金黄色葡萄球菌的检验PPT课件

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医学金黄色葡萄球菌PPT

医学金黄色葡萄球菌PPT

表皮剥落脱毒素B 1971
33000
7.0
染色体 质粒
烫伤样皮肤 综合症
剥落性皮炎
中毒性休克综合症 1981
24000
7.0
毒素 (TSST-1)
转座子
毒性休克综 合症
金黄色葡萄球菌肺炎(staph
ylococcus aureus pneumonia) 是由 金黄色葡萄球菌(一般为凝固酶阳性) 所致的肺炎。由于滥用抗生素的结果, 抗药性金黄色葡萄球菌的菌株明显增加, 金黄色葡萄球菌感染也见增多。本病大 多并发于葡萄球菌败血症,多见于幼婴 及新生儿,年长儿也可发生。
生物学特性
❖ 形态与染色
典型的金黄色葡萄球菌为球 型,直径0.8μm左右,显微 镜下排列成葡萄串状。
A蛋白已广泛应用于细菌、 病毒等病原诊断及分析等方 面。
其细胞壁含有3种主要成分: 核糖醇磷壁酸、肽聚糖和A 蛋白(SPA)。
金黄色葡萄球菌A蛋白
金黄色葡萄球菌无芽 孢、鞭毛,大多数无 荚膜。
革兰氏染色阳性。
❖ 为检测食品中的SAU, 国内外常用的微生物定量方法有平板 计数法、细菌磷酸酶活性定量法、MPN-PCR 法等, 这些方 法耗时费力、特异性不强、需要PCR后处理。
❖ 另一种定量方法是荧光定量PCR , 该方法能够定量测定DNA 的含量, 因此也具有对微生物进行计数的能力。但许多食品 基质、培养基等都可能对PCR 有抑制作用, 导致假阴性结果, 这是荧光定量PCR全面引入常规食品分析的一大障碍。

分类地位
黄 色
生物学特性
葡 萄
功能/危害

作用机理

最新研究进展
球菌 金黄色葡萄球菌
细菌 杆菌

微生物检测技术--金黄色葡萄球菌检测PPT课件

微生物检测技术--金黄色葡萄球菌检测PPT课件
❖ β溶血: 呈完全性溶血,在血平皿上菌落周围有2~4mm宽、 界限分明、无色透明的溶血环。
❖ γ溶血:不产生溶血素,在血琼脂平皿上的菌落周围无溶血 环。
2021
9
❖ 可产生卵磷脂酶,在卵黄高盐培养基上形 成周围有白色沉淀环的菌落。
2021
10
1.3 生化反应
❖ 大多数菌株分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗 糖,产酸不产气。
❖ 分解甘露醇,产酸。
2021
11
2、致病性
❖ 金黄色葡萄球菌是人类化脓感染中最常见的病原菌,为条件致 病菌。可引起局部化脓感染,也可引起肺炎、心包炎等,甚至 败血症、脓毒症等全身感染。
2021
12
葡萄球菌皮肤感染
2021
13
❖ 菌株致病力的强弱主要取决于其产生的毒素和侵袭性酶:
a.溶血素:外毒素,分α、β、γ多种,能损伤血小板,破坏溶酶体,
C. 分解甘露醇
D. 产生耐热核酸酶
3.金黄色葡萄球菌的培养特性是—————— A.营养要求高 ,必须在血平板上才能生长
B.均能产生金黄色色素
C. 耐盐性强, 可在含7%~15%NaCL的培养基中生长
D.专性需氧
2021
34
课堂练习
4.金黄色葡萄球菌定性试验中所用的增菌液是( )。
A 7.5%氯化钠肉汤 B 10%氯化钠胰酪胨大豆肉汤
2021
32
检样:25 g(mL)样品+225 mL 7.5 %氯化钠肉汤或10 % 氯化钠胰酪胨大豆肉汤,均质
36 ℃±1 ℃ 18 h~24 h
Baird-Parker 平板,血平板
36℃±1℃
18 h~24 h
增菌 分离
涂片染色

第六章金黄色葡萄球菌的检验PPT资料

第六章金黄色葡萄球菌的检验PPT资料

3、生化特性:
可分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖,产酸 不产气。甲基红反应阳性,VP反应弱阳性。
许多菌株可分解精氨酸,水解尿素,还原硝 酸盐,液化明胶。
金黄色葡萄球菌具有较强的抵抗力,对磺胺 类药物敏感性低,但对青霉素、红霉素等高度敏 感。
金黄色葡萄球菌的致病性
金黄色葡萄球菌的致病力强弱主要取决于其产生的毒素 和侵袭性酶: a.溶血毒素:外毒素,分α、β、γ、δ,能损伤血小板, 破坏溶酶体,引起肌体局部缺血和坏死; b.杀白细胞素:可破坏人的白细胞和巨噬细胞; c.血浆凝固酶:当金黄色葡萄球菌侵入人体时,该酶使血液 或血浆中的纤维蛋白沉积于菌体表面或凝固,阻碍吞噬细胞 的吞噬作用。 葡萄球菌形成的感染易局部化与此酶有关; d.脱氧核糖核酸酶:金黄色葡萄球菌产生的脱氧核糖核酸酶 能耐受高温,可用来作为依据鉴定金黄色葡萄球菌; e.肠毒素:金黄色葡萄球菌能产生数种引起急性胃肠炎的蛋 白质性肠毒素,分为A、B、C、D、E及F六种血清型。
比如:法国梅里埃公司生产的RPF培养基、API检测系统等。 当用接种针触及菌落时具有黄油样粘稠感。 葡萄球菌形成的感染易局部化与此酶有关; 5%氯化钠肉汤或胰酪胨大豆肉汤50 mL培养基内,36℃±1℃培养24 h,转种血平板和Baird-Parker平板, 36℃±1℃培养24 h,挑取血 平板上金黄色(有时为白色)菌落进行革兰氏染色镜检及血浆凝固酶试验。 金黄色葡萄球球菌的单个菌落在血平板上呈金黄色,有时也为白色,大而突出、圆形、不透明、表面光滑,周围有溶血圈。 Staphylococcus aureus Enhanced sem w: 7. 5~15%NaCl肉汤中生长。 中毒食品种类多,如奶、肉、蛋、鱼及其制品。 金黄色葡萄球菌的扫描电镜照片 杀白细胞素:可破坏人的白细胞和巨噬细胞;

金黄色葡萄球菌pptppt课件

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8
治疗方法
现在有金黄色葡萄球菌感染者者, 可选用:红霉素、新型青霉素、庆大 霉素、万古霉素或先锋霉素Ⅵ治疗。
.9检测方法Fra bibliotek一般方法
快速检测法
革兰染色镜检 耐热核酸酶试验 血浆凝固酶试验 生化反应试验
金黄色葡萄球菌鉴别 培养基
3M 金黄色葡萄球菌 快速测试片法
金黄色葡萄球菌乳胶 凝集试验
.
10
企业
个人
.
11
企业
防止金黄色葡萄球菌污染食品 防止金黄色葡萄球菌肠毒素的生成 杀死金黄色葡萄球菌
.
12
个人
1、皮肤、口腔、鼻咽腔中寄居的葡萄球菌,常是感染的来 源。因此,首先要注意个人的清洁卫生,皮肤有创伤时不
要直接接触食物,并应及时消毒处理,防止感染。 2、食物要新鲜。尽量不吃隔夜菜,保存食物尽量选择低温、 通风的条件,可阻止致病菌的生长繁殖。 3、生熟分开。从检测的结果看,生的食物带有致病菌的比 例远高于熟食。同时,冰箱里中剩菜和生的原料(如蔬菜) 不要混放,要有相对隔离,或者简单包装(如放在保鲜盒内) 后再盛放。处理食材的案板、菜刀等最好要生熟分开使用。
个特性进行污染标本分离。
%蔗糖或15 %以上食盐食品中
才可被抑制,能在15 %NaCl
和40 %胆汁中生长。
.
4
存在什 么危害
谁会受 到危害
危害怎么 发生
危害性评估
.
5
人食用了被金黄色葡萄球菌及其毒 素污染的食物,会引起急性胃肠炎,有 恶心、呕吐、腹痛、腹泻等症状。严重 者可虚脱或休克 。
金黄色葡萄球菌可经皮肤伤口,引 起局部化脓感染。如果人抵抗力低下, 则会因其在身体内大量繁殖,而引起多 发性脓肿和炎症。

第六章_金黄色葡萄球菌的检验ppt课件

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17
血平板上金黄色葡萄球菌 菌落形态
金黄色葡萄球球菌的单个菌落在血平板上呈金 黄色,有时也为白色,大而突出、圆形、不透明、表面 光滑,周围有溶血圈。
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18
溶血圈
-
19
金黄色葡萄球菌 在BP平板上的菌落形态
在Baird-Parker琼脂平板上菌落呈圆形,表面光滑、凸起、 湿 润,直径2~3 mm。灰黑色至黑色,有光泽,常有浅色(非白 色)的边缘,周围绕以不透明圈 (沉淀),其外常有一清晰带 。当用接种针触及菌落时具有黄油样粘稠感。有时可见到不分解 脂肪的菌株,除没有不透明圈和清晰带外,其他外观基本相同。 从长期贮存的冷冻或脱 水食品中分离的菌落,其黑色常较典型 菌落浅些,且外观可能较粗糙,质地较干燥。
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8
3、生化特性:
可分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖,产酸不产气。 甲基红反应阳性,VP反应弱阳性。
许多菌株可分解精氨酸,水解尿素,还原硝酸盐,液 化明胶。
金黄色葡萄球菌具有较强的抵抗力,对磺胺类药物敏 感性低,但对青霉素、红霉素等高度敏感。
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金黄色葡萄球菌的致病性 金黄色葡萄球菌的致病力强弱主要取决于其产生的毒素和 侵袭性酶: a.溶血毒素:外毒素,分α、β、γ、δ,能损伤血小板,破 坏溶酶体,引起肌体局部缺血和坏死; b.杀白细胞素:可破坏人的白细胞和巨噬细胞; c.血浆凝固酶:当金黄色葡萄球菌侵入人体时,该酶使血液或 血浆中的纤维蛋白沉积于菌体表面或凝固,阻碍吞噬细胞的吞 噬作用。 葡萄球菌形成的感染易局部化与此酶有关; d.脱氧核糖核酸酶:金黄色葡萄球菌产生的脱氧核糖核酸酶能 耐受高温,可用来作为依据鉴定金黄色葡萄球菌; e.肠毒素:金黄色葡萄球菌能产生数种引起急性胃肠炎的蛋白 质性肠毒素,分为A、B、C、D、E及F六种血清型。

金黄色葡萄球菌演示课件

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诊断方法
根据临床表现、细菌学检查和血清学 检查等综合判断。其中,细菌学检查 包括涂片镜检、分离培养和药敏试验 等。
02
生物学特性
形态与结构特点
革兰氏阳性球菌,呈葡萄串状排列 细胞壁含有肽聚糖和磷壁酸
无芽孢、无鞭毛,大多数无荚膜
生长条件及繁殖方式
01
需氧或兼性厌氧菌,最适生长温度为37°C
02
在普通培养基上生长良好,形成圆形、凸起、 光滑、湿润的菌落
05
临床治疗策略与预防措施
抗菌药物治疗原则及选用建议
早期、足量、联合使用敏感抗菌药物
01
在感染初期,应尽早使用足量、敏感的抗菌药物,以迅速控制
感染,减少并发症的发生。
个体化治疗方案
02
根据患者的年龄、病情严重程度、感染部位等因素,制定个体
化的治疗方案,以提高治疗效果。Biblioteka 避免滥用抗菌药物03
严格掌握抗菌药物的使用指征,避免不必要的滥用,以减少耐
04
实验室检测方法与技术
传统培养法鉴定原理及操作步骤
鉴定原理
通过选择性培养基,如Baird-Parker琼脂平板,抑制其他细菌生长,促进金黄色葡 萄球菌生长并形成典型菌落。根据菌落形态、色素产生和生化反应进行鉴定。
免疫学检测方法介绍及应用范围
免疫学检测方法
利用抗原抗体特异性结合的原理,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫荧光 技术、免疫磁珠分离技术等检测金黄色葡萄球菌。
03
繁殖方式主要为二分裂,也可进行多次分裂形 成短链状
代谢途径与产物分析
01
主要代谢途径包括糖酵 解、磷酸戊糖途径和三
羧酸循环等
02
可产生多种酶类,如凝 固酶、葡萄球菌溶血素

金黄色葡萄球菌的检测技术ppt课件

金黄色葡萄球菌的检测技术ppt课件
食品中金黄色葡萄球菌检验技术
金黄色葡萄球菌在自然界中无处不在,空气、土壤、水及人 和动物的排泄物中都可以找到。因而,食品受其污染的机会 很多。近年来,美国疾病控制中心报告,由金黄色葡萄球菌 引起的感染占第二位,仅次于大肠杆菌。金黄色葡萄球菌肠 毒素是个世界性卫生问题,在美国由金黄色葡萄球菌肠毒素 引起的食物中毒占整个细菌性食物中毒的33%,加拿大责更 多占百分之45%,我国每年发生的此类中毒事件也非常多。
头孢呋辛酯 - 适应症 皮疹 本品适用于溶血性链球菌、金黄 色葡萄球菌(耐甲氧西林株除外) 及流感嗜血杆菌、大肠埃希菌、 肺炎克雷伯菌、奇异变形杆菌等 肠杆菌科细菌敏感菌株所致成人 急性咽炎或扁桃体炎、急性中耳 炎、上颌窦炎、慢性支气管炎急 性发作、急性支气管炎、单纯性 尿路感染、皮肤软组织感染及无 并发症淋病奈瑟菌性尿道炎和宫 颈炎。儿童咽炎或扁桃体炎、急 性中耳炎及脓疱病等。
二、检验所需器材
金黄色葡萄球菌检验的器材主要有:胰酪胨大豆肉汤、 7.5%氯化钠肉汤、血琼脂平板、Baird-Parker琼脂平 板、肉浸液肉汤、灭菌盐水、兔血浆及显微镜、培养 箱、离心机、1ml和10ml灭菌吸管、灭菌试管、灭菌平 皿、均质器、载玻片、L形涂布棒、酒精、接种环等。
25g(ml)+225ml灭菌生理盐
2.直接计数方法 1)检样处理 同“增菌培养法”。 2)样品稀释 吸取上述1:10混悬液,进行10倍递 增稀释。 3)分离接种 根据样品污染情况,选择适宜浓度 的稀释液1ml,分别加入三个Baird-Parker平板,每个 平板接种量分别为 0.3,0.3,0.4ml,然后用灭菌L棒涂布整个平板。如水 分不易吸收,可将平板放在 (36+1) ℃ 温箱1h, 等水分蒸发后反转平皿置(36+1) ℃ 温箱培养。 4)菌落计数 在三个平板上将周围有浑浊带的黑 色菌落计数。 5)接种血平板 任选5个菌落,分别接种血平板, (36+1)℃ 培养24h后进行革兰氏染色镜检。
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金黄色葡萄球菌的致病性
金黄色葡萄球菌的致病力强弱主要取决于其产生的毒素 和侵袭性酶: a.溶血毒素:外毒素,分α 、β 、γ 、δ ,能损伤血小板, 破坏溶酶体,引起肌体局部缺血和坏死; b.杀白细胞素:可破坏人的白细胞和巨噬细胞; c.血浆凝固酶:当金黄色葡萄球菌侵入人体时,该酶使血液 或血浆中的纤维蛋白沉积于菌体表面或凝固,阻碍吞噬细胞 的吞噬作用。 葡萄球菌形成的感染易局部化与此酶有关; d.脱氧核糖核酸酶:金黄色葡萄球菌产生的脱氧核糖核酸酶 能耐受高温,可用来作为依据鉴定金黄色葡萄球菌; e.肠毒素:金黄色葡萄球菌能产生数种引起急性胃肠炎的蛋 白质性肠毒素,分为A、B、C、D、E及F六种血清型。
季节分布,多见于春夏季;中毒食品 种类多,如奶、肉、蛋、鱼及其制品。此 外,剩饭、油煎蛋、糯米糕及凉粉等引起 的中毒事件也有报道。
金黄色葡萄球菌的检验
GB4789.10-2010 √第一法:金黄色葡萄球菌的定性检测 √第二法:金黄色葡萄球菌Baird-Parker平板计数 √第三法:金黄色葡萄球菌MPN计数
*金黄色葡萄球菌肠毒素是个世界性卫生 问题,在美国由金黄色葡萄球菌肠毒素引起 的食物中毒占整个细菌性食物中毒的33%, 加拿大则更多,占45%,我国每年发生的此 类中毒事件也非常多。肠毒素形成条件:
√存放温度,在37℃内,温度越高,产 毒时间越短;
√存放地点,通风不良氧分压低易形成 肠毒素;
√食物种类,含蛋白质丰富,水分多, 同时含一定量淀粉的食物,肠毒素易生成。
• 7月2日,大阪府公共卫生研究所证实,从患 者饮用剩余的雪印牛奶中检查出了金黄色葡 萄球菌,这种葡萄球菌导致A型肠毒素滋生, 该毒素可造成饮用者腹泻、呕吐及全身不适。
• 牛奶被污染原因何在?
一、金黄色葡萄球菌的生物学特性
1、形态与染色:(staphylococcus aureus)
金黄色葡萄球菌无芽胞、鞭毛,大多数无荚膜,不运动 典型的金黄色葡萄球菌为球型,直径0.8 mm左右,显 微镜下排列成葡萄串状。 革兰氏染色阳性
金黄色葡萄球菌的定性检验
检样
增菌(7.5%氯化钠肉汤或
10%氯化钠胰酪胨大豆肉汤)
BP平板,血平板
涂片染色
观察溶血 报告
BHI肉汤和营养琼脂 血浆凝固酶实验
金黄色葡萄球菌的检验
1、样品制备 按无菌操作取检样25 g(mL),加入
225 mL灭菌生理盐水,固体样品研磨或置 均质器中制成1:10样品混悬液。
***当金黄色葡萄球菌污染了含淀粉及水分较 多的食品,如牛奶和乳制品、肉、蛋等,在温度条 件适宜时,经过8~10小时即可产生相当数量的肠毒 素,肠毒素可耐受100℃煮沸30分钟而不被破坏。
人摄食该菌污染的食物2~3h后 可引起中毒症状,它引起的食 物中毒症状是呕吐和腹泻。
金黄色葡萄球菌的流行病学特点
供计数检验时,可按十进位递增稀释法 将样品匀液再进行适当稀释。
金黄色葡萄球菌的检验
2、增菌及分离培养 吸取5 mL混悬液,接种于7.5%氯化钠
肉汤或胰酪胨大豆肉汤50 mL培养基内, 36℃±1℃培养24 h,转种血平板和BairdParker平板, 36℃±1℃培养24 h,挑取血 平板上金黄色(有时为白色)菌落进行革 兰氏染色镜检及血浆凝固酶试验。
血平板上金黄色葡萄球菌 菌落形态
金黄色葡萄球球菌的单个菌落在血 平板上呈金黄色,有时也为白色,大而 突出、圆形、不透明、表面光滑,周围 有溶血圈。
溶血圈
金黄色葡萄球菌 在BP平板上的菌落形态
在Baird-Parker琼脂平板上菌落呈圆形,表面光 滑、凸起、湿 润,直径2~3 mm。灰黑色至黑色,有 光泽,常有浅色(非白色)的边缘,周围绕以不透明 圈 (沉淀),其外常有一清晰带。当用接种针触及 菌落时具有黄油样粘稠感。有时可见到不分解脂肪的 菌株,除没有不透明圈和清晰带外,其他外观基本相 同。从长期贮存的冷冻或脱 水食品中分离的菌落, 其黑色常较典型菌落浅些,且外观可能较粗糙,质地 较干燥。
附: 金黄色葡萄球菌的显微照片 金黄色葡萄球菌的染色照片 金黄色葡萄球菌的扫描电镜照片 金黄色葡萄球菌的透射电镜照片

金黄色葡萄球菌的显微照片
典型的金黄色葡萄球菌为球型,直径0.8 mm 左右,显微镜下排列成葡萄串状。
金黄色葡萄球菌革兰氏染色显微照片
金黄色葡萄球菌无芽胞、鞭毛,大多数无荚膜
革兰氏染色阳性
金黄色葡萄球菌的扫描电镜照片 Staphylococcus aureus Enhanced sem w: 7.9 micron
金黄色葡萄球菌的透射电镜照片 Tem x12000 digitized Staphylococcus aureus
2、培养特性:
金黄色葡萄球菌营养 要求不高,在普通培养基 上生长良好,加少量葡萄 糖或血液生长更旺盛。需 氧或兼性厌氧,最适生长 温度37℃,最适生长pH 7.4
金黄色葡萄球菌检验
雪印牛奶中毒事件
• 人民日报(记者于青 管克江)报导 6月底以来,日本 关西等地区发生特大食品中毒事件,截至6月30日晚间, 因喝下有问题的雪印牌低脂肪牛奶而产生上吐下泻、腹 痛等不适症状的患者人数为4891人,到7月1日中午, 中毒人数已经超过5000人!且受害范围 也由原来的5个行政区域扩大至8个。这是战 后日本发生的规模最大的一起食品中毒事件。
成分:
胰蛋白胨 牛肉膏 酵母膏 丙酮酸钠 甘氨酸 氯化锂 卵黄 亚碲酸钾 琼脂
亚碲酸钾
卵磷脂环
甘氨酸、 氯化锂
BP平板主要成分及作用
• 氯化锂、甘氨酸 抑制非致病性葡萄球菌的生长
• 丙酮酸钠 促进葡萄球菌生长
• 亚碲酸钾 抑制G-杆菌生长,可被金黄色葡萄球菌还原为碲盐呈 黑色
• 卵黄 含蛋白质、卵磷脂、脂肪,提供营养和有利于观察卵 磷脂环
金黄色葡萄球菌有高度的耐盐性,可在7.5~ 15%NaCl肉汤中生长。
3、生化特性:
可分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖,产酸 不产气。甲基红反应阳性,VP反应弱阳性。
许多菌株可分解精氨酸,水解尿素,还原硝 酸盐,液化明胶。
金黄色葡萄球菌具有较强的抵抗力,对磺胺 类药物敏感性低,但对青霉素、红霉素等高度敏 感。
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