最新分析方法验证

注释：
① 已有重现性验证，不需要验证中间精密度。 ②如一种方法不够专属，可用其他分析方法予以补充。
③视具体情况予以验证。
2015年版药典四部指导原则相关要求
准确度
准确度系指采用该方法测定的结果与真实值或参考值接近的程 度，一般用回收率（%）表示。准确度应在规定的范围测定。
原料药采用对照品进行测定，或用本方法所得结果与已知准确
进行酸、碱、高温、光、氧化等强制降解试验时，降解程度要
适度，对于敏感条件，通常要求降解10%左右，一般不超过20%。如 样品在某些条件下很稳定，则无必要过度提高降解条件的剧烈程度
。重点考察空白溶剂和空白辅料有没有干扰，各峰之间的分离情况
（通常要求主峰与相邻杂质峰的分离度不小1.5，特定杂质峰与相邻 峰的分离度不小于1.5），峰纯度和物料平衡（95% ～ 105%）。
物杂质和降解产物时，应确定方法的定量限。
2015年版药典四部指导原则相关要求
线性
线性系指在设计的范围内，测定响应值与试样中被测物浓度成 比例关系的程度。
范围
范围系指分析方法能达到一定精密度、准确度和线性要求时的 高低限浓度。
耐用性
耐用性系指在测定条件有小的变动时，测定结果不受影响的承 受程度。
分析方法验证方案及可接受标准
专属性
专属性系指在其他成分（如杂质、降解产物、辅料等）存在下 ，采用的分析方法能正确测定被测物的能力。鉴别反应、杂质检查
和含量测定方法，均应考察其专属性。
检测限 检测限系指试样中被测物能被检测出的最低量。
定量限
定量限系指试样中被测物能被定量测定的最低量，其测定结果 应符合准确度和精密度要求。对微量或痕量药物分析、定量测定药
对标准偏差表示。包括重复性、中间精密度和重现性。
重复性：在相同条件下，有同一个分析人员测定所得结果的精 密度称为重复性；
中间精密度：在同一个实验室，不同时间由不同分析人员用不
同设备测定结果之间的精密度，称为中间精密度； 重现性：在不同实验室由不同分析人员测定结果之间的精密度
，称为重现性。
2015年版药典四部指导原则相关要求
分析方法验证方案及可接受标准
检测限
直观法 用已知浓度的被测物，试验出能被可靠地检测出的最低浓 度或量。
信噪比法 一般以信噪比为3:1或2:1时相应的浓度或注入仪器的量
确定检测限。 基于响应值标准偏差和标准曲线斜率法 该方法通常适用于光谱测
定，计算公式 ：检测限 =3.3 ×响应值标准偏差/标准曲线斜率
中间精密度
实验方案同重复性，由不同的实验人员用不同的
仪器测定，并将结果与重复性试验结果一起进行评价。 重现性 国家药品标准采用的分析方法，应进行重现性试验，
如通过不同实验室检验获得重现性结果。
分析方法验证方案及可接受标准
精密度 可接受标准
待测定成分含量 100% 10% 重复性（RSD%） 1 1.5 中间精密度（RSD%） 2 3
，则应为下限的 -20% 至上限的 +20% ；杂质测定，范围应根据初步实
际测定数据，拟定为规定限度的±20% 。
分析方法验证方案及可接受标准
耐用性
以HPLC法为例，分别考察流动相比例变化±5％、流动相pH值 变化±0.2、柱温变化±5℃、检测波长变化±5nm、流速相对值变化
±20％以及采用3根不同品牌的色谱柱进行测定时，仪器色谱行为的
相应值得2.0% ；
对于杂质，线性相关系数不低于0.995。
分析方法验证方案及可接受标准
范围
范围系指分析方法能达到一定精密度、准确度和线性要求时的 高低限浓度。
原料药和制剂含量测定，范围一般为测定浓度的 80% ～120%; 制
剂含量均匀度检查，范围一般为测定浓度的70%～130%；溶出度或释 放度中溶出量的测定，范围一般为限度的±30%，如规定了限度范围
characterristics Accuracy Precision Repeatability Interm.Precision -
quantitat +
limit -
dissolution content/potency +
+ +
-
+ +（1）
Specificity（2）
Detection Limit Quantitation Limit Linearity
药品质量标准分析方法验证
刘同欣
ICH指导原则相关要求 中国药典2015年版四部通则相关要求
分析方法验证方案及可接受标准
ICH指导原则相关要求
Type of analytical – procedure ASSAY
IDENTIFICA TION TESTING FOR IMPURITIES
准确度
方案（以化药制剂为例） 在规定范围内，取同一浓度（相当于 100% 浓度水平）的供试品
，用至少6份样品的结果进行评价；或设计3种不同浓度（通常是80%
、100%和120%），对于要测定含量均匀度的项目，浓度通常是70%、 100% 和130% ），每种浓度分别制备 3 份供试品溶液进行测定，用9 份
1%
0.1% 0.01% 10μg/g（ppm） 1μg/kg 10μg/kg(ppb)
2
3 4 6 8 15
4
6 8 11 16 32
分析方法验证方案及可接受标准
专属性
鉴别 鉴别试验要考察专属性。
含量测定
验证空白和杂质对主成分测定有没有干扰。 有关物质
对于原料药，可根据其合成工艺，采用各步反应的中间体（尤
—
— — — — —
分析方法验证方案及可接受标准
精密度
精密度包括重复性、中间精密度和重现性 重复性 在规定范围内，取同一浓度（相当于 100% 浓度水平）
的供试品，用至少6 份样品的结果进行评价；或设计 3种不同浓度（
通常是 80% 、100% 和 120% ），每种浓度分别制备 3 份供试品溶液进行 测定，用9份样品的测定结果进行评价。
定，计算公式 ：检测限 =10×响应值标准偏差/标准曲线斜率
分析方法验证方案及可接受标准
线性
应在规定的范围内测定线性关系。可用同一对照品贮备液经精 密稀释，或分别精密称取对照品，制备一系列对照品溶液的方法进
行测定，至少制备5份不同浓度的对照品溶液。以测得的响应信号对
被测物的浓度作图，用最小二乘法进行线性回归。 对于含量测定，线性相关系数不低于0.999，Y轴截距应在100%
分析方法验证方案及可接受标准
定量限
直观法 用已知浓度的被测物，试验出能被可靠地定量测定的最低 浓度或量。
信噪比法 一般以信噪比为10:1时相应的浓度或注入仪器的量确定
定量限。进样6次，主峰保留时间的相对标准差应不大于2.0%，峰面 积的相对标准差应不大于5.0%。
基于响应值标准偏差和标准曲线斜率法 该方法通常适用于光谱测
样品的测定结果进行评价。
分析方法验证方案及可接受标准
准确度 可接受标准
待测定成分含量 100% 10% 回收率限度（%） 98～101 95～102 RSD（%） 2.0 —
1%
0.1% 0.01% 10μg/g（ppm） 1μg/kg 10108 85～110 80～115 75～120 70～125
其是后几步反应的中间体）、立体异构体、粗品、重结晶母液等作 为测试品进行系统适用性研究，考察产品中各杂质峰及主成分峰相
互间的分离度是否符合要求，从而验证分析方法对工艺杂质的分离
能力。 同时通过强制降解试验来考察降解杂质。
分析方法验证方案及可接受标准
专属性
对于制剂，根据原料药的化学特性，结合制剂的处方工艺和储 存条件等选用合适的强制降解试验来验证分析方法的专属性。
有关物质检查可接受标准：主成分峰面积的 RSD 应不大于 2.0%
，杂质含量的绝对值在±0.1％以内，并不得出现新的大于报告限度 的杂质。
含量测定可接受标准：主成分峰面积的 RSD 应不大于 2.0%，不
得出现规律性的降低或升高趋势。
感谢大家的参与！
Thank you！
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Range
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ICH指导原则相关要求
注释： “-” signifie sthat this characterristics is not normally evaluated
“+” signifie sthat this characterristics is normally evaluated （1） in cases where reproducibility has been performed, intermediate precision is not needed （ 2 ） lack of specificity of one analytical procedure could be compensated by other supporting analitical procedure(s) （3） may be needed in some cases
度的另一种方法测定的结果进行比较。制剂可在处方量空白辅料中 ，加入已知量被测物对照品进行测定。如不能得到制剂辅料的全部
组分，可向待测制剂中加入已知量被测物对照品进行测定。
2015年版药典四部指导原则相关要求
精密度
精密度系指在规定的条件下，同一份均匀供试品，经多次取样 测定所得结果之间的接近程度。精密度一般用偏差、标准偏差和相
2015年版药典四部指导原则相关要求