微生物检验洁净室确认方案
1概述
本厂微生物限度检验室位于综合办公楼二楼西北部，于2013年新建成，洁净室主要为微生物限度检验室、效价室与阳性菌室，功能间设计能满足微生物限度检验要求。微生物限度检验室与效价室共用一套空气净化系统，阳性菌室用一套空气净化系统。
微生物限度检测室、效价室、阳性菌室人流与物流分开，效价室和阳性菌室相对缓冲室为负压，空气为直排，为了防止排放的空气的污染，在排放口加装净化装置。洁净区分别设有C级区域，净化工作台局部A级。微生物限度检测室的面积为8.7m2、效价室的面积为9.3m2、阳性菌室的面积为9.0m2。
洁净室内设计参数：温度18～26℃、相对湿度45～65%、室内与室外静压差为≥10Pa。2确认目的
本厂为北京中新制药集团异地新建厂房，检验室亦为新建，为保证检验结果的正确性和有效性，需对微生物限度检验洁净室进行确认，确保其能够满足微生物限度检验的要求。3确认范围及依据
3.1方案适用于本厂微生物限度检验洁净室的确认。
3.2依据
序号文件名称文件编号
1 中国药典2010年版二部
2 药品生产质量管理规范2010年修订
3 药品GMP指南质量控制实验室与物料系统2011年版
4验证小组成员及职责
部门姓名职位确认工作中职责
质量部QC主管
负责起草确认方案，方案的实施；
负责起草确认报告；
负责复审确认记录；
负责对相关人员进行培训。
QC
负责按确认方案要求实施确认和记录结果；
负责报告确认中发生的任何偏差。
QA主管负责审核确认方案、确认记录和确认报告。负责监督本方案实施。
质量部长负责审核确认方案、确认记录和确认报告；负责确保本方案正确实施，并提供资源；负责对发生的偏差组织调查。
质量副总验证组长：负责批准确认方案和确认报告。质量受权人负责确认方案、确认报告的审核及评价
质量管理负
责人验证领导小组组长：负责确认方案、确认报告的批准，提供资源。
5确认方案培训
确认方案起草人在方案经验证领导小组批准后及确认方案实施前，对本次确认实施的相关人员组织培训工作，由QC主管负责该次验证方案的培训工作，明确分工。
培训记录：
方案名称微生物检验洁净室确认方案
培训时间培训人
序号接受培训人序号接受培训人序号接受培训人
1 2 3
4 5 6
7 8 9
6确认进度计划
年月日开始，年月日结束。
7确认方案的执行
7.1确认数据的记录与审核
确认数据应记录在已批准方案的记录表中，并要有执行者的签名与日期。
在验证执行中产生的原始数据，包括收集的附加数据单，计算机建立和打印的数据、系统产生的数据单、色谱图等，必须作为验证报告的附件，并在相应的确认记录表的“包括附件”栏中注明，建立索引关系。
确认完毕拟制确认报告，需注明每项总结内容与确认方案中记录表、附件的索引关系。
7.2文件要求
书写或打印应清晰。
所有的工作只使用不退色的笔记录。
修改时要求在错处划单线，签名、日期和必要时的说明。
8确认内容
洁净室的悬浮粒子(≥0.5μm、≥5μm)数、沉降菌、浮游菌指标应符合GMP规范中C级洁净区洁净度规定,净化工作台应符合GMP规范中A级洁净区洁净度规定，其中悬浮粒子、温湿度、压差在系统开始完成自净后开始检测，沉降菌、浮游菌在悬浮粒子等合格后进行检测，连续监测三个消毒灭菌周期（三天）。
8.1自净时间的确定
选择三个有代表性的房间：微生物限度检验室、效价室与阳性菌室。在开启空调机组前监测各房间的悬浮粒子数，然后开启空调机组，监测各房间的悬浮粒子数，记录达到标准规定的时间，依此来确定自净时间。要求自净时间应小于20分钟。
表8.1-1 自净时间测定记录表
操作间名称洁净度
级别
悬浮粒子数（静态，个/m3）
≥5.0μm（2900个/ m3）≥0.5μm（352000个/ m3）
时间（min）0 10 20 30 0 10 20 30 微生物限度检验室C级
效价室C级
阳性菌室C级
结论
检查人日期年月日复核人日期年月日
8.2房间静压差测定
进行房间静压差测定的目的是查明洁净室和邻室之间是否保持必须的正压或负压，从而知道空气的流向。根据测定结果调整空调系统，使各房间静压差符合设计标准要求。
可接受标准：洁净室与室外的压差应≥10Pa
将测定结果记录于表8.3-1。
8.3房间温湿度测定
进行房间温湿度测定的目的是确认HVAC系统具有将洁净厂房温度、相对湿度控制在设计要求范围内的能力。
可接受标准：温度18～26℃相对湿度45～65%。
将温度、相对湿度监测及评价结果分别记录于表8.3-1。
表8.3-1 房间压差、温湿度记录
日期房间压差（Pa）温度（℃）相对湿度（%）结论限度室一更
限度室二更
限度室缓冲
微生物限度室
效价室一更
效价室二更
效价室缓冲
效价室
阳性菌室一更
阳性菌室二更
阳性菌室缓冲
阳性菌室
限度室一更
限度室二更
限度室缓冲
微生物限度室
效价室一更
效价室二更
效价室缓冲
效价室
阳性菌室一更
阳性菌室二更
阳性菌室缓冲
阳性菌室
限度室一更
限度室二更
限度室缓冲
微生物限度室
效价室一更
效价室二更
效价室缓冲
效价室
阳性菌室一更
阳性菌室二更
阳性菌室缓冲
阳性菌室
结论
确认人日期年月日复核人日期年月日
8.4悬浮粒子的测定
方法：按《GBT16292-2010医药工业洁净区（室）悬浮粒子测试方法》及《悬浮粒子检验操作规程》进行悬浮粒子的测定。采用计数浓度法，即通过测定洁净环境内单位体积空气中含大于或等于某粒径来评定洁净室（区）的悬浮粒子洁净度等级。测量时，每个点计数3次，然后求其平均值。
测试仪器：尘埃粒子计数器
测试状态：系统至少运行30分钟后进行。
可接受标准：C级≥0.5μm悬浮粒子数/m3 ≤352000粒
≥5μm悬浮粒子数/m3 ≤2900粒
房间取样位置示意图
将悬浮粒子监测及评价结果分别记录于表8.4-1。
表8.4-1 悬浮粒子测试结果
日期
房间
悬浮粒子数（静态，个/m3）
≥0.5μm（352000个/ m3）≥5.0μm（2900个/ m3）
1点2点平均UCL 1点2点平均UCL 限度室一更
限度室二更
限度室缓冲
微生物限度室
效价室一更
效价室二更
效价室缓冲
效价室
阳性菌室一更
阳性菌室二更
阳性菌室缓冲
阳性菌室
限度室一更
限度室二更
限度室缓冲
微生物限度室
效价室一更
效价室二更
效价室缓冲
效价室
1⊙ 2 ⊙
阳性菌室一更
阳性菌室二更
阳性菌室缓冲
阳性菌室
限度室一更
限度室二更
限度室缓冲
微生物限度室
效价室一更
效价室二更
效价室缓冲
效价室
阳性菌室一更
阳性菌室二更
阳性菌室缓冲
阳性菌室
结论
检查人日期年月日复核人日期年月日
8.5沉降菌测定
方法：在HVAC系统至少运行30min，操作室的温度、相对湿度及空气压差达到要求后，进行沉降菌测定。将注有普通肉汤琼脂培养基的Ф90mm玻璃培养皿，放置在采样点，打开平皿盖，使培养基表面暴露4h后，将培养皿盖盖上，然后在30～35℃条件下培养48h后计数。采样点的位置同悬浮粒子检测点。
可接受标准
洁净度级别采样频率微生物最大允许数cfu /4小时
C级每个点放1个皿，每个皿放置4h 50
将沉降菌监测及评价结果分别记录于表8.6-1。
8.6浮游菌测定
方法：沉降菌取样结束后，进行浮游菌测定，用浮游菌采样仪定量取空气样喷注到Ф90mm玻璃培养皿内普通肉汤琼脂培养基表面，盖上培养皿盖，然后在30～35℃条件下培养48h后计数。采样点的位置同沉降菌检测点。
可接受标准
洁净度级别微生物最大允许数（cfu/m3）
C级100
将浮游菌监测及评价结果分别记录于表8.6-1。
表8.6-1 沉降菌、浮游菌检测结果
沉降菌数（静态cfu/4h）浮游菌(cfu/m3) 日期操作间名称
≤50 ≤100
限度室一更
限度室二更
限度室缓冲
微生物限度室
效价室一更
效价室二更
效价室缓冲
效价室
阳性菌室一更
阳性菌室二更
阳性菌室缓冲
阳性菌室
限度室一更
限度室二更
限度室缓冲
微生物限度室
效价室一更
效价室二更
效价室缓冲
效价室
阳性菌室一更
阳性菌室二更
阳性菌室缓冲
阳性菌室
限度室一更
限度室二更
限度室缓冲
微生物限度室
效价室一更
效价室二更
效价室缓冲
效价室
阳性菌室一更
阳性菌室二更
阳性菌室缓冲
阳性菌室
结论
检查人日期年月日复核人日期年月日
8.7确认结论
确认结论：
包括附件：
评价人：年月日
9变更及偏差管理
若确认方案需要变更，须按方案制定时的审批程序进行批准；若系统发生重大变更，应重新制定确认方案。其它变更按变更控制管理规程进行处理。
确认过程中应严格按照本确认方案执行，出现个别项目不符合标准结果时，应按偏差管理规程进行处理。
所有偏差、异常情况处理过程均应记录备案，并记录于确认过程漏项、偏差记录中。
确认过程漏项、偏差记录
漏项或偏差描述：
签名：年月日漏项或偏差原因分析：
签名：年月日漏项或偏差处理措施：
签名：年月日
漏项或偏差处理结果：
签名：年月日
10确认周期
10.1设备变更等引起的再确认
当设备有下列情况时，其确认状态受到影响应进行再确认：
经历重大维修，或更换关键部件；
空气净化系统停用超过3个月；
由偏差，数据超出标准或数据趋势分析引起。
10.2定期再确认
正常情况下，再确认周期为1年。
11确认结果的评价与建议
11.1验证小组负责收集各项确认、试验结果记录，根据确认、试验结果起草验证报告、标准操作规程、维护保养规程等，报验证委员会。
11.2验证委员会负责对确认结果进行综合评审。评审内容包括：
确认试验是否有遗漏。
确认实施过程中对确认方案有无修改，修改原因、依据以及是否经过批准。
确认记录是否完整。
确认试验结果是否符合标准要求，偏差及对偏差的说明是否合理，是否需要进一步补充试验。
微生物检验技术基础知识模拟题12
微生物检验技术基础知识模拟题12 一、最佳选择题 1. SS琼脂培养基属于 A.厌氧培养基 B.营养培养基 C.鉴别培养基 D.选择培养基 E.特殊培养基 答案：D SS琼脂含有抑制剂胆盐、煌绿、硫代硫酸钠，对大肠埃希菌有较强的抑制作用，而对肠道致病菌则无明显抑制作用，是沙门菌属及志贺菌属的强选择培养基。 2. 从脑脊液中分离培养，能在血平板上生长的细菌最可能是 A.脑膜炎奈瑟菌 B.军团菌 C.变形杆菌 D.伤寒沙门菌 E.金黄色葡萄球菌 答案：A 脑膜炎奈瑟菌为流行性脑脊髓膜炎(流脑)的病原菌，引起化脓性脑脊髓膜炎，可从脑脊液中分离培养，而且培养条件要求较高，普通培养基上不生长，在含有血清或血液的培养基上方能生长。 3. 病毒长期保存最好的方法是 A.-20℃冰箱 B.-80℃冰箱 C.-70℃冰箱
答案：D 冷冻干燥法是保存病毒最好的方法，用此方法病毒可长期保存。 4. 痰标本涂片抗酸染色，如镜检找到抗酸杆菌，报告时符号“++”代表 A.多数视野能发现1～9个以上的抗酸杆菌 B.多数视野发现10个或10个以上的抗酸杆菌 C.全片发现1～2个抗酸杆菌 D.全片发现1～9个抗酸杆菌 E.全片未发现抗酸杆菌 答案：A 痰标本检查结核分枝杆菌，行涂片与抗酸染色，如镜检时多数视野能发现1～9个以上的抗酸杆菌，可报告“++”。 5. SPA是指 A.肺炎克雷伯杆菌A蛋白 B.金黄色葡萄球菌A蛋白 C.链球菌A蛋白 D.表皮葡萄球菌A蛋白 E.大肠埃希菌A蛋白 答案：B SPA是金黄色葡萄球菌细胞壁成分中的A蛋白，能与人及多种哺乳动物血清中的IgG类抗体的Fc段非特异结合，常用作协同凝集试验。 6. 结核分枝杆菌在液体培养基中培养时出现的现象是 A.混浊生长 B.沉淀生长
微生物实验室现场检查
微生物实验室要求 微生物检验实验室操作技术要求 第一节实验室管理制度 一、实验室管理制度 1 ．实验室应制定仪器配备管理、使用制度，药品管理、使用制度，玻璃器皿管理，使用制度，并根据安全制度和环境条件的要求，本室工作人员应严格掌握，认真执行。 2 ．进入实验室必须穿工作服，进入无菌室换无菌衣、帽、鞋，戴好口罩，非实验 室人员不得进入实验室，严格执行安全操作规程。 3 ．实验室内物品摆放整齐，试剂定期检查并有明晰标签，仪器定期检查、保养、 检修 , 严禁在冰箱内存放和加工私人食品。 4 ．各种器材应建立请领消耗记录，贵重仪器有使用记录，破损遗失应填写报告； 药品、器材、菌种不经批准不得擅自外借和转让，更不得私自拿出，应严格执行《菌种保管制度》。 5 ．禁止在实验室内吸烟、进餐、会客、喧哗，实验室内不得带入私人物品，离开 实验室前认真检查水、电、暖气、门窗，对于有毒、有害、易燃、污染、腐蚀的物品和废弃物品应按有关要求执行。 6 ．科、室负责人督促本制度严格执行，根据情况给于奖惩，出现问题立即报告， 造成病原扩散等责任事故者，应视情节直至追究法律责任。 二、仪器配备、管理使用制度 1 ．食品微生物实验室应具备下列仪器：培养箱、高压锅、普通冰箱、低温冰箱、厌氧培养设备、显微镜、离心机、超净台、振荡器、普通天平、千分之一天平、烤箱、冷冻干燥设备、匀质器、恒温水浴箱、菌落计数器、生化培养箱，电位 pH 计、高速离心机。 2 ．实验室所使用的仪器、容器应符合标准要求，保证准确可靠，凡计量器具须经 计量部门检定合格方能使用。 3 ．实验室仪器安放合理，贵重仪器有专人保管，建立仪器档案，并备有操作方法，保养、维修、说明书及使用登记本，做到经常维护、保养和检查，精密仪器不得随意移动，若有损坏需要修理时，不得私自拆动、应写出报告、通知管理人员，经科室负责人同意填报修理申请、送仪器维修部门。
检验科微生物实验室生物安全事件应急预案
检验科微生物实验室生物安全事件应急预案 This manuscript was revised by JIEK MA on December 15th, 2012.
检验科微生物实验室生物安全事件应急预案为了有效的预防微生物实验室生物污染，有效应对实验室突发污染事件，保证实验结果的科学准确，保障实验工作人员的健康、生命财产安全，防止实验室污染对周围环境造成严重污染，加强检验工作的质量控制和实验室的管理，根据《中华人民共和国传染病防治法》、《突发公共卫生事件应急条例》和《实验室生物安全通用要求》等相关法律法规的规定，特制定本预案，确保一旦发生实验室污染事件及安全事故时，能及时、规范、科学、迅速有效地控制。 一、适用范围 本预案适用于微生物实验室发生的、与实验室安全相关的、危害科室工作人员健康以及社会公众健康和社会稳定的所有事件。主要包括：1．病原微生物的实验室污染事件； 2．工作人员受到实验室内有毒病原微生物的感染或侵害； 3．病原微生物被泄漏出实验室事件。 4．由于停电、火灾等不可预测因素所引起的实验室其他污染事件。 当出现以上适用范围中的任意情况，启动本预案。 二、应急管理小组 有微生物实验室生物安全事件应急管理小组，科主任任组长，制定实验室生物安全防护指导方针，规划对实验室的硬件建设、组织实施科学管理。在实验室生物安全事件发生时，决策指挥，调动人员，全面部署。发生突发事件后应急处理小组全体成员，应立即按实验室污染突发事件处理
的技术规范，采取有效措施控制事件、调查原因，减少人员伤亡和财产损失。 三、预防措施 1．加强实验室标准化建设，对实验室设备的配置、个人防护和实验室安全行为应按《实验室生物安全通用要求》做出明确规定。 2．建立实验室病原微生物专库，对于传染病病原样本建立严格的监督管理制度。 3．增强安全意识，合理完善实验室生物安全的各项规章制度。把生物安全管理责任和措施落到实处，消除安全隐患。实验室工作人员应自觉遵守实验室生物安全管理规定，严格按照操作规程和技术规范开展研究工作。 4．提高警惕，加强安全保卫，防止不法之徒盗窃病原微生物和有毒有害化学试剂，用于对人群进行生物化学恐怖攻击，对公众健康产生严重损害，影响社会稳定。 5．建立有效的预警机制，为各种病原微生物和有毒有害化学试剂建立档案和使用纪录，填写准确。每次使用后及时登记，发现遗失或被盗，立即报告。 6．建立实验室工作人员健康档案，定期体检。发现与实验室生物安全有关的人员感染或伤害应立即报告。 7．定期开展自查，及时发现安全隐患，发出预警通报。 四、应急控制措施
微生物检验技术基础知识模拟题9
微生物检验技术基础知识模拟题9 一、单项选择题 以下每一道考题下面有A、B、C、D、E 5个备选答案。请从中选择1个最佳答案。 1. 脑膜炎奈瑟菌初次分离培养时需提供 A.5～10%CO2 B.1%CO2 C.5～10%O2 D.0.9%NaCl E.10%CaCl2 答案：A 2. 溶脲脲原体生长的最适pH是 A.6.0～6.5 B.6.5～7.5 C.7.2～7.4 D.7.5～8.0 E.7.0～7.5 答案：A 3. 能引起婴幼儿和旅游者腹泻的大肠埃希菌是 A.EPEC B.EIEC C.EFEC D.EHEC E.EAggEC
答案：C 4. 梅毒螺旋体感染局部出现无痛性硬性下疳见于 A.一期梅毒 B.二期梅毒 C.三期梅毒 D.四期梅毒 E.五期梅毒 答案：A 5. 噬菌体在电子显微镜下观察可见3种形态 A.蝌蚪形、微球形和细杆形 B.螺旋形、蝌蚪形和细杆形 C.双球形、丝形和螺旋形 D.蝌蚪形、丝形和细杆形 E.蝌蚪形、微球形和丝形 答案：A 6. 基础琼脂培养基中的成分不包括 A.琼脂 B.牛肉膏 C.蛋白胨 D.NaCl E.水解酪蛋白 答案：E 7. 流感病毒中易引起大规模流行的是 A.甲型流感病毒
B.乙型流感病毒 C.丙型流感病毒 D.甲型流感病毒和丙型流感病毒 E.甲型流感病毒和乙型流感病毒 答案：A 8. 白喉毒素的作用机制是 A.阻断上下神经元之间正常抑制性神经冲动的传递 B.增强对内毒素的敏感性 C.使细胞内延伸因子2灭活，影响蛋白质的合成 D.抑制胆碱能运动神经释放乙酰胆碱 E.作用于脊髓前角运动神经细胞 答案：C 9. 煮沸法杀死芽胞最短需要 A.10min B.20min C.1h D.1.5h E.2h 答案：C 10. 大肠埃希菌O157:H7是 A.EPEC的主要血清型 B.EIEC的主要血清型 C.ETEC的主要血清型 D.EHEC的主要血清型 E.EAggEC的主要血清型
微生物实验室要求
微生物检验实验室操作技术要求 第一节实验室管理制度 一、实验室管理制度 1．实验室应制定仪器配备管理、使用制度，药品管理、使用制度，玻璃器皿管理，使用制度，并根据安全制度和环境条件的要求，本室工作人员应严格掌握，认真执行。 2．进入实验室必须穿工作服，进入无菌室换无菌衣、帽、鞋，戴好口罩，非实验室人员不得进入实验室，严格执行安全操作规程。 3．实验室内物品摆放整齐，试剂定期检查并有明晰标签，仪器定期检查、保养、检修, 严禁在冰箱内存放和加工私人食品。 4．各种器材应建立请领消耗记录，贵重仪器有使用记录，破损遗失应填写报告；药品、器材、菌种不经批准不得擅自外借和转让，更不得私自拿出，应严格执行《菌种保管制度》。 5．禁止在实验室内吸烟、进餐、会客、喧哗，实验室内不得带入私人物品，离开实验室前认真检查水、电、暖气、门窗，对于有毒、有害、易燃、污染、腐蚀的物品和废弃物品应按有关要求执行。 6．科、室负责人督促本制度严格执行，根据情况给于奖惩，出现问题立即报告，造成病原扩散等责任事故者，应视情节直至追究法律责任。 二、仪器配备、管理使用制度 1．食品微生物实验室应具备下列仪器：培养箱、高压锅、普通冰箱、低温冰箱、厌氧培养设备、显微镜、离心机、超净台、振荡器、
普通天平、千分之一天平、烤箱、冷冻干燥设备、匀质器、恒温水浴箱、菌落计数器、生化培养箱，电位pH计、高速离心机。 2．实验室所使用的仪器、容器应符合标准要求，保证准确可靠，凡计量器具须经计量部门检定合格方能使用。 3．实验室仪器安放合理，贵重仪器有专人保管，建立仪器档案，并备有操作方法，保养、维修、说明书及使用登记本，做到经常维护、保养和检查，精密仪器不得随意移动，若有损坏需要修理时，不得私自拆动、应写出报告、通知管理人员，经科室负责人同意填报修理申请、送仪器维修部门。 4．各种仪器（冰箱、温箱除外），使用完毕后要立即切断电源，旋钮复原归位，待仔细检查后，方可离去。 5．一切仪器设备未经设备管理人员同意，不得外借，使用后按登记本的内容进行登记。 6．仪器设备应保持清洁，一般应有仪器套罩。 7．使用仪器时，应严格按操作规程进行，对违反操作规程的因管理不善致使仪器械损坏，要追究当事者责任。 三、药品管理、使用制度 1．依据本室检测任务，制定各种药品试剂采购计划，写清品名、单位、数量、纯度、包装规格，出厂日期等，领回后建立帐目，专人管理，每半年做出消耗表，并清点剩余药品。 2．药品试剂陈列整齐，放置有序、避光、防潮、通风干燥，瓶签完整，剧毒药品加锁存放、易燃、挥发、腐蚀品种单独贮存。
检验科微生物室室内质量控制流程精编版
检验科微生物室室内质 量控制流程 公司标准化编码 [QQX96QT-XQQB89Q8-NQQJ6Q8-MQM9N]
检验科微生物室室内质量控制流程 一、实验室仪器设备的性能维护 微生物室常用仪器设备主要包括：细菌培养箱、细菌鉴定及药敏测试仪、显微镜、高压灭菌器、冰箱、水浴箱等。这些仪器设备的质量维护对于检验结果的质量保证至关重要。性能维护方法及维护频率参照制造商提供的使用手册进行。如使用手册中未详细注明或实验室自身无法完成，由生产厂家协助解决，每年至少一次。 二、培养基的质量控制 要求对培养基进行两方面的质量控制：无菌试验以及已知菌生长试验。无菌试验一般为随机抽样3-5%，在35℃条件下培养48h，每批培养基至少进行一次无菌试验；已知菌生长试验的前提条件是实验室有足够的已知菌储备，其中包括标准菌株(如ATCC或NCTC标准菌株)及经过准确鉴定的临床分离菌。如果条件允许，提倡使用标准菌株。已知菌生长试验应明确预期结果。每批培养基至少进行一次已知菌生长试验。三、细菌染色的质量控制 在临床细菌学检查过程中，革兰染色和抗酸染色使用频率最高。1．革兰染色IQC要求：利用标准菌株(金黄色葡萄球菌ATCC25923及大肠埃希菌ATCC25922)或其他已知的革兰阳性菌及革兰阴性菌至少每周进行一次质量验证。 2．抗酸染色：利用已知的抗酸杆菌(AFB)阳性涂片每周或在更新炭酸复红染液时至少进行一次质量验证。 四、细菌鉴定或鉴别常用试验的质量控制
细菌鉴定或鉴别试验的IQC就是利用已知菌或标准菌株(如ATCC或NCTC标准菌株)进行鉴定或鉴别试验相关影响因素的质量监控。应 用频率较高的试验IQC每周至少一次，频率较低的试验IQC随标本 一同进行。五、微生物药物敏感试验的质量控制 临床常用抗微生物药物敏感试验包括一般β-内酰胺酶测试、超广谱β-内酰胺酶(ELBLs)测试、纸片扩散法药敏试验以及定量药敏试验(即MICs测定法)。1．一般β-内酰胺酶测试的质量控制：至少每周一次。质控菌株可使用临床分离的已知菌株，但最好使用标准菌 株，如淋病奈瑟菌ATCC31426(β-内酰胺酶阳性绿脓杆菌ATCC27853)和淋病奈瑟菌ATCC43069(β-内酰胺酶阴性或金黄色葡萄球菌 ATCC25923)。 2．ESBLs测试的质量控制：美国临床实验室标准化协会(CLSI：原NCCLS)目前仅提供了肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌、大肠埃希菌和 奇异变形杆菌ESBLs的测试标准。其测试标准参照最新的CLSI文件。质量控制随临床测试菌株一同进行。 3．纸片扩散法及MIC测定法药敏试验的质量控制：质控试验条件、质控菌株选择及质控允许范围参照最新的CLSI规定。频率为每周至少一次。 4．某些耐药菌检测的质量控制：一些耐药菌株如高水平氨基糖苷类耐药的肠球菌、苯唑西林耐药的金黄色葡萄球菌以及万古霉素耐药 的肠球菌等的IQC具体方法、质控菌株及质控预期结果参见最新的CLSI规定。质量控制随临床测试菌株一同进行。
微生物实验室设计施工.doc
阳性对照室、无菌室、微生物实验室设计施工建造 一、微生物实验室设计 微生物实验室由准备室、洗涤室、灭菌室、无菌室、恒温培养室和普通实验室六部分组 成。这些房间的共同特点是地板和墙壁的质地光滑坚硬，仪器和设备的陈设简洁，便于打扫卫 生。 二、微生物实验室基本要求 （一）准备室 准备室用于配制培养基和样品处理等。室内设有试剂柜、存放器具或材料的专柜、实验 台、电炉、冰箱和上下水道、电源等。 （二）洗涤室 洗涤室用于洗刷器皿等。由于使用过的器皿已被微生物污染，有时还会存在病原微生物 。因此，在条件允许的情况下，最好设置洗涤室。室内应备有加热器、蒸锅，洗刷器皿用的 盆、桶等，还应有各种瓶刷、去污粉、肥皂、洗衣粉等。 （三）灭菌室 灭菌室主要用于培养基的灭菌和各种器具的灭菌，室内应备有高压蒸汽灭菌器、烘箱等 灭菌设备及设施。 （四）无菌室 无菌室也称接种室，是系统接种、纯化菌种等无菌操作的专用实验室。在微生物工作中 ，菌种的接种移植是一项主要操作，这项操作的特点就是要保证菌种纯种，防止杂菌的污染。 在一般环境的空气中，由于存在许多尘埃和杂菌，很易造成污染，对接种工作干扰很大。 1.无菌室的设置 无菌室应根据既经济又科学的原则来设置。其基本要求有以下几点： （1）无菌室应有内、外两间，内间是无菌室，外间是缓冲室。房间容积不宜过大，以 便空气灭菌。最小内间面积 2×＝ 5m2，外间面积 1×2＝ 2m2，高以以下为宜，都应有天花 板。 （2）内间应当设拉门，以减少空气的波动，门应设在离工作台最远的位置上；外间的 门最好也用拉门，要设在距内间最远的位置上。 （3）在分隔内间与外间的墙壁或“隔扇”上，应开一个小窗，作接种过程中必要的内外 传递物品的通道，以减少人员进出内间的次数，降低污染程度。小窗宽60cm、高 40cm、厚30cm，内外都挂对拉的窗扇。 （4）无菌室容积小而严密，使用一段时间后，室内温度很高，故应设置通气窗。通气窗 应设在内室进门处的顶棚上（即离工作台最远的位置），最好为双层结构，外层为百叶窗， 内层可用抽板式窗扇。通气窗可在内室使用后、灭菌前开启，以流通空气。有条件可安装恒 温恒湿机。 1
微生物实验室技术操作规范
实验室技术操作规范 一、无菌操作要求 食品微生物实验室工作人员，必须有严格的无菌观念，许多试验要求在无菌条件下进行，主要原因：一是防止试验操作中人为污染样品，二是保证工作人员安全，防止检出的致病菌由于操作不当造成个人污染。 1.接种细菌时必须穿工作服、戴工作帽。 2. 进行接种食品样品时，必须穿专用的工作服、帽及拖鞋，应放在无菌室缓冲间，工作前经紫外线消毒后使用。 3. 接种食品样品时，应在进无菌室前用肥皂洗手，然后用75％酒精棉球将手擦干净。 4. 进行接种所用的吸管，平皿及培养基等必须经消毒灭菌，打开包装未使用完的器皿，不能放置后再使用，金属用具应高压灭菌或用95%酒精点燃烧灼三次后使用。 5. 从包装中取出吸管时，吸管尖部不能触及外露部位，使用吸管接种于试管或平皿时，吸管尖不得触及试管或平皿边。 6. 接种样品、转种细菌必须在酒精灯前操作，接种细菌或样品时，吸管从包装中取出后及打开试管塞都要通过火焰消毒。 7. 接种环和针在接种细菌前应经火焰烧灼全部金属丝，必要时还要烧到环和针与杆的连接处，接种结核菌和烈性菌的接种环应在沸水中煮沸5min，再经火焰烧灼。 8. 吸管吸取菌液或样品时，应用相应的橡皮头吸取，不得直接用口吸。 二、无菌间使用要求 1. 无菌间通向外面的窗户应为双层玻璃，并要密封，不得随意打开，并设有与无菌间大小相应的缓冲间及推拉门，另设有0.5-0.7m2的小窗，以备进入无菌间后传递物品。 2. 无菌间内应保持清洁，工作后用2%-3%煤酚皂溶液消毒，擦拭工作台面，不得存放与实验无关的物品。 3. 无菌间使用前后应将门关紧，打开紫外灯，如采用室内悬吊紫外灯消毒时，需30W紫外灯，距离在1.0m处，照射时间不少于30min，使用紫外灯，应注意不得直接在紫外线下操作，以免引起损伤，灯管每隔两周需用酒精棉球轻轻擦拭，除去上面灰尘和油垢，以减少紫外线穿透的影响。 4. 处理和接种食品标本时，进入无菌间操作，不得随意出入，如需要传递物品，可通过小窗传递。 5. 在无菌间内如需要安装空调时，则应有过滤装置。 三、消毒灭菌要求 微生物检测用的玻璃器皿、金属用具及培养基、被污染和接种的培养物等，必须经灭菌后方能使用。 1．灭菌前准备 （1）所有需要灭菌的物品首先应清洗晾干，玻璃器皿如吸管、平皿用纸包装严密，如用金属筒应将上面通气孔打开。 （2）装培养基的三角瓶塞，用纸包好，试管盖好盖，注射器须将管芯抽出，用纱布包好。
检验科微生物实验室菌种
任县医院检验科微生物实验室菌种、毒株管理规定与 流程 1．目的 对本实验室菌种、毒种的申购、保存、保管、领用、处理等各个环节实行有效的监督控制，防止意外事故发生，确保疾病预防与控制检验业务及科研教学工作。 2．适用范围及菌种、毒种专职管理人员 适用于本科微生物实验室菌种、毒株的管理； 菌种、毒种专职管理人员：宋素玲乔伟涛 3．职责 3．1微生物实验室负责菌、毒种的出入库保管、保存及处理等日常管理。 3．2科室指定宋素玲乔伟涛2名菌种、毒种库管理人员承担菌、毒种日常管理。 3．3科室负责人负责一、二类菌、毒种的出入库和向上级索取及对下级发送的审核。 3．4技术管理层批准本实验室一、二类菌、毒种的出入库和向上级索取及对下级发送的审批。 4．工作程序 4．1报送及入库 4．1．1当微生物实验室检出菌、毒株应及时报送市疾病预
防控制中心。 4．1．2新发现的菌、毒种，要做好原始记录，逐级报送进行复核确认，报送时须宋素玲乔伟涛2人参加。 4．1．3一、二类菌、毒种入库前，科室审核，技术管理层批准后入库 4．1．4个人不得擅自保留菌、毒种，必须由科室进行统一编号、登记入库管理 4．1．5菌、毒种入库时，宋素玲乔伟涛2名菌、毒种保管人员须认真做好菌毒种的编号、登记工作。 4．2日常管理 4．2．1保管人员由宋素玲乔伟涛2名检验人员组成。4．2．2菌、毒种入库时，保管人员应及时验收，统一编号，填写《菌、毒种登记表》 4．2．3严禁随意将菌、毒种置于非菌、毒种专用保存场所，应做到三专（专室、专柜、专锁）。 4．2．4菌、毒种库由2名保管人员双锁管理，铁门与锁必须牢固有效，发现损坏须及时报修。未经各科室负责人同意，不得擅自将钥匙委托他人代管。 4．2．5菌、毒种保管人员应定期对库内温度、湿度、通风及冰箱、冰柜等菌、毒种保藏设备运转情况进行检查，并做好记录。 4．2．6菌、毒种保管人员根据菌、毒种的保存期限，及时
微生物检验技术基础知识模拟题8
微生物检验技术基础知识模拟题8 一、单项选择题 以下每一道考题下面有A、B、C、D、E 5个备选答案。请从中选择1个最佳答案。 1. 虫媒病毒的传递者是 A.家畜 B.啮齿类动物 C.媒介昆虫 D.野生动物 E.家禽 答案：C 某些病毒通过媒介昆虫叮咬传播，称为虫媒病毒，如流行性乙型脑炎病毒。 2. 不属于虫媒病毒病的是 A.流行性乙型脑炎 B.森林脑炎 C.黄热病 D.血吸虫病 E.登革出血热 答案：D 血吸虫病是由血吸虫侵入人体引起的，当人或哺乳动物接触含有血吸虫尾蚴的疫水时，尾蚴侵入皮肤，成为童虫，再发育成成虫，产卵。血吸虫尾蚴、童虫、成虫和虫卵均有致病作用。 3. 乙脑病毒分离和培养的细胞是 A.C6/36细胞 B.人胚肾细胞 C.猴肾细胞
D.Hep—2细胞 E.PMK细胞 答案：A 培养乙脑病毒常用的细胞有C6/36、BHK21、Vero等，以C6/36最常用。 4. 螺旋体的特点不包括 A.以二分裂方式繁殖 B.具有鞭毛 C.运动活跃 D.细长柔软呈螺旋状 E.原核细胞型微生物 答案：B 螺旋体是一类细长、柔软、弯曲呈螺旋状、运动活泼的原核细胞型微生物，无鞭毛。 5. 病毒的复制周期不包括 A.吸附与穿入 B.生物合成 C.二分裂 D.脱壳 E.释放 答案：C 病毒必须在活细胞内寄生，并以复制方式繁殖后代。病毒复制周期包括吸附、穿入、脱壳、生物合成、组装成熟和释放5个步骤。 6. 患者，男性，40岁，农民。发热、剧烈头痛、皮疹，查有体虱。导致该症状的病原体是 A.莫氏立克次体 B.Q热立克次体 C.普氏立克次体
D.恙虫病立克次体 E.澳大利亚立克次体 答案：C 普氏立克次体是流行性斑疹伤寒的病原体。病人是唯一的传染源，体虱是主要传播媒介。斑疹伤寒以高热、头痛、全身皮疹为主要特征。 7. 不属于细菌合成代谢产物的是 A.热原质 B.维生素 C.抗生素 D.甲酸 E.细菌素 答案：D 细菌利用分解代谢中的产物和能量不断合成菌体自身成分，同时还合成一些在医学上具有重要意义的代谢产物，包括热原质、毒素与侵袭性酶、色素、抗生素、细菌素和维生素。 8. 兔肠段结扎试验检测LT，阳性结果判断标准为每立方厘米肠段的液体量大于 A.1ml B.1.5ml C.2ml D.2.5ml E.5ml 答案：A LT是不耐热肠毒素，可用兔肠段结扎试验检测，可使兔毛细血管通透性增加，肠液分泌大量增加，试验每立方厘米肠段的液体量＞1ml为阳性。 9. 卡他布兰汉菌是 A.革兰阳性球菌
医疗器械微生物实验室装修建设方案SICOLAB
医疗器械微生物实验室装修建设方案-喜格 随着医疗器械生产质量管理规范的实施，对无菌和植入类医疗器械的微生物实验室已做出相应要求，其中《医疗器械生产质量管理规范无菌医疗器械实施细则》和《医疗器械生产质量管理规范植入性医疗器械实施细则》中第八章监视和测量规定：生产企业应当建立符合要求并与生产产品相适应的无菌检验室。但实际还包括阳性对照室、微生物限度检查室等，总体称之为微生物实验室更加符合实际。目前医疗器械微生物实验室法规要求起步晚，依据不够细化，加之产品的复杂性，因此微生物实验室的规范化设计并不成熟，SICOLAB对微生物实验室的设计和布局进行初步探讨。 1.微生物实验室功能医疗器械的检验通常分为物理性能、化学性能、生物性能检验。理化检验需要设置理化检验室或在相应工位设检验装置；生物性能检验，对其中的生物学评价检验，企业一般不设检验室，而是委托检测机构进行检测，而微生物检测按法规要求需自行建立微生物检验室。微生物实验室应实现以下功能： (1)按照该产品的标准要求(引用GB/T14233.2方法或药典方法)，对产品进行无菌检验； (2)对洁净环境(空气、水、工艺用气、台面、手)进行微生物检验； (3)对原材料、半成品、成品的初始污染菌检测； (4)部分含药的医疗器械还需满足药品检验需要(无菌、微生物限度、抗生素效价的微生物检定)，如含药敷料、含有庆大霉素的骨水泥、药物涂层产品等；此外，部分产品标准规定需要进行细菌内毒素检查(如注射器、输液器等一次性使用无菌医疗器械产品，氧合器、血液透析器、冠脉支架系统等部分人工器官和植入物产品)该类检查虽不是微生物检查，但对检查环境有较高的要求的，操作间应设有紫外线灯，并有控制温度、湿度的设备。应有书面操作规程，并有防止污染的措施。 2.微生物实验室设计要求SICOLAB 微生物实验室设计包括以下几个方面：人员，培养基，菌种，设备，实验室的布局和运行，器具及工作服洗涤、存放要求，更衣流程。 2.1人员从事微生物实验工作的人员应具备微生物学或相近专业知识的教育背景。检验人员数量和素质应能满足检验工作的需要。检验人员必须熟悉相关检测方法、程序、检测目的和结果评价。保证人员在上岗前接受胜任工作所必须的设备操作、微生物检验技术和实验室生物安全等方面的培训，经考核合格后方可上岗。 2.2培养基培养基质量稳定可靠，有良好的促菌生长能力，具备适宜的灭菌方式，在规定的条件和环境下贮藏，通过不同菌种的接种试验并观察生长状态，进行灵敏度试验。 2.3菌种标准菌株的复活和传代应当满足药典要求。试验过程中，生物样本是最敏感的，它们的活性依赖于合适的试验操作和存储条件。实验室菌种的处理和保藏的程序应标准化，尽可能减少菌种污染和生长特性的改变。工作菌株的传代次数应当严格控制，不得超过5代(从菌种保藏机构获得的标准菌株为第0代)，防止过度的传代增加菌种变异的风险。 2.4设备完成相应的检定、校准、验证、确认其性能。对于一些容易造成微生物污染的仪器设备如水浴锅、培养箱、冰箱和生物安全柜等应定期清洁和消毒。 2.5无菌检查室如果企业标准引用药典要求，企业应当按照2010版药典中(附录ⅪH)无菌检查法要求设置洁净间，无菌检查应在洁净度10000级下的局部洁净度100级的单向流空区域内或隔离系统中进行，其全部过程应当严格遵守无菌操作，防止微生物污染，防止污染的措施不得影响供试品微生物的检出。单向流空气区、工作台面及环境应定期按《医药工业洁净室(区)悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的测试方法》的现行国家标准进行洁净度验证。如企业
微生物实验室的要求
微生物实验室的基本要求 实验室总体面积应在70平米以上，要求水、电供应充足，畅通，排污设施与安全措施齐备。 一、选址： 1. 实验室应选择在清洁安静的场所，远离生活区，锅炉房与交通要道； 2. 实验室应选择在光线充足，通风良好的场所，要与生产加工车间有一定距离； 3. 实验室应选择在方便取样与检验，距离车间较近的工作场所。 二、结构和布局： 应设置细菌与理化检验兼有的综合实验室，主要包括以下三大部分：细菌实验室、理化实验室、办公室。 1. 办公室 2. 理化分析实验室：（或者和细菌检验操作室合并） ①理化分析室（兼作感观检验室） ②仪器室（兼放细菌室显微镜等少量仪器） 3．细菌实验室： ①细菌检验操作室； ②无菌室； ③培养基制作室； ④洗涮消毒室； 一般布局要求如下： 1. 办公室：办公室是化验人员进行原始记录等各项工作的场所，是与非化验室人员交往较多的场所，因此，应设在整体综合化验室的最外层，只需有桌、椅等简单设施即可。 2. 细菌检验操作室（常规操作）细菌检验操作室是细菌培养与检验主要操作室，主要设施是实验台。 对实验台的要求： a.实验台面积一般不小于2.4×1.3m； b.实验台位置应在实验室中心位置，要有充足光线；也可以做边台。
c.实验台两侧安装小盆与水龙头； d.实验台中间设置试剂架，架上装有日光灯与插座； e.实验台材料要以耐热、耐酸碱为宜； f. 实验室围护结构采用彩钢板材料，表面光滑、耐腐蚀、防水，所有缝隙可靠密封，便于清洁消毒，且防震、防火； g. 墙面、吊顶：彩钢板：钢板厚度0.426，15克覆膜。 3. 无菌室：无菌室是处理样品和接种培养的主要工作间，应与细菌检验操作室紧密相连。为满足无菌室无菌要求，无菌间应满足以下布局： a.入口避开走廊，设在细菌检验操作室内； b.与操作室用两道缓冲间隔开； c.无菌室与缓冲间均装有紫外灯，要求每3平米安装30ｗ紫外灯一盏； d.无菌室内设有工作台（中心与边台皆可），紫外灯距工作台面要小于1.5m； e. 微生物室结构应坚固、严密、防尘、光线明亮，地面应光滑，并应有缓冲间，设双层传递窗传递物件； f.门窗应是不锈钢的； g．室内温度18～26℃，相对湿度为45～65%，室内必须保持整洁； h．墙面、吊顶：彩钢板：钢板厚度0.426，15克覆膜； i. 地面采用PVC材料，防渗漏、无接缝、光洁、防滑。 4. 培养基制作室：培养基室是制作、配制微生物培养所需培养基及检验用试剂的场所，其主要设备应为边台与药品橱。 a.边台上要放置电炉，以满足熔化煮沸培养基时用； b.边台材料要耐高热、耐酸碱； c.药橱分门别类存放一些一般药品及试剂； d.危险、易腐易燃有毒有害药品单独设保险柜存放； e.边台上要放天平，以称取药品用。 5. 洗涮消毒室：洗涮消毒室用以消毒洗涮待用与已用之玻璃器皿，培养基及污物，其面积应大于10平米。 为满足洗涮消毒的功能，洗涮消毒室应设有： a.1-2个洗涮池，洗涮池上下水网要畅通；
微生物检验基础知识初级师 个人整理
《微生物检验》初级师基础知识 个人整理 沙门菌在普通平板上的菌落特点为中等大小，无色半透明 沙门菌属不发酵乳糖和蔗糖；中引起食物中毒最常见的菌种为鼠伤寒沙门菌。伤寒沙门菌发酵葡萄糖产酸不产气 志贺菌分为 4 个群 A 痢疾志贺菌 B福氏志贺菌C群为鲍氏志贺菌 D宋内志贺菌 庆大霉素培养基适合于培养霍乱弧菌 内毒素均由革兰氏阴性菌产生，为细胞壁的一种成分，脂多糖。毒性作用包括发热白细胞内毒素血症与内毒素休克。 外毒素分为神经毒素、细胞毒素和肠毒素。包括：金黄色葡萄球菌肠毒素，产毒性大肠杆菌肠毒素，白喉毒素，表皮剥脱毒素、痉挛毒素，肉毒毒素，霍乱肠毒素。 甲肝诊断方法依赖检测患者血清中的抗HAV的IgM HBV的抗原成分中HBsAg与病毒的中和性质作用有关。 羊血清热灭菌58℃。 CFT 反应中为了查Ag，常常降低反应温度，称为冷 CFT，冷 CFT的反应温度通常是4℃。 CFT 反应成分：Ag 被检血清补体溶血素 SRBC 补体作用是非特异性结合。 Vero 细胞狂犬病毒疫苗是最近最先进的狂犬病疫苗。 流行性出血热布尼亚病毒科 克里米亚-刚果出血热布尼亚病毒科 登革出血热黄病毒科 艾博拉出血热弹状病毒科 家鼠型 SEOV型 野鼠型 HTNV型 混合型 SEOV型和 HTNV型 健康带菌者的排菌时间较短,一般不超过7天（一周）。潜伏期排菌多在最末一两天，持续时间更短。病后带菌有两种情况：恢复期带菌自临床症状消失后3个月内带菌,绝大多数患者恢复期带菌的时间不超过一周，和慢性带菌（持续排菌超过3个月）,这种情况少见，可能与胆囊或胆道的炎症有关。 与小儿顽固性腹泻有关的是肠集聚粘附性大肠埃希氏菌 引起旅游者腹泻的最主要的是肠产毒性大肠埃希氏菌 LT导致腹泻的主要原因是肠道细胞质内的cAMP 升高
9205药品洁净室微生物监测和控制指导原则
9205 药品洁净实验室微生物监测和控制指导原则 本指导原则是用于指导药品微生物检验用的洁净室等受控环境微生物污染情况的监测和控制。 药品洁净实验室是指用于药品无菌或微生物检验用的洁净实验室、隔离系统及其它受控环境。药品洁净实验室的洁净级别按空气悬浮粒子大小和数量的不同参考现行“药品生产质量管理规范”分为A、B、C、D 4个级别。为维持药品洁净实验室操作环境的稳定性、确保药品质量安全及检测结果的准确性，应对药品洁净实验室进行微生物监测和控制，使受控环境维持可接受的微生物污染风险水平。 本指导原则包括人员要求、初次使用的洁净实验室参数确认、微生物监测方法、监测频次及监测项目、监测标准、警戒限和纠偏限、数据分析及偏差处理、微生物鉴定和微生物控制。 人员 从事药品洁净实验室微生物监测和控制的人员应符合现行《中国药典》通则中“药品微生物实验室质量管理指导原则（通则9203）”的相关要求。 确认 初次使用的洁净实验室应进行参数确认，确认参数包括物理参数、空气悬浮粒子和微生物。洁净实验室若有超净工作台、空气调节系统等关键设备发生重大变化时应重新进行参数测试。 药品洁净实验室物理参数的测试应当在微生物监测方案实施之前进行，确保操作顺畅，保证设备系统的运行能力和可靠性。主要的物理参数包括高效空气过滤器完整性、，气流组织、空气流速（平均风速），换气次数、压差、温度和相对湿度等。测试应一般首先在静态下测试，符合要求后再在模拟正常检测条件下进行测试。 各级别洁净环境物理参数建议标准及最长监测周期见表1，必要时，各实验室应根据洁净实验室使用用途、检测药品的特性等制定适宜的参数标准。物理参数测试方法参照《洁净室施工及验收规范》的现行国家标准中附录D3高效空气过滤器现场扫描检漏方法、附录E12气流的检测、附录E1风量和风速的检测、附录E2静压差的检测、附录E5温湿度的检测进行。
微生物检验技术中级(主管技师)题库1500题及答案
微生物检验技术中级（主管技师）题库1500题及答案 基础知识部分 A1题型 1. 机体抵抗病原微生物的屏障结构包括 A、皮肤与粘膜 B、血脑屏障 C、胎盘屏障 D、免疫系统 E、A、B和C 答案E 2. 有关内毒素的描述哪项是错误的 A、均由革兰氏阴性菌产生 B、其化学成分为脂多糖 C、160℃，2~4小时才被破坏 D、毒害效应具有组织器官选择性 E、毒性作用较弱 答案D 3. 下列描述哪项是错误的 A、病原菌致病力的强弱度称为毒力 B、毒力主要由侵袭力和毒素所决定 C、破伤风毒素属于内毒素 D、侵袭力是指病原菌突破宿主机体的防御功能，并能在体内定居、繁殖和扩散的能力 E、以上均不是 答案C 4. 下列哪种成分不属于外毒素 A、脂多糖 B、痉挛毒素 C、肉毒毒素 D、表皮剥脱毒素 E、霍乱肠毒素 答案A 5. 下列哪种成分不属于外毒素 A、金黄色葡萄球菌肠毒素 B、产毒性大肠杆菌肠毒素 C、白喉毒素 D、表皮剥脱毒素 E、类脂A 答案E 6. 内毒素的毒性作用包括 A、发热反应 B、白细胞反应 C、内毒素血症与内毒素休克 D、以上都是
E、A和C 答案D 7. 慢性志贺菌感染的病程一般在（）以上 A、两周 B、一个月 C、两个月 D、六周 E、七周 答案C 8. 志贺菌随饮食进入体内，导致人体发病，其潜伏期一般为 A、一天之内 B、1-3天 C、5-7天 D、7-8天 E、8天以后 答案B 9. 下列关于结核分支杆菌描述正确的是 A、类脂质为胞壁中含量最多的成分 B、产生外毒素 C、产生内毒素 D、耐药性低 E、一般采用革兰氏染色 答案A 10. 我国的卫生标准中，每升饮用水中不得超过（）个大肠杆菌 A、1 B、3 C、5 D、7 E、8 答案B 11. 大肠杆菌指数测定时，37℃培养24小时，能发酵乳糖（）为阳性 A、产酸 B、产酸产气 C、产酸不产气 D、产气不产酸 E、以上都不产生 答案B 12. 下列何种细菌为革兰氏阴性菌 A、脑膜炎奈瑟菌 B、结核分支杆菌 C、铜绿假单细胞 D、枯草芽孢杆菌 E、白喉棒状杆菌 答案C
检验科微生物室sop文件检验科微生物实验室
检验科微生物室sop文件检验科微生物实验室检验科微生物室SOP文件检验科微生物实验室 作业指导书细菌室工作守则文件编号:LAB,SOP,JX001 细菌室工作守则 1.每日工作前用紫外线照射实验室半小时以上。 2.入室前应穿工作服，并做好实验前的各项准备工作。 3.实验室内应保持肃静，不准吸烟、吃东西及用手触摸面部。尽量减少室内活动，以免引起风动，无关人员禁入。 4.非必要物品禁止带入实验室，必要资料和书籍带入后，应远离操作台。 5.做好标本的登记、编号及试验记录。未发出报告前，请勿丢弃标本。 6.标本处理及各项试验应在操作间进行，接种环用完后应立即火焰灭菌，沾菌吸管、玻片等用后应浸泡在消毒液内。 7.实验时手部污染，应立即用过氧乙酸消毒或浸于3%来苏儿溶液中5-10分，再用肥皂洗手并冲洗干净;如误入口内，应立即吐出，并用1:1000高锰酸钾溶液或3%双氧水漱口，根据实际情况服用有关药物。 8.实验过程中，如污染了实验台或地面，应用3%来苏儿覆盖其上半小时，然后清洗;如污染工作服，应立即脱下，高压灭菌。 9.若出现着火情况，应沉着处理，切勿慌张，立即关闭电闸，积极灭火。易燃物品(如酒精、二甲苯、乙醚和丙酮等)必须远离火源，妥善保存。 10.工作结束时检查电器、酒精灯等是否关闭，观察记录培养箱、冰箱温度及工作情况，用浸有消毒液的抹布将操作台擦拭干净，并将试剂、用具等放回原处，清理台面，未污染的废弃物扔进污物桶，有菌废弃物应送高压灭菌后处理。 11.离室前工作人员应将双手用消毒液消毒，并用肥皂和清水洗净。
12.爱护仪器设备，经常清洁，注意防尘和防潮。 作业指导书细菌室消毒隔离措施文件编号:LAB,SOP,JX002 细菌室消毒隔离措施 1.每天工作前用消毒液消毒工作台，上班前、下班后开紫外灯(最少半小时)进行空气消毒。 2.非必要品禁止带入实验室，必要资料和书籍带入后，应远离操作台。 3.使用后的载玻片、盖片、平皿、试管等用消毒液浸泡，经煮沸后清洗或丢弃。 4.试验后的血液标本用消毒液浸泡后煮沸消毒，所有用于试验的反应板、吸头等用消毒液浸泡(至少24小时以上)后清洗或丢弃。 5.所有微生物培养物(细菌、支原体、真菌等培养物)，不管标本阳性或阴性均用消毒液浸泡后，经煮沸消毒，才能清洗或丢弃。 6.取材、最好采用一次性工具，不能采用一次性工具者，每次取材前均应彻底消毒。 7.用于浸泡各种器械如刮菌刀、持物钳、镊子等的消毒液要定期更换。 8.不慎发生临床标本或培养物污染工作台，不要立即用水冲洗，应先用纸巾、布等敷料加上消毒液(如5%石炭酸、3%来苏儿等)消毒30分钟以上，然后再清洗。如污染工作服，应立即脱下，高压灭菌。 9.实验时手部污染，应立即用肥皂洗手并冲洗干净，再外用消毒药水，如误入口内，应立即吐出，并用1:1000高锰酸钾溶液或3%双氧水漱口，必要时根据实际情况服用有关药物。作业指导书微生物实验室安全与防护文件编 号:LAB,SOP,JX003 在工作区内禁止饮食，吸烟和存放食物及使用化妆品。 实验室里应保持整洁，不存放与工作无关的杂物。 工作台每天至少用消毒剂清洁一次，在溢渗传染物后要立即消毒、清洗; 进入无菌室必须穿工作服，戴口罩、帽子。 在各种操作进程中均应尽量避免或减少气溶胶产生。
微生物实验室管理规定
微生物实验室管理规定 微生物实验室包括无菌试验室、微生物限度检查室及阳性菌接种室。一．微生物实验室洁净度要求： 微生物实验室洁净度应符合相应的医药洁净室设计规范和验收要求。 1. 操作室洁净度应符合洁净万级要求。 2. 操作台洁净度应符合洁净百级要求。 二．微生物实验室的使用： 1. 微生物实验室使用前应确保操作室的洁净程度。 1.1.使用30分钟前应先开启操作台及操作室的净化和消毒系统，关闭消毒系统后10~15分钟再进入操作室；操作结束后，开启消毒系统30分钟后再关闭消毒系统和净化系统。 1.2.试验开始前应做好相关试验的准备工作，确保在试验过程中不离开操作室。 1.3.进入操作室的任何东西外包装均需消毒处理。 1.4.与试验样品接触的任何器具均应预先灭菌处理。 1.5.清洁消毒用器具应专室专用，不得混用。 2. 微生物实验室操作人员应严格遵守洁净工作区域净化控制规定。 2.1. 保持个人卫生，不得佩带饰物，不得涂抹化妆品。 2.2. 室内应穿戴专用衣帽、口罩及鞋子。 2.3.手部应进行2次消毒，宜带无菌手套。 2.4. 在操作中，操作台面应垫上消毒布巾，以防操作中有滴落液污染台面。 3. 试验操作中应进行沉降菌检测，以便判断操作环境是否符合要求。 3.1.在进行微生物试验时，在操作区域左、中、右分别打开3个培养平板直至试验结束，关闭平板。 3.2.大豆酪蛋白琼脂培养基（TSA平板）倒置于30℃~35℃的培养箱中培养；沙氏培养基（SDA平板）倒置于20℃~25℃的培养箱中培养。 4. 不同的微生物试验项目不得在同一时段同一区域操作台中进行。 4.1.产品初始污染菌检查，不得与产品无菌试验同时进行。 4.2.工艺用水微生物检查，不得与产品无菌试验同时进行。 4.3.有菌培养物试验必须在阳性菌接种室生物安全柜内操作。 三、微生物实验室的维护： 1. 微生物实验室应定期清洁消毒。 1.1. 每次操作前用消毒液擦拭台面。 1.2. 每次操作结束，做好清场，不遗留本次试验用具和物品。 1.3. 每次操作结束，用消毒液擦拭操作台面、消毒灯、操作台内外表面、操作室门把手等凸出面及辅助房间的地面。 1.4. 每月用消毒液擦拭操作室及辅助房间的墙面、门窗及门顶和房间顶棚、操作台底部。 2. 定期按洁净室控制要求检测房间及操作台环境洁净度，视检测结果采取相应的措施。 2.1.微粒浓度达到相应等级要求的50%，重新大扫除；达到相应等级要求的80%时，如通过大扫除还不能下降粒子数，则应考虑更换高效过滤器。
微生物检验实验室沙门菌属标准操作规程
微生物检验实验室沙门菌属标准操作规程 1.概述 沙门菌属是一大群寄生于人和动物肠道中的形态、培养特性、生化反应和抗原构造相似的革兰阴性杆菌，其血清型别繁多、抗原复杂的肠道病原菌，分为6个亚属、2200种以上的血清型。伤寒沙门菌属亚属I，多价O抗血清D群，是临床上最为重要的沙门菌。 2.标本类型 粪便、血液等额标本。 3.鉴定 3.1 形态与染色：革兰阴性杆菌，菌体细长，大小为（0.7~1.5um）×（2~5um）。有周鞭毛，无芽胞，无荚膜。 3.2 培养特性：在麦康凯琼脂平板上形成无色、透明的菌落；SS琼脂平板上呈无色、透明，但大部分菌落中央呈黑色（产H2S）；在XLD琼脂平板上也产生中央黑色的菌落（产H2S）；HE琼脂平板上菌落呈蓝绿色。CHROMagar显色培养基上呈紫色菌落。半固体琼脂中均匀混浊生长，无穿刺线。 3.3 生化反应：氧化酶试验阴性，TSI为K/A；发酵葡萄糖，不发酵乳糖；IMViC-+--或-+-+，H2S试验阳性或阴性，动力、赖氨酸脱羧酶和硝酸盐还原试验阳性，鸟氨酸脱羧酶、尿素酶试验阴性，氰化钾（KCN）培养基不生长。 3.4 鉴别要点：
3.4.1 本菌特征：鉴别平板上无色透胆或半透明的菌落，TSI为K/A，H2S阳性或阴性，有动力，IMViC-+--或-+-+，尿素酶试验阴性。符合上述特性者，可通过血清凝集试验）作出诊断。 3.4.2 与志贺菌属的鉴别：少数伤寒沙门菌在TSI上H2S阴性，动力不明显，易与志贺菌属混淆，可用血清凝集反应相鉴别。 3.5 操作步骤 3.5.1 观察菌落特征，挑取可疑菌落，做TSI试验。参见细菌鉴定标准操作构规程。 3.5.2 血清学鉴定参见沙门菌血清学检测标准操作规程。 3.5.3 鉴定从SS琼脂平板上挑取可疑菌落，用微生物鉴定仪或传统生化法进行细菌鉴定。 4. 药敏 参见药物敏感性试验标准操作规程及CLSI M100-S20最新版本文件。 5. 质量控制 参见质量管理程序。 6.检验结果解释与分析 沙门菌的鉴定依赖于传统或商品化系统生化反应和血清学两种方法。若生化反应符合沙门菌，但A-F多价血清不