板蓝根的研究及概括

武汉生物工程学院

毕业论文(设计)文献综述

板蓝根的提取及药理研究概况

题目名称：

题目类别：论文

系别：制药工程系

专业班级：

学生姓名：

指导教师：

完成日期：

板蓝根的提取及药理研究概况摘要：板蓝根（常用别名：靛青根、蓝靛根、大青根）是一种中药材。具有清热解毒、凉血消肿、利咽之功效。本文通过查阅大量文献及相关资料阐述了板蓝根的药理作用、鉴别、现代提取工艺及有效成分的含量测定。

关键词: 板蓝根鉴别提取工艺板蓝根多糖含量测定药理作用临床引用

前言：为十字花科植物菘篮和草大青的根；或爵床科植物马蓝的根茎及根；或草大青的干燥根；或十字花科植物移蓝（Isatis tinctoria L．），以根、叶入药。为植物菘蓝或草大青的干燥根。呈细长圆柱形，长约10～20～30厘米，直径3～8毫米。表面浅灰黄色，粗糙，有纵皱纹及横斑痕，并有支根痕，根头部略膨大，顶端有一凹窝，周边有暗绿色的叶柄残基，较粗的根并现密集的疣状突起及轮状排列的灰棕色的叶柄痕。质坚实而脆，断面皮部黄白色至浅棕色，木质部黄色。气微弱，味微甘。以根平直粗壮、坚实、粉性大者为佳。分布江苏、浙江、福建、台湾、广东、广西、贵州、云南、四川、湖南、湖北等地。板蓝根味苦性寒，归心、胃、肝、胆经。功能清热解毒，凉血利咽。主治温毒所致的疾病，如流感、上呼吸道炎症、流脑、腮腺炎、急性肠炎、菌痢、肝炎、颜面丹毒、热病发斑等。虽然药理研究表明，板蓝根对多种病毒与病菌有明显的抑制作用，但不要忘记它是一味苦寒药物。所以，对于上述疾病，只有出现温热、热毒、湿热内盛证候时，才能使用。

1、鉴别

1．取板蓝根水煎液，置紫外光灯（365nm）下观察，显蓝色荧光．

2．取板蓝根粉末0.5g,加稀乙醇20ml,超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加稀乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液．另取精氨酸对照品，加稀乙醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液．吸取上述两种溶液各1～2μ1,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上（自然干燥），以正丁醇一冰醋酸一水（19:5:5）为展开剂，展开，取出，热风吹干，喷以茚三酮试液，在105℃加热至斑点显色清晰．供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点．

3.板蓝根植物横切面：木栓层为数列细胞。皮层狭。韧皮部宽广，射线明显。形成层成环。木质部导管黄色，类圆形，直径约至80μm；有木纤维束。薄壁细胞含淀粉粒。

2、提取工艺

板蓝根多糖的提取方法

多糖类物质是所有生命有机体的重要组成部分，广泛存在于动物、植物、和微生物细胞壁中，是生物体内除核酸和蛋白质以外的又一类重要的生物分子。科学研究已经确认糖类物质具有许多生物活性，包括抗肿瘤、免疫、降血糖和抗病毒等，而且对机体几乎无毒副作用。中药多糖因具有增强机体免疫功能及抗肿瘤降血糖等药理作用，而且几乎没有毒性与副作用，因此引起国内外药理学家、生物学家和化学家们的关注。多糖是板蓝根的主要活性物质之一。目前，多糖较常用的提取方法有：水提法、超声辅助提取法和酶提取法等。

2.1.1 水提法

用水作溶剂来提取多糖是最常用的方法之一，可以用热水浸煮提取，也可以用冷水浸提。水提取的多糖多数是中性多糖。一般植物多糖提取多数采用热水浸提法，该法所得多糖提取液可直接或离心除去不溶物；或者利用多糖不溶于高浓度乙醇的性质，用高浓度乙醇沉淀提纯多糖；但由于不同性质或不同相对分子质量的多糖沉淀所需乙醇浓度不同，它也可以用于样品中不同多糖组分的分级分离；还可按多糖不同性质在粗分阶段利用混合溶剂提取法对植物

中不同的多糖进行分离；其中，以乙醇沉淀最为普遍。如李宏燕等人用100 g去核枣粉，加入250 mL适当体积分数的乙醇，45℃水浴回流脱脂两次，离心分离后枣渣加水共3500 mL，90℃水浴搅拌浸提8h，离心分离，合并所得多糖提取液；提取液45℃减压浓缩，浓缩液用无水乙醇沉淀，离心分离，得粗多糖沉淀；粗多糖加水溶解后，氯仿、正丁醇脱蛋白，用NaOH溶液调节pH值至弱碱性，加0.4倍多糖液体积的H202，40℃水浴保温4h脱色；脱色液对蒸馏水透析24h，无水乙醇沉淀，离心分离，45℃真空干燥，得到大枣多糖。溶剂提取为常用的传统方法之一，有自身的优点。如不需特殊设备，成本低等，但此法往往提取效率低且费时，操作周期过长。因此，近年来，伴随着现代工业工程技术的迅猛发展，一些现代高新技术不断被应用到植物多糖的提取中。

2.1.2 超声提取法

超声波作为一种先进的提取方法，具有提取时间短、能耗低、效率高等特点，在生产中得到了广泛的应用。其主要原理就是超声波产生“空化作用”，这种空化作用能够产生局部的高温高压，并形成强大的冲击波或高速射流，这种强大的高速射流能够有效地减小、消除与水相之间的阻滞层，加大了传质效率。同时，高速射流对植物细胞组织产生一种物理剪切力，使之变形、破裂并释放出内含物，这就大大加速了萃取过程。另外，超声波的许多次级效应如热效应、溶化、扩散、击碎、化学效应、生物效应、凝聚效应等也能加速多糖成分在溶剂中的扩散释放，促进多糖与溶剂混合，有利于萃取。

2.1.3 酶提取法

酶技术是近年来广泛应用到有效成份提取中的一项生物技术，使用酶可降低提取条件，在比较温和的条件下分解植物组织，加速有效成分的释放或提取。此外，使用酶还可分解提取液中淀粉、果胶、蛋白质等非目的产物。此法可使后续的浓缩和脱蛋白工艺更简易、省时，粗多糖的纯度更高。但会提高生产成本，对提取条件要求较高。杨云采用的单酶法和复合酶法提取大枣多糖，单酶法提取多糖含量最高可达44.69%，而复合酶法多糖最高含量可达68.13%。

3、含量测定研究概况

试验可采用苯酚—硫酸比色法测定板蓝根多糖的含量。苯酚—硫酸比色法测定多糖含量是由Dubois等［7］提出的。其原理是：多糖或寡糖被浓硫酸在适当高温下水解，产生单糖，并迅速脱水成糠醛衍生物，该衍生物在强酸条件下与苯酚起显色反应，生成橙黄色物质，在波长490nm处和一定浓度范围内，其吸光度A值与糖浓度C呈线性关系[8]，从而可用比色法测定其含量。

板蓝根多糖提取的工艺流程

板蓝根粉末→干燥→回流脱脂→80%乙醇浸提→超声波辅助提取→离心取上清液→浓缩→乙醇沉淀→水溶→冷冻干燥→板蓝根多糖

将板蓝根粉碎成粒径约40目的粉末，置于65℃烘箱中烘干至恒重。采用索氏抽提法，用乙醚作为萃取溶剂，对板蓝根粉进行脱脂处理。准确称取干燥板蓝根粉末4g，装入滤纸包中，封好包口。用长镊子将装有板蓝根粉末的滤纸包放入抽提筒中，连接好抽提器各部分，向提取管中加入无水乙醚，使其正好虹吸一次，再向提取管中加入石油醚，使液面达到第一次的70%位置，接通冷凝水水流，调节水温至70—80℃，使冷凝下滴的乙醚成连珠状（120～150滴/min或回流7次/h以上），回流5小时取出滤纸包，在通风处使乙醚挥发。用80%乙醇浸提除去料粉中的单糖、多酚、低聚糖和苷类等小分子杂质，将料粉晾干。准确称取料粉2.0 g，分别放于5支50 mL离心管中，调节超级恒温水浴锅使超声波清洗机中的水温恒定在60℃，控制料水比为1:25，分别进行超声辅助提取10 min、20 min、30 min、40 min以及50min，将提取液以2000 rpm离心15 min，收集上清液，再按照同样的超声提