《临床生物化学和生物化学检验》
《临床生物化学与检验〉实验大纲(本)

《临床生物化学与检验》实验教学大纲编写单位:西安医学院医学技术系临床生化与免疫病原检验教研室编写时间:2008年6月20日教务处印制2008年6月20日一、实验课程简介二、实验教学内容与基本要求(一)、实验项目名称:生化检验基本实验技术[实验目的]1. 掌握吸量管、加样器、分光光度计的使用;2. 掌握实验报告的内容及书写格式;3. 熟悉混匀技术、标准曲线的绘制,临床生物化学实验室守则。
[实验教学基本要求]1. 学会生化检测的简单操作;2. 学习标准曲线制作及其意义。
[实验内容提要]1. 吸量管及加样器的使用;2. 分光光度计的使用;3. 混匀技术;4.标准曲线的绘制。
[实验类型]验证性[实验学时]:3学时[实验使用的主要仪器]1.试剂 3%的CuSO4溶液、蒸馏水2.器材 721/723分光光度计、吸量管、加样器(二)、实验项目名称:血清蛋白测定[实验目的]1. 掌握双缩脲法测定血清总蛋白、溴甲酚绿法测定血清清蛋白基本原理及操作;2. 熟悉血清蛋白测定的临床意义、注意事项;3.了解测定血清蛋白特点。
[实验教学基本要求]1. 学会血清蛋白测定的手工操作;2. 树立准确检测的概念。
[实验内容提要]1.双缩脲法测定血清总蛋白;2.溴甲酚绿法测定血清清蛋白。
[实验类型]验证性[实验学时]:3学时[实验使用的主要仪器]1.试剂 70g/L蛋白标准液、双缩脲试剂、溴甲酚绿试剂、40g/L清蛋白标准液2.器材 721/723分光光度计、吸量管、加样器、水浴箱(三)、实验项目名称:醋酸纤维素薄膜电泳分离血清蛋白质[实验目的]1. 掌握CAM电泳分离血清蛋白原理,操作过程(点样、电泳条件的选择、染色、漂洗、等过程);2. 熟悉电泳仪装置过程,支持物平衡,区带的定量分析方法3.了解电泳中出现脱尾现象的原因及纠正方法。
[实验教学基本要求]1. 学会CAM电泳的操作(点样、电泳条件的选择、染色、漂洗过程);2. 学会洗脱法进行区带的定量分析。
临床生物化学和生物化学检验课程内容整合

践, 把美感体验运用到课堂教学和学习中去。
32 营造和 谐 镰 堂 氛围 ,t 学 生 求知 欲 . .曩
营造一个和谐的课堂氛围 ,给学生 自由发挥和积极思索的
空间 , 引导其形成审美意识 , 提高其审美情趣 和审美 鉴赏能力 ,
有利于培养学生追求美 、 创造美的意识 。 在授课过程中教师以和
愿意继续学习护理美学知识 。
3 讨论
懂得去欣赏美 、 创造美 , 从而使讲授具有说服力 , 并能调 动学生 学习的 积极性 , 以促进教学质量 的不断提高。
参考文献:
31 }l教 学实践, . 量t I 促避护 理美学知识的退用 护理美学是一 门实践性很强 的学科 。在教学 中需要学生 充分调动 自己的视觉 、 听觉等感 官 , 学会去观照美 、 思考美 , 用 心灵去感受美 , 从而创造美 。文字描述 固然有其生 动的一面 ,
极参与给予肯定和鼓励 ; 同时把学生的课堂表现作为考核内容 ,
进行现场记录 , 并作为期末成绩 的一部分 , 以此提高学生 的学习
兴趣 。
课程结束后发放 自制调查表对学生进行调查 , 统计结果显 示 :01%的学生认为教师采用的教学方法较丰富 , 7. 0 最喜欢 的
3 提 高 师 文素养是傈证护理美学教 学质量的根本 . 3 教 人
目前 , 护理美学师资多为护理专业教师 , 他们基本没有接受 过专业美学教育 ,人文知识有限 ,难 以将美学与护理学完美融
教学方法依次是美学欣赏(1 1 、 8. %)礼仪练习(2 7 、 8 4. %)设计 3
活动(3 6 及案例讲授 (54 %)8 . %的学生 认为学 习 3. %) 9 2. 2 ;67 6 护理美学很有必要 ;65%的学生认为增强 了护理美学知识 ; 9. 7
临床生物化学检验试卷及答案

临床生物化学检验试卷及答案《临床生物化学检验》考试试题与答案一、名词解释 1、临床化学 2、前带效应 3、色素原底物 4、溯源性 5、酶的比活性二、填空1 、翻译下列英文缩写:IFCC 的中文全称为_______________________________________ ,其中文简称为 _______________________________ 。
NCCLS 的中文全称为_______________________________。
PNPP 为_____________________。
AMS为_____________。
AChE 为________________________。
CRM 为________________。
质量保证中的VIS 为____________________。
2、将十几个步骤简化为样本采集、样本分析、质量控制、解释报告等四个步骤的过程称为病人身边检验,其英文缩写为_____________ 。
实验室国家认可委员会的英文缩写为_________ 。
美国临床化学协会的英文缩写为_____________。
3、最早对临床生物化学检验做出开创性研究的我国科学家是_______________。
4、NCCLS的精密度评价试验中,规定合乎要求的批内不精密度CV范围为_______________,批间不精密度CV变异范围为_______________,其中的EA_______________的规定标准。
三、单选1、连续监测法测定酶活性的吸光度读数次数应不少于次 A、2 B、3 C、4 D、72、测定待测酶Ex的酶偶联反应A??E?x→B??E?a→C ??Ei→D 之中,关于零级反应、一级反应的描述正确的是 A、三个酶催化的都是零级反应B、Ex和Ea催化的是零级反应,Ei催化一级反应C、Ex催化的是零级反应,Ea和Ei催化一级反应D、三个酶催化的都是一级反应3、测定代谢物Ax的酶偶联反应A B C D Ea Ea Ei x→→ ??→ 1 2之中,关于零级反应、一级反应的描述正确的是A、三个酶催化的都是零级反应B、Ea1和Ea2催化的是零级反应,Ei催化一级反应得分阅卷人得分阅卷人得分阅卷人- 2 -C、E a1催化的是零级反应,Ea2和Ei催化一级反应D、三个酶催化的都是一级反应4、WHO规定,空腹指至少h内无含热量食物的摄入 A、6 B、8 C、12 D、145、NCCLS规定的精密度统计评价的测定原始数据一般为个 A、xx年人血清同工酶电泳区带中含量多少应该符合 A、LD1>LD2>LD3>LD4>LD5 B、LD1LD1>LD3>LD4>LD5 D、LD3>LD1>LD2>LD4>LD5 11、自动生化分析仪测定酶活性中的K 值计算公式: 106 Vt εb Vs k= ×中各参数的含义错误的是A、K 值是指理论值,一般要求进行校正B、b 是比色皿光径,有些仪器已换算为1cmC、Vt 为反应总体积,若有稀释水,则包含稀释水量D、Vs 为样品量,若有稀释水,则包含稀释水量 12、IFCC 推荐法测定ALP 选用哪个缓冲液 A、乙二胺 B、AMP C、Tris D、甘氨酸13、在室间质评中,一般认为VIS 大于多少时表明测定结果超过允许误差A、80 B、150 C、200 D、400 14、OCV 与RCV 的关系是A、OCV=RCVB、OCV>RCVC、OCV 16、比色分析仪器的性能检查不包括A、波长校正B、线性检查C、杂光检查D、变异系数检查 17、下列不属于外源性干扰物质的是)A、偶然误差B、比例误差C、恒定误差D、系统误差 19、ALT 双试剂盒的第一试剂能排除的干扰是A、内源性NH3B、游离甘油C、抗坏血酸D、内源性丙酮酸 20、有关“特异度”的描述,错误的是 A、特异度高的实验主要用于筛选B、指在非患病者中,应用该试验获得阴性结果的百分比C、反映诊断试验正确鉴别非患病者的能力D、一般来讲,该值越大越好 21、假阴性是A、经试验而被正确分类的患者数B、经试验而被错误分类的非患者数 - 3 -C、经试验而被正确分类的非患者数D、经试验而被错误分类的患者数 22、阳性似然比是A、=灵敏度/B、=真阴性/假阴性C、=假阳性/真阳性D、=/特异度 23、方法比较试验检测的是A、偶然误差B、比例误差C、恒定误差D、系统误差24、同一种试剂盒,取10 瓶试剂复溶,测定同一样品的含量,求平均值、标准差、变异系数,则结果表示的是 A、批间差异 B、批内精密度 C、瓶间差异 D、以上都不是25、测定尿素的酶法液体型双试剂试剂盒,第一试剂中不含有 A、α-酮戊二酸 B、 NADH C、脲酶 D、谷氨酸脱氢酶26、光谱检验技术要运用互补色,其中红色的互补色为A、黄色B、绿色C、蓝色D、紫色 27、SDS 的中文名称是 A、十二烷基硫酸钠 B、十二烷基磺酸钠 C、十二烷基苯磺酸钠 D、十二烷基苯硫酸钠 28、对同工酶描述错误的是A、可不同基因编码B、可等位基因编码C、可同一基因编码D、同工酶基因不可能会相同29、LPL-GK-GPO-POD双试剂法测定甘油三酯,可以排除内源性甘油的干扰。
《临床生物化学和生物化学检验》

《临床生物化学和生物化学检验》理论教学大纲(供五年制检验本科用)医学检验系《临床生物化学和生物化学检验》教学组2007-01-01前言《临床生物化学和生物化学检验》(第三版)为供医学检验专业用的全国高等医药教材建设研究会规划教材、全国高等医药院校教材。
主编为周新教授(武汉大学医学院)与涂植光教授(重庆医科大学),参与编写本版教材的共有12所高等学校的14位教授。
编写宗旨:适应科学技术的发展和21世纪医学检验教育的需要,力争达到医学检验系本科生的培养目标要求。
教材的编写思路是:突出基本理论、基本知识、基本技能,便于教与学;也注意反映学科发展和教学改革成果,适当介绍本学科及相关学科的新进展,有利于培养学生的创新思维和实践能力。
与第二版比较,本版教材作了较大的更动和补充。
新增了四章,删去了已经另有教材的诊断分子生物学和实验室管理章节,并对原有的章节进行了较大的修改更新。
各章最后均有“小结”,旨在帮助学生掌握该章重点。
书末还附有主要参考文献、汉英和英汉索引,便于教师和学生查阅,以及深入了解有关的详细内容。
全书分为二十章:绪论、临床生物化学实验室基本技术与管理、血浆蛋白质以及非蛋白含氮化合物的代谢紊乱、糖代谢紊乱、血浆脂蛋白及其代谢紊乱、诊断酶学、微量元素与维生素的代谢紊乱、体液平衡与酸碱平衡紊乱、肝胆疾病的生物化学诊断、肾脏疾病的生物化学诊断、心脏疾病的生物化学诊断、胃肠胰疾病的临床生物化学、骨代谢异常的生物化学诊断、红细胞代谢紊乱、内分泌疾病的生物化学诊断、神经、精神疾病的生物化学、妊娠的临床化学、体液肿瘤标志物、治疗药物浓度监测、自动生物化学分析仪的应用与原理。
《临床生物化学和生物化学检验》课程介绍《临床生物化学及其检验》是高等医学检验专业的核心课程,是介于基础医学和临床医学的桥梁学科之一。
本课程是在人体正常的生物化学代谢基础上,研究疾病状态下生物化学病理性变化的基础理论和相关代谢物的质与量的改变,进一步从生物化学代谢和分子水平,认识疾病发病机制,从而为疾病的临床实验诊断、治疗监测、药物疗效和预后判断、疾病预防等方面提供信息和决策依据的一门学科。
临床生物化学和生物化学检验

03 生物化学检验技术
光谱分析技术
1 2 3
紫外-可见光谱分析
利用物质对紫外-可见光的吸收特性进行分析, 常用于蛋白质、核酸等生物大分子的定性和定量 分析。
红外光谱分析
通过物质对红外光的吸收或透射,获得分子的振 动和转动信息,用于鉴定有机化合物和生物大分 子的官能团和结构。
对未来临床生物化学和生物化学检验的展望
技术创新
未来,随着科技的不断进步,临床生物化学和生物化学检验将迎来更加先进的 技术和方法,如基因测序、蛋白质组学等,为疾病的诊断和治疗提供更加精准 的依据。
智能化发展
人工智能、大数据等技术的应用将为临床生物化学和生物化学 检验带来更加智能化的发展,提高检测效率和准确性。
06 结论与展望
本次汇报的主要内容和结论
01
汇报内容
本次汇报详细介绍了临床生物化学和生物化学检验的基本原理、方法、
技术及其在临床诊断中的应用。
02
重要发现
通过对血液、尿液等样本的检测,可以准确判断机体内的生化反应和代
谢状况,为疾病的早期发现、诊断和治疗提供重要依据。
03
结论
临床生物化学和生物化学检验在现代医学中发挥着不可替代的作用,是
个性化医疗
随着精准医疗的不断发展,临床生物化学和生物化学检验将更 加注重个体化差异,为患者提供更加个性化的诊疗方案。
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下一代测序技术
对基因组进行大规模、高深度的测序分析,提供更为全面 和准确的遗传信息,为疾病的诊断、治疗和预后评估提供 有力支持。
04 临床常见疾病的生物化学 诊断
糖尿病的生物化学诊断
血糖测定
《临床生物化学和生物化学检验》课程简介

《临床生物化学和生物化学检验》课程简介在现代医学领域中,临床生物化学和生物化学检验是一门至关重要的学科。
它犹如一把精准的钥匙,能够开启了解人体生理和病理状态的神秘之门,为疾病的诊断、治疗和预防提供关键的依据和指导。
这门课程主要研究人体在健康和疾病状态下的生物化学变化,以及如何通过各种检验技术和方法来检测和分析这些变化。
课程内容涵盖了广泛的领域,从生物大分子的结构与功能,到细胞内的代谢途径和调控机制,再到体液和组织中的生物化学标志物。
在课程的开篇,我们会深入学习生物化学的基础知识。
了解蛋白质、核酸、糖类和脂质等生物大分子的结构、性质和功能,这是理解后续复杂生命过程的基石。
例如,蛋白质的一级结构决定了其空间构象和生物活性,而核酸中的 DNA 承载着遗传信息,通过转录和翻译过程指导蛋白质的合成。
紧接着,我们将聚焦于细胞代谢。
细胞如同一个微型的化工厂,进行着各种物质和能量的转化。
糖代谢、脂代谢、氨基酸代谢等过程相互关联,又受到精细的调控。
比如,糖酵解在缺氧条件下为细胞提供能量,而有氧氧化则是产生大量 ATP 的主要途径。
当这些代谢过程出现紊乱时,可能会导致糖尿病、高脂血症等疾病的发生。
课程的核心部分之一是生物化学标志物的研究。
这些标志物是反映人体生理和病理状态的重要指标。
例如,心肌梗死时,心肌细胞内的肌酸激酶、肌红蛋白等会释放入血,通过检测这些标志物的水平,可以快速诊断疾病。
此外,肿瘤标志物如甲胎蛋白、癌胚抗原等对于肿瘤的筛查和诊断也具有重要意义。
生物化学检验技术则是将理论转化为实践的关键环节。
我们会学习各种样本的采集、处理和保存方法,以确保检测结果的准确性和可靠性。
同时,掌握先进的仪器设备的原理和操作方法,如全自动生化分析仪、免疫分析仪等。
例如,酶联免疫吸附试验(ELISA)常用于检测蛋白质类标志物,而高效液相色谱法可以精确分析各种小分子物质。
在学习过程中,我们还会涉及到临床案例的分析。
通过实际病例,将所学的理论知识与临床实践相结合,培养学生的临床思维和解决问题的能力。
临床生物化学和生物化学检验-PowerPoint演示文

2、去路:由消化道、肾、肝、乳汁及头发排泄。失血是丢锌的主要途径。 (二)锌的生物学作用 1、锌作为多种酶的功能成分或激活剂。 2、促进机体生长发育。锌是调节DNA复制、转录DNA聚合酶的必需成分。缺
锌----伤口难愈合、性器官发育不全或减退、机体发育不良,儿童缺锌易导致 侏儒症。
导致输精管退变、精子减少、性功能减退以致不育。锰还是硫酸软骨素合成酶 的必需基团。锰缺乏可致软骨生长障碍。 (三)锰缺乏病 1、侏儒症。 2、贫血。
(四)锰中毒
1、非职业性中毒 服用高锰酸钾,轻者可引起恶心、呕吐、胃痛、口腔溃烂。
重者可呈现口唇粘膜肿胀糜烂、血便、腹剧痛,甚至死亡。
2、职业性中毒
矿工、油漆工、电焊工和生产电池、陶器的工人,长期接
(三)铜缺乏症 1、原因: (1)生长阶段,供给量不足;(2)长期腹泻和营养不良;(3)伴肠道 吸收不良病变;(4)肾综,铜丢失过多;(5)长期使螯合剂。 2、临床表现: (1)贫血,因为Cu2+的缺乏影响了铁的吸收、转运、利用以及细 胞色素与Hb的合成;(2)骨骼发育障碍, Cu2+缺乏导致骨质中胶原纤维合成障碍。 (3)生长发育停滞;(4)肝、脾肿大等。 (四)铜中毒 1、急性铜中毒 食用含铜丰富食物或误服铜盐等。表现为铜中毒、呕吐、上腹 部痛、腹泻、眩晕、金属味等,重者出现高血压、昏迷、心,甚至死亡。 2、慢性铀中毒 长期接触或食用铜含量丰富的食品。表现为胃肠道症状、呼吸 道症状、眼结膜剌激症状、皮肤病变等。
6、保护心血管和心肌。硒保护细胞膜结构功能、消除自由基的毒性、抑制脂质 的过氧化反应,从而保护心肌和血管功能。 7、调节Vit A、C、E、K的代谢。 8、对肿瘤有显著抑制作用。硒通过干扰致癌物的代谢达到抗癌作用。 (三)硒缺乏(了解) 缺硒或致克山病,一种以心肌坏死为主的地方病。表现为心力衰竭或心源性休克、 心律失常、心功能失代尝。 (四)硒中毒(了解) 表现为头晕、头痛、乏力、恶心、汗液蒜臭味、脱发和脱指甲、寒战、高热、指 颤等。
临床生物化学与检验您了解吗?王丽

临床生物化学与检验您了解吗?王丽发布时间:2023-06-14T06:37:43.407Z 来源:《中国医学人文》(学术版)2023年6月6期作者:王丽[导读] 临床生物化学是在人体正常的生物化学代谢基础上,研究疾病状态下生物化学病理性变化的基础理论和相关代谢物质的质与量的改变,从而为疾病的临床实验诊断、治疗监测、药物疗效和预后判断、疾病预防等方面提供信息和决策依据的一门医学学科,而生物化学检验则是一种以生物化学方法检测人类疾病的方法,其主要任务是利用物理知识、化学知识、生物学知识、遗传学知识、病理学知识、免疫学知识、药理学知识等共同探讨疾病的发病机制,检测及研究疾病病理过程中出现的特异性化学标志物或体内特定成分的改变,如平时大家所熟知的项目肝功能、甲状腺功能、肾功能、心肌标志物、电解质以及血糖血脂检测等等,生化检验的项目很多,不同的检验项目临床意义也不相同的,因此要对身体有一个完整的认识,光是生化检查就有几十项。
那么如何进行生物化学检测?生化检验可以知道哪些病症?让我们一起来看一看,学一学。
岳池县中医医院四川广安 638300临床生物化学是在人体正常的生物化学代谢基础上,研究疾病状态下生物化学病理性变化的基础理论和相关代谢物质的质与量的改变,从而为疾病的临床实验诊断、治疗监测、药物疗效和预后判断、疾病预防等方面提供信息和决策依据的一门医学学科,而生物化学检验则是一种以生物化学方法检测人类疾病的方法,其主要任务是利用物理知识、化学知识、生物学知识、遗传学知识、病理学知识、免疫学知识、药理学知识等共同探讨疾病的发病机制,检测及研究疾病病理过程中出现的特异性化学标志物或体内特定成分的改变,如平时大家所熟知的项目肝功能、甲状腺功能、肾功能、心肌标志物、电解质以及血糖血脂检测等等,生化检验的项目很多,不同的检验项目临床意义也不相同的,因此要对身体有一个完整的认识,光是生化检查就有几十项。
那么如何进行生物化学检测?生化检验可以知道哪些病症?让我们一起来看一看,学一学。
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《临床生物化学与检验》实验教学大纲(供检验医学专业本科教学使用)蚌埠医学院生物化学与分子生物学教研室制定二OO八年八月蚌埠医学院《临床生物化学与检验》课程实验教学大纲课程编号:课程名称:临床生物化学与检验英文名称:Clinical Biochemistry and Techniques of Biochemistry课程性质:专业主干课程适用专业:医学检验本科考核方式:日常考核、操作考核、提交实验结果。
实验成绩的构成是由实验报告成绩、平时成绩、实验考核成绩三部分组成。
实验总成绩40分,其中实验报告成绩15分、平时成绩10分、实验考核成绩15分。
课程简介:本课程是医学检验专业本科生的必修课程,临床生物化学和生物化学检验是由生物化学、分析化学、临床医学等学科交叉融合而形成边缘学科,是临床医学的不可分割的重要组成部分,是医学检验专业学生的主干课程之一。
临床生物化学和生物化学检验着重阐述了人体疾病发病机制中的生物化学改变,临床生物化学检验方法的原理、方法学评价、检测结果的临床意义和如何按循证医学要求合理选择相关检验指标。
教学大纲要求总学时162学时,其中理论教学68学时、实验教学68学时,实验教学共15实验类别,共计26个实验。
选用教材:钱士匀.主编.临床生物化学与检验实验指导.人民卫生出版社,第三版.2007.实验一生化实验要求、电教一、类别:示教性实验二、实验目的和要求:【掌握】1.正确使用玻璃器材。
包括:⑴认识玻璃器材。
⑵掌握玻璃器材的分类。
⑶掌握玻璃器材的正确使用方法。
⑷掌握玻璃器材的正确清洗方法。
⑸了解玻璃器材的校准方法。
2.正确使用各种加样器。
【熟悉】1.实验室的规则。
2.药品和试剂的分级和使用原则。
【了解】检验科临床生化室的基本操作流程及实验室规则。
三、实验内容:1.介绍实验室的一般规则,包括实验秩序、药品和试剂使用规则。
2.发实验器材。
3.观看电教,熟悉相关器材与仪器的正确使用。
四、学时:4学时五、主要仪器设备:电视机、放像机、可调微量加样器等。
六、实验中注意事项:1.观看电教片时,注意记录电教中的要点。
2.认真观察授课教师的示教内容。
3.遵守课堂纪律,熟悉实验室规则。
2.注意操作时试剂的加入顺序。
实验二血清蛋白质测定一、类别:设计性实验二、实验目的和要求:【掌握】1.双缩脲法测定血清蛋白质含量的原理和方法。
2.溴甲酚绿法测定血清清蛋白的原理和方法。
3.醋酸纤维素薄膜电泳法分离血清蛋白质的原理、操作步骤、实验结果的分析及注意事项。
【熟悉】1.双缩脲法测定血清蛋白质含量的注意事项及临床意义。
2.溴甲酚绿法测定血清清蛋白的注意事项及临床意义。
3.琼脂糖凝胶电泳法分离血清蛋白质的原理及操作步骤。
4.血清蛋白电泳的临床意义。
5.蛋白质测定的各种方法的原理及评价。
【了解】1.血清中其它蛋白质的测定原理。
2.聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清蛋白质的原理。
三、实验内容:1.介绍双缩脲法测定血清总蛋白质含量的原理、操作方法及注意事项等内容。
2.介绍溴甲酚绿法测定血清清蛋白的原理、操作方法及注意事项等内容。
3.介绍蛋白质测定的各种方法的原理及评价。
4.介绍醋酸纤维素薄膜电泳法分离血清蛋白质的原理、操作步骤、实验结果的分析及注意事项。
5.介绍琼脂糖凝胶电泳法分离血清蛋白质的原理及操作步骤。
6.学生按操作步骤进行实验,并对结果进行分析。
四、学时:8学时五、主要仪器设备:水浴箱、分光光度计、离心机、微量加样器及电泳仪、电泳槽等。
六、实验中注意事项:(一)双缩脲法测定血清总蛋白质试验的注意事项:1.黄疸血清、严重溶血;葡萄糖、酚酞及溴磺酞钠对测定血清总蛋白有明显干扰,需用标本空白管来消除。
2.高脂血症混浊血清会干扰双缩脲法测定血清总蛋白的比色,可采用下述方法消除:取2支带塞试管或离心管,各加待测血清0.1ml,再加蒸馏水0.5ml和丙酮10ml,塞紧并颠倒混匀10次后离心,倾去上清液,将试管倒立于滤纸上吸去残余液体。
向沉淀中分别加入双缩脲试剂及双缩脲空白试剂,再进行与上述相同的其他操作和计算。
(二)溴甲酚绿法测定血清清蛋白试验的注意事项:1.BCG是一种pH指示剂,变色域为pH3.8(显黄色)~5.4(显蓝绿色),因此控制反应液的pH是溴甲酚绿法测定血清清蛋白的关键。
2.配制BCG试剂也可用其他缓冲液如枸橼酸盐或乳酸盐缓冲液。
但以琥珀酸盐缓冲液的校正曲线通过原点,线性好,灵敏度高,成为首选推荐配方。
3.当60g/L的白蛋白标准液与BCG结合后,溶液光径1.0ml,在630nm处测定的吸光度应为0.811±0.035,如达不到此值,表示灵敏度较差。
(三)醋酸纤维素薄膜电泳法分离血清蛋白质试验的注意事项:1.通电时,不得接触槽内缓冲液或CAM,以防触电。
2.CAM在电泳前,必须浸泡在巴比妥缓冲液中,使薄膜浸泡透彻。
3.缓冲液液面要保证一定高度,同时电泳槽两侧的液面应保持同一水平,否则通过薄膜时有虹吸现象,会影响蛋白质分子的泳动速度。
4.电泳常见的缓冲液为巴比妥缓冲液,用硼砂,Tris和EDTA组成的缓冲液可以分离出前白蛋白,三种 -球蛋白,三种β-球蛋白和γ-球蛋白。
5.电泳后区带应无拖尾,各区带明显分开,如果电泳图谱分离不清或不整齐,最常见的原因有:①点样过多;②点样不均匀、不整齐,样品触及薄膜边缘;③薄膜过湿,样品扩散;④薄膜未完全浸透或温度过高导致局部干燥或水分蒸发;⑤薄膜与滤纸桥接触不良;⑥薄膜位置歪斜、弯曲,与电流方向不平行;⑦缓冲液变质;⑧样品不新鲜;⑨CAM 质量不高等。
6.染料问题染料的选择应对蛋白质的各组分亲和力相同,吸光度与蛋白质的浓度成正比。
并要求水溶性好、染料稳定、吸光度敏感,形成的染料蛋白质复合物稳定且易洗脱比色。
现在常用丽春红S、氨基黑10B和尼基黑作为染料,其中尼基黑对蛋白质吸光度比氨基黑10B敏感3倍以上。
用光密度计扫描定量一般用丽春红S染色,比色法定量既可用丽春红S也可用氨基黑10B染色。
在血清蛋白正常浓度范围内,丽春红S能与各蛋白质组分成正比例结合而氨基黑10B却对白蛋白染色过深,导致白蛋白结果偏高,球蛋白偏低。
实验三血糖测定、半自动生化分析仪的使用一、类别:验证性实验二、实验目的和要求:【掌握】GOD-POD法测定血糖的原理、方法、操作方法、及注意事项。
【熟悉】1.血糖测定的临床意义。
2.己糖激酶法测定血糖的原理和方法。
3.半自动生化分析仪如何进行血糖浓度的测定。
【了解】邻甲苯胺法测定血糖的原理。
三、实验内容:1.介绍GOD-POD法测定血糖的原理、注意事项及临床意义。
2.介绍己糖激酶法测定血糖的原理和方法。
3.讲授半自动生化分析仪的操作方法及如何进行血糖浓度的测定。
4.学生按操作步骤进行实验,并对结果进行分析。
四、学时:4学时五、主要仪器设备:水浴箱、分光光度计、离心机、BT-224型半自动生化分析仪等。
六、实验中注意事项:1.葡萄糖氧化酶对β-D葡萄糖高度特异,溶液中的葡萄糖约36%为α型,64%为β型。
葡萄糖的完全氧化需要α型到β型的变旋反应。
国外某些商品葡萄糖氧化酶试剂盒含有葡萄糖变旋酶,可加速这一反应,但在终点法中,延长孵育时间可达到完成自发变旋过程。
新配制的葡萄糖标准液主要是α型,故须放置2h以上(最好过夜),待变旋平衡后方可应用。
2.葡萄糖氧化酶法可直接测定脑脊液葡萄糖含量,但不能直接测定尿液葡萄糖含量。
因为尿液中尿酸等干扰物质浓度过高,可干扰过氧化物酶反应,造成结果假性偏低。
3.测定标本以草酸钾-氟化钠为抗凝剂的血浆较好。
取草酸钾6g,氟化钠4g。
加水溶解至100ml。
吸取0.1ml到试管内,在80℃以下烤干使用,可使2~3ml血液在3~4天内不凝固并抑制糖分解。
实验四血清总胆固醇和血清甘油三酯测定一、类别:验证性实验二、实验目的和要求:【掌握】1.磷酸甘油氧化酶法测定甘油三酯的原理。
2.胆固醇氧化酶法测定血清总胆固醇的原理。
【熟悉】1.乙酰丙酮显色法测定甘油三酯的原理、操作方法、注意事项及临床意义。
2.邻苯二甲醛法测定总胆固醇的原理、操作方法、注意事项及临床意义。
3.测定甘油三酯和总胆固醇的临床意义。
【了解】胆固醇和甘油三酯的测定发展史及方法学进展。
三、实验内容:1.介绍胆固醇和甘油三酯的测定发展史。
2.介绍乙酰丙酮法测定甘油三酯的原理、操作方法、注意事项及临床意义。
3.介绍磷酸甘油氧化酶法测定甘油三酯的原理。
4.介绍胆固醇氧化酶法测定血清总胆固醇的原理。
5.介绍邻苯二甲醛法测定总胆固醇的原理、操作方法、注意事项及临床意义。
6. 学生按操作步骤进行实验,并对结果进行分析。
四、学时:4学时五、主要仪器设备:水浴箱、分光光度计、微量加样器、BT-224型半自动生化分析仪等。
六、实验中注意事项:(一)乙酰丙酮法测定甘油三酯实验的注意事项:1.血清TG易受饮食的影响,在进食脂肪后可以观察到血清中甘油三酯明显上升,2~4h内即可出现血清混浊,8h以后接近空腹水平。
因此,要求空腹12h后再进行采血,并要求72h内不饮酒,否则会使检测结果偏高。
2.显色后吸光度随时间延长会有一定量的增高,故加样后要立即比色,当标本过多时,可置冰箱中逐管进行比色。
3.本方法所用试剂较稳定,室温下可保存半年,分装使用可避免因试剂污染而引起的空白值升高。
4.皂化、氧化及显色的时间和温度对吸光度均会有影响,所以每测定一批都应该同时做标准对照。
5.TG在12.93mmol/L以下时,线性关系良好,当血清明显混浊时,可用生理盐水作倍比稀释后再测。
6.以血浆作标本时,还应注意抗凝剂的影响,通常使用EDTAK2(1 mg/ml)作抗凝剂。
(二)邻苯二甲醛法测定总胆固醇实验的注意事项:1.注意浓硫酸试剂使用的注意事项。
2.注意加入浓硫酸后要在旋涡混匀器上振荡至少1分钟或采取冲洗混匀的方式。
3.显色液稳定时间为半小时。
实验五血清钠、钾、氯的测定一、类别:综合性实验二、实验目的和要求:【掌握】1.离子选择电极法测定血清钠、钾、氯的原理、方法及注意事项。
2.硫氰酸汞比色法测定血清氯的原理、方法及注意事项。
【熟悉】1.火焰光度法测定钠、钾的原理和方法。
2.血清钠、钾、氯测定的临床意义。
3.血气分析仪的使用。
【了解】电解质分析仪的维护与保养。
三、实验内容:1.介绍火焰光度法测定钠、钾的原理、方法及注意事项。
2.介绍离子选择电极法测定血清钠、钾、氯的原理、方法及注意事项。
3.硫氰酸汞比色法测定血清氯的原理、方法及注意事项。
4.观看电教(火焰光度计、离子选择电极及血气分析仪的使用)。
5.进行IMS-972型电解质分析仪使用方法、授课教师示教及学生上机操作练习。
6.学生按操作步骤进行实验,并对结果进行分析。
四、学时:8学时五、主要仪器设备:水浴箱、分光光度计、离心机、电视机、放像机、IMS-972型电解质分析仪等。