微生物学实验教案
微生物生理学实验教案
微⽣物⽣理学实验教案实验⼀酸乳制品中乳酸菌的分离⼀、实验⽬的学会并掌握从酸乳中分离乳酸菌的技术进⼀步巩固⽆菌操作技术。
⼆、实验原理酸乳中乳酸菌的分离采⽤溴甲酚绿（BCG）⽜乳营养琼脂平板分离法。
溴甲酚绿指⽰剂在酸性环境中呈黄⾊，在碱性环境中呈蓝⾊。
在分离培养基（pH6.8）中加⼊溴甲酚绿指⽰剂后呈蓝绿⾊，乳酸菌在该培养基中⽣长并分解乳糖，产⽣乳酸，使菌落呈黄⾊，菌落周围的培养基也变为黄⾊。
乳酸可⽤纸上层析法鉴别。
三、实验器材1、材料：市售酸奶2、培养基：（1） BCG脱脂乳粉培养基：A(溶液)：脱脂奶粉100g，⽔500mL，加⼊1.6%溴甲酚绿（B.C.G）⼄醇溶液1mL，80℃灭菌20min。
B(溶液)：酵母膏10g，⽔500mL，琼脂20g，pH6.8，121℃灭菌20min以⽆菌操作趁热将A B溶液混合均匀后倒平板。
（2）10%脱脂乳粉培养基：脱脂乳粉10g，⽔100mL，121℃灭菌20min。
2、器材：涂布器、培养⽫、⽆菌⽣理盐⽔/⽆菌⽔四、操作步骤1、制备BCG⽜乳营养琼脂培养基。
①称取脱脂奶粉10g，溶于50mL⽔中，加⼊1.6%溴甲酚绿酒精溶液0.1mL，0.075MPa压⼒下灭菌20min。
②另取琼脂2g，溶于50mL⽔中，加酵母膏1g，溶解后调pH值⾄6.8，0.1MPa压⼒下灭菌20min。
③趁热将上述两液以⽆菌操作混合均匀，倒平板4个。
2、梯度稀释：将样品以10倍稀释法稀释⾄10-6，取其中10-5、10-6 2个稀释度的稀释液各0.1~0.2mL，分别置于上述各营养平板上，⽤⽆菌涂布器依次涂布2个⽫，置43℃培养48h，如出现圆形稍扁平的黄⾊菌落及其周围培养基亦为黄⾊者初步定为乳酸菌。
3、将典型菌落转⾄10%脱脂乳发酵管，43℃培养8~24h，若⽜乳管凝固，⽆⽓泡，呈酸性，镜检细胞杆状或链球状，⾰兰⽒染⾊呈阳性，则将其连续传代若⼲次，43℃培养，挑选出在3~4h能凝固的乳管，保存备⽤。
微生物学教案
微生物学教案一、教学目标1.知识与技能：（1）了解微生物的概念、特点及分类。
（2）掌握微生物的生长条件及影响因素。
（3）了解微生物在自然界和人类生活中的作用。
（4）了解微生物的实验室培养和观察方法。
2.过程与方法：（1）通过观察微生物的图片和实物，培养学生的观察能力。
（2）通过实验操作，培养学生的动手能力和实验技能。
（3）通过小组讨论，培养学生的合作能力和交流能力。
3.情感、态度与价值观：（1）培养学生对微生物学的兴趣和好奇心。
（2）培养学生珍爱生命、保护环境的意识。
（3）培养学生严谨的科学态度和探索精神。
二、教学内容1.微生物的概念、特点及分类（1）微生物的概念：微生物是一类个体微小、结构简单的生物，包括细菌、真菌、病毒等。
（2）微生物的特点：体积小、面积大、生长速度快、繁殖能力强、适应性强、分布广泛。
（3）微生物的分类：根据微生物的结构和生物化学特征，将其分为细菌、真菌、病毒等类别。
2.微生物的生长条件及影响因素（1）微生物的生长条件：适宜的温度、pH值、水分、营养物质等。
（2）微生物的生长影响因素：温度、pH值、水分、营养物质、氧气、有害物质等。
3.微生物在自然界和人类生活中的作用（1）微生物在自然界中的作用：参与物质循环、能量流动、生态平衡等。
（2）微生物在人类生活中的作用：食品发酵、药物研发、环境保护、生物技术等。
4.微生物的实验室培养和观察方法（1）微生物的实验室培养：培养基的制备、接种、培养条件控制等。
（2）微生物的观察方法：光学显微镜观察、电子显微镜观察、染色技术等。
三、教学过程1.导入新课：通过展示微生物的图片和实物，引起学生对微生物的兴趣，引出本节课的主题。
2.讲授新课：（1）讲解微生物的概念、特点及分类。
（2）讲解微生物的生长条件及影响因素。
（3）讲解微生物在自然界和人类生活中的作用。
（4）讲解微生物的实验室培养和观察方法。
3.实验操作：（1）观察微生物的图片和实物。
（2）进行微生物的培养实验。
《微生物学》教案(共6)
结
物
构
原
质
核
生
微
细胞壁、细胞膜、细胞
物
质
的
生
异养、自养、兼性自养
物
代
的
谢
应
方
用
式
04
微生物营养与代谢
营养类型及营养物质吸收方式
营养类型
根据微生物对营养物质的需求和利用方式，可分为光能自养型、化能自养型、光能异养型和化 能异养型等。
营养物质吸收方式
微生物通过细胞膜上的特定转运蛋白或通道蛋白，以主动运输或被动运输的方式吸收营养物质 ，如氨基酸、糖类、无机盐等。
显微镜
使用前应检查镜头是否干净、光源是 否正常，使用过程中要轻拿轻放，避
免损坏镜头。
离心机
使用前应检查离心管是否平衡、转速 和时间设置是否合理，使用过程中要 注意观察离心机运转情况，如有异常
应立即停机检查。
培养箱
使用前应检查温度、湿度等参数是否 设置正确，使用过程中要定期观察培 养物生长情况，及时调整参数。
微生物学是研究微生物及其生命活动的科学，涉 及细菌、病毒、真菌、原生动物等微小生物。
02 课程内容与体系结构
课程内容涵盖微生物的形态结构、生理生化、遗 传变异、生态分布及分类进化等方面，体系结构 完整，注重基础理论与实践应用相结合。
03 微生物学在相关领域的应用
微生物学在医学、农业、工业、环保等领域具有 广泛应用，对于人类健康、经济发展及生态环境 保护具有重要意义。
《微生物学》教案( 共6)
目录
• 课程介绍与教学目标 • 微生物基本概念与分类 • 微生物形态结构与功能 • 微生物营养与代谢 • 微生物生长繁殖与遗传变异 • 微生物生态与环境影响 • 免疫系统与抗感染免疫 • 实验操作规范及注意事项
幼儿园科学探索：微生物世界实验教案
幼儿园科学探索：微生物世界实验教案微生物世界对于幼儿来说，是一个神秘而又充满好奇的领域。
通过实验，可以让幼儿们更好地了解微生物的存在和影响。
在这篇文章中，我将为您介绍一份幼儿园科学探索微生物世界的实验教案，并共享我对这个主题的观点和理解。
一、实验目的1. 让幼儿了解微生物的存在和种类2. 观察微生物的生长和变化3. 培养幼儿的观察力和实验能力二、实验材料1. 一瓶透明的瓶子2. 白糖3. 酵母4. 温水5. 一个放大镜三、实验步骤1. 将适量的白糖和酵母混合在瓶子中2. 加入适量的温水后，盖好瓶盖3. 让幼儿们用放大镜观察瓶子里的液体4. 鼓励幼儿们记录观察到的微生物的形态和变化四、实验讨论通过上述实验，幼儿可以观察到酵母在温暖潮湿的环境下生长并产生气泡的情况。
这些气泡就是酵母呼吸作用的产物，让幼儿们通过实际观察和亲身体验，更好地理解微生物的存在和作用。
五、实验总结通过这个实验，幼儿不仅可以学习到科学知识，更重要的是培养了他们对微生物世界的好奇心和观察力。
这样的实验教案可以在幼儿园的科学教育中得到广泛应用，引导幼儿们主动参与到科学探索中来，激发他们对科学的兴趣和热爱。
六、我的观点和理解微生物世界是一个神秘而又丰富多彩的领域，幼儿正处于求知的阶段，通过这样的实验教案，不仅可以拓宽他们的科学视野，更能够锻炼他们的观察力和实验能力。
我相信，通过这样的科学探索，幼儿们将更加热爱科学，更加主动地探索未知的世界。
幼儿园科学探索微生物世界的实验教案有助于培养幼儿的科学兴趣和实验能力，引导他们主动探索和发现微生物世界的奥秘。
希望这样的实验教案能够得到更广泛的推广和应用，让更多的幼儿在科学探索中茁壮成长。
幼儿园科学探索微生物世界的实验教案是非常有意义的，因为微生物是孩子们最陌生的科学领域之一。
通过这个实验，孩子们可以亲身体验到微生物的存在和作用，培养他们的观察力和实验能力，以及对科学的好奇和热爱。
这样的实验教案也能够引导孩子们主动参与科学探索，培养他们的科学思维和学习兴趣。
微生物学实验教案
革兰氏染色法一、[目的要求]了解革兰氏染色的原理；掌握革兰氏染色的方法。
二、[实验原理]根据革兰氏染色反应的结果，可将所有细菌分为两类：呈蓝紫色的称为革兰氏阳性细菌，用G+表示；呈红色的称为革兰氏阴性细菌，用G-表示；三、[实验步骤]（插片法）1.涂片2.固定3.染色4.干燥5.镜检四、[实验报告]1.实验结果报告所观察到的两种细菌革兰氏染色的结果并绘图。
2.思考题1.革兰氏染色涂片为什么不能过于浓厚？2. 革兰氏染色成败的关键在哪一步？为什么？应如何掌握？实验四微生物大小的测定及计数一、[目的要求]1学习并掌握用测微尺测定微生物大小的方法。
增强微生物细胞大小的感性认识。
2.明确血球计数板计数的原理3.掌握使用血球计数板进行微生物计数的方法。
二、[实验原理]微生物细胞的大小是微生物基本的形态特征，也是分类鉴定的依据之一。
微生物大小的测定在显微镜下，借助于特殊的测量工具—测微尺，包括目镜测微尺和镜台测微尺。
显微镜直接计数法是将小量待测样品的悬浮液置于一种特别的具有确定面积和容积的载玻上(又称计菌器)，于显微镜下直接计数的一种简便、快速、直观的方法。
三、[实验步骤]1.目镜测微尺的标定2.菌体大小的测定3.用毕后处理取出目镜测微尺，将目镜测微尺和镜台测微尺用檫镜纸檫试干净，放回盒内保存。
4.稀释5.镜检记数室6.显微镜记数7.清洗血细胞记数板四、[实验报告]1.实验结果将测得的菌体大小值填入表中。
2.思考题若目镜和目镜测微尺不便，只改用不同放大倍数的物镜测定同一菌体时，其测定结果是否相同？为什么？3.根据你实验的体会，说明用血细胞记数板的误差主要来自哪些方面？应如何尽量减少误差，力求准确？实验五牛肉膏蛋白胨培养基的制备一、[目的要求]1. 明确培养基的配制原理。
2.通过对基础培养基的配制，掌握配制培养基的一般方法和步骤。
3.了解高压蒸汽灭菌的基本原理及应用范围。
4.学习高压蒸汽灭菌的操作方法。
二、[实验原理]牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基，有时又称为普通培养基，由于这种培养基中含有一般细菌生长繁殖所需要的最基本的营养物质，所以可供作微生物生长繁殖之用。
《微生物学教案》
微生物学教案（一）教学目标：1. 了解微生物的定义和分类。
2. 掌握微生物的基本特征和生命活动。
3. 认识微生物在自然界和人类生活中的重要作用。
教学内容：1. 微生物的定义和分类2. 微生物的基本特征3. 微生物的生命活动4. 微生物在自然界和人类生活中的作用教学过程：1. 导入：通过展示微生物图片，引起学生兴趣，提问“你们知道什么是微生物吗？”2. 讲解：介绍微生物的定义、分类、基本特征、生命活动以及其在自然界和人类生活中的作用。
3. 互动：学生分享他们对微生物的了解，提问解答。
教学评价：1. 课堂参与度：学生分享和提问解答的情况。
2. 理解度：学生对微生物定义、分类、基本特征和生命活动的掌握程度。
3. 应用能力：学生对微生物在自然界和人类生活中作用的的理解和举例。
微生物学教案（二）教学目标：1. 了解微生物的培养方法和培养基的制备。
2. 掌握微生物的分离和纯化技术。
3. 认识微生物的鉴别和鉴定方法。
教学内容：1. 微生物的培养方法2. 培养基的制备3. 微生物的分离和纯化4. 微生物的鉴别和鉴定方法教学过程：1. 导入：回顾上一节课的内容，提问“你们知道微生物是如何培养的吗？”2. 讲解：介绍微生物的培养方法、培养基的制备、分离和纯化技术以及鉴别和鉴定方法。
3. 互动：学生演示微生物的分离和纯化操作，提问解答。
教学评价：1. 操作能力：学生进行微生物分离和纯化操作的准确性。
2. 理解度：学生对微生物培养方法、培养基制备和鉴别鉴定技术的掌握程度。
3. 应用能力：学生能够将所学知识应用于实际微生物实验。
微生物学教案（三）教学目标：1. 了解微生物的代谢类型和代谢产物。
2. 掌握微生物的生长条件和优化方法。
3. 认识微生物在工业生产和环境中的应用。
教学内容：1. 微生物的代谢类型和代谢产物2. 微生物的生长条件和优化方法3. 微生物在工业生产和环境中的应用教学过程：1. 导入：回顾上一节课的内容，提问“你们知道微生物的代谢类型和代谢产物吗？”2. 讲解：介绍微生物的代谢类型、代谢产物、生长条件和优化方法以及其在工业生产和环境中的应用。
微生物学实验教案
微生物学实验教案引言：微生物学是研究微生物的结构、生长、代谢、生态和应用等方面的科学。
微生物实验是微生物学教学中重要的一环，通过实验可以帮助学生深入了解微生物的特性和应用，提高学生对微生物学的兴趣和理解。
本教案将结合教学目标和实验内容，设计一系列的微生物实验，旨在培养学生的观察和分析能力，提高实验操作技巧，加深对微生物学知识的理解。
一、教学目标：1.了解微生物的概念、分类和特性；2.学习微生物的培养、观察和鉴定方法；3.掌握微生物的常用实验技巧和操作规范；4.培养学生的科学思维和实验设计能力。
二、实验一：微生物的分类与观察实验目的：通过观察不同类型的微生物，了解微生物的形态特征和分类方法。
实验材料与仪器：显微镜、玻璃载片、消毒剂、甲苯、甘露醇、无菌培养皿、细菌培养基、酵母菌培养基。
实验步骤：1.准备工作：（1）消毒显微镜和工作台，用无菌培养皿收集微生物样品。
（2）取适量的微生物样品，分别涂抹于玻璃载片中。
2.显微镜观察：（1）对比观察不同微生物的形态特征，如菌落形态、颜色、大小等。
（2）用不同放大倍数的镜头观察微生物细胞的结构特征。
3.制备细菌涂片：（1）取少量细菌培养液，挖取细菌菌落，均匀涂抹在玻璃载片上。
（2）用火焰烘烤杀灭细菌，用甲苯固定细菌。
4.观察细菌涂片：（1）用40倍镜头观察细菌涂片，观察细菌形态和排列方式。
（2）用100倍镜头观察细菌细胞的结构特征。
5.制备酵母涂片：（1）取酵母菌培养液，从菌落中取适量的酵母。
（2）用甘露醇固定酵母。
6.观察酵母涂片：（1）用40倍镜头观察酵母细胞的形态特征。
（2）用100倍镜头观察酵母细胞的结构特征。
实验结果：通过观察不同类型的微生物涂片，学生能够熟悉不同微生物的形态特征和细胞结构。
讨论与总结：1.微生物的形态特征对其分类具有重要意义。
2.不同微生物类群有不同的细胞结构。
3.观察微生物涂片的方法和技巧。
三、实验二：微生物的培养与鉴定实验目的：通过微生物的培养和鉴定，学习微生物的生长条件和鉴别方法。
小学微生物学教案模板
课时：2课时年级：四年级教学目标：1. 知识与技能目标：了解微生物的基本概念，认识到微生物在自然界中的重要作用。
2. 过程与方法目标：通过观察、实验、讨论等方式，培养学生的观察能力和科学探究能力。
3. 情感态度价值观目标：激发学生对微生物的兴趣，培养爱护环境、关注生态的意识。
教学重点：1. 微生物的基本概念。
2. 微生物在自然界中的作用。
教学难点：1. 微生物的微观世界特点。
2. 微生物与人类生活的关系。
教学准备：1. 教师：多媒体课件、显微镜、实验器材、观察样本等。
2. 学生：观察记录本、笔。
教学过程：第一课时一、导入1. 教师通过提问：“你们知道自然界中还有哪些生物？”引导学生思考。
2. 教师简要介绍微生物的概念，激发学生对微生物的兴趣。
二、新课讲授1. 教师通过多媒体课件，展示微生物的图片和视频，让学生直观地了解微生物。
2. 教师讲解微生物的基本概念，如微生物的定义、分类、特点等。
3. 学生分组讨论，交流对微生物的认识。
三、实验观察1. 教师指导学生进行简单的显微镜观察实验，观察微生物的形态。
2. 学生在实验过程中，记录观察到的微生物特点。
四、总结1. 教师引导学生总结本节课所学内容，强调微生物的基本概念和作用。
2. 学生分享实验观察结果，交流自己的发现。
第二课时一、复习导入1. 教师提问：“上一节课我们学习了什么？”引导学生复习微生物的基本概念。
2. 教师简要回顾微生物在自然界中的作用。
二、新课讲授1. 教师讲解微生物与人类生活的关系，如食品、药品、环境等。
2. 学生分组讨论，探讨微生物在人类生活中的应用。
三、拓展延伸1. 教师引导学生思考：如何保护微生物的生态环境？2. 学生分享自己的观点，讨论如何关爱微生物。
四、总结1. 教师总结本节课所学内容，强调微生物在自然界和人类生活中的重要作用。
2. 学生回顾本节课所学，分享自己的收获。
教学评价：1. 学生对微生物的基本概念和作用的理解程度。
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微生物实验教案实验一显微镜油镜的使用和细菌形态的观察一、实验目的以染色玻片为例,熟练掌握显微镜油镜的使用方法。
二、实验原理1 显微镜油镜使用的原理(1）光学部分：接目镜、接物镜、照明装置（聚光镜、虹彩光圈、反光镜等）。
它使检视物放大, 造成物象.（2）机械部分: 镜座、镜臂、镜筒、物镜转换器、载物台、载物台转移器、粗调节器、细调节器等部件。
它起着支持、调节、固定等作用。
2显微镜的放大倍数和分辨率（1）放大倍数=接物镜放大倍数×接目镜放大倍数（2）显微镜的分辨率：表示显微镜辨析物体（两端)两点之间距离的能力，可用公式表示为:D=λ/2n·sin（α/2 )式中D：物镜分辨出物体两点间的最短距离.λ：可见光的波长（平均0。
55μm）n: 物镜和被检标本间介质的折射率。
a：镜口角（即入射角）。
3油镜使用的原理油镜，即油浸接物镜。
当光线由反光镜通过玻片与镜头之间的空气时,由于空气与玻片的密度不同，使光线受到曲折，发生散射，降低了视野的照明度。
若中间的介质是一层油（其折射率与玻片的相近），则几乎不发生折射，增加了视野的进光量，从而使物象更加清晰。
三、实验材料1显微镜、香柏油、二甲苯、擦镜纸、吸水纸、载玻片、盖玻片、接种环、镊子、酒精灯、火柴、玻璃铅笔、蒸馏水等。
2枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌的玻片染色标本。
四、实验方法与步骤(1）用前检查：零件是否齐全，镜头是否清洁。
（2）调节光亮度.(3）低倍镜观察：先粗调再微调至物象清晰。
（4）转入中倍、高倍观察，每一不只需调微调旋纽即可看到清晰的物象。
（5）油镜观察：高倍镜下找到清晰的物象后，旋转转换器,在标本中央滴一滴香柏油,使油镜镜头浸入香柏油中，细调至看清物象为止。
（6)绘出所观察到的细菌形态图像。
（7)、换片:另换新片观察，必须从（3）步开始操作。
(8）、用后复原：观察完毕，上悬镜筒,先用擦镜纸擦去油镜头上的香柏油，然后再用擦镜纸沾取少量二甲苯擦去残留的油，最后用擦镜纸擦去残留的二甲苯，后将镜体全部复原.五、实验报告油镜使用的原理绘制细菌形态六、思考题1油镜与普通物镜在使用方法上有何不同？应特别注意些什么？2使用油镜时,为什么必须用镜头油？七、实验注意事项1不准擅自拆卸显微镜的任何部件，以免损坏。
2镜面只能用擦镜纸擦，不能用手指或粗布，以保证光洁度.3观察标本时，必须依次用低、中、高倍镜,最后用油镜。
当目视接目镜时，特别在使用油镜时，切不可使用粗调节器，以免压碎玻片或损伤镜面。
4观察时，两眼睁开,养成两眼能够轮换观察的习惯，以免眼睛疲劳，并且能够在左眼观察时，右眼注视绘图。
5拿显微镜时,一定要右手拿镜臂，左手托镜座，不可单手拿,更不可倾斜拿。
6显微镜应存放在阴凉干燥处,以免镜片滋生霉菌而腐蚀镜片.八、教学反馈实验二细菌的简单染色一、实验目的熟练掌握显微镜油镜的使用方法。
学习染色的基本技术，二、实验原理简单染色的原理大多数微生物细胞质是带负电荷,简单染色时采用已知的、带正电荷的碱性染料。
染料适用于热固定的涂片，染料与菌体细胞质黏附使菌体着色。
经染色后的细菌细胞与背景形成鲜明对比。
三、实验材料1显微镜、香柏油、二甲苯、擦镜纸、吸水纸、载玻片、盖玻片、接种环、镊子、酒精灯、火柴、玻璃铅笔、蒸馏水等。
2、培养12—18h的枯草芽孢杆菌和大肠杆菌以及金黄色葡萄球菌。
3、简单染色液(美蓝染色液、黑色素液或炭素墨水）四、实验方法与步骤1、活菌制片观察取一张干净的载玻片，在其中央滴上一滴干净的蒸馏水，取培养12-18h的枯草芽孢杆菌一小环，在水滴上反复涂抹至菌体充分分散，盖上盖玻片，用吸水纸吸去多余的水分,按照油镜的使用步骤，观察草芽孢杆菌形态，边观察边绘图。
2、简单染色(1）涂片:取两块干净的载玻片，各滴一小滴生理盐水于载玻片中央，用无菌操作分别挑取金黄色葡萄球菌和大肠杆菌于二载玻片的水滴中（每一种菌制一片)，调匀并涂成薄膜.注意滴生理盐水时不宜过多，涂片必须均匀。
(2）干燥：自然气干或酒精灯高处微微加热。
(3）固定:于火焰上通过2—3次.(4) 染色:在整个涂面上滴加齐氏石炭酸复红,染色１分钟。
（5）水洗:倾去染液，用自来水细流冲洗至流下的水中无染料颜色为止。
（6）干燥：空气中自然干燥或在酒精灯高处微微加热.（7）镜检:在油镜下观察细菌形态.五、实验报告油镜使用的原理绘制细菌形态六、思考题1镜检标本时，为什么先用低倍镜观察，而不是直接用高倍镜或油镜观察？2根据实验体会，你认为制备染色标本时，应注意哪些事项？七、教学反馈实验三细菌的革兰氏染色一、实验目的1掌握革兰氏染色。
2了解革兰氏染色法的原理及其在细菌分类鉴定中的重要性。
二、实验原理1 革兰氏染色的原理革兰氏阳性菌的细胞壁主要有肽聚糖形成的网状结构组成,在染色过程中，当用95%乙醇处理时,由于脱水而引起网状结构中的孔径变小，细胞壁的通透性降低,使结晶紫-碘复合物被保留在细胞壁内而不易脱色,因此呈蓝紫色。
革兰氏阴性菌的细胞壁中肽聚糖含量低,脂类物质含量高,当用乙醇处理时，脂类物质溶解，细胞壁的通透性增加，使结晶紫—碘复合物容易被乙醇抽提出来而脱色，然后又被染上了复染剂的颜色，因此呈现红色。
三、实验材料1大肠杆菌24h的斜面培养物.2葡萄球菌24h的斜面培养物。
4革兰氏染色液（结晶紫染液、卢戈氏碘液、95％乙醇、石碳酸复红）5载玻片、盖玻片、接种环、镊子、酒精灯、火柴、玻璃铅笔、蒸馏水等.6显微镜、香柏油、二甲苯、擦镜纸、吸水纸等。
四、实验方法和步骤附表1细菌染色法分类附表2 微生物染色常用染料A酸性染料:如酸性复红、刚果红、伊红、藻红、苯胺黑等.B碱性染料:一般有碱性复红、中性红、孔雀绿、番红、结晶紫、美兰、甲基紫等，细菌易被碱性染料染色。
C中性(复合)染料：如伊红、美兰等，Wright染料和Gimsa染料等（常用于细胞核染色）。
D单纯染色：这类染料物，不溶于水,但溶于脂肪溶剂中，如苏丹类(Sudan b）的染料2革兰氏染色（1）涂片。
(2）初染:在做好的涂面上滴加草酸铵结晶紫染液，染1分钟，倾去染液,流水冲洗至无紫色。
（3）媒染：先用新配的卢哥氏碘液冲去残水，而后用其覆盖涂面1分钟，后水洗。
（4）脱色：除去残水后，滴加95％酒精进行脱色约30秒，后立即用流水冲洗。
（5)复染:滴加番红染色液，染1分钟，水洗后用吸水纸吸干.(6）镜检：观察染色结果。
五、实验报告1 革兰氏染色的基本原理和意义2 革兰氏染色成败的关键六、思考题1根据实验体会，你认为制备染色标本时,应注意哪些事项？2制片为什么要完全干燥后才能用油镜观察？3做革兰氏染色涂片为什么不能过于浓厚？其染色成败的关键一步是什么?4当你对一株未知菌进行革兰氏染色时，怎样能确证你的染色技术操作正确，结果可靠?七、教学反馈实验四培养基的配制一、实验目的1学习和掌握配制培养基的一般方法和步骤2学会实验室灭菌锅的使用方法二、实验材料1牛肉膏、蛋白胨、琼脂、可溶性淀粉、葡萄糖、孟加拉红、链霉素、1mol/LNaOH、1mol/LHCl、KNO3、NaCl、K2HPO4·3H2O、MgSO4·7H2O、FeSO4.·7H2O。
2试管、三角瓶、烧杯、量筒、玻璃棒、天平、牛角匙、pH试纸、棉花、牛皮纸、记号笔、线绳、纱布。
3 灭菌锅三、实验方法（一)牛肉膏蛋白胨培养基的配制牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基。
其配方如下：牛肉膏3g，蛋白胨10g．NaCl5g，琼脂15—20g,水1000mL，pH7.4-7。
6。
1称药品：按实际用量计算后，按配方称取各种药品放入大烧杯中。
牛肉膏可放在小烧杯或表面皿中称量，用热水溶解后倒入大烧杯;也可放在称量纸上称量，随后放人热水中,牛肉膏便与称量纸分离，立即取出纸片。
蛋白胨极易吸潮，故称量时要迅速。
2加热溶解：在烧杯中加入少于所需要的水量，然后放在石棉网上，小火加热，并用玻棒搅拌，待药品完全溶解后再补充水分至所需量。
若配制固体培养基,则将称好的琼脂放入已溶解的药品中，再加热融化，此过程中，需不断搅拌，以防琼脂糊底或溢出,最后补足所失的水分。
3调pH：检测培养基的pH，若pH偏酸，可滴加1滴1mol/LNaOH，边加边搅拌，并随时用pH试纸检测，直至达到所需pH范围。
若偏碱，则用1mol/L HCl进行调节.pH 的调节通常放在加琼脂前。
应注意pH值不要调过头，以免回调而影响培养基内各离子的浓度。
4过滤：液体培养基可用滤纸过滤，固体培养基可用4层纱布趁热过滤,以利结果的观察。
5分装：按实验要求，可将配制的培养基分装入试管或三角瓶内。
分装时可用三角漏斗以免培养基沾在管口或瓶口上面造成污染。
分装量:固体培养基约为试管高度的1／5，灭菌后制成斜面。
分装入三角瓶内以不超过其容积一半为宜.半固体培养基以试管高度的1/4为宜，灭菌后垂直待凝。
6加棉塞:试管口和三角瓶口塞上用普通棉花（非脱脂棉）制作的棉塞。
棉塞的形状、大小和松紧度要合适，四周紧贴管壁,不留缝隙，才能起到防止杂菌侵入和有利通汽的作用。
要使棉塞总长约3／5塞人试管口或瓶口内，以防棉塞脱落。
有些微生物需要更好的通气，则可用8层纱布制成通气塞。
有时也可用试管帽或塑料塞代替棉塞。
7包扎：加塞后，将三角瓶的棉塞外包一层牛皮纸或双层报纸，以防灭菌时冷凝水沾湿棉塞。
若培养基分装于试管中，则应先把试管扎成捆后,再于棉塞外包一层牛皮纸.然后用记号笔注明培养基名称、组别、日期。
8灭菌：将上述培养基于121.3℃湿热灭菌20min。
如因特殊情况不能及时灭菌,则应放人冰箱内暂存.9摆斜面：灭菌后，如制斜面，则需趁热将试管口端搁在一根长木条上，并调整斜度,使斜度的长度不超过试管总长度的1/2。
10无菌检查：将灭菌的培养基放入37℃温箱中培养24-48h，无菌生长即可使用。
或储存于冰箱清洁的橱内,备用。
四、实验结果和报告记录本实验配制培养第的名称、数量,并图解说明其配制过程，指明要点。
五、问题和思考1配制培养基有哪几个步骤?在操作过程中应注意些什么问题？为什么?2培养基配制完成后,为什么必须立即灭菌？若不能及时灭菌应如何处理？如何进行无菌检查，3试设计实验对饮料进行无菌检查。
六、演示1培养基的分装方法。
2试管斜面的搁置方法七、注意事项称药品用的牛角匙不要混用，称完药品应及时盖紧瓶盖.调PH时要小心操作，避免回调.不同培养基各有配制特点，要注意具体操作。
八、教学反馈实验五土壤的稀释、分离、纯化及无菌操作技术一、实验目的和内容1学习从上壤中分离微生物的方法，学习无菌操作技术.2用稀释法分离细菌、放线茵和霉菌.3用平板划线法分离微生物。
4学习平板接种等无菌操作技术。
二、实验材料1金黄色葡萄球菌和普通变形菌斜面菌种。