高效液相色谱法和薄层色谱法测定重楼中薯蓣皂苷元的含量
三峡库区栽培重楼属药用植物中薯蓣皂苷元含量测定
三峡库区栽培重楼属药用植物中薯蓣皂苷元含量测定目的建立高效液相色谱法测定重楼中薯蓣皂苷元含量，考察不同产地和不同品种重楼属药用植物中薯蓣皂苷元的含量。
方法采用岛津Inertsil ODS-C18色谱柱（150 mm×4.6 mm，5 ?m），以乙腈-水（92∶8）为流动相，流速1.0 mL/min，检测波长203 nm，柱温30 ℃。
结果不同产地、不同品种的重楼属药材中均含有薯蓣皂苷元，渝北区的长药隔重楼含量最高（6.813 7 mg/g），城口县的狭叶重楼含量次之（5.758 4 mg/g），最低的为石柱县的滇重楼（1.952 2 mg/g），表明不同栽培品种重楼药材化学品质差异较大，可能与产地、品种及栽培技术等因素有关。
结论非药典品种长药隔重楼、狭叶重楼含量超过中国药典收载品种，具有较大的药用价值。
Abstract：Objective To establish an HPLC method to determine the content of diosgenin in Paridis Rhizoma；To examine contents of diosgenin in different varieties of Paridis Rhizoma medicinal plants and from different habitats. Methods Shimadzu Inertsil ODS-C18 guard column （150 mm×4.6 mm，5?m）was used in HPLC system；elution conditions were the mobile phase using 92% acetonitrile and 8% water （isocraticelution）at a flow rate of 1.0 mL/min with 203 nm detection wavelength. The temperature of the column oven was maintained at 30 ℃. Results Different varieties of Paridis Rhizoma medicinal plants and Paridis Rhizoma medicinal plants from different habitats contained diosgenin. The Paris polyphylla var. pseudothibetica in Yubei district had the highest content （6.813 7 mg/g）；Paris polyphylla var. stenophylla in Chengkou County had the middle content （5.758 4 mg/g）；Paris yunnanensis Franch in Shizhu county showed the lowest content （1.952 2 mg/g）. The results showed that the obvious difference of chemical quality between various cultivated varieties of Paridis Rhizoma medicinal plants，which might be related with origin，variety and the cultivation technology，and so on. Conclusion The diosgenin contents of Paris polyphylla var. pseudothibetica and Paris polyphylla var. stenophylla were higher than that of varieties recorded in Chinese Pharmacopeia. Paris polyphylla var. pseudothibetica and Paris polyphylla var. stenophylla had important medical value.Key words：Paridis Rhizoma；diosgenin；HPLC；quality evaluation重楼主要活性成分为薯蓣皂苷和偏诺皂苷等类型，薯蓣皂苷通过水解可以得到薯蓣皂苷元[1-2]。
反相高效液相色谱法同时测定重楼药材中4种皂苷的含量
反相高效液相色谱法同时测定重楼药材中4种皂苷的含量【摘要】目的成立RP HPLC法测定重楼中4种甾体皂苷的含量。
方式采纳色谱柱：Zorbax eclipse XDB C8,（150 mm× mm，5 μm）；流动相：乙腈水（40∶60），流速 ml·min-1；检测波长：203 nm；柱温：40℃。
结果4种甾体皂苷范围在～μg线性良好，R= 6～ 9，回收率%～% 。
不同来源的重楼药材中4种甾体皂苷的含量不同较大。
结论该方式准确、简捷，为重楼药材的质量操纵提供了必然方式和依据。
【关键词】重楼；甾体皂苷；反相高效液相色谱法Abstract：ObjectiveA comprehensive analytical method based on high performance liquid chromatography-ultraviolet detection has been established for the simultaneous determination of four steroidal saponins in Paris column was Symmetry C8,mobile phase was acetonitrile-water (40∶60),UV detection was performed at calibration curves showed good linearity over the range of ～ g, R=～,the recoveries were %～% for the four steroidal saponins. The results showed that the contents of the four steroidal saponins in Paris polyphylla were different with different sources . ConclusionThe method issimple with good reproducibility and selectivity and high sensitivity ,which provides a method for quality control of Paris polyphylla.Key words：Paris polyphylla; Steroidal saponins; RP HPLC重楼Paris polyphylla来源于百合科（Liliaceae）重楼属植物的干燥根茎，又名蚤休、七叶一支花等。
高效液相色谱法测定金刚藤口服液中薯蓣皂苷元的含量
２．４ 测 定方 法
１．１ 仪 器 Ａｇｉｌｅｎｔｌ２６０ 型 Ｇｌ３ｌｌＢ—Ｇ １３ｌ４Ｆ 液 相 色 谱 仪 ；
ｗａｔｅｒｓｌ５２５．ｗａｔｅｒｓ２４８７型液 相色 谱仪 （美 国 ｗａｔｅｒｓ公 司）（配备 自动 进 样 器 、柱 温 箱 ； ＣＰ２２５Ｄ 型 电 子 分析 天平 （Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ 公 司）：
ｂｅ ｕｓｅｄ ｆｏｒ ａｎａｌｙｚｉｎｇ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆｄｉｏｓｇｅｎｉｎ ｉｎ Ｓｍ ｉｌａｘ ｏｒａｌ ｌｉｑｕｉｄ．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｓｍｉｌａｘ ｏｒａｌ ｌｉｑｕｉｄ： ｄｉｏｓｇｅｎｉｎ： ＨＰＬＣ
金刚 藤Ｉ ０】口服 液 具有 清热 解 毒 ，消肿 散 结 。用 于 ５ｆＣｅｂ炎 和附 件 炎 性 包 块 及 妇 科 多种 炎症 【４．…。本 品 中菝 葜 （Ｒｈｉｚｏｍａ Ｓｍｉｌａｃｉｓ Ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ）中文别 名 为金 刚 藤 、金 刚 剌 、马加 次 兜、 马加勒 等 。金 刚 藤为 百 合科 植物 菝 葜 Ｓｍｉｌａｘ ｃｈｉｎａ Ｌ．的根 茎 ，其 化学 成 分主 要 含 菝 葜 皂 苷 Ａ、 Ｂ、Ｃ（Ｓｍｉｌａｘ．ＳａｐｏｎｉｎＡ．Ｂ，Ｃ）， 薯 蓣 皂 苷 元
２００￣４。６ｍｍ ５蛐Ａ；ＳｙｍｍｅｔｒｙｓｈｉｅｌｄＣＩ８１５０￣３．９ｍｍ ５ ｐａｎ；流 动 相 为乙 睛一水（９０：ｌ０）：流 速 １ ０ｍＬ／ｎｌｉｎ：捡洲 波 长 ２／）５ ｎｍ： 牦温 ３５。Ｃ：进 样 量
反相高效液相色谱法测定穿龙骨刺片中薯蓣皂苷的含量
图 １ 薯 蓣 皂 苷 对 照 图
图 ２ 阴 性 对 照 图
图 ３ 穿 龙 骨 刺 片 样 品 图 为横坐标,峰面积积分 值 为 纵 坐 标 绘 制 标 准 曲 线,求 出 回 归 方 程,
������ ３３１ ������
反相高效液相色谱法测定穿龙骨刺片中薯蓣皂苷的含量
张少正 喻贵英 刘伟霞 聂必伦 洪 贇 罗 伟
【摘要】目的 建立反相高效液相色谱法测定穿龙骨刺片中薯蓣皂苷的含量.方法 采用安捷伦 C１８色谱柱(EclipseXDB－ C１８,２５０×４������６mm,５μm),乙腈－水(５０:５０)为 流 动 相;检 测 波 长 为 ２０３nm;柱 温 ３０℃. 结 果 薯 蓣 皂 苷 进 样 量 在 ０������４９４２３~ ７������９０７６４μg范围内,与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率为１００������９％,(RSD 为０������６％).结 论 此 法 用 于 测 定 穿 龙 骨 刺 片 中 薯 蓣 皂 苷 的 含 量 ,方 法 简 便 、专 属 性 高 ,结 果 准 确 可 靠 .
【关 键 词 】高 效 液 相 色 谱 ;穿 龙 骨 刺 片 ;薯 蓣 皂 苷
【中 图 分 类 号 】R２４９ 【文 献 标 识 码 】B 【文 章 编 号 】１００４－５５１１(２０１８)０－０３３１－０２
穿龙骨刺片具有补肾、健骨、活血、止痛的功效.主要用于 骨 质 增生,骨刺疼痛的治疗.该 产 品 收 载 于«中 国 药 典»２０１５ 年 版 一 部, 由穿山龙、淫羊藿、狗脊、川牛膝、熟地黄和枸杞子等６味 药 物 组 成. 穿山龙为方中主药,具有祛风除湿,活血通络的功效,临床用于治 疗 类风湿关节炎.而薯蓣皂苷为穿山龙药材的 主 要 指 标 成 份.在«中 国 药 典 »２０１５ 年 版 一 部 穿 龙 骨 刺 片 质 量 标 准 中 采 用 高 效 液 相 色 谱 法 测 定 穿 山 龙 的 水 解 产 物 薯 蓣 皂 苷 元 的 含 量 来 控 制 产 品 质 量 ,该 方 法 中需要使用甲醇、三 氯 甲 烷、乙 腈,且 用 量 较 大,样 品 前 处 理 时 间 较 长.为了减少有毒有 害 试 剂 的 使 用,缩 短 检 验 时 间,保 持 与 穿 山 龙 药材质量控制指标一 致,便 于 制 剂 的 质 量 控 制,尽 可 能 减 少 对 人 体 及 环 境 的 影 响 ,本 文 对 穿 龙 骨 刺 片 质 量 标 准 进 行 修 订 . １ 实 验 方 法 １������１ 仪 器 安 捷 伦 高 效 液 相 色 谱 仪 HP－１２６０(自 动 进 样 器 G１３２９B、紫外检测器 G１３１５D),KQ－５００DBB型数控超声波清洗仪 (昆 山 市 超 声 仪 器 有 限 公 司 ). １������２ 试药 穿龙骨 刺 片 样 品 由 桐 君 阁 药 厂 提 供,薯 蓣 皂 苷(批 号: １１１７０７－２０１４０２,含量以 ９６������２％ 计)由 中 国 药 品 生 物 制 品 检 定 所 提 供 . 乙 腈 为 色 谱 纯 ,水 为 二 次 纯 化 水 (一 级 纯 化 水 ),其 余 为 分 析 纯 . １������３ 色 谱 条 件 色 谱 柱 为 安 捷 伦 EclipseXDB－C１８２５０mm× ４������６mm ,５μm;流动相为 乙 腈:水(５０:５０);流 速:１������０ml/min ;柱 温: ３０℃;检测波长２０３nm ;进样体积:１０μl. １������４ 供试品溶液 制 备 取 适 量 样 品,研 细,取 样 品 ０������５g ,精 密 称 定,置具塞锥形瓶中,精 密 加 入 ７０％ 乙 醇 ２５mL,密 塞,称 定 重 量, 超 声(４０kHz ,５００W)处 理 ３０min,放 冷 ,再 称 定 重 量 ,用 ７０％ 乙 醇 补 足 减 失 的 重 量 ,摇 匀 ,滤 过 ,取 续 滤 液 ,即 得 . １������５ 对照品溶液制备 精密称取薯蓣皂苷对照 品 适 量,置 棕 色 容 量瓶中,加甲醇制成每 ml含０������２mg的溶液,即得. ２ 方 法 学 考 察 ２������１ 系统适应性试验 以十八烷基硅烷键合硅 胶 为 填 充 剂;以 乙 腈 － 水 (５０:５０) 为 流 动 相;流 速 为 １������０ml/min;检 测 波 长 为 ２０３nm;柱温:３０℃.采 用 安 捷 伦 C１８(EclipseXDB－C１８２５０mm ×４������６mm ,５μm )色谱柱测 定,结 果 理 论 板 数 按 薯 蓣 皂 苷 峰 计 算 均 不 低 于 ３８００. ２������２ 阴性对照实验 为进一步考察试验的合理 性,取 不 含 穿 山 龙 的阴性对照样品,依正 文 所 述 方 法 进 行 测 定. 结 果 阴 性 样 品 色 谱 在与薯蓣皂苷峰相应 的 保 留 时 间 附 近 无 干 扰 峰 检 出,从 而 证 明 本 方法是合理可行的.结果见下图. ２������３ 标 准 曲 线 制 备 精 密 称 取 薯 蓣 皂 苷 对 照 品 ２０������５５mg(按 ９６������２％计算含量),置 ２５ml棕 色 量 瓶 中,加 甲 醇 溶 解 并 稀 释 至 刻 度,摇 匀,作 为 贮 备 液. 精 密 量 取 贮 备 液 ５ml,置 １０ml量 瓶 中,加 甲醇稀释至刻度,摇匀;再精密量取上 述 稀 释 液 ５ml,置 １０ml量 瓶 中,加 甲 醇 稀 释 至 刻 度,摇 匀;依 次 操 作,分 别 制 成 浓 度 为 ７９０������７６４μg/ml、 ３９５������３８２μg/ml、 １９７������６９１μg/ml、 ９８������８４６μg/ml、 ４９������４２３μg/ml的对照品溶液,分别注入液相色谱仪,进样体积 １０μl. 以 进 样 量 (μg)
高效液相色谱法测定咳喘胶囊中薯蓣皂苷元的含量
中薯 蓣 皂 苷 元 与 相 邻 成 分 达 到 基 线 分 离 ， 阴性 对 且
照无 干扰。
２ ２ 对 照 品溶 液 的 制 备 ．
取 于 １５℃ 下 干 燥 至 恒 ０
重 的薯 蓣 皂 苷 元 约 ２ ， 密 称 定 ， 甲醇 制 成 每 ０ｍｇ精 加
１ｍＬ含 ２ ｍｇ的对 照 品溶 液 。
高 效 液 相 色 谱 法 测 定 咳 喘 胶 囊 中薯 蓣 皂 苷 元 的 含 量
周 钢 ，葛 斌 ２ 唐 ， 星
７００ ３ ９ ０；
（． １ 白银 市 第 二 人 民 医 院 制 剂 中心 ， 肃 白银 甘
２ 甘 肃 省 人 民 医 院 药 剂 科 ， 肃 兰 州 ７ ０ ０ ； ． 甘 ３ ０ ０ ３ 沈 阳 药科 大 学 药 剂 教 研 室 ， 宁 沈 阳 １ ０ ４ ） ． 辽 ０ ０ ５ 咳 喘 胶 囊 由 沈 阳药 科 大 学 药 剂 教 研 室 根 据 祖 传 秘 方 ： 黄 、 山 龙 、 朴 、 仁 、 辛 等 ５味 中 药 组 麻 穿 厚 杏 细 成 ， 穿 山龙 、 黄 等 经 醇 提 、 发 油 提 取 各 有 效 成 对 麻 挥 分 组 成 的 复 方 胶 囊 剂 ； 有 宣 肺 理 气 ， 咳平 喘 的功 具 止 穿 山 龙 乙 醇 提 取 干 燥 浸 膏 ３份 ， 别 加 入 ２ ｔｏ ・ 分 ｌ ｏ Ｌ～ ， ｏ ・ ～ ， ｏ・ 的盐 酸 于 １ ０℃ 水 浴 水 ４ ｔ ｌ Ｌ ６ ｔ ｌＬ ｏ ｏ ０ 解 ３ｈ 。结 果 ： ４ ｔｏ・ 盐 酸 水 解 的薯 蓣 皂 苷 元 以 ｌＬ ｏ 含量最 高。
效 。部 分 临 床 应 用 ， 效 确 切 。为 确 保 产 品 质 量 对 疗 咳 喘胶 囊 中有 效 成 分 之 一 的 薯 蓣 皂 苷 元 用 高 效 液 相
高效液相色谱法测定金刚藤浸膏中薯蓣皂苷元的含量
ｒ（ ｎ ｒ＝０ ９９ ， ｌ ．９ ３ ｎ
７ ， ｎ ｎａｅａｅｒｃｖｒ ９ ．８ ， Ｓ ） ａｄａ ｖｒ ｏｅｙｏ ９ ９ ％ Ｒ Ｄ％ ＝ ０ ７ ％ （ ＝ ５ ｅｅ ｂａ ｅ．Ｔ ｅｏｔ ｕ ｙｒｌ ｉａ ｄｅｔ ｃ ｖ ｏｄ ｇ ｅ ｆ ．６ ｎ ）ｗ ｒ ｏｔｉ ｄ ｈ ｐ ｍ ｈｄｏ ｔ ｒ ｔｅｃｎｉ ｎ ｉｍ ｙｃ ｎ ｘａ ｉ —
６ｍｎ× ５ ｌ ２０ｍｍ， ｍ） ｏ ｍ ａ ｓｄｗｔ ｅ ａｏ ａ ｔｅｍ ｂ ｅｐａｅ ｈ ｅ ｃｏ ａｅｅｇｈｗ ｓａ ２ ３ ｍ．Ａ ｘ ｒａ ５ｘ ｃｌ ｎ ｗ ｓｕｅ ｉ ｍ ｔ ｎｌ ｓ ｈ ｏｉ ｈｓ．Ｔ ｅｄｔ ｔ ｎ ｗｖｌｎｔ ａ ｔ ０ ｎ １ ｕ ｈ ｈ ｌ ｅｉ ｎｅｔｎｌ ｅ
ｓ ｎ ａ ｉ ｔ ｎｍ ｔｏ ａ ｓｄ ｈ ｒｅ ａｔ ｓ ｎｄｏｃ ｙｒｌ ｉ ａｄｅｔ ｃｉ ，ｈ ｏｃｎ ａｉ ｆａ ｏｏ（ ，ｔ ｏｔｎ ｏ ｔ ｄｒ ｚ ｉ ｅ ｄｗ ｓｕｅ ．Ｔ ｏ ｃ ｒ ｏ ｉ ｉ ｈｄｏ ｓ ｎ ｘ ａｔ ｎ ｔｅｃｎｅｔ ｔ ｎｏ ｃｈｌＡ） ｈ ｃｎｅｔ ｆ ａ ｄ ａｏ ｈ ｆ ｏ ｓｎ ｙｓ ｒ ｏ ｒ ｏ ｌ ｅ ａ ｏｏ（ ） ｚｍ ｌ ｉｔ ｅ Ｃ ｅｅｓ ｄｅ ｙ ｒ ｏｏ ｅｉ ．Ｒ ｓｌ ： ｅｌ ｅａｒ ｇ ｆ ４ ７～ ７ ． ｌ ｈｌＢ ， ｙ ｏ ｓ ｍ （ ）ｗ ｒ ｔ ｉ ｂ ｔ ｇｒ ｄ ｓ ｎ ｅｕ ｓ Ｔ ｎ ｒ ｎ ｅ ． １６ ５ ｃ ｙ ｓｉ ｕ ｄ ｏ ｈ ａ ｌ ｇ ｔ ｈ ｉ ａ ｏ１
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第 １ ４卷第 ２ 期
Ｖ０ ． ４ １１ Ｎｏ ２ ．
中
医
药
导
报
２０ ０ ８年 ２月
’ ｅ ｒａｙ ２ ０ Ｆ ｂｕ ｒ． ０ ８
HPLC法测定粉萆薢和绵萆薢中薯蓣皂苷元的含量
将上述制备好的浓度为 1. 20 5 mg / mL 的对照品溶液依次稀 释制 备 成 0. 120 5 mg / mL、0. 241 0 mg / mL、0. 482 0 mg / mL、 0. 723 0 mg / mL 和 0. 964 0 mg / mL，取上述溶液，分别按照上述
色谱条件进行测定，测得的结果见表 1。根据测定的结果绘制标 准曲线，以浓度（ C） 为横坐标（ X） ，峰面积值（ A） 为纵坐标（ Y） ， 得回归方程为 y = 4E + 06x + 55592，r = 0. 9997。结果表明： 薯蓣 皂苷元在 0. 120 5 ～ 1. 205 mg / mL 范围内线性关系良好。
已知样品 含量 / mg
0. 333525 0. 333525 0. 333525 0. 333525 0. 333525
表 2 加样回收率实验结果表
加入量 / mg 测得量 / mg 回收率 / %
0. 30125 0. 30125 0. 30125 0. 30125 0. 30125
0. 633045 0. 632199 0. 632517 0. 635253 0. 634748
JIN Shao － gang （ Department of Medicament，Anhui Chinese Medicine Hospital，Anhui Tongcheng 231400，China）
Abstract： A HPLC method was established to determine Diosgenin content in Dioscorea collettii and Dioscorea Septemloba Thunb to compare their content. The HPLC method was that column was Gemini C18 （ 250 mm × 4. 60 mm， 5 μm） ，mobile phase consisted of methanol∶water was 95∶5，flow rate was 1. 0 mL / min，and the detection wavelength was 210 nm. The results showed that linear range was 0. 120 5 ～ 1. 205 mg / mL，r = 0. 9997，average recovery was 99. 59% ，ＲSD = 0. 46% （ n = 10） ，average content in Dioscorea collettii was 0. 481 1 mg / mL，and average content in Dioscorea Septemloba Thunb was 0. 101 0 mg / mL. The method was simple，rapid，more reliable，and can be used to determine Diosgenin content in Dioscorea collettii and Dioscorea Septemloba Thunb. The content in Dioscorea collettii was higher than that in Dioscorea Septemloba Thunb.
高效液相色谱法测定怀山药中的薯蓣皂苷元
高效液相色谱法测定怀山药中的薯蓣皂苷元
张社利;许文静;张会菊;牛海波;杨泛明;范云场
【期刊名称】《理化检验-化学分册》
【年(卷),期】2013(049)001
【摘要】提出了高效液相色谱法测定怀山药中薯蓣皂苷元的含量.样品经无水乙醇提取,用ZORBAX SB-C18色谱柱分离,以甲醇-水(80+20)溶液为流动相淋洗,在波
长210 nm处进行测定.薯蓣皂苷元的质量在10～150 ng范围内与其峰面积呈线
性关系,检出限(3S/N)为2.5 ng.方法用于分析怀山药样品,回收率在94.2％～104％之间,测定值的相对标准偏差(n=6)为3.1％.
【总页数】3页(P33-34,38)
【作者】张社利;许文静;张会菊;牛海波;杨泛明;范云场
【作者单位】焦作师范高等专科学校生化系,焦作454000;焦作师范高等专科学校
生化系,焦作454000;河南理工大学物理与化学学院,焦作454003;河南理工大学物
理与化学学院,焦作454003;河南理工大学物理与化学学院,焦作454003;河南理工
大学物理与化学学院,焦作454003
【正文语种】中文
【中图分类】O652.63
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王勇;刘绣华
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1-丹参素钠 2-原儿茶醛1-D (+)-β-(3,4-dih yd roph en yl )-lactate s odium 2-protocatech uald eh yd e图1 丹参素钠的制备型RP -H PLC 色谱图及中心切割示意图Fig .1 Central incision of D (+)-β-(3,4-dihydroph -enyl )-lactate sodium by preparative RP -H PLC3.3 分析型RP-HPLC 条件转换至制备型RP-HPLC 条件:分析型HPLC 条件向制备型HPLC 转化时扩展因子SF =(r p )2×L p /(r a )2×L a =105(式中:p -制备型HPLC,a-分析型HPLC,r -色谱柱内径,L -色谱柱长度)。
选择小的容量因子有利于分离时间的缩短和出峰体积的缩小。
高的分离度与制备型HPLC 可能出现的过载相适应。
3.4 分离参数[5]:制备型HPLC 的效能取决于分离速度、产品纯度和上样量(制备量)。
为保证产品的最终纯度,采用的方法是选择与分析型HPLC 粒度相同的反相键合固定相、加快流动相的流速(45m L /min )和逐步加大上样量。
3.5 洗脱程序优化:将分析型的填料直接应用于制备型色谱,勿需对流动相作较大改动。
为了提高色谱的分离效率,扩大各组分的容量因子的差别,在分析型HPLC 优化条件的基础上,选择梯度分离条件。
一次分离可在30min 内完成,丹参素钠的纯度达98.3%。
3.6 色谱柱的超载和色谱峰中心切割:为提高制备HPLC 的分离能力,由分析型HPLC 的分离规模和扩展因子转化为制备型HPLC 分离时,逐步加大上样样品的浓度,使色谱柱浓度超载。
此时的分离为非线性色谱,采用“中心切割”技术(图1)进行收集,有效避免了丹参素钠色谱峰前后微量组分的污染。
3.7 本实验以丹参干燥根为原料,采用预处理、稳定化和HPLC 制备方法进行了丹参素钠的分离纯化研究,得出如下结论:利用亲脂性吸附树脂和制备型液相色谱组合分离技术,能较好地解决丹参素钠在分离过程物理性质不稳定问题,初步筛选出批量制备丹参素钠的工艺条件。
分离所得丹参素钠产品,经LC-M S,IR,UV ,HPLC 和熔点鉴定以及与对照品比较,纯度达到98%。
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方法 采用HPL C 法,选用O D S 柱,流动相:乙腈-水(90∶10),检测波长:203nm ,柱温:35℃;T LC 法选用硅胶G 板,展开剂:环已烷-乙酸乙酯(4∶1),测定波长:610nm,参比波长:420nm 。
结果 线性范围分别为1.2～7.2μg (r =0.9998),0.2～ 1.0μg (r =0.9957)。
平均回收率分别为102.2%,RSD = 3.39%(n =6);100.9%,R SD = 2.68%(n =6)。
结论 两种方法均可用于重楼中薯蓣皂苷元的质量控制。
关键词:重楼;薯蓣皂苷元;高效液相色谱;薄层色谱中图分类号:R286.02 文献标识码:B 文章编号:02532670(2002)12012703·127·中草药 Chinese T raditio nal a nd Herbal Drug s 第34卷第2期2003年2月 收稿日期:2002-04-28*现在贵州省、中国科学院天然产物化学重点实验室Determination of diosgenin in Rhizoma P aridis by HPLC and TLCLI Hui -fen 1,PIN G Yuan 1,CHEN Gang 1,LI Jun -yan 2,HE Jun1(1.Colleg e of Pha rmacy ,Tianjin U niv er sity o f M edical Sciences ,Tianjin 300070,China;2.Gua ng anmen Ho spital,C A T CM ,Beijing 100053,China )Abstract:Object To determine the contents of dio sg enin in Rhizoma Paridis by HPLC and TLC .Methods O DS column was used in HPLC with mo bile phase :acetonitrile -w ater (90∶10),detectio n w av e-leng th:203nm ,co lum n temperature :35℃;silica g el plate w as used in T LC w ith dev elo per :cy clohex-ane -ethyl aceta te (4∶1),scan w av eleng th :610nm ,reference w av eleng th :420nm .Results The linea r ra ng es of HPLC a nd TLC w ere 1.2—7.2μg (r =0.9998),0.2— 1.0μg (r =0.9957).The av erag e re-cov ery and RSD were 102.2%, 3.39%(n =6)and 100.9%, 2.68%(n =6)respectiv ely .Conclusion Both of tw o methods ca n be used fo r the quality control o f diosgenin in Rhizoma Paridis .Key words :Rhizoma Paridis ;diosgenin;HPLC ;TLC 重楼为百合科植物云南重楼Paris polyphylla Smith va r .yunnanensis (Fra nch .)Hand .-M azz .或七叶一枝花Paris polyphylla Smith v ar .chinensis (Franch.)Hara 的干燥根茎[1]。
其药用历史悠久,以蚤休之名始载于《神农本草经》,具有清热解毒、消肿止痛、凉肝定惊之功效[1]。
含有多种甾体皂苷元,其中薯蓣皂苷元的糖苷是重楼的主要活性成分。
现代药理研究发现,重楼活性成分具有抗肿瘤、消炎、抑菌、镇静、镇痛、止血等作用,广泛用于临床治疗癌症、子宫出血、慢性支气管炎和流行性腮腺炎[2]。
《中华人民共和国药典》2000年版一部中尚无含量测定方法。
本实验采用反相高效液相色谱法[3]和薄层色谱法[4]分别对重楼中薯蓣皂苷元进行测定,希望为该药材的质量控制提供定量方法。
1 仪器和材料Wa ters 515双泵型高效液相色谱仪,配有2847双通道紫外检测器,Millennium 32色谱管理系统;CS-930型双波长薄层扫描仪(日本岛津株式会社);硅胶G 薄层板(青岛海洋化工厂,110℃活化30min ),美国定量毛细管(0.5,1.0μL);微量注射器(Hamilto n Co .);BP 210S 电子天平(Sartorius 公司);薯蓣皂苷元对照品(中国药品生物制品检定所),重楼药材(天津市中药饮片厂,经天津中医学院第一附属医院尚英和药师鉴定为七叶一枝花);乙腈(色谱纯,天津市康科德科技有限公司);重蒸水,其他试剂均为分析纯。
2 方法和结果2.1 高效液相色谱条件:色谱柱:Prodig y O DS 柱(4.6m m ×250mm ,5μm);柱温:35℃;流动相:乙腈-水(90∶10);测定波长:203nm;流速: 1.0m L /min;进样量:20μL 。
2.2 薄层色谱与扫描条件:硅胶G 板(10cm ×10cm );上行展开;展距:10cm;展开剂:环己烷-乙酸乙酯(4∶1),预饱和20min ;显色剂:50%磷钼酸乙醇溶液,110℃烘烤5min 至蓝色清晰斑点出现;扫描方式:双波长锯齿扫描;狭缝宽度: 1.2mm ×1.2mm;线性参数:S X =3;λS =610nm,λR =420nm 。
2.3 样品溶液的制备:取已干燥的重楼样品适量,粉碎过50目筛,精密称取 1.000g 装滤纸包,置索氏提取器中,加入甲醇75m L 。