枸杞子提取物技术要求
中药提取技术提取枸杞子中有效物质

中药提取技术提取枸杞子中有效物质【植物名称】枸杞子【英文名】Barbary Wolfberry Fruit P.E.【来源】从双子叶植物药茄科植物枸杞或宁夏枸杞的成熟果实中提取。
【资源分布】枸杞为多年生灌木,生长于土层深厚的黄土沟边及山坡。
野生分布于青海至山西黄河资源分布两岸的黄土高原、山麓地带。
野生枸杞质量较次,现已很少采收,药用多为栽培品。
主产于宁夏回族自治区中宁、中卫等县,已有数百年的栽培历史,经验丰富,产品质量优良,多供出口。
天津、河北、内蒙古、河南、甘肃、新疆等地也有较大面积的引种栽培。
【有效成分】现代分析表明,枸杞子所含的营奍成分非常丰富,每百克枸杞果中含粗蛋白 4.49 克,有效成分粗脂肪 2.33 克,碳水化合物 9.12 克,类胡萝卜素 96 毫克,硫胺素0.053 毫克,核黄素0.137 毫克,抗坏血酸19.8 毫克,甜菜碱 0.26毫克,还含有丰富的钾、钠、钙、镁、铁、铜、锰、锌等元素,以及22种氨基酸和多种维生素。
有效成分为枸杞多糖。
【功效】免疫调节、降血糖、降血脂、延缓衰老、抗疲劳作用等。
枸杞子油富含丰富的亚油酸、亚功效麻酸、油酸、维生素E、胡萝卜素等生物活性物质,具有降低血管胆固醇,防止动脉粥样硬化,增强视力,防止青光眼,增白、滋润、护肤、减少色素等作用。
【质量标准】一般以枸杞多糖的含量为标准。
二、中药提取技术提取枸杞子中有效物质方法枸杞油、β-胡萝卜素提取方法:萃取分离技术枸杞多糖的提取方法:枸杞多糖的提取纯化分为二步。
1.是枸杞粗多糖的提取,2.是枸杞多糖的分级纯化。
粗多糖的提取工艺如下:称取已烘干粉碎的枸杞子,以石油醚:丙酮(1:1)回流脱脂,滤出溶剂,残渣风干后以80%乙醇脱单糖和低聚糖。
将脱低聚糖等后的残渣用水在90~100℃水溶提多糖,提取液减压浓缩后用酒精沉淀多糖,再用无水乙醇、丙酮洗涤沉淀,真空干燥得枸杞粗多糖。
粗多糖的分级纯化是将上述枸杞粗多糖通过DEAE纤维素柱,以不同浓度的NaCl梯度洗脱,将不同盐浓度的洗脱液分别减压浓缩后,用透析法脱盐,冷冻干燥后得不同级分的枸杞糖蛋白脱水、冷冻。
枸杞子提取物技术要求编制说明

枸杞子提取物技术要求编制说明一、基本情况为贯彻落实《食品安全法》对保健食品实行严格监管的要求,严格保健食品原料管理,加强保健食品原料的安全监管,提高保健食品准入门槛,做好保健食品许可工作,国家食品药品监督管理局开展了保健食品原料标准的研究工作。
按国家食品药品监督管理局食品许可司的要求,由湖北省食品药品监督检验研究院承担保健食品原料-枸杞子提取物技术要求的研究工作。
湖北省食品药品监督检验研究院成立枸杞子提取物原料技术要求研究的项目工作组,确立实施完成项目的方案,同时明确枸杞子提取物原料技术要求的制定原则,即先进性、实用性、规范性及对产品质量的有效可控性。
二、起草过程1、通过检索、查阅相关文献资料,收集了全国已有的生产样品,参照已收集的企业生产工艺、制法,经试验确定产品制法并自制部分样品。
主要从以下几方面制定产品的技术要求:1 真伪方面。
从感官、薄层及所含功效成分等方面鉴别产品的真伪;2 安全方面。
按《中国药典》中药质量标准研究制定技术要求(国家药典委员会)中的规定,注重中药安全性检测方法和指标的建立和完善,加强对重金属及有害元素、残留农药、残留溶剂、残留二氧化硫、微生物、真菌毒素等外源污染物的检测。
3 产品质量方面。
参考《中国药典》2010年版及相关文献资料,根据产品的实际功效,选定相应的功效成分控制产品的质量。
4 根据稳定性研究结果提供产品的贮藏条件。
于2010年7月完成了保健食品枸杞子提取物原料技术要求的试验研究工作。
2、组织有关专家进行评审2010年7月份,组织相关专家召开了专家论证会。
对保健食品枸杞子提取物原料技术要求进行了论证并提出了修改意见。
3、委托三家检测单位进行了技术复核2010年9月份,国家食品药品监督管理局食品许可司召开了保健食品原料技术要求制订汇报工作会议。
会上对保健食品枸杞子提取物原料技术要求提出了有关要求。
按要求于10月中旬,委托陕西省食品药品检验所,湖北省疾病控制中心及武汉市食品药品检验所三家单位进行了复核。
枸杞原液工艺流程

枸杞原液工艺流程
《枸杞原液工艺流程》
枸杞原液是一种以枸杞为原料提取的液态产品,具有丰富的营养成分和药用价值。
下面是枸杞原液的工艺流程。
1. 原料准备
选用新鲜的枸杞果实作为原料,经过清洗、分类和破碎处理,使得果实中的有效成分更容易提取。
2. 浸提
将破碎后的枸杞果实放入提取罐中,加入适量的提取溶剂,如乙醇或水,进行浸提。
提取时间一般为24小时以上,以保证
充分提取果实中的有效成分。
3. 过滤
经过浸提后的液体需要进行过滤,去除果渣和其他杂质,得到纯净的枸杞提取液。
4. 精制
将过滤后的提取液进行精制处理,通过蒸馏、减压浓缩等方法,去除提取溶剂,得到枸杞原液。
5. 包装
最后,将精制后的枸杞原液进行冷却、稳定处理,并进行严格的检验,确保产品符合国家标准,然后进行包装装瓶,进行产品的质量检测。
通过以上工艺流程,枸杞原液的制作完成,产品具有浓郁的枸杞风味和丰富的营养成分,可以用于饮料、保健品、化妆品等多个领域。
枸杞中多糖成分的分离和提取技术

枸杞的功效十分强大,《神农本草经》中记载,枸杞能补气益血,清肝明目。
在1981—2010年,一系列与枸杞和枸杞多糖相关的中成药和制剂也是层出不穷,据统计已经达到876种。
对于天然产物的分析检测而言,得率和纯度至关重要,因此在多糖成分的分离和提取技术研究中必须在优化条件的同时,确保多糖的生物活性不会因提取工艺受到影响。
现阶段,碱溶液、酸溶液、水溶液都常被用于多糖的提取。
其中,热水凭借着易于获取、溶解度强等显著优势成为了提取多糖时首选的溶剂。
然而,多糖中含有醛基等官能团,所以碱性溶液也常被用于多糖的提取。
随着科学技术的不断进步,超声波技术、超临界萃取等技术也被广泛用于枸杞中多糖成分的分离[1]。
1 枸杞多糖的结构和理化性质随着科技的进步,人们发现枸杞中的生物活性成分较为复杂,既包括氨基酸、生物碱、脂肪酸、色素类物质,也含有离子盐等无机元素。
其中,枸杞多糖因为抗癌、抗氧化、免疫调节等作用受到广泛关注。
然而,枸杞多糖多与蛋白质相结合,这给枸杞中多糖成分的提取和分离带来了一定的难度。
研究表明,枸杞多糖成分较为复杂,多由葡萄糖、甘露糖、木糖、鼠李糖、阿拉伯糖等己碳糖组成侧链(简单结构见图1),并与由氨基酸组成的多肽链紧密结合。
图1 简单多糖结构示意图2 多糖的提取分离方法2.1 多糖的提取方法枸杞中的多糖以不同形式存在,对于每种形式的多糖都需要采用针对性的预处理方法。
现阶段,在天然产物分离与提纯中常用的分析检测方法包括脱色处理、粉碎成末、清洗脱脂等。
其中,粉碎是为了促进枸杞中物质的溶解,最大限度的获取枸杞中的有效物质。
脱色处理主要是为了除去枸杞中的显色物质,避免对后续处理工艺的干扰。
脱脂是避免多余的脂质对后续结果的影响。
2.1.1 溶剂浸提法因为多糖在水溶液中的溶解度较高,故而可以用水、酸、碱等极性溶剂或者甲醇、乙醇等质子型溶剂溶解。
其中,热水因成本低、来源广等优势常用作溶媒介质。
虽然多糖在酸、碱性溶液中也存在一定的溶解度,但是酸碱会影响多糖成分的活性,例如,溶解糖苷键,破坏多糖的三维立体结构等,故而此类方法常被用于对生物活性要求不高的成分的提取。
枸杞原液工艺流程

枸杞原液工艺流程枸杞原液是指利用现代科学技术将新鲜枸杞榨取的汁液进行浓缩、过滤等工艺处理后所得的液体产品。
枸杞原液具有丰富的维生素和矿物质,具有保健养生的功效。
下面介绍一下枸杞原液的工艺流程。
首先是收获枸杞。
枸杞采摘时要选择成熟度适中的果实,避免过熟或未熟的果实。
同时要避开雨天采摘,以免果实受潮发霉。
采摘的果实要放在通风透气的地方晾晒,将果实表面的杂质清理干净。
然后是研磨和过滤。
将晾晒干净的枸杞果实放入研磨机中进行破碎,研磨出果汁。
将研磨出的果汁过滤,去掉果渣和杂质,得到较为纯净的枸杞汁液。
接着是浓缩。
将得到的枸杞汁液放入浓缩锅中,进行蒸发浓缩。
在浓缩过程中,要控制好温度和时间,避免过高温度破坏营养成分。
适度浓缩后得到浓稠的枸杞液体。
再然后是杀菌和灭菌。
为了保证产品的质量和安全性,需要对枸杞液体进行杀菌和灭菌处理。
常用的方法有高温杀菌和紫外线杀菌。
高温杀菌要求在一定的温度下保持一定的时间,确保杀菌效果好。
紫外线杀菌则是利用紫外线的辐射能力杀灭细菌和病毒。
最后是包装和储存。
经过杀菌灭菌处理的枸杞原液可以进行包装。
常见的包装方式有玻璃瓶、塑料瓶和铁罐等。
包装时要注意卫生,确保包装容器的密封性。
包装好的枸杞原液可以存放在阴凉干燥的地方,避免阳光直射和潮湿环境,以保持产品的质量和营养成分。
以上就是枸杞原液的主要工艺流程。
通过这些工艺处理,可以提取出纯净的枸杞汁液,并保持其营养成分和天然的健康功效。
枸杞原液具有较长的保质期,方便消费者在长时间内享用。
同时,生产过程中要注重卫生和安全,确保产品的质量和安全性。
枸杞原液的工艺流程不仅有助于开发利用农产品资源,还可以为人们提供更加便捷和健康的保健食品。
枸杞多糖提取条件初探

液 固形物总含量 ( 近视认 为是枸杞多糖) 为指标 , 通过 改变提取料液比、 提取时间、 提取温度 、 提取 次数四
个 因数 来探讨枸杞多糖提取率的高低 与各 因数的关 系, 同时通过正交 实验 , 综合考虑后得 出了枸杞多糖
提取 的理想工艺条件 : 提取温度 8  ̄ 提取 时间 6ri, 5C, 0 n 提取料液比 1: 5提取次数 2次。 a 2, 关键词 : 枸杞多糖 ; 提取率; 条件
枸杞为茄科落叶植物 L c m brau 。 yi brm L 的 u a 干燥成熟果实, 它是历史悠久、 药食同源、 驰名中外 的名贵中药材。它的化学成分主要包括枸杞多糖 ( B )甜菜碱(e i )类胡萝 卜 cr o s, LP, bt n , ae 素( o i ) a td 类胡萝 卜 素酯 , 维生素 C 莨菪亭( oo t ) 多种 , s pli , c en 氨基 酸及多种微量元素 。此外 , 枸杞 中还含有 玉米 黄素及玉米黄素二棕榈酸酯(ex nh ia i za ati dp l — n m tt)环肽 (yl et e) 枸杞素 A—D, ae , cci ppi s及 c d 脑苷 脂类等。 它早在《 神农本草经》 中就被列为上品, 称 之为“ 久服 , 轻身不老 , 耐寒暑”《 ;本草纲目》 中介 绍枸杞治病强身的方子达 3 0多条; 本经汇言》 《 指 出:枸杞能使气可充, “ 血可补, 阳可生, 阴可长, 火可降, 风湿可去 , 有十全之妙用。近年来, ” 对枸 杞的药理作用进行了深入的研究。现代医学认为 , 枸杞含有的多糖具有调节和增强人体非特异性免 疫的功能, 可参与提高机体的免疫功能, 增强抗病 能力 , 而达 到抗衰老 、 从 抗癌 、 抗辐射 、 抗肝炎 以及 抗 艾滋病 等 作用 ,并 能增强 网状 内皮 系统 的吞 噬 能力。 枸杞是一种传统的具有抗疲劳, 保护视力, 提 高免疫力, 降血脂等多种保健功能的药食同源的中 药材, 安全无毒副作用, 并且廉价易得, 提取方法简 便 , 以用作提取药用物质的原材料是理想的选 所 择 。枸杞提取物非单一成分, 而是多种化学成分的 混合物, 以本实验以枸杞水提液 固形物 总含量 所 ( 近视 认为是 枸杞多糖) 为指标 , 分别通过单 因素实
黑果枸杞提取物(原花青素)质量标准

B.5 分析结果表述 试样中原花青素测定结果按 B.1 式计算
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B.5.1 计算:
1000m1v X % = 100 ………………………………(B.1) 1000 1000m 式中:X—试样中原花青素的百分含量,g/100g; m1—反应混合物中原花青素的量,μg; v—待测样液的总体积,ml; m—试样的质量,mg 5.2 结果表示 计算结果保留三位有效数字。
B.6 技术参数 相对标准偏差:<10%;回收率:84.6~94.4%
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存。贴上标签,注明产品名称、批号、抽样日期、抽样人、分成两份,一份送质量部检验, 一份保留备查,型式试验应在出厂检验合格的产品中抽取样品。 6.2 检验分类 产品分出厂检验和型式试验 6.3 出厂检验 6.3.1 每批产品出厂前须经生产厂质量检验部门按本标准规定遂批检验,保证出厂产品
都符合本标准的要求,并签发合格证方可出厂。 6.3.2 每批产品出厂检验项目包括外观和感官特征、理化指标、微生物指标。
6.4 型式检验 型式试验每季度或一个生产周期进行一次。有下列情况之一时亦应进行型式试验: a)原辅料有较大改变,可能影响产品质量时; b)正常生产时每季度进行一次; c)产品停产三个月以上,恢复生产时; d)出厂检验结果与上次型式试验有较大差异时; e)国家质量监督机构提出进行型式试验要求时。 6.5 6.5.1 6.5.1.1 6.5.1.2 判定规则 出厂检验判定和复检 出厂检验项目全部符合本标准,判为合格品。 出厂检验项目如有一项(微生物指标除外)不符合本标准可以对该项目加倍抽样
枸杞提取物

6.具有抗肿瘤作用,枸杞子提取液对致癌剂诱导的突变有抑制作用,抑制率分别为91.8%和82.6%。通过细胞体外培养的方法观察枸杞对癌细胞的生物效应,证明枸杞子对人胃腺癌、宫颈癌细胞均有明显抑制作用,枸杞子结合放疗有明显的放射增效作用。
2.保健价值,枸杞能滋肝补肾,益精明目。主治虚劳精亏,腰膝酸痛,眩晕耳鸣,内热消渴,血虚萎黄,目昏不明。
3.增强免疫和免疫调节功能,枸杞子、枸杞多糖(LBP)均可显著提高人体吞噬细在胞吞噬百分率和吞噬指数。枸杞子还能显著提高血清溶菌酶活力。枸杞可以显著提高中老者经年人细胞免疫功能,改善临床病症,而且淋巴细胞转化和E-花环两项细胞免疫指标增强。
8.其他作用,枸杞子中含有枸橼酸,甜菜碱,对治疗各种性肝病,有较好疗效。另外,枸杞子对慢性萎缩性胃炎,白细胞减少症、肥胖症、精子减少不育症等也有一定的辅助疗效。
【应用领域】用于来治疗心中烦热、常欲饮水等症状,建议坚持每晚睡前嚼服枸杞子约30克,
【包装方式】25公斤/纸板桶或铝箔袋
【存储条件】本品应密封遮光,贮存在干燥、阴凉、通风良好的地方;有效期为两年。
【产品规格】10:1或者根据客户需要 TLC
【颜色性状】棕黄色粉末
【产品目数】100%通过80目筛
【药用作用】
1.营养价值,枸杞是一种名贵中药,营养成分十分丰富,并有很高的药物价值,不仅含铁、磷、钙等物质,而且还含有大量糖、脂肪、蛋白质及氨基酸、多糖色素、维生素、甾醇、甙类等,有润肺清肝、滋肾、益气、生精、助阳、祛风、明目、强筋骨的功能。还含有对人体具有良好医疗保健作用的多糖和有益于人体智力开发的有机锗。
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枸杞子提取物技术要求本技术要求的编写格式是按GB/T 1.1-2009《标准化工作导则》的有关规定编辑。
本技术要求检验方法引用了《中华人民共和国药典》2010年版一部;GB/T 5009.11;GB 5009.12;GB/T 5009.13;GB/T 5009.15;GB/T 5009.17;GB/T 5009.19等国家标准,以保证检验数据的准确性。
本技术要求的附录A、附录B均为规范性附录。
1 范围本技术要求适用于以茄科植物宁夏枸杞Lycium barbarum L.的干燥成熟果实为原料经加工制成的提取物。
2 规范性引用文件本技术要求中引用的文件对于本技术要求的应用是必不可少的。
凡是注日期的引用文件,仅所注日期的版本适用于本技术要求。
凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本技术要求。
GB/T 5009.11 食品中总砷及无机砷的测定GB 5009.12 食品中铅的测定GB/T 5009.13 食品中铜的测定GB/T 5009.15 食品中镉的测定GB/T 5009.17 食品中总汞及有机汞的测定GB/T 5009.19 食品中有机氯农药多组分残留量的测定GB 4789.2 食品卫生微生物学检验菌落总数测定GB 4789.3 食品卫生微生物学检验大肠菌群测定GB 4789.4 食品卫生徽生物学检验沙门氏菌检验GB 4789.5 食品卫生微生物学检验志贺氏菌检验GB 4789.10 食品卫生微生物学检验金黄色葡萄球菌检验GB 4789.11 食品卫生微生物学检验溶血性链球菌检验GB 4789.15 食品卫生微生物学检验霉菌和酵母菌计数《中华人民共和国药典》2010年版一部3 技术要求3.1 制法取枸杞子,粉碎成粗粉,加15倍量的80%乙醇为提取溶剂,加热回流提取2小时,滤过;再以水为提取溶剂,加热回流提取两次,每次2小时,第一次加10倍量,第二次加8倍量,滤过,合并三次滤液,滤液于50℃减压浓缩至稠膏状,50℃以下真空干燥,即得。
3.2 感官要求:应符合表 1 规定。
表1 感官要求3.3 功效成分:应符合表2规定。
表2 功效成分3.4 理化指标:应符合表3规定。
表3 理化指标3.5 微生物指标:应符合表4规定。
表4 微生物指标4 检验方法4.1 感官检验取适量试样,置于白瓷板上,在自然光下,用肉眼观察其色泽、性状、杂质,闻其气味,用温开水漱口,品尝其滋味。
4.2 功效成分检验4.2.1 枸杞多糖按规范性附录A规定的方法测定。
4.2.2 总黄酮按规范性附录B规定的方法测定。
4.2.3 甜菜碱按规范性附录C规定的方法测定。
4.3 理化检验4.3.1 薄层鉴别4.3.1.1取本品粉末0.5g,加水35ml,振摇使溶解,滤过,滤液用乙酸乙酯15ml振摇提取,分取乙酸乙酯液,浓缩至1ml,作为供试品溶液。
另取枸杞子对照药材0.5g,加水35ml,加热煮沸15分钟,放冷,滤过,同法制成对照药材溶液。
照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录Ⅵ B)试验,吸取上述两种溶液各5μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(15:8:1.5)为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯(365nm)下检视。
供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。
4.3.1.2取本品粉末约2g,加80%甲醇溶液50ml,超声30min,滤过,取滤液浓缩至10ml,用盐酸调节pH值至1,加入活性炭1g,加热煮沸,放冷,滤过,用水15ml分次洗涤,合并洗液和滤液,加入新配制的2.5%硫氰酸铬铵溶液20ml,摇匀,10℃以下放置3小时,用G4垂熔漏斗滤过,沉淀用少量冰水洗涤,抽干,残渣加5ml丙酮使溶解,作为供试品溶液。
另取甜菜碱对照品适量,加盐酸甲醇溶液(0.5→100)制成每1ml含4mg的溶液,作为对照品溶液。
照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录Ⅵ B)试验,吸取上述两种溶液各5μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以丙酮-无水乙醇-甲酸(10:6:1.5)为展开剂,预饱和30分钟,展开,取出,挥干溶剂,立即喷以新配制的改良碘化铋钾试液,放置约2小时至斑点清晰。
供试品色谱中,在与甜菜碱对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。
注改良碘化铋钾试液:取碱式硝酸铋0.85g,加冰醋酸10ml与水40ml溶解后,加碘化钾溶液(4→10)20ml,摇匀;取1ml,加0.6mol/L盐酸溶液2ml,加水至10ml,摇匀,即得。
4.3.2 干燥失重:取本品,以五氧化二磷为干燥剂,在40℃减压干燥至恒重,按《中华人民共和国药典》2010年版一部附录ⅨG测定,不得过5.0%。
4.3.3 炽灼残渣:按《中华人民共和国药典》2010年版一部附录Ⅸ J测定,不得过5.0%。
4.3.4 铅:按GB 5009.12《食品中铅的测定》规定的方法测定。
4.3.5 镉:按GB/T 5009.15《食品中镉的测定》规定的方法测定。
4.3.6 砷:按GB/T 5009.11《食品中总砷及无机砷的测定》规定的方法测定。
4.3.7 汞:按GB/T 5009.17《食品中总汞及有机汞的测定》规定的方法测定。
4.3.8 铜:按GB/T 5009.13《食品中铜的测定》规定的方法测定。
4.3.9 六六六、滴滴涕及五氯硝基苯:按GB/T 5009.19《食品中有机氯农药多组分残留量的测定》规定的方法测定。
4.4 微生物检验4.4.1 菌落总数:按GB 4789.2 《食品卫生微生物学检验菌落总数测定》规定的方法测定。
4.4.2 大肠菌群:按GB 4789.3 《食品卫生微生物学检验大肠菌群测定》规定的方法测定。
4.4.3 霉菌和酵母菌:按GB 4789.15 《食品卫生微生物学检验霉菌和酵母菌计数》规定的方法测定。
4.4.4 沙门氏菌:按GB 4789.4 《食品卫生徽生物学检验沙门氏菌检验》规定的方法测定。
4.4.5 志贺氏菌:按GB 4789.5 《食品卫生微生物学检验志贺氏菌检验》规定的方法测定。
4.4.6 金黄色葡萄球菌:按GB 4789.10 《食品卫生微生物学检验金黄色葡萄球菌检验》规定的方法测定。
4.4.7 溶血性链球菌:按GB 4789.11 《食品卫生微生物学检验溶血性链球菌检验》规定的方法测定。
5 贮藏密封,置凉暗干燥处。
附录 A(规范性附录)功效成分-枸杞多糖的检验A.1 原理用80%乙醇作溶剂,超声溶解除去单糖、低聚糖等杂质,得枸杞多糖沉淀物。
枸杞多糖成分在浓硫酸的作用下,水解成单糖,并迅速脱水生成糠醛衍生物,与苯酚缩合成有色化合物,采用分光光度法测定其含量。
A.2 试剂A.2.1水:纯化水。
A.2.2乙醇:分析纯。
A.2.3苯酚:分析纯。
A.2.4硫酸:分析纯。
A.2.5无水葡萄糖(C6H12O6)对照品:由中国药品生物制品检定所提供。
A.3 仪器紫外分光光度计。
超声波清洗器。
A.4 分析步骤A.4.1 溶液的制备A.4.1.1 对照品溶液的制备取无水葡萄糖对照品10mg,精密称定,置100ml量瓶中,加水适量使溶解并稀释至刻度,摇匀,即得(每1ml中含无水葡萄糖0.1mg)。
A.4.1.2 供试品溶液的制备取本品约60mg,精密称定,置250ml具塞锥形瓶中,加入80%乙醇100ml,超声处理30分钟,滤过,用80%乙醇30ml分次洗涤锥形瓶与滤渣、滤器,弃去滤液,滤渣连同滤纸置100ml锥形瓶中,加热水约60ml,振摇,超声处理30分钟,滤过,并用适量水洗涤锥形瓶与滤器,合并滤液,滤液置100ml量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,即得。
A.4.2 标准曲线的制备精密量取对照品溶液0.2ml、0.4ml、0.6ml、0.8ml、1.0ml,分别置具塞试管中,分别加水补至2.0ml(对照品浓度分别为10、20、30、40、50μg/ml),各精密加入5%苯酚溶液1ml,摇匀,迅速精密加入硫酸5ml,摇匀,放置10分钟,置40℃水浴中保温15分钟,取出,迅速冷却至室温,以相应的试剂为空白,照紫外-可见分光光度法(中国药典2010年版一部附录ⅤA),在490nm的波长处测定吸光度,以吸光度为纵坐标,对照品浓度为横坐标,绘制标准曲线。
A.4.3 样品测定精密量取供试品溶液2ml,置具塞试管中,照标准曲线的制备项下的方法,自“各精密加入5%苯酚溶液1ml”起,依法测定吸光度,从标准曲线上读出供试品溶液中含葡萄糖的浓度,计算,即得。
本品按干燥品计算,含枸杞多糖以葡萄糖(C6H12O6)计,不得少于3.6%。
A.4.4 计算C×100×100X=W×(1-M)×1000式中:X-试样中枸杞多糖的含量,%;C-从标准曲线上求得供试品溶液中葡萄糖的浓度,μg/ml;W-取样量,mg;M-干燥失重,%。
计算结果保留至小数点后一位。
A.4.5 允许差同一样品两次测定,相对平均偏差不得超过5.0%。
附录 B(规范性附录)功效成分-总黄酮的检验B.1 原理在中性或弱碱性及亚硝酸钠存在条件下,黄酮类化合物与铝盐生成螯合物,加入氢氧化钠试液后显红橙色,在500nm波长处有吸收,以芦丁为对照,进行定量测定.B.2 试剂B.2.1水:纯化水。
B.2.2乙醇:分析纯。
B.2.3亚硝酸钠:分析纯。
B.2.4硝酸铝:分析纯。
B.2.5氢氧化钠:分析纯。
B.2.6氢氧化钠试液:取氢氧化钠4.3g,加水溶解成100ml,即得。
B.2.7芦丁由中国药品生物制品检定所提供。
B.3 仪器紫外分光光度计。
超声波清洗器。
B.4 分析步骤B.4.1 溶液的制备对照品溶液的制备取芦丁对照品20mg,精密称定,置50ml量瓶中,加60%乙醇使溶解并稀释至刻度,摇匀;精密量取25ml,置50ml量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,即得(每1ml中含芦丁0.2mg)。
供试品溶液的制备取本品约0.25g,精密称定,置25ml量瓶中,加水5ml,振摇使溶解,再加入60%乙醇至刻度,超声处理30min,摇匀,过滤,即得。
B.4.2 标准曲线的制备精密量取对照品溶液1ml、2ml、3ml、4ml、5ml、6ml,分别置25ml量瓶中,各加30%乙醇至6ml,加5%亚硝酸钠溶液1ml,混匀,放置6分钟,再加10%硝酸铝溶液1ml,摇匀,放置6分钟,加氢氧化钠试液10ml,再加30%乙醇至刻度,摇匀,放置15分钟,以相应试剂为空白,照紫外-可见分光光度法(中国药典2010年版一部附录ⅤA),在500nm的波长处测定吸光度,以吸光度为纵坐标,对照品溶液浓度为横坐标,绘制标准曲线。
B.4.3 样品测定精密量取供试品溶液2ml,置25ml量瓶中,加30%乙醇至6ml,照标准曲线制备项下的方法,自“加5%亚硝酸钠溶液1ml”起,依法测定吸光度,同时取供试品溶液2ml,除不加氢氧化钠试液外,其余同上操作,作为空白,从标准曲线上读出供试品溶液中含芦丁的浓度,计算,即得。