不常见细菌的快速鉴别方法

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单胞菌、大肠杆菌、乳酸杆菌及梭状芽孢杆菌的鉴别方法

单胞菌、大肠杆菌、乳酸杆菌及梭状芽孢杆菌的鉴别方法

单胞菌、大肠杆菌、乳酸杆菌及梭状芽孢杆菌的鉴别方法单胞菌、大肠杆菌、乳酸杆菌和梭状芽孢杆菌都是常见的微生物,但它们在形态、生理和生化特性上有明显的差异。

以下是一些常用的鉴别方法:一、形态学特征:1.单胞菌:一般呈圆形或卵圆形,直径在1微米左右,无芽孢,无鞭毛。

革兰氏染色呈阳性。

2.大肠杆菌:杆状,两端钝圆,通常周生鞭毛。

革兰氏染色呈阴性。

3.乳酸杆菌:杆状或球状,通常无鞭毛,少数有鞭毛。

革兰氏染色呈阳性。

4.梭状芽孢杆菌:杆状,两端膨大,有鞭毛。

革兰氏染色呈阳性。

二、培养特性:1.单胞菌:需氧或兼性厌氧,可在普通培养基上生长,有些种类可以产生色素。

2.大肠杆菌:需氧或兼性厌氧,在伊红美蓝培养基上形成黑色菌落。

3.乳酸杆菌:厌氧或兼性厌氧,在乳酸培养基上生长良好,可发酵多种糖类产生乳酸。

4.梭状芽孢杆菌:厌氧或兼性厌氧,在缺氧条件下可形成芽孢。

在葡萄糖肉汤培养基中可形成双层溶血环。

三、生化特性:1.单胞菌:通常不发酵糖类,少数种类可发酵葡萄糖。

不产气,过氧化氢酶通常阳性。

2.大肠杆菌:发酵葡萄糖产酸产气,甲基红和V-P试验均呈阳性;乳糖发酵试验通常为阴性(病原性大肠杆菌除外)。

3.乳酸杆菌:发酵葡萄糖产酸产气,甲基红试验阳性,V-P试验阴性。

4.梭状芽孢杆菌:可发酵葡萄糖,产酸产气;过氧化氢酶阳性;有些种类可产生外毒素。

四、抗原和血清学鉴定:通过细菌的抗原检测和血清学鉴定是鉴别细菌种类的最准确的方法。

例如通过抗O抗原和荚膜抗原的检测可以确定链球菌的种类;通过鞭毛抗原的检测可以确定大肠杆菌的血清型等。

综上所述,通过对形态学特征、培养特性、生化特性和抗原血清学鉴定等方法综合应用可以对单胞菌、大肠杆菌、乳酸杆菌及梭状芽孢杆菌进行准确的鉴别。

细菌和病毒的快速检测和治疗方法

细菌和病毒的快速检测和治疗方法

细菌和病毒的快速检测和治疗方法细菌和病毒是人类生活中常见的病原体,在医学领域中,对于快速检测和治疗这些微生物的方法一直是研究的热点之一。

本文将介绍一些目前常用的快速检测和治疗细菌和病毒的方法。

一、快速检测方法1. PCR技术(聚合酶链反应)PCR技术是一种高度敏感和特异性的快速检测方法,能够在短时间内扩增特定的DNA序列。

通过PCR技术,可以检测细菌和病毒的遗传物质,如细菌的16S rRNA基因和病毒的核酸。

PCR技术具有操作简便、灵敏度高、结果准确等优点,被广泛应用于临床诊断和科学研究。

2. 快速免疫检测方法快速免疫检测方法是通过检测细菌和病毒产生的抗原或抗体来判断是否感染。

这种方法通常使用免疫层析试纸、酶联免疫吸附试验(ELISA)等技术,操作简便且迅速。

快速免疫检测方法对于一些常见的病原体,如流感病毒和细菌感染,有着较高的准确性和灵敏度。

二、治疗方法1. 抗生素治疗抗生素是用于治疗细菌感染的常见药物,通过抑制细菌的生长和繁殖来达到治疗效果。

不同种类的细菌对抗生素的敏感性不同,因此,在选择抗生素进行治疗时,需要明确感染细菌的种类,并选择对其具有高效杀菌作用的抗生素。

临床常用的抗生素有青霉素、红霉素、头孢菌素等。

2. 抗病毒药物治疗抗病毒药物主要用于治疗病毒感染,具有抑制病毒复制和传播的作用。

不同的病毒有着不同的抗病毒药物敏感性,因此,在选择抗病毒药物进行治疗时,需要根据具体病毒种类进行判断和选择。

例如,对于流感病毒感染,常用的抗病毒药物有奥司他韦、扎那米韦等。

3. 免疫治疗免疫治疗是指通过增强机体自身免疫力来抵抗细菌和病毒的感染。

该治疗方法常用于治疗免疫功能低下的患者,如艾滋病患者、器官移植患者等。

免疫治疗包括使用免疫增强剂、疫苗接种等方式来提高机体的免疫力,从而增强对细菌和病毒的防御能力。

总结:细菌和病毒的快速检测和治疗方法涵盖了多种技术和药物,针对不同的病原体类型和感染情况,需要选择适当的方法进行检测和治疗。

培养观察细菌的简易方法

培养观察细菌的简易方法

培养观察细菌的简易方法一、牙垢中的细菌用消毒牙签,在自己牙齿缝里挑下一些碎屑,放在洁净载玻片上的水滴中,调匀,制成涂片。

待涂片干燥后,在酒精灯火焰上徐徐来回掠过3~4次,细菌外面的一些胶质粘着在载玻片上,使细菌固定、稍冷,加一滴亚甲基蓝溶液,染色1~2分钟后,用清水冲洗,然后盖上盖玻片。

置显微镜下,先用低倍镜观察,再换高倍镜,可观察到杆菌、弧菌、球菌等。

若使用油镜观察,效果更清楚明显。

二、粪池里的细菌在粪池用吸管吸取一滴沤过的粪混合液上层液体,滴在洁净的载玻片上,盖上盖玻片。

置显微镜下观察,先用低倍镜,后用高倍镜。

可见到活的螺旋菌及杆菌。

注意在观察时光线应暗些,效果好。

三、酸莱、酸奶中的细菌取酸菜液上部的白色薄膜或酸奶澄清液,制成临时装片,放在高倍镜下观察,可看到乳酸杆菌。

四、根瘤菌的观察取豆科植物[大豆、蚕豆、花生]的根瘤用刀片切开,用针挑取一小块内容物,放在载玻片上的水滴中,制成涂片,晾干后,用酒精灯火焰烘烤固定,然后滴一滴亚甲基蓝溶液,染色2~3分钟,清水冲洗,盖上盖玻片,吸干后,用500倍高倍镜观察,可见到短杆状根瘤菌。

五、枯草杆菌的培养和观察把25克新鲜干草切成小段,放在盛200毫升清水烧杯中,加热煮沸15分钟,待溶液呈暗褐色时,倒入烧瓶,放在黑暗、20~30℃的温暖环境中。

2~3天后,液体混浊,表面形成薄膜。

用吸管吸取浮在上层的液体,制成临时涂片,放在高倍镜下观察,可看到连成线的枯草杆菌。

若将培养液放在低温处1~2天,再取出制成临时涂片,用600倍或更高倍数的显微镜观察还能看到枯草杆菌的芽孢。

微生物学实验细菌细胞的生化反应实验一、实验目的了解并掌握细菌鉴定中常用生理生化反应的原理和方法。

二、实验原理各种细菌由于具有不同的酶系统,致使它们能利用不同的底物,或虽然可以利用相同的底物,却产生不同的代谢产物,因此可以利用各种生理生化反应来鉴别细菌。

糖发酵是最常用的生化反应,存在于大多数细菌中。

鉴别大肠杆菌和枯草芽孢杆菌的方法

鉴别大肠杆菌和枯草芽孢杆菌的方法

鉴别大肠杆菌和枯草芽孢杆菌的方法介绍大肠杆菌(Escherichia coli)和枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)是两种常见的细菌,虽然它们在形态上有一些相似之处,但在生物学特性上有很大差异。

正确鉴别这两种细菌对于保障公共卫生和食品安全具有重要意义。

本文将详细介绍鉴别大肠杆菌和枯草芽孢杆菌的方法。

外观观察大肠杆菌和枯草芽孢杆菌在进一步检测之前可以通过外观观察进行初步鉴别。

大肠杆菌外观观察1.形态:大肠杆菌为革兰氏阴性杆菌,呈棒状。

2.颜色:培养在富含营养物的琼脂平板上产生的大肠杆菌菌落呈乳白色或浑浊白色。

3.糖发酵:大肠杆菌能够发酵葡萄糖,产生酸,导致琼脂平板颜色变黄。

枯草芽孢杆菌外观观察1.形态:枯草芽孢杆菌为革兰氏阳性杆菌,形态较大肠杆菌更为多样,包括短杆状、长杆状和梭形等。

2.颜色:培养在琼脂平板上的枯草芽孢杆菌菌落呈白色或灰白色。

3.胶质囊:枯草芽孢杆菌形成胶质囊,使菌落观察时呈乳白色,菌落平整立体。

生理和生物化学特性除了外观观察之外,大肠杆菌和枯草芽孢杆菌在生理和生物化学特性上也有明显差异,这些特性可以用于进一步鉴别。

大肠杆菌特性1.氧需求:大肠杆菌是厌氧菌,无需氧气生长。

2.好气性发酵:大肠杆菌可以利用葡萄糖进行好气性发酵,产生酸和气体,如二氧化碳。

3.非芽孢形成:大肠杆菌不会形成孢子。

枯草芽孢杆菌特性1.氧需求:枯草芽孢杆菌是好气性菌,需氧气生长。

2.好气性发酵:枯草芽孢杆菌可以进行好气性发酵,但不像大肠杆菌那样产生气体。

3.孢子形成:枯草芽孢杆菌能够在逆境下形成芽孢,以保护自己。

生化试验生化试验是一种常用的方法,用于鉴别大肠杆菌和枯草芽孢杆菌。

大肠杆菌的常见生化试验1.非芽孢形成:通过培养在常规琼脂平板上,观察是否形成孢子,大肠杆菌不会形成孢子。

2.外膜酶试验:大肠杆菌产生β-半乳糖苷酶,可通过添加半乳糖苷甲醚酸盐,观察是否产生金黄色沉淀物来进行鉴别。

3.琼脂溶血试验:大肠杆菌可以分泌溶血素,在琼脂平板上添加红细胞进行观察,大肠杆菌使红细胞溶解,形成溶血环。

鉴定葡萄球菌的方法

鉴定葡萄球菌的方法

鉴定葡萄球菌的方法葡萄球菌是一种常见的细菌,常常引起各种感染。

因此,准确鉴定葡萄球菌对于临床治疗和疾病控制至关重要。

本文介绍了几种常见的鉴定葡萄球菌的方法。

下面是本店铺为大家精心编写的5篇《鉴定葡萄球菌的方法》,供大家借鉴与参考,希望对大家有所帮助。

《鉴定葡萄球菌的方法》篇1一、生化试验生化试验是鉴定葡萄球菌的一种常用方法。

通过检测葡萄球菌的生化反应,可以初步鉴定其种类。

常见的生化试验包括:1. 葡萄糖发酵试验:葡萄球菌可以发酵葡萄糖,产生酸和气体。

将葡萄球菌接种到含有葡萄糖的培养基上,观察是否产生酸和气体,可以初步鉴定其是否为葡萄球菌。

2. 乳糖发酵试验:葡萄球菌不能发酵乳糖。

将葡萄球菌接种到含有乳糖的培养基上,观察是否产生酸和气体,可以进一步确认其是否为葡萄球菌。

3. 尿酸酶试验:葡萄球菌可以产生尿酸酶,将尿酸分解为尿酸盐和氨。

将葡萄球菌接种到含有尿酸的培养基上,观察是否产生尿酸盐和氨,可以进一步鉴定其种类。

二、药敏试验药敏试验是鉴定葡萄球菌的另一种常用方法。

通过检测葡萄球菌对不同抗生素的敏感性,可以初步鉴定其种类。

常见的药敏试验包括: 1. 盘状药敏试验:将葡萄球菌接种到含有不同抗生素的培养基上,观察葡萄球菌对不同抗生素的敏感性。

2. 纸片药敏试验:将含有不同抗生素的纸片贴在含有葡萄球菌的培养基上,观察葡萄球菌对不同抗生素的敏感性。

三、分子生物学方法近年来,分子生物学方法也被广泛应用于鉴定葡萄球菌。

常见的分子生物学方法包括:1. PCR 法:利用 PCR 技术,检测葡萄球菌的特异性基因,可以快速、准确地鉴定葡萄球菌。

2. 质谱法:利用质谱技术,检测葡萄球菌的蛋白质指纹,可以鉴定其种类。

鉴定葡萄球菌的方法有多种,包括生化试验、药敏试验和分子生物学方法等。

《鉴定葡萄球菌的方法》篇2鉴定葡萄球菌的方法包括直接镜检、分离培养、PCR 方法等。

直接镜检可通过革兰染色镜检,观察菌体形态和排列方式,判断是否为葡萄球菌。

细菌分离鉴定(完整版)

细菌分离鉴定(完整版)

细菌分离鉴定细菌分离鉴定[细菌分离鉴定]细菌分离鉴定目的要求:熟悉临床标本中常见的病原性细菌的分离鉴定方法,细菌分离鉴定。

实验内容:一、脓汁、咽拭子等标本中病原性细菌的分离与鉴定(一)标本采集1.脓拭子:用无菌棉签蘸取患处深部脓液或分泌物少许,置入无菌空试管内,送检。

2.痰拭子:用消毒容器收集病人痰液,用无菌棉签挑取脓稠痰块,置入无菌空试管内,送检。

3.咽拭子:嘱病人把口张大,用压舌板压住舌根,用无菌棉签迅速蘸取咽部分泌物,置入无菌空试管内,送检。

4.血标本:疑为败血症患者,在严格无菌操作下,静脉采血,床旁直接加入含50ml的肉汤瓶内,立即摇匀后送培养。

5.脑脊液:对疑似流脑患者,作腰椎穿刺取脑脊液,立即行直接床旁接种(送检过程中应注意保温)。

6.尿道、阴-道分泌物:对可疑淋病患者,男性可从尿道取材,取材时导尿管应进入尿道1cm~2cm,如为刚排尿,应等待1h左右;女性则可以从宫颈口取分泌物,当内窥器插入宫颈口后应稍等片刻,再旋转取出,取材应立即送检,不可放置冰箱。

(二)分离鉴定程序待检标本可直接做涂片染色检查鉴定,必要时可做分离培养、生化反应及致病性鉴定。

常见的致病性球菌检查程序如下。

直接涂片、革兰染色、镜检(形态、排列、染色性)脓、痰、咽拭子分泌物、脑脊液观察菌落性状、溶血性、色素血琼脂平板→涂片、染色、镜检↑挑取可疑菌落生化反应血液、穿刺液→肉汤培养基纯分离致病性测定↓药敏试验如培养液混浊时可涂片、染色、镜检(三)常见临床标本的检查方法1.脓拭子在脓汁中除了球菌外,也有杆菌存在,例如革兰阳性的有炭疽杆菌、白喉杆菌、结核杆菌、枯草杆菌等,革兰阴性的有大肠杆菌、绿脓杆菌、变形杆菌等,此外尚可有真菌、放线菌、螺旋体等。

材料(1) 标本:脓拭子(2) 培养基:血琼脂平板(3) 兔血浆、白色滤纸片、无菌生理盐水、载玻片方法脓汁→革兰染色→镜检↓↑血琼脂平板→观察菌落形态及溶血情况↓致病力试验(1)将脓拭子作革兰染色,镜检(先作培养再涂片以免污染),鉴定材料《细菌分离鉴定》()。

细菌的分离、培养和鉴定

细菌的分离、培养和鉴定

② 加富培养基:在基础培养基中加入某些特殊营养物质 (如血液/血清、酵母浸膏或生长因子等);用以培养对 营养要求高的微生物(2216E)
③ 选择培养基:利用细菌对某种或某些化学物质的敏感性 不同;在培养基中加入这类物质,利于所需分离的细菌生 长,而抑制不需要的细菌生长,从而达到分离某种微生物 的目的。(中国科学院海洋研究所专利:一种定量检测鳗弧 菌的选择性培养基及其制备)【利用鳗弧菌对氨苄青霉素的抗性 】
④ 鉴别培养基:是一类含有某种特定化合物或试剂的培养
基。某种细菌在这种培养基上培养后,产生某种代谢产物,
能与这种特定化合物或试剂发生某种明显的特征性反应;
从而达到区分不同的微生物.。(TCBS)
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ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ ❖ 病料在接种培养基后,经过一段时间,应检查其 生长状况。首先用肉眼检查有无细菌生长;若有, 则需进一步检查菌落是否纯一。形态特征包括: 大小、形状、突起或扁平、凹陷、边缘(光滑、 波形、锯齿状、卷发状等)、颜色(红色、灰白 色、黄色等)、表面(光滑、粗糙等)、透明度 (不透明、半透明、透明等)和粘度等
水可直接涂布平板
• 平板置于28℃ 恒温培养箱培养24h,观察细菌生
长状况
(注意:操作台在使用前后都需要用酒精棉球擦拭
台面,保持操作台的整洁)
.
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二、细菌的培养
培养基:培养基是指由人工方法配合而成的,用于微生物 培养、分离、鉴别、研究和保存菌种用的混合营养制品。
培养基的种类
① 基础培养基:含有一般细菌生长繁殖需要的基本营养物 质;可作为一些特殊培养基的基础成分(普通营养琼脂)
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生化鉴定管
各种细菌所具有的酶系统不尽相同,对营养 基质的分解能力也不一样,因而代谢产物 或多或少地各有区别,可供鉴别细菌之用

铜绿假单胞菌感染的临床表现及其与其他细菌感染的鉴别

铜绿假单胞菌感染的临床表现及其与其他细菌感染的鉴别

铜绿假单胞菌感染的临床表现及其与其他细菌感染的鉴别铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)是一种常见的病原体,常引起严重的感染。

它在自然环境中广泛分布,在土壤、水源、植物等多个生物体中都可被发现。

铜绿假单胞菌感染可以影响多个器官系统,尤其是呼吸道、泌尿系统、皮肤和软组织。

临床上,铜绿假单胞菌感染的特征性表现包括以下几个方面:1. 呼吸道感染:铜绿假单胞菌是常见的呼吸道感染病原体之一,尤其在慢性阻塞性肺疾病、囊性纤维化、肺炎等患者中更易感染。

患者常出现咳嗽、咳痰、呼吸困难等症状,痰样特征呈浓痰样,有时带有恶臭。

肺部体征常见的是杂音、湿罗音或触觉闻诊异常等。

2. 尿路感染:铜绿假单胞菌是常见的尿路感染病原体,尤其在长期导尿、泌尿系统结石、低免疫状态等患者中易感染。

患者常出现尿频、尿急、尿痛等症状,尿液呈不同程度的混浊,可有血尿。

尿标本培养可检测到铜绿假单胞菌。

3. 皮肤和软组织感染:铜绿假单胞菌感染在烧伤和创伤患者中非常常见。

感染部位常常出现红肿、疼痛和渗液,可伴有骨髓炎、皮下脓肿等严重并发症。

在病情严重且治疗不及时的情况下,感染可导致坏死和组织破坏。

4. 肺外感染:除上述常见感染部位外,铜绿假单胞菌还可引起败血症、心内膜炎、中耳炎、角膜溃疡等。

这些感染常常与患者作为医疗器械相关感染、手术后感染、免疫功能低下等因素有关。

与其他细菌感染的鉴别:1. 与肺炎克雷伯菌感染的鉴别:肺炎克雷伯菌感染也常见于呼吸道感染,其临床表现与铜绿假单胞菌感染有很多相似之处。

然而,铜绿假单胞菌感染的痰样通常表现为浓痰,有时有恶臭。

铜绿假单胞菌还常伴有其他感染表现,如尿路感染或皮肤软组织感染等,而肺炎克雷伯菌感染多以呼吸道感染为主,罕见其他部位感染。

2. 与金黄色葡萄球菌感染的鉴别:金黄色葡萄球菌是另一常见的病原菌,可以导致多种感染,如肺炎、尿路感染、皮肤软组织感染等。

与铜绿假单胞菌感染不同的是,金黄色葡萄球菌感染常伴有局部明显红肿、脓肿形成,而铜绿假单胞菌感染在皮肤软组织感染时表现更加浸润。

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不常见细菌的快速鉴别方法一. 不常见革兰阴性菌1. 布氏杆菌属布氏杆菌属是一类革兰阴性细小杆菌,牛、羊、猪等动物最易感染。

人类接触带菌动物或食用病畜及其乳制品,均可被感染。

布氏杆菌病广泛分布世界各地,我国部分地区曾有流行。

布氏杆菌属分为羊、牛、猪、鼠、绵羊及犬布氏杆菌6个种,20个生物型。

中国流行的主要是羊、牛、猪三种布氏杆菌,其中以羊布氏杆菌病最为多见。

布氏杆菌属细菌为非抗酸性,无芽胞,无荚膜,无鞭毛,呈球杆状(见图1)。

血琼脂(BAP)上为透明或半透明、光滑且有光泽菌落。

此细菌不在麦康凯琼脂上生长。

布氏杆菌属细菌尿素阳性,触酶、氧化酶阳性,而吲哚阴性。

由于该菌属细菌具有强的传染性,因此一旦怀疑应送往LRN B级参考实验室进行确认。

2. 空肠弯曲菌空肠弯曲菌是一种人畜共患病病原菌,可以引起人和动物发生多种疾病,并且是一种食物源性病原菌,认为是引起全世界人类细菌性腹泻的主要原因。

其致病因素包括粘附、侵袭、产生毒素和分子模拟机制等四个方面,通过分子模拟机制可以引起最严重的并发症一格林一巴利综合征。

空肠弯曲菌可以通过产生细胞紧张性肠毒素、细胞毒素和细胞致死性膨胀毒素而致病。

空肠弯曲菌对红霉素、新霉素、庆大霉素、四环素、氯霉素、卡那霉素等抗生素敏感,但近年发现了不少耐药菌株及多重耐药性菌株。

空肠弯曲菌菌体轻度弯曲似逗点状(见图2)。

菌体一端或两端有鞭毛,运动活泼,在暗视野镜下观察似飞蝇。

有荚膜,不形成芽胞。

微需氧菌,在含2.5~5%氧和10% CO2的环境中生长最好,在正常大气或无氧环境中均不能生长,最适温度为37~42℃。

本菌在普通培养基上难以生长,在凝固血清和血琼脂培养基上培养36小时可见无色半透明毛玻璃样小菌落,单个菌落呈中心凸起,周边不规则,无溶血现象。

空肠弯曲生化反应不活泼,不发酵糖类,不分解尿素。

可还原硝酸盐,氧化酶和触酶为阳性。

能产生微量或不产生硫化氢,甲基红和v-p试验阴性,枸椽酸盐培养基中不生长,在弯曲菌中马尿酸呈阳性反应具有重要鉴定价值。

3.“HACEK”群细菌HACEK是指一组革兰阴性杆菌:嗜血杆菌属(H)、放线杆菌属(A)、人心杆菌属(C)、艾肯菌属(E)、金氏杆菌属(K)。

这组微生物的共同特征是易导致心内膜感染,约占全部感染性心内膜炎的5-10%,它们是导致正常人群(非静脉药物滥用者)心内膜炎的常见原因之一。

所有这些微生物都是口咽部正常菌群的一部分,生长缓慢、喜好富二氧化碳环境。

除心脏瓣膜感染,HACEK菌还导致其他感染:菌血症、各类脓肿、腹膜炎、中耳炎、结膜炎、肺炎、化脓性关节炎、骨髓炎、尿路感染、伤口感染、脑脓肿、牙周感染。

嗜血杆菌属因在生长过程中需含有生长因子X(氯化高铁血红素)和(或)V(辅酶Ⅰ)的血液琼脂而得名。

本属细菌为革兰阴性小杆菌,无动力,具有明显的多型性,不形成芽胞,需氧或兼性厌氧。

流感嗜血杆菌是嗜血杆菌属最重要的病原菌,镜下呈球杆状、长杆状、少数为丝状。

粘液型菌株有荚膜,毒力较强。

菌落一般为光滑型,若与金黄色葡萄球菌在BAP上共同孵育,则在葡萄球菌菌落周围生长的流感嗜血杆菌菌落较大,这叫做“卫星现象”。

原因是金黄色葡萄球菌能合成较多的V因子,促进流感嗜血杆菌的生长。

放线杆菌属为革兰阴性杆菌,有时呈球形、椭圆形(见图3)。

兼性厌氧菌,无动力,无荚膜,在含血清或血液的培养基上生长良好,37℃培养2~3天后形成直径约1mm的菌落。

在肉汤培养液中生长呈颗粒状。

对人或动物致病的有伴放线放线杆菌、林氏放线杆菌和马驹放线杆菌。

伴放线放线杆菌因常见于人类的某些放线菌病的病灶中而得名。

但也可单独致病,如一些亚急性细菌性心内膜炎是由本菌引起的。

本属细菌能还原硝酸盐,不产生吲哚,尿素阳性。

人心杆菌是心杆菌属内唯一的种,是人的鼻腔和咽喉部的正常菌群,可引起心内膜炎、尿路感染、脑脓肿和牙周炎等疾病。

大部分菌株可从血液中分离而来,有的菌株也可从脑脊液中分离而来。

人心杆菌为无鞭毛、无荚膜、无芽孢,并具有多形性的革兰阴性杆菌(见图4)。

革兰染色不易被脱色,单个存在或成对排列,有时形成短链或呈葡萄状排列。

该菌为兼性厌氧菌,某些菌株在初代分离时需要CO2,在生长过程中要有一定湿度,在干燥环境中不生长;在35~37 ℃均可生长,但在22 ℃或42 ℃均不生长。

该菌在BAP上不溶血,经24h 培养后菌落很小,48h 后可达1mm,菌落为圆形、凸起、光滑、有光泽而边缘整齐,某些菌株的菌落可长入培养基中,使培养基表面琼脂凹陷。

麦康凯琼脂上不生长。

人心杆菌氧化酶阳性,触酶阴性,吲哚阳性,不还原硝酸盐。

啮蚀艾肯菌是革兰阴性多形性球杆菌(见图5),有一种漂白剂的气味,兼性厌氧,是口腔和许多其他粘膜表面的正常菌群。

啮蚀艾肯菌是人咬伤后发生的蜂窝织炎的病原体,它也是已发现静脉药物滥用者软组织感染和心内膜炎主要病原体。

它也能导致各种各样的肺部感染(如脓胸、肺炎、败血症栓子),类似严格偏性厌气菌。

大多数啮蚀艾肯菌性心内膜炎患者有潜在的生物瓣膜病变。

与其他HACEK菌不同,大多数啮蚀艾肯菌性心内膜炎与静脉药物滥用有关。

啮蚀艾肯菌在培养基上凹陷生长,吲哚阴性,鸟氨酸阳性。

金氏杆菌属是革兰阴性球杆菌(见图6),有3个种:金氏金氏杆菌、产吲哚金氏杆菌、去硝化金氏杆菌,只有金氏金氏杆菌引起心内膜炎。

与其他HACEK菌不同,金氏杆菌感染进展相当迅速。

金氏金氏杆菌在BAP呈大的、光滑、不透明、白色或米色、β-溶血菌落,与肠杆菌科细菌相似,但在麦康凯琼脂上不生长。

金氏金氏杆菌触酶阴性,氧化酶阳性,通常分离自无菌组织和体液。

4. 土拉热弗朗西斯氏菌土拉热弗朗西斯氏菌简称土拉弗氏菌,是引起土拉弗氏菌病(野兔热)的病原菌。

人类感染此病多因接触患病动物而致,或摄食污染食物和吸入污染空气所致。

土拉杆菌是革兰阴性多形性细菌,镜下呈球状、杆状、豆状和丝状等,无芽胞、无动力、有荚膜。

该菌营养要求较高,在普通琼脂培养基和肉汤中均不生长,只在加入胱氨酸、半胱氨酸、血液或卵黄的培养基中生长,形成圆形、光滑、灰色、凸起、有粘性的菌落,在鸡胚绒尿膜上也能生长,在卵黄囊中生长尤为茂盛,最适生长温度35℃~37℃。

若从动物或人体初次分离,一般需要3—5天。

常用培养基主要有半胱氨酸葡萄糖血液琼脂平板(Francis培养基)、卵黄琼脂平板和半胱氨酸巧克力琼脂。

土拉热弗朗西斯氏菌氧化酶阴性,触酶阴性或弱阳性,β-内酰胺酶阳性。

由于该菌具有强传染性,必须在生物安全柜中处理,一旦怀疑需送往LRN参考实验室进行确认。

5. 卡他莫拉菌卡他莫拉菌为革兰阴性双球菌。

过去一直认为卡他莫拉菌是对人体无致病性的上呼吸道正常寄居菌,但是,近20多年的研究发现,该菌不仅可以引起儿童和老年人的上呼吸道感染,而且还是引起成人下呼吸道感染的重要病原菌,是儿童上颌窦炎、中耳炎、肺炎以及成人的慢性下呼吸道感染的第3位最常见致病菌,仅次于流感嗜血杆菌和肺炎链球菌。

卡他莫拉菌在BAP上不溶血,整个菌落可推动,氧化酶、触酶阳性,丁酸盐、吲哚酚醋酸盐阳性。

6. 奈瑟菌属奈瑟菌属细菌为革兰阴性球菌,单个或成双排列,无芽孢、无鞭毛、有菌毛,触酶、氧化酶阳性,包括脑膜炎奈瑟菌(见图7)、淋病奈瑟菌等9种,其中有临床意义的致病菌为脑膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌。

BAP上呈透亮不溶血菌落,氧化酶、γ-谷氨酰氨肽酶阳性为脑膜炎奈瑟菌。

BAP上呈浅灰色不溶血菌落,氧化酶、β-半乳糖苷酶阳性为乳糖奈瑟菌。

淋病奈瑟菌在巧克力琼脂上呈小的、有光泽的菌落,通常在BAP、MH和胰大豆琼脂上生长,氧化酶阳性,触酶强阳性(30%过氧化氢),而γ-谷氨酰氨肽酶、β-半乳糖苷酶阴性。

不常见革兰阴性菌的快速鉴定方法二. 不常见革兰阳性菌1.产单核李斯特菌李斯特菌是一种典型的胞内寄生的革兰阳性短杆菌,共分为2个群,7个种。

第一群包括产单核细胞李斯特菌、伊氏李斯特菌、无害李斯特菌(又名英洛克李斯特菌) 、韦氏李斯特菌及西尔李斯特菌;第二群为较少见的格氏李斯特菌和莫氏李斯特菌。

其中产单核细胞李斯特菌和伊氏李斯特菌具有致病性,且产单核细胞李斯特菌是惟一能引起人类疾病的,是一种人兽共患病的病原菌,能引起人、畜的李斯特菌病,感染后主要表现为败血症、脑膜炎、流产和单核细胞增多。

这种病菌在自然界广泛存在,食品中存在的产单核细胞李斯特菌对人类的安全具有危险,世界卫生组织(WHO)指出,水产品、奶及奶制品、肉制品均有不同程度的污染,并曾将其列为20世纪90年代食品中四大致病菌之一。

产单核李斯特菌是一种革兰阳性短小杆菌,通常成双排列,偶尔可见双球状(见图8)。

有鞭毛,但仅在18~20℃有动力,在37℃动力缓慢。

无芽胞,一般不形成荚膜,但在含有血清的葡萄糖蛋白胨水中能形成粘多糖荚膜。

兼性厌氧,对营养要求不高,普通培养基上可生长,在血平板上会形成β-溶血。

最适的生长温度是30~37℃,并可在4℃条件下进行冷增菌。

本菌耐碱不耐酸,对热较为敏感,加热50℃10min即可死亡同时该菌对多种抗生素敏感,以氨苄青霉素为首选,尚有青霉素、链霉素、四环素、氯霉素和红霉素等敏感。

但该菌对磺胺、杆菌肽和多粘菌素耐药。

产单核李斯特菌触酶阳性,马尿酸盐阳性。

2.链球菌属链球菌属细菌广泛分布于自然界、人和动物肠道、健康人鼻咽部等,致病链球菌可引起各种化脓性炎症、猩红热、风湿热等疾病。

本属细菌为革兰阳性球菌,链状排列,无鞭毛,无芽孢,可形成荚膜,在液体培养基中易形成长链,致病性强的菌株多为长链,在脓汁标本中多为短链。

本属细菌为需氧或兼性厌氧菌,部分为厌氧菌。

营养要求较高,需在加有血液、血清等成分的培养基生长良好。

根据链球菌在血液琼脂平板上菌落周围溶血情况,有草绿色溶血环的称为α型溶血,如草绿色链球菌;呈透明溶血环的称为β型溶血,称β溶血性链球菌或化脓性链球菌;也有不溶血的,称为γ型溶血,如肠球菌。

根据族特异性抗原将链球菌分A-T 18个族。

链球菌属细菌触酶阴性。

化脓链球菌(A群) PYR阳性。

无乳链球菌(B群) 马尿酸盐阳性,CAMP阳性。

草绿色链球菌PYR阴性,LAP阳性,胆汁溶菌试验阴性。

肺炎链球菌镜下为革兰阳性球菌,矛尖状,成双排列,在人和动物体内形成荚膜,菌落细小、周围有草绿色溶血环,48小时后,由于菌落自溶,呈现“脐窝状”,Optochin敏感试验阳性,胆汁溶菌试验阳性,菊糖分解试验阳性。

表2 不常见革兰阳性菌快速鉴定方法。

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