新第十一章：抗生素类药物的分析.ppt
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抗生素类药物的分析.ppt
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8
第二节 β–内酰胺类抗生素
S CH3
RCO HN 6
1
5
2
7 N4
3 CH3
O
COOH
母核（6-氨基青霉烷酸）
青霉素类
2019-10-13
感谢你的欣赏
9
S
RCO NH 7 6
1 2
N5
3
O
4
CH2R1
COOH
母核（7-氨基头孢菌烷酸）?
头孢菌素类
2019-10-13
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10
C2H5 2NCH2CH2OOC
2019-10-13
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48
（2）与三硝基苯酚反应
二苄基乙二胺
苄 星 青 霉 素Na OH 二 苄 基 乙 二 胺 三硝基△苯酚
2019-10-13
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49
CH2 COHN O
S N
CH3
CH3
CH2
CH2
COOH HNCH2CH2NH
[检查] 增加异常毒性、细菌内 毒素、热原、降压物质、无菌
2019-10-13
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5
二 质量分析的测定方法 （一）生物学方法
1 测定抗生素抑菌或杀菌的能力 优点 1、与临床效果一致 2、灵敏度高
3、干扰物质少
缺点 1、操作繁琐 2、培养时间长
2019-10-13
2、感测谢你的定欣赏 误差大
2019-10-13
感谢你的欣赏
13
CH2 COHN O
S CH3
N
CH3
COOH
NH2
C2H5 2NCH2CH2OOC
普鲁卡因青霉素
抗生素类药物的分析PPT课件
谱图中，供试品溶液主峰的保留时间应 与对照品溶液主峰的保留时间一致。
Ch.P（2005） HPLC、IR
（二）各种盐的鉴别
1. K+、Na+的反应 Na+ 焰色→鲜黄色
+ 醋酸氧铀锌→↓黄 焰色→紫色 K+ + 0.1%四苯硼钠 + Ac-→↓白
青霉素钠 Ch.P（2005） 【鉴别】（3）本品显钠盐的火焰反 应（附录 Ⅲ）。
青霉素钾 Ch.P（2005） 【鉴别】（3）本品显钾盐的火焰 反应（附录 Ⅲ）。
2. 旋光性 3. 紫外吸收特性 （1）青霉素分子的母核无吸收，侧 链有吸收 （2）头孢菌素分子的母核有吸收
4. -内酰胺环的不稳定性 -内酰胺环不稳定，与酸、碱、
青霉素酶、羟胺及某些金属离子等作 用，易发生水解和分子重排，导致失 去抗菌活性
二、鉴别试验
（一）显色反应 1. 羟肟酸铁反应 β-内酰胺类
2. 沉淀反应 （1）在稀盐酸中生成白色沉淀
在过量HCl或 有机溶剂中溶解
青霉素钠、青霉素钾 Ch.P（2000） 【鉴别】（2）取本品约0.1g，加水5ml
溶解后，加稀盐酸2滴，即生成白色 沉淀；此沉淀能在乙醇、醋酸戊酯、 氯仿、乙醚或过量的盐酸中溶解。
（2）有机胺盐的特殊反应 普鲁卡因青霉素可发生重氮化—偶 合反应
（3）C3位有游离羧基
2. 头孢菌素类
（1）侧链（RCO-）+母核（7-ACA）
（2）分子中含二个手性碳原子（C6、
C7）
RCO NH
S
侧链 O
N CH2R1
COOH
（3）C4位有游离羧基
（二）性质
1. 酸性及溶解性 青霉素和头孢菌素分子中有游离
Ch.P（2005） HPLC、IR
（二）各种盐的鉴别
1. K+、Na+的反应 Na+ 焰色→鲜黄色
+ 醋酸氧铀锌→↓黄 焰色→紫色 K+ + 0.1%四苯硼钠 + Ac-→↓白
青霉素钠 Ch.P（2005） 【鉴别】（3）本品显钠盐的火焰反 应（附录 Ⅲ）。
青霉素钾 Ch.P（2005） 【鉴别】（3）本品显钾盐的火焰 反应（附录 Ⅲ）。
2. 旋光性 3. 紫外吸收特性 （1）青霉素分子的母核无吸收，侧 链有吸收 （2）头孢菌素分子的母核有吸收
4. -内酰胺环的不稳定性 -内酰胺环不稳定，与酸、碱、
青霉素酶、羟胺及某些金属离子等作 用，易发生水解和分子重排，导致失 去抗菌活性
二、鉴别试验
（一）显色反应 1. 羟肟酸铁反应 β-内酰胺类
2. 沉淀反应 （1）在稀盐酸中生成白色沉淀
在过量HCl或 有机溶剂中溶解
青霉素钠、青霉素钾 Ch.P（2000） 【鉴别】（2）取本品约0.1g，加水5ml
溶解后，加稀盐酸2滴，即生成白色 沉淀；此沉淀能在乙醇、醋酸戊酯、 氯仿、乙醚或过量的盐酸中溶解。
（2）有机胺盐的特殊反应 普鲁卡因青霉素可发生重氮化—偶 合反应
（3）C3位有游离羧基
2. 头孢菌素类
（1）侧链（RCO-）+母核（7-ACA）
（2）分子中含二个手性碳原子（C6、
C7）
RCO NH
S
侧链 O
N CH2R1
COOH
（3）C4位有游离羧基
（二）性质
1. 酸性及溶解性 青霉素和头孢菌素分子中有游离
抗生素类药物分析 ppt课件
光谱图, max, min, E
,A
头孢氨苄 λmax = 262nm 青霉素V钠 A280nm/A264nm = 1.30～1.50
苯唑青霉素 苯唑青霉烯酸 A 2+ 339nm Cu
药学院药物分析教研室
PPT课件 36
H
S CONH N O CH 3 O N
CH 3 CH 3 COONa
变色酸
显色
30
（二）各种盐的反应 K+、Na+的火焰反应
+ Na
焰色→鲜黄色 + 醋酸氧铀锌→↓黄
焰色→紫色 + 0.1%四苯硼钠 + Ac→↓白
PPT课件 31
K+
药学院药物分析教研室
沉淀反应（青霉素盐） 遇酸→↓
青霉素钾 H 青霉素 白 青霉素钠
在过量HCl或 有机溶剂中溶解
药学院药物分析教研室
PPT课件 46
RCOHN O N
S
CH 3 CH 3 COOH
NaOH
第一步
S NH CH3 CH3
RCOHN Na OOC
COONa
第二步
4 I2 + 5 H 2 O + 2 HCl
CH COOH 2 C + 8 HI + 2 NaCl + CH 3 SO H NHCOR 3
2、 HPLC法
对照品 相同条件 比较t R 供试品
药学院药物分析教研室
PPT课件 42
三、检查
本类抗生素的杂质主要有高分子聚合物，有关物 质，异构体等，一般采用HPLC法控制其限量，也 有采用测定杂质的吸光度来控制杂质量的。此外， 有的还进行结晶性、抽针与悬浮时间等有效性试 验，部分抗生素还检查有机溶剂残留量。
第十一章 抗生素
8
5．变色酸-硫酸呈色反应 如阿莫西林加变色酸-硫酸试剂混合后， 于1500C加热2～3min，呈深褐色。 6．与重氮苯磺酸呈色反应 头孢菌素族7位侧链含有—C6H5—OH基 团时，能与重氮苯磺酸试液产生偶合反应， 显橙黄色。 7．与铜盐呈色 头孢氨苄加醋酸、硫酸铜、氢氧化钠试 液后，生成铜配位盐，显橄榄绿色。
40
l测定法
取本品适量，精密称定，加水溶解并 定量稀释制成每1ml中含0.1mg的溶液，精密量 取10ul注入液相色谱仪，记录色谱图；另取苯唑 西林对照品适量，同法测定。按外标法以峰面积 计算供试品中C19H19N3O5S的含量。
41
例2 头孢哌酮
l
【性状】 本品为白色或类白色结晶性粉末； 无臭，味微苦；有引湿性。 l本品在丙酮或二甲亚砜中溶解，在甲醇或乙醇 中微溶，在水或乙酸乙酯中极微溶解。
47
l测定法
取本品约50mg，精密称定，置100ml 量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，精密量取 20ul，注入液相色谱仪，记录色谱图；另取头孢 哌酮对照品，先加上述磷酸盐缓冲液适量助溶后， 再用流动相定量稀释成每1ml中含0.5mg的溶液， 同法测定。按外标法以峰面积计算供试品中 C25H27N9O8S2的含量。
3
第二节
β-内酰胺类抗生素
本类抗生素包括青霉素族和 头孢菌素族，它们的分子结构中 均含有β-内酰胺环，故统称为β内酰胺类抗生素。
4
二、鉴别试验
（一）
钾、钠盐的火焰反应
5
（二）呈色反应
1．羟肟酸铁反应
羟胺 青霉素/头孢菌素 碱性环境 羟肟酸 稀酸 高铁离子
紫红色 红褐色
红棕色Байду номын сангаас
氨苄西林 头孢氨苄
5．变色酸-硫酸呈色反应 如阿莫西林加变色酸-硫酸试剂混合后， 于1500C加热2～3min，呈深褐色。 6．与重氮苯磺酸呈色反应 头孢菌素族7位侧链含有—C6H5—OH基 团时，能与重氮苯磺酸试液产生偶合反应， 显橙黄色。 7．与铜盐呈色 头孢氨苄加醋酸、硫酸铜、氢氧化钠试 液后，生成铜配位盐，显橄榄绿色。
40
l测定法
取本品适量，精密称定，加水溶解并 定量稀释制成每1ml中含0.1mg的溶液，精密量 取10ul注入液相色谱仪，记录色谱图；另取苯唑 西林对照品适量，同法测定。按外标法以峰面积 计算供试品中C19H19N3O5S的含量。
41
例2 头孢哌酮
l
【性状】 本品为白色或类白色结晶性粉末； 无臭，味微苦；有引湿性。 l本品在丙酮或二甲亚砜中溶解，在甲醇或乙醇 中微溶，在水或乙酸乙酯中极微溶解。
47
l测定法
取本品约50mg，精密称定，置100ml 量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，精密量取 20ul，注入液相色谱仪，记录色谱图；另取头孢 哌酮对照品，先加上述磷酸盐缓冲液适量助溶后， 再用流动相定量稀释成每1ml中含0.5mg的溶液， 同法测定。按外标法以峰面积计算供试品中 C25H27N9O8S2的含量。
3
第二节
β-内酰胺类抗生素
本类抗生素包括青霉素族和 头孢菌素族，它们的分子结构中 均含有β-内酰胺环，故统称为β内酰胺类抗生素。
4
二、鉴别试验
（一）
钾、钠盐的火焰反应
5
（二）呈色反应
1．羟肟酸铁反应
羟胺 青霉素/头孢菌素 碱性环境 羟肟酸 稀酸 高铁离子
紫红色 红褐色
红棕色Байду номын сангаас
氨苄西林 头孢氨苄
抗生素类药物的分析.ppt
第十六章 抗生素类药物的分析
2019年8月29
感谢你的观看
1
第一节 概述
一、抗生素药物的定义和特点
定义：抗生素是指在低微浓度下即可对某些生 物的生命活动有特异抑制作用的化学物质的总 称。
抗生素的来源： 1. 生物合成（发酵）
2. 化学合成或半合成
2019年8月29
感谢你的观看
2
特点：
1.化学纯度较低
2019年8月29
感谢你的观看
30
2、有关物质和异构体 头孢呋辛酯中有关物质和异构体的检查反相HPLC 法 固定相：ODS；流动相：0.2mol/L磷酸二氢铵-甲 醇（62:38）
3、吸光度 杂质吸光度、药物吸光度
4、有机溶剂 气相色谱法测定溶剂残留量
5、结晶性 偏光显微镜法和X射线粉末衍射法
2019年8月29
S
65 12
7N
3
O
4
S
76 12
O
8
N
5
4
3
2019年8月29
感谢你的观看
14
（三）紫外吸收特性
青霉素类
母核无明显UV 多数有苯环取代基
头孢菌素类 母核有共轭体系
S
N O
2019年8月29
O
感谢你的观看
S N
15
（四）β–内酰胺环 不稳定性因素
四元环张力大 酰胺键易水解
干燥纯净 稳定 水溶液 不稳定
2019年8月29
感谢你的观看
47
四、含量测定 微生物检定法 各国药典主要采用 HPLC法 常用于体内药分
2019年8月29
感谢你的观看
48
第四节 四环素类抗生素
R R1 R2
2019年8月29
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1
第一节 概述
一、抗生素药物的定义和特点
定义：抗生素是指在低微浓度下即可对某些生 物的生命活动有特异抑制作用的化学物质的总 称。
抗生素的来源： 1. 生物合成（发酵）
2. 化学合成或半合成
2019年8月29
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2
特点：
1.化学纯度较低
2019年8月29
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30
2、有关物质和异构体 头孢呋辛酯中有关物质和异构体的检查反相HPLC 法 固定相：ODS；流动相：0.2mol/L磷酸二氢铵-甲 醇（62:38）
3、吸光度 杂质吸光度、药物吸光度
4、有机溶剂 气相色谱法测定溶剂残留量
5、结晶性 偏光显微镜法和X射线粉末衍射法
2019年8月29
S
65 12
7N
3
O
4
S
76 12
O
8
N
5
4
3
2019年8月29
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14
（三）紫外吸收特性
青霉素类
母核无明显UV 多数有苯环取代基
头孢菌素类 母核有共轭体系
S
N O
2019年8月29
O
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S N
15
（四）β–内酰胺环 不稳定性因素
四元环张力大 酰胺键易水解
干燥纯净 稳定 水溶液 不稳定
2019年8月29
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47
四、含量测定 微生物检定法 各国药典主要采用 HPLC法 常用于体内药分
2019年8月29
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48
第四节 四环素类抗生素
R R1 R2
抗生素类药物分析—β内酰胺类抗生素(药物分析课件)
头孢氨苄 λmax = 262nm 2、 IR法
专属性强，各国药典广 泛采用
（四）色谱法
1、TLC法
对照品 供试品
相同条件比较R
f
和斑点颜色
2、HPLC法
供对试照品品相同条件比较t紫色
+ 0.1%四苯硼钠 →↓白
2. 沉淀反应（青霉素盐） 遇酸→↓
青霉素钾 青霉素钠
H+ 青霉素 白
在过量HCl或 有机溶剂中溶解
3. 重氮化 - 偶合反应
芳伯氨基
普鲁卡因青霉素 H 普鲁卡因 青霉素
重氮化-偶合反应
红
（三） 光谱法
1、UV法 样品、分解产物
CH2 COHN
NH2
O
S CH3
N
CH3
COOH
-氨基酸 茚三酮 蓝紫色
3. 双缩脲反应
CONH
似肽键
- 内酰胺类
碱性酒石酸铜 （开环分解）
紫
4. 与重氮苯磺酸反应 头孢哌酮 酚羟基
C6H5 OH
重氮苯磺酸
（偶合）
橙黄色
（二）各种盐的反应
1. K+、Na+的火焰反应
Na+ 焰色→鲜黄色
第二节 β-内酰胺类抗生素
二、鉴别反应 （一）显色反应
1·
羟 肟 酸 铁 反 应
O
R
N7 H
S
61 2
8 N5 4 3
NaOH
CH2R1
O
COOH
O
R
N7 H
S
61 2
HN5 4 3
CH2R1
O
NHOH COONa
O
R
N7 H
6
S
专属性强，各国药典广 泛采用
（四）色谱法
1、TLC法
对照品 供试品
相同条件比较R
f
和斑点颜色
2、HPLC法
供对试照品品相同条件比较t紫色
+ 0.1%四苯硼钠 →↓白
2. 沉淀反应（青霉素盐） 遇酸→↓
青霉素钾 青霉素钠
H+ 青霉素 白
在过量HCl或 有机溶剂中溶解
3. 重氮化 - 偶合反应
芳伯氨基
普鲁卡因青霉素 H 普鲁卡因 青霉素
重氮化-偶合反应
红
（三） 光谱法
1、UV法 样品、分解产物
CH2 COHN
NH2
O
S CH3
N
CH3
COOH
-氨基酸 茚三酮 蓝紫色
3. 双缩脲反应
CONH
似肽键
- 内酰胺类
碱性酒石酸铜 （开环分解）
紫
4. 与重氮苯磺酸反应 头孢哌酮 酚羟基
C6H5 OH
重氮苯磺酸
（偶合）
橙黄色
（二）各种盐的反应
1. K+、Na+的火焰反应
Na+ 焰色→鲜黄色
第二节 β-内酰胺类抗生素
二、鉴别反应 （一）显色反应
1·
羟 肟 酸 铁 反 应
O
R
N7 H
S
61 2
8 N5 4 3
NaOH
CH2R1
O
COOH
O
R
N7 H
S
61 2
HN5 4 3
CH2R1
O
NHOH COONa
O
R
N7 H
6
S
链霉素
头 孢 菌 素 （ CEP） 族 的 母 核 ： 7 - 氨 基 头 孢 菌 烷 酸 （ 7 aminocephalosporanic acid，简称7-ACA）。
β-内酰胺类抗生素结构
O H R N H
O
H
H
H
6 7
O
5
N
1 4
H
S
CH3
R
N H
7 8
O
6
N
S
1
2 3
CH2R1
2
3
CH3 COOH
N
N
1 4
H
S
CH3
2
3
CH3 COOH
COOH R O O R
青霉烯酸
CH2CONHCH2CHO
青霉酸
酸性加热
CH3
+
HS H2N
C
C H
CH3 COOH
青霉醛
青霉胺
青霉素的降解产物
青霉噻唑酸－青霉素酶
降 解 产 物
青霉酸－强酸性环境
青霉烯酸－弱酸性环境
青霉醛－强酸性-加热
青霉胺－强酸性-加热/青霉素酶-重金属
特 点
适用范围广－纯品、不纯品、已知的和新的 可一次测定同类型抗生素的总效价－无需分离纯化，与临床 的应用要求一致
缺 点
操作繁琐、费时费力 是结构复杂和多组分抗生素效价测 定的首先方法 误差较大 培养时间长
2、物理化学法 仪 High-performance liquid chromatography（HPLC） 器 Liquid chromatography-Mass spectrometry（LC-MS） 分 UV 析 方 容量法 法 优点 准确可靠、专属性高、操作简单、省时、样品用量少 适用 1、对结构已知或提纯的抗生素 范围 2、需要标准品对照 缺 点
实用药物化学课件第11章抗生素
元的氢化噻唑环骈合而成，二个环的张 力都比较大
★青霉素结构中β-内酰胺环 中羰基和氮原子的孤对电子不能共轭， 易受到亲核性或亲电性试剂的进攻， 使β-内酰胺环破裂
NH
4 S
O
H
6
5
O
H
N
2
H1 O
OH
青霉素理化性质
H RCH2CONH
H S
1）白色结晶、略溶于水
N O
COOH
2）COOH，酸性：可成盐，溶于水，肌注静脉
心脑血管疾病：两性霉素B具有降胆固醇作用
他汀类美伐他汀——桔青霉菌中产生 刺激植物生长：赤霉素
4、来源 微生物、动植物提取、人工合成
5、分类
按抗生素的抗菌谱----适合临床用药
按抗生素的化学结构
β-内酰胺抗生素 氨基糖甙类抗生素 四环素类抗生素
大环内酯类抗生素
氯霉素类
第一节 β-内酰胺抗生素 (β-Lactam Antibiotics)
拉氧头孢）；4、影响药动学及药效学
半合成头孢菌素的特点
种类多：可变部位多 抗菌谱广：G+ G过敏反应小：药典无明确皮试要求 对酶稳定，疗效好：中、重度感染应用 多数药物可口服：一代、二代、三代均有 价格较贵：三代口服及四代产品
交叉过敏低的原因 P272
半合成头孢菌素分类
第四代
3位含有带正电荷的季铵基团，增 加了药物对细胞膜的穿透力和抗菌 活性。
O
NH S H
O - C-OC2 O2
H
N
OH
OH
Penicillonic Acid
H
N
O
HH OH
OH
OH-
Penicilloic acid
★青霉素结构中β-内酰胺环 中羰基和氮原子的孤对电子不能共轭， 易受到亲核性或亲电性试剂的进攻， 使β-内酰胺环破裂
NH
4 S
O
H
6
5
O
H
N
2
H1 O
OH
青霉素理化性质
H RCH2CONH
H S
1）白色结晶、略溶于水
N O
COOH
2）COOH，酸性：可成盐，溶于水，肌注静脉
心脑血管疾病：两性霉素B具有降胆固醇作用
他汀类美伐他汀——桔青霉菌中产生 刺激植物生长：赤霉素
4、来源 微生物、动植物提取、人工合成
5、分类
按抗生素的抗菌谱----适合临床用药
按抗生素的化学结构
β-内酰胺抗生素 氨基糖甙类抗生素 四环素类抗生素
大环内酯类抗生素
氯霉素类
第一节 β-内酰胺抗生素 (β-Lactam Antibiotics)
拉氧头孢）；4、影响药动学及药效学
半合成头孢菌素的特点
种类多：可变部位多 抗菌谱广：G+ G过敏反应小：药典无明确皮试要求 对酶稳定，疗效好：中、重度感染应用 多数药物可口服：一代、二代、三代均有 价格较贵：三代口服及四代产品
交叉过敏低的原因 P272
半合成头孢菌素分类
第四代
3位含有带正电荷的季铵基团，增 加了药物对细胞膜的穿透力和抗菌 活性。
O
NH S H
O - C-OC2 O2
H
N
OH
OH
Penicillonic Acid
H
N
O
HH OH
OH
OH-
Penicilloic acid
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（-）
②细菌内毒素(引起热原反应的主要物质)：
G-
鲎
分子
（-） （+）
L=？
③热源: 控制药品中的致热杂质
④降压： 检查有降压作用的杂质
⑤毒性试验: 控制药品中的毒性杂质
【检查】
（二）特殊杂质检查：
①晶体检查：IR、X-射线衍射法、DTA ②已知杂质 ③有关物质 ④高分子聚合物
三、抗生素的分 类
RCONH * O
S
*
N*
CH3 CH3 COOH
S RCONH * *
N O
CH2R1
COOH
HO H H R
H3C C
H
N
S R'
O
COOH
③紫外吸收
RCONH * O
S
*
N
*
CH3 CH3 COOH
＊ 青霉素类母核没有共轭系 统，没有紫外吸收。
＊ 侧链中有苯环取代基的药， 在紫外区也有吸收。
第十六章 6h
抗生素类药物的分析
The Analysis of Antibiotic drugs
青霉素的发现者是英国细菌学家弗莱明。 1928年的一天，弗莱明在他的一间简陋 的实验室里研究导致人体发热的葡萄球菌。 由于盖子没有盖好，他发觉培养细菌用的 琼脂上附了一层青霉菌。这是从楼上的一 位研究青霉菌的学者的窗口飘落进来的。 使弗莱明感到惊讶的是，在青霉菌的近旁， 葡萄球菌忽然不见了。这个偶然的发现深深 吸引了他，他设法培养这种霉菌进行多次 试验，证明青霉素可以在几小时内将葡萄
碳青霉烯类
二、 -内酰胺类抗生素的主要性质
HH
R' OCHN
S
CH 3
N O
CH 3
COOR
HH S
R' OCHN
N O
CH 2R''
COOR
HOBiblioteka HH RH3C C
H
N
S R'
O
COOH
①酸性 ＊有羧基，具有酸性 ＊pKa值在2.5～2.8之间 ＊与碱成盐 如：青霉素G钠、青霉素G钾等
② 旋光性：
球菌全部杀死。 葡萄球菌
发酵
来源
提、纯
发酵、半合成
本章内容
第一节 概述 第二节 -内酰胺类抗生素的分析 第五节 抗生素类药物中高分子杂质
的检查 第四节 四环素类抗生素的分析
第三节 氨基糖苷类抗生素的分析
第一节 概述 一、抗生素自身的特点
1.纯度较低：
三多（同系物、异构体、降解物或聚合物）
2.活性组分的变异(组成或比例)： 3.多数不稳定：
二、 抗生素分析的特点
【性状】 【鉴别】 【含量测定】 【检查】
【含量测定】
来源
发酵、半合成、全合成
原料药定量
HPLC 生物学法(管碟法)
生物学法(管碟法)：
S
R
【检查】
（一）一般杂质检查： 1.水分测定: 2.有机溶剂残留量
3.安全性检查：生物试验
①无菌： 检查药品中有无杂菌污染
（+） ℃
头孢克洛及其片剂检验（ChP2015二部）
容量分析？
P421
P417-420
264nm
254nm（等度） 220nm（梯度）
264nm(UV)
【检查】：水分（3.0%～6.5%）
ChP（2015）四部 第一法：费休氏法 第二法：烘干法 第三法：减压干燥法 第四法：甲苯法 第五法：GC（热导检测器）
1935 Karl Fischer 结晶水、吸附水、游离水
第一法：费休氏法（ P127 ） 非水滴定法：
滴定管： 反溶应剂式：：CH3OH
计算：
(V-V0)T
青霉素V钾及其片剂检验（ChP2015二部）
总论？
溶解度
P417-420
268nm
268nm 268nm
【检查】：结晶性
ChP（2015）四部： 第一法：偏光显微镜法 第二法：X-射线粉末衍射法
S RCONH
N O
CH2R1
COOH
HO
HH R
H3C C
H
N
S R'
O
COOH
有共轭体系： （O＝C－N－C＝C） 在260nm处有最大吸收。
无共轭体系，无紫外吸收。
氨苄西林
④ IR
阿莫西林
⑤显色反应： ◆羟肟酸铁反应
◆与茚三酮反应：α氨基酸结构
◆各种盐的鉴别 ◆硫酸及硫酸-甲醛反应 ◆硫酸-变色酸反应
β-内酰胺 大环内酯
氨基糖苷
O
H3C HO R3 H3C
H3C O
CH3 O
CH3
CH3 OH OR2
OR1
CH2R
四环素
第二节 -内酰胺类抗生素的分析
本章内容&要求
1. -内酰胺类抗生素的结构与性质 2. 【鉴别】：羟肟酸铁反应、茚三酮反应 3.【含量测定】：
R-HPLC阴离子对试剂，离子抑制剂、扫尾剂 4. 【检查】：水分测定、晶型检查
R640
A S662
文献：DTA、 IR 、拉曼
第一法：偏光显微镜法 双折射现象
第二法：X-射线粉末衍射法
2dhkl sinθ =nλ
例:氨苄西林的X—射线衍射图
● DTA
例：氨苄西林不同晶型的DTA曲线：
晶型1 晶型2
晶型1
● IR
P112图3-3 甲苯咪唑中Ａ晶型的检查
R
Ａ
Ａ
S
Ａ１
规定：Ｃ
Ｃ
Ｃ１
A ＜ A S640
扫尾剂？
分离度？
P421
P417-420
【含量测定】
例：头孢克洛的含量测定（P421）
要求： 1. 分别写出Ch.p与USP色谱条件与系统适用性试验要求。 2. Ch.p系统适用性试验加头孢克洛α-3异构体目的？ 3. USA流动相加戊烷磺酸钠与三乙胺的目的？
1.色谱条件： H+
ChP： 固定相： C18 流动相： PH3.4磷酸二氢钾缓冲液-乙腈（92:8） 检测器： UV-254nm
USP： 固定相： C18 流动相： PH2.5±0.1,戊烷磺酸钠-三乙胺-甲醇 检测器： UV-254nm
2.系统适用性试验：
对照品 n、R、T、RSD
3.测定法：
R
S
（按无水物计≥95.0%）
小结：-内酰胺类抗生素的含量测定
R-HPLC
离子对试剂
离子抑制剂
扫尾剂（三乙胺、乙腈等）
R？ 入？
物理常数、含量测定、有关物质检查检测波长为何不同？ 3. 原料药与制剂分析异同
一、 结构与代表性药物
亚胺培南R＝－H 美洛培南R＝－CH3
HH
R' OCHN
S CH3
N O
CH 3
COOR
HH S
R' OCHN
N O
CH 2R''
COOR
HO
HH R
H3C C
H
N
S R'
O
COOH
青霉素类
头孢菌素类
单选题
1.不能产生羟肟酸铁反应的化合物（）
A.
B. C.
D.
HO
F O
CH2OH CO
OH CH3
2. 能与茚三酮试液反应的化合物（）
A.
B. C.
D.
HO
F O
CH2OH CO
OH CH3
氨苄西林
3.IR
阿莫西林
头孢克洛及其片剂检验（ChP2015二部）
色谱条件：
离子对试剂？
显色剂？
离子抑制剂？
②细菌内毒素(引起热原反应的主要物质)：
G-
鲎
分子
（-） （+）
L=？
③热源: 控制药品中的致热杂质
④降压： 检查有降压作用的杂质
⑤毒性试验: 控制药品中的毒性杂质
【检查】
（二）特殊杂质检查：
①晶体检查：IR、X-射线衍射法、DTA ②已知杂质 ③有关物质 ④高分子聚合物
三、抗生素的分 类
RCONH * O
S
*
N*
CH3 CH3 COOH
S RCONH * *
N O
CH2R1
COOH
HO H H R
H3C C
H
N
S R'
O
COOH
③紫外吸收
RCONH * O
S
*
N
*
CH3 CH3 COOH
＊ 青霉素类母核没有共轭系 统，没有紫外吸收。
＊ 侧链中有苯环取代基的药， 在紫外区也有吸收。
第十六章 6h
抗生素类药物的分析
The Analysis of Antibiotic drugs
青霉素的发现者是英国细菌学家弗莱明。 1928年的一天，弗莱明在他的一间简陋 的实验室里研究导致人体发热的葡萄球菌。 由于盖子没有盖好，他发觉培养细菌用的 琼脂上附了一层青霉菌。这是从楼上的一 位研究青霉菌的学者的窗口飘落进来的。 使弗莱明感到惊讶的是，在青霉菌的近旁， 葡萄球菌忽然不见了。这个偶然的发现深深 吸引了他，他设法培养这种霉菌进行多次 试验，证明青霉素可以在几小时内将葡萄
碳青霉烯类
二、 -内酰胺类抗生素的主要性质
HH
R' OCHN
S
CH 3
N O
CH 3
COOR
HH S
R' OCHN
N O
CH 2R''
COOR
HOBiblioteka HH RH3C C
H
N
S R'
O
COOH
①酸性 ＊有羧基，具有酸性 ＊pKa值在2.5～2.8之间 ＊与碱成盐 如：青霉素G钠、青霉素G钾等
② 旋光性：
球菌全部杀死。 葡萄球菌
发酵
来源
提、纯
发酵、半合成
本章内容
第一节 概述 第二节 -内酰胺类抗生素的分析 第五节 抗生素类药物中高分子杂质
的检查 第四节 四环素类抗生素的分析
第三节 氨基糖苷类抗生素的分析
第一节 概述 一、抗生素自身的特点
1.纯度较低：
三多（同系物、异构体、降解物或聚合物）
2.活性组分的变异(组成或比例)： 3.多数不稳定：
二、 抗生素分析的特点
【性状】 【鉴别】 【含量测定】 【检查】
【含量测定】
来源
发酵、半合成、全合成
原料药定量
HPLC 生物学法(管碟法)
生物学法(管碟法)：
S
R
【检查】
（一）一般杂质检查： 1.水分测定: 2.有机溶剂残留量
3.安全性检查：生物试验
①无菌： 检查药品中有无杂菌污染
（+） ℃
头孢克洛及其片剂检验（ChP2015二部）
容量分析？
P421
P417-420
264nm
254nm（等度） 220nm（梯度）
264nm(UV)
【检查】：水分（3.0%～6.5%）
ChP（2015）四部 第一法：费休氏法 第二法：烘干法 第三法：减压干燥法 第四法：甲苯法 第五法：GC（热导检测器）
1935 Karl Fischer 结晶水、吸附水、游离水
第一法：费休氏法（ P127 ） 非水滴定法：
滴定管： 反溶应剂式：：CH3OH
计算：
(V-V0)T
青霉素V钾及其片剂检验（ChP2015二部）
总论？
溶解度
P417-420
268nm
268nm 268nm
【检查】：结晶性
ChP（2015）四部： 第一法：偏光显微镜法 第二法：X-射线粉末衍射法
S RCONH
N O
CH2R1
COOH
HO
HH R
H3C C
H
N
S R'
O
COOH
有共轭体系： （O＝C－N－C＝C） 在260nm处有最大吸收。
无共轭体系，无紫外吸收。
氨苄西林
④ IR
阿莫西林
⑤显色反应： ◆羟肟酸铁反应
◆与茚三酮反应：α氨基酸结构
◆各种盐的鉴别 ◆硫酸及硫酸-甲醛反应 ◆硫酸-变色酸反应
β-内酰胺 大环内酯
氨基糖苷
O
H3C HO R3 H3C
H3C O
CH3 O
CH3
CH3 OH OR2
OR1
CH2R
四环素
第二节 -内酰胺类抗生素的分析
本章内容&要求
1. -内酰胺类抗生素的结构与性质 2. 【鉴别】：羟肟酸铁反应、茚三酮反应 3.【含量测定】：
R-HPLC阴离子对试剂，离子抑制剂、扫尾剂 4. 【检查】：水分测定、晶型检查
R640
A S662
文献：DTA、 IR 、拉曼
第一法：偏光显微镜法 双折射现象
第二法：X-射线粉末衍射法
2dhkl sinθ =nλ
例:氨苄西林的X—射线衍射图
● DTA
例：氨苄西林不同晶型的DTA曲线：
晶型1 晶型2
晶型1
● IR
P112图3-3 甲苯咪唑中Ａ晶型的检查
R
Ａ
Ａ
S
Ａ１
规定：Ｃ
Ｃ
Ｃ１
A ＜ A S640
扫尾剂？
分离度？
P421
P417-420
【含量测定】
例：头孢克洛的含量测定（P421）
要求： 1. 分别写出Ch.p与USP色谱条件与系统适用性试验要求。 2. Ch.p系统适用性试验加头孢克洛α-3异构体目的？ 3. USA流动相加戊烷磺酸钠与三乙胺的目的？
1.色谱条件： H+
ChP： 固定相： C18 流动相： PH3.4磷酸二氢钾缓冲液-乙腈（92:8） 检测器： UV-254nm
USP： 固定相： C18 流动相： PH2.5±0.1,戊烷磺酸钠-三乙胺-甲醇 检测器： UV-254nm
2.系统适用性试验：
对照品 n、R、T、RSD
3.测定法：
R
S
（按无水物计≥95.0%）
小结：-内酰胺类抗生素的含量测定
R-HPLC
离子对试剂
离子抑制剂
扫尾剂（三乙胺、乙腈等）
R？ 入？
物理常数、含量测定、有关物质检查检测波长为何不同？ 3. 原料药与制剂分析异同
一、 结构与代表性药物
亚胺培南R＝－H 美洛培南R＝－CH3
HH
R' OCHN
S CH3
N O
CH 3
COOR
HH S
R' OCHN
N O
CH 2R''
COOR
HO
HH R
H3C C
H
N
S R'
O
COOH
青霉素类
头孢菌素类
单选题
1.不能产生羟肟酸铁反应的化合物（）
A.
B. C.
D.
HO
F O
CH2OH CO
OH CH3
2. 能与茚三酮试液反应的化合物（）
A.
B. C.
D.
HO
F O
CH2OH CO
OH CH3
氨苄西林
3.IR
阿莫西林
头孢克洛及其片剂检验（ChP2015二部）
色谱条件：
离子对试剂？
显色剂？
离子抑制剂？