空气中微生物的检测

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两种方法比较

1. 沉降法测定的菌落总数要多,在实验条件下比撞击法多 24.6%。

2. 小颗粒含菌粒子在空气中稳定,不易沉降或者漂浮,撞
击法比沉降法更易采集到小粒子。

3. 沉降法结果不稳定,容易受采样条件的影响。
影响因素

1. 温度对细菌数量影响较大,温度越低,细
菌数越少。 2. 气流,不仅可以把室外的细菌带入室内, 也会将地面、墙壁的含菌粒子扬起。 3. 日光,波长为254纳米的紫外线光具有杀 菌作用 4. 湿度,湿度过低,繁殖体易趋向死亡。

2.撞击法 Anderson采样器原理:多级筛孔型采样器 由6个带有微细针孔的金属撞击盘构成,盘下放置 有培养基的平皿,每个圆盘上有400个环形排列小 孔,由上到下孔径逐渐减小。气流从顶罩进第一 级,较小的粒子会由于动量不足随气流绕过平皿 进入下一级。经过6次撞击后,可把绝大部分微生 物采下。
五、结果评价

空气微生物卫生标准,是以细菌作为标准 细菌选用的指标是菌落总数,表示方法为cfu/皿 或者cfu/m3
我国现行标准是根据空气中实测细菌数和流行病学 观察结果为主要依据。


室内空气质量标准 (GB/T18883-2002) 2500cfu/m3
公共场所空气卫生标准

图书馆、阅览室的空气卫生标准:空气细菌总数 ≤2500cfu/m3(撞击式),或≤30个/皿(沉降式)
Baidu Nhomakorabea
气受到微生物性污染程度的指标。

用于医院、公共场所等空气质量的评价
二、实验原理

1:自然沉降法(沉降平板法)
根据空气中携有微生物气溶胶粒子在地心引力的
作用下,以垂直的自然方式沉降到琼脂培养基上,
经过24h,37℃温箱培养计算出菌落数。

特点:此法简单方便,但稳定性差,直径1~5μm 的粒子在5min中内沉降距离有限,使小粒子采集 率较低。

娱乐场所的卫生标准:空气≤4000cfu/m3 幼托机构室内卫生标准:空气细菌菌落数应≤2500cfu/cm3 (沉降法)
医院消毒卫生标准(GB 15982-1995)
1.对两种方法结果的比较?
2.根据Anderson采样器的实验结果,计算空气
中微生物大小分布:以各级的菌落数占六
级总菌落数的百分比表示。
采样5min/10min后,取出平皿,经过24h,37℃培养,计数
分组:
4个同学一组,分别采用自然沉降法和
Anderson采样器,采样时间设为5min和
10min,比较两种采样方法的结果。
注意事项: 整个过程注意无菌操作。
四、结果计算

1.自然沉降法

根据奥梅梁斯基建议,面积为100cm2的平板培养基,暴露 于空气中5min,于37℃温箱培养24h后所生长的菌落数相 当于10L空气中的细菌数 空气中细菌数(cfu/m 3) =1000×[(100/A) ×(5/t) ×(1/10)] ×N
100m2以上至少5个点
b. 采样高度 和人呼吸高度一致(1.2~1.5m)
c. 采样点应避开风口,离墙壁距离应大于0.5m,采样 时关闭门窗,减少人员走动

2.撞击法
调整采样器高度为呼吸带高度于1.2~1.5m ↓ 将平皿依次放入圆盘,固定并做好标记 ↓ 接通电源,开打电源开关,调整流量到28.3L/min ↓
= 50000N/(A×T) A-平板面积(cm2) T-暴露时间(min) N-平均菌落数(cfu/皿)



2.撞击法 空气含菌量(cfu/m3)=[六级采样板的总菌数(cfu) ÷28.3(L/min)×采样时间(min)] ×1000

计算空气中微生物大小分布: 各级微生物粒子数 %=该级菌落数/六级总菌落数
各种粒径大小的菌落易沉降的部位及意义

特点 a. 采集粒谱范围广,一般在0.2~20μm以上; b. 采样效率高,逃逸少 c. 微生物存活率高

3.滤过法:使一定量的空气通过吸附剂(灭 菌生理盐水),然后培养吸附剂中的细菌, 计算出菌落数。

4.液体撞击法:和固体撞击式采样器一样,
是利用喷射气流方式将空气中的微生物粒
Anderson采样器(FA-1型)
各级撞击盘捕获粒子范围及孔径大小

Ⅰ:>7μm Ⅱ:4.7~7μm Ⅲ:3.3~4.7μm Ⅳ:2.1~3.3μm Ⅴ:1.1~2.1μm Ⅵ:0.65~1.1μm
孔径1.18㎜ 孔径0.91㎜ 孔径0.71㎜ 孔径0.53㎜ 孔径0.34㎜ 孔径0.25㎜
空气中微生物数量的检测
2011.11.21



一、实验目的 二、实验原理 三、实验步骤 四、结果计算 五、结果评价
一、实验目的和意义

掌握检测和计数空气中微生物的基本方法
掌握无菌操作技术和微生物实验的基本操 作


学习对室内空气进行初步的微生物学评价
实验意义

空气中细菌总数常作为室内空气质量和空



子采集在小体积的液体中,适用于高浓度
的空气微生物采样。
三、实验步骤

1.自然沉降法 配制琼脂培养基(已做) ↓ 培养皿暴露空气中5min/10min ↓ 37℃温箱培养24h ↓ 计数和结果评价

采样布点原则
a. 根据室内面积进行对角线或者梅花式均匀布点,
小于50m2的房间应设3个点,50~100m2设3~5个;
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