临床生化检验与生化试剂
临床生化检验基础知识培训
临床生化检验基础知识培训一、生化基础知识二、生化仪器基础知识三、部分生化项目的临床意义本文档仅供生化应用工程师参考阅览，更多专业知识请查阅后附参考文献。
肖自强2014-3-19一、生化基础知识1.1生化诊断试剂盒为由一定的化学品或者酶类组成的多成分混合试剂（Reagent），最终以水溶液的方式与待测物发生一系列化学或者生化反应，通过生成物或反应物中某物质的吸光度变化，测量待检测物中某种特定物质的含量。
1.2生化诊断试剂用于检测样本，包括：人体血清（主要）、血浆及尿液中的各种酶类和代谢产物，用于预测，诊断以及治疗监测，协助临床医生诊治疾病提供数据参考。
1.3按功能分为：肝功、血脂、肾功、心肌、代谢、免疫&风湿、离子&其他。
1.4试剂性能评价指标：1 试剂外观2批间差3准确度4精密度5线性（灵敏度）6抗干扰能力（特异性）7稳定性1.5试剂检测原理（朗伯比尔定律）：A=Kbc式中，A 为吸光度;K 为吸收系数，是与入射辐射的波长及吸收物质的性质有关的常数;b为液层厚度，单位为cm;c 为吸收物质的浓度。
当浓度的单位为mol/L 时，K 的单位为L/mol·cm，称为摩尔吸收系数，通常用ε表示。
摩尔吸收系数ε表示物质对某一波长的辐射的吸收特性。
ε愈大，表示物质对某波长辐射的吸收力愈强，因而分光光度法测定的灵敏度就愈高.1.6理论值与实测值偏差的解释：实测值偏离了朗伯比尔定律。
偏离Lambert-Beer定律的因素：1复合光对Beer 定律的偏离：吸收定律要求入射光为单色光，而分光光度计单色光的纯度主要决定于色散元件及光路设计，即使高精度的仪器，也得不到纯单色光，而是波长宽度的复合光，其结果导致偏离Lambert Beer 定律。
2杂散光的影响：杂散光(stray light) 是进入检测器待测波长以外的光。
主要来源于仪器色散元件表面的散射、单色器内壁尘埃等。
3狭缝宽度的影响：单色器设有进、出口狭缝，狭缝愈窄，单色光愈纯，吸光度增加，但辐射能减小，对弱吸收带的测量有一定影响。
《临床生物化学和生物化学检验》
《临床生物化学和生物化学检验》理论教学大纲(供五年制检验本科用)医学检验系《临床生物化学和生物化学检验》教学组2007-01-01前言《临床生物化学和生物化学检验》（第三版）为供医学检验专业用的全国高等医药教材建设研究会规划教材、全国高等医药院校教材。
主编为周新教授（武汉大学医学院）与涂植光教授（重庆医科大学），参与编写本版教材的共有12所高等学校的14位教授。
编写宗旨：适应科学技术的发展和21世纪医学检验教育的需要，力争达到医学检验系本科生的培养目标要求。
教材的编写思路是：突出基本理论、基本知识、基本技能，便于教与学；也注意反映学科发展和教学改革成果，适当介绍本学科及相关学科的新进展，有利于培养学生的创新思维和实践能力。
与第二版比较，本版教材作了较大的更动和补充。
新增了四章，删去了已经另有教材的诊断分子生物学和实验室管理章节，并对原有的章节进行了较大的修改更新。
各章最后均有“小结”，旨在帮助学生掌握该章重点。
书末还附有主要参考文献、汉英和英汉索引，便于教师和学生查阅，以及深入了解有关的详细内容。
全书分为二十章：绪论、临床生物化学实验室基本技术与管理、血浆蛋白质以及非蛋白含氮化合物的代谢紊乱、糖代谢紊乱、血浆脂蛋白及其代谢紊乱、诊断酶学、微量元素与维生素的代谢紊乱、体液平衡与酸碱平衡紊乱、肝胆疾病的生物化学诊断、肾脏疾病的生物化学诊断、心脏疾病的生物化学诊断、胃肠胰疾病的临床生物化学、骨代谢异常的生物化学诊断、红细胞代谢紊乱、内分泌疾病的生物化学诊断、神经、精神疾病的生物化学、妊娠的临床化学、体液肿瘤标志物、治疗药物浓度监测、自动生物化学分析仪的应用与原理。
《临床生物化学和生物化学检验》课程介绍《临床生物化学及其检验》是高等医学检验专业的核心课程，是介于基础医学和临床医学的桥梁学科之一。
本课程是在人体正常的生物化学代谢基础上，研究疾病状态下生物化学病理性变化的基础理论和相关代谢物的质与量的改变，进一步从生物化学代谢和分子水平，认识疾病发病机制，从而为疾病的临床实验诊断、治疗监测、药物疗效和预后判断、疾病预防等方面提供信息和决策依据的一门学科。
临床生化检验试剂盒性能评价试验线性范围试验
临床生化检验试剂盒性能评价试验线性范围试验线性范围是指在一定的浓度范围内，检测结果与样本浓度之间呈线性关系的范围。
线性范围试验的目的是确定试剂盒的线性范围及其上下限。
线性范围的确定对于准确测量样品浓度非常重要，因为如果超出了线性范围，测量结果将不准确。
试验前需要准备一系列不同浓度的样品，通常使用稀释法制作。
然后依次使用这些样品进行检测，记录每个样品的测量结果。
在绘制一个标准曲线时，可以将样品的测量结果作为纵坐标，样品的浓度作为横坐标，在纸上标出一系列点，并通过这些点拟合一条直线。
这条直线称为标准曲线。
标准曲线的斜率和截距可以反映试剂盒的灵敏度和误差。
斜率表示单位浓度变化时，测量值的变化情况，斜率越大，灵敏度越高。
截距表示零浓度时的测量值，截距越小越接近零浓度。
通过分析标准曲线的相关系数可以评估试剂盒的线性程度。
相关系数越接近1，线性程度越好。
一般认为，相关系数超过0.99，即可认为试剂盒满足线性要求。
在进行线性范围试验时需要注意以下几个方面：1.样品浓度的选择：应根据所测定物质的生理浓度范围来选择样品浓度，以保证测试的实用性。
2.样品的制备与存储：样品的制备应精确控制，避免因稀释或浓缩不准确而影响试验结果。
样品的存储应避免长时间曝光于大气中，以免发生化学反应导致样品浓度的变化。
3.试剂盒的选择：应根据所测定物质的特性和预期的分析结果，选择适宜的试剂盒进行测试。
4.试剂盒的操作：应按照试剂盒说明书的要求进行操作，严格控制操作步骤和时间，以减少试验误差产生的可能性。
5.数据处理和分析：应根据所测定物质的特性和测量结果，采用适当的统计方法进行数据处理和分析，并在数据分析报告中详细说明试验设计、方法和结果。
通过进行线性范围试验，可以确定试剂盒的线性范围及其上下限，为临床生化检验提供可靠的测试数据，为临床诊断提供准确的参考依据。
同时，线性范围试验还可以评估试剂盒的稳定性和重复性，为试剂盒的质量控制提供参考依据。
临床常用生化检验项目参考区间 第4部分
临床常用生化检验项目参考区间第4部分摘要：一、引言二、临床生化检验项目概述1.常规生化检验项目2.特殊生化检验项目三、参考区间及其意义1.参考区间的定义2.参考区间的应用3.参考区间的划分四、我国常用生化检验项目参考区间标准1.血清生化指标参考区间2.尿液生化指标参考区间3.唾液生化指标参考区间五、临床应用实例1.血清生化指标在疾病诊断中的应用2.尿液生化指标在疾病诊断中的应用3.唾液生化指标在疾病诊断中的应用六、检验结果的解读与分析1.单一指标异常的解读2.多项指标异常的解读3.异常结果的临床意义七、检验过程中的质量控制1.样本采集与处理2.仪器与试剂的选择3.检验操作规范八、总结与展望正文：一、引言临床生化检验是现代医学诊断和监测疾病的重要手段之一。
众多的生化检验项目为临床医生提供了丰富的诊断依据。
然而，如何正确理解和应用这些检验结果，避免误诊和漏诊，成为了临床医生关注的问题。
本文将对临床常用生化检验项目参考区间进行详细阐述，以期为广大临床工作者提供参考。
二、临床生化检验项目概述1.常规生化检验项目常规生化检验项目包括血清生化指标、尿液生化指标和唾液生化指标等。
这些指标可以反映人体器官和系统的功能状态，为临床诊断提供依据。
2.特殊生化检验项目特殊生化检验项目包括免疫生化、酶学、遗传代谢等方面，具有较高的专业性和针对性。
特殊生化检验项目的应用有助于临床医生对疾病进行精准诊断。
三、参考区间及其意义1.参考区间的定义参考区间是指在正常人群中，某一生化指标的分布范围。
合理的参考区间有助于临床医生判断检验结果的异常与否。
2.参考区间的应用参考区间在临床检验中具有重要意义，可以帮助医生识别异常指标，进一步进行疾病诊断和治疗。
3.参考区间的划分划分参考区间时，需充分考虑年龄、性别、生活习惯等因素，以确保检验结果的准确性。
四、我国常用生化检验项目参考区间标准1.血清生化指标参考区间血清生化指标包括血糖、血脂、肝功能、肾功能等。
(整理)检验医学专业实验IV临床生物化学检验部分
自动生化分析仪实际K值测定实际K值：理论K值受样品和试剂的加量准确度、比色杯光径准确度，尤其是ε的影响。
ε在波长和温度等不同时有所不同，故有必要获得用户所用分析仪的实际ε，再计算K值，此为~。
一、340nm波长实际K值测定【实验原理】：通过有NAD+（NADP+）参与的反应途径，用NADH或NADPH标准液来校正仪器。
用己糖激酶（HK）方法测定葡萄糖时，葡萄糖的消耗与NADH的生成呈等摩尔关系。
葡萄糖有标准纯品，当反应达到终点时，NADH的摩尔数等于标准的葡萄糖摩尔数。
在需要校正的仪器上测其A即可求得实际摩尔吸光系数，计算出实际K值。
【注意事项】1．减少偶然误差重复测定10次，当CV>5％时，则重新测定10次。
2．减少系统误差使用实际K值计算酶活性。
3．如果实际ε值与理论ε值偏差过大，需对仪器检修和校正。
二、405nm波长实际K值测定【实验原理】：许多酶活性测定时，以人工“色素原”为底物，经酶作用后可释放出在405nm 波长具有吸收峰有色的反应产物，如对硝基苯酚(4-NP)、对硝基苯胺(4-NA)、对硝基-5-氨基苯甲酸(ANBA)。
他们在405nm波长时的理论ε分别为18 700、9 870、9 490。
可使用其相应的纯标准品在需要校正的仪器上测其A即可求得实际ε，计算出实际K值。
以ALP实验(产物为4-NP) 为例测定实际K值。
【注意事项】1．4-NP标准品纯度要求较高，必要时需纯化。
2．其他注意事项参见340nm K值校正。
三、如何校正K值在理论K值或实际K值得情况下，测定某标准品的含量，若测得的结果偏低，则需要把测得的结果调整至原标准品的含量，此时调整的数值称为校正因子，则校正K值=理论（实际）K值×校正因子=理论（实际）K值×校准值÷实测值NADH正负向反应测定酶活性一、血清乳酸脱氢酶测定LD催化反应式为：L-乳酸+ NAD+（LD）→丙酮酸+ NADH + H+在反应过程中，乳酸被氧化生成丙酮酸，同时NAD+还原为NADH。
临床生化检验的质量控制措施
汇报人：日期:•样品采集与处理•仪器设备与试剂•实验室内质量控制目录•实验室间质量控制•临床生化检验的质量管理•相关问题及解决方案样品采集与处理•空腹采集：生化检验一般要求受检者空腹采集样品，以避免饮食对检测结果的影响。
- 规范采集流程：采集样品时，应按照规定的采集流程进行，如消毒、采血等步骤。
- 采集部位选择：采集血液样品时，应选择肘静脉等部位进行采集，避免选择有炎症或损伤的部位。
•及时处理：采集的样品应尽快进行处理，以避免样品变质或污染。
- 专业处理：处理样品时应采用专业的方法和技术，以确保样品的质量和完整性。
- 标识与记录：处理样品时应进行标识和记录，以便于后续的追踪和管理。
样品储存与运输•储存条件：样品应存放在适当的容器中，并按照规定的条件进行储存，以避免样品变质或污染。
- 运输方式：运输样品时应选择适当的运输方式，以确保样品的质量和完整性。
- 记录与追踪：运输过程中应对样品进行记录和追踪，以确保样品的准确性和可靠性。
仪器设备与试剂仪器校准在每次实验前，对仪器进行校准，确保仪器处于良好的工作状态，从而保证实验结果的准确性。
仪器维护定期对仪器进行保养和维护，及时发现并解决潜在问题，延长仪器设备的使用寿命。
选择合适的仪器设备根据实验室的需求，选择符合精度要求的仪器设备，同时要考虑到仪器的稳定性、重复性以及可靠性。
仪器设备选择与仪器设备相匹配、质量可靠的试剂，确保实验结果的准确性。
选择高质量的试剂试剂储存试剂更换根据试剂的特性选择合适的储存条件，如温度、湿度等，确保试剂的有效性和稳定性。
定期更换试剂，避免因试剂过期或失效导致实验结果的不准确。
030201试剂选择与使用根据仪器设备的规定，定期进行校准，确保仪器设备的准确性和稳定性。
定期校准校准证明是证明仪器设备准确性和稳定性的重要依据，应妥善保管。
校准证明记录仪器的维修情况及维修后的使用情况，以便追踪和管理。
维修记录仪器校准与维护实验室内质量控制应选择与患者样本相似基质、处于正常参考范围上限的冻干质控血清或干粉质控品。
临床生化检验个人总结范文
临床生化检验个人总结范文引言临床生化检验是临床医学中非常重要的一项辅助检查技术，通过对血液、尿液、体液等样本中各种生物化学指标的定量测定，可以为医生提供重要的诊断依据和治疗监测。
在我参与的临床生化检验工作中，深切感受到了其重要性和对患者诊疗过程的支持作用。
下面将对我在临床生化检验方面的个人经验进行总结与反思。
临床生化检验工作的重要性临床生化检验对于患者的诊断和治疗起到了至关重要的作用。
通过对患者血液中的生化指标如血糖、肝功、肾功、血脂等进行测定，可以帮助医生准确了解患者的体内代谢状况，从而为病情判断和治疗方案的制定提供科学依据。
例如，通过测定血糖水平，可以判断患者是否患有糖尿病，并根据测定结果调整患者的降糖治疗方案。
同时，临床生化检验还可以对治疗效果进行监测，帮助医生及时调整治疗方案，提高患者的治疗效果。
个人经验总结与反思在我参与的临床生化检验工作中，主要负责测定血糖、肝功、肾功等重要生化指标。
通过这段时间的工作，我积累了一定的经验和感悟，并对自己的工作进行了反思。
首先，在临床生化检验中，准确性是至关重要的。
生化检验结果的准确性直接关系到患者的诊疗过程及结果。
因此，我们在进行样本采集、标本处理、试剂配制等环节时，一定要严格按照操作规范进行操作，确保结果的可靠性和准确性。
同时，在结果的解读和报告中，也要保持严谨的态度，避免出现错误的诊断判断。
其次，团队合作是保证临床生化检验工作顺利进行的重要保障。
临床生化检验往往涉及多个环节，包括采样、标本运送、样本处理、数据分析等。
在这个过程中，多个环节的衔接和协作是至关重要的。
因此，在工作中，我始终与实验室其他成员保持良好的沟通和合作，及时协调解决问题，保证工作的顺利进行。
再次，持续学习和提升是我在临床生化检验工作中的重要心得。
临床生化检验领域的知识和技术日新月异，仅仅掌握基本的业务知识是远远不够的。
因此，我始终保持学习的态度，通过参加学术讲座、阅读相关文献和与他人交流等方式，不断更新自己的知识储备和技术水平。
医学生化临床检验
激素
甲状腺激素、肾上腺皮质 激素等，评估内分泌功能， 异常提示各种内分泌疾病。
03
生化检验的质量控制
检验前质量控制
样本采集
确保采集的样本符合要求， 避免采集过程中的污染和 误差。
样本处理
尽快处理样本，避免样本 变质或降解，影响检验结 果。
仪器校准
确保生化检验仪器准确性 和稳定性，定期进行校准 和维护。
α-羟丁酸脱氢酶（αHBDH）
反映心肌损伤程度，升高提示 心肌梗死、心肌炎等心肌疾病 。
其他生化指标
01
02
03
电解质
钾、钠、钙、磷等，评估 体内电解质平衡，异常提 示各种电解质失衡相关的 疾病。
血气分析
pH值、PaO2、PaCO2等， 评估呼吸功能和酸碱平衡 状态，异常提示呼吸衰竭、 酸碱平衡紊乱等疾病。
自动化和智能化
应用机器人技术、人工智能等手段， 实现生化检验的自动化和智能化，提 高检测效率和准确性。
无创检测技术
开发无创或微创的检测技术，减少患 者痛苦，提高患者体验。
个性化检测
根据患者个体差异，开展个性化检测， 为患者提供更精准的诊断和治疗方案。
与其他医学检验的整合与互认
1 2
整合各类检验项目
目的
临床生化检验主要用于疾病的诊断、 治疗监测、预防和评估健康状况，为 医生提供科学依据，辅助制定治疗方 案。
检验方法与技术
检验方法
包括化学分析法、光谱分析法、 电化学分析法、免疫分析法等。
技术
涉及自动化技术、生物技术、纳 米技术等，以提高检测的灵敏度 、特异性和准确性。
检验流程与注意事项
流程
包括样本采集、处理、运输、检测和结果分析等步骤。
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反应到达终点后与起始点（空白）的吸光度差与相同条件下用校正液测 得的结果比较取得结果的方法。试剂与样本反应之前的吸光度在某一定的水 平，开始反后，在主波长下出现一个最大的吸光度，得到一个较明显的吸光 度的落差，所以通过标准品吸光度变化值可以限定其它样本的浓度。终点 法中的反应时间是指开始反应后，试剂与反应物反应到达一定的稳定点，试 剂与反应物不再反应，吸光度不再随时间的变化而发生改变，既到达了反应 平衡。其间所要的时间就是反应时间。在反应时间进程曲线上为与x轴平行 线区段。如血象和Βιβλιοθήκη 瘤细胞学的普查等临床生化检验
临床生物化学，即采用生物化学分析方法，对临床标本进行 定性或定量分析，以辅助临床诊断； 临床生化常用的检测方法： ➢ 化学比色法：待测物经特定的化学反应生成的一定的产物，
在特定波长光照下具有吸收峰，待测物的浓度与吸光度成 正比，从而对物质进行定量检测方法 ➢ 免疫比浊法：抗原抗体在特殊缓冲液中快速形成复合物， 使反应液出现浊度。当反应液中保持抗体过剩时，形成的 复合物随抗原量增加而增加，浊度亦增加。然后检测透 （散）射光强度，即透（散）射比浊 ➢ 离子选择性电极电位法：通过检测电极表面电位的改变， 比较测定电极与参比电极表面电位变化的差值大小来计算 样本中离子的含量。如，钾、钠、氯的测定 ➢ 电泳法：直流电场中，带电粒子向相反电极移动，血清中 的蛋白质为双性离子，在碱性环境中带负电荷，在电场中 向正极移动。不同蛋白具有不同大小、分子量和电荷，带 电荷多，分子量小则泳动快，反之则慢，从而将不同蛋白 分离。如:血清蛋白电泳
~ 780nm
2.5 m ~ 50 m
50 m ~300 m
光学光谱区
光吸收基本定律: Lambert-Beer定律
Lambert－Beer定律时讨论溶液吸光度同溶液浓度和溶液层 厚度之间关系的基本定律，该定律时分光分析的理论基础。
A=lg(I0/It)=kbc
吸光度
介质（溶液层）厚
度(cm)——光径
K为比例常数，C为溶液浓度
（当液层厚度为cm，浓度单位为mol/L时，吸光系数K称为摩尔吸光系
数ε。ε的意义是：当液层厚度为1cm，物质浓度为1mol/L时在特定波长
下的吸光度值。ε是物质的特征性常数）
Lambert-Beer定律适用于可见光、紫外光、红外光和均匀 非
散射的液体
吸光度与浓度的关系 A = bc
二 全自动生化分析仪
自动生化分析仪：
集添加试剂、注入样本、比色、计算、出报告等功能于 一体，用于检测生化项目的计算机控制的自动化仪器。
国内使用的主要品牌：
日本：日立（HITACHI） 7020，7060，7080，7170，7180， 7600
奥林帕斯（OLYMPUS），AU400,640, 800,1000，2700,5400 岛津（SHIMADZU），CL7200,8000 东芝（TOSHIBA），TBA40FR,120FR 希森美康（SYSMEX）；180 京都1024魅力系列 美国：雅培（ABBOTT），AerosetC8000，2000 德灵（杜邦）（DADE BEHRING），AR,RXL,XPAND 贝克曼库尔特（BECKMAN COULTER），CX4,5,7,9,LX20 德国：拜尔（BAYER）ADVIA1650,2400；罗氏（ROCHE） 利霸欧宝S-600；康宁560 国内：深圳迈瑞，沈阳东软、南京英诺华,上海科华 其他：荷兰的威图、意大利的BT2000/3000、西班牙的A30等。
自动生化分析仪应用原理：分光光度法
分光光度技术是利用物质的分子对光的选择性吸收作用对物质进行定性或定 量分析的技术。分光光度法是光谱分析技术中最常用的一种，应用最多的是紫 外－可见光分光光度法
远紫外 近紫外 可见 近红外 中红外 远红外
10nm~200 nm
200nm ~380nm 380nm
780 nm ~ 2.5 m
临床生化检验与生化试剂
临床检验在医学中的作用
➢为准确诊断、及时治疗提供依据：
如：肾脏有实质性损伤：尿液中出现蛋白、细胞管型 贫血(症) ：血中红细胞和血红蛋白量减少 白血病： 血象和骨髓象
➢为分析病情、观察疗效、判断预后提供依据：
在疾病过程中，血液、体液、分泌物和排泄物也会随之 发生相应的变化
➢为预防疾病提供资料
生化分析基本测定方法
▪ 连续监测法（速率法）：
即连续监测反应过程，按产物的生成或底物的消耗的速度(△A/min)进 行定量分析的方法，读数点必须在等速区对低浓度的样本，它的吸光度随时 间变化的慢（速率低），而高浓度样本，它的吸光度随时间的快（速率 高）。在反应时间进程曲线上为反应呈恒速区段(斜率保持不变)，常用于酶 活性线性反应期测定或以酶为工具测底物（代谢物）的浓度。
实时反应曲线
（1）延迟区： delay time,lag time； （2）等速区： 斜率相等的线性段； 连续检测法在此区 读数 （3）过渡区： 两点固定时间法， 在此在此区读数 （4）平衡区： 终点法在此区读数
典型的全自动自动生化分析仪
基本结构
样品(Sample)系统：
校准品、质控品和病人样品盘。由样品装载、输送和分配等装置组成。
试剂(Reagent)系统：
一般由试剂储放（试剂盘）和分配加液装置组成；
条形码(Barcode)识读系统 ：条码试剂 反应系统 ：
反应盘-反应转盘比色杯（Cuvettes）；恒温控制装置 ；蠕动泵(Pump) ；回旋搅拌 混合装置
清洗(Wash)系统：
碱性洗液，酸性洗液，去离子水清洗-防止交叉污染
吸光度
0.00
光源
检测器 吸光度
0.22
b
检测器
吸光度 b
0.42
光源 光源
检测器
一般对一个新的试剂来 说，总是先做标准品定标 （校准），再进行相应的 样本检测。
多点定标和一点定标： 通过多个浓度有一定梯
度的标准液来定标（校 准），规范出标准曲线的 一定的趋势，以此来得到 浓度与吸光度的函数。多 点定标大多用于非线性校 准，得到的标准曲线一般 为二次函数的抛物线类型。 只用一个标准品来定标， 得到的函数为Y（浓度） =AX(吸光度)+B，是一条简 单的直线。