分光光度计的三大类型特点
分光光度法-紫外可见分光光度计分类及特点、常见故障及排除方法
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检查保险丝（或更换保险丝）
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检查计算机主机与仪器主机连线是否正常
➢ 自检时，某项不通过，或出现错误信息
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关机稍等片刻再开机重新自检
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重新安装软件后自检
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检查计算机主机与仪器主机连接是否正常
➢ 自检时出现“钨灯能量低”的错误
检查光度室是否有挡光物 打开光源室盖，检查钨灯是否点亮：如钨灯不亮，则关机，更换新钨灯 开机重新自检 重新安装软件后自检
镜纸由上而下擦拭干净，检视比色皿外无残留液体
➢比色皿放样品室时应注意方向相同 ➢使用完毕后需洗干净，晾干，防尘保存 ➢仪器室不得存放酸、碱、挥发性或腐蚀性等物质，以免损坏仪器。
紫外可见分光光度计维护及故障
02 紫外可见分光光度计常见故障及排除方法
➢ 打开主机后发现 不能自检主机风扇不转
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检查电源开关是否正常
收池，因为普通玻璃能吸收紫外光，石英吸收池也可用于可见光区。
➢ 检测器 光敏检测器的作用是将接受的光辐射信号转换为相应的电信号，便于测量。紫外可见分光光度计常使用的检测
器是光电倍增管，响应速度快，能检测10-8~10-9s的脉冲光，灵敏度高，比一般光电管高200倍。
➢ 信号显示器 显示装置或读数装置的作用就是检测电流的大小，并将有关分析数据显示或记录下来。
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检查样品是否有光解
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检查样品是否太稀
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检查比色皿是否玷污
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是否测试时光谱带太小
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周围有无强电磁场干扰
分光光度法
紫外可见分光光度计维护及故障
分光光度法
02 紫外可见分光光度计常见故障及排除方法
➢ 钨灯是好的，但自检时出现“钨灯能量高”的错误
三种常见的紫外可见分光光度计的简介与改进
三种常见的紫外可见分光光度计的简介与改进摘要：本文主要从定义、结构、原理图、应用进行介绍单光束紫外可见分光光度计、双光束紫外可见分光光度计、双波长紫外可见分光光度计，并根据实际使用中的优缺点提出了一些改进的思路。
关键词：单光束紫外可见分光光度计双光束紫外可见分光光度计双波长紫外可见分光光度计Abstract: This article introduces the definition, structure, schematics, applications of single-beam UV-Vis spectrophotometer, double beam UV-Vis spectrophotometer, dual wavelength UV-Vis spectrophotometer, and I also make some improvement ideas to make full use of their advantages and overcome their disadvangtages. Keywords:single-beam UV-Vis spectrophotometer double-beam UV-Vis spectrophotometer dual wavelength UV-visible spectrophotometer目录引言 (2)单光束紫外可见分光光度计 (2)定义 (2)结构 (2)优点 (2)应用前景 (2)缺点 (2)改进 (2)双光束紫外可见分光光度计 (3)定义 (3)结构 (3)优点 (3)应用前景 (3)缺点 (3)改进 (3)双波长紫外可见分光光度计 (4)原理 (4)结构示意图 (4)应用 (4)优点 (4)缺点 (4)改进 (4)引言：分光光度法在现代分析化学具有举足轻重的地位，常用于核酸的定量、蛋白质的直接定量、细菌细胞密度的测量。
分光光度计的种类
分光光度计的种类分光光度计是一种用于测量各种液体、气体、固体等物质的光吸收度的科学仪器。
通过不同波长的光以及样品对光的不同吸收，分光光度计能够分析出样品中所含的化学物质浓度、反应动力学等信息。
在生化、医学、环境等领域，分光光度计是不可或缺的工具之一。
本文将介绍分光光度计的种类及其特点。
一、单波段分光光度计单波段分光光度计指的是在一定的波长范围内进行测量的光度计。
这种光度计的原理是：当样品中的化合物吸收入射光时，光强减弱，根据比例关系，可以推算出物质的浓度。
例如，在DNA分子的260nm波长处测量吸光度，可以用来测定DNA浓度。
单波段分光光度计测量精度高，而且便于使用，但对于多个化合物的混合物无能为力，对于样品的预处理和纯化也有严格的要求。
二、双波长分光光度计双波长分光光度计则是指在两个不同波长下进行测量的光度计，从而减小了背景干扰及样品浓度变化等因素的影响。
这种光度计通常是具有408nm和550nm两种波长的双信道光度计。
双波长分光光度计能够同时测量两种化合物的吸光度，适用于多成分混合物的测量，测量精度相对于单波段分光光度计有所提高。
三、分光比色计分光比色计是指在两个不同波长下，比较样品与标准溶液的吸光度差异，同时进行测量的光度计。
这种技术可以测量非色谱性物质，如蛋白质和其他生化大分子的浓度，其测量精度非常高。
分光比色计的优点是不受背景的影响，例如色素、脂肪和杂质等。
四、荧光分光光度计荧光分光光度计是一种测量荧光的强度和特征的分光光度计。
荧光分光光度计可以用来定量测量样品中含有的荧光物质，如荧光染料、 DNA、 RNA、蛋白质等。
荧光分光光度计的测量原理是样品吸收紫外线，激发荧光物质分子，当分子从高能态退回到激发态时，会辐射出一定波长的光谱，被荧光探测器记录下来。
荧光分光光度计具有高的灵敏度和选择性，广泛应用于医学、环境科学、材料科学等领域。
综上所述，不同应用领域中需要不同的光度计种类。
在进行测量前应根据需要选用适当的光度计。
分光光度计的三大类型特点及工作原理
分光光度计的三大类型特点及工作原理分光光度计的三大类型特点由于分光光度计是一种常用的试验室分析仪器，所以无论是从款式上还是价格上五花八门，一般往往给初购者造成眼花缭乱、令人无所适从的感觉；价格因素一般是购买者首先考虑的问题，尽管分光光度计种类繁多，但不外乎：简易型、中档型和高档型三大类：（1）简易型仪器及其特点：结构：这种类型的仪器多为单光束型，即只有一束光照射到样品室内；光源一般仅有钨灯；样品支架一般为推拉式四联池架；波长选择多为手动查找，重复性差；狭缝为一个固定宽度模式；光学性能指标较低；检测器多为光敏二极管；显示器多为机械表头或数码管显示器，数据处理器一般没有。
此类仪器生产以国内厂家居多。
测量模式：多为定点（固定波长）吸光度或透过率测量方式，基本不能进行波长扫描测量。
适应范围：小型试验室及示范教学，分析样品相对简单，测试结果精度要求不高。
价格：相对低廉，一般在2万元人民币以下，所以还有确定的市场。
（2）中档型仪器及其特点：结构：此类仪器多为双光束型或准双光束型，但也有单光束仪器型；光源有钨灯和氘灯；样品池支架为两个固定式，分别是样品通道和参比通道；波长依照设定模式自动查找或扫描；狭缝多数仍为2nm固定宽度模式,也有1.5nm狭缝宽度的；检测器多数是硅光二极管，但也有少数用光电倍增管的；光学性能相对较高，其中光栅的技术指标尤为紧要，较佳的光栅为凹面型，为此无论在辨别率还是在杂散光方面指标要优于简易型仪器；显示器为液晶式或连接电脑，数据处理可由仪器自身具有的或外接计算机处理。
并有确定的测量附件。
测量模式：透过率、吸光度、浓度直读、单光束；单点及扫描均可。
适应范围：此类仪器基本可充分大多试验室分析需要。
价格：3～10万人民币之间，此类型仪器占分光光度计的比例最大。
（3）高档型仪器及特点：结构：除了中档仪器的特点外，紧要是光学系统的设计和制造工艺水平更高了，比如使用了大尺寸的凹面光栅，并且光栅刻槽数大于1800条/mm；波长检测范围有的仪器在近红外区已经超过1100nm，可达到2600nm；狭缝均为连续可调型，以适应高辨别率的需要，波长扫描速度的档位也加添了，检测器均使用高灵敏度的光电倍增管和红外检测器；数据处理目前基本是电脑来执行；衡量一台仪器的另外一个指标是看此仪器是否具有丰富的附属测量器件，如偏振附件、积分球附件、反射附件、自动进样器附件、色度分析软件、薄膜附件等等。
分光光度计的原理分类
分光光度计的原理分类一.分光光度计的一般原理是什么?分光光度计是利用分光光度法，通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度，对该物质进行定性和定量分析。
不同种类的分光光度计的基本原理相似，都是利用一个可以产生多个波长的光源，通过系列分光装置，从而产生特定波长的光源。
光源透过测试的样品后，部分光源被吸收，通过测量样品的吸光值，经过计算可以转化成样品的浓度。
样品的吸光值与样品的浓度成正比。
二.分光光度计有哪些不同的类型，不同种类的应用领域有什么区别?分光光度计有哪几种不同的分类方式：1.分光光度计按照波长及应用领域的不同可以分为：(1)可见光分光光度计：测定波长范围为400～760 nm的可见光区;(2)紫外分光光度计：测定波长范围为200～400nm的紫外光区;(3)红外分光光度计：测定波长范围为大于760nm的红外光区;(4)荧光分光光度计：用于扫描液相荧光标记物所发出的荧光光谱;(5)原子吸收分光光度计：光源发出被测的特征光谱辐射，被经过原子化器后的样品蒸气中的待测元素基态原子所吸收，通过测定特征辐射被吸收的大小，来求出被测元素的含量。
2.分光光度计按自动化程度分类：可分为手动、半自动、自动分光光度计。
3.分光光度计按软件可分为：带扫描、不带扫描。
三.分光光度计最常见的用途和常用波长有哪些?1.核酸的定量核酸的最高吸收峰的吸收波长260 nm。
利用260nm的波长可以定量测量溶于缓冲液的寡核苷酸，单链、双链DNA，以及RNA的浓度。
除了核酸浓度，分光光度计同时显示几个非常重要的比值表示样品的纯度。
如A260/A280的比值，用于评估样品的纯度，因为蛋白的吸收峰是280nm。
纯净的样品，比值大于1.8(DNA)或者2.0(RNA)。
如果比值低于1.8 或者2.0，表示存在蛋白质或者酚类物质的影响。
A230表示样品中存在一些污染物，如碳水化合物，多肽，苯酚等，较纯净的核酸A260/A230的比值大于2.0。
原子吸收分光光度计的特性是怎样的
原子吸收分光光度计的特性是怎样的原子吸收分光光度计是一种可用于测量样品中多种金属元素的浓度的仪器。
其基本原理是利用样品溶液中特定金属元素原子的吸收能力，通过测量吸收光谱的强度来推断其浓度。
原子吸收分光光度计的特性包括稳定性、精度、灵敏度和重现性等。
稳定性稳定性是原子吸收分光光度计的基本特性之一。
稳定性包括两个方面：长期和短期的。
长期稳定性表征仪器长时间使用后仍能保持稳定的能力，同时保证所测定结果的精度和准确性。
短期稳定性则表征仪器在同一测量条件下的重复测量结果是否相同。
对于原子吸收分光光度计，它的长期稳定性和短期稳定性均非常关键，它需要保证仪器响应的稳定性，能够保证测量结果的准确性和重复性。
精度精度是原子吸收分光光度计另一个重要的特性。
它用于比较所测结果与真实值之间的偏差。
精度取决于仪器的贡献和影响，在任何测量情况下都需要考虑到所有可能的误差来源。
在实际使用中，精度要与样品中待测元素的浓度持平，这是因为低浓度样品在测量中比高浓度样品更容易出现误差。
灵敏度原子吸收分光光度计的另一个特性是其灵敏度。
灵敏度是仪器检测限的度量，以检测指定元素的最低浓度为标准。
较高的灵敏度使得仪器能够检测到很低的元素浓度。
通常，在金属元素的测量中，灵敏度较高通常意味着仪器的检测限会降低，使得测量结果更为准确。
重现性重现性是指在相似的测试条件下，仪器是否产生可重复的测试结果。
它是比较仪器性能稳定性的一个重要变量。
在原子吸收分光光度计中，重现性是能够保证仪器重复测量结果的稳定性指标之一。
总结原子吸收分光光度计是一种在实验室中广泛应用的仪器，用于检测样品中的金属元素。
该仪器的特性包括稳定性、精度、灵敏度和重现性等。
稳定性和重现性是保证测量结果准确性的关键因素，而精度和灵敏度则可以影响测量结果的准确性。
总体来说，原子吸收分光光度计是一种非常有价值的实验设备，对于许多实验室都是非常重要的。
分光光度计的种类
分光光度计的种类
分光光度计是用来测量光的强度的仪器，这种仪器可以测量波长
在可见光段的幅值，精度可以达到千分之一以上。
它通常分为三种类型：近红外分光光度计、可见光/紫外分光光度计和全光谱分光光度计。
1. 近红外分光光度计：使用基于近红外技术的专业仪器，可以检
测室内温度、湿度、光照度、环境压力、天气状况和污染物含量等参数，也可以测量星系中光频率的变化。
2. 可见光/紫外分光光度计：主要用于测量波长范围在
400nm~750nm之间的可见光和紫外光，精度可达到百分之一以上，常见
的紫外分光光度计可以用来测量测试光照度、紫外线强度、激发源的
能量分布和其他用于传感的实验检测等。
3. 全光谱分光光度计：这是一种将光的波长分解成不同区段的分
光光度计，可以用来测量宽幅度的光谱，测试当前样本中所有可见光
和紫外光含量，也可以用来测量源光光谱，从而推断样本的性质和含量。
分光光度计
三、吸光度测量条件的选择
入射光波长的选择：选择待测物最大吸收波长 入射光波长的选择： 作为入射波长。 作为入射波长。 参比溶液的选择：用来调节仪器的零点， 参比溶液的选择：用来调节仪器的零点，消除 因溶剂和比色皿壁对入射光的反射或吸收而引 起的误差。 起的误差。
参比溶液(空白溶液) 参比溶液(空白溶液)的选择：
a b Aa+b ⋅ Kb − A2 +b ⋅ K1 2 ⇒ Ca = 1 a b b K1 ⋅ K2 − Ka ⋅ K1 2
A ⋅K − A ⋅K Cb = b K ⋅ K − K ⋅ K1
a 1 b 2
a+b 2 a 1
a+b 1 a 2
a 2
∆ Ax =
A −A
x
s
= εb c x − εb cs
续前
（二）多组分的定量方法
定量依据：A总 = Aa + Ab + Ac +L
三种情况： 1．两组分吸收光谱不重叠（互不干扰） 两组分吸收光谱不重叠（互不干扰） 两组分在各自λ 下不重叠→分别按单组分定量 两组分在各自 max下不重叠 分别按单组分定量
一、Lamber-Beer定律：吸收光谱法基本定律 Lamber-Beer定律 定律：
描述物质对单色光吸收强弱与液层厚度和待测物浓度 的关系
Lamber定律：A ∝ l Beer定律：A ∝ C
续前
I Lamber − Beer定律表达式 − lg = K ⋅ b ⋅ c I0 I 透光率 T = I0 或 T =10− A =10−Kb⋅c 吸光度 A = − lg T = K ⋅ b ⋅ c
1．吸光系数的物理意义： 吸光系数的物理意义： 单位浓度、单位厚度的吸光度
三类分光光度计的特点详解
三类分光光度计的特点详解分光光度计是一种用于测量样品在不同波长下吸光度的仪器。
根据其具体应用和原理不同，分光光度计可以分为三类：分光比色法光度计、荧光光度计和红外光度计。
本文将对这三类分光光度计的特点进行详细介绍。
1. 分光比色法光度计分光比色法光度计利用可见光区域内样品分离光束的原理进行测量。
样品通过单色仪分成不同波长的光束后，进入具有不同吸收系数的试管或池中进行比色，最终测量吸光度。
分光比色法光度计的特点如下：1.1 具有高的灵敏度分光比色法光度计可以测量非常低浓度的物质，因为它可以将光束分成不同波长，从而提高灵敏度。
此外，由于样品的分离和比色都在可见光范围内进行，因此该仪器非常适合于测量生物学样品等透过可见光的样品。
1.2 可以通过比色确定化合物的浓度由于分光比色法光度计可以测量不同波长下的吸光度，所以可以通过比色确定化合物的浓度。
这种方法常用于检测食品、环境和水质等样品。
1.3 需要精确的比色试剂分光比色法光度计需要使用精确的比色试剂来测量样品的吸光度。
不同比色试剂对于不同化合物的吸收都是不同的，因此需要选择正确的比色试剂才能测量准确的吸光度。
2. 荧光光度计荧光光度计是一种测量样品在激发光下的荧光强度的仪器。
激发光通过样品，样品吸收激发光并在一定波长下放出荧光，荧光光谱可以用来确定样品的化学成分和浓度。
荧光光度计的特点如下：2.1 高选择性和高灵敏度荧光光度计可以通过激发波长来选择性地刺激某些化合物，因此可以获得高选择性的荧光信号。
此外，相较于分光比色法光度计，荧光光度计具有更高的灵敏度和分辨率，因此可以用来检测浓度更低的样品。
2.2 需要具有荧光能力的样品荧光光度计可以测量具有荧光能力的物质。
如果样品不能发出荧光，将无法使用荧光光度计进行测量。
因此，与分光比色法光度计一样，荧光光度计的应用也受到样品的限制。
3. 红外光度计红外光度计通过测量样品在红外光谱范围内的吸收来测量样品的化学成分。
分光光度计知识
分光光度计是一种分析仪器，它利用分光原理来测定物质对光的吸收、发射或散射等光学特性。
以下是关于分光光度计的一些基本知识：1. 基本原理：-分光光度计通过分光元件（如棱镜或衍射光栅）将光源发出的白光分解成单色光。
-单色光依次通过样品，样品会吸收特定波长的光，减弱透过光的强度。
-透过光经过检测器（如光电倍增管或光电二极管）转换为电信号，信号的大小与样品的吸光度相关。
2. 主要部件：-光源：提供光能，通常使用钨丝灯、氘灯或激光等。
-分光元件：将光分解成单色光，常见的是棱镜和衍射光栅。
-样品池：放置待测样品，确保光能够均匀通过样品。
-检测器：将光信号转换为电信号，如光电倍增管、光电二极管或电荷耦合器件（CCD）。
3. 类型：-可见分光光度计：用于测量可见光区域（大约400-760 nm）的吸光度。
-紫外分光光度计：用于测量紫外光区域（大约200-400 nm）的吸光度。
-红外分光光度计：用于测量红外光区域（大约760 nm至几微米）的吸收特性。
4. 应用：-分光光度计广泛应用于化学、生物学、环境科学、食品科学等领域。
-可以用来测定溶液的浓度、物质的纯度、化学反应的速率等。
5. 定量分析：-通常使用标准曲线法或标准加入法进行定量分析。
-通过测定一系列已知浓度的标准溶液的吸光度，建立标准曲线，然后根据未知样品的吸光度推算其浓度。
6. 校准和维护：-分光光度计需要定期校准，以确保测量结果的准确性。
-定期检查和维护仪器，包括清洁光学元件、调整光源和检测器等。
分光光度计是一种强大的分析工具，通过对光的吸收、发射或散射的测量，可以帮助科学家们研究和量化物质的性质。
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分光光度计的三大类型特点
由于分光光度计是一种常用的实验室分析仪器，所以无论是从款式上还是价格上五花八门，一般往往给初购者造成眼花缭乱、令人无所适从的感觉；价格因素一般是购买者首先考虑的问题，尽管分光光度计种类繁多，但不外乎：简易型、中档型和型三大类：
(1)简易型仪器及其特点：
结构：这种类型的仪器多为单光束型，即只有一束光照射到样品室内；光源一般仅有钨灯；样品支架一般为推拉式四联池架；波长选择多为手动查找，重复性差；狭缝为一个固定宽度模式；光学性能指标较低；检测器多为光敏二极管；显示器多为机械表头或数码管显示器，数据处理器一般没有。
此类仪器生产以国内厂家居多。
测量模式：多为定点(固定波长)吸光度或透过率测量方式，基本不能进行波长扫描测量。
适应范围：小型实验室及示范教学，分析样品相对简单，测试结果精度要求不高。
价格：相对低廉，一般在2万元人民币以下，所以还有一定的市场。
(2)中档型仪器及其特点：
结构：此类仪器多为双光束型或准双光束型，但也有单光束仪器型；光源有钨灯和氘灯；样品池支架为两个固定式，分别是样品通道和参比通道；波长按照设定模式自动查找或扫描；狭缝多数仍为2nm固定宽度模式,也有1.5nm狭缝宽度的；检测器多数是硅光二极管，但也有少数用光电倍增管的；光学性能相对较高，其中光栅的技术指标尤为重要，的光栅为凹面型，为此无论在分辨率还是在杂散光方面指标要优于简易型仪器；显示器为液晶式或连接电脑，数据处理可由仪器自身具有的或外接计算机处理。
并有一定的测量附件。
测量模式：透过率、吸光度、浓度直读、单光束;单点及扫描均可。
适应范围：此类仪器基本可满足大多实验室分析需要。
价格：3～10万人民币之间，此类型仪器占分光光度计的比例。
(3)型仪器及特点：
结构：除了中档仪器的特点外，主要是光学系统的设计和制造工艺水平更高了，比如使用了大尺寸的凹面光栅，并且光栅刻槽数大于1800条/mm;波长检测范围有的仪器在近红外区已经超过1100nm，可达到2600nm;狭缝均为连续可调型，以适应高分辨率的需要，波长扫描速度的档位也增加了，检测器均使用高灵敏度的光电倍增管
和红外检测器;数据处理目前基本是电脑来执行;衡量一台仪器的另外一个指标是看此仪器是否具有丰富的附属测量器件，如偏振附件、积分球附件、反射附件、自动进样器附件、色度分析软件、薄膜附件等等。
测量模式：透过率、吸光度、浓度直读、反射方式、能量方式，单点、扫描均可;适应范围：科研、光学产品的检测、生化样品检测、复杂样品检测等。
不但可以测液态样品，也可测固态样品。
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