药代动力学试验
中药药代动力学研究及应用
中药药代动力学研究及应用近年来，随着人们对传统中药的关注度不断增加，中药药代动力学研究成为一个热门话题。
中药药代动力学研究涉及到中药的吸收、分布、代谢和排泄等过程，对中药的功效和安全性有着重要的指导意义。
本文将探讨中药药代动力学研究的意义及其应用。
一、中药药代动力学研究的意义中药药代动力学研究可以帮助我们了解中药的药效和毒副作用，进而指导中药的合理应用。
通过中药药代动力学研究，可以确定中药的适宜剂量和给药方式，提高中药的疗效。
同时，中药药代动力学研究还可以评估中药在人体内的代谢和消除情况，为中药的质量控制和制定中药的用药规范提供科学依据。
二、中药药代动力学研究的方法中药药代动力学研究可以采用体内外实验方法。
体外实验方法包括体外酶反应、细胞培养和酶联免疫吸附分析等，可以研究中药在体内的代谢酶系统和药物转运体的作用。
体内实验方法则是通过动物试验或人体试验，研究中药在体内的吸收、分布、代谢和排泄等药代动力学过程。
三、中药药代动力学研究的应用中药药代动力学研究在中药研究和临床应用中有着广泛的应用。
首先，中药药代动力学研究可以用于中药的质量评价和质量控制。
通过研究中药的吸收和代谢情况，可以判断中药是否符合药物的质量要求。
其次，中药药代动力学研究可以指导中药的合理配伍和药物疗效评价。
对于复方中药来说，了解各个组分的药代动力学特征，可以合理配伍，提高疗效。
最后，中药药代动力学研究还可以用于中药的药物相互作用研究和药物个体化治疗。
通过研究中药与其他药物的相互作用，可以合理用药，减少药物不良反应。
四、中药药代动力学研究的挑战与展望虽然中药药代动力学研究已取得了一些进展，但仍面临着一些挑战。
首先，中药的多组分复杂性和药物代谢途径的多样性使得中药药代动力学研究变得复杂。
其次，中药的质量控制和药效评价方法尚不完善，限制了中药药代动力学研究的应用。
此外，中药药代动力学研究还需要大量的时间和资源投入。
未来，我们需要加强中药药代动力学研究的标准化和规范化，提高中药研究的质量和可靠性。
药代动力学实验流程
下面是一般药代动力学实验的流程：
1. 实验设计：确定研究目的、选择合适的动物模型、设计给药方案（包括剂量、途径和时间）以及采样时间点。
2. 动物准备：选择合适的动物种类和性别，根据实验要求对动物进行分组，并在实验前适应环境。
3. 给药：按照设计的给药方案给动物施以药物，可以通过口服、静脉注射、皮下注射等方式进行。
4. 样品采集：在设定的时间点采集血液、尿液、粪便等生物样本，用于分析药物的浓度。
5. 样品处理：将采集的生物样本进行处理，如离心、萃取、净化等，以准备进行药物浓度分析。
6. 药物浓度分析：采用适当的分析方法，如高效液相色谱法（HPLC）、气相色谱法（GC）、质谱法（MS）等，测定生物样本中的药物浓度。
7. 数据分析：将测得的药物浓度数据进行处理和分析，计算药物的药代动力学参数，如消除半衰期、血药浓度-时间曲线下面积（AUC）、清除率等。
8. 结果解释：根据药代动力学参数，评估药物在体内的吸收、分布、代谢和排泄过程，以及药物的有效性和安全性。
9. 报告撰写：撰写实验报告，包括实验目的、方法、结果、结论等内容，并对实验结果进行讨论和解释。
型的不同而有所调整。
在进行实验前，应仔细设计实验方案，并确保实验操作的科学性和准确性。
药物代谢动力学测定方法的研究及应用
药物代谢动力学测定方法的研究及应用一、引言药物代谢动力学研究是药理学和药物化学重要的研究领域之一，目的是探讨药物在体内的代谢过程以及代谢产物的生成、分布和排泄等情况。
药物代谢动力学测定方法的研究和应用是探究药物代谢的核心内容，本文将从多个角度进行阐述。
二、药物代谢动力学测定方法的研究（一）药物浓度测定方法药物浓度是药物代谢动力学研究的重要指标之一。
药物浓度测定方法主要包括高效液相色谱法（HPLC）、气相色谱法（GC）、液相质谱法（LC-MS/MS）等。
其中，HPLC法是最常用的一种方法，已经成为药物代谢动力学研究的规范方法之一。
（二）药物代谢酶的测定方法药物代谢酶是影响代谢过程的重要因素，其测定方法也是药物代谢动力学研究中的重要环节。
药物代谢酶的测定方法主要包括酶活力测定、酶蛋白的分离纯化、基因测序等。
其中，酶活力测定是最常用的一种方法。
（三）药物代谢动力学参数测定方法药物代谢动力学参数是反映药物代谢特性的重要指标，主要包括最大消除率（Vmax）、药物溶液的清除率（Cl）、生物利用度（F）等。
药物代谢动力学参数测定方法主要包括常规体外实验测定、体内药代动力学研究测定等。
其中，体内药代动力学研究测定是最常用的方法之一。
三、药物代谢动力学测定方法的应用（一）药物代谢特性的研究药物代谢动力学测定方法的应用可以揭示药物在体内的代谢特性，进而确定药物的剂量和用药方式，以提高疗效和减少不良反应。
例如，对于众多的心血管药物，通过药物代谢动力学研究，可以发现它们的代谢途径和代谢产物，以及药物的剂量和用药方式等，为临床应用提供了有力的指导。
（二）药物相互作用研究药物代谢动力学测定方法的应用还可以研究药物相互作用，为临床用药提供参考。
例如，在一些药物联用的情况下，药物可以相互影响，改变其代谢特性，从而导致药物的不良反应或者治疗效果下降。
因此，药物代谢动力学测定方法可以通过研究药物相互作用，提出针对性的药物联合治疗方案，以减少不良反应和提高治疗效果。
药物代谢动力学的研究方法
药物代谢动力学的研究方法药物代谢动力学是指药物在体内的代谢过程，涉及药物吸收、分布、代谢和排泄等过程。
药物代谢动力学的研究方法包括体内外实验、数学模型、分子生物学技术等方面。
本文将从这几个方面介绍药物代谢动力学的研究方法。
一、体内外实验体内外实验是药物代谢动力学研究中常用的方法。
体内实验是指将药物直接注入小鼠、大鼠、狗等实验动物体内，通过采集不同时间点的血样和组织样品，来研究药物的代谢过程。
体外实验则是在离体条件下（如体外肝微粒体、细胞系等），对药物进行代谢动力学研究。
体内外实验虽然具有操作简便、容易获得药物代谢动力学数据等优点，但也存在缺点，如可能受生理环境影响、需要大量动物供试等等。
因此，近年来，体内外实验的使用已被限制。
二、数学模型为了更加精确的研究药物代谢动力学，研究者们开始采用数学模型来模拟体内药代动力学过程。
数学模型是将药物代谢动力学过程分解成不同的阶段，建立相关方程模拟药物的吸收、分布、代谢和排泄等过程，从而预测药物在体内的药代动力学参数。
一些常用的数学模型包括：单室模型、双室模型、生物利用度模型等等。
数学模型方法最大的优点在于可以预测药物的药代动力学参数，降低体内外实验对实验动物的数量和时间、成本等方面的需求。
但是，数学模型的建立需要消耗大量的时间和精力，同时模型参数的确定也需要更多的数据支持，还存在着误差较大、难以考虑生物环境变异等诸多不足之处。
三、分子生物学技术近年来，分子生物学技术的发展已经对药物代谢动力学的研究产生了重大的影响。
分子生物学技术通过分子生物学手段如PCR扩增、基因克隆等技术，可以对组织、细胞、蛋白质等层面的药物代谢动力学进行研究。
特别是在相关基因的筛查、基因多态性的鉴定、基因表达谱及蛋白表达和代谢酶鉴定等技术上，分子生物学技术的应用已成为药物代谢动力学研究中的重要手段。
同时，分子生物学技术的出现也为药物代谢动力学的研究开启了一个新的研究领域。
总结来看，药物代谢动力学的研究方法虽然有着各自的特点，但是这些方法共同促进和推进了药物代谢动力学的研究和发展。
药物代谢动力学实验
药物代谢动力学实验
药物代谢动力学实验是一种用于研究药物在体内的药代动力学特征的实验方法。
药物代谢是指药物在体内发生的化学转化过程，通过代谢，药物可以转化成活性代谢物，也可以被转化为无活性的代谢产物，进而影响药物的药效和药物的药代动力学特性。
药物代谢动力学实验通常包括以下几个方面的研究内容：
1. 药物的消除速率：研究药物在体内消除的速率，即药物从体内被排除的速度。
常用的实验方法包括测量药物的消除半衰期和清除率。
2. 药物的代谢途径：研究药物在体内的代谢途径和代谢产物。
通过分析药物在体内的代谢产物，可以了解药物的代谢途径和代谢酶的类型。
3. 药物的代谢酶：研究参与药物代谢的酶的类型和功能。
常用的实验方法包括测定药物代谢酶的活性和测定酶的表达水平。
4. 药物的药代动力学参数：研究药物在体内的吸收、分布、代谢和排泄等动力学过程，计算药物的药代动力学参数，包括AUC（面积下曲线）、Cmax（峰浓度）、Tmax（峰时间）等。
药物代谢动力学实验可以为药物研发和临床应用提供重要的参考数据，可以帮助科学家了解药物的代谢途径和消除速率，指
导药物剂量的选择，预测药物的药效和毒性，优化药物的治疗效果。
药物代谢动力学的研究现状及趋势
药物代谢动力学的研究现状及趋势药物代谢动力学研究是指对药物在体内经过吸收、分布、代谢和排泄等一系列生理过程后的体内动力学过程的研究。
药物代谢动力学研究的重要性在于能够揭示药物在体内的行为，为药物的合理使用和药物研究提供科学依据。
随着医学和生物技术的快速发展，药物代谢动力学研究也在不断地更新和发展。
一、药物代谢动力学的研究方法1.药物代谢动力学实验药物代谢动力学研究的核心方法就是药物代谢动力学实验。
该实验是通过给物种（如小鼠、大鼠、猴子、犬、猪等），或人体内注射、灌胃等途径给药，然后测定药物在体内的吸收、分布和代谢产物的质量和数量，从而进行药物代谢动力学研究的方法。
2.计算机模拟药物代谢动力学研究的另外一种方法是计算机模拟。
计算机模拟是通过建立药物代谢动力学模型，利用计算机模拟技术对药物的代谢、吸收和排泄等方面进行分析和探讨的方法。
计算机模拟技术具有操作简便，模型可重复性好，数据可视化等特点。
二、药物代谢动力学的研究现状药物代谢动力学研究的进展离不开世界各地许多科学家的共同努力。
近年来，药物代谢动力学研究的革新主要表现在以下几个方面：1.药物代谢动力学在药物研究中的应用药物代谢动力学的研究为新药研发、药物剂量设计和药物安全性评价提供了重要依据和技术手段。
药物代谢动力学实验广泛应用于化学药品、天然药物、中药、微生物代谢产物等药物的研究。
2.基因组学技术在药物代谢动力学中的应用随着基因组学技术的不断发展和普及，研究人员也将药物代谢动力学与基因组学结合起来进行相关研究。
应用基因组学技术可以为药物代谢动力学提供更多的新信息和更加准确的数据，这对药物研发和药物安全性评价有很大的帮助。
3.探索药物代谢动力学的新机制药物代谢动力学的研究不断地推进着。
在研究中，还有许多新的药物代谢机制被揭示出来，例如硫化代谢、类烯基化代谢、半胱氨酸代谢等。
这些新机制的发现为药物研发和药物安全性评价开辟了新的研究领域。
三、药物代谢动力学的研究趋势药物代谢动力学的研究趋势主要表现在以下几个方面：1.多样性趋势药物代谢动力学的研究将更多的从概率性转向个体化和精准，药物代谢动力学的研究也将从组平均到个体化过渡。
药代动力学实验指导2
药代动力学实验指导2实习指导生物药剂学与药物动力学实验实验一药物在体小肠吸收实验一、实验目的1．以磺胺嘧啶为模型药物，掌握大鼠在体肠道灌流法的基本操作和实验方法。
2．掌握药物肠道吸收的机理及吸收速度常数（k a）与吸收半衰期[t1/2(a)]的计算方法。
二、实验原理药物消化道吸收实验方法可分为体外法（in vitro）、在体法（in situ）和体内法（in v ivo）。
在体法由于不切断血管和神经，药物透过上皮细胞后即被血液运走，能避免胃内容物排出及消化道固有运动等生理影响，是一种较好的研究吸收的方法。
但本法一般只限于溶解状态药物，并有可能将其他因素引起药物浓度的变化误认为吸收。
消化道药物吸收的主要方式为被动扩散。
药物服用后，胃肠液中高浓度的药物向细胞内透过，又以相似的方式扩散转运到血液中。
这种形式的吸收不消耗能量，扩散的动力来源于膜两侧的浓度差。
药物转运的速度可用Fick's（注：最后一稿校，全书一致）扩散定律描述：式中，为扩散速度；D为扩散系数；A为扩散表面积；k为分配系数；h为膜厚度，C GI为胃肠道中药物浓度；C为血药浓度。
在某一药物给予某一个体的吸收过程中，其D、A、h、k均为定值，可用透过系数P来表示，即。
当药物口服后，吸收进入血液循环中的药物，随血液迅速地分布于全身。
故胃肠道中的药物浓度（C GI）远大于血中药物浓度（C），则上式可简化为：上式表明药物被动转运（简单扩散）透过细胞膜的速度与吸收部位药物浓度的一次方成正比，表明被动转运速度符合表观一级速度过程。
若以消化液中药量（X a）的变化速度（）表示透过速度，则：式中，k a为药物的表观一级吸收速度常数。
对上式积分后两边取对数：式中，X a为t时间消化液中药量；X0为零时间消化液中药量。
以lg X a对t作图可得一直线，由此直线斜率即可求出药物的吸收速度常数，并可计算吸收半衰期：本实验以磺胺嘧啶为模型药物，进行大鼠在体小肠吸收试验。
药代动力学实验
标准加入法举例
• 废水样品中五氯苯（PCP）的分析
4 ppm 3 ppm 2 ppm
PCP
1 ppm
常用的定量方法
• 峰面积百分比法
– 由于检测技术的影响，在液相色谱中不常用
• 外标法
– 在液相色谱中用的最多
• 内标法
– 准确，但是麻烦 – 在标准方法中用的最多
外标法定量
• 配制一系列已知浓度的标样
液相色谱对流动相的要求
• 除色谱柱对流动相对的要求外，还有∶
– 与检测器匹配 – 脱气 – 避免卤素离子（不锈钢系统） – 溶剂的粘度 – 细菌的生长
流动相的脱气
• 流动相脱气的目的
– 使色谱泵的输液准确
• 输液均匀准确，并且脉动减小 • 保留时间及色谱峰面积的重现性提高
– 提高检测的性能
• 防止气泡引起的尖峰 • 基线稳定，信噪比增加 • 溶剂的紫外吸收本底降低
药物代谢动力学实验
赵娣 中国药科大学药代研究中心
2012年10月16日
神农尝百草
传说神农一生下来就是个 “水晶肚”，几乎是全透明的， 五脏六腑全都能看得见，还能 看得见吃进去的东西。那时候， 人们经常因乱吃东西而生病， 甚至丧命。神农为此决心尝遍 百草，能吃的放在身体左边的 袋子里，介绍给别人吃；不好 吃的就放在身体右边袋子里， 作药用。不能吃的就提醒人们 注意。
万分之一电子天平：称量量程范围、记录、保养
紫外可见光分光光度计：预热、样品量、校准
涡旋振荡器：涡旋程度
超声机：超声效果、时间
药代动力学实验室的要求
1.环境的要求：灰尘、湿度、阳光是分析仪器的大敌 2.所写即所做 3.分析测定用试剂为色谱纯及以上，水为超纯水 4.痕量分析对实验人员有较高要求 5.对仪器设备的操作严格按照SOP执行，专人管理和 维护保养 6.良好的实验习惯
药药代动力学研究方法
药药代动力学研究方法目录一、内容概览 (2)1. 研究背景与意义 (3)1.1 药物研发的重要性 (4)1.2 药物代谢动力学研究的目的与意义 (5)2. 研究方法与论文结构 (6)2.1 研究方法介绍 (7)2.2 论文组织结构 (9)二、药代动力学基础概念与理论 (10)1. 药代动力学定义及研究内容 (11)1.1 药代动力学的概念 (13)1.2 药代动力学研究的主要内容 (13)2. 药物在体内的过程 (15)2.1 药物的吸收 (16)2.2 药物的分布 (18)2.3 药物的代谢 (20)2.4 药物的排泄 (21)三、药代动力学研究方法与技术 (22)1. 实验设计 (23)1.1 实验动物的选择与分组 (24)1.2 给药方案的设计 (26)1.3 采样点的设置与样本处理 (26)2. 药学实验技术与方法应用 (28)一、内容概览药药代动力学（Pharmacokinetics，简称PK）研究方法主要关注药物在体内的动态变化过程，包括药物的吸收、分布、代谢和排泄等过程。
这些研究方法的应用对于理解药物的安全性、有效性和合理性具有重要意义。
在本研究中，我们采用多种先进的药药代动力学研究方法，以确保结果的准确性和可靠性。
具体包括：血药浓度法：通过测定不同时间点血液中的药物浓度，计算出药物的消除速率常数、生物利用度等参数。
这种方法适用于大多数口服和静脉注射给药的药物。
生理药物代动力学模型：基于解剖学和生理结构建立的药物体内动态模型，能够模拟药物在体内的分布、代谢和排泄过程，提供更为精确的药代动力学参数。
统计矩方法：通过对血药浓度时间曲线进行拟合，计算出药物的吸收速率常数、达峰时间、半衰期等参数。
这种方法适用于非线性药动学特征明显的药物。
生物效应法：通过观察药物对生物体的药理效应，间接反映药物在体内的动态变化过程。
这种方法适用于那些药理作用与血药浓度无直接关系的药物。
模型模拟与实验验证：将建立的数学模型与实验数据进行对比和分析，不断优化模型的结构和参数，以提高研究的准确性和可靠性。
药物代谢动力学实验讲义
时间（ min ）
ΔA
5
10
20
30
60 120
C（ μg/ml ）
血药浓度（ μg/ml ）
240 480
【注意事项 】
1.紫外分光光度计使用前需预热 30min 并激发氢灯。 2.振摇混匀药液时防止溅出并准确加样。 3.样品离心前需配平。 4.测量时若更换波长，必须重新调节 0 和 100 ％。
醒。 3、氯霉素溶液有结晶析出时可在水浴中加热溶解。 4、吸取氯霉素溶液的注射器应预先干燥，否则易结晶堵塞针头。
【思考题 】 1、何谓肝药酶诱导剂与抑制剂？ 2、试从理论上解释苯巴比妥及氯霉素对戊巴比妥钠睡眠时间的影响。
实验二 家兔血浆中水杨酸钠 浓度测定和药代动力学参数测定
【实验目的】
1. 以水杨酸钠为例了解血浆药物浓度随时间变化的时量关系。 2. 了解药代动力学参数的临床意义。
指压住静脉耳根端， 使静脉充盈，给药前用 12 号针头自耳静脉取血 1-1.5ml ， 7 号针头平行刺入静脉，抽动针管，见有回血即可推注。对其静脉注射氨茶 碱 15mg/kg 。 1.3 另一耳用锐利刀片切割取血。分别在给氨茶碱后 5、10 、20、30 、60 、120 、 180 、 300 、420min 取血。 1.4 分离血清，各管均取血清 0.5ml 于 15ml 试管中，加 0.1mol/L 盐酸 0.2ml 、 抽提液 5ml ，振摇混合， 2500r/min 离心 10min 。 2 血药浓度测定（紫外分光光度法） 2.1 吸取下层氯仿液 4ml 置另一试管中，加入 0.1mol/L NaOH 溶液 4ml ，振摇 混匀， 2500r/min 离心 10min 。 2.2 吸取上层碱液，以 0.1mol/L NaOH 溶液 4ml 作参比，振摇混匀， 2500r/min 离心 10min 。 测定其在λ274 和λ298 处的吸收度（ A274 和 A298 ），计算△A。 3 制作茶碱标准曲线： 取 5 支试管，依次加入茶碱标准液 20、40、60 、80 、100μl， 各加入 0.1mol/L NaOH 溶液 4ml ，终浓度依次为 0.5 、1.0 、1.5、2.0 、2.5 μg/ml ， 测定各管的 A274 和 A298 ，计算△A。以茶碱浓度为横坐标，△ A 为纵坐标描 点绘图，用 Excel 软件求直线回归方程， 即为茶碱标准曲线的直线方程 （图示）。 4. 将测得血清样品的△ A 代入标准曲线的方程，求得相应的 C，C×10 即为茶碱 的血药浓度。 以时间为横坐标， 浓度对数为纵坐标， 用 CAPP 软件描点做图， 判断氨茶碱在体内代谢的房室模型。
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标准加入法举例
? 废水样品中五氯苯（PCP）的分析
PCP
4 ppm 3 ppm 2 ppm 1 ppm
常用的定量方法
? 峰面积百分比法
? 由于检测技术的影响，在液相色谱中不常用
? 外标法
? 在液相色谱中用的最多
? 内标法
? 准确，但是麻烦 ? 在标准方法中用的最多
外标法定量
?配制一系列已知浓度的标样
? 步骤一： ? 90%甲醇1mL/min流速冲洗30min ? 步骤二： ? 10%甲醇1mL/min流速冲洗30min ? 步骤三： ? 90%甲醇1mL/min流速冲洗60min
色谱柱的存放
? 存放前的处理
? 除去杂质、盐
? 合适的存放溶剂 ? 避免色谱柱床的干枯 ? 避免机械震动 ? 防止细菌生长 ? 注意存放的温度
静注加替沙星在家兔体内的药代动力学研究
HPL1.HCP原LC理的与组成标准操作规程 (SOP)
2.分配色谱的原理 3.色谱柱 4.流动相 5.定性与定量方法 6.样品的预处理 7.反相色谱分析方法的开发
Chromatography
HPLC 的组成
? Pump 泵 ? Injector/Autosampler 进样器/自动进样器 ? Column 色谱柱 ? Detector 检测器 ? Data System/Integrator 数据系统/积分仪表
柱号 8082693.
键合相色谱柱
? 以硅胶为基质，通过化学键合方式把碳十八、碳 八、胺基等基团联在基质上，作为固定相。
? 优点∶
? 固定相稳定，不易流失 ? 应用广泛，可使用多种溶剂 ? 消除硅羟基的不良影响
? 缺点∶
? pH值不能小于3 ? 同样填料，各种牌号色谱柱不尽相同
反相C18色谱柱的活化
Minutes
0.00 0.00 0.50 1.00 1.50 2.00 2.50 3.00 3.50 4.00 4.50 5.00 5.50 6.00 6.50 7.00
Minutes
0.00 0.00 0.50 1.00 1.50 2.00 2.50 3.00 3.50 4.00 4.50 5.00 5.50 6.00 6.50 7.00
? 有机溶剂如甲醇、乙腈，水 ? 应用添加剂，成为离子对、离子抑制方法
? 常用固定相：
? 碳十八、碳八、胺基等基团 ? 反相色谱固定相多为键合相
对HPLC柱的了解
? 色谱柱分类 ? 填料，含碳量，基质，粒径 ? 色谱柱的应用 ? 正相柱，反相柱，预处理柱 ? 色谱柱的规格 ? 岛津 Shimadzu VP-ODS; 150L×2.0; 5μm;
药物代谢动力学实验
赵娣 中国药科大学药代研究中心
2012年10月16日
神农尝百草
传说神农一生下来就是个
“水晶肚”，几乎是全透明的， 五脏六腑全都能看得见，还能 看得见吃进去的东西。那时候， 人们经常因乱吃东西而生病， 甚至丧命。神农为此决心尝遍 百草，能吃的放在身体左边的 袋子里，介绍给别人吃；不好 吃的就放在身体右边袋子里， 作药用。不能吃的就提醒人们 注意。
药物代谢动力学
定量研究药物（包括外来化学物质）在生物体内吸收、分布、排泄和代谢（简 称体内过程）规律的一门学科。
? HPLC-UV ?
生物样品 常用测
定方法
?GC-MS ?
数据处理分析
?LC-MS/MS ?
3
实验安排
? 1.HPLC原理与标准操作规程(SOP) ? 2.实验设计与动物实验 ? 3.样品处理与方法开发 ? 4.定性定量与分析测定 ? 5.数据处理与药动学参数计算 ? 6.实验报告
液相色谱对流动相的要求
? 除色谱柱对流动相对的要求外，还有∶
? 与检测器匹配 ? 脱气 ? 避免卤素离子（不锈钢系统） ? 溶剂的粘度
?
流动相的脱气
? 流动相脱气的目的
? 使色谱泵的输液准确
? 输液均匀准确，并且脉动减小 ? 保留时间及色谱峰面积的重现性提高
? 提高检测的性能
? 防止气泡引起的尖峰 ? 基线稳定，信噪比增加 ? 溶剂的紫外吸收本底降低
外标法定量（二）
?实际色谱图
5,000
4,000
响应值 ()峰面积
3,000 2,000
1,000
0
0
50
0.30
0.30
0.30
0.25
0.25
0.25
0.20
0.20
ห้องสมุดไป่ตู้
0.20
0.15
0.15
0.15
0.10
0.10
0.10
0.05
0.05
0.05
0.00 0.00 0.50 1.00 1.50 2.00 2.50 3.00 3.50 4.00 4.50 5.00 5.50 6.00 6.50 7.00
? 可保持连续脱气，多用于低压梯度
色谱峰定性
? 鉴别每个色谱峰
?通过比较保留值(通常是保留时间)的方法，找到各色谱 峰所对应的组份
?大多数情况下用比较保留时间来定性
即所谓：
à 保留时间相同，可能是同样的组份 á 保留时间不同，肯定不是同样的组份
用保留时间定性
?用“标样”的保留值定出被测组份的位置
Minutes
标准曲线
100
150
200
250
样品浓度
内标法定量（一）
?配制一系列浓度的标样，其中加有内标样
内标法定量（二）
1.80
MethylParaben
0.40
Ethylparaben
0.35
0.30
0.25
AU
0.20
0.15
Uracil
Propylparaben
0.10
0.05
0.00 0.00 0.50 1.00 1.50 2.00 2.50 3.00 3.50 4.00 4.50 5.00 5.50 6.00 6.50 7.00
Minutes
? 保护色谱柱
? 减少死体积 ? 防止填料的氧化
流动相脱气的方法
? 加热
? 简单，如同抽真空一起使用，其效果很好。但容易造成流动相组成 的变化
? 抽真空
? 同上，一般在溶剂抽滤的同时，也有脱气的效果
? 超声波
? 简单，但效果不理想。
? 通惰性气体（一般用氦气）
? 可保持连续脱气，多用于低压梯度
? 脱气机
高色效谱泵液相色谱系统
进样器
数据处理
检测器
色谱柱
高效液相色谱系统
SHIMADZU LCMS-2010EV
LC-MS/MS Thermo TSQ Quantum Access
分配色谱的分离机理
分配色谱概述
? 反相色谱的主要类型，基于分子的极性分离 ? 洗脱次序：一般为反相，即极性高的先被洗脱 ? 常用的流动相：