实验七 细菌生长曲线
微生物实验报告：测定细菌生长曲线
测定细菌生长曲线一、实验目的1．了解细菌生长曲线特征，测定细菌繁殖的代时；2．学习液体培养基的配制以及接种方法；3．反复练习无菌操作技术；4．了解不同细菌，不同接种方法在同一培养基上生长速度的不同；5．掌握利用细菌悬液混浊度间接测定细菌生长的方法；二、实验原理将一定量的菌种接种在液体培养基内，在一定的条件下培养，可观察到细菌的生长繁殖有一定规律性，如以细菌活菌数的对数做纵坐标，以培养时间做横坐标，可绘成一条曲线，称为生长曲线。
单细胞微生物发酵具有4个阶段，即调整期（迟滞期）、对数期（生长旺盛期）、平衡期（稳定期）、死亡期（衰亡期）。
生长曲线可表示细菌从开始生长到死亡的的全过程动态。
不同微生物有不同的生长曲线，同一种微生物在不同的培养条件下，其生长曲线也不一样。
因此，测定微生物的生长曲线对于了解和掌握微生物的生长规律是很有帮助的。
测定微生物生长曲线的方法很多，有血细胞计数法，平板菌落计数法，称重法和比浊法。
本实验才用比浊法，由于细胞悬液的浓度与混浊度成正比，因此，可以利用分光光度计测定菌悬液的光密度来推知菌液的菌液的浓度。
将所测得的光密度值（OD600）与对应的培养时间做图，即可绘出该菌在一定条件下的生长曲线。
注意，由于光密度表示的是培养液中的总菌数，包括活菌和死菌，因此所测生长曲线的衰亡期不明显。
从生长曲线我们可以算出细胞每分裂一次所需要的时间，即代时，以G表示，其计算公式为：G＝（t2-t1）/[(lgW1-lgW2)/lg2]式中t2和t1为所取对数期两点的时间，W1和W2分别为对应时间测得的细胞含量或OD。
三、实验器材大肠杆菌，枯草杆菌菌液及平板；培养基(100mL/250mL三角瓶×10瓶/大组):牛肉膏蛋白胨葡萄糖培养基；取液器(5000ul, 1000ul 各一支)，无菌1000ul吸头若干，无菌5000ul吸头若干，比色皿10个及共用参比杯一个，培养箱3台，722s分光光度计；四、实验步骤1．活化菌种将细菌接种到牛肉膏蛋白胨葡萄糖三角瓶培养基中，37℃振荡培养18h，另外准备单菌落平板各1块；2．接种6人大组分为3个小组，按表1接种。
细菌生长曲线及特点
细菌生长曲线及特点细菌生长曲线及特点细菌是微生物界中数量繁多的一类生物，它们的生长规律是生物学研究的重要内容之一。
细菌的生长曲线是描述细菌在培养基中生长繁殖过程中细胞数量随时间的变化规律的图表。
通过研究细菌生长曲线及其特点，可以更好地了解细菌的生长机理、调控因素和生物学特性，对于生态学、医药学以及食品工业的微生物控制等领域有着重要的意义。
一、细菌生长曲线的基本形态细菌生长曲线通常呈现出经典的四个阶段：潜伏期、指数期、平稳期和死亡期。
1. 潜伏期（Lag phase）：细菌刚转入新环境时，需要适应新的生长条件，此时细菌的生长速度较慢，细菌数量几乎不变。
细菌在此期通过合成必要的酶、蛋白质等物质来适应环境。
2. 指数期（Log phase）：此阶段为快速增长期，细菌开始进入高度增殖状态。
细菌数量呈指数级增长，代表着细菌的快速繁殖。
这是因为细菌在此时处于最适合生长的温度、pH值、营养成分等条件下，利用培养基中的营养物质大量繁殖。
3. 平稳期（Stationary phase）：该阶段细菌的繁殖速度逐渐减慢，细菌数量达到一个相对稳定状态。
此时细菌的分裂速度与死亡速度相互平衡，其中营养物质的消耗和废物的积累是导致生长停滞的主要原因。
4. 死亡期（Death phase）：此阶段细菌数量开始逐渐减少，细菌中的死亡速度远远大于新细菌的产生速度。
营养物质的枯竭、有毒物质的积累以及母细胞的衰老等因素，都会导致细菌的死亡和生长的终止。
二、细菌生长曲线的特点1. 不同种类细菌具有不同的生长周期和生长速度。
一般而言，细菌的生长周期可从几小时到几天不等。
某些嗜热菌能在高温下迅速繁殖，而一些室温菌对温度的要求较低。
2. 细菌生长曲线呈现出的四个阶段可以反映细菌生长的动态变化。
通过观察曲线的形态，可以判断细菌在特定环境下的适应能力以及生长特性。
3. 细菌生长曲线的特点与培养基、环境条件、温度、氧气含量等因素密切相关。
不同的培养基和环境条件对细菌的生长有直接影响，而温度和氧气含量对细菌的生长速度和类型也有重要的影响。
细菌生长曲线pt课件
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1. 微生物群体生长
（Population Growth）
生长：微生物生长包括个体体积的增加及细胞数量 的增多
生长速率（Growth rate）是指单位时间内细胞数量或 质量增加的量
从一个细胞变成两个细胞的时间间隔称代时 （generation time）
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思考题: 1. 研究微生物生长曲线的意义 2. 对数期的细胞有何特点，在实际中的意义
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2
2. 生长曲线（Growth） Curve）
描述微生物特别是单细胞微生物生长规律的 曲线
在液体培养中，将微生物细胞接种到新鲜培养基中 在特定条件下培养 细胞以二分分裂繁殖 以培养时间为横坐，以细胞数量的对数为纵坐标作图 所得到的曲线即是微生物生长曲线
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微生物生长曲线制作原理示意图
4
细菌生长曲线可分为延滞期（lag phase），对数期（log phase），稳定期（stationary phase）和死亡期（death phase）
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死亡期（Death Phase）
细胞死亡是细胞失去生长繁殖的能力 每小时内细胞死亡速率是常数 在某种情况下细胞死亡伴随着细胞的裂解
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4. 生长曲线的实际应用
1) 微生物生长的控制 2) 微生物生长与感染 3) 微生物生长与食品腐败变质 4) 微生物培养技术
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根据微生物生长曲线， 如何判断杀菌、抑菌 和溶菌
n=lgy-lgx/lg2=lg109-102/0.3010=23.1
代时G=17.3 结果：代时是17.3分钟，400分钟内繁殖了23.1代
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对数期的细胞生长， 红色表示直接的细 胞数量，蓝色表示 细胞的对数生长
细菌生长曲线的测定实验报告
竭诚为您提供优质文档/双击可除细菌生长曲线的测定实验报告篇一：细菌生长曲线实验九测定细菌生长曲线[实验目的]1．了解细菌生长曲线特征：2．学习液体培养基的配制以及注意事项。
3．学习液体种子和固体种子的不同接种方法和注意事项。
4．利用细菌悬液浑浊度间接测定细菌生长。
[仪器和材料]1．实验材料(1)大肠杆曲，枯草杆曲培养液及大肠杆菌平板。
(2)牛肉膏蛋门胨葡萄糖培养基(150ml／250ml三角瓶x4瓶／大组)，配方：牛肉膏5g，蛋白胨10g，nacl5g，葡萄糖10g，加水至1000ml，ph7．5。
2．实验仪器取液器(5000μl，1000μl，200tμl各一支)；培养箱．摇床，722s分光光度汁；1000μl无菌吸头100个；5000μl 无菌吸头2(:细菌生长曲线的测定实验报告)个；1ml或4ml 玻璃或塑料比色皿4个，共用参比杯一个。
[实验原理]将一定量的细菌接种在液体培养基内．在一定的条件下培养，可观察到细菌的生长繁殖有一定规律性，如以细菌活菌数的对数作纵坐标，以培养时间作横坐标，可绘成一条曲线，称为生长曲线(图91)。
单细胞微生物发酵具有4个阶段，即调整(迟滞期)、对数期(生长旺盛期)、平衡期(稳定期)、死亡期(衰亡期)。
生长曲线可表示细菌从开始生长到死亡的全过程动态。
不同微生物有不同的生长曲线，同一种微生物在不同的培养条件下，其生长曲线也不一样。
因此，测定微生物的生长曲线对于了解和掌握微生物的生长规律是很有帮助的．测定微生物生长曲线的方法很多，有血细胞计数法，平板菌落计数法，称重法和比浊法等。
本实验采用比浊法测定，由于细菌悬液的浓度与浑浊度成正比，因此，可以利用分光光度计测定菌悬液的光密度来推知菌液的浓度。
将所测得的光密度值(测oD550或oD620或oD600或oD420，可任选一波长)与对应的培养时间作图，即可绘出该菌在一定条件下的生长曲线。
注意，由于光密度表示的是培养液中的总菌数，包括活菌与死菌，因此所测生长曲线的衰亡期不明显。
[精品]细菌生长曲线的测定
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[精品]细菌生长曲线的测定细菌生长曲线的测定是细菌学中的一项重要实验。
它可以帮助我们了解细菌的生长繁殖规律及其影响因素，为控制细菌繁殖提供理论依据。
本次实验将介绍如何通过外观观察、菌落计数及测定细菌生物量的方法，获得细菌在液体培养基中的生长曲线。
实验步骤：一、准备实验材料和试剂1、选取一种细菌菌株，本次实验选择了大肠杆菌（Escherichia coli）；2、配置好液体培养基，一般为普通营养琼脂培养基、肉汤培养基等；3、消毒好实验室的工作台面及实验仪器；4、准备好移液管、试管、比色管和加热消毒的线圈镊子等实验用具。
二、制备不同浓度的菌液1、挑选一根菌棒，从培养基上接入一些带有细菌的菌落，将菌落均匀涂抹于培养基表面；2、将含有细菌的培养基放置在恒温摇床中，在适宜的温度下进行培养；3、当细菌生长至一定程度（一般在对数生长期）时，用无菌的移液管，在培养基中取出一定量的菌液；4、分别将不同体积的菌液加入到含有培养基的试管中，制备成不同浓度的菌液。
三、测定不同浓度菌液对应的OD600值1、将制备好的不同浓度菌液放入洗涤过的比色管中；2、由于细菌太小，肉眼观察不能得出其数量的增多或减少，因此需要使用分光光度计在600nm处测量各个浓度的菌液的吸光度（OD）值；3、重复测量3次，取平均值计算OD600；4、根据OD600值和菌液中细胞数量的线性关系，可通过OD600值推算出细胞数。
2、每隔2-3个小时，取出一定量的菌液，测量其OD600值，记录下菌液对应时间的值；3、采用计数培养法，每隔一定时间取出一定体积的菌液，进行菌落数的计数；4、利用OD600值曲线和菌落数曲线绘制出细菌生长曲线。
实验注意事项：1、实验期间需在无菌条件下操作，防止细菌的外界感染对实验结果的影响；2、实验者需佩戴适当的防护手套及实验服，以免对人体造成伤害；3、制备好菌液后需要及时放置在摇床中，防止菌落外的细菌感染进去；4、测量OD600值时比色管必须清洗干净，用甲醇或无菌去离子水。
(完整版)生长曲线的测定
实验日期：2017.11.1 实验班级：生物技术指导教师：张建丽姓名：高熹学号：1120152430测定细菌生长曲线一．实验目的1.通过对大肠杆菌生长曲线的测定，了解细菌生长的特点，综合训练微生物实验的基本实验技能。
2.巩固培养基的配制、灭菌、仪器的包扎、倒平板。
3.掌握用比浊法测定细菌的生长曲线。
二．实验原理将少量细菌接种到一定体积的、适合的新鲜培养基中，在适宜的条件下进行培养，一定时间测定培养液中的菌量，以菌量的数量作纵坐标，生长时间作横坐标，绘制的曲线叫生长曲线。
它反映了单细胞微生物在一定环境条件下于液体培养时所表现出的群体生长规律。
依据其生长速率的不同，一般可把生长曲线分为延缓期、生长期、稳定期和衰亡期。
将每一种一定量的细菌转入新鲜液体培养基中，在适宜的条件下培养细胞要经历延迟期、对数生长期、稳定期和衰亡期四个阶段。
延迟期：又叫调整期。
细菌接种至培养基后，对新环境有一个短暂适应过程（不适应者可因转种而死亡）。
此期曲线平坦稳定，因为细菌繁殖极少延迟期长短因素种、接种菌量、菌龄以及营养物质等不同而异，一般为1～4小时。
此期中细菌体积增大，代谢活跃，为细菌的分裂增殖合成、储备充足的酶、能量及中间代谢产物。
对数生长期：又称指数期。
此期生长曲线上活菌数直线上升。
细菌以稳定的几何级数极快增长，可持续几小时至几天不等（视培养条件及细菌代时而异）。
此期细菌形态、染色、生物活性都很典型，对外界环境因素的作用敏感，因此研究细菌性状以此期细菌最好。
抗生素作用，对该时期的细菌效果最佳。
稳定期：该期的生长菌群总数处于平坦阶段，但细菌群体活力变化较大细菌浓度达到最大即环境最大容纳量。
由于培养基中营养物质消耗、毒性产物（有机酸、过氧化物等）积累PH下降等不利因素的影响，细菌繁殖速度渐趋下降，相对细菌死亡数开始逐渐增加，此期细菌增殖数与死亡数渐趋平衡。
细菌形态、染色、生物活性可出现改变，并产生相应的代谢产物如外毒素、内毒素、抗生素、以及芽孢等。
细菌生长曲线
对数期的细胞生长， 红色表示直接的细 胞数量，蓝色表示 细胞的对数生长
作图法确定微生物代时 （Generation time）
用群体生长数据对处于对数 期的时间横坐标作图 群体数量加倍时间可以直接 从曲线上读出.
稳定期（Stationary Phase）
特征： 细胞总数达到最大，新增加的细胞数量和死亡的细胞数量平衡 细胞能量代谢和生物合成功能正常 细胞生长速率降低为零 有些细胞死亡，芽孢形成，合成代谢产物
生长曲线计算应用举例
某处于对数期的大肠杆菌培养物的细胞浓度为 100个/ml，经过400分钟培养，细胞的浓度增加 到10亿个/ml 求大肠杆菌的代时和繁殖代数 n=lgy-lgx/lg2=lg109-102/0.3010=23.1 代时G=17.3 结果：代时是17.3分钟，400分钟内繁殖了23.1代
根据微生物生长曲线， 如何判断杀菌、抑菌 和溶菌
思考题:
1பைடு நூலகம் 研究微生物生长曲线的意义
2. 对数期的细胞有何特点，在实际中的意义
3. 生长曲线中各时期的特点：
延滞期（Lag Phase）
现象：没有细胞的分裂繁殖及生长
实质：细胞内代谢活跃，进行DNA复制，蛋白质 及酶的合成，做好细胞分裂的准备 这个时期的长短与细胞的遗传特性和培养条件有关
对数生长期 (Exponential phase )
微生物的生长速率最大，并且是个常数
细菌生长曲线（growth curve）
1. 微生物群体生长 （Population Growth）
生长：微生物生长包括个体体积的增加及细胞数量 的增多 生长速率（Growth rate）是指单位时间内细胞数量或 质量增加的量 从一个细胞变成两个细胞的时间间隔称代时 （generation time）
细菌生长曲线
2.细胞内开始积累储藏物，如肝糖、异染颗粒、脂肪 粒等。
3.大量积累代谢产物，如放线菌发酵形成大量抗生素。 在生产上可通过补料，调节pH与温度等措施,延长稳 定期，以积累更多的代谢产物。 4.大多数芽孢细菌在此阶段形成芽孢。
四、衰亡期（decline phase） 细菌死亡率逐渐增加，以致死亡数大大超过新生数， 群体中活细菌的数目急剧下降，出现“负生长”，此阶 段叫衰亡期，又称死亡期。
同步生长能否无限的维持下去？
由于同步群体内细胞个体之间的差异，同步生长 不能无限的维持，往往会逐渐破坏，最多能维持 2～3 个世代后，群体内的各个细胞个体就会因为生长周期 的代时差异而处于不同的生长阶段，出现非同步生长。
细菌的同步生长与非同步生长
第四节 环境因素对微生物生长的影响
微生物的生长受到它们所处环境理化因素的极大影 响。了解环境因素对微生物生长的影响，有助于说明微 生物在自然界的分布，还可帮助我们采用相应的方法控 制微生物的活动。
特点： 1.死亡期中有一段时间, 活菌数按几何级数下降, 称 为“对数死亡阶段”。
2.菌体细胞产生或释放出一些产物。如氨基酸、转化 酶、抗生素等。 3.菌体细胞有的开始自溶，有的呈现多种形态,有的 产生畸形，细胞大小悬殊，有的细胞内多液泡，有的 细胞革兰氏反应阳性变成阴性反应等。
第二节 连续培养
温 度
温度是影响微生物生长的一个重要因子。 每种微生物都有3种基本温度。 最低生长温度：低于这个温度以下不再生长。 最适生长温度：在此温度时生长速度最快。 最高生长温度：在此温度以上不可能生长。
微生物按其生长温度范围可分为三类： 低温微生物、中温微生物、高温微生物。
微生物的三种类型(温度）
低温的应用?
干 燥
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细菌生长曲线测定生05 边晔 2010030026周四班同组成员：徐竞吴国梁夏川两位学弟实验时间 2012年11月29日一、实验目的1.了解细菌生长曲线特征，测定细菌繁殖的代时2.学习液体培养基的配制以及接种方法3.反复练习无菌操作技术4.了解不同细菌，不同接种方法在同一培养基上生长速度的不同5.掌握利用细菌悬液混浊度间接测定细菌生长的方法二、实验原理将一定量的菌种接种在液体培养基内，在一定的条件下培养，可观察到细菌的生长繁殖有一定规律性，如以细菌活菌数的对数做纵坐标，以培养时间做横坐标，可绘成一条曲线，称为生长曲线。
单细胞微生物发酵具有4个阶段，即调整期（迟滞期）、对数期（生长旺盛期）、平衡期（稳定期）、死亡期（衰亡期）。
生长曲线可表示细菌从开始生长到死亡的的全过程动态。
不同微生物有不同的生长曲线，同一种微生物在不同的培养条件下，其生长曲线也不一样。
因此，测定微生物的生长曲线对于了解和掌握微生物的生长规律是很有帮助的。
测定微生物生长曲线的方法很多，有血细胞计数法，平板菌落计数法，称重法和比浊法。
本实验才用比浊法，由于细胞悬液的浓度与混浊度成正比，因此，可以利用分光光度计测定菌悬液的光密度来推知菌液的菌液的浓度。
将所测得的光密度值（OD600）与对应的培养时间做图，即可绘出该菌在一定条件下的生长曲线。
注意，由于光密度表示的是培养液中的总菌数，包括活菌和死菌，因此所测生长曲线的衰亡期不明显。
三、实验仪器、材料和用具大肠杆菌，枯草杆菌，金黄色葡萄球菌菌液及平板；培养基(100mL/250mL三角瓶X10瓶/大组)，牛肉膏蛋白胨葡萄糖培养基；取液器(5000ul, 1000ul 各一支)；培养箱，摇床，722s分光光度计；比色皿3个+共用参比杯一个。
四、实验步骤1.准备菌种（已做）：将细菌接种到牛肉膏蛋白胨葡萄糖三角瓶培养基中，37℃振荡培养18h，另外准备单菌落平板各1块；2.接种，分成3小组做，实验结果共享：第（1）小组1)取1.0ml大肠杆菌菌液接种到100ml培养基，37 ℃ 200rpm2)取2.0ml大肠杆菌菌液接种到100ml培养基，37 ℃ 200rpm3)取4.0ml大肠杆菌菌液接种到100ml培养基，37 ℃ 200rpm第（2）小组4)取1.0ml金黄色葡萄球菌接种到100ml培养基，37 ℃ 200rpm5)取1.0ml金黄色葡萄球菌接种到100ml培养基，37 ℃ 110rpm6)取1.0ml金黄色葡萄球菌接种到100ml培养基，30 ℃ 200rpm第（3）小组7)取一个大肠杆菌菌落接种到100ml培养基，37 ℃ 200rpm8)取1.0ml大肠杆菌菌液接种到100ml培养基，37 ℃ 110rpm9)取1.0ml大肠杆菌菌液接种到100ml培养基，30 ℃ 200rpm每培养一小时取样一次(2.5h,3.5h加测1次)。
对照组测量起始pH，所有瓶子测量发酵9h结束测pH。
注意全班同时取样，同时开始振荡，取样期间时间不算。
发酵时间7小时。
3.测量：取500ul培养液到2000ul自来水中，以自来水为对照，测OD600；注意固定参比杯和每个比色皿；固定取样器；固定波长；固定一台分光光度计；零小时也要测，把结果填入下表。
表1. 生长曲线OD600值123456789五、实验结果与讨论1.数据1)第一组a) 1.0ml大肠杆菌,37 ℃ 200rpmb) 2.0ml大肠杆菌,37 ℃ 200rpmc) 4.0ml大肠杆菌,37 ℃ 200rpm一个大肠杆菌菌落，37 ℃ 200rpm1.0ml大肠杆菌，37 ℃ 110rpm1.0ml大肠杆菌，30 ℃ 200rpm表2. 第一组生长曲线OD600值注：由于5:15-5:30没有开摇床，故往后顺延15min，下同。
2)第二组d) 1.0ml金黄色葡萄球菌，37 ℃ 200rpme) 1.0ml金黄色葡萄球菌，37 ℃ 110rpmf) 1.0ml金黄色葡萄球菌，30 ℃ 200rpm3)第三组g)一个大肠杆菌菌落，37 ℃ 200rpmh) 1.0ml大肠杆菌，37 ℃ 110rpmi) 1.0ml大肠杆菌，30 ℃ 200rpm4)pH2.OD曲线的绘制1)第一组a) 1.0ml大肠杆菌菌液,37 ℃ 200rpmb) 2.0ml大肠杆菌菌液,37 ℃ 200rpmc) 4.0ml大肠杆菌菌液,37 ℃ 200rpm图1 第一组生长曲线2)第二组d) 1.0ml金黄色葡萄球菌，37 ℃ 200rpme) 1.0ml金黄色葡萄球菌，37 ℃ 110rpmf) 1.0ml金黄色葡萄球菌，30 ℃ 200rpm图2 第二组生长曲线3)第三组g)一个大肠杆菌菌落，37 ℃ 200rpmh) 1.0ml大肠杆菌，37 ℃ 110rpmi) 1.0ml大肠杆菌，30 ℃ 200rpm图3 第三组生长曲线3.代时计算根据表2中的数据，做lgOD-t函数。
1)第一组图4 第一组lg(OD600)-t 曲线2)第二组图5 第二组lg(OD600)-t 曲线3)第三组图6 第三组lg(OD600)-t 曲线图4,5,6中取直线部分，用公式： G＝（t1-t2）/[(lgW1-lgW2)/lg2]来计算各瓶的代时。
计算结果见表7。
表7. 各发酵条件下的代时组号t1/h t2/h lgOD600 lgOD600 代时G/mina 1 2.5 -1.823909-0.82102327.01474b 1 2.5 -1.72125-0.7304927.34537c 1 2.5 -1.67778-0.7212528.32394d 2 4 -1.01323-0.3819557.22278e 2 3.5 -1.27572-0.6143940.96699f 2 3.5 -0.97469-0.3893446.28462g 2 3.5 -1.35655-0.5482133.51647h 1 3 -1.65758-0.3968628.65315i 1 4 -2.1549-0.3615130.21393由上表可以看出大肠杆菌代时短于金黄葡萄球菌，但是也有一些数据不太合理，比如说d 组，其数值与同一组相比差距很大，且不符合预期，这可能是由以下原因造成的：i.人为误差。
我们是分组实验，无论是取样稀释，还是测量OD600时，都存在个人操作上的差异，所以实验数据有一些随机波动。
尤其是在取样的过程中，吸取菌液的位置不同，会对结果产生较大影响。
ii.实验方法误差。
我们是采取隔一个小时或者半个小时测量一个点的OD值，没有实时监控，所以做出来的曲线会有差异。
另外，由于我们每隔一段时间就停止摇床，开始取样，这样干扰了细菌的生长，导致了生长周期的改变。
并且，使用OD值来代表菌体的量的改变误差比较大，死亡的菌体，培养基的变化等都会影响到样品的OD值，我们没有办法得到真实的细菌浓度。
另外本次实验有个重大的问题，就是有15分钟摇床没有开启，大约在2.5h的时候，而此时正是细菌生长最旺盛处于对数期的时候。
4.不同因素对于生长曲线的影响1)接种量图7 第一组生长曲线由图7可以看出，虽然三组几乎同时达到顶峰，但是c最先进入对数期，a最晚进入，说明接种量在一定范围内增大，能缩短延迟期。
2)菌液接种和固体平板接种图8 菌液与菌落接种大肠杆菌生长曲线由图8可以看出，菌落接种要比另外三组更晚进入对数期，将其数据与同样条件下的菌液接种（第一组实验结果）进行对比，发现菌落接种确实造成较长的延迟期。
这可能是因为大肠杆菌从固体培养基环境移动到溶液环境需要较长时间适应，而液体的接种只需要适应不同的培养基成分和浓度即可。
3)摇床转速图9 第二组生长曲线由图9可以看出，d(1ml金黄色葡萄球菌，37 ℃,200rpm)与e(1ml金黄色葡萄球菌，37 ℃,110rpm)相比仅转速不同，d较早进入对数期。
说明在一定范围内，提高转速，有利于细菌生长。
这是因为增加转速能提高溶氧量。
但是转速也有一定限度，转速过高，会使细胞破裂。
不过摇床不是离心机，应该问题不大。
4)温度由图9可以看出，d(1ml金黄色葡萄球菌，37 ℃,200rpm)与f(1ml金黄色葡萄球菌，30 ℃,200rpm)相比，d温度较高，但似乎要慢于f，但是差别不大。
可能是实验中有其它因素干扰。
但理论上讲，温度影响细菌细胞内酶的活性，会影响细菌的新陈代谢，一定范围内升高温度有助于尽快进入对数期。
不过也可能是因为30 ℃比37 ℃更接近于金黄色葡萄球菌的最适生长温度。
六、思考题1.为什么可用比浊法来表示细菌的相对生长状况？细胞悬液的浓度与混浊度成正比（lambert-beer公式）因此，可以利用分光光度计测定菌悬液的光密度来推知菌液的菌液的浓度，从而在一定程度上反应细菌的相对生长状况。
但是需要注意的是吸光度所指示的为培养瓶内的菌体总含量，而非瓶内的活菌量，所以在生长曲线中并没有明显的死亡期。
2.生长曲线中为什么会有平衡期和死亡期？平衡期：由于本次实验所使用的培养环境为封闭式的培养环境，中间没有加料，所以随着营养物质的消耗，代谢产物的积累和pH等环境因素的变化，培养基内环境不再适于细菌的生长繁殖，从而导致细菌的净生长速率逐渐接近于零，单位时间内细菌二分裂增加的细胞数量接近于细菌死亡的细胞数量，从而使生长进入平衡期（总菌量基本不变）。
这时，死亡细胞数和繁殖细胞数处于平衡状态，细胞总数将处于稳定状态。
死亡期：平衡期后如果继续培养，细胞总数不再稳定，由于培养基中营养物质和氧气的消耗不利于细菌繁殖，并且细菌开始合成次级代谢产物，影响培养基的PH或者造成培养基的毒性等，对细菌的生存有害，死亡细胞数将逐渐增加，死亡速度超过繁殖速度，使进入死亡期。
3.什么条件下接种为宜？液体种子比固体种子有什么优越性？通过本次实验，我们可以看到，接种量、接种方式和培养条件（溶氧量和温度等）对细菌调整期的长短，细菌的代时即生长速度均有非常关键的影响。
只有在采取最佳接种方式和接种量，在该菌种最适条件下进行培养，才能使得细菌迅速渡过调整期，并快速进行生长繁殖。
最适宜的接种菌种应该是处在生长曲线的对数区的菌液。
此时细菌已经度过调整期，生长繁殖最为旺盛，生命力最强大，各种分解和合成代谢反应都被充分激活，对环境有最强的适应能力。
从实验结果可知，在细菌的最适温度、溶氧条件下，接种适当数量的对数期液态种子最好。
液体种子相比于固体种子，调整期短很多，可以快速进入对数期，工业生产周期短，设备利用效率高。
原因如下：液体种子所含细菌易于扩散和分布到培养基中，如采用固体种子，可能会使接种环上附着的菌体不能完全进入液体培养基中，而且固体种子在培养基中不宜均匀分散。
用液体种子向液体培养基中接种，特别是如果接种前后培养基的成分和培养条件一致，则细菌前后的生活环境基本相同，调整期很短，而固体种子接种则由于环境变化比较大，调整期较长。