抗生素类药物分析PPT
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第十二章 抗生素类药物的分析
第十二章 抗生素类药物的分析
第一节
概述
通过鉴别、检查、含量测定（效价测定） 通过鉴别、检查、含量测定（效价测定）判 断抗生素质量的优劣 1、鉴别试验 用理化方法或生物学方法证明是何种抗生素
第一节 概述
2、检查 用理化方法或生物学方法证明是何种抗生素 （1）．影响产品稳定性的指标 ）．影响产品稳定性的指标 ）．控制有机和无机杂质的指标 （2）．控制有机和无机杂质的指标 ）．与临床安全性密切相关的指标 （3）．与临床安全性密切相关的指标 ）．其他指标 （4）．其他指标
第二节
ß-内酰胺类抗生素的分析 -
一、结构与性质
）、性质 性质： （二）、性质： 旋光性： 3、旋光性： 青霉素族、头孢菌素族都含有手性碳， 青霉素族、头孢菌素族都含有手性碳，具 有旋光性
﹡﹡ S 1
6 7 5
2 3
﹡ S ﹡ 1
O
7 6 8 N 4 5
O
N
4
2 3
﹡
第二节
ß-内酰胺类抗生素的分析 -
第二节
ß-内酰胺类抗生素的分析 -
二、鉴别试验
（三）化学鉴别法 1、钾、钠盐的反应
焰色→ 焰色→鲜黄色 Na+ 焰色→ 焰色→紫色
K+
第二节
ß-内酰胺类抗生素的分析 -
二、鉴别试验
（三）化学鉴别法 2、呈色反应 羟肟酸铁反应： （ 1） . 羟肟酸铁反应：青霉素及头孢霉素在 碱性中与羟胺作用， 碱性中与羟胺作用， ß-内酰胺环破裂生成羟肟 酸；在稀酸中与高铁离子呈色
α − 氨 →蓝 色 基 紫
△
三 茚 酮
第二节
ß-内酰胺类抗生素的分析 -
二、鉴别试验
（三）化学鉴别法 2、呈色反应 − 斐林试剂反应： 似肽键， （3）.斐林试剂反应： CONH−似肽键，可产生双 缩脲，开环分解，使碱性酒石酸铜还原显紫色， 缩脲，开环分解，使碱性酒石酸铜还原显紫色， 如阿莫西林 与重氮苯磺酸反应：侧链含有酚羟基时， （4）.与重氮苯磺酸反应：侧链含有酚羟基时， 能与重氮苯磺酸试液偶合呈色
第一节
概述
通过鉴别、检查、含量测定（效价测定） 通过鉴别、检查、含量测定（效价测定）判 断抗生素质量的优劣 1、鉴别试验 用理化方法或生物学方法证明是何种抗生素
第一节 概述
2、检查 用理化方法或生物学方法证明是何种抗生素 （1）．影响产品稳定性的指标 ）．影响产品稳定性的指标 ）．控制有机和无机杂质的指标 （2）．控制有机和无机杂质的指标 ）．与临床安全性密切相关的指标 （3）．与临床安全性密切相关的指标 ）．其他指标 （4）．其他指标
第二节
ß-内酰胺类抗生素的分析 -
一、结构与性质
）、性质 性质： （二）、性质： 旋光性： 3、旋光性： 青霉素族、头孢菌素族都含有手性碳， 青霉素族、头孢菌素族都含有手性碳，具 有旋光性
﹡﹡ S 1
6 7 5
2 3
﹡ S ﹡ 1
O
7 6 8 N 4 5
O
N
4
2 3
﹡
第二节
ß-内酰胺类抗生素的分析 -
第二节
ß-内酰胺类抗生素的分析 -
二、鉴别试验
（三）化学鉴别法 1、钾、钠盐的反应
焰色→ 焰色→鲜黄色 Na+ 焰色→ 焰色→紫色
K+
第二节
ß-内酰胺类抗生素的分析 -
二、鉴别试验
（三）化学鉴别法 2、呈色反应 羟肟酸铁反应： （ 1） . 羟肟酸铁反应：青霉素及头孢霉素在 碱性中与羟胺作用， 碱性中与羟胺作用， ß-内酰胺环破裂生成羟肟 酸；在稀酸中与高铁离子呈色
α − 氨 →蓝 色 基 紫
△
三 茚 酮
第二节
ß-内酰胺类抗生素的分析 -
二、鉴别试验
（三）化学鉴别法 2、呈色反应 − 斐林试剂反应： 似肽键， （3）.斐林试剂反应： CONH−似肽键，可产生双 缩脲，开环分解，使碱性酒石酸铜还原显紫色， 缩脲，开环分解，使碱性酒石酸铜还原显紫色， 如阿莫西林 与重氮苯磺酸反应：侧链含有酚羟基时， （4）.与重氮苯磺酸反应：侧链含有酚羟基时， 能与重氮苯磺酸试液偶合呈色
抗生素类药物的分析
H 苯唑青霉素 苯唑青霉烯酸 A339nm Cu2+
1% E ， ， 1cm min
第二节 抗生素类药物的鉴别
（4）色谱法 • ①TLC法 对照品对照法
对照品 相同条件 比较R 和斑点颜色 f 供试品
• ②HPLC法
对照品 相同条件 比较t R 供试品
第一节 概 述
（2）类似重量单位 以特定的纯抗生素制品盐的重量1μg
作为一个单位，即1mg＝1000单位，其中包括了无抗菌活 性的酸根在内。 • 如四环素盐酸盐（包括无生物活性的盐酸根在内）。 • 这种类似重量单位，虽然并不合理，但在国际上已经习惯 沿用。
（3）重量折算单位
以特定的纯抗生素制品的某一重量
第二节 抗生素类药物的鉴别
二、氨基糖苷类抗生素的鉴别
氨基糖苷类抗生素又称氨基环醇类抗生素，是由一 类分子中含有一个环己醇配基以糖苷键与氨基糖 （或戊糖）连接的有机化合物。分子中含有多羟基、
多氨基，因含有氨基或其他碱性基团，顾显碱性。
氨基糖 苷元 氨基糖苷
碱性环己多元醇
缩合
第二节 抗生素类药物的鉴别
• 制霉菌素（1963年）为1mg=3000单位等。
• 这类抗生素的效价单位的精确定义很难确定，折算效价也 难以计算，只能以国际标准品的效价单位，作为比较的基 准。 • 目前，抗生素的剂量原则上以纯品的重量表示，并加注单 位。如土霉素0.25g（250000单位）；但个别品种仍以习 惯沿用，如青霉素仍用单位表示剂量。
肽类、蒽环类、林可霉素类、其他抗生素类等。
第二节 抗生素类药物的鉴别
一、β-内酰胺类抗生素的鉴别
该类抗生素包括典型β-内酰胺类抗生素，如青霉素类 （Penicillins）、头孢菌素类（Cephalosporins）；非典 型β-内酰胺类如克拉维酸（clavulanicacid）、噻纳霉素 （Thienamycin）和Sulfazecins等。
1% E ， ， 1cm min
第二节 抗生素类药物的鉴别
（4）色谱法 • ①TLC法 对照品对照法
对照品 相同条件 比较R 和斑点颜色 f 供试品
• ②HPLC法
对照品 相同条件 比较t R 供试品
第一节 概 述
（2）类似重量单位 以特定的纯抗生素制品盐的重量1μg
作为一个单位，即1mg＝1000单位，其中包括了无抗菌活 性的酸根在内。 • 如四环素盐酸盐（包括无生物活性的盐酸根在内）。 • 这种类似重量单位，虽然并不合理，但在国际上已经习惯 沿用。
（3）重量折算单位
以特定的纯抗生素制品的某一重量
第二节 抗生素类药物的鉴别
二、氨基糖苷类抗生素的鉴别
氨基糖苷类抗生素又称氨基环醇类抗生素，是由一 类分子中含有一个环己醇配基以糖苷键与氨基糖 （或戊糖）连接的有机化合物。分子中含有多羟基、
多氨基，因含有氨基或其他碱性基团，顾显碱性。
氨基糖 苷元 氨基糖苷
碱性环己多元醇
缩合
第二节 抗生素类药物的鉴别
• 制霉菌素（1963年）为1mg=3000单位等。
• 这类抗生素的效价单位的精确定义很难确定，折算效价也 难以计算，只能以国际标准品的效价单位，作为比较的基 准。 • 目前，抗生素的剂量原则上以纯品的重量表示，并加注单 位。如土霉素0.25g（250000单位）；但个别品种仍以习 惯沿用，如青霉素仍用单位表示剂量。
肽类、蒽环类、林可霉素类、其他抗生素类等。
第二节 抗生素类药物的鉴别
一、β-内酰胺类抗生素的鉴别
该类抗生素包括典型β-内酰胺类抗生素，如青霉素类 （Penicillins）、头孢菌素类（Cephalosporins）；非典 型β-内酰胺类如克拉维酸（clavulanicacid）、噻纳霉素 （Thienamycin）和Sulfazecins等。
抗生素类药物的分析
氯霉素Chloramphenicol
【鉴别】显色反应 吸取供试品溶液、对照 品溶液、空白溶液各1ml，加1%氯化钙溶液 3ml与锌粉50mg，置水浴上加热10min，倾 取上清液，加苯甲酰氯约0.1ml，立即强力 振摇1min，加三氯化铁试液0.5ml与氯仿2ml, 振摇。供试品溶液和对照品溶液水层均显紫 红色，空白溶液水层未显紫红色。
大环内酯类抗生素 Macrolide Antibiotics
一 概述
⒈ 简介 由链霉菌产生的弱碱性抗生素（红霉素、 阿奇霉素）。 抗菌特点：对G+和某些G-、支原体作 用强 结构特征 • 内酯结构的十四元或十六元大环 • 通过内酯环上的羟基和去氧氨基糖或6去氧糖缩合成碱性甙
红霉素 Erythromycin 一、结构和性质 ⒈ 来源红色链丝菌产生，包括A、B和C， 三者的区别如下
氯霉素 Chloramphenicol
【检查】 残留溶剂 （甲醛、乙醇） 高效液相色谱：加二甲亚砜溶解并稀释至刻度， 作为供试品溶液；另精密取甲醛、乙醇，加二甲 亚砜溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。 照残留溶剂测定法测定，使用紫外检测器，按外 标法计算，含甲醛、乙醇应符合规定。 毛细管色谱：柱温40-100，常以氮气为载气，采 用火焰离子化检测器。
• • • •
药物的性质 酸性：有机酸（pKa2.65～2.70） 旋光性：青霉素家族分子都有三个手性碳 原子，头孢家族有两个 紫外吸收特性：头孢家族有共轭的母环， 青霉素家族一般有苯环取代基 β-内酰胺环不稳定：四元内酰胺环，张力 比较大
鉴别试验
• 呈色反应： 与羟胺作用生成羟肟酸，与铁离子呈色。 类似于肽键反应，双缩脲反应和茚三酮反应 • 钾钠离子的焰色反应 • 普鲁卡因青霉素有芳伯氨基，可以发生重氮化偶合反应，生成红色染料沉淀。 • 光谱法：包括红外吸收光谱（IR)和紫外吸收光谱 (UV) • 色谱法:与对照品的高效液相色谱（HPLC)和薄层 色谱(TLC)的保留时间和比移值一致
抗生素类药—四环素类(药物学课件)
四环素类及氯霉素
【不良反应】
(1)骨髓毒性:是最严重的毒性反应。
①可逆性血细胞减少：常见，与剂量疗程相关，停药可恢 复。
②再生障碍性贫血：发生率低，死亡率高，与剂量疗程无 关。
严格掌握适应症，定期检查血象。
四环素类及氯霉素
⑵灰婴等合征：是指早产儿、新生儿大剂量应用氯
霉素，因肝葡萄糖醛酸转移酶活性不足及肾排泄能 力低下所致的蓄积中毒。表现为腹胀、吐奶、呼吸 不规规则、面色灰紫、循环衰竭等。
⑶影响骨、牙生长 永久性棕色色素沉着，使牙齿黄染，牙釉质发育不全， 生长抑制。
⑷其它反应 口服剂量较大或静注时，与药物沉积在线粒体有关， 导致急性肝细胞脂肪坏死，孕妇尤其伴有肾功能障碍 易发生，导致致死性肝中毒。
实例分析
下列处方合理吗？
某医生用中西医结合法治疗支气管炎，给患者服用四 环素片和牛黄解毒片（含石膏）。试分析该用药是否合理？
【作用机制及耐药性】
氯霉素与细菌核糖体50S亚基上的肽酰转移酶作用位点可 逆性结合，阻止P位上肽链的末端羧基A位上氨基酰发生反应， 从而阻止肽链延伸，使蛋白合成受阻。 耐药性主要与细菌产生钝化酶以及细胞膜通透性改变有关
四环素类及氯霉素
【临床用途】
作为一种高效的抗生素，曾广 泛用于治疗各种敏感菌感染， 但由于其抑制骨髓作用，其临 床应用受到严格控制。凡有合 适的抗生素替代，一般不主张 选用氯霉素。
H3C O OH-
O OH CH3 O OO
O OH
CH3 O
OO
四环素类及氯霉素
【与金属离子的反应】（C10酚-OH和C12烯 醇羟基）
与钙或镁形成不溶性盐。 与铁离子形成红色络合物。 与铝离子形成黄色络合物。 与钙离子形成黄色螯合物，沉积在骨骼和牙齿上，
第十一章 抗生素
8
5．变色酸-硫酸呈色反应 如阿莫西林加变色酸-硫酸试剂混合后， 于1500C加热2～3min，呈深褐色。 6．与重氮苯磺酸呈色反应 头孢菌素族7位侧链含有—C6H5—OH基 团时，能与重氮苯磺酸试液产生偶合反应， 显橙黄色。 7．与铜盐呈色 头孢氨苄加醋酸、硫酸铜、氢氧化钠试 液后，生成铜配位盐，显橄榄绿色。
40
l测定法
取本品适量，精密称定，加水溶解并 定量稀释制成每1ml中含0.1mg的溶液，精密量 取10ul注入液相色谱仪，记录色谱图；另取苯唑 西林对照品适量，同法测定。按外标法以峰面积 计算供试品中C19H19N3O5S的含量。
41
例2 头孢哌酮
l
【性状】 本品为白色或类白色结晶性粉末； 无臭，味微苦；有引湿性。 l本品在丙酮或二甲亚砜中溶解，在甲醇或乙醇 中微溶，在水或乙酸乙酯中极微溶解。
47
l测定法
取本品约50mg，精密称定，置100ml 量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，精密量取 20ul，注入液相色谱仪，记录色谱图；另取头孢 哌酮对照品，先加上述磷酸盐缓冲液适量助溶后， 再用流动相定量稀释成每1ml中含0.5mg的溶液， 同法测定。按外标法以峰面积计算供试品中 C25H27N9O8S2的含量。
3
第二节
β-内酰胺类抗生素
本类抗生素包括青霉素族和 头孢菌素族，它们的分子结构中 均含有β-内酰胺环，故统称为β内酰胺类抗生素。
4
二、鉴别试验
（一）
钾、钠盐的火焰反应
5
（二）呈色反应
1．羟肟酸铁反应
羟胺 青霉素/头孢菌素 碱性环境 羟肟酸 稀酸 高铁离子
紫红色 红褐色
红棕色Байду номын сангаас
氨苄西林 头孢氨苄
5．变色酸-硫酸呈色反应 如阿莫西林加变色酸-硫酸试剂混合后， 于1500C加热2～3min，呈深褐色。 6．与重氮苯磺酸呈色反应 头孢菌素族7位侧链含有—C6H5—OH基 团时，能与重氮苯磺酸试液产生偶合反应， 显橙黄色。 7．与铜盐呈色 头孢氨苄加醋酸、硫酸铜、氢氧化钠试 液后，生成铜配位盐，显橄榄绿色。
40
l测定法
取本品适量，精密称定，加水溶解并 定量稀释制成每1ml中含0.1mg的溶液，精密量 取10ul注入液相色谱仪，记录色谱图；另取苯唑 西林对照品适量，同法测定。按外标法以峰面积 计算供试品中C19H19N3O5S的含量。
41
例2 头孢哌酮
l
【性状】 本品为白色或类白色结晶性粉末； 无臭，味微苦；有引湿性。 l本品在丙酮或二甲亚砜中溶解，在甲醇或乙醇 中微溶，在水或乙酸乙酯中极微溶解。
47
l测定法
取本品约50mg，精密称定，置100ml 量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，精密量取 20ul，注入液相色谱仪，记录色谱图；另取头孢 哌酮对照品，先加上述磷酸盐缓冲液适量助溶后， 再用流动相定量稀释成每1ml中含0.5mg的溶液， 同法测定。按外标法以峰面积计算供试品中 C25H27N9O8S2的含量。
3
第二节
β-内酰胺类抗生素
本类抗生素包括青霉素族和 头孢菌素族，它们的分子结构中 均含有β-内酰胺环，故统称为β内酰胺类抗生素。
4
二、鉴别试验
（一）
钾、钠盐的火焰反应
5
（二）呈色反应
1．羟肟酸铁反应
羟胺 青霉素/头孢菌素 碱性环境 羟肟酸 稀酸 高铁离子
紫红色 红褐色
红棕色Байду номын сангаас
氨苄西林 头孢氨苄
抗生素类药物的分析)
RCO HN O
S N
CH3
RCO NH
CH3
O
COOH
S
N CH2R1
COOH26
溶解性 青霉素
K+
NHa
青霉素钾 青霉素钠
难溶于水 易溶于有机溶剂
易溶于水 难溶于有机溶剂
27
2. 手性C 旋光性
S
** O N*
**S
N O
（5%头孢唑啉钠溶液［］2D0 –18～–24°）
58
（三）汞量法 ChP
1. 原理 *β-内酰胺类不直接与汞反应 *β-内酰胺类水解产物可与汞发
生定量反应
59
青霉素类O水H解 青霉噻唑酸水O解H 青霉胺
ChP（2000） 青霉素钾 青霉素钠 苯唑西林钠 普鲁卡因青霉素 氯唑西林钠
pH4.6 Hg2
青霉胺络汞
60
CH2 COHN O
NH2 O
S N
CH3 CH3 COOH
18
阿莫西林（羟氨苄青霉素）
S CH3
HO
CH COHN
NH2
N
O
CH3 COOH
19
普鲁卡因青霉素
CH2 COHN O
S N
NH2 CH3
CH3 ·
COOH
(C2H5)2NCH2CH2OOC
20
磺苄西林钠
CH COHN
SO3Na O
S N
CH3 CH3 COONa
水5ml溶解后，加1mol/L氢氧化钠溶液5ml，摇匀
，放置15分钟，加1mol/L硝酸溶液5ml，醋酸盐
S N
CH3 CH3 COONa
青霉胺络汞
突跃2 CH3
《—抗生素》PPT幻灯片PPT
O
NS
O O
❖β-内酰胺环为一个平面结构。但两个稠合 环不共平面，青霉素沿N1-C5轴折叠，头孢 菌素沿N1-C6轴折叠。
13
一、青霉素类
14
青霉素的发现简史
❖ 早在唐朝，长安城的裁缝将长有绿毛的糨糊涂在被 剪刀划破的手指上帮助伤口愈合。
❖ 1928年英国医生Fleming首先从青霉菌中发现青霉素， 其具有明显抑制G+菌的作用，但由于Fleming无法分 离得到纯净的单体，研究成果没有引起重视。
6
第一节 β-内酰胺抗生素 β-Lactam Antibiotics
7
β-内酰胺类抗生素概述
❖ 定义：分子中含有由四个原子组成
的β-内酰胺环的抗生素。
❖ 属于时间依赖型的繁殖期杀菌剂。
❖ β-内酰胺环的作用：
▪ 四元环张力较大，其化学性质不 稳定，易发生开环导致失活；
▪ β-内酰胺环开环与细菌的黏肽
不溶于水，可溶于有机溶剂(乙酸丁酯) 。 ❖ 临床上主要用于革兰氏阳性球菌例如链球菌、肺炎
球菌、敏感的葡萄球菌等引起的全身或严重的局部 感染。 ❖ 优点：相比于其它抗生素，副作用小、发生率低。
21
青霉素G的缺点
1. 不能口服给药，只能注射给药，临床上常用其钠 盐，以增强其水溶性，其水溶液在室温下不稳定， 易分解。故临床上通常使用青霉素钠的粉针，注 射前用注射用水新鲜配制。
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1
第十章 抗生素
1 β-内酰胺类抗生素 2 四环素类抗生素 3 氨基苷类抗生素 4 大环内酯类抗生素
5 氯霉素类抗生素
2
抗生素定义
抗生素类药物的分析
盐酸四环素
（二）吸收度杂质吸收度
ChP、USP
HPLC法（外标法）
第三章节
第三节 分析文体特征和表现手法 2大考点
书法大家启功自传赏析
中学生，副教授。博不精，专不透。名虽扬，实不够。高不成，低不就。瘫偏‘左’，派曾‘右’。面微圆，皮欠厚。妻已亡，并无后。丧犹新，病照旧。六十六，非不寿。八宝山，渐相凑。计平生，谥曰陋。身与名，一起臭。
（1）羧基
Na
与有机碱(普鲁卡因)成盐，难溶于水，易溶于甲醇等有机溶剂
普鲁卡因青霉素
头孢菌素类 C6 C7
青霉素类 C3 C5 C6
旋光性
根据此性质，可用于鉴别和含量测定
（2）手性C
青霉素类 母核无明显UV 多数有苯环取代基
UV
（3）共轭体系
干燥纯净 稳定 室温密封可以保存3年以上 水溶液 不稳定随PH和温度有很大变化。青霉素水溶液在PH6-6.8时较稳定本类药物在酸，碱，青霉素酶，羟胺，及某些金属离子（铜，铅，汞，银）或氧化剂等作用下，易发生水解和分子重排
原因：
四元环张力大酰胺键易水解
＊
＊
＊
＊
＊
青霉素族和头孢菌素族分子都有一个游离羧基和酰胺侧链。氢化噻唑环或氢化噻嗪环与β–内酰胺环并合的杂环,分别构成二者的母核.
6-APA
7-ACA
青霉素分子中含有三个手性碳原子(C3,C5,C6),头孢菌素族分子两个手性碳原子(C6,C7),
青霉素分子中的母核称为6-氨基青霉烷酸(6-APA),头孢菌素族分子中的母核称为7-氨基头孢菌烷酸(7-ACA)
氧化还原性：链霉素分子结构中具有醛基，遇氧化剂如：高锰酸钾、氯酸钾、过氧化氢等易被氧化成链霉酸而失效；遇还原剂如：Vc、葡萄糖、半光氨酸等被还原为双氢链霉素，毒性增加 硫酸庆大霉素:对光，热，空气均较稳定，水溶液亦稳定，PH2-12时，100℃加热30min活性无明显变化（四）紫外吸收光谱链霉素在230nm有紫外吸收，庆大霉素没有紫外吸收。
（二）吸收度杂质吸收度
ChP、USP
HPLC法（外标法）
第三章节
第三节 分析文体特征和表现手法 2大考点
书法大家启功自传赏析
中学生，副教授。博不精，专不透。名虽扬，实不够。高不成，低不就。瘫偏‘左’，派曾‘右’。面微圆，皮欠厚。妻已亡，并无后。丧犹新，病照旧。六十六，非不寿。八宝山，渐相凑。计平生，谥曰陋。身与名，一起臭。
（1）羧基
Na
与有机碱(普鲁卡因)成盐，难溶于水，易溶于甲醇等有机溶剂
普鲁卡因青霉素
头孢菌素类 C6 C7
青霉素类 C3 C5 C6
旋光性
根据此性质，可用于鉴别和含量测定
（2）手性C
青霉素类 母核无明显UV 多数有苯环取代基
UV
（3）共轭体系
干燥纯净 稳定 室温密封可以保存3年以上 水溶液 不稳定随PH和温度有很大变化。青霉素水溶液在PH6-6.8时较稳定本类药物在酸，碱，青霉素酶，羟胺，及某些金属离子（铜，铅，汞，银）或氧化剂等作用下，易发生水解和分子重排
原因：
四元环张力大酰胺键易水解
＊
＊
＊
＊
＊
青霉素族和头孢菌素族分子都有一个游离羧基和酰胺侧链。氢化噻唑环或氢化噻嗪环与β–内酰胺环并合的杂环,分别构成二者的母核.
6-APA
7-ACA
青霉素分子中含有三个手性碳原子(C3,C5,C6),头孢菌素族分子两个手性碳原子(C6,C7),
青霉素分子中的母核称为6-氨基青霉烷酸(6-APA),头孢菌素族分子中的母核称为7-氨基头孢菌烷酸(7-ACA)
氧化还原性：链霉素分子结构中具有醛基，遇氧化剂如：高锰酸钾、氯酸钾、过氧化氢等易被氧化成链霉酸而失效；遇还原剂如：Vc、葡萄糖、半光氨酸等被还原为双氢链霉素，毒性增加 硫酸庆大霉素:对光，热，空气均较稳定，水溶液亦稳定，PH2-12时，100℃加热30min活性无明显变化（四）紫外吸收光谱链霉素在230nm有紫外吸收，庆大霉素没有紫外吸收。
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酸碱滴定法：应用广泛 HPLC法：应用广泛
硫醇汞盐法
青霉素
咪青唑霉烯酸硫醇汞盐 HgCl2
（λmax 324～345nm）
三、氨基糖苷类
1. 化学结构
都是以氨基环醇与氨基糖缩合而成的苷； 分子结构中都含有多羟基； 均为碱性抗生素；
链霉素
三、氨基糖苷类
碱性(氨基) 临床应用其硫酸盐
旋光性(糖) （糖）：有多个手性碳
A
CONH2
OH O
(CH3)2N H
A
OH O
OH
CONH2
差向异构体
R CH3 OH H
DCB
R
H2O D
CH3
CB
R
CH3
DC B
OH O
OH
OH O
OH
OH OH O
脱水四环素类
四、四环素类
R CH3 OH R''' H N
OH O
OH OH O
CH3
CH3 OH
二、β–内酰胺类
包括青霉素类和头孢菌素类 1. 化学结构
青霉素类：6-APA为母核
头孢菌素类：7-ACA为母核
中国药科大学药学院药分教研室
二、β–内酰胺类
酸性(羧基) 酸性较强（pKa 2.5-2.8） 临床常用其碱金属盐 （水溶性好）
旋光性
有多个手性碳
2、主要 理化性质
UV（共轭） 青霉素类：苯环取代基 头孢菌素类：母核有共轭结构
一、概 述
1. 抗生素（antibiotics）
在低微浓度下即可对某些生物（病原微生物）的生命活动有特异抑制作用的化学物质的 总称
2. 分 类
β–内酰胺类 氨基糖苷类 四环素类 大环内酯类 多烯大环类
多肽类
一、概 述
3. 来 源
化学合成
4. 抗生素的特点 化学纯度较低 活性组分易发生变异 稳定性差
稳定性 易发生异构化，降解等反应，性质不稳
定
与金属离子络合
酚羟基、烯醇基与Ca2+、Mg2+络合显色
四、四环素类
2. 主要理化性质
弱酸性（pH2-6） A环C-4异构化 差向四环素
酸性（pH< 2）
C环脱水
脱水四环素
碱性
C环开环，形成内酯 异四环素
四、四环素类
H N(CH3)2
OH pH2.0~6.0
5）色谱法（HPLC、TLC）
二、β–内酰胺类
4、检 查
聚合物 有关物质和异构体 吸光度 残留溶剂 结晶性
二、 β–内酰胺类
5、含量测定 -----------碘量法（ChP2000）
原理：青霉素与头孢菌素本身不与碘反应，但其碱性降解产物可消耗碘
青霉素族 头孢菌素族
I2+2Na2S2O3
剩余
NaOH 水解
空白试验:
因样品中杂质会消耗碘，故应作空白试验。
空白试验与经典空白试验不同：
加入样品，不加碱； 其余试剂（醋酸盐缓冲液，碘液，硫代硫酸钠）都要加碱。
5、含量测定
-----------碘量法（ChP2000）
特 点：
灵敏度高：样品 : 碘 = 1 : 8 反应条件、实验操作要求高
1份含量
V对、V对空 V样、V样空
稳定性(内酰胺)
干燥条件较稳定，溶液不稳定
青霉素
氧化剂、酸、碱 酶、金属离子、Δ
降解 失效
二、β–内酰胺类
3、鉴 别
1）羟肟酸铁反应：
β–内酰胺类
羟NH肟2O酸H·HCl 显色
Fe3+
NaOH
H+
2）茚三酮反应
呈
α-氨基 3）双缩脲反应
茚蓝三紫酮色 Δ
色 反
β–内酰胺类
碱性酒紫石红酸色铜
应
4）光谱法（UV、NMR）
加试剂次序、反应时间、滴定速度相同
含量％＝
V样空 - V×样 V对空 - V对
W对× 对照品％ W样
5、含量测定
-----------电位配位滴定法（汞量法）
原理：青霉素不与汞盐反应，其碱性降解产物可与Hg2+络和。
Hg+ + 2R-SH
(RS)2Hg + 2H+
R CONHCH
H HS CC
Hg2+ C N O OH
N
CH3
CH3
N
N
CH3
CH3
H+
+N CH3
N H CH3
红色
三、氨基糖苷类 -------鉴别
麦芽酚（Maltol)反应：(链霉糖特有）
链霉素
麦O芽H-酚 重排
紫红色Fe3+
O
O
O
O
CH3
OH
CH3
Fe/3 O
坂口（Sakaguchi）反应：(链霉胍特有）
链霉素
链霉OH胍水解
8-羟基喹啉
橙红 或α-萘酚
4I2H
+
8I-
2NaI + Na2S4O6
定量过量
5、含量测定
-----------碘量法（ChP2000）
反应分两步进行： 水解反应 (按化学计算量进行)
氧化-还原反应 (无定量关系，受温度、pH值和时间等因素影响， 应严格控制反应条件并采用标准品平行对照测定)
5、含量测定
-----------碘量法（ChP2000）
2、主要 理化性质
溶解度(氨基、羟基) 水溶性
稳定性(苷) 强酸、碱条件均可水解
三、氨基糖苷类
3、鉴 别
茚三酮反应：具羟基胺类，α-氨基酸性质 链霉素 + 水和茚三酮
蓝紫色
N-甲基葡萄糖胺（Elson-Morgan）反应：
链霉素
水解N-甲基葡萄糖胺
CHO
乙酰丙酮 OH-
对二甲氨基苯甲醛
H
H
C
C
+
N
NaOBr
硫酸盐反应
三、氨基糖苷类
4、检 查-------------
来 源：
链霉素中链霉素B的检查
发酵中产生
薄层色谱法（杂质对照品法）
BP:
色谱柱：ODS
庆大霉素C 组分测定（系统适用性试验）
检测波长：
330nm（邻苯二甲醛柱前衍生）
流动相： H2O-HAc-MeOH配制的庚烷磺酸钠溶液(0.2M)，必要时调节甲醇的含量。
R CONH CHHOOCΒιβλιοθήκη 方法说明：C CH3
C CCHO3OH H
R
HS C
NH Hg2+
O
CH3 CH3 H CO
a、空白试验与碘量法类似，加样品，不加NaOH
b、与碘量法相比，汞量法不需对照试验
H CONHC
OC O
HS C
CH3
HN
H CCHO3OH
Hg2+
5、含量测定
-----------其他常用方法
要求：NC2 ≥2000，C2a峰和C2峰的分离度应符合要求，重复进样RSD<2.0%
三、氨基糖苷类
4、含 量 检 测 氨基糖苷类 含量检测
微生物法、HPLC法等
四、四环素类
1. 化学结构
四、四环素类
两性 -OH：酸性
N(CH3)2：碱性 与酸、碱均可成盐 临床多用盐酸盐
旋光性
UV和荧光
2、主要 理化性质
生物合成（发酵） 半合成
原因
生产工艺复杂 发酵过程不易控制，易受污染
一、概 述
5. 抗生素质量分析
鉴别：物理化学方法、微生物法 检查：水分、异常毒性、热原、细菌内毒素、降压物质等 含量/效价测定：
微生物法 ： 与临床疗效吻合，灵敏度高，但操作复杂费时；
理化方法： 准确度与专属性较高，且操作简便，但与临床疗效有偏差