实验用培养基适用性检查标准操作规程
培养基配制、适用性检查标准操作程序
目的：制定培养基配制、培养基适用性检查的标准操作程序。
范围：适用于微生物实验室培养基的配制和适用性检查。
责任者：微生物检验员所用器具、仪器、材料、菌种器具、仪器：高压蒸汽灭菌锅、高温灭菌柜、隔水恒温培养箱、生化培养箱、双人净化操作台、单人净化操作台、干燥箱、恒温水浴锅、电子天平、500ml三角瓶、移液管、培养皿、试管、接种环、酒精灯材料：标准干燥培养基（购于生物研究所）、待验证培养基菌种：大肠杆菌CMCC（B）44102、金黄色葡萄球菌CMCC（B）26003、枯草芽孢杆菌CMCC （B）63501、白色念球菌CMCC （F）10231沙门氏菌CMCC （B）500941. 培养基的配制1.1 准备工作1.1.1 选择适宜容量的容器配制试剂，配制培养基的容器应为玻璃容器，以避免接触金属离子，如吸管、试管、三角瓶和平皿等，应按《玻璃容器清洗规程》洗涤、干燥、灭菌。
1.1.2 配制用水培养基配制用水应为纯化水，纯化水应临用新配。
1.2 配制1.2.1 记录所用脱水培养基的品名、批号、生产日期、生产厂家及配制处方。
1.2.2 用分度值为0.01的电子天平准确按处方量进行称量并装入三角瓶内。
1.2.3 用量筒按照培养基处方配比加入纯化水。
1.2.4 用硅胶橡皮塞塞上瓶口，轻轻振摇使充分混匀。
1.2.5 培养基在配置后必须进行PH值的测定，以确保符合药典要求和生产厂家的规定，一般情况下，PH值不能超过规制值±0.2。
1.2.6 用牛皮纸包扎瓶口，贴上标签，注明品名、批号、配置日期、配置人、有效期。
1.3 灭菌将上述已配制的培养基放入高压蒸汽灭菌锅按培养基灭菌条件进行灭菌（每次配制的培养基应在2小时内进行有效灭菌，否则极易染菌。
若未能在2小时内进行有效灭菌，则倒掉重新配制）。
若没有具体要求，一般灭菌温度（压力）为121℃（0.1MPa），灭菌时间为20分钟。
灭菌完成后，待高压灭菌锅温度、压强自然下降为“0”值，方可取出灭菌好的培养基（不可未降温时拿出，否则培养基内外会形成负压，易染菌）。
培养基适用性检查标准操作规程
培养基适⽤性检查标准操作规程培养基适⽤性标准操作规程1⽬的规范培养基适应性检查的标准操作。
2范围本规程适⽤于《中华⼈民共和国药典》2010年版⼆部规定微⽣物限度检查中成品培养基、由脱⽔培养基或按处⽅配制的培养基均应进⾏培养基适⽤性检査。
3责任3.1本规程由质量保证中⼼主任指定⼈员起草。
3.2与本⽂件相关的部门负责⼈参与审阅，企业质量负责⼈批准本⽂件。
3.3质量控制中⼼负责具体实施本规程。
4内容4.1依据4.1.1《药品⽣产质量管理规范》（2010年修订）4.1.2《中华⼈民共和国药典》2010年版⼆部4.2试验⽤菌株及培养基4.3试验⽤仪器设备4.3.1恒温培养箱（30～35℃）、霉菌培养箱（23～28℃）、蒸汽压⼒灭菌器、净化⼯作台、电热⼲燥箱、恒温⽔浴锅、振荡器、电冰箱、天平4.3.2锥形瓶、培养⽫（9cm）、量筒、试管及塞、吸管（1ml分度，10ml分度）4.3.3接种环、⼄醇灯、⼄醇棉球或碘伏棉球、⽕柴、记号笔、灭菌镊⼦、不锈钢药匙、⽩瓷盘。
4.4操作步骤4.4.1菌液的制备接种⼤肠埃希菌、⾦黄⾊葡萄球菌、枯草芽孢杆菌的新鲜培养物⾄营养⾁汤培养基中，于30～35℃培养18～24h。
取30～35℃培养18～24h的⼤肠埃希菌、⾦黄⾊葡萄球菌、枯草芽孢杆菌营养⾁汤新鲜培养物1ml，⽤%⽆菌氯化钠溶液10倍递增稀释制成每1ml 含菌数50～100cfu的菌悬液，备⽤。
接种⽩⾊念珠菌的新鲜培养物⾄改良马丁培养基上，于23～28℃培养24～48h。
取于23～28℃培养24～48h的⽩⾊念珠菌新鲜培养物1ml，⽤%⽆菌氯化钠溶液10倍递增稀释每1ml含菌数50～100cfu的菌悬液备⽤。
接种⿊曲霉菌的新鲜培养物⾄改良马丁琼脂斜⾯培养基上，于23～28℃培养5～7天，加⼊3～%（ml/ml)聚⼭梨酸酯80的%⽆菌氯化钠溶液，将孢⼦洗脱，然后，⽤适宜的⽅法吸出孢⼦悬液⾄⽆菌试管内，⽤含%（ml/ml)聚⼭梨酸酯80的%⽆菌氯化钠溶液10倍递增稀释制成每1ml含孢⼦数50～100cfu的孢⼦悬液备⽤。
无菌检查用培养基的适用性检查标准操作规程
无菌检查用培养基的适用性检查标准操作规程目的：建立无菌检查用培养基适用性检查标准操作规程。
范围：适用于无菌检查使用培养基的适用性检查。
依据：中国药典》2015年版《药品生产质量管理规范》2010年修订《中国药品检验标准操作规程》2010年版责任：QC化验员对实施本规程负责。
内容:1、概要：无菌检查用的硫乙醇酸盐流体培养基和胰酪大豆胨液体培养基等应符合培养基的无菌检查及灵敏度检查要求。
本检查可在供试品的检查前或与供试品的检查同时进行。
2、材料及设备2.1 生化培养箱2.2 生物安全柜2.3 中国浊度标准管（由中国药品生物制品检定所提供）2.4 灭菌试管、灭菌注射器2.5 0.9%无菌氯化钠溶液2.6 0.05%(ml/ml)聚山梨酯80的pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液或0.9%无菌氯化钠溶液：取聚山梨酯80 0.05ml，加pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液或0.9%氯化钠至100ml，混匀，灭菌即可。
3、无菌检查培养基的适用性检查3.1无菌性检查取新鲜配制灭菌的培养基各5瓶，硫乙醇酸盐流体培养基置30～35℃，胰酪大豆胨液体培养基置20～25℃，培养14天，应无菌生长。
3.2灵敏度检查3.2.1菌种培养基灵敏度检查所用的菌株传代次数不得超过5代（从菌种保存中心获得的干燥菌种为第0代），并采用适宜的菌种保藏技术进行保存，以保证试验菌株的生物学特性。
金黄色葡萄球菌[Staphylococcus aureus CMCC(B) 26003]铜绿假单胞菌[Pseudomonas aeruginosa CMCC(B) 10104]枯草芽孢杆菌[Bacillus subtilis CMCC(B) 63501]生孢梭菌[Clostridium sporogenes CMCC(B) 64941]白色念珠菌[Candida albicans CMCC(F) 98001]黑曲霉[Aspergillus niger CMCC(F) 98003]3.2.2菌液制备3.2.2.1 金黄色葡萄球菌菌悬液制备3.2.2.1.1 取金黄色葡萄球菌的新鲜培养物至胰酪大豆胨液体或胰酪大豆胨琼脂培养基上，30～35℃培养18～24小时，取新鲜传代菌种一支待用。
培养基灵敏度及适用性检查操作规程
培养基灵敏度及适⽤性检查操作规程1. ⽬的：通过培养基适⽤性检查，确保购买的培养基符合实验要求。
2. 范围：本规程适⽤于技术质量部实验员对培养基适⽤性的检查。
3. 职责：质量部实验员负责执⾏此规程。
4. 内容：4.1 检验依据：《中华⼈民共和国药典》2015版4.2 试验⽤具：烧杯、三⾓瓶、酒精灯、接种环、平⽫、试管、吸管、移液枪、滴管、电⼦天平、电热恒温培养箱、⽣化培养箱或恒温恒湿培养箱、单⼈净化⼯作台、⾼压蒸汽灭菌器、微⽣物限度仪、漩涡混合器、试验菌种、检查⽤培养基等。
4.3 ⽆菌培养基适⽤性检查：本检查可在供试品的⽆菌检查前或与供试品的⽆菌检查同时进⾏。
4.3.1 培养基：硫⼄醇酸盐流体培养基、胰酪⼤⾖胨液体培养基或胰酪⼤⾖胨琼脂培养基（培养基的配制按《培养基配制操作规程》配制）。
4.3.2 稀释液、冲洗液及其制备⽅法稀释液、冲洗液配制后应采⽤验证合格的灭菌程序灭菌。
a) 0.1%⽆菌蛋⽩胨⽔溶液取蛋⽩胨1.0g，加⽔1000ml，微温溶解，滤清，调节pH值⾄7.1±0.2，分装，灭菌。
b) pH7.0⽆菌氯化钠-蛋⽩胨缓冲液取磷酸⼆氢钾3.56g，⽆⽔磷酸氢⼆钠5.77g，氯化钠4.30g，蛋⽩胨1.00g，加⽔1000ml，微温溶解，滤清，分装，灭菌。
c) 根据供试品的特性，可选⽤其他经验证过的适宜的溶液作为稀释液、冲洗液（如0.9%⽆菌氯化钠溶液）。
如需要，可在上述稀释液或冲洗液的灭菌前或灭菌后加⼊表⾯活性剂或中和剂等。
4.3.3 ⽆菌性检查：每批培养基随机取不少于5⽀（瓶），置各培养基规定的温度培养14天，应⽆菌⽣长。
4.3.4 灵敏度检查4.3.4.1 菌种培养基灵敏度检查所⽤的菌株传代次数不得超过5代（从菌种保存中⼼获得的⼲燥菌种为第0 代），并采⽤适宜的菌种保藏技术进⾏保存，以保证试验菌株的⽣物学特性。
⾦黄⾊葡萄球菌（Staphylococcus aureus ）〔CMCC（B）26 003〕铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa ）〔CMCC（B）10 104〕枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）〔CMCC（B）63 501〕⽣孢梭菌（Clostridium sporogenes）〔CMCC（B）64 941〕⽩⾊念珠菌（Candida albicans）〔CMCC（F）98 001〕⿊曲霉（Aspergillus niger）〔CMCC（F）98 003〕4.3.4.2 菌液制备a) 接种⾦黄⾊葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌的新鲜培养物⾄胰酪⼤⾖胨液体培养基中或胰酪⼤⾖胨琼脂培养基上，接种⽣孢梭菌的新鲜培养物⾄硫⼄醇酸盐流体培养基中，30～35℃培养18～24⼩时；b) 接种⽩⾊念珠菌的新鲜培养物⾄沙⽒葡萄糖液体培养基中或沙⽒葡萄糖琼脂培养基上，20～25℃培养24～48⼩时，上述培养物⽤pH7.0⽆菌氯化钠-蛋⽩胨缓冲液或0.9%⽆菌氯化钠溶液制成每1ml含菌数⼩于100cfu（菌落形成单位）的菌悬液。
培养基使用操作规程
培养基使用操作规程培养基使用操作规程一、实验目的培养基是进行细菌、真菌、细胞等生物体的培养和研究的重要工具，合理、正确地使用培养基是保证实验结果准确可靠的基础。
本操作规程的目的是规范培养基的使用，提高实验操作的效率和质量。
二、实验准备1. 准备所需的培养基和辅助设备，包括培养皿、试管、平板、移液器、蒸汽灭菌器等。
2. 检查培养基的颜色、透明度和保存情况，如有异常，应及时更换。
3. 检查辅助设备的清洁及消毒状态，确保无杂质和污染。
4. 执行无菌操作，包括洗手消毒、穿戴无菌手套等。
三、实验操作步骤1. 取出所需的培养基，检查其批号和有效期，如过期或批号异常，应立即更换。
2. 打开培养基瓶盖，注意不要将瓶盖放在工作台上，以防培养基被污染。
3. 使用移液器或注射器等无菌工具，将培养基均匀地移液到培养皿、试管或平板中，避免气泡的产生。
4. 关闭培养基瓶盖，以免污染其他培养基。
5. 将已加入培养基的培养皿、试管或平板进行标记，包括标注样品信息、培养基类型和培养日期等。
6. 将标记好的培养皿、试管或平板进行分类放置，如需高温、低温或其他特殊条件下培养，应放置在相应的设备中。
7. 操作完成后，清洁工作台，将未使用的培养基存放在适当的条件下，防止曝光、高温或低温等因素影响其质量。
四、实验安全措施1. 操作时要穿戴好无菌手套，以免细菌和其他微生物污染培养基。
2. 注意培养基的防护，避免被培养基溅到眼睛或其他敏感部位。
3. 注意实验室的清洁和消毒，保持操作环境的无菌状态。
4. 注意对培养基的正确处理和保存，避免因保存不当而导致培养基的污染或变质。
五、实验记录在培养基使用过程中，应做好详细、准确的实验记录，包括培养基的批号和有效期、使用日期、实验操作的细节、实验结果等。
记录应保存在指定的实验记录本中，并及时整理和归档，以备后续参考和查阅。
六、实验结果分析对培养基使用过程中出现的异常和特殊结果，应及时进行分析和解释。
如对培养结果的质量和效果有问题，应排除可能的技术和非技术原因，确保实验的准确性和可靠性。
培养基适用性验证方案
培养基适用性验证方案培养基适用性验证是指在培养基的研发过程中，通过实验验证培养基的适用性和质量。
这一过程对于生物学、医学等领域研究以及工业生产来说非常重要。
本文将介绍一个基本的培养基适用性验证方案，以确保培养基的质量和有效性。
一、实验目的1.验证培养基中各种成分的适用性和稳定性；2.测试培养基对细胞或微生物的生长和增殖的支持程度；3.评估培养基对细胞或微生物的表型和基因表达的影响；4.了解培养基的理化指标，如pH值、渗透压等。
二、实验步骤1.准备培养基和试样：根据所研究的生物体或微生物的需要，准备相应的培养基，包括成分和浓度。
同时，准备不同的试样，如细胞或微生物的悬浮液或分离物等，用于验证培养基的适用性。
2.测定培养基理化指标：测定培养基的理化指标，如pH值、渗透压、离子浓度等，确保其在范围内。
3.测定培养基对细胞或微生物的生长和增殖的支持程度：将细胞或微生物接种于培养基中，通过监测生物体的生长曲线、增殖速率等参数来评估培养基对其的支持程度。
可以使用细胞计数仪、显微镜等工具进行观察和计数。
4.评估培养基对细胞或微生物的表型和基因表达的影响：通过观察生物体的形态、结构、活力等方面，了解培养基对其表型的影响。
同时，可以通过转录组分析、蛋白质组分析等手段，评估培养基对基因表达的影响。
5.验证培养基的稳定性：将培养基保存一段时间后，再次进行生物体的培养和生长实验，以验证培养基的稳定性和持久性。
6.数据分析和结果呈现：对实验结果进行统计分析，包括均值、标准差等指标，通过图表、表格等形式呈现实验结果。
三、实验注意事项1.实验室条件要符合要求，包括洁净无菌、合适的温度和湿度等；2.培养基的配制要精确，注意称量和混合时间；3.使用无菌技术和条件进行细胞或微生物的接种和培养；4.实验过程中要使用适当的控制组和重复实验，以确保实验结果的可靠性和准确性；5.实验过程中要严格按照操作规程和实验流程进行，避免误操作和实验结果的偏差。
实验用培养基适用性检查标准操作规程讲述
起草人Prepared by:起草日期Date: _____________________ QC审核人Reviewed by:审核日期Date: _____________________ QC审核人Reviewed by:审核日期Date: QA批准人Approved by:批准日期Date:质量部QD目的Purpose为保障微生物检验的准确性及相关工作特制定本规定。
范围Scope本程序适用于微生物限度测定培养基的适用性检查及相关工作。
职责Responsibility分析员：严格按照本操作规程执行。
及时完成各类相关记录。
在主管的指导下进行任何可能的OOS及偏差调查。
主管：监督本操作规程的执行。
对检验员进行必要的培训。
指导任何可能的OOS和偏差调查。
内容procedure1检验员应根据培养基配制程序或培养基各自的说明书配制培养基。
2试验用菌种及培养基2.1菌种:2.1.1培养基灵敏度测试所用的菌株传代次数不得超过5代，从国家药检所或菌种保藏中心购买。
2.1.2枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)[ATCC 6633]2.1.3大肠埃希菌(Escherichia coli) [ATCC 8739]2.1.4金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus) [ATCC 6538]2.1.5白色念珠菌(Candida albicans) [ATCC 10231]2.1.6黑曲霉(Aspergillus niger)[ATCC 16404]2.1.7伤寒沙门菌(Salmonella) [ATCC 14028]2.1.8铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa) [ATCC 9027]2.2培养基2.2.1按照培养基说明书进行配制灭菌。
2.2.2大豆酪蛋白消化肉汤Soybean-Casein Digest Broth2.2.3大豆酪蛋白消化琼脂Soybean-Casein Digest Agar2.2.4沙氏葡萄糖琼脂Sabouraud Dextrose Agar2.2.5肠道菌增菌肉汤Enterobacteria Enrichment Broth Mossel2.2.6紫红色胆汁葡萄糖琼脂Violet Red Bile Glucose Agar2.2.7麦康凯肉汤MacConkey Broth2.2.8麦康凯琼脂MacConkey Agar2.2.9RV沙门氏菌富集肉汤Rappaport Vassiliadis Salmonella Enrichment Broth2.2.10木糖赖氨酸脱氧胆盐琼脂Xylose Lysine Deoxycholate Agar2.2.11甘露醇氯化钠琼脂培养基Mannitol Salt Agar2.3微生物计数培养基的适用性检查2.3.1微生物计数用的成品培养基、由脱水培养基或按处方配制的培养基均应进行培养基适用性检查。
培养基灵敏度及适用性检查操作规程
1. 目的：通过培养基适用性检查，确保购买的培养基符合实验要求。
2. 范围：本规程适用于技术质量部实验员对培养基适用性的检查。
3. 职责：质量部实验员负责执行此规程。
4. 内容：4.1 检验依据：《中华人民共和国药典》2015版4.2 试验用具：烧杯、三角瓶、酒精灯、接种环、平皿、试管、吸管、移液枪、滴管、电子天平、电热恒温培养箱、生化培养箱或恒温恒湿培养箱、单人净化工作台、高压蒸汽灭菌器、微生物限度仪、漩涡混合器、试验菌种、检查用培养基等。
4.3 无菌培养基适用性检查：本检查可在供试品的无菌检查前或与供试品的无菌检查同时进行。
4.3.1 培养基：硫乙醇酸盐流体培养基、胰酪大豆胨液体培养基或胰酪大豆胨琼脂培养基（培养基的配制按《培养基配制操作规程》配制）。
4.3.2 稀释液、冲洗液及其制备方法稀释液、冲洗液配制后应采用验证合格的灭菌程序灭菌。
a) 0.1%无菌蛋白胨水溶液取蛋白胨1.0g，加水1000ml，微温溶解，滤清，调节pH值至7.1±0.2，分装，灭菌。
b) pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液取磷酸二氢钾3.56g，无水磷酸氢二钠5.77g，氯化钠4.30g，蛋白胨1.00g，加水1000ml，微温溶解，滤清，分装，灭菌。
c) 根据供试品的特性，可选用其他经验证过的适宜的溶液作为稀释液、冲洗液（如0.9%无菌氯化钠溶液）。
如需要，可在上述稀释液或冲洗液的灭菌前或灭菌后加入表面活性剂或中和剂等。
4.3.3 无菌性检查：每批培养基随机取不少于5支（瓶），置各培养基规定的温度培养14天，应无菌生长。
4.3.4 灵敏度检查4.3.4.1 菌种培养基灵敏度检查所用的菌株传代次数不得超过5代（从菌种保存中心获得的干燥菌种为第0 代），并采用适宜的菌种保藏技术进行保存，以保证试验菌株的生物学特性。
金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus ）〔CMCC（B）26 003〕铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa ）〔CMCC（B）10 104〕枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）〔CMCC（B）63 501〕生孢梭菌（Clostridium sporogenes）〔CMCC（B）64 941〕白色念珠菌（Candida albicans）〔CMCC（F）98 001〕黑曲霉（Aspergillus niger）〔CMCC（F）98 003〕4.3.4.2 菌液制备a) 接种金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌的新鲜培养物至胰酪大豆胨液体培养基中或胰酪大豆胨琼脂培养基上，接种生孢梭菌的新鲜培养物至硫乙醇酸盐流体培养基中，30～35℃培养18～24小时；b) 接种白色念珠菌的新鲜培养物至沙氏葡萄糖液体培养基中或沙氏葡萄糖琼脂培养基上，20～25℃培养24～48小时，上述培养物用pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液或0.9%无菌氯化钠溶液制成每1ml含菌数小于100cfu（菌落形成单位）的菌悬液。
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目的Purpose
为保障微生物检验的准确性及相关工作特制定本规定。
范围Scope
本程序适用于微生物限度测定培养基的适用性检查及相关工作。
职责Responsibility
分析员：严格按照本操作规程执行。
及时完成各类相关记录。
在主管的指导下进行任何可能的OOS及偏差调查。
主管：监督本操作规程的执行。
对检验员进行必要的培训。
指导任何可能的OOS和偏差调查。
内容procedure
1检验员应根据培养基配制程序或培养基各自的说明书配制培养基。
2试验用菌种及培养基
2.1菌种:
2.1.1培养基灵敏度测试所用的菌株传代次数不得超过5代，从国家药检所或菌种保藏中心购买。
2.1.2枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)[ATCC 6633]
2.1.3大肠埃希菌(Escherichia coli) [ATCC 8739]
2.1.4金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus) [ATCC 6538]
2.1.5白色念珠菌(Candida albicans) [ATCC 10231]
2.1.6黑曲霉(Aspergillus niger)[ATCC 16404]
2.1.7伤寒沙门菌(Salmonella) [ATCC 14028]
2.1.8铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa) [ATCC 9027]
2.2培养基
2.2.1按照培养基说明书进行配制灭菌。
2.2.2大豆酪蛋白消化肉汤Soybean-Casein Digest Broth
2.2.3大豆酪蛋白消化琼脂Soybean-Casein Digest Agar
2.2.4沙氏葡萄糖琼脂Sabouraud Dextrose Agar
2.2.5肠道菌增菌肉汤Enterobacteria Enrichment Broth Mossel
2.2.6紫红色胆汁葡萄糖琼脂Violet Red Bile Glucose Agar
2.2.7麦康凯肉汤MacConkey Broth
2.2.8麦康凯琼脂MacConkey Agar
2.2.9RV沙门氏菌富集肉汤Rappaport Vassiliadis Salmonella Enrichment Broth
2.2.10木糖赖氨酸脱氧胆盐琼脂Xylose Lysine Deoxycholate Agar
2.2.11甘露醇氯化钠琼脂培养基Mannitol Salt Agar
2.3微生物计数培养基的适用性检查
2.3.1微生物计数用的成品培养基、由脱水培养基或按处方配制的培养基均应进行培养基适用性检查。
2.3.2菌悬液的制备
2.3.3上述培养物用0.9%无菌氯化钠溶液或pH7.2磷酸盐缓冲液制成每1ml含菌数不大于100cfu的菌悬
液，制备黑曲霉孢子悬浮液时，添加3-5ml含0.05%（ml/ml）聚山梨酯80的0.9%无菌氯化钠溶液
或pH7.2磷酸盐缓冲液，将孢子洗脱。
然后，用适宜方法吸出孢子悬液至无菌试管内，用含0.05%
（ml/ml）聚山梨酯80的0.9%菌氯化钠溶液或pH7.2磷酸盐缓冲液制成每1ml含孢子数不大于100cfu
的孢子悬液。
菌悬液在室温下放置应在2小时内使用，若保存在2～8℃可在24小时内使用。
黑曲
霉孢子悬液可保存在2-8℃，在验证过的贮存期内使用。
2.4大豆酪蛋白消化肉汤促生长试验
2.4.1取以上前3种菌悬液各0.1ml(不大于100cfu)，分别注入灭过菌的含有10ml大豆酪蛋白消化肉汤的
试管中，于30℃-35℃培养不超过3天。
同时用相应的上一批通过促生长试验的培养基替代被检培
养基进行上述试验。
培养结束后进行观察，如果肉眼能清晰看到的微生物的生长与上一批通过促生
长试验的培养基的生长情形基本一致，则判定此培养基通过促生长试验。
反之则判定此培养基不符
合规定，未通过促生长试验。
2.5大豆酪蛋白消化琼脂和沙氏葡萄糖琼脂促生长试验
2.5.1取以上5种菌悬液各1ml（不大于于100cfu），分别注入无菌平皿中，立即倾注大豆酪蛋白消化琼
脂，每株试验菌平行制备2个平皿，混匀、凝固，置30℃-35℃培养不超过3天，计数，后2种菌
悬液不超过5天，计数。
再取后2种菌悬液各少于100cfu，分别注入无菌平皿中，立即倾注沙氏葡
萄糖琼脂，每株试验菌平行制备2个平皿，混匀、凝固，置20℃-25℃培养不超过5天，计数。
同
时用相应的上一批通过促生长试验的培养基替代被检培养基进行上述试验。
进行促生长试验的培养
基平皿上，微生物生长情况必须与已通过促生长试验的培养基平皿上的微生物生长情况一致或者更
好，同时将待测定的培养基上的菌落数与已通过促生长试验的培养基上的菌落数对比，两者之间的
比值应处于70%-200%之间,则判定此培养基通过促生长试验；反之则判定该培养基不符合规定，未
通过促生长试验。
2.6控制菌测试所用培养基的适用性检查
2.6.1控制菌检查用的成品培养基、由脱水培养基或按处方配制的培养基均应进行培养基适用性检查。
2.6.2菌悬液的制备
2.6.3上述培养物用0.9%无菌氯化钠溶液或pH7.2磷酸盐缓冲液制成适宜浓度的菌悬液。
菌悬液在室温下
放置应在2小时内使用，若保存在2～8℃可在24小时内使用。
2.6.4控制菌检查用培养基的适用性检查项目包括培养基的促生长能力、抑制能力及指示能力的检查。
各
培养基的检查测试项目及所用菌株见下表
2.7液体培养基促生长能力检查
取试验菌各0.1ml（含菌数不大于100cfu）（见上表）于被检培养基和上一批检验并通过的培养基中，在相
应控制菌检查规定的培养温度及最短培养时间下培养。
两者比较，被检培养基与上一批检验并通过的培养
基比较，微生物生长良好并且相当。
2.8固体培养基促生长能力检查
取试验菌各0.1ml（含菌数不大于100cfu）（见上表）分别涂布于被检培养基和上一批检验并通过的培养基
中，在相应控制菌检查规定的培养温度及最短培养时间下培养。
两者比较，被检培养基与上一批检验并通
过的培养基比较，微生物生长良好并且相当。
2.9液体培养基和固体培养基的抑制能力检查
取试验菌各0.1ml（含菌数不小于100cfu）（见上表）于被检培养基中，在相应控制菌检查规定的培养温度
及最长时间下培养，试验菌应不得生长。
2.10培养基指示能力检查
取试验菌各0.1ml（含菌数不大于100cfu）（见上表）分别涂布于被检培养基和上一批检验并通过的培养基
中，在相应控制菌检查规定的培养温度及时间范围内培养。
被检培养基中生长的菌落在外观和指示反应上
与从此前已检测并批准的培养基批次所获得的菌落是相当的。
3参考文件
Current USP、BP、EP
附件及相关文件Attachment and related documents
R01 微生物计数固体培养基适用性检查记录
R02 微生物计数液体培养基适用性检查记录
R03 微生物控制菌培养基适用性检查记录
历史History
附件编号Attachment No.:R01 微生物计数固体培养基适用性检查记录
Growth promotion test of solid media for Microbial enumeration test
附件编号Attachment No.:R02
微生物计数液体培养基适用性检查记录
Growth promotion test of liquid media for Microbial enumeration test
实验用培养基适用性检查标准操作规程
附件编号Attachment No.:R03 微生物控制菌培养基适用性检查记录
Growth promotion test of media for Specified Microorganisms tests。