_聚谷氨酸高产菌株的选育及发酵条件优化

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聚谷氨酸高产菌株筛选及发酵条件优化.

γ中国生物工程杂志China Biotechnology, 2005, 25(12):62～65胡荣章1叶海峰1金丽1吴昌琳2吴自荣1*(1 华东师范大学生命科学学院上海2000622 华东师范大学物理系上海200062）摘要γ报道了以11株枯草芽孢杆菌菌株为培养菌株，用3种谷氨酸钠含量不同的培养基进行筛选获得1株γ初始pH、接种量、通气量等发酵条件的优化实验，结果表明最佳发酵条件为：250ml三角烧瓶装液40ml,接种体积分数5％，麦芽糖50g/L，酵母膏10g/L，谷氨酸钠30g/L， NaCl 10g/L，KH2PO4 5g/L，MgSO4·7H2O 0.5g/L，初始pH6.0，发酵60h，此时γ达到30.26g/L，比国外报道的20g/L的产量有显著提高。

纯化后产物经红外光谱及核磁共振检测，鉴定为γ关键词聚谷氨酸芽孢杆菌筛选发酵条件优化收稿日期：20050628修回日期：20051008* 通讯作者，电子信箱：zrwu@γγpolyglutamic acid,γPGA）是由微生物合成的一种细胞外高分子量聚合物，由谷氨酸的α－氨基和γ缩合而成。

Shih等［1］首次发现炭疽芽孢杆菌的荚膜中含有γPGA，随后发现有些芽孢杆菌属细菌能够通过发酵培养积累γPGA。

γPGA分子链上具有较高活性的羧基（-COOH），可与一些药物结合生成较稳定的复合物，在体内可被溶酶体降解为内源性谷氨酸，并释放出药物，是一种理想的药物载体［2,3］。

此外，它还具有水溶性、可生物降解、可食用、吸水性强、对人体和环境无毒害作用等特性，因而被广泛应用于食品、化妆品、水处理、农业医药等方面［4］。

但由于微生物发酵产量低，生产成本过高，因此还没有实现大规模生产，故筛选高产菌种、降低生产成本是解决问题的关键。

本研究从筛选高产菌种、优化发酵条件、提高产量着手进行了初步探讨。

1材料和方法1.1材料1.1.1菌种枯草芽孢杆菌（Bacillus. sp）共11株，由本实验室保存。

γ-聚谷氨酸生产菌种的ARTP诱变及其发酵条件优化

Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ａｓａｈｉ【ｇｈｍｏｌｅｃｕｌａｒａｍｉｎｏａｃｉｄｆｒｏｍｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，＾ｙ — ＰＧＡｈａｓｈｉｇｈｗａｔｅｒｓｏｌｕｂｉｌｉｔｙａｎｄｂｉｏｃｏｍｐａｔｉｂｉｌ — ｉｔｙ，ｗｈｉｃｈｃａｎｂｅｗｉｄｅｌｙｕｓｅｄｉｎｆｏｏｄ，ｍｅｄｉｃｉｎｅ，ｈｏｕｓｅｈｏｌｄｃｈｅｍｉｃａｌｓ，ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ
食
品与发
酵科
技
ＦｏｏｄａｎｄＦｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎＳｃｉｅｎｃｅｓ＆Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ
第５３卷（第６期）Ｖｏ１．５３，Ｎｏ．６
一
聚谷氨酸生产菌种的ＡＲＴＰ诱变及其发酵条件优化
２．ＳｉｃｈｕａｎＡｃａｄｅｍｙｏｆＦｏｏｄａｎｄＦｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎＩｎｄｓｔｕｒｉｅｓ，ＣｈｅｎｇｄｕＳｉｃｈｕａｎ６１３３３０，Ｃｈｉｎａ）
ＴｈｅＰｒｏｄｕｃｔｉｏｎｏｆＴ－ＰｏｌｙｇｌｕｔａｍｉｃＡｃｉｄＳｔｒａｉｎｂｙｔｈｅＡＲＴＰａｎｄＯｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎｏｆｉｔ ’ ＳＦｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎＣｏｎｄｉｔｉｏｎｓ

谷氨酸生产菌培养条件的优化

谷氨酸生产菌培养基条件的优化综述前言谷氨酸的发现为氨基酸的发展与应用奠定了基础。

以谷氨酸为基础生产的各种下游产品广泛的应用于食品、化工、医药等行业，其中味精是第一代食品调味品，其产量以及需求量正逐年递增。

由于微生物学及生物工程技术、基因工程技术的发展，使现如今谷氨酸发酵工业从粗放的、以传统经验为指导的生产正向着以了解发酵代谢机理为指导的新型工业生产发展，这为谷氨酸发酵工业带来了更大的发展空间。

谷氨酸生产工业与先进的生产技术相结合，对谷氨酸生产菌种的育种、代谢控制发酵和下游产品的开发具有一定的促进作用。

1.2 谷氨酸谷氨酸（Glutamic acid）作为一种酸性氨基酸，由里索逊于1856 年发现。

谷氨酸大量存在于谷类蛋白质及动物脑中，在生物体内的蛋白质代谢过程中占重要地位，并参与动物、植物和微生物中的许多重要化学反应，是构成蛋白质的20 种常见α-氨基酸之一，与我们的生活息息相关。

谷氨酸谷氨酸（Glutamic acid）作为一种酸性氨基酸，由里索逊于1856 年发现。

一、谷氨酸的应用1. 应用于食品行业谷氨酸是人类应用的第一个氨基酸，也是世界上应用广，产量及销量最大的一种氨基酸，主要用于食品行业中味精的生产。

L-谷氨酸是制造味精的前体，与适量碱反应可生成谷氨酸钠，即味精。

这是家喻户晓的一种风味增强剂，是重要的鲜味剂，不仅具有增强食品风味的功能，而且对动物性食品还具有保鲜作用，最重要的是这种风味添加剂食用安全，应用性较广。

在食品中浓度为0.2 % ~ 0.5 %，每人每天允许摄入量（ADl）为0 ~ 120 μg/ kg（以谷氨酸计）。

2. 应用于医药行业谷氨酸还可用于医药，虽然它并非人体必需氨基酸，但它可作为碳氮营养参与机体代谢，有较高的营养价值。

谷氨酸的先进生产工艺

谷氨酸的先进生产工艺谷氨酸是一种重要的氨基酸，在食品添加剂、保健品、药物、化妆品等领域有广泛的应用。

目前，谷氨酸的生产工艺主要有微生物发酵法和化学合成法两种。

微生物发酵法是目前主要的生产方法，下面将重点介绍谷氨酸的先进生产工艺。

微生物发酵法是利用谷氨酸高效产生菌株通过生物代谢反应将低价的有机废弃物转化为谷氨酸。

谷氨酸的先进生产工艺主要包括菌株选育、发酵过程优化和分离纯化技术三个方面。

首先，菌株选育是谷氨酸生产工艺的核心环节。

目前，国内外研究人员已经从多种微生物中筛选出多种高效的谷氨酸产生菌株，如变异株、突变株等。

其中，变态球菌、拟杆菌、乳酸杆菌和乳酸菌是常用的谷氨酸产生菌株。

菌株选育的目标是寻找产量高、菌种稳定、代谢特性好的菌株，并通过遗传工程手段进一步提高菌株的产酸能力和抗性。

其次，发酵过程优化是提高谷氨酸生产效果的关键。

发酵过程优化主要包括培养基优化、发酵条件调控、发酵设备升级等方面。

培养基优化是通过调整培养基组成和添加合适的添加剂来提高菌种的生长速度和产酸能力，如碳源、氮源、有机酸、氨基酸等。

发酵条件调控包括发酵温度、pH值、氧气供给、搅拌速度等，通过合理调节这些因素可以提高菌种的生理代谢活性和谷氨酸的产量。

发酵设备升级是利用现代生物工程技术，开发新的发酵设备和设备控制系统，提高谷氨酸发酵的自动化水平和生产效能。

最后，分离纯化技术是谷氨酸生产工艺中不可或缺的环节。

分离纯化技术主要包括过滤、浓缩、离心、脱色、结晶等过程。

在分离纯化过程中，采用适当的工艺条件和操作方法，可以高效地提取和纯化谷氨酸。

目前，常用的分离纯化技术包括膜分离技术、离子交换及吸附技术、凝胶过滤技术等。

这些技术既可以提高产品的纯度，又可以降低生产成本，提高谷氨酸的生产效能。

综上所述，谷氨酸的先进生产工艺主要包括菌株选育、发酵过程优化和分离纯化技术三个方面。

通过优化这些环节，可以提高谷氨酸的生产效能和产品质量，推动谷氨酸产业的发展。

L-组氨酸高产菌株的选育及其发酵条件优化

文章编号：０９００（０６０－７７０１０－０２０）５０４ — ３２
研究报告
Ｌ组氨酸高产菌株的选育及其发酵条件优化一
史楠，刘辉，陈宁
天津科技大学生物工程学院，天津３０２０２２
［要］目的：摘以谷氨酸棒杆菌Ｔ２２（ｈ－ｙ－５Ｍ＇ＳＶ－／Ｉ为出发菌株，向选育具有５Ｑ２３ＰｅＴｒ－ＰＧ５￣ＣＮ）／／／定－甲基色氨酸抗性
（－＇）磺胺胍抗性（Ｇ）５氟色氨酸抗性（－Ｐ）８氮鸟嘌呤抗性（－Ｇ）６巯基嘌呤抗性（－￣、－唑丙氨酸抗５ＭＰ、Ｓｒ、－５Ｆ、－８Ａ＇、－６Ｍ１）２噻
性（－）遗传标记的突变株；２Ｔ等同时对突变株发酵培养基及条件进行研究，获得最优条件。方法：经硫酸二乙酯诱变处理，测定了诱变时间与致死率的关系，对发酵培养基中不同氮源、物素添加量进行了单因素实验，接种量、酵培养温度并生对发等发酵条件也进行了实验确定。结果：诱变处理后，向选育出的菌株Ｔ１０（－ＰＳＶ一Ｐ８ＡＶ一Ｖ２Ｔ在经定Ｌ１５５Ｍ＇Ｇ５Ｆ／一Ｇ６ＭＰ一Ａ）／未经优化的摇瓶发酵条件下，＿氨酸的产量为１．／；优化培养条件后，＿氨酸的产量达２ — ４ｇＬＬ组２０ｇＬ而２Ｌ组３２／。结论：确定最佳诱变时间３ｍｉ，时致死率为８％。酸铵为发酵培养基中最适碳源，物素添加量为５ｐ／采用５０ｎ此０硫生０￣Ｌ，ｇ％接种量为宜，组氨酸发酵的最适温度为３ ℃ 。０［键词］组氨酸；氨酸棒杆菌；变；化关谷诱优

γ-聚谷氨酸产生菌的发酵培养基优化

γ-聚谷氨酸产生菌的发酵培养基优化李文婧;赵祥颖;田延军;张家祥;韩延雷;刘建军【期刊名称】《食品与发酵工业》【年(卷),期】2010(036)003【摘要】采用响应面试验对1株γ-聚谷氨酸产生菌的发酵培养基进行优化,得到的产γ-PGA发酵培养基组合为:NaCl 15g/L、豆粕53 g/L、柠檬酸钠16 g/L、谷氨酸钠40 g/L、NH_4Cl 4.6 g/L、K_2HPO_4 0.625 g/L、MgSO_4 1.25g/L、MnSO_4 0.35 g/L、CaCl_2 0.2 g/L,在此条件下,γ-PGA发酵产率为25.81 g/L,比优化前提高了约1.5倍.【总页数】5页(P108-111,116)【作者】李文婧;赵祥颖;田延军;张家祥;韩延雷;刘建军【作者单位】山东轻工业学院食品与生物工程学院,山东,济南,250353;山东省食品发酵工程重点实验室,山东,济南,250013;山东省食品发酵工程重点实验室,山东,济南,250013;山东省食品发酵工程重点实验室,山东,济南,250013;山东省食品发酵工程重点实验室,山东,济南,250013;山东轻工业学院食品与生物工程学院,山东,济南,250353;山东省食品发酵工程重点实验室,山东,济南,250013【正文语种】中文【相关文献】1.γ－聚谷氨酸产生菌发酵培养基的响应面法优化研究 [J], 张海群;张智维;刘婷2.利用响应面法优化γ-聚谷氨酸发酵培养基 [J], 于晓丹;马霞;王可;陈君娜3.解淀粉芽孢杆菌fmbj37产γ-聚谷氨酸发酵培养基的优化 [J], 盛洁; 孟凡强; 吕凤霞; 赵海珍; 张充; 陆兆新4.γ-聚谷氨酸生产菌株的鉴定及发酵培养基优化 [J], 张雷;张蕾;王玲莉;魏占波;李杰;周怡;丁芳;高纪超;石元亮5.暹罗芽孢杆菌LW-1产γ-聚谷氨酸发酵培养基的优化 [J], 蔡亚慧;王青;王文玉;皇高峰;张继冉;徐淑霞;张世敏;吴坤因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

L-谷氨酰胺高产菌株选育及发酵过程优化的开题报告

L-谷氨酰胺高产菌株选育及发酵过程优化的开题报告
一、选题背景
谷氨酰胺（L-Glutamine，L-Gln）是一种广泛应用于医药、保健品、食品和饲料等领域的重要氨基酸，在生物体内具有多种功能，如维持肠
道黏膜屏障、免疫调节、脑神经传递等。

由于其生理功能的多样性和重
要性，谷氨酰胺市场需求量逐年增加，成为一种具有广阔市场前景的生
物活性物质。

谷氨酰胺的生产主要依靠微生物发酵工艺，然而，传统发酵方法生
产谷氨酰胺效率较低，产量有限。

因此，选育高产菌株和优化发酵过程
是解决该问题的有效途径。

二、研究目的和内容
本研究旨在选育高产谷氨酰胺的菌株，并通过发酵过程的优化，提
高谷氨酰胺的生产效率。

具体内容包括：
1. 从具有谷氨酰胺生产潜力的微生物中筛选出高产谷氨酰胺的菌株，并进行鉴定和优化。

2. 采用响应面分析等方法优化谷氨酰胺发酵过程的参数，包括菌种
培养条件、发酵基质成分和发酵条件等。

3. 根据最佳发酵条件进行大规模发酵试验，考察谷氨酰胺的产量和
品质等指标，并与传统发酵工艺进行比较分析。

三、研究意义
本研究的成果可以为谷氨酰胺的生产提供新的思路和方法，解决传
统发酵工艺产量低、生产效率低等问题，提高谷氨酰胺的产量和质量，
为生物活性物质的生产和应用提供强有力的支持。

此外，研究过程中所涉及到的微生物分离、鉴定和优化方法，对于探索和利用其他有潜力的微生物，并提高其代谢产物的产量和质量也具有一定的参考意义。

γ-聚谷氨酸生产菌的选育及培养条件研究

ｐｏｕｃｎｇ — ｏｙｌｔｍｉｃｄｒｄｉｐｌｇｕａｃａｉ
ＦＮＺｉｂｎ，ＣＥＧｈ— ｉＨＥＮＳｉｉＧｈ— ，ＭＩｉｇＨＡＮＧＹｕｘａｇｗｅＡＯＪｎ，Ｚ —ｉｎ，
ＷＡＧＱｎｑｎＹＮａ—ｏｇＺＵＹｎ—ｕＮｉ—ｉ，ＡＧＺｉｎ，Ｈｉｇｐｄ
中图分类号：９５Ｑ３文献标志码：Ａ文章编号：６２— ６８２１）１— ００— ５１７３７（００００４０
ＳｒｅｉｇａｄｏｔｚｎｕｔｒｏｄｔｎｆＢａｉｕｔａｎｆｒｃｅｎｎｎｐｉｉｇｃｌｅｃｎｉｏｓｏｃｌｓｓｒｉｏｍｉｕｉｌ
ｇｎｓｓｂｅｅｉｙＵＶｎａｄＮＴＧ，ａｔｗａｅｅｉｌｔｂｅｉ０ｇｎｒｔｏｓｅｍｅｔｔｏｄｕｍｏｏｉｎｄｉｓｇｎｔａｌｓａｌｎ１ｅｅａｉｎ．Ｆｒｎａｉｎｍｅｉｃｍｐｓ— ｃｙｔｏｏｈｅｍｕａｔｓｒｉｓｏｔｍｉｅｙａｓｎｌａｔｒａｄｐｅｉｎｒｒｈｇｎｌｅｐｒｍｅｔ．Ｔｈｉｎｆｒｔｔｎｔａｎｗａｐｉｚｄｂｉｇｅｆｃｏｎｒｌｍｉａｙｏｔｏｏａｘｅｉｎｓｅａｅａｅｙｅｄｏ－ｏｙｌｔｍｉｃｄｒａｈｄ２．／ｏｈｐｉｚｄｍｅｉｍ．ｖｒｇｉｌｆｐｌｇｕａｃａｉｅｃｅ８５ｇＬｎｔｅｏｔｍｉｅｄｕＫｅｒｙｗｏｄｓ：ｃｌｕｕｔｉＢａｉｌｓｂｉｓ；ｏｔｍｉａｉｎ；－ｏｙｌｔｍｉｃｄ；ｓｒｅｉｇｓｌｐｉｚｔｏｐｌｇｕａｃａｉｃｅｎｎ

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H D F1 H D F2 H D F3 H D F4
7. 51 ! 0. 34 7. 84 ! 0. 40 7. 98 ! 0. 51 8. 51 ! 0. 37
H D F6 H D F7 H D F8 H D F9
9. 86! 0. 47 9. 94! 0. 50 10. 01 ! 0. 33 10. 72 ! 0. 41
聚谷氨酸( po lyg lut amic acid, PGA) , 是由 L 谷氨酸和 D 谷氨酸单体之间通过氨基和羧基形成肽键之后生成的同聚酰胺, 分子质量一般在 10 万~ 100 万 u[ 1] , 具有增稠、乳化、凝胶、成膜、保湿和粘接等功能特性, 可广泛用于医药制造、食品加工、重金属吸附、化妆品生产、植物种子保护等许多领域, 是一种有极大开发价值和前景的高分子生物制品[ 2 4] .
180
河南大学学报( 自然科学版) , 2010 年, 第 40 卷第 2 期
1. 2 主要培养基固体分离培养基: 蛋白胨 1 % , 酵母膏 0. 5 % , NaCl 1 % , 琼脂 2 % , pH 7. 0, 121 灭菌 20 min. 种子培养基: 葡萄糖 2 % , 酵母膏 0. 5 % , 谷氨酸钠 1 % , K H 2P O4 0. 2 % , M gSO4 0. 025 % , pH 7. 0,
杜沛, 等: 聚谷氨酸高产菌株的选育及发酵条件优化
1 81
2. 2 菌株稳定性实验结果筛选产量较高的突变株 H D F6、H D F7、H D F8、H D F9 在斜
面培养基中转接 10 代, 每代再进行摇瓶实验, 测定每代摇瓶的 PGA产量, 其中 H D F 9 比较稳定, 结果见图 1.
对 PGA 产量的影响, 结果见图 5, 酵母膏最佳浓度选 8 g/ L .
图 4 氮源对 PG A 产量的影响 Fig. 4 Effect of nitr og en sour ces on pro duction of P GA
将发酵液 10 000 r/ min 离心收集菌体, 加入等体积的 0. 85 % 无菌生理盐水洗脱菌体, 制成浓度为 10- 8 个/ m L 左右的单细胞菌悬液. 分别做硫酸二乙酯 ( diethy l sulfat e, DES) 、亚硝基胍( nit roso guanidine, NT G) 和紫外诱变, 处理条件分别为 0. 9 % DES, 0. 4 m g/ m L NT G, 15 W、30 cm、120 s 的紫外照射. 将处理后的菌液混合, 冷藏 2 h, 转接于液体培养基, 37 、200 r/ m in 振荡培养 6 h, 取少量菌液做甘油管保藏, 其余菌液做下一步诱变, 共重复诱变 3 次. 将 3 次诱变后的菌液混合, 稀释, 涂布平板, 挑选湿润、粘稠的菌落做摇瓶复筛[ 10] . 1. 5 分析方g. 3 Effect of carbon so ur ces concentr atio n
on product ion of PG A
2. 3. 2 氮源种类筛选及浓度优化结果
发酵培养基中分别添加 6 g / L 的蛋白胨、牛肉膏、酵母膏、玉米浆、( N H 4 ) 2SO 4 作为氮源, 其他条件相同, 结果见图 4. 酵母膏作为氮源时, PGA 产量最高. 以发酵培养基为基础, 选择不同浓度酵母膏来考察其
Abstract: Bacillus s ubtilis H D 23 was used as or ig inal str ain fo r PG A pr oduction, w hich w as treated w ith multi mutag enicity method of ultrav iolet, diethyl sulfate and nitr osog uanidine. Bacillus subtilis HD F 9 w as isolated, and the PG A yield attained 10. 72 g/ L increasing by 56. 3 % , and the mutant show ed genetic stability during 10 generatio ns. T he fermentatio n medium optimized by or thogo na l ex periment was glucose 50 g / L , yeast extr act 8 g/ L , mo no so dium g lutamate 40 g/ L . In 250 mL shake flask, the o ptimal medium v olume, temper ature, o riginal pH , r otation speed wer e 40 mL, 37 , pH 7. 5 and 200 r / min. T he f inal PG A y ield att ained 14. 88 g/ L incr easing by 38. 8 % . Key words: polyg lutamic acid; mult i mut agenicity ; fermentation; or thog onal ex per iment
第 40 卷第 2 期 2010 年 3 月
河南大学学报( 自然科学版) Journal of H enan U niver sity ( N atur al Science)
V ol. 40 N o. 2 M ar. 2010
聚谷氨酸高产菌株的选育及发酵条件优化
杜沛, 宴正, 陈双喜*
( 河南大学生命科学学院生物工程研究所, 河南开封 475004)
将发酵液 10 000 r/ m in 离心去除菌体, 取上清液测谷氨酸单体含量; 另取部分上清液与 6 mo l/ L 的盐酸按 1 1 体积比加入试管中混匀, 封口后于 121 水解 2 h, 然后测水解液中谷氨酸总量, 两次测得谷氨酸含量之差为 P GA 的含量[ 12] .
2 结果与分析
PGA 的化学结构独特, 很难通过化学方法合成, 目前获取 P GA 的最有效的途径是通过微生物发酵[ 5, 6] . 目前国内 P GA 产生菌产量都比较低, 难以实现大规模生产, 因此筛选高产菌种、降低生产成本是解决问题的关键. 本文以实验室筛选出的 P GA 产生菌 Bacil l us subti li s H D 23 作为原始出发菌株, 进行紫外线- 硫酸二乙酯- 亚硝基胍多组复合诱变, 选育出一株遗传稳定性良好的高产突变株并对其摇瓶发酵条件进行了研究.
115 灭菌 20 min. 发酵培养基: 葡萄糖 4 % , 酵母膏 0. 8 % , 谷氨酸钠 3 % , K H 2P O4 0. 2 % , M gSO4 0. 025 % , pH 7. 5,
115 灭菌 20 min[ 7 9] . 1. 3 培养方法 1. 3. 1 菌种活化
取 H D 23 菌种一环, 接入新鲜斜面培养基中, 37 培养 18 h. 1. 3. 2 种子培养
DU Pei, Y A N Zheng , CH EN Shuang x i*
( I nstitute of Bioengineering , Col lege of L if e S cience, H enan Univers ity , H enan K aif eng 475004 , China)
2. 1 多组复合诱变的结果从筛选平板上分离纯化了 45 株形态大、表面光滑且粘稠的单菌落, 将每个单菌落斜面保藏, 液体发酵后
测定 P GA 产量, 有 9 株产量较高( 表 1) , 其中 H D F 6、H D F 7、H D F8、H D F9 产量比出发菌株分别提高了 43. 7 % 、44. 9 % 、45. 9 % 、56. 3 % , 可见复合诱变的效果比较明显.
中图分类号: Q 815
文献标志码 : A
文章编号: 1003- 4978( 2010) 02- 0179- 06
High Production Strain Breeding for Polyglutamic Acid and Its Fermentation Conditions Optimization
250 mL 三角瓶内装 20 mL 种子培养基, 接种活化后的斜面培养物一环, 37 , 200 r/ min 振荡培养 10 h. 1. 3. 3 发酵培养
250 mL 三角瓶中装发酵培养基 40 mL , 接种量 3 % , 37 , 200 r/ m in, 振荡培养 48 h. 1. 4 多组复合诱变方法
1 材料与方法
1. 1 出发菌种枯草芽胞杆菌( Baci l lus subti li s ) H D 23, 河南大学生物工程实验室筛选保藏.
收稿日期: 2009 12 03 作者简介: 杜沛( 1983- ) , 女, 河南南阳人, 在读硕士, 研究方向为微生物发酵工程. * 通讯作者, E mail: csx 1231@ 126. co m
表 1 复合诱变菌株 PG A 产量
T ab. 1 T he P GA yield of strains by mult i mut agenicity
菌株
PG A 质量浓度/ ( g/ L)
菌株
P GA 质量浓度/ ( g / L )
原始菌株
6. 86 ! 0. 29
H D F5
8. 96! 0. 19
采用 721 分光光度计测定 600 nm 下菌悬液的光密度. 1. 5. 2 pH 的测定
采用数字式 pH 计测定. 1. 5. 3 谷氨酸含量测定
用纸层析法[ 11] 测定, 谷氨酸含量与 OD 520 之间的关系为: y = 0. 1937 x - 0. 0409 , R2 = 0. 997 5. 1. 5. 4 P GA 含量的测定