Microlab STAR IVD ELISA全自动酶免仪常见故障排除
全自动生化分析仪常见异常结果及原因分析
全自动生化分析仪常见异常结果及原因分析反应曲线波动、跳动1．几乎所有反应曲线跳动l 电源接地不良：主电源接地不良、光电盒接地不良l 反应盘进水：真空泵压力密封圈磨损、真空泵电源接触不良、管接头处漏气、管路漏气、吸废液钢管堵塞、单向阀坏、比色杯破裂l 搅拌杆不搅拌：搅拌电机坏、搅拌电机线接触不良、搅拌杆顶住比色杯底l 光路歪：灯泡装歪、比色杯装歪、温控锅装歪、透镜装歪l 试剂加入异常：试剂针堵塞、试剂注射器脱落、试剂针接头处脱落、快速接头脱落l 一次性比色杯不干净l 阳光直射反应光电系统l 外界干扰因素：如发动机，电钻等2．只有个别波长反应曲线跳动l 电源接地不良：主电源接地不良、光电盒接地不良3．只有个别项目反应曲线跳动l 试剂异常：试剂变混浊、变色或试剂放错位置试剂经搅拌后起较多气泡，挡住光路反应曲线异常1．几乎所有反应曲线形状正确，反应曲线平稳，但基本无反应l 样本未加入：样本针堵塞、样本注射器脱落、样本针接头处脱落、快速接头脱落2．个别项目反应曲线形状正确，反应曲线平稳，但基本无反应l 第二试剂未加入：第二试剂放错位置3．个别项目反应曲线形状改变，但反应曲线平稳l 试剂加入异常：试剂盘固定销钉脱落、试剂注射器漏气。
4．个别项目反应曲线形状改变，剧烈上升或下降，反应曲线或平稳，或小幅波动l 试剂异常：试剂性能差或失效，最易发生在ALP、GGT、AMY等项目上5．个别测试反应曲线形状改变，剧烈上升或下降，但反应曲线平稳l 试剂间交叉污染：最易发生在TG、TC、Glu和Bun等项目上l 样本异常：样本中含有某些药物或干扰成分，最易发生在TB、DB等项目上反应曲线正常，结果重复性差1．几乎所有项目重复性差l 样本加入异常：样本针半堵塞、样本注射器中有气泡、样本针接头处密封不严、样本针内壁阀关闭不严l 试剂加入异常：试剂针半堵塞、试剂注射器中有气泡、试剂针接头处密封不严、试剂针内壁阀关闭不严l 搅拌异常：搅拌电机坏、搅拌电机线接触不良、搅拌杆顶住比色杯底l 试剂/样本内外壁清洗不够，交叉污染大：液泵压力下降、第二级过滤器堵塞l 反应盘温度不稳定：反应盘温度波动较大2．个别项目重复性差l 试剂放错位置l 试剂异常：试剂性能差或失效，最易发生在ALP、GGT、AMY等项目上l 项目参数设置异常：样本量少、反应时间短、反应方法设置错误l 定标异常：定标液浓度设置错误、定标液失效反应曲线正常，结果为零或很低1．几乎所有项目结果为零或很低l 样本加入异常：样本针堵塞、样本注射器中有气泡、样本针接头处密封不严、样本针内壁阀关闭不严l 搅拌异常：搅拌电机坏、搅拌电机线接触不良、搅拌杆顶住比色杯底2．个别项目结果为零或很低l 试剂空白测试异常l 试剂放错位置：特别是第二试剂放错位置l 试剂失效或变色：最易发生在ALP、GGT、AMY等项目上l 试剂量少3．个别项目测试结果为负数l 试剂空白测试异常l 试剂失效或变色。
酶联免疫吸附测定（ELISA）常见问题及步骤
酶联免疫吸附测定（ELISA）常见问题及步骤酶联免疫吸附测定（ELISA）的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。
结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性，酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。
实验步骤1.标准品的稀释：按表1在小试管中进行标准品的稀释。
2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50µl，待测样品孔中先加样品稀释液40µl，然后再加待测样品1 0µl（样品最终稀释度为5倍）。
加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30 倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此重复 5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂50µl，空白孔除外。
7.温育：操作同3。
8.洗涤：操作同5。
9.显色：每孔先加入显色剂A50µl，再加入显色剂B50µl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15 分钟.10.终止：每孔加终止液50µl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（O D值）。
测定应在加终止液后15分钟以内进行。
12.计算：以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD 值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD 值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。
BDNF的ELISA结果显示为毫微克/毫克组织（ng / mg）或皮克/mL上清液（pg / mL），并表示为平均值±SEM。
常见问题一、白板现象：显色结束后，酶标板所有孔均无颜色，阳性对照不显色。
ELISA 出现的问题及解决方法
ELISA试剂盒可能出现的问题及解决方法问题及现象原因解决办法1整块板最终反应未产生颜色或整体吸光度值偏低1.室温过低或试剂未回至室温。
2.试剂失效。
3.试剂过失效日期。
4.试剂开启时间过长，污染。
5.移液器吸量不足，移液抽吸排放太快，吸头内壁挂液太多或者内壁不清洁。
6.反应时间不足。
7.洗涤时冲击力太大，洗涤液浸泡时间太长，洗涤次数增加。
1.控制室温并确保试剂回至室温。
2.与我公司联系。
3.更换新批号的试剂盒。
4.试剂开启后尽快用完。
5.校正移液器，吸头要配套，每次装吸头要吻合紧密。
移液不宜过快，排放应完全。
吸头内壁要清洁，最好一次性使用。
6.准确计时。
7.减少洗涤冲击力，按说明书要求浸泡时间，准确记住洗涤次数8.蒸馏水水质有问题。
9.样品添加了防腐剂，抑制了酶的反应8.测定蒸馏水配剂对酶联免疫的影响9.样品中不能添加防腐剂2整行或整列板孔最终反应产生颜色深，无梯度10.手工洗板时相对应的吸头与移液器接触不严，导致未吸上洗涤用水或吸上的水量不够。
11.洗板机洗板时相对应的管路阻塞，导致未注入洗涤用水或水量不够。
10.洗板前检查吸头是否接牢固，是否高矮一致并且在一条直线上。
如果在安装吸头时感觉不易安装牢固请不要使用。
曾发现过有的国内厂商的吸头不直，不易安装牢固，请不要使用，避免造成实验失败。
11.检查管路是否阻塞，出水不畅并疏通，检查注水量是否充分。
3标准曲线不成良好的S型，请与盒中的质检报告曲12.加完酶标记物之后的手工洗板步骤失败。
洗涤用水被板孔中游离的酶标记物污染。
12.注意加洗涤水的移液器吸头尖必须置于微孔板上方约1厘米处打出洗涤水，绝对避免注入板孔中的液体接触到或溅到移液器管尖上而将板孔线对比13.加完酶标记物之后的洗板机洗板步骤失败。
洗涤次数不够及注水量不够。
14.洗板后未立即进行下一步操作，中间间隔过长。
15.当板孔中含有两种以上的试剂时未能充分混均。
中游离的酶标记物带回到洗涤用水中。
Microlab FAME全自动酶免分析仪常见故障分析及预防论文
Microlab FAME全自动酶免分析仪常见故障分析及预防【中图分类号】r443.8 【文献标识码】a 【文章编号】1004-7484（2012）10-0399-02microlab fame全自动酶免分析仪目前广泛应用于对大批量血液标本的全自动快速检测。
该仪器可按照elisa试剂盒说明书设计最适合的参数，从孵育、洗板、分配试剂、终止，一整套过程全部自动化完成，使分析结果更准确、可靠，有利于血液检测过程标准化实施。
笔者参照文献报道和实际工作经验，就fame常见故障及处理做一简单总结如下：1 在进板时发生实验中断，可能由于以下几种情况：1.1 板条码号与所选实验子掩码不一致。
处理及预防：检查板条码号或所选试验程序是否相符，重新进板。
1.2 微板或进板架与主传输架发生碰撞引起卡板。
处理及预防：及时纠正酶标板或进板架被卡的位置，检查主传输架处于无阻碍位置，重新进板。
1.3 酶标板板条不完整或酶标仪透视镜表面不洁净可引起试验中断。
处理及预防：补足微板板条，清洁酶标仪透视镜。
2 在实验过程中发生实验中断，可能由于以下几种情况：2.1 在孵育过程发生实验中断。
因洗液、试剂不足需重新装载，或洗板异常而使洗板头反复“解锁”，导致前一酶标板处理时间过长，进而影响后一块酶标板的正常处理时间，提示酶标板“孵育时间超限”，造成该板实验中断。
处理及预防：(1)适当延长酶标板孵育的宽容度到6%～8%[1]；(2)及时补充洗液、试剂；(3)找到洗板异常原因并纠正。
2.2 洗板时发生实验中断，可能由于以下几种情况：2.2.1 洗液未装载或洗液量不足。
洗液桶容量约为3500ml，当标本量大进板批次较多时，会因洗液量不足而中断实验。
处理及预防：进板后应对仪器进行巡视，在洗板间隙补充洗液，及时装载。
2.2.2吸液针堵塞。
多是由于标本处理不当、抗凝不理想等原因,使微板板孔内有极小的血凝块或在孵育后产生的纤维蛋白小凝块等,均可堵塞吸液针,引起实验中断。
microlab_fame全自动酶免分析仪常见故障分析处理及预防
临床输血与检验
２１ ０ ０年 ４月第 １ ２卷 第 ２ 期 板表 面 ， 理方 法可 参 考 ３２ １ 处 ．．。
・１ ９・ ６
重 新 释 放 加样 信 息 。 ３ 洗 板 时 ， ＡＭＥ 仪 器 出 现 “ 板 ” 象 ， 往 是 由 于 以下 Ｆ 吐 现 往
３ Ｈ ａｌｔ ｎ Ａ Ｅ ， ｒ ｚ ｌｓ ｏ ｅ Ｐｅ ｅ ＥＡ ．Ｂｌ ｏｄ ｙｐ ａ ｄ ｈｅ ｉｋ ｏ ｔ ｅ ｎ ｔ ｒｓ ｏｆ
参
考 文 献
的 遗 传 信 息 ， 疾 病 的 易 感 性 存 在 ～ 定 关 联 。国 内外 研 究 与 表 明 不 同 血 型 者 消 化性 溃 疡 的发 病 率 存在 差 异 。本 文 调查
器 的精密度较高 ， 模块零件较复杂， 在频繁使用过程中容易
出 现 各 种 故 障 。若 处 理 不 当 ， 会 造 成 “ 板 ” 影 响实 验 则 吐 而 的 连 续 性 和 准 确 性 。 因此 ， 解 和 熟悉 Ｍ ｉ ｏａ ＡＭＥ 常 了 ｃ ｌｂＦ ｒ 见 故 障 的 解 决 和 预 防 ， 于 一 线 检 验 人 员 显 得 尤 为 重 要 对
桶 ， 可 彻底 清 洁洗 液桶 和桶 内 的管 道 和 滤 膜 ， 持 每 日实 也 坚
验 完 毕 后 进 行 日维 护 ， 清 洁 洗 液 桶 ， 到 洗 液 “ 并 做 当天 配 制 当 天 使 用 ” 。 ３ ３ 洗 板 机 头 后 电路 板 和 插 槽 感 应 异 常 。 在 洗 板 时 “ ． 吐
消 化 性 溃 疡 患 者 Ａ Ｏ 血 型 抗 原 分 布特 征 ： 者 组 Ａ Ｏ 血 Ｂ 患 Ｂ
Microlab Fame故障
Microlab F.A.M.E全自动酶免处理系统常见故障及排除方法Microlab F.A.M.E全自动酶免处理系统是瑞士HAMILTON 公司生产的一套完全自动化的酶标处理系统，它可以执行ELISA试验中所有必需的处理步骤，同时该仪器也是一套开放系统，可同时处理各个厂商的不同ELISA试验项目，具有操作灵活简便、处理能力大以及日常维护方便等特点。
我站分别于2003年4月和2004年8月购进了两套F.A.M.E全自动酶免处理系统，经过一年多的使用，仪器总体状况良好，故障率相对较低，但在日常使用过程中也遇到了一些常见故障，并积累了一些故障处理的经验，现将我科一年多使用该仪器遇到的常见故障及排除方法总结如下：1、主传输架出现的故障仪器在使用过程中，有时会出现主传输架传输微板不能到位的情况，造成这种故障的原因是主传输架丢步造成的，出现的频率不是很高，而且很随机。
发生此类故障时，计算机会有相应的提示，由于F.A.M.E 是模块化设计，虽然出现主传输架的故障，但并不影响其他模块的正常运行。
处理方法：工作人员应首先按照计算机的提示将主传输架人工移至相应的位置，在移动的过程中要注意动作要快，要准确。
然后将主传输架锁定后再解锁，使主传输架重新初始化，即可正常。
2、洗板模块出现的问题2.1洗板头堵头造成洗板头堵头的原因有以下几种：1）血样处理的不好，血清或血浆中的纤维蛋白没有完全析出，造成在洗板时纤维蛋白凝块将洗板头的吸液针堵塞。
处理方法：用仪器自带的工具将堵在吸液针处的血浆蛋白挑出即可，但要根本解决此类问题，还是要在实验开始前处理好血样。
2）实验用的微孔板中含有碎的塑料块，造成在洗板时塑料块将洗板头的吸液针堵塞。
处理方法：用仪器自带的工具将堵在吸液针处的塑料块挑出即可，并且在每次实验开始之前，将实验用微板倒扣轻拍几下，即可彻底解决此类问题。
3）还有一个造成洗板头的吸液针或注液针堵塞的重要原因就是每次在仪器使用完毕后，没有进行正常的日维护程序，从而造成在第二天工作时，残留在吸液针中的洗液形成的结晶将洗板头的吸液针或注液针堵塞。
自动免疫分析仪纤维杯故障分析
自动免疫分析仪纤维杯故障分析
自动免疫分析仪纤维杯故障分析：
一、故障现象
纤维杯在AxSYM自动免疫分析仪中用作反应载体，若不能正常进入转盘，则仪器所有运行的项目自动终止，造成严重的试剂浪费和硬件损伤。
这里举例说明的频繁、不定时的纤维杯故障，其故障代码为5019，按
照说明书提示的解决方法未能排除。
硬件工程师根据经验认为是纤维
杯转盘与"V"形滚轮不匹配，但更换该部件后同一故障仍然时有发生。
二、故障原因
1、脱落的不干胶塑料条带在活门夹板内的位置由于活动板的运动而漂
移不定，当所处位置狭窄时可引起活动板的运动阻力增加，诱导仪器
的自动保护程序启动，提示活门错误。
2、塑料条带如果漂移至纤维杯侦察器（由发射灯和光敏元件组成）内，使光敏元件接受不到来自发射灯的光束。
系统会误认为纤维杯已经存
在于活动板上，不再驱动往返梭加载纤维杯到转盘。
因此，虽然往返
梭和纤维杯转盘并无异常，而仪器自诊断程序仍然提示其错误，误导
对真正问题部件的检查。
三、故障分析
与纤维杯加载有关的部件包括往返梭、弹射器、活门及纤维杯转盘。
在每次故障后进入自诊断程序的纤维杯子菜单，查看有“Error”标记
的故障部件，往返梭和纤维杯转盘被标记的几率较高，其次为活门。
认真检查往返梭和纤维杯转盘，未发现异常。
活门是一个三层夹板结
构的密封套件，中间一层是由马达控制的可水平开关的活动板，是将纤维杯载入转盘的控制器。
打开该套件，发现原来紧贴于活动板的不干胶塑料编号条带脱落，不干胶仍然有部分粘性。
去除该条带，对活动板进行清洁、润滑，上述故障可以解除。
论文：全自动生化分析仪的维护保养及故障排除
论文：全自动生化分析仪的维护保养及故障排除论文：全自动生化分析仪的维护保养及故障排除全自动生化分析仪是科技进步的时代产物，它具有操作简单、检验速度快、结果准确等优点，目前在大部分医疗单位的实验室得到了广泛运用。
它的特点是把取样、加试剂、混匀、恒温反应、比色测定、数据处理以及清洗加样针、比色杯等步骤全部进行自动化操作的仪器，它代替了原来手工操作过程。
虽然它具有精确度高、重复性好、速度快等优点，但在使用过程中，每一个检验工作者还是要有扎实的理论基础和实践经验，熟练的操作技能，严格执行操作规程，这样才能使自动化仪器发挥最大效能。
绝对不能认为全自动就是将标本和试剂放入仪器，输入各种信息，点一下“开始”，就只需要等结果出来，打印报告单即可。
如果是这样，那就会误导临床医生做出错误的`临床分析和诊断结果，从而延误病情。
因为再好的仪器，也只有在正规的操作下，随时随地监控仪器的工作状态，及时处理在使用过程中随时都可能出现的影响检验结果的问题，使仪器始终处在良好的工作状态，这样才能确保检验结果的准确性，才能真正的服务于临床。
我院于2008年购进一台OLYMPUSAU640全自动生化分析仪，现将近五年来仪器操作的一些个人体会介绍如下。
1 对仪器要定期进行维护和保养，才能保证仪器运转正常1·1 每日维护每天开机前，检查电源是否连接完好，稳压器是否正常，仪器冰箱是否工作，去离子水机是否正常，样品针洗液，B洗液是否注满，分配器及洗液蠕动泵是否漏液。
检查样品针、试剂针和搅拌棒是否堵塞。
方法如下：在【Maintenance】【ANL Maintenance】菜单下，选择“F/Cleanin g Wash wells冲洗管道”，再按急诊台白色开关，观察清洗液会从各管道喷射出来，水柱如果成直线即为正常，反之则表示针孔堵塞需要处理，一般用清洁纱布蘸取无水乙醇擦拭，或将堵塞针取下冲洗。
1·2 每周维护①清洗样品针、试剂针，从【Maintenance】【ANL Maintenance】菜单下选中要清洗的探针，样品针A/ReplaceS Probe & Syringe和试剂针B/Replace R1 Probe & Syringe,C/Replace R2 Probe & Syringe，按急诊台白色开关，液体从探针排出。
全自动酶免疫分析仪的故障及处理
［ ］ Ｓ ｕ ｄｉ Ｐ ｅｉＭ ， ｅ ｚ ，ｌ １Ｈｉｈｐｅａ ｎ ｅ ６ ｑ ａ ｒ ｏＧ，ｒｖ ｉ Ｌ ｎ ｉ ｅ ａ． ｇ ｒｖｌ ｃ ｔ ｔ Ｍ ｅ
５ ｍ ６２ ６ ．
者 同 时 检 出 ＡＭＡ， ＫＭ 和 ＡＳ Ｌ ＭＡ。高 滴 度 的 ＡＮＡ， ＭＡ， ＡＳ ＡＭＡ 和 Ｌ ＫＭ 通 常 被认 为 是 自身 免疫 性肝 脏疾 病 的标 志性抗 体 。 ５ 高滴度 抗体 这 例 的产生 可能 是 病 毒感 染 过 程 中的 自身 免疫 反应 所 导 致 的 ， 可 能是 ＨＣ 患者 同时合并 有 自身 免疫 亦 Ｖ 性 肝病 ， 确切 机理 有待 于进一 步研究 。但一 般认 其 为 ， 数 自身 抗 体在 低滴 度 时 ， 自身 免疫 反 应或 多 是 疾 病 的标 志 ， 直接 影 响免 疫 系统 功 能 ， 高滴 度 不 在 时才与 自身免疫 性疾 病密 切相关 。 于丙型肝 炎患 对
ｎ ｎ ｐｃ ｉ ｅｅ ｔ ［ ］ Ｒ ｃｎ Ｐ ｏ ｄ ２ ０ ， ２ ｏ ｓｅｉｃ ｖ ｎｓ Ｊ ． ｅｅｔ ｒｇ Ｍｅ ， ０ １ ９ ： ｆ
１ ７ １ ２． Ｏ— １
物 ， 干扰 素 抗 病毒 治疗 可诱 导或 增 强 自身免 疫 ， 但 若 存在 高滴度 自身抗 体 时 ， 干扰素治疗 就会 使病 用 情恶化， 而激 素 类可 治疗 自身 免疫 性 疾病 ， 但使 病 毒 复 制增 强 ， 因此 有 ＨＣ 感染 及有 自身免 疫 现象 Ｖ 特别是存 在较 高滴 度 自身抗体 的患者 ， 如何选 择治 疗 方案 成为关 键 问题 。临床 医师在 对 ＨＣ 感 染患 Ｖ 者进行 治疗 过程 中 ， 进行 自身 抗体 的检 测 以及 滴度
ｆｃｅ ｔ ｅａｉｓＣｖｒｓ Ｊ． ｌｏ ，０４ １３（） ｅｔｄｗｉ ｈ ｐｔ ｉ ｉ ［］Ｂ ｏｄ ２ ０ ，０ ３ ｈ ｔ ｕ
酶免疫检测技术及试剂盒操作中常见问题和解决办法
• 3. 设计实验
标记好标本的位置。通常，每块板设阴、阳性对照 各二孔，空白对照一孔。
• 4. 加样品、加酶结合物
样品应全部加于反应孔底部，避免液滴悬挂在孔壁 上。加样量应准确。加下一个标本时应换吸嘴。 酶结合物一般使用滴瓶滴加，滴加时瓶身应垂直， 加液速度适中，使液滴大小均匀一致。在一步法试剂中， 一般先加样品后加酶，不可颠倒顺序。一般空白对照孔 只允许加入底物和终止液，而不能加入其他物质，尤其 是酶结合物。
• 2、双抗原夹心法
例：HBsAb
竞争法
• 例：HBcAb、HBeAb
测HBcAb
测HBeAb
间接法
例：HDV-IgG/IgM, HEV-IgG/IgM, HGV-IgG/IgM
测IgG
测IgM
捕获法测IgM
• 例：HAV-IgM，TORCH系列IgM
HAV-IgM
TORCH系列IgM
实验操作要求及注意事项
酶免疫检测技术及试剂盒操作 中常见问题和解决办法
酶免疫技术的分类
均相法 双抗体夹心法（测抗原） 直接法 酶免疫 分析法 （EIA） 非均相法 （ELISA） 竞争法 测抗体 捕获法（测IgM型抗体） （夹心法） 双抗原夹心法（测抗体） 测抗原 间接法 测抗体 测抗原
夹心法
• 1、双抗体夹心法
例：HBsAg、HBeAg、AFP、IV 型胶原、HDAg
现象
(一)显色 淡、灵敏 度低
可能原因
纠正方法
（二） 重复性差
（三）满 板白，阳 性对照不 显色。
8．蒸馏水被污染。 换用合格的蒸馏水或去离子水。 9．洗涤液配制不当，稀释倍 准确稀释浓缩洗涤液。 数大于 1：20 倍。 10．试剂盒在运输途中时间太 夏天长途运输时，应注意降温 措 长，受高温影响。 施，并尽量缩短运输时间。 11．试剂盒超过有效期。 过期试剂不要使用。 1．样品数量较多，加样时间 过长。 重复测定标本时，尽可能使用同一 2．加样量不一致。 移液器，装紧吸嘴，条件、人员应 3．保温时间不一致。 尽量与上次保持一致，以排除这些 因素造成的重复性差的可能性。 4．洗涤条件不一致。 5．操作人员不同。 1．把终止液误当作酶结合物、 或底物使用。 严格按试剂说明书操作，加液时看 2．漏加试剂，如酶结合物、 准标签，正确稀释洗涤液,不要漏 底物 A、B 液 加试剂。 3.丙肝试剂酶临时稀释时忘记 加入酶。