结核病细菌学检验
肺结核实验室检测方法金标准
肺结核实验室检测方法金标准
肺结核实验室检测的金标准是基于培养和鉴定结核分枝杆菌。
以下是具体步骤：
1.痰液样本收集：患者需要提供早晨醒来时的深咳痰液样本，
以获得有效的细菌数量。
2.痰液预处理：痰液样本经过预处理，包括离心和去除杂质。
这一步通常包括液体化和浓缩痰液。
3.痰液培养：将预处理后的痰液接种到培养基上，通常是液体
培养基。
培养基中的结核分枝杆菌将逐渐增殖形成菌落。
4.鉴定：通过常规培养、染色和生化试验等方法，鉴定已培养
的菌落是否为结核分枝杆菌。
5.药敏试验：对已鉴定的结核分枝杆菌进行药敏试验，以确定
哪些药物对其具有抗菌作用，从而为治疗方案的选择提供依据。
此方法被认为是金标准，因为它能够准确检测到结核分枝杆菌，并且可以确定其对药物的敏感性，为结核病的诊断和治疗提供可靠的结果。
但是，该方法需要相对较长的时间（通常需要几周）来进行培养和鉴定，因此在临床实践中可能需要其他更快速的检测方法来尽早确诊结核病。
结核检验项目
结核检验项目结核病是一种由结核分枝杆菌引起的感染性疾病，其传播途径主要是通过空气中的飞沫传播。
为了及早发现和治疗结核病，医学界开展了多种结核检验项目。
本文将介绍几种常见的结核检验项目，以及其作用和操作步骤。
一、结核菌素皮肤试验结核菌素皮肤试验是诊断结核病最常用的方法之一。
这项检验通过注射结核菌素溶液到皮下，观察注射部位的反应情况来判断是否感染结核分枝杆菌。
注射后48-72小时，如果注射点周围形成红斑和硬结，直径大于5毫米，则说明感染了结核分枝杆菌。
二、结核病原学检验结核病原学检验是通过检测痰液、组织活检等样本中的结核分枝杆菌，来确定结核病的诊断和治疗方案。
常用的方法有涂片法、培养法和PCR法。
涂片法是将样本涂抹在玻璃片上，经染色后观察结核分枝杆菌的形态。
培养法是将样本放入培养基中培养，待菌落形成后进行进一步鉴定。
PCR法是通过扩增结核分枝杆菌DNA的特定片段来检测其存在。
三、结核抗体检测结核抗体检测是通过检测人体内特定的抗体来判断是否感染了结核分枝杆菌。
这种方法可以辅助结核病的诊断和监测治疗效果。
目前常用的结核抗体检测方法有酶联免疫吸附试验（ELISA）和荧光免疫分析法（FIA）。
这些方法通过检测血液中的抗体水平来判断感染情况。
四、结核药物敏感性检测结核药物敏感性检测是为了确定结核病患者对抗结核药物的敏感性，从而选择合适的药物治疗方案。
常用的方法有比例法和荧光法。
比例法是将结核分枝杆菌培养物与不同浓度的药物一起培养，观察菌落生长情况来判断药敏性。
荧光法是通过检测结核分枝杆菌培养物中的荧光信号来判断抗药性。
结核检验项目的开展，能够帮助医生及时发现和治疗结核病，减少疾病的传播。
通过结核菌素皮肤试验、结核病原学检验、结核抗体检测和结核药物敏感性检测等项目的综合应用，可以提高结核病的诊断准确性和治疗效果，为控制结核病的蔓延起到重要作用。
希望通过这些结核检验项目的研究和应用，能够更好地保护人们的健康，并减少结核病的发病率。
结核病实验室检查
结核病实验室检查结核病是一种严重的传染病，通常由结核分支杆菌引起。
这种病菌会侵入肺部并引起肺结核，而也可以通过血液传播到其他部位，如淋巴、骨髓和肝脾等。
在许多地方，特别是在发展中国家，结核病仍然是一种普遍的疾病，因此及早诊断和治疗至关重要。
结核病实验室检查是确诊结核病的一种重要方法。
结核病实验室检查通常涉及多种类型的检测，例如：1.酸杆菌检测结核分支杆菌是酸杆菌，因此酸杆菌检测是一种常用的实验室检查方法。
该方法不需要复杂的设备并且具有高度的特异性和灵敏度。
患者的样本可以是咳嗽的痰液、唾液或肺组织，也可以通过胃镜获得胃肠液。
如果酸杆菌检测呈阳性，则可以确诊结核病。
但是，该方法也存在一些局限性，例如在一些情况下不能检测出结核分支杆菌，如某些菌株可以耐受某些药物。
2. 结核抗体检测结核抗体检测是另一种可以用于诊断结核病的实验室检查方法。
该方法通常使用ELISA（酶联免疫吸附试验）或其他类似方法检测患者的血清中是否存在结核抗体，如果测试结果呈阳性，则表示患者可能感染了结核分支杆菌。
但是，结核抗体检测的结果可能会出现假阳性或假阴性的情况，这限制了其在临床实践中的应用。
3.结核病PCR检测PCR检测是检查抗原核酸序列的一种方法。
由于PCR技术可以扩增极微量的DNA，并且非常特异和灵敏，因此可以检测出非常小的感染量。
在结核病中，PCR检测可以用于检测结核分支杆菌的DNA，以确认病原体的存在。
但是，该方法对样本中的DNA污染非常敏感，因此必须进行严格的实验室操作和质量控制。
总之，结核病实验室检查是确诊结核病的一种重要方法。
这些测试方法都具有不同的优缺点，并且结果可能受到许多因素的影响。
因此，必须在临床实践中综合考虑这些方法的结果和临床表现，以取得最佳的诊断结果。
同时，实验室技术人员必须受过专业培训，严格遵守操作规程，以确保准确诊断和最佳治疗效果。
结核菌的实验室检测
结核菌的实验室检测实验室检查是确诊结核病、选择治疗方案、评价治疗效果的重要依据，也是发现传染源，控制结核病流行的重要手段。
目前，结核病常用的实验室检查主要包括：痰涂片检查、痰结核菌培养及药物敏感性试验、分子生物学检查等。
1.痰涂片检查痰标本采集：一般应采集3种痰标本：即时痰：就诊即时咳出的痰清晨痰：清晨深咳出的痰夜间痰：就诊前夜间咳出的痰。
痰标本的要求：痰标本采集的时间、痰标本质量好坏和是否在使用抗结核药等均直接影响结核菌的检出。
痰标本应以脓样、干酪样或脓性粘液样性质的痰液为合格标本。
痰量为3ml～5ml。
晨痰涂片阳性率比较高。
当患者痰少时，可采用高渗盐水超声雾化导痰。
痰涂片结果：包括：阳性、阴性结果的意义：涂片染色阳性只能说明抗酸杆菌存在，不能区分是结核菌还是非结核分枝杆菌。
由于我国非结核分枝杆菌病较少，故检出抗酸杆菌对诊断结核病有极重要的意义。
直接涂片方法简单、快速，应作为常规检查方法。
涂片阴性不能排除肺结核，连续检查3次以上,可提高其检出率。
2痰结核菌培养确定诊断：临床怀疑肺结核，但直接痰涂片结果为阴性，为进一步明确诊断，可进行痰培养。
确定诊断的培养检查应采集2个合格的痰标本，即夜间痰和晨痰。
耐药监测：以耐药监测为目的的培养，主要是为了获得分枝杆菌的纯培养物用于药敏试验，所以一般选用涂片阳性的标本进行培养。
药敏试验：这是了解抗结核药物是否对结核菌敏感、诊断耐药结核以及指导结核病治疗的有效手段。
痰培养结果：包括：阳性、阴性痰结核菌培养的灵敏度高于痰涂片检查，可直接获得菌落，便于与非结核分枝杆菌鉴别。
未进行抗结核治疗或停药48-72小时的肺结核患者可获得比较高的检出率。
痰结核菌培养所需时间较长，一般需培养4-8周。
3、分子生物学检测目前，国内结核病的检测，绝大部分还是采用的是痰涂片镜检。
由于它敏感性差，漏检率可达40%-80%。
而结核菌培养通常需要1-2个月左右的时间才能出结果，这样，在实际工作中就会带来很多问题，有时，结果还没有出来，病人却已经不在了；或病人虽然在，但早已离开医院，这就要花大量时间和精力去追踪病人。
结核病的实验室诊断方法
结核病的实验室诊断方法结核病实验室检查主要有；涂片染色显微镜检查、分枝杆菌分离培养、分枝杆菌药物敏感性试验、分枝杆菌菌种鉴定、分枝杆菌基因分型、分枝杆菌血清学及核酸扩增检测等。
细菌学检查细菌学检验结果的准确性首先取决于标本的质量。
正确地采集、转送标本，是直接影响检验结果的重要因素和取得准确结果的前提。
各种标本(痰液、血液、伤口分泌物和各种感染组织等)采集时应充分考虑到选择恰当合理的时问，考虑到可能存在的病原菌的性质，按要求采集标本，这样可使标本包含细菌，并为后续检验步骤打下良好的。
合格的痰标本在低倍镜视野里上皮细胞应<10个，白细胞数应>25个。
涂片染色显微镜检查根据我国结核病防治规划的要求，对咳嗽、咳痰>13周或有咯血或血痰的肺结核可疑症状者，应留取3份痰标本(夜间痰、清晨痰和即时痰)进行痰涂片抗酸染色检查。
即时痰为病人就诊时咳出的痰液：清晨痰为清晨深咳出的痰液；夜间痰为就诊前1天晚睡前咳出的痰液。
留取的痰液标本常规涂片后，进行要尔－尼尔逊氏染色法(ziehl-Neelen)染色。
分枝杆菌分离培养结核分枝杆菌是兼性需氧菌，最适生长温度为37℃，最适pH为6.5～7.2。
分枝杆菌分离培养检查法，是结核病确诊最可靠的方法。
是获得纯培养物进行菌种鉴定、药物敏感性试验以及其他生物学研究的。
当前，我国普遍采用改良L-J(改良罗氏)培养基来分离培养结核分枝杆菌。
通常情况下，当每1ml标本中微生物含量达102～3CFU(菌落形成单位)时，即可培养阳性。
分枝杆菌快速培养检查是使用分枝杆菌快速培养仪(MIGT、BacT/A1err、ESP)，通过测定细菌生长代谢检测分枝杆菌生长情况的方法。
在进行分枝杆菌快速培养检查时，标本接种前的祛污染处理，必须严格按照系统说明书中给定的方法进行。
孵育检测过程中系统报告阳性时，相应标本的培养液必须首先进行抗酸染色镜检，发现抗酸菌后方可发出阳性报告。
分枝杆菌药物敏感性试验分枝杆菌药物敏感性试验对于结核病人合理的药物选择、合适的药物剂量以及针对耐药病人的预防控制具有积极的作用。
肺结核病原学检查方法及意义
.
13
• PPD阴性除了表明机体未曾感染过结核菌 外，还可能处于结核感染早期（4-8周内） 或血行播散性肺结核等重症结核病患者及 免疫抑制人群罹患肺结核，如AIDS、恶性 肿瘤、免疫抑制剂使用者、老年人、营养 不良者等。
.
14
• 2. 血清结核抗体检测
结核抗体是测定机体对结核菌的体液免 液，且受试剂盒、患者免疫状态影响，特 异性及敏感性均较低。结核抗体对诊断有 一定辅助意义，其阳性仅能说明患者感染 过结核菌，不能区分为现症感染或既往感 染。有研究显示，在结核病治疗过程中， 监测结核抗体可阴转，可作为判定病情变 化、临床疗效的指标之一。
.
3
• 1. 直接镜检法
直接镜检法即涂片法，可采用萋-尼抗酸 染色和荧光染色两种方法，具有快速、简
便等优点，后者不需油镜，视野范围广（
可在低倍显微镜下筛选检查，高倍显微镜
下确认），敏感性高于前者，但容易出现
假阳性，因此，两者结合可避免检查过程
中的假阴性和假阳性。我国结核病诊断细
菌学检验规程规定不同染色法的定量标准
.
15
• 3. 淋巴细胞培养+γ-干扰素释放试验（TBIGRA或T-SPOT.TB）
T-SPOT.TB是以特异性抗原为刺激源， 应用酶联免疫斑点技术诊断结核感染的一 种方法，其敏感性为70%-90%，特异性可 高达95%以上。与PPD、结核抗体等不同 ，患者的免疫状态通常不会影响TSPOT.TB的敏感性。
不同，见表1。
.
4
涂片阳性并非一定为结核分枝杆菌，也可以是非结核分枝杆菌、麻风分 枝杆菌，奴卡菌、放线菌抗酸染色可呈弱阳性。涂片阴性亦不能排除肺 结核，连续检查3次及以上，可提高检出率。
.
结核病诊断细菌学检验规程
结核病诊断细菌学检验规程一、样本采集结核病诊断细菌学检验的样本主要包括痰液、肺泡灌洗液、血液等。
采集样本时应遵守无菌操作原则，避免交叉感染。
样本采集后应尽快送检，并注明采样时间、病人姓名、年龄、性别、疾病等信息。
二、样本处理1.痰液处理：将痰液放入无菌容器中，加入等量1%氢氧化钠溶液，混合均匀，作用15分钟后用无菌水冲洗2～3次，再取沉淀物涂片检查。
2.肺泡灌洗液处理：将肺泡灌洗液过滤后，离心沉淀，取沉淀物涂片检查。
3.血液处理：抽取病人静脉血5～10毫升，离心沉淀，取沉淀物涂片检查。
三、抗酸染色涂片染色采用萋-尼氏染色法，涂片干燥后用萋-尼氏染色液染色，然后用碳酸钠溶液冲洗，最后用无水乙醇脱色，晾干后镜检。
抗酸染色阳性表明涂片中有抗酸菌存在，可用于初步诊断结核病。
四、培养法将处理后的样本接种在罗氏培养基或改良罗氏培养基上，置37℃恒温箱中培养。
结核分枝杆菌在此培养基上生长缓慢，需时约6～8周。
培养阳性表明有结核分枝杆菌生长，可用于确诊结核病。
五、药敏试验药敏试验用于检测结核分枝杆菌对药物的敏感性。
试验方法有多种，如纸片法、比例法等。
药敏试验结果可作为选择和调整抗结核药物的依据。
六、鉴定与分型通过形态学、生化反应和基因鉴定等方法对结核分枝杆菌进行鉴定与分型。
这些方法有助于了解结核病的传播途径和特点，为预防和治疗提供依据。
七、质控与报告发放结核病诊断细菌学检验的质控包括室内质控和室间质评。
室内质控主要是对检验过程进行质量控制，包括试剂质量、仪器校准等；室间质评则是通过参加实验室间的比对试验来评估检验结果的准确性。
检验结果经审核后发放给临床医生或病人。
报告应包含样本采集时间、病人信息、检验方法、检验结果等内容。
金安O荧光染色法、抗酸染色法用于结核病细菌学检验的临床价值
金安 O荧光染色法、抗酸染色法用于结核病细菌学检验的临床价值摘要：目的：探析金安O荧光染色法、抗酸染色法用于结核病细菌学检验的临床价值。
方法：选取本院2020年5月~2020年12月收治的结核病患者120例为检查对象。
采集患者痰液样本，分别应用金安O荧光染色法、抗酸染色法进行细菌学检验。
对两种检查方法的诊断价值进行分析。
结果：金安O荧光染色法阳性率明显高于抗酸染色法，差异显著（P＜0.05）。
结论：金安O荧光染色法在诊断结核病相比于抗酸染色法具有更高的准确率，联合应用将提高准确率。
关键词：金安O荧光染色法；抗酸染色法；结核病；细菌学检验结核病属于较为严重慢性传染病，属于结核分枝杆菌通过呼吸系统、消化系统、血液循环等感染人体造成发病。
在疾病早期，症状不明显，随着疾病的发展，患者可表现出乏力、体重减轻、出冷汗等全身症状，对患者健康和生活产生较大影响[1]。
以往临床诊断结核病通常使用抗酸染色法，但是检出率较低，难以满足需求。
近年来发展出使用金安O荧光染色法，可产生较高检出率。
本研究对两种细菌学检验方法进行比较分析，现将结果报告如下。
1资料与方法1.1临床资料选取本院2020年5月~2020年12月收治的结核病患者120例为检查对象。
其中男性患者74例，女性患者46例。
年龄范围22~58岁，年龄均值（46.35±4.26）岁。
患者在清晨漱口，采集从深部咳出2~3ml痰液作为样本，放置在无菌器皿中，送检。
将痰液标本涂抹在玻片上，使用火焰加热干涸固定，等待晾干，准备检验。
1.2方法1.2.1仪器与试剂金安O染色液：青岛海博生物；抗酸染色液：按照相关标准本院实验室进行配制。
荧光显微镜：奥林巴斯，BX53；光学显微镜：奥斯威，M303-HK830。
1.2.2金安O荧光染色法选取患者痰涂片，进行金安O荧光染色。
在玻片上滴加金安O染色液，染色15min，随后用流水冲洗。
使用0.5%盐酸酒精褪色1~2min，直至玻片接近无色，流水轻柔冲洗。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
结核病细菌学检验一、目的和任务结核病人的细菌学检查，是发现传染源的最主要途径和手段，是确定结核病诊断和化疗方案的重要依据，也是考核疗效、评价防治效果的可靠标准。
因此，结核病细菌学检查是国家结核病控制规划(NTP)的重要组成部分，在结核病防治工作中起着不可缺少的重要作用。
二、实验室的职能为落实国家结核病控制规划中对结核病传染源监控要求，应建立各级结核病细菌学实验室，明确其职能和工作围。
各级结核病细菌学参比实验室(简称参比实验室)，应明确为各自辖区的结核病控制工作服务的宗旨。
(一)国家结核病参比实验室在卫生部结核病控制中心领导下，国家结核病参比实验室负责全国结核病细菌学工作的规划，实施等技术管理，并向中心报告工作。
国家结核病参比实验室，应保持适当数量和结构的人员编制：专业人员15～20人，其中高级专业技术职称3名以上，中级10名，初级7名。
参比实验室的职能：1根据国家结核病控制规划的要求，规划全国结核病细菌学工作，制定实施措施，对全国结核病细菌学监控质量进行督导和评估。
国家结核病参比实验室负有指导、协调、督导各省(市、自治区)参比实验室的工作。
2建立结核病细菌学实验技术标准化准则、操作规程及规章制度。
推行WHO推荐的国际通用的结核病细菌学检查技术。
3建立可行的涂片镜检、分离培养、药物敏感性试验的质量控制标准和质量控制系统。
4承担非结核分支杆菌菌种的最后鉴定，和其它非常规分析手段的实施。
5建立结核分支杆菌和非结核分支杆菌临床菌株库网。
制定库网的管理、交流和资源提供办法。
6开展结核病细菌学等实验诊断新技术，新方法的基础研究，及其实际应用可行性评估。
7对我国结核病控制的实施性研究，提供细菌学服务。
此外，对常规结核病细菌学检查方法进行实施性研究。
8培训省(市、自治区)或地、市参比室技术人员。
(二)省(市、自治区)参比实验室省级参比实验室，是我国结核病控制规划细菌学监测中的重要环节。
在省结核病防治所(科)的领导和国家结核病参比实验室的指导下，负责所在辖区结核病细菌学工作计划的制定和实施等技术管理。
省级参比实验室，应有5～10名专业人员，其中含中、高级专业技术职称人员2名以上。
省级参比实验室，至少具有50平方米以上的实验工作场所。
具备开展检查项目的相应仪器和设备，包括：生物安全柜一台、高压蒸汽灭菌锅一台、培养基蒸汽凝固灭菌器一台、恒温培养箱和双目生物光学显微镜均不少于两台、荧光显微镜一台、离心机一台、冰箱1～2台。
已建立菌株分库的省参比室，应有-20℃或-80℃冷冻箱。
参比实验室的职能：1根据国家和省结核病控制规划的需要，规划本省结核病细菌学工作，制定实施措施。
协调省各级细菌实验室工作，对地、县结核病细菌学质量，进行监控、督导和评估。
2开展涂片镜检、分离培养、药物敏感性检测和临床分离株种的初步鉴定。
有条件的省参比实验室，可建立完整的分支杆菌菌种鉴定体系，所有细菌学检查应严格遵照国家参比实验室制定的标准化准则、操作规程及规章制度进行。
3根据国家参比实验室制定的质控标准，对全省痰片镜检和分离培养工作进行质量控制。
为地、市参比实验室开展分离培养，提供培养基服务。
核准地、市实验室自制培养基。
4承担药物敏感性测定，接受国家参比实验室和跨国参比实验室，定期药物敏感性测定质量控制。
5省临床分离野生株菌库，应参加全国菌株库网，遵守菌库的管理、交流和资源提供办法。
6为省结核病控制规划有关研究工作，提供细菌学服务。
7将省结核病细菌学监测工作、质量控制年报表上报国家参比实验室。
(三)地(市)级细菌学实验室在省参比实验室的指导下，地(市)级细菌学实验室负责本地(市)结核病细菌学监测。
应有相应的专用工作场所和不少于4名专业人员。
应能开展痰涂片镜检工作，并具有相应的仪器设备，包括：无菌柜、双目光学显微镜(备油镜镜头)、蒸汽高压灭菌锅、紫外线灭菌灯、冰箱、离心机及染片所需的器材。
实验室职能：1在省参比实验室的指导下，制定本地(市)结核病细菌学检测工作计划。
2依照国家参比室制定的操作规程，开展痰直接涂片镜检工作。
为县(市)结核病细菌学实验室提供抗酸染色液。
3依照国家参比实验室制定的操作规程，为各县(市)提供分离培养服务。
其培养基或由省参比实验室供给，或经省参比实验室核准后自制。
4定期督导和评价县(市)细菌学实验室的结核病细菌学检查工作，定期向省参比实验室报告其督导、评价结果和质控报表。
5定期培训所辖县(市)细菌学实验室技术人员。
监督辖区细菌学检验人员培训后上岗制度。
(四)县(市)级细菌学实验室在省、地(市)参比实验室指导下，负责全县(市)结核病细菌学工作。
应有1名以上专职工作人员，开展直接痰涂片镜检工作。
应具有单独的涂片检查工作室，配备相应的仪器设备，包括双目光学显微镜(备油镜镜头)、蒸汽高压灭菌锅、紫外线灭菌灯、冰箱及染片所需的器材。
县(市)实验室职能：1在省、地(市)参比实验室的指导下，制定本县(市)结核病细菌学检测的工作计划。
2接受省、地(市)参比实验室的定期培训。
痰检人员应在培训后上岗，并保持稳定。
3按照国家参比室制定的操作规程，开展痰直接涂片镜检工作。
4应用统一的"结核病细菌学实验室登记本"，记录痰涂片镜检结果。
5保存3个月的全部痰涂片，留待上级实验室复验质控后方可销毁。
6运送需作分离培养的标本至上级实验室待检。
7条件具备的县(市)实验室，经省参比实验室核准后，依照国家参比实验室制定的操作规程进行分离培养工作。
并从省/地(市)参比实验室获得分离培养基。
8接受省参比实验室的定期质控检查。
(五)乡镇卫生院镜检站在一些远离县(市)结防所、交通不便的乡镇，可选择乡镇中心卫生院建立涂片镜检站，镜检人员需经地(市)或县(市)实验室培训后方可上岗，人员保持稳定，接受定期复训。
其涂片应全部保存，每1～3月由县(市)实验室负责人复验一次。
三、实验室人员培训(一)国家参比实验室1国家结核病参比实验室，每年召开省参比实验室负责人会议一次：报告工作，交流经验，研究和讨论工作中出现的问题及解决办法。
2结合工作会议，每二年举办一次结核病细菌学研讨会，介绍有关结核病细菌学流行病学和实验室检测的新理论、新技术和新方法。
3举办省级参比实验室专题培训。
4接受省、地(市)实验人员的进修。
(二)省级参比实验室每年至少轮流培训下辖地(市)细菌实验室人员一次。
培训可扩展至县(市)专业人员，或安排地(市)实验室对县(市)专业人员的培训。
培训容包括：1结核病流行病概念和我国及本省结核病流行现状和问题。
2国家结核病控制规划的原则。
3结核病细菌学检查在国家结核病控制规划中的作用。
4痰涂片检查的规，包括细菌实验室的安全、显微镜使用和保养、涂片的制作，染色液的制备、染色和镜检操作，正确的记录、报告方法等。
5痰涂片镜检，分离培养的质量控制和报告方式。
6结核病细菌学检验工作督导、访视技术，督导报告及要求。
(三)地(市)细菌学实验室地(市)实验室应按省参比实验室的安排，结合痰片镜检和分离培养质量控制，每年对县级实验室专业人员进行培训。
县(市)新任痰检人员，需经不少于两周的技术培训，方可上岗。
四、痰标本收集和送检的有关规定(一)对象1因症求诊者检查：凡因肺结核症状求诊者及转诊的可疑肺结核病人，均应送痰标本作涂片镜检(详见第三章"肺结核病人发现"，第17页)。
2疗效考核：凡已确诊、登记、治疗的肺结核病人，在化疗期间应按规定定期作痰菌复查：1)初治涂阳病人在疗程满2、5、6月时，复治涂阳病人在疗程满2、5、8月时，各查痰一次。
2)初、复治涂阳病人在疗程满2月时，痰菌仍为阳性者，应在治疗满3月时增加查痰一次。
复治涂阳病人若满5个月治疗时痰菌仍阳性，应在满7个月时增加查痰一次。
3)确诊、登记的涂阴肺结核病人，即使病人因故未接受治疗，也应在登记后满2和6月时进行痰菌检查。
(二)要求1初诊病人应送3份痰标本(夜间痰、清晨痰和即时痰)。
如无夜间痰，在留取清晨痰后2～3小时再留取一份痰标本；或在送痰时，留取两份即时痰。
疗程中或复诊随访病人按期每次送检两份痰(晨痰和夜间痰)。
2痰标本采集：即时痰为病人就诊时咳出的痰液。
清晨痰为清晨深咳出的痰液。
夜间痰为就诊前夜间咳出的痰液。
痰标本应以脓样、干酪样或脓性粘液样性质的痰液为合格标本，痰量应为3～5毫升。
应由检验人员或专人验收痰标本，痰液不合格者，要求重新送检。
难以获得合格标本时，也应进行细菌学检查，但应注明标本性状，以供分析结果时参考。
痰标本的容器，应采用国家参比实验室推荐的国际通用痰瓶，或采用直径4厘米、高2厘米的塑料或涂蜡纸密闭盒。
留痰容器上应注明病人、编号(门诊序号，或病人登记号)及日期。
3痰标本的保存和输送：痰标本容器密封，勿倒置，严防痰液外溢。
不能立即作分离培养的痰标本，须置4℃冰箱保存，防止痰液干涸或污染。
需送上一级细菌实验室培养的痰标本，外送前应认真核对痰标本容器上标注，是否正确和清晰，是否与化验单一致。
痰容器应采用专用的结核杆菌和痰标本冰盒运送，或以纸和塑料袋封装、扎牢，顺序放置于包装袋。
盒外注明勿倒置标志。
4送检时，县(市、区)结防所(科)医师应填写检验单。
填写项目包括：病人、地址、登记号(或门诊序号)、送检日期(或初诊日期)、送检原因(初诊病人或随访病人)。
检验单应与痰标本分别放置在不同容器中，一齐送交上级实验室。
5收到痰标本后，实验室检验人员仔细核对标本和检验单各项容，察看痰标本是否合格。
随后按顺序编号，及时检查和登记。
对不合格标本要求重送。
填写说明：1)实验序号：初诊病人的3份标本，及其后每次检查的痰标本，均用同一实验序号编号。
2)痰标本来源：初诊病人门诊序号以门诊登记本为据；随访病人登记号以病人登记本为据。
3)痰标本性质，按脓样痰、干酪样痰、血性样痰、脓性粘液痰和水样痰分类登记。
6废弃标本和污染物的处理：1)痰盒和废弃标本等污染物，均须经高压蒸汽灭菌后才能丢弃或清洗，严禁不经灭菌随意处理。
2)痰盒等污染物如采用焚烧处理，须置于焚烧炉彻底焚化。
焚化不彻底，或暴露焚烧是有害的。
3)痰检工作面的消毒：可将痰标本置于一搪瓷盘中，在操作厨中进行痰涂片操作。
涂片操作完成后，将盘与废弃物等一并进行高压蒸汽灭菌，或与操作台面同时以3%石碳酸或其它可靠的消毒液擦拭后，再以紫外线灭菌灯(距离1米)照射30分钟。
五、痰直接涂片检查法(一)涂片取经95%乙醇擦拭脱脂过的干燥、清洁、无油污、无划痕的新玻璃片，于玻片背面的左端1/3 处以蓝色或黑色记号笔(玻璃铅笔)编号。
用接种环或折断的竹签茬端，挑取痰标本的脓样、干酪样部分约005～0.1ml，于玻片正面的右侧三分之二处均匀涂沫成2×25厘米卵圆形痰膜。
自然干燥后待检。
一玻片只可涂沫一份标本。
玻片只应使用一次，不得清洗后再次使用。