四君子汤已经应用于临床上治疗冠心病等心血管病，并且已经在很多研究中证明了其具有多种作用，如抗氧化、抗炎和抗凋亡。
然而，这些研究主要集中于细胞和小鼠水平，仅有少数研究报道SJST在心肌I/R损伤中的作用。
因此，本研究旨在探究SJST在心肌I/R损伤中的作用及其机制。
材料和方法动物模型使用50只健康雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠，体重250±20克。
大鼠同时放置于轻度麻醉下，通过左锁骨下方切开胸骨，将人工空气管插入支气管，将心脏暴露出来。
使用一根8-0丝线将左冠状动脉上沿近心端缝合，随后缝合线紧张，导致心肌缺血状态，然后在约30分钟后缝线松开，恢复血液供应，并进行心脏再灌注（I/R）。
药物实验对SD大鼠进行分组，患者随机抽样进入SJST组和空白对照组（对照组）。
SJST组的SD大鼠按照体重比例口服SJST（每毫升50mg）0.5毫升，每天两次，治疗时间为7天。
对照组的大鼠给予同等剂量的蒸馏水，口服方式相同。
当归注射液预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤后心肌组织中TRAIL的表达
正常体细胞 的生长 分化 。能迅速 诱导表 Ｔ Ｉ Ａ Ｒ Ｌ特异受 体 的
细胞发生凋亡［ 。
本实验采用免 疫组织 化学 方法 观察 当归注 射液 对缺 血／
再灌注过程心 肌的保 护作用 ， 研究 当归注射液抗 心肌缺 血／ 再
醇、 抗血栓形成 等作用 ， 临床用 于治 疗高 血压 病 、 缺血 性 心脏
凌娜佳 张端莲
（ 武汉大学医学院人体解剖与组织胚胎学系 武汉 ４ ０７ ） ３Ｏ １
摘 要： 目的 ： 观察 当归 注射液对 缺血再灌 注损 伤心肌细胞 内 ＴＲＡＩ Ｌ表达 的变化 ， 探讨 当归抗 心肌缺血再灌 注损伤保护作用 的机理 。方法 ： ３ 将 ５只 Ｓ Ｄ大 鼠随机分成 ４组 （ ＝１ ） 正常对照组 （ ０： ＝５ ； ） 假手术组（ ＝１ ） 缺血再灌 注组（ ０； ＝ｌ ） 当归治疗组 （ Ｏ； 一１ ）， ０ 建立在体心肌缺血再灌注 动物模 型 。实 验完 毕后 ， 将各 组动 物心 肌组 织做免 疫组 织化 学染 色 ， 察各组 动物 心肌 细胞 内 观 ＴＲＡＩ Ｌ表达的变化 。利用 ＨＰ ＡＳ２ ０ Ｉ －０ ０图像分析系统测定 Ｔ ＲＡＩ Ｌ在以上各组中表达的平均光密度 和平均 阳性面积率 。结果 ： 正常
病 。 目前在研究药物治疗心肌缺 血方面还 没有任 何一种 能绝
灌注损伤 的作用机理 。 旨在 指导临床合理应用 当归治疗 心血 管疾病 ， 开辟 当归在体外循环手术前和术 中应用 的新途径 。
１ 材 料 与 方 法
对减 少心肌梗死 ， 抗心 肌缺血 ［ 。当归 注 射液 是 由传统 中 对 ２ ］ 药 当归研 制而成 的一种 制剂 ， 于治 疗心 、 血管 疾病 ， 效 用 脑 疗
数 理 医 药 学 杂 志
灯盏花素对大鼠缺血再灌注心肌细胞凋亡及STAT表达的影响
２１ ００年 １ 月 ， ２ 我们观察 了灯盏 花素对 大 鼠心肌缺 血 再灌 注损 伤 （ Ｒ ） ＭＩＩ的保 护 作用 ， 讨 其 可能 的作 探
用 机 制 ， 临床 应用 提供 参考 。 为
１ 材料 与方 法
取 出硅胶管 ， 再灌注 ２ｈ 。假手术组仅分离前降支 ， 不 结扎 。
司 ） 。
Ｄ Ｂ显 色 ， 木素 复染 ， Ａ 苏 中性 树 胶 封 片 。 以 Ｄ Ａ酶 Ｎ 处 理切 片做 阳性对 照 ， 标记 液代替 Ｔ Ｎ Ｌ反应 液做 Ｕ Ｅ 阴性 对 照 。以 细 胞核 和 （ ） 胞 碎 片 呈 深 浅 不 一 或 细
的棕黄 色为 阳性 ， 张切片 随机选 取 １ 每 ０个视 野计 数
１ ２ 方 法 ．
凋 亡 阳性 细 胞 ， 凋 亡指 数 （ Ｉ ： Ｉ 视 野 内凋 计算 Ａ ） Ａ ＝（
将 大 鼠 随机 分 为 假 手 术 亡 细胞数 ／ 野 内所 有 细胞 数 ）Ｘ１０ 。② 免 疫 组 视 ０ ％
１ ２ １ 动物 分组 及 处 理 ． ．
组、 缺血再灌注组 、 灯盏花素 １ 组和灯盏花素 ２组各
±Ｓ 示 ， 量 资 料 多 组 间 比较 采 用 方 差 分 析 ， 表 计 两
两计 学 意 ．５
义。
有证 据表 明 ，Ｔ Ｔ ＳＡ １和 Ｓ Ａ ３激 活 对 心肌 具 有 相 反 ＴＴ
的作 用 ，Ｔ Ｔ Ｓ Ａ ３激 活抑制 心肌 细胞 凋亡 ， 挥心 肌保 发
１２ ２ 检测 方法 ．． 术 后 迅 速取 左 室 心 尖部 位 的心
肌 组织 制作 石 蜡 切 片 。① Ｔ Ｎ Ｌ法 检 测 心 肌 细 胞 ＵＥ 凋 亡 ： 蜡 切片 常规脱 蜡 ，％ Ｈ Ｏ 石 ３ ： 溶 液封 闭 ， 白 蛋 酶 Ｋ３ 【消 化 ３ ｉ， Ｔ Ｎ Ｌ混 合 液 ，７℃ 下 ７ｃ ＝ ０ｒｎ 加 Ｕ Ｅ ａ ３
PCNA在大鼠肠缺血再灌注损伤中的表达及意义
２４ ｌ一
ｏ ｖ ｉ ｎｃ ｆ ａｒａ ｅ， Ｏｎｅ —Ｗ ａ ＡＮ ＯＶＡ ） ｙ ，
表 １ 小肠缺血再灌注不 同时间点细胞凋亡表达
均 数 间 两 两 比 较 采 用 Ｎ ｗｍａ ～Ｋ ｕｓ ｅ ｎ ｅｌ ｑ
检验法 ，Ｐ＜０． ０ ５认为差异 有显著性 意
义 。
２ 结果
限 小 肠 黏 膜 所 发 生 的病 理 变 化 ， 们 通 过 我 检 ａＪ－ 缺 血 再 灌 注 后 不 同时 间点 小 肠黏 ｌ， ，￣ ＇ Ｊ
膜 形态 、 细胞凋亡情况及Ｐ ＣＮＡ的表达 ， 探 讨 小肠缺 血再 灌注 损伤 的性 质和 发展过 程， 为临床 实践 及防治 Ｉ Ｒ损伤提 供相关 ／
８ Ｃ Ｄ Ｅ Ｆ ０ Ｈ ｛
０
０
孕
０ ｅ ０
０
０
血管 明显充血 ； 再灌注后 ２ ｈ： ～６ 小肠绒毛 水 肿 明 显 ， 膜 及绒 毛 排 列 明显 紊乱 ， 膜 黏 黏
表 ２ 小肠缺血再灌注组各时间点细胞凋亡两两比较 （Ｐ ） 值
且 Ａ Ｂ
２ １ 小 肠 缺 血 再 灌 注 后 不 同时 限 小 ．
肠黏膜组织学 改变 对照组小肠黏膜基本 正常 ．Ｊ 缺血 再灌注后 ０ ｎ： ／肠 、 ｍｉ 黏膜 及绒 毛排 列轻 度紊乱 ， 绒毛缩短 ， 黏膜 变性 、 无
坏死 ， 出现上皮下间隙扩大 ， 腺体轻 度受损 ｆ
及毛 细 血 管 充 血 ； 灌 注 后 ３ ｒｉ １ 小 再 ０ ｎ～ ｈ： ａ 肠 绒 毛 明 显水 肿 ， 黏膜 及绒 毛 排 列 紊 乱 ， 多 数 绒 毛 黏膜 脱 落 呈 糜 烂 ， 体 受 损 及 毛 细 腺 ｝
HIF-1α抗心肌缺血再灌注炎性损伤的作用
HIF-1α抗心肌缺血再灌注炎性损伤的作用王文香;张妞妞;曾先燕;李廷瑞;吉晔楠;贺忠梅【摘要】目的:本文旨在通过稳定低氧诱导因子1α(HIF-1α)表达,探讨其在大鼠心肌缺血再灌注(I/R)所致炎性损伤中的作用及可能的机制.方法:60只清洁级雄性Wistar大鼠随机分为4组:假手术(sham)组、I/R组、HIF-1α稳定剂二甲基乙二酰甘氨酸(DMOG)+I/R组和HIF-1α抑制剂YC-1+I/R组.各组分别予相应处理后,用Western blot法检测心肌组织的Toll样受体4(TLR4)和核因子κB(NF-κB)的蛋白表达;real-time PCR检测白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、TLR4和NF-κB的mRNA水平;并利用试剂盒检测心肌组织的髓过氧化物酶(MPO)活性;HE染色观察炎性细胞浸润情况.结果:HIF-1α可明显降低心肌组织中炎性细胞的浸润、MPO活性及炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α的mRNA水平,同时降低TLR4和NF-κB的mRNA及蛋白水平(P<0.05).结论:HIF-1α可减轻心肌I/R 引起的炎性损伤,其机制可能与抑制TLR4/NF-κB信号通路激活有关.【期刊名称】《中国病理生理杂志》【年(卷),期】2018(034)007【总页数】5页(P1201-1205)【关键词】低氧诱导因子1α;心肌缺血再灌注损伤;炎症;TLR4/NF-κB信号通路【作者】王文香;张妞妞;曾先燕;李廷瑞;吉晔楠;贺忠梅【作者单位】山西医科大学基础医学院生理学系,细胞生理学山西省重点实验室,山西太原030001;山西医科大学基础医学院生理学系,细胞生理学山西省重点实验室,山西太原030001;山西医科大学基础医学院生理学系,细胞生理学山西省重点实验室,山西太原030001;苏州大学材料与化学化工学部,江苏苏州215123;山西医科大学基础医学院生理学系,细胞生理学山西省重点实验室,山西太原030001;山西医科大学基础医学院生理学系,细胞生理学山西省重点实验室,山西太原030001【正文语种】中文【中图分类】R542.2;R363缺血性心脏病是临床上致死率和致残率极高的疾病。
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ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｓｏｍａｔｏｓｔａｔｉｎ ｒｅｌｅａｓｅｄ ｆｒｏｍ ｃａｐｓａｉｃｉｎ ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ ｖａｇａｌ ａｎｄ
ｓｃｉａｔｉｃ ｓｅｎｓｏｒｙ ｆｉｂｒｅｓ ｏｆ ｔｈｅ ｒａｔ ａｎｄ ｇｕｉｎｅａ ｐｉｇ ［ Ｊ］ ．Ｅｕｒ Ｊ Ｐｈａｍａ－
ｃｏｌ， ２０００，３９９（２－３） ：２５１－２５８．
１．５３ ±０．２６ １．９２ ±０．３２ 倡＃ ２．２２ ±０．３４ 倡＃ ３．８３ ±０．４２ 倡＃ ４．１１ ±０．４８ 倡＃
１４３ ±１７ １４４ ±１８ １５１ ±１５ １４５ ±２１ １４２ ±８
２７７ ±３８ ２８４ ±４０ ２７９ ±４４ ２８２ ±３９ ２７６ ±４２
１．４６ ±０．１３ １．４９ ±０．２１ １．５０ ±０．１８ １．５２ ±０．２４ １．５５ ±０．２８
Ｓｕｒｇｅｒｙ， １９９６，１２０（２） ：２２７－２３２．
［１２］ 宋执华，金伟，张银华，等．国产十四肽生长抑素治疗重症急性
胰腺炎的临床研究［ Ｊ］ ．中国全科医学，２０１０，１３（２９） ：１７２－１７３．
［１３］ Ｔｈａｎ Ｍ， Ｎｅｍｅｔｈ Ｊ， Ｓｚｉｌｖａｓｓｙ Ｚ， ｅｔ ａｌ．Ｓｙｓｔｅｍｉｃ ａｎｔｉ－ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ
山东医药 ２０１４ 年第 ５４ 卷第 ４４ 期
［７］ Ｋｏｊｉｍａ Ｍ， Ｔａｎａｂｅ Ｍ， Ｓｈｉｎｏｄａ Ｍ， ｅｔ ａｌ．Ｒｏｌｅ ｏｆ ｈｉｇｈ ｍｏｂｉｌｉｔｙ ｇｒｏｕｐ ｂｏｘ ｃｈｒｏｍｏｓｏｍａｌ ｐｒｏｔｅｉｎ １ ｉｎ ｉｓｃｈｅｍｉａ－ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ ｉｎｊｕｒｙ ｉｎ ｔｈｅ ｒａｔ ｓｍａｌｌ ｉｎｔｅｓｔｉｎｅ［ Ｊ］ ．Ｊ Ｓｕｒｇ Ｒｅｓ， ２０１２，１７８（１） ：４６６－４７１．
４５
压（ＭＡＰ）、心率（ ＨＲ）；右侧颈内静脉穿刺置管，用 于采集血样及给药。 沿左锁骨中线切开皮肤 ２ ｃｍ， 在 ４、５ 肋间打开胸腔，剪开心包，轻压右侧胸廓，挤 出心脏，用 ６－０ ＰＲＯＬＥＮＥ 缝线作一线结，在左冠状 动脉前降支下穿过，稳定 １０ ｍｉｎ 后拉紧结扎线 ３０ ｍｉｎ，造成局部心肌缺血。 表现为左冠状动脉所支配 的局部心肌出现发绀，血压下降，ＥＣＧ 出现心肌梗 死改变（ 如 ＳＴ－Ｔ 升高或压低等）。 松开结扎线后， 抬高 ＳＴ 段可相对降低（ ＞５０％），血压恢复，且缺血 区心外膜颜色恢复红润作为再灌注成功的标准［６］ 。 Ｂ 组仅在左冠状动脉前降支下穿线不结扎。 １．２．２ 血流动力学观察 缺血前即刻、缺血 ３０ ｍｉｎ 及再灌注 ３０、６０、１２０ ｍｉｎ 时记录 ＨＲ、ＭＡＰ，并计算 心肌氧耗指数（ＲＰＰ 为 ＨＲ 和 ＭＡＰ 的乘积）。 １．２．３ 血清炎症因子检测 分别于上述时点采集 血清标本，ＥＬＩＳＡ 法检测血清 ＩＬ－１、ＩＬ－６、ＴＮＦ－α，按 试剂盒说明书操作。 １．２．４ 心肌组织炎症因子检测 采集完血样，Ａ 组 再次结扎左冠状动脉前降支，取前降 支结扎线下 ２ ｍｍ至心尖部左心室缺血心肌组织 １００ ｍｇ；捣碎组 织，按 １ ｍｇ ／Ｌ 加入含蛋白酶抑制剂与细胞裂解液的 混合物 ４ ℃过夜；以 ２０ ０００ ｒ ／ｍｉｎ 离心 ２０ ｍｉｎ，取上 清于 －８０ ℃保存待测。 Ｂ 组在心脏同样部位穿线 但不结扎， 于 相 同 时 间 点 采 用 相 同 方 法 采 集 标 本。 操作过程同血清内细胞因子检测，同时用考马斯亮 蓝蛋白测定法检测每个组织标本的蛋白含量，得出 数值后，将匀浆液中的细胞因子含量（ ｍＬ） 换算成蛋 白中的细胞因子含量（ ｍｇ） 。 １．２．５ 心肌组织学观察 取部分心肌组织固定、脱 水、石蜡包埋、切片，行 ＨＥ 染色压片；显微镜下观察 心脏病理形态以及炎症细胞分布情况，由同一个观 察者按照单盲的原则评估。 １．２．６ 统计学方法 采用 ＳＰＳＳ１１．０ 统计软件。 计 量资料以 ｘ珋±ｓ 表示，组间比较采用单因素方差分 析。 Ｐ≤０．０５ 为差异有统计学意义。 ２ 结果 ２．１ 两组各时点血流动力学变化 见表 １。 ２．２ 两组各时点血清 ＩＬ－１、ＩＬ－６、ＴＮＦ－α比较 见 表 ２。 ２．３ 两组心肌组织 ＩＬ－１、ＩＬ－６、ＴＮＦ－α表达比较 见表 ３。 ２．４ 两组心肌组织病理表现 Ａ 组可见心肌组织 纹理紊乱，细 胞 核 不 规 则， 并 出 现 大 量 炎 症 细 胞 浸 润；Ｂ 组可见心肌细胞排列整齐，组织纹理清晰，无 明显炎性细胞浸润。
［８］ 吕艺，盛志勇，侯晓霞，等．肠缺血—再灌流大鼠不同组织 ＴＮＦ－ α和 ＩＬ－６ ｍＲＮＡ 表 达 的 规 律 及 意 义 ［ Ｊ］ ．解 放 军 医 学 杂 志 ， １９９９，２４（２） ：９４－９６．
［９］ 杨洁，张海霞，赵东伟，等．参附注射 液对肠缺血再灌注大鼠肝 肾功能及 ＴＮＦ－α、 ＩＬ－６ 水 平 的 影 响 ［ Ｊ ］ ．山 东 医 药 ， ２０１２， ５２ （１９） ：２７－２８．
关键词：缺血再灌注；血流动力学；炎症因子；大鼠
ｄｏｉ： １０．３９６９ ／ｊ．ｉｓｓｎ．１００２－２６６Ｘ．２０１４．４４．０１７ 中图分类号：Ｒ３９２．１１ 文献标志码：Ａ 文章编号：１００２－２６６Ｘ（２０１４）４４－００４５－０３
急性心肌梗死（ ＡＭＩ） 最有效的治疗方法是尽早 行再灌注治疗［１，２］ ，但再灌注损伤是无法避免的问 题。 心肌缺血时，新陈代谢障碍，从而继发一系列功 能障碍；但当缺血心肌组织血流恢复后，会出现组织 细胞损伤加重的病理状态，导致心肌功能障碍或心 律失常，称为心肌缺血再灌注损伤［３］ 。 炎症因子是 参与心 肌 缺 血 再 灌 注 损 伤 的 一 个 重 要 因 素［４，５］ 。 ２０１３ 年 １０ 月 ～２０１４ 年 ４ 月，我们建立了大鼠心肌 缺血再灌注损伤模型，观察再灌注后血流动力学变 化，及心肌组织与不同时段血清炎症因子白细胞介 素 １（ＩＬ－１）、ＩＬ－６ 及肿瘤坏死因子 α（ ＴＮＦ－α） 的表达 变化。 现报告如下。
注：与同组缺血前即刻比较，倡 Ｐ ＜０．０５；与 Ｂ 组 同 时 点 比 较，＃ Ｐ
＜０ ．０５
表 ３ 两组大鼠心肌组织中 ＩＬ－１、ＩＬ－６、ＴＮＦ－α 表达比较（ｐｇ ／ｍｇ，珔ｘ ±ｓ，ｎ ＝１５）
组别 Ａ组 Ｂ组
ＩＬ－１ ３３．１５ ±３．６３ 倡 １４．２０ ±１．８３
ＩＬ－６ ３６．７２ ±３．４５ 倡 １６．２６ ±２．４０
ＴＮＦ－α ９．２３ ±０．９３ 倡 ５．２６ ±１．０１
注：与 Ｂ 组比较，倡 Ｐ ＜０．０５
３ 讨论 １９６０ 年 Ｊｅｎｎｉｎｇｓ 等［７］ 首次描述了心肌缺血再 灌注损伤这一现象，随后该现象引起了人们的广泛 关注。 缺血再灌注损伤指在缺血基础上恢复血流供 应后组织损伤反而加重，甚至发生不可逆性损伤的 现象［８］ ，心肌组织中可 表现为心肌的舒缩功 能降 低、心律失常、心肌顿抑、微循环障碍等，其中一些表 现为可逆性［９］ 。 目前，关于炎症因子在缺血再灌注 损伤中的作 用 研 究 较 广 泛， 且 研 究 结 论 富 有 争 议。 大多数动物实验表明，在心肌缺血再灌注过程中，促 炎因子表达升高，且两者具有一定相关性；但在临床
基金项目：安徽省高等学校省级自然科学研究项目（ ＫＪ２０１３Ｚ１０８ ） ；安 徽省科技重点项目（１３０１０４３０２５） 。
１ 材料与方法 １．１ 材料 健康雄性 ＳＤ 大鼠 ３０ 只（ 香港大学实 验动物中心提供），体质量 ２５０ ～３００ ｇ。 ＭＯＤＥＬ ６８３ 动物呼吸机（Ｈａｒｖａｒｄ 公司，美国），ＰｏｗｅｒＬａｂ Ｓｙｓｔｅｍｓ 心电记录仪（ＡＤ 公司，澳大利亚），ＩＬ－１、ＩＬ－６、ＴＮＦ－α ＥＬＩＳＡ 试剂盒均购自美国 Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ 公司。 １．２ 方法 １．２．１ 分组与造模 将 ３０ 只大鼠随机分为 Ａ、Ｂ 组各 １５ 只，Ａ 组制备心肌缺血再灌注损伤模型：大 鼠腹腔注射 ３％戊巴比妥钠 ７５ ｍｇ ／ｋｇ 麻醉，经口气 管插管，接呼吸机机械通气（ 吸入气体为室内空气 混入 ０．５ Ｌ ／ｍｉｎ 氧气），设置潮气量 ２ ～３ ｍＬ ／１００ ｇ， 通气频率 ６０ ～８０ 次 ／ｍｉｎ，吸呼比 １∶１，维持 ＰＥＴ ＣＯ２ ３０ ～４０ ｍｍＨｇ。 行右颈总动脉切开置管，接压力换 能器，连接心电记录仪记录心电图（ ＥＣＧ）、平均血
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山东医药 ２０１４ 年第 ５４ 卷第 ４４ 期
表 １ 两组大鼠各时点血液动力学变化（珔ｘ ±ｓ， ｎ ＝１５）
组别
Ａ组 缺血前即刻 缺血 ３０ ｍｉｎ 再灌注 ３０ ｍｉｎ 再灌注 ６０ ｍｉｎ 再灌注 １２０ ｍｉｎ Ｂ组 缺血前即刻 缺血 ３０ ｍｉｎ 再灌注 ３０ ｍｉｎ 再灌注 ６０ ｍｉｎ 再灌注 １２０ ｍｉｎ
［１０］ 刘丕，朱勇，徐龙，等．加倍生长抑素 联合早期肠内营养对重症 急性胰腺炎炎症因子和肠通透性的影响［ Ｊ］ ．山东医药，２０１０，
５０（２５） ：６－８．
［１１］ Ｔｅｉｔｅｌｂａｕｍ ＤＨ， Ｄｅｌ Ｖａｌｌｅ Ｊ， Ｒｅｙａｓ Ｂ， ｅｔ ａｌ．Ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｉｎｔｒａｅｐｉ－
ｔｈｅｌｉａｌ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ ｔｈｅ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ｓｏｍａｔｏｓｔａｔｉｏｎ ［ Ｊ］ ．
ＩＬ－１ （ ｐｇ ／ｍＬ）
ＩＬ－６ （ ｐｇ ／ｍＬ）
ＴＮＦ－α （ ×１０３ ，ｐｇ ／ｍＬ）
１４６ ±１８ １９８ ±２８ 倡＃ ２５５ ±２８ 倡＃ ３６７ ±３０ 倡＃ ４１８ ±２４ 倡＃
２８３ ±４１ ３９８ ±２８ 倡＃ ５２１ ±３７ 倡＃ ５６７ ±４２ 倡＃ ５９２ ±４０ 倡＃
表 ２ 两组大鼠各时点血清 ＩＬ－１、ＩＬ－６、ＴＮＦ－α 比较（珔ｘ ±ｓ， ｎ ＝１５）
组别
Ａ组 缺血前即刻 缺血 ３０ ｍｉｎ 再灌注 ３０ ｍｉｎ 再灌注 ６０ ｍｉｎ 再灌注 １２０ ｍｉｎ Ｂ组 缺血前即刻 缺血 ３０ ｍｉｎ 再灌注 ３０ ｍｉｎ 再灌注 ６０ ｍｉｎ 再灌注 １２０ ｍｉｎ
（ 收稿日期：２０１４－０６－１６）