葡萄糖氧化酶法测定血糖浓度(版本2)
葡萄糖氧化酶法
葡萄糖氧化酶法关于《葡萄糖氧化酶法》，是我们特意为大家整理的，希望对大家有所帮助。
葡萄糖氧化酶法在生活起居中大部分人可能也没有听闻过，实际上葡萄糖氧化酶法是一种检测病人是不是高血糖，是不是患糖尿病的一种查验方式，一般较为普遍应用与医院门诊，假如高血糖或是是糖尿病人用葡萄糖氧化酶法来检验結果是十分精确的，下边实际详细介绍葡萄糖氧化酶法。
葡萄糖氧化酶法精确测量血糖浓度的详解生产基本原理疫苗葡萄糖氧化酶(glucose oxidase，GOD)运用氧和水将葡萄糖空气氧化为葡萄糖酸，并释放出来双氧水。
乳酸脱氢酶(peroxidase，POD)在色原性氧蛋白激酶存有时将双氧水溶解为水和氧，并使色原性氧蛋白激酶4-羟基安替比林和酚去氢缩合反应为鲜红色醌类化合物，即Trinder反映。
鲜红色醌类化合物的产生量与葡萄糖成分正比。
生产实验试剂疫苗1．0.1mol/L聚磷酸盐缓冲溶液(pH7.0)称量没有水磷酸氢二钠8.67g及没有水磷酸二氢钾5.3g溶解纯净水800ml中，用1mol/L 氢氧化钠溶液(或1mol/L盐酸)调pH至7.0，用纯净水定容至1L。
2．酶实验试剂称量乳酸脱氢酶1 200U，葡萄糖氧化酶1 200U，4-羟基安替比林10Mg，叠氮钠100mg，溶解聚磷酸盐缓冲溶液80Ml中，用1 mol/L NaOH调pH至7.0，用聚磷酸盐缓冲溶液定容至100ml，置4℃储存，可平稳3月。
3．酚水溶液称量重水蒸气蒸馏酚100mg溶解纯净水100ml 中，用深棕色瓶存储。
4．酶酚混和实验试剂酶实验试剂及酚水溶液相等混和，4℃能够储放1月。
5．12mmol/L苯甲酸水溶液融解苯甲酸1.4g于纯净水约800ml 中，升温助溶，制冷后加纯净水定容至l L。
6．100mmol/L葡萄糖标准存储液称量已干躁恒重的无水葡萄糖1.802g，溶解12mmol/L苯甲酸水溶液约70Ml中，以12mmol/L 苯甲酸水溶液定容至100ml。
葡萄糖氧化酶法测定血糖的原理_概述及解释说明
葡萄糖氧化酶法测定血糖的原理概述及解释说明1. 引言1.1 概述本文旨在介绍葡萄糖氧化酶法测定血糖的原理，并对其进行详细的解释和说明。
血糖测定是医学和生物科学领域中非常重要的一项实验技术，用于评估人体内的葡萄糖水平以及相关代谢功能的异常情况。
葡萄糖氧化酶法是一种常用的血糖测定方法，其基本原理是利用特定酶对葡萄糖进行氧化反应并与辅助试剂发生显色反应，从而间接地测定血液中的葡萄糖含量。
1.2 文章结构本文将按照以下结构进行展开：首先，介绍葡萄糖氧化酶的简要概况和血糖测定方法的总体概述；其次，详细讲解葡萄糖氧化酶法测定血糖的基本原理；然后，描述实验步骤并给出操作流程；接着，分析实验结果并讨论其中的意义和影响因素；最后，总结实验结论并展望未来该领域的研究意义和发展方向。
1.3 目的本文的目的是全面而清晰地介绍葡萄糖氧化酶法测定血糖的原理，帮助读者了解该方法在实际应用中的作用和意义。
通过本文的阅读，读者可以深入了解葡萄糖氧化酶法的基本理论和操作流程，并对实验结果进行准确而详细的分析与讨论。
同时，本文也旨在提供对该方法局限性和未来发展方向进行探讨，并为相关研究人员提供参考，促进该领域的进一步发展和突破。
2. 葡萄糖氧化酶法测定血糖的原理：2.1 葡萄糖氧化酶简介：葡萄糖氧化酶是一种存在于细胞内的酶类，在生物体中起到将葡萄糖转化为能量的重要作用。
该酶主要参与细胞内氧化还原反应，并催化葡萄糖与辅酶NAD+之间的反应。
在此过程中，葡萄糖被氧化成葡萄糖酸，并产生还原型辅酶NADH。
2.2 血糖测定方法概述：血液中的血糖水平是一个重要的生理指标，可以提供人体能量供给的信息。
因此，血糖水平的测定对于诊断和治疗许多代谢性疾病非常重要。
目前，有多种方法用于测定血液中的血糖浓度，其中最常用且最经典的方法就是使用葡萄糖氧化酶法。
2.3 葡萄糖氧化酶法的基本原理：葡萄糖氧化酶法是一种非常敏感和特异性的测定血糖浓度的方法。
该方法基于葡萄糖氧化酶与葡萄糖的特异性反应，通过检测在该反应中生成的还原型辅酶NADH的产生量来间接测定血液中的血糖浓度。
血糖浓度测量实验报告
一、实验目的1. 掌握血糖测量的原理和方法。
2. 了解血糖浓度的正常范围及其临床意义。
3. 通过实验操作，提高实验技能和数据分析能力。
二、实验原理血糖浓度是指血液中葡萄糖的含量，是人体能量代谢的重要指标。
血糖浓度的测定方法主要有氧化还原法、葡萄糖氧化酶法、己糖激酶法等。
本实验采用葡萄糖氧化酶法测定血糖浓度，该方法具有特异性强、操作简便、准确性高等优点。
三、实验器材与试剂1. 仪器：血糖仪、血糖试纸、微量移液器、试管、离心机、恒温箱等。
2. 试剂：葡萄糖标准溶液、葡萄糖氧化酶试剂、磷酸盐缓冲液、硫酸铜溶液等。
四、实验步骤1. 标准曲线绘制（1）将葡萄糖标准溶液按照不同浓度进行稀释，得到一系列浓度梯度。
（2）取试管，分别加入磷酸盐缓冲液、葡萄糖标准溶液和葡萄糖氧化酶试剂，混匀。
（3）将试管放入恒温箱中反应一定时间。
（4）取出试管，加入硫酸铜溶液，混匀。
（5）使用血糖仪测定各试管中葡萄糖氧化酶反应后的吸光度值。
（6）以葡萄糖浓度为横坐标，吸光度值为纵坐标，绘制标准曲线。
2. 血糖浓度测定（1）取待测血液样本，按照微量移液器的要求，准确移取一定量的血液。
（2）将血液样本与血糖试纸接触，等待试纸变色。
（3）使用血糖仪测定试纸变色后的吸光度值。
（4）根据标准曲线，计算出血液样本中的血糖浓度。
五、实验结果与分析1. 标准曲线绘制通过绘制标准曲线，得到葡萄糖浓度与吸光度值之间的关系，可以用于后续血液样本的血糖浓度测定。
2. 血糖浓度测定根据实验操作，测定血液样本的血糖浓度，并与正常范围进行比较。
若血糖浓度超过正常范围，提示可能存在糖尿病等疾病。
六、实验讨论1. 本实验采用葡萄糖氧化酶法测定血糖浓度，具有特异性强、操作简便、准确性高等优点。
2. 实验过程中，应注意温度、时间等条件的控制，以保证实验结果的准确性。
3. 血糖浓度的测定对于糖尿病等疾病的诊断和病情监测具有重要意义。
七、实验总结通过本次实验，我们掌握了血糖测量的原理和方法，了解了血糖浓度的正常范围及其临床意义。
实验报告血糖的测定
一、实验目的1. 掌握血糖测定的原理和方法。
2. 了解血糖水平与人体健康的关系。
3. 培养实验操作技能，提高实验数据分析能力。
二、实验原理血糖是指在血液中葡萄糖的浓度。
正常人体血糖水平相对稳定，维持在一定范围内。
血糖的测定对于糖尿病等疾病的诊断和治疗具有重要意义。
本实验采用葡萄糖氧化酶法测定血糖浓度。
葡萄糖氧化酶法是一种测定血糖的常用方法，其原理是葡萄糖在葡萄糖氧化酶的催化下，与氧气反应生成葡萄糖酸和过氧化氢，过氧化氢在过氧化物酶的作用下，使色原物质氧化产生颜色变化，根据颜色变化程度，可以计算出样品中的葡萄糖浓度。
三、实验材料1. 试剂：葡萄糖标准溶液、显色剂、显色剂储备液、反应缓冲液、显色剂工作液、空白试剂、待测血液样品。
2. 仪器：微量移液器、移液管、移液器、酶标仪、试管、水浴锅、吸管、滤纸等。
四、实验步骤1. 标准曲线绘制（1）取6支试管，分别加入0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5ml葡萄糖标准溶液，加入0.5ml反应缓冲液。
（2）将各试管充分混匀，置于水浴锅中，恒温30分钟。
（3）取出试管，加入0.5ml显色剂，充分混匀，室温放置10分钟。
（4）以空白试剂为参比，用酶标仪在波长540nm处测定各管吸光度。
（5）以葡萄糖浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
2. 待测样品测定（1）取6支试管，分别加入0.5ml反应缓冲液、0.5ml显色剂、0.5ml待测血液样品。
（2）将各试管充分混匀，置于水浴锅中，恒温30分钟。
（3）取出试管，加入0.5ml显色剂，充分混匀，室温放置10分钟。
（4）以空白试剂为参比，用酶标仪在波长540nm处测定各管吸光度。
（5）根据标准曲线，计算待测样品的血糖浓度。
五、实验结果与分析1. 标准曲线绘制：根据实验数据绘制标准曲线，线性范围为0-2.5mmol/L。
2. 待测样品测定：根据标准曲线计算，待测样品的血糖浓度为3.8mmol/L。
六、实验结论本实验采用葡萄糖氧化酶法测定血糖浓度，实验结果准确可靠。
血糖测定(葡萄糖氧化酶过氧化物酶法)及肾上腺素对血糖浓度的影响
因
1.肾上腺素
素
一、升高血糖 2.胰高血糖素
3.各种激素
3.糖皮质激素
二、降低血糖：胰岛素(体内唯一)
葡萄糖-6-磷酸酶只存在于肝、肾中,而不存在于肌肉中。 所以肌糖原不能分解成葡萄糖,只能进行糖酵解或有氧氧化。
生化教研室 朱欣婷
肾 肝+肌的细胞膜受体
上
腺
素
升 血 cAMP
加速糖原分解,
糖
使血糖升高！
选择皮肤较薄、皮下组织疏松 而血管较少的腹部，在注射局 部用消毒棉球将毛向四周分开， 以左手的拇指、食指和中指将 皮肤轻轻捏起，形成一个皱褶， 右手将注射器针头刺入皱褶皮 下，深约1.5-2厘米，药液注 完后，用酒精棉球按住进针部 皮肤，拔针，轻按进针部皮肤。
三.第二次取血(注射药物后30 min) 四.血糖测定操作（P55） 五.尿糖检测（P56）
选择皮肤较薄皮下组织疏松而血管较少的腹部在注射局部用消毒棉球将毛向四周分开以左手的拇指食指和中指将皮肤轻轻捏起形成一个皱褶右手将注射器针头刺入皱褶皮下深约152厘米药液注完后用酒精棉球按住进针部皮肤拔针轻按进针部皮肤
实验七
血糖测定（葡萄糖氧化酶-过氧化物酶 法）及肾上腺素对血糖浓度的影响
遵义医学院生物化学教研室 朱欣婷
实验安排
一.第一次取血(未施药) 二.皮下注射肾上腺素 三.实验内容的讲解 四.第二次取血(注射药物后30 min) 五.血糖测定操作(比较注射肾上腺素前后血糖水平) 六.尿糖检测
生化教研室 朱欣婷
1.掌握葡萄糖法测定血糖浓度的原理及方法； 2.观察肾上腺素对家兔血糖浓度的影响； 3.熟悉尿糖的半定量检测； 4.了解血糖测定的临床意义。
生化教研室 朱欣婷
葡萄糖氧化酶法测定血糖浓度
甲状腺功能亢进、内服
或注射大量葡萄糖等。
尿糖
增高率 =
A肾 - A正 A正
× 100%
尿糖测定
1.葡萄糖氧化酶试纸法（干化学法）：特异 性强，临床常用。检测原理是葡萄糖氧化酶 法。
2.班氏定性试验：价廉，操作简单，比较常 用，但易受尿中还原性物质干扰。
班氏定性试验原理
：
CHO
COOH
(CHOH)n + 2Cu2+ + 4OH-
CH2OH
葡萄糖
37oC 氧化缩合
H2O ＋ 醌亚胺 红色
+O2
比色测定 505nm
具体操作
（1）空腹称重（已称好）
（2）耳缘静脉取血
①取血部位去毛，接着擦拭酒精，涂二甲苯、 凡士林。
②用三棱针刺破耳缘静脉放血，离心管收集血 液2-3ml（干棉球压迫止血），离心，1500rpm ，10min，取出放试管架上备用。
碱性 煮沸
(CHOH)n
+
CH2OH
葡萄糖酸
2CuOH 黄色
+ H2O
2CuOH
分解
H2O + Cu2O
红色
根据沉淀显色的深浅，对尿糖作半定量检 测。
操作步骤
班氏A剂尿220滴
班B尿氏2剂滴20滴再煮煮沸沸5m5minin
待完全沉淀到管 底后（10min） ，对比判断标准 判定结果。
尿糖结果判断标准
检测
尿糖 病病1用.理理临药性性床以医及胰胰糖 颅生判岛 高尿 内：断β血病 压细作升糖、 增胞为糖素内 高增疾药分分 、生病或泌泌 严、诊降不腺 重胰断糖足功脱岛依药、能水β据的严障细、疗重碍胞指效肝、瘤导病、 2.糖尿病患患者者：监控自身血糖及尿糖变
血糖浓度测定的实验报告
一、实验目的1. 熟悉血糖测定的原理和方法。
2. 掌握血糖浓度的正常范围及其临床意义。
3. 学习血糖测定在糖尿病诊断和治疗中的应用。
二、实验原理血糖浓度是指血液中葡萄糖的含量，是人体能量代谢的重要指标。
血糖浓度的测定方法主要有氧化还原法、酶法、化学发光法等。
本实验采用葡萄糖氧化酶法测定血糖浓度。
葡萄糖氧化酶法是一种利用酶反应来测定血糖浓度的技术。
葡萄糖氧化酶能够专一性地催化葡萄糖与氧的反应，生成葡萄糖酸和过氧化氢。
通过检测过氧化氢的生成量，可以计算出血糖浓度。
三、实验器材与试剂1. 实验器材：微量移液器、移液管、试管、比色皿、血糖测定仪、葡萄糖氧化酶试剂盒等。
2. 试剂：葡萄糖标准液、葡萄糖氧化酶试剂盒、空白试剂等。
四、实验步骤1. 标准曲线的绘制（1）取6支试管，分别加入0、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0毫升葡萄糖标准液。
（2）向各试管中加入相应量的试剂，混匀。
（3）在规定时间内，用血糖测定仪测定各试管中葡萄糖的浓度，以葡萄糖浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
2. 血糖浓度测定（1）取适量静脉血或指尖血，按照说明书加入相应量的试剂，混匀。
（2）在规定时间内，用血糖测定仪测定样品中葡萄糖的浓度。
五、实验结果1. 标准曲线绘制以葡萄糖浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线，得到线性方程为：y = 0.012x + 0.003，相关系数R² = 0.998。
2. 血糖浓度测定本次实验测得血糖浓度为5.6 mmol/L。
六、实验讨论1. 实验过程中，标准曲线的绘制和样品的测定应严格按照操作规程进行，以保证实验结果的准确性。
2. 血糖浓度的正常范围因个体差异而异，但一般成人空腹血糖浓度在3.9～6.1 mmol/L之间。
本次实验测得血糖浓度为5.6 mmol/L，处于正常范围内。
3. 血糖测定在糖尿病的诊断和治疗中具有重要意义。
糖尿病患者需定期进行血糖监测，以了解病情变化，调整治疗方案。
测血糖浓度实验报告
一、实验目的1. 了解血糖浓度的测定原理和方法。
2. 掌握血糖浓度测定的操作步骤。
3. 分析血糖浓度测定的结果，并得出结论。
二、实验原理血糖浓度是指血液中葡萄糖的含量，是反映机体能量代谢状况的重要指标。
血糖浓度的测定方法主要有：氧化酶法、己糖激酶法、葡萄糖氧化酶-过氧化氢法等。
本实验采用葡萄糖氧化酶-过氧化氢法测定血糖浓度。
葡萄糖氧化酶-过氧化氢法原理：葡萄糖氧化酶催化葡萄糖氧化生成过氧化氢，过氧化氢在过氧化物酶催化下与色原性氧受体缩合为红色化合物，此物质在505nm处有最大吸收峰，其吸光度值与葡萄糖量成正比。
三、实验器材1. 仪器：血糖测定仪、微量移液器、试管、吸管、恒温水浴锅、分光光度计等。
2. 试剂：葡萄糖标准液、血清或血浆、缓冲液、葡萄糖氧化酶、过氧化物酶、色原性氧受体等。
四、实验步骤1. 准备工作：将血糖测定仪预热至室温，将葡萄糖标准液、血清或血浆、缓冲液、葡萄糖氧化酶、过氧化物酶、色原性氧受体等试剂准备好。
2. 标准曲线绘制：取6支试管，分别加入0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5毫升葡萄糖标准液，再分别加入0.5毫升缓冲液。
将各试管充分混匀，室温放置10分钟。
3. 样品测定：取6支试管，分别加入0.5毫升血清或血浆，再分别加入0.5毫升缓冲液。
将各试管充分混匀，室温放置10分钟。
4. 反应：向上述各试管中加入葡萄糖氧化酶、过氧化物酶和色原性氧受体，混匀后置于恒温水浴锅中，反应10分钟。
5. 测定：用分光光度计在505nm处测定各试管吸光度值。
6. 计算血糖浓度：根据标准曲线，计算各样品的血糖浓度。
五、实验结果与分析1. 标准曲线绘制：以葡萄糖浓度为横坐标，吸光度值为纵坐标，绘制标准曲线。
2. 样品测定：根据标准曲线，计算各样品的血糖浓度。
3. 结果分析：比较实验测定的血糖浓度与正常值范围（空腹血糖3.6～5.3毫摩尔/升，餐后2小时血糖4.4～6.1毫摩尔/升），分析实验结果的准确性。