常用抗凝剂的配制及用法(1)
常用抗凝剂的配制及用法
常用抗凝剂的配制及用法 Prepared on 22 November 2020在医学实验中常需动物的全身抗凝，采出的全血或血浆有的也需加入适当的抗凝剂抗凝。
对抗凝剂的要求是：用量少、溶解度大、不带进干扰实验的杂质。
一、肝素（1）肝素抗凝作用原理肝素的抗凝作用很强,作死亡复苏等实验时,常用它作动物全身抗凝剂，肝素的抗凝作用主要是抑制凝血致活酶的活力，阻止血小板凝聚以及抑制抗凝血酶等作用，从而使血液不发生凝固。
（2）配制和用量纯的肝素10mg能抗凝65~125 ml血液(按lmg等于125U，10~20U能抗1 ml血液计)。
但由于肝素制剂的纯度高低以及其保存时间长短不等，因而其抗凝效果也不相同。
一般可配成1％肝素生理盐溶液，用时取0．1毫升于试管内，100℃烘干，每管能抗凝5～10ml血液。
也可将抽血注射器用配好肝素湿润一下管壁，直接抽血至注射器内而使血液不凝。
在动物实验作全身抗凝时，一般剂量为：大白鼠2．5～3．0mg/200～300g体质量，兔10mg ／kg体质量，狗5～10mg／kg体质量。
肝素可改变蛋白质等电点，因此当用盐析法分离蛋白质作蛋白质各部分的测定时，不可采用肝素。
市售的肝素钠溶液每毫升含肝素12500U，相当于100mg。
二、草酸盐合剂（1）原理草酸胺能使血细胞略为膨大，而草酸钾能使血细胞微缩小，因此草酸铵与草酸钾按3：2比例配置，可使血细胞体积保持不变；加福尔马林则能防止微生物在血中繁殖。
此抗凝剂最适于作红细胞比积测定。
（2）配制方法及用量草酸铵1．2g、草酸钾0．8g、福尔马林1．0ml、蒸馏水加至100ml每毫升血加草酸盐合剂0．1ml(即相当草酸铵1．2mg，草酸钾0．8mg)。
根据取血量将计算好的草酸盐剂量加入玻璃容器内烤干备用。
如取0．5ml于试管，烘干后每管可使5ml血不凝固。
（3）注意事项草酸的作用在于能够沉淀血凝过程中所必需的钙离子，而达到抗凝目的。
用时注意加的量应适中，不能过多，以免妨碍去蛋白质血滤液的制取。
常用抗凝剂的原理及其实际运用
草酸盐溶解后解离的草酸根离子与血液中
的钙离子形成草酸钙沉淀，使钙离子失去
凝血功能，阻止凝血过程。常用的草酸盐
抗凝剂有草酸钠，草酸钾和草酸铵。
配制方法及用量
草酸盐合剂：草酸铵1．2g、草酸钾0．8g、福尔 马林1．0ml、蒸馏水加至100ml每毫升血加草酸盐 合剂0．1ml (即相当草酸铵1．2mg，草酸钾 0．8mg)。根据取血量将计算好的草酸盐剂量加入 玻璃容器内烤干备用。如取0．5ml于试管，烘干 后每管可使5ml血不凝固。 草酸钾：取草酸钾10g，加蒸馏水少许使溶解，再 加蒸馏水至100ml。配制成10％水溶液，如每管加 0.1ml则可使5~10ml血不凝。
血功能测定。测定血沉用3.8%枸橼酸钠抗
凝，抗凝剂与血液比例为1：4，凝血试验
需用3.2%枸橼酸钠抗凝，比例为1：9。
2.另外，因为枸橼酸盐作为抗凝剂的细胞毒
性小，常作为血液保养液的成分之一。
缺点
枸橼酸钠6mg才能抗凝1ml血液，碱性强，
不适用于血液化验和生化测验。
氟化钠的抗凝原理
氟化钠中的氟离子可与钙结合形成螯合物 而发挥抗凝作用，但其抗凝能力较其他抗 凝剂弱， 氟离子可抑制糖酵解中的烯醇化 酶，防止糖酵解，若未加氟化钠，血标本 中的葡萄糖含量将以每小时6%的速度下降， 而在有氟化钠存在 的条件下，血糖浓度在 25摄氏度的条件下可以稳定24h，4摄氏度 可以稳定48h。
常用抗凝剂的原理及运用
主要内容
. 抗凝剂的概念
. 临床上常用的抗凝剂
. 问题
概念：
抗凝：应用物理或化学的方法除去或抑制血液中 的某些凝血因子，阻止血液凝固，称为抗凝。 抗凝剂：阻止血液凝固的化学试剂就称为抗凝剂。 对抗凝剂的一般要求是用量少、溶解度大、不影 响测定。生化检验常用的抗凝剂有以下几种：
常用抗凝剂及其配置法
常用抗凝剂的配制及用法在医学实验中常需动物的全身抗凝，采出的全血或血浆有的也需加入适当的抗凝剂抗凝。
对抗凝剂的要求是：用量少、溶解度大、不带进干扰实验的杂质。
一、肝素（1）肝素抗凝作用原理肝素的抗凝作用很强,作死亡复苏等实验时,常用它作动物全身抗凝剂，肝素的抗凝作用主要是抑制凝血致活酶的活力，阻止血小板凝聚以及抑制抗凝血酶等作用，从而使血液不发生凝固。
（2）配制和用量纯的肝素10mg能抗凝65~125 ml血液(按lmg等于125U，10~20U能抗1 ml 血液计)。
但由于肝素制剂的纯度高低以及其保存时间长短不等，因而其抗凝效果也不相同。
一般可配成1％肝素生理盐溶液，用时取0．1毫升于试管内，100℃烘干，每管能抗凝5～10ml血液。
也可将抽血注射器用配好肝素湿润一下管壁，直接抽血至注射器内而使血液不凝。
在动物实验作全身抗凝时，一般剂量为：大白鼠2．5～3．0mg/200～300g体质量，兔10mg／kg体质量，狗5～10mg／kg体质量。
肝素可改变蛋白质等电点，因此当用盐析法分离蛋白质作蛋白质各部分的测定时，不可采用肝素。
市售的肝素钠溶液每毫升含肝素12500U，相当于100mg。
（3）注意事项做全血DNA提取的时候抗凝剂不能采用肝素！因为肝素是聚合酶链式反应的抑制剂！二、草酸盐合剂（1）原理草酸胺能使血细胞略为膨大，而草酸钾能使血细胞微缩小，因此草酸铵与草酸钾按3：2比例配置，可使血细胞体积保持不变；加福尔马林则能防止微生物在血中繁殖。
此抗凝剂最适于作红细胞比积测定。
（2）配制方法及用量草酸铵1．2g、草酸钾0．8g、福尔马林1．0ml、蒸馏水加至100ml每毫升血加草酸盐合剂0．1ml(即相当草酸铵1．2mg，草酸钾0．8mg)。
根据取血量将计算好的草酸盐剂量加入玻璃容器内烤干备用。
如取0．5ml于试管，烘干后每管可使5ml血不凝固。
（3）注意事项草酸的作用在于能够沉淀血凝过程中所必需的钙离子，而达到抗凝目的。
常用抗凝剂的配制及用法_常用抗凝剂的配制及用法
常用抗凝剂的配制及用法专业相关2010-08-08 14:48:34 阅读458 评论0 字号：大中小订阅在医学实验中常需动物的全身抗凝，采出的全血或血浆有的也需加入适当的抗凝剂抗凝。
对抗凝剂的要求是：用量少、溶解度大、不带进干扰实验的杂质。
一、肝素（1）肝素抗凝作用原理肝素的抗凝作用很强,作死亡复苏等实验时,常用它作动物全身抗凝剂，肝素的抗凝作用主要是抑制凝血致活酶的活力，阻止血小板凝聚以及抑制抗凝血酶等作用，从而使血液不发生凝固。
注意事项：做全血DNA提取的时候抗凝剂不能采用肝素！因为肝素是聚合酶链式反应的抑制剂！（2）配制和用量纯的肝素10mg能抗凝65~125 ml血液(按lmg等于125U，10~20U能抗1 ml血液计)。
但由于肝素制剂的纯度高低以及其保存时间长短不等，因而其抗凝效果也不相同。
一般可配成1％肝素生理盐溶液，用时取0．1毫升于试管内，100℃烘干，每管能抗凝5～10ml血液。
也可将抽血注射器用配好肝素湿润一下管壁，直接抽血至注射器内而使血液不凝。
在动物实验作全身抗凝时，一般剂量为：大白鼠2．5～3．0mg/200～300g体质量，兔10mg／kg体质量，狗5～10mg／kg体质量。
肝素可改变蛋白质等电点，因此当用盐析法分离蛋白质作蛋白质各部分的测定时，不可采用肝素。
市售的肝素钠溶液每毫升含肝素12500U，相当于100mg。
二、草酸盐合剂（1）原理草酸胺能使血细胞略为膨大，而草酸钾能使血细胞微缩小，因此草酸铵与草酸钾按3：2比例配置，可使血细胞体积保持不变；加福尔马林则能防止微生物在血中繁殖。
此抗凝剂最适于作红细胞比积测定。
（2）配制方法及用量草酸铵1．2g、草酸钾0．8g、福尔马林1．0ml、蒸馏水加至100ml每毫升血加草酸盐合剂0．1ml(即相当草酸铵1．2mg，草酸钾0．8mg)。
根据取血量将计算好的草酸盐剂量加入玻璃容器内烤干备用。
如取0．5ml于试管，烘干后每管可使5ml血不凝固。
常用的抗凝剂肝素
常用的抗凝剂肝素、草酸盐合剂、枸橼酸钠和草本钾的配制方法肝素（Heparin）肝素的抗凝血作用很强，常用来作为全身抗凝剂，特别是在进行微循环方面动物实验时的肝素应用更有重要意义。
纯的肝素10mg能抗凝100ml血液（按1mg等于100个国际单位，10个国际单位能抗凝1ml 血液计）。
如果肝素的纯度不高，或过期，所用的剂量应增大2～3倍。
用于试管内抗凝时，一般可配成1%肝素生理盐水溶液，取0.1m l加入试管内，加热80℃烘干，每管能使5～10ml血液不凝固。
作全身抗凝时，一般剂量为：大鼠2.5～3mg·(200～300g体重)-1，兔或猫10mg·kg-1，狗5～10mg·kg-1。
如果肝素的纯度不高，或过期，所用的剂量应增大2～3倍。
草酸盐合剂配方：草酸铵 1.2g草酸钾 0.8g福尔马林 1.0ml蒸馏水加至 100ml配成2%溶液，每1ml血加草酸盐2mg（相当于草酸铵1.2m g，草酸钾0.8mg）。
用前根据取血量将计算好的量加入玻璃容器内烤干备用。
如取0.5ml于试管中，烘干后每管可使5ml血不凝固。
此抗凝剂量适于作红细胞比容测定。
能使血凝过程中所必须的钙离子沉淀达到抗凝的目的。
枸橼酸钠常配成3%～8%水溶液，也可直接用粉剂。
枸橼酸钠可使钙失去活性，故能防止血凝。
但其抗凝作用较差，其碱性较强,不适作化学检验之用。
一般用1：9（即1份溶液，9份血）用于红细胞沉降和动物急性血压实验（用于连接血压计时的抗凝）。
不同动物，其浓度也不同：狗为6%，猫为2%+硫酸钠25%，兔为5%。
草酸钾每1ml血需加1-2mg草酸钾。
如配制10%水溶液，每管加0.1ml则可使5-10ml血液不凝固。
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抗凝剂
抗凝剂种类很多，性质各异，必须根据检验止的适当选择，才能获得预期的结果。
现将实验常用抗凝剂及其使用方法简述如下：1、乙二胺四乙酸（EDTA）盐EDTA有二钠、二钾和三钾盐。
均可与钙离子结全成螯合物，从而阻止血液凝固。
EDTA盐经1000C烘干，抗凝作用不变，通常配成15g/L水溶液，每瓶0.4ml，干燥后可抗凝5ml血液。
EDTA 盐对红、白细胞形态影响很小，根据国际血液学标准公委员会（Internationalcommittee standard of hematology ,ICSH）1993年文件建议，血细胞计数用EDTA二钾作抗凝剂，用量为EDTA-K2。
2H2O1.5-2.2MG （4.45±0.85μmol）/ml血液。
EDTA-NA与EDTA-K2对血细胞计数影响均较小，但二钠溶解度明显低于二钾，有时影响抗凝效果，其他抗凝剂不适合于血细胞计数。
表1-1是几种抗凝剂对白细胞计数的影响，EDTA影响小板聚集，不适合于作凝血象检查和血小板功能试验。
2.枸椽酸钠（trisodium citrate）枸椽酸盐可与血中钙离子形成可溶性螯合物，从而阻止血液凝固。
枸椽钠对凝血因子有较好的保护作用，使其活性减低缓，故常用于凝血象的检查，也用于红细胞沉降率的测定。
因毒性小，是输积压保养中的成分之一。
由于枸椽酸钠溶液是按体积肥比例加入血液内达到抗凝目的的，而抗凝剂主要是作用于积压浆成分，通常所谓的1：9比例抗凝的概念是提1份体积的抗凝剂作用9份红细胞比积正常血液内的血浆成分而言。
所以台果对贫血或红细胞增多症患者的血液仍按1：9的比例加入抗凝剂时，就会发生抗凝剂足或相对过多，这将明显地影响凝象检查结果。
为了避免这种现象，有文献报道应根据抗凝剂用量（ml）=0.00185×血量×（100—病人红细胞比积%）这一公式，来计算抗凝剂的用量。
3．草酸钠（sodium oxalate）草酸盐可与血中钙离子生成草酸钙沉淀，从而阻止血液凝固。
抗凝剂
4.枸椽酸钠（trisodium citrate）枸椽酸盐可与血中钙离子形成可溶性螯合物，从而阻止血液凝固。
枸椽酸钠有2Na3C6H5O7。和2Na3C6H5。11H2O等多种晶体。通常用前者配成109mmol/l(32g/l)水溶液（也有用106mmol/l浓度），与血液按1：9或1：4比例使用。枸椽钠对凝血V因子有较好的保护作用，使其活性减低缓，故常用于凝血象的检查，也用于红细胞沉降率的测定。因毒性小，是输积压保养中的成分之一。
枸橼酸钠可使钙失去活性，故能防止血凝。但其抗凝作用较差，其碱性较强，不适作化学检验之用。可用于红细胞沉降速度测定。急性血压实验中所用的枸橼酸钠为5％～6％溶液。
（四）草酸钾
每毫升血需加1～2mg草酸钾。如配制10％水溶液，每管加0.1m1则可使5～10ml血不凝固。
（2）配制和用量
纯的肝素10mg能抗凝65~125 ml血液(按lmg等于125U，10~20U能抗1 ml血液计)。但由于肝素制剂的纯度高低以及其保存时间长短不等，因而其抗凝效果也不相同。一般可配成1％肝素生理盐溶液，用时取0．1毫升于试管内，100℃烘干，每管能抗凝5～10ml血液。也可将抽血注射器用配好肝素湿润一下管壁，直接抽血至注射器内而使血液不凝。在动物实验作全身抗凝时，一般剂量为：大白鼠2．5～3．0mg/200～300g体质量，兔10mg／kg体质量，狗5～10mg／kg体质量。肝素可改变蛋白质等电点，因此当用盐析法分离蛋白质作蛋白质各部分的测定时，不可采用肝素。市售的肝素钠溶液每毫升含肝素12500U，相当于100mg。
（3）注意事项
草酸的作用在于能够沉淀血凝过程中所必需的钙离子，而达到抗凝目的。用时注意加的量应适中，不能过多，以免妨碍去蛋白质血滤液的制取。不适用于血液内钙或钾的测定，也不能用于血液非蛋白氮测定。
临床检验基础考点常用抗凝剂和使用方法
临床检验基础考点常用抗凝剂和使用方法常用抗凝剂和使用方法：
（1）乙二胺四乙酸（EDTA）盐：常用有钠盐或钾盐，能与血液中钙离子结合成螯合物，使Ca2＋失去凝血作用，阻止血液凝固。
EDTA盐对血细胞形态、血小板计数影响很小，适用于血液学检查，尤其是血小板计数。
根据国际血液学标准化委员会（ICSH）建议，CBC抗凝剂用EDTA-K2•2H2O，量为1.5～2.2 mg/ml血液。
不适于凝血检查、血小板功能试验。
（2）草酸盐：常用有草酸钠、草酸钾、草酸铵，溶解后解离的草酸根离子能与样本中钙离子形成草酸钙沉淀，使Ca2＋失去凝血作用，阻止血液凝固。
草酸盐不适于凝血检查。
双草酸盐抗凝剂：草酸钾可使红细胞体积缩小，草酸铵则可使红细胞胀大，两者按适当比例混合，恰好不影响红细胞形态和体积，可用于血细胞比容、CBC、网织红细胞计数等项目检查。
双草酸盐抗凝剂可使血小板聚集、影响白细胞形态，不适于血小板计数、白细胞分类计数。
（3）肝素：加强抗凝血酶（AT）灭活丝氨酸蛋白酶作用，阻止凝血酶的形成，并阻止血小板聚集等作用，从而阻止血液凝固。
肝素是红细胞渗透脆性试验的理想抗凝剂。
但肝素可引起白细胞聚集，瑞氏染色后产生蓝色背景，不适于CBC、细胞形态学检查。
（4）枸橼酸盐：常用有枸橼酸钠，能与血液中钙离子结合形成螯合物，阻止血液凝固。
枸橼酸钠与血液的抗凝比例为1:9或1:4。
适用于红细胞沉降率、凝血检查，是输血保养液的成分。
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在医学实验中常需动物的全身抗凝，采出的全血或血浆有的也需加入适当的抗凝剂抗凝。
对抗凝剂的要求是：用量少、溶解度大、不带进干扰实验的杂质。
一、肝素
（1）肝素抗凝作用原理
肝素的抗凝作用很强,作死亡复苏等实验时,常用它作动物全身抗凝剂，肝素的抗凝作用主要是抑制凝血致活酶的活力，阻止血小板凝聚以及抑制抗凝血酶等作用，从而使血液不发生凝固。
（2）配制和用量
纯的肝素10mg能抗凝65~125 ml血液(按lmg等于125U，10~20U能抗1 ml血液计)。
但由于肝素制剂的纯度高低以及其保存时间长短不等，因而其抗凝效果也不相同。
一般可配成1％肝素生理盐溶液，用时取0．1毫升于试管内，100℃烘干，每管能抗凝5～10ml血液。
也可将抽血注射器用配好肝素湿润一下管壁，直接抽血至注射器内而使血液不凝。
在动物实验作全身抗凝时，一般剂量为：大白鼠2．5～3．0mg/200～300g体质量，兔10mg／kg体质量，狗5～10mg／kg体质量。
肝素可改变蛋白质等电点，因此当用盐析法分离蛋白质作蛋白质各部分的测定时，不可采用肝素。
市售的肝素钠溶液每毫升含肝素12500U，相当于100mg。
二、草酸盐合剂
（1）原理
草酸胺能使血细胞略为膨大，而草酸钾能使血细胞微缩小，因此草酸铵与草酸钾按3：2比例配置，可使血细胞体积保持不变；加福尔马林则能防止微生物在血中繁殖。
此抗凝剂最适于作红细胞比积测定。
（2）配制方法及用量
草酸铵1．2g、草酸钾0．8g、福尔马林1．0ml、蒸馏水加至100ml每毫升血加草酸盐合剂0．1ml(即相当草酸铵1．2mg，草酸钾0．8mg)。
根据取血量将计算好的草酸盐剂量加入玻璃容器内烤干备用。
如取0．5ml于试管，烘干后每管可使5ml血不凝固。
（3）注意事项
草酸的作用在于能够沉淀血凝过程中所必需的钙离子，而达到抗凝目的。
用时注意加的量应适中，不能过多，以免妨碍去蛋白质血滤液的制取。
不适用于血液内钙或钾的测定，也不能用于血液非蛋白氮测定。
三、枸橼酸钠
常配成3～5%水溶液。
也可直接加粉剂，每毫升血加3～5mg，即可达到抗凝目的。
枸橼酸钠可使钙失去活性，防止凝血。
但其抗凝作用较差，碱性较强，不宜作化学检验之用。
仅可用于红细胞沉降速度测定。
急性血压测定实验所用枸橼酸钠为5～6％溶液。
四、草酸钾
（一）原理和注意事项
草酸钾为最常用的抗凝剂。
其与血液混合后可迅速与血液中的钙离子结合，形成不溶解的草酸钙，使血液不凝固。
常用于非蛋白氮测定，但不适用于测定钾和钙。
草酸盐能抑制乳酸脱氢酶、酸性磷酸酶和淀粉酶的活性，故应注意。
（二）配制及使用方法
取草酸钾10g，加蒸馏水少许使溶解，再加蒸馏水至100ml。
配制成10％水溶液，如每管加0.1ml则可使5~10ml血不凝。
一般如作微量检验，用血量较少，可配制成2％溶液，如每管加0．1ml可使1~2ml血液不凝。
五、乙二胺四乙酸二钠盐（EDTA）
EDTA对血液中钙离子有很大的亲和力，能与钙离子络合而使血液抗凝。
每0.8mg可抗凝1 ml血液。
除不能用于血浆中钙、钠及含氮物质之测定外，适用于多种抗凝。