蛋白质分离技术-层析
蛋白质纯化与层析技术
蛋白质纯化与层析技术蛋白质纯化是生物化学和生物技术领域中至关重要的过程，用于从混合物中分离和纯化目标蛋白质。
层析技术作为蛋白质纯化的关键步骤之一，它不仅可以选择性地将目标蛋白质从混合物中分离出来，还可以去除杂质，获得高纯度的蛋白质样品。
一、蛋白质纯化的基本原理蛋白质纯化的基本原理是根据不同的理化性质，如分子量、极性、电荷等特征，选择合适的纯化方法分离目标蛋白质。
常见的蛋白质纯化方法包括离心、超滤、电泳、沉淀和层析等。
离心法是通过调整离心速度和时间，根据不同蛋白质的分子量和密度差异，将目标蛋白质和非目标蛋白质分层离心，进而实现纯化。
超滤法则是利用滤膜对溶液进行筛选分离，减少蛋白质和其他分子之间的尺寸和质量差异，从而实现蛋白质的纯化。
电泳法是根据蛋白质在电场中不同的电荷和分子量特性，使其在凝胶上移动的速度不同，从而实现纯化和分离。
沉淀法则是通过添加适当的沉淀剂，使蛋白质凝聚成颗粒，经过离心后分离出来。
而层析法是根据蛋白质与层析介质之间的相互作用，通过选择性吸附和洗脱，将目标蛋白质从混合物中纯化出来。
二、层析技术的分类与原理层析技术是在纯化过程中广泛使用的方法，根据不同的工作原理和介质特性，可以将其分为几种不同的类型。
常见的层析技术包括吸附层析、凝胶层析、亲和层析和离子交换层析等。
吸附层析是通过目标蛋白质与特定层析介质之间的亲和力，使目标蛋白质被吸附在介质上，从而实现纯化。
凝胶层析则是利用介质中多孔性凝胶矩阵的分子筛效应，根据蛋白质的分子量和形状特征，通过不同的渗透效应将目标蛋白质分离出来。
亲和层析是利用目标蛋白质与特定配体（如抗体）之间的特异性结合，使目标蛋白质选择性地与介质上的配体结合，从而实现纯化。
离子交换层析则是基于蛋白质表面的电荷特性，通过电荷间的相互作用，使目标蛋白质与介质表面的离子互相吸附和洗脱，实现纯化。
三、层析技术的操作步骤和优化层析技术的操作步骤通常包括前处理、样品加载、洗脱和再生等步骤。
蛋白质层析技术
蛋白质互作分析
利用蛋白质层析技术分析蛋白质之间的相互作用，揭示生命活动 的分子机制。
蛋白质复合物分离
通过蛋白质层析技术分离蛋白质复合物，研究其结构和功能，有 助于深入了解细胞内复杂的生物过程。
药物靶点筛选
在药物研发过程中，蛋白质层析技术用于筛选药物作用的靶点， 为新药研发提供有力支持。
THANKS FOR WATCHING
荧光法需要使用荧光标记物，操作相 对复杂，成本较高。
免疫学检测法
免疫学检测法利用抗原-抗体反应的特异性，通过抗体对目标蛋 白质进行识别和检测。常用的免疫学检测法包括酶联免疫吸附 试验（ELISA）、免疫印迹和免疫沉淀等。
免疫学检测法具有高灵敏度、高特异性的优点，适用于蛋白 质的定性分析和定量分析。但该方法需要制备特异性抗体， 操作相对复杂，成本较高。
蛋白质层析技术的分类
根据固定相的不同
可分为凝胶电泳、滤纸电泳、薄层电 泳等。
根据分离机制
可分为等电点沉淀法、离子交换法、 亲和层析法等。
蛋白质层析技术的应用
01
蛋白质组学研究
用于分离和纯化蛋白质，为蛋白质 组学研究提供基础。
临床诊断
用于检测和分离疾病相关蛋白质， 辅助疾病诊断和治疗。
03
02
生物药物研发
疾病标志物检测
肿瘤标志物检测
蛋白质层析技术用于检测肿瘤标志物，辅助肿瘤的诊断和预后评 估。
感染性疾病标志物检测
通过蛋白质层析技术检测感染性疾病标志物，有助于快速诊断和指 导治疗。
代谢性疾病标志物检测
蛋白质层析技术在代谢性疾病标志物检测中也有广泛应用，如糖尿 病、肥胖症等疾病的标志物检测。
蛋白质相互作用研究
缺点
根据分子大小分离蛋白质的方法
根据分子大小分离蛋白质的方法蛋白质是生命体中非常重要的分子，它们在细胞的结构和功能中起着关键作用。
为了研究蛋白质的特性和功能，科学家们经常需要对蛋白质进行分离和纯化。
分离蛋白质的一个重要方法是根据蛋白质的分子大小进行分离。
本文将介绍几种常用的根据分子大小分离蛋白质的方法。
一、凝胶过滤层析法凝胶过滤层析法是一种基于分子大小的常用分离技术。
其原理是利用孔径大小不同的凝胶材料，将大分子蛋白质滞留在凝胶中，而小分子溶质可以顺利通过凝胶。
常用的凝胶材料有琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶等。
根据需要选择不同的凝胶孔径，可以实现对不同分子大小的蛋白质进行分离。
二、聚丙烯酰胺凝胶电泳聚丙烯酰胺凝胶电泳是一种常用的蛋白质分离技术。
它利用电场作用将蛋白质分子按照大小进行分离。
在聚丙烯酰胺凝胶中，较大的蛋白质分子迁移速度较慢，而较小的蛋白质分子迁移速度较快。
通过调整电场强度和时间，可以实现对不同分子大小的蛋白质进行分离。
三、尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳是一种常用的变性凝胶电泳方法。
尿素是一种强变性剂，可以使蛋白质分子解离成单体，并且具有较好的可溶性。
在尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳中，蛋白质分子的迁移速度主要取决于它们的电荷和分子大小。
通过调整电场强度和时间，可以实现对不同分子大小的蛋白质进行分离。
四、尺寸排阻色谱尺寸排阻色谱是一种利用固定相孔径大小进行分离的色谱技术。
在尺寸排阻色谱中，较大的蛋白质分子无法进入固定相孔径，因此会以较快的速度从色谱柱中洗脱，而较小的蛋白质分子则会在固定相中发生多次扩散，从而保留更长的时间。
通过调整固定相的孔径，可以实现对不同分子大小的蛋白质进行分离。
五、离心过滤法离心过滤法是一种简便快速的蛋白质分离方法。
它利用离心力将大分子蛋白质沉淀在滤膜上，而小分子蛋白质则通过滤膜被洗脱出来。
通过选择不同孔径的滤膜，可以实现对不同分子大小的蛋白质进行分离。
根据分子大小分离蛋白质的方法有凝胶过滤层析法、聚丙烯酰胺凝胶电泳、尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳、尺寸排阻色谱和离心过滤法等。
分离纯化蛋白质的方法
分离纯化蛋白质的方法蛋白质是生命体内最基本的分子，它们参与了生命体内的许多重要生物学过程，如代谢、信号转导、免疫防御等。
因此，对蛋白质的研究具有重要的科学意义。
但是，蛋白质在生物体内的含量很少，且与其他成分相混合，因此需要通过分离纯化的方法来获取纯净的蛋白质样品。
本文将介绍几种常用的分离纯化蛋白质的方法。
1. 溶液层析法溶液层析法是一种常用的蛋白质分离纯化方法。
它基于蛋白质在不同的化学性质和结构特征下在固定相中的不同亲和力，通过不同的溶液组成、pH值、离子强度等条件来分离纯化蛋白质。
溶液层析法的操作简单、效果好，可以分离出高纯度的蛋白质。
但是，它需要对分离材料的性质和蛋白质的性质有深入的了解，以便选择合适的分离条件。
此外，溶液层析法需要大量的分离材料和实验室设备，成本较高。
2. 凝胶层析法凝胶层析法是一种基于蛋白质分子大小、形状和电荷等性质的分离纯化方法。
它利用凝胶作为分离材料，通过分子筛效应、凝胶孔道大小和分子电荷等因素来分离不同大小和电荷的蛋白质。
凝胶层析法具有操作简单、分离效果好、成本低等优点。
但是，它需要长时间的分离过程，而且凝胶的孔径大小和材料的性质会影响分离效果。
此外，凝胶层析法只能分离相对较小的蛋白质，对大分子蛋白质的分离效果较差。
3. 电泳法电泳法是一种通过电场作用将不同电荷的蛋白质分离的方法。
它利用电泳移动速度与蛋白质质量和电荷密度之间的关系，将蛋白质分离纯化。
电泳法具有操作简单、分离效果好、成本低等优点。
但是，它需要专业的电泳设备和实验技能，而且对蛋白质的性质和电泳条件有较高的要求。
此外，电泳法只能分离相对较小的蛋白质，对大分子蛋白质的分离效果较差。
4. 亲和层析法亲和层析法是一种基于蛋白质与其配体之间的亲和作用来分离纯化蛋白质的方法。
它利用配体与蛋白质的特异性结合来分离纯化目标蛋白质。
亲和层析法具有分离效果好、选择性高、可重复使用等优点。
但是，它需要高纯度的配体和专业的实验技能，而且对蛋白质的性质和配体的选择有较高的要求。
蛋白质层析法
蛋白质层析法是一种用于分离和纯化蛋白质的技术，它基于蛋白质在不同条件下在固定相和流动相中的分配系数不同来实现分离。
层析技术的基本原理是将混合物中的各组分根据其物理或化学性质（如分子大小、电荷、亲和性等）在不同相中的不同分布和迁移速率来实现分离。
以下是一些常见的蛋白质层析技术：
1. **凝胶过滤层析（Gel Filtration Chromatography）**：
- 也称为分子筛层析，利用凝胶的多孔结构将分子按大小分离。
小分子可以进入凝胶内部的孔隙，而大分子则被排阻在外部，因此迁移速度不同。
2. **离子交换层析（Ion Exchange Chromatography）**：
- 根据蛋白质的电荷性质（如阴离子或阳离子交换树脂）来分离蛋白质。
带正电的蛋白质可以与阴离子交换树脂结合，而带负电的蛋白质则与阳离子交换树脂结合。
3. **亲和层析（Affinity Chromatography）**：
- 利用蛋白质与特定配体（如金属离子、生物大分子等）的特定相互作用来分离蛋白质。
4. **反相层析（Reverse Phase Chromatography）**：
- 基于蛋白质在不同极性溶剂中的不同保留行为来实现分离。
通常使用非极性固定相（如C-18柱）和极性流动相。
5. **尺寸排阻层析（Size Exclusion Chromatography，SEC）**：
- 也称为凝胶渗透层析，分离蛋白质混合物中的不同分子量蛋白质。
6. **疏水作用层析（Hydrophobic Interaction Chromatography，HIC）**：
- 利用蛋白质与固定相之间的疏水作用来分离蛋白质。
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目
CONTENCT
录
• 层析技术简介 • 层析技术在蛋白质分离纯化中的应
用 • 层析技术原理 • 层析技术的应用实例 • 层析技术的优缺点及展望
01
层析技术简介
层析技术的定义
层析技术
是一种分离和纯化混合物中各组分的方法，基于各 组分在固定相和流动相之间的分配差异进行分离。
05
层析技术的优缺点及展望
层析技术的优点
分离效果好
层析技术能够根据分子间的吸附、分配等作用力 的差异，将混合物中的组分进行有效的分离，得 到高纯度的产物。
适用范围广
层析技术可以应用于不同性质的混合物分离，如 有机物、无机物、离子、蛋白质等，具有广泛的 适用范围。
分离过程可重复
层析技术是一种物理分离方法，不涉及化学反应 ，因此分离过程可以重复进行，适用于大规模分 离和制备。
凝胶过滤层析原理
原理概述
凝胶过滤层析是一种基于分子 大小差异的分离技术。通过不 同孔径的凝胶介质，不同大小 的分子会以不同的速度通过凝 胶，从而实现分离。
应用范围
凝胶过滤层析常用于蛋白质、 多糖等大分子物质的分离和纯 化。
技术特点
操作简便、分离效果好、分辨 率高。
离子交换层析原理
01 02
原理概述
1950年代
随着凝胶技术的发展，凝胶层 析、电泳等新型层析技术逐渐 兴起。
1970年代至今
层析技术不断改进和创新，应 用范围越来越广泛，成为生物 化学领域中重要的分离分析方 法。
层析技术的分类
根据固定相和流动相的物理状态
可分为液相层析和气相层析。液相层析又可分为液-固层析和液液层析，是生物分子分离纯化中最常用的技术。
蛋白质分离技术-层析
阴离子交换基
强碱性，聚苯乙烯树脂 弱碱性，二乙氨氨乙基纤维素
基质
电荷基团 反离子 商品名
纤维素 —O—CH2——COO- ·Na+
N 纤维素-O-（CH2）2- +H（C2H5）2 ·Cl-
CM-纤维素 DEAE-纤维素
聚苯乙烯—————SO3-· Na+
聚苯乙烯——N+（CH2）4 ·Cl-
732阳离子树 脂
止大分子物与配基 结合 载体的空间障碍
载体影响了配基的空 间，特别是小分子 配基。需加碳氢链 “手臂”，长度需 适中。
二、亲和层析分离过程
1、装柱和平衡 2、上样、亲和吸附 3、洗脱
无效洗脱
吸附效率不高
有效吸附
影响吸附的因素 1、缓冲液离子成份强度、pH、温度等都有影响。 2、流速尽可能慢，<10ml/cm2.小时 3、上柱样品用平衡层析柱缓冲液溶解，浓度约20mg蛋白/ml. 4、上样体积取决于亲和力，低则上样量减少，一般柱床体积的5％。
操作过程： 1.装柱； 2.离子交换； 3.洗脱
三、离子交换剂与缓冲 液的选择
（一）离子交换剂的选择
必须考虑的影响因素 1．阴、阳离子交换剂的选择 2．强、弱离子交换剂的选择 3．不同离子型交换剂的选择 4．不同基质离子交换剂的选择
阴、阳离子交换剂的选择
测定pI 确定稳定pH范围
碱性分子在偏酸性环境中稳定：细胞色素c 酸性分子在偏碱性环境中稳定：核酸、HCG
b．较强时：梯度洗脱，连续改变缓冲液浓度，使 洗脱能力逐渐加强
c、非常强时：强的酸、碱或加入脲、胍等变性剂 使蛋白质变性，而从配体上解离出来。然后再通过 适当的方法使待分离物质恢复活性。
（2）特异性洗脱法： 一种是选择与配体有亲和力的物质进行洗脱：
分离蛋白质的方法
分离蛋白质的方法蛋白质是细胞组成的重要成分之一，具有多种功能，包括结构支持、运输物质、催化反应等。
为了研究蛋白质的结构、功能和相互作用，科学家们需要将蛋白质从混合复杂的生物样本中分离出来。
下面将介绍几种常见的蛋白质分离方法。
1. 盐析法（salting out）：盐采用其离子效应使溶液中的蛋白质凝聚沉淀，从而实现分离。
在盐析过程中，可以根据蛋白质的溶解特性选择适当的盐，并调节溶液pH值和离子强度。
最常用的盐是硫酸铵，其通过降低溶液中的溶剂活性从而促使蛋白质沉淀。
盐析方法适用于大多数蛋白质，但对于疏水性蛋白质效果较好。
2. 柱层析法（chromatography）：柱层析是一种流动相（mobile phase）和固定相（stationary phase）相互作用的分离技术，主要通过蛋白质与固定相之间的亲和性差异实现分离。
具体而言，柱层析可以根据蛋白质的大小、电荷、亲和性等特性，选择适当的柱填料和流动相，使不同的蛋白质在柱中有选择性地吸附和洗脱。
常用的柱层析方法包括凝胶过滤层析、离子交换层析、亲和层析等。
3. 电泳法（electrophoresis）：电泳是利用蛋白质在电场中的迁移率差异进行分离的技术。
根据蛋白质的电荷、质量、形状等特性，可选择不同类型的电泳方法。
常见的电泳方法有凝胶电泳、等电聚焦、二维电泳等。
其中，凝胶电泳是最常见的方法之一，可以通过调节凝胶浓度和类型，从而实现按照分子大小分离蛋白质的目的。
4. 离心法（centrifugation）：离心是通过调节离心速度和时间，利用不同蛋白质的沉降系数差异来分离蛋白质的方法。
离心可分为不同类型，如差速离心、密度梯度离心等。
差速离心适用于分离不同大小和形状的蛋白质，而密度梯度离心常用于分离不同密度的蛋白质。
此外，还有一些其他的分离方法，如过滤、萃取、固相萃取等。
这些方法可以根据研究的具体需求和样本的特性进行选择和组合，以实现高效、纯度较高的蛋白质分离。
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8
吸附层析
常用的吸附剂
硅胶
氧化铝
碱性:碳氢化合物 中性:醛,酮,醌,酯,内酯 酸性:酸性色素,醛,酸
活性炭
粉末:吸附力大,流速慢 颗粒:吸附力中,流速易控 锦纶-活性炭:吸附力弱
聚酰胺
锦纶66或锦纶6 酰胺基团 对酚,DNP-氨基酸, 醌,羧 酸 氢键：羟基与羰基
磷酸钙
唯一用于生物活性物质 羟基磷灰石
二、亲和层析分离
1、装柱和平衡 2、上样、亲和吸附 3、洗脱
无效洗脱
吸附效率不高 实用文档
有效吸附 55
洗脱方法
（1）非特异性洗脱：改变
洗脱液pH值
离子强度
梯度洗脱
（2）特殊洗脱：当蛋白吸附紧密或上述方法洗脱 会引起失活，可用专一的化学方法裂解配基与载体 的连接键，再用透析或凝胶层析法去除配基。
组分在凝胶柱
中的迁移速度
不同得到分离。 小分子 被延滯
较快流出
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凝胶层析过程的数理关系
1、柱床体积(VT) 2、洗脱体积（Ve） 即欲分离物质通过层析柱洗脱下来所需洗脱
液的总体积。 3、外水体积（V0） 4、内水体积（Vi） 5、凝胶干体积（Vg）
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数理关系
外水体积V0
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固相化 再生
样品
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44
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45
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常见具有专一性亲和力的生物分子对：
酶：
基质类似物，抑制剂，辅酶
抗体：
抗原，病毒，细胞
细胞：
细胞表面特异蛋白，外源凝集素
核酸：
互补碱基序列，组蛋白，核酸聚合酶，
结合 蛋白
激素或药物：受体，载体蛋白
外源凝集素：多糖，糖蛋白，细胞表面受体，细胞
蛋白质分离技术-层析
上海交通大学医学院 倪培华 副教授
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1
一、概述
1、定义 层析(又名色谱)
一种利用混合 物中各组分的物理化 学性质间的差异，使 各组分在层析两相中 以不同程度分配，借 此将各组分分离。
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2
2、物理化学性质间的差异
分子极性 分子大小 分子形状 离子亲和力 分子亲和力 吸附能力
E0、L0：起始浓度
当L0》E0时
KL =[E0-EL][L0]/[EL]
[EL]=[E0-EL][L0]/ KL
Kd=结合酶/游离酶=[EL]/[E0-EL]=[L0]/ KL
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（三）固相化——将配体以共价键连接于固相基 质上制成固相化吸附剂
载体的排斥效应 载体的空间障碍
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每个溶质分子在流动相和固定相之间有一 个特定的分配系数（Kd）
Ve=Vo+KdVi
Ve -Vo — Kd = ———
Vi
特点： （1）与被分离物质分 子的大小和凝胶颗粒 孔隙的大小有关 （2）与柱的长短粗细 无关
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(1)Ve = Vo (2)Ve = Vo + Vi
Kd = 0
Kd = 1
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二、操作注意点：
1、装柱 ※先用蒸馏水赶走层析柱中的死体积； ※凝胶不能有气泡和分层现象； ※装柱结束后要保持凝胶表面平整。
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2、加样 ※使液面和凝胶表面相切，关闭出口； ※加样时尽量不要破坏凝胶面； ※让样品进入凝胶以后在加蒸馏水开始洗脱。
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三、结果要求：
血红蛋白和二硝基苯-鱼精蛋白的 洗脱体积？ 柱的外水体积和内水体积
Albumin
NaCl
Elution volume (ml)
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测分子量
Ve
log Mr
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实验： 凝胶层析法分离蛋白质
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一、原理：
血红蛋白
64,480
二硝基苯-鱼精蛋白
2,000-12,000
Sephadex G-50 孔径 1,500-30,000
Kd=0 Kd=1
纯化生物物质的纯度
取决于混合物中各组分K 值的差异 程度。
混合物中各组分若 K值相差较大, 则能较易地把混合物中的生物物质分 离。反之,K值相差较小,不易把混合物 中的生物物质分离。
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凝胶层析 Gel Chromatography
凝胶过滤 （gel filtration）(Porath, Flodin, 1959)
凝胶层析
离子交换层析 亲和层析
吸附层析
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3
3、层析的发展
➢ 1903年 俄国植物学家 茨维特 发表了有关填充以菊根粉的玻璃柱分离植物 色素，以石油醚冲洗，得到黄色、绿色区带;
➢ 1970s早期 高效液相色谱法（HPLC)
➢ 目前 气相层析仪和HPLC与色谱、质谱以及计算 机联用。
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4
层析法进行时有两个相，一个 相称为固定相，另一相称为流动相。
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亲和层析 Affinity
Chromatography
Ni Peihua
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39
一、原理
亲和层析是利用生物大分子所具有的专 一亲和力而设计的纯化技术。
寻找配基 使配基固定化 制成亲和层析柱
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40
基本过程 •固相化
+
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41
吸附
+
+
洗
脱
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42
解吸
+
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3.聚丙烯酰胺凝胶
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Pharmacia
Sephadex glucose
■ 各
Sepharose agarose Sephacryl glucose + acrylamide
种
Sephacel cellulose
层
析
胶 体
Bio-Rad
：
BioGel P acrylamide
BioGel A agarose
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9
（2）分配层析
——利用不同组分在流动相和固定相中的分配 系数不同而进行分离的方法。
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3.按制备量分类
柱层析 进样量大且容易回收
薄层层析 小量样品，快速， 操作简便
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11
■ 层析法的演变过程：
圆形滤纸
长条滤纸
加展开液
柱层析
薄层层析 (TLC)
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容量变大
容量更大
1.凝胶是一种不带电 荷的惰性载体，结 构稳定。
2. 操作条件较温和 。
3. 样 品 得 率 高 , 重 复 性好,可进行大量样 品的分离纯化。
四、凝胶层析的缺点 1.要求样品和洗脱液的
粘度很低。
2.凝胶颗粒网络孔径大 小非常有限,所以可 被纯化的物质的分子 量范围受到限制。
3.凝胶结构对某些溶质 分子具有吸附作用。
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（一） 载体的选择
1、载体要求： （1）不溶性 （2）渗透性：疏松网状结构，有良好的液
体流动性 （3）化学和机械性能稳定 （4）具备大量能被活化的基因 （5）抗微生物和酶的侵蚀
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2、常用载体
（1）纤维素 特点：价廉、来源充足
纤维性、非均一性限制大分子的掺入 非专一性吸附严重 用于抗体和酶的纯化
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纸层析
薄层层析
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13
三.层析的一般原理
1.分配系数 表示一种物质在两种特定相（流动相和固定 相）中分配程度。
溶质在固定相中的浓度 Cs
K= ———————————— = — — C⇋⇋m特 K大定：的被温溶的固度质移定：在动相常流速吸数动度附相较的中慢牢的。固浓，度随流动相
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在不同条件下，吸附剂 与被吸附物之间的作用
对不同物质的吸附力而 物理作用的范德华吸附：无
使混合物分离的方法。 选择性，吸附速度快，吸
附的过程是可逆的
化学吸附：由原子价力的作 用引起。有选择性，吸附 速度较慢，不易解吸
在单位时间内被吸附于吸附剂的某一表面积上的分子和 同一单位时间内离开此表面的分子之间可以建立动态平衡， 吸附层析就是不断地产生平衡与不平衡，吸附与解吸。
分子筛层析（molecular sieve chromatography）
(Hjertén, Mosbach, 1962)
排阻层析 （exclusion chromatography）
(Pedersen, 1962)
指混合物随流动相经固定相的层析柱时， 混合物中各组份按其分子大小不同而被分离 的技术。
（5）多孔玻璃 特点：不受微生物的侵蚀
耐酸、碱、有机溶剂 表面非专一性吸附
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（二）配基的选择 1、对于欲纯化的物质应有专一亲和力 2、必须具备能被修饰的功能基团
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以酶和底物为例K：L：解离常数
E：酶
KL
E+L
EL
L：底物 EL：复合物
KL =[E][L]/[EL]=[E0-EL][L0-EL]/[EL]
பைடு நூலகம்
G-75 3,000~70,000
G100 4,000
~150,000
G150 5,000
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吸水性 G类的型号 表示每克干凝胶吸
水量（ml）x10 如G-50
每克干凝胶吸 水量为5ml。
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2.琼脂糖凝胶（商品名为Sepharose)
大孔凝胶 工作范围的下限几乎是 Sephadex的上限 可分离MW40万以上的物质 可用来分离核酸及病毒。