药物分析 -- 维生素类药物分析
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维生素类药物分析(SYSH)
返 回9
第一节 维生素A
维生素A包括有维生素A1（视黄醇）、去 氢维生素A（维生素A2 ）和去水维生素A（ 维生素A3）等，其中维生素A1活性最高，
2020/11/14
10
一、结构和性质
R:
2020/11/14
-H -COCH3 -COC15H31
维生素A醇 维生素A醋酸酯 维生素A棕榈酸酯
11
2020/11/14
25
（2）波长的选择： ① 1
VitA的max（328nm） ② 2 3
分别在1的两侧各选一点
2020/11/14
26
第一法 等波长差法
32 8 31 6 34 0 328
A 3校 2 8 3 . 5 正 2 A 2 3 2 A 3 8 1 A 3 6 4
测定对象 VitA醋酸酯
结构分析
CH3
CH3
CH3 CH3
环己烯
2020/11/14
共轭多 烯侧链
CH3 CH2OR
多异构体 UV 易被氧化
12
1、为一个具有共轭多烯侧链的环己烯 ❖ （1）具有UV吸收
❖ （2）存在多种立体异构化合物 ❖ （3）易发生脱氢、脱水、聚合反应
2020/11/14
13
2、不稳定性
VitA紫 外 线 、 O2 、 氧 化 剂 环氧化物 [ O]VViittAA酸 醛
2020/11/14
31
2020/11/14
32
中国药典收载方法
第一法（维生素A醋酸酯的测定） 将维生素A溶于环己烷，在规定波长测定吸
收度，计算吸收度比值（A/A328 ）
2020/11/14
33
数据处理
如果λmax在326-329nm之间，且A/A328比值未 超过规定值的±0.02，可直接按下式计算含 量：
药物分析维生素
第二步 求
注意： C 为混合样品的浓度
A
B
换算因数由纯品计算而得：
第三步 求效价
第四步：求标示量％
01
方法：
03
第一法
02
04
维生素A醋酸酯
判断 是否在326～329nm之间
在326～329nm之间
改用第二法
是
否
求算 并与规定值比较
2、
内标法加校正因子
供试液（样品+内标）
对照液（对照+内标）
是样品中不存在的物质 与被测组分峰靠近 能与各组分完全分离 与被测组分的量接近
内标物
内标法
校正因子：
实际工作中的计算方法
W
W
K
K
%
VitE
100
1
2
=
稀释倍数
稀释倍数
样
对
×
×
×
×
01
HPLC法
02
外标法 此外，还有铈量法、比色法和荧光法
掌握维生素类药物的结构特点与分析方法之间的关系。
1
掌握维生素类药物的鉴别原理与方法。
2
掌握三点校正法测定维生素A的原理、测定方法与计算方法。
3
掌握维生素D的HPLC含量测定法和维生素E的GC含量测定法。
4
掌握维生素B1非水溶液滴定法与维生素C碘量法的测定原理、方法与注意事项。
5
熟悉本类药物其他的含量测定方法。
02
A300 ：0.374
A316 ：0.592
A328 ：0.663
A340 ：0.553
A360 ：0.228
A300 /A328 ：0.564
A316/A328 ：0.893
注意： C 为混合样品的浓度
A
B
换算因数由纯品计算而得：
第三步 求效价
第四步：求标示量％
01
方法：
03
第一法
02
04
维生素A醋酸酯
判断 是否在326～329nm之间
在326～329nm之间
改用第二法
是
否
求算 并与规定值比较
2、
内标法加校正因子
供试液（样品+内标）
对照液（对照+内标）
是样品中不存在的物质 与被测组分峰靠近 能与各组分完全分离 与被测组分的量接近
内标物
内标法
校正因子：
实际工作中的计算方法
W
W
K
K
%
VitE
100
1
2
=
稀释倍数
稀释倍数
样
对
×
×
×
×
01
HPLC法
02
外标法 此外，还有铈量法、比色法和荧光法
掌握维生素类药物的结构特点与分析方法之间的关系。
1
掌握维生素类药物的鉴别原理与方法。
2
掌握三点校正法测定维生素A的原理、测定方法与计算方法。
3
掌握维生素D的HPLC含量测定法和维生素E的GC含量测定法。
4
掌握维生素B1非水溶液滴定法与维生素C碘量法的测定原理、方法与注意事项。
5
熟悉本类药物其他的含量测定方法。
02
A300 ：0.374
A316 ：0.592
A328 ：0.663
A340 ：0.553
A360 ：0.228
A300 /A328 ：0.564
A316/A328 ：0.893
药物分析---典型药物的鉴别试验
2,6-二氯靛酚的氧化型在 H+ 介质中为玫瑰红色，在 OH- 介质中 为蓝色。与VC作用后生成还原型无色的酚亚胺。
氧化型
还原型
实验步骤：
• VC的鉴别：
•
取本品约 0.2g ，加水 10mL 溶解后，分成二等份，在一份中
加 AgNO3 0.5mL , 观察沉淀生成颜色；在另一份中加二氯靓酚钠 试液 1－2滴，观察并记录实验现象。
结构：
VA的结构为具有一个共轭多烯醇侧链的环己烯，具有许多立体异构体。 天然VA主要是反式VA，取代基R不同则可以是VA醇或其酯。
理化性质： 溶解性：脂溶性，溶于乙醚、石油醚等有机溶剂中，在乙醇中微溶，在水中
不溶。
不稳定性：易发生氧化、脱氢、脱水、聚合反应《中国药典》 紫外吸收特性：共轭多烯醇的侧链结构 与三氯化锑呈色 ：VA在氯仿溶液中能与三氯化锑作用，产生不稳定的蓝色。
实验步骤：
• VB1的鉴别：
•
取本品约 5mg ，加 NaOH 试液 2.5 mL溶解后，加 K3Fe(CN)6试液 0.5mL 与正
丁醇 5mL ，强力振摇 2分钟，放置使分层，观察上面的醇层荧光颜色；加稀
HCl 使成酸性，而后再加 NaOH 试液使成碱性，观察并记录实验现象。
ห้องสมุดไป่ตู้
•
K3Fe(CN)6试液配制：取 K3Fe(CN)6 1g , 加水 10mL 使溶解，即得。本液应临
典型药物的鉴别试验
-----维生素类典型药物的鉴别
张丽
实验目的
掌握维生素类典型药物的鉴别原理和鉴别方法：
维生素类典型药物：维生素A , B1 , C
熟悉维生素类典型药物的鉴别实验操作中的基本方法和试剂。
VA 鉴别实验原理
氧化型
还原型
实验步骤：
• VC的鉴别：
•
取本品约 0.2g ，加水 10mL 溶解后，分成二等份，在一份中
加 AgNO3 0.5mL , 观察沉淀生成颜色；在另一份中加二氯靓酚钠 试液 1－2滴，观察并记录实验现象。
结构：
VA的结构为具有一个共轭多烯醇侧链的环己烯，具有许多立体异构体。 天然VA主要是反式VA，取代基R不同则可以是VA醇或其酯。
理化性质： 溶解性：脂溶性，溶于乙醚、石油醚等有机溶剂中，在乙醇中微溶，在水中
不溶。
不稳定性：易发生氧化、脱氢、脱水、聚合反应《中国药典》 紫外吸收特性：共轭多烯醇的侧链结构 与三氯化锑呈色 ：VA在氯仿溶液中能与三氯化锑作用，产生不稳定的蓝色。
实验步骤：
• VB1的鉴别：
•
取本品约 5mg ，加 NaOH 试液 2.5 mL溶解后，加 K3Fe(CN)6试液 0.5mL 与正
丁醇 5mL ，强力振摇 2分钟，放置使分层，观察上面的醇层荧光颜色；加稀
HCl 使成酸性，而后再加 NaOH 试液使成碱性，观察并记录实验现象。
ห้องสมุดไป่ตู้
•
K3Fe(CN)6试液配制：取 K3Fe(CN)6 1g , 加水 10mL 使溶解，即得。本液应临
典型药物的鉴别试验
-----维生素类典型药物的鉴别
张丽
实验目的
掌握维生素类典型药物的鉴别原理和鉴别方法：
维生素类典型药物：维生素A , B1 , C
熟悉维生素类典型药物的鉴别实验操作中的基本方法和试剂。
VA 鉴别实验原理
药物分析-第六章-维生素类药物-xzy-02
第六章 维生素类药物的分析 Analysis of Vitamins
主讲人：谢智勇 专 业：药学本科 课 程：药物分析学 教研室：药物分析与质量评价实验室
维生素A的分析
维生素（vitamins）：
维生素是维持人体正常生理机能所必需的生物 活性物质，人体不能合成维生素。
如果人体缺少某种维生素，就会引起维生素 缺乏症，而影响人体的正常生理机能。
-CO2
H C CHOH 3 CH2OH
O （戊糖）
-H2O
50℃
O CHO
(糠醛)
N CH
O （蓝色）
N H
(吡咯)
N
（三） UV (BP)
0.01 mol/L HCl
l max 243nm
H lmax 245nm OH- lmax 265nm
17
维生素C的分析：结构与性质
C6H2OH H *C OH
5
O
*4
1O
32
HO
OH
1. 溶解性：易溶于水 2. 旋光性：4个光学异构体 3. 水解性：强碱性下水解 4. 酸性：能与碱呈盐 5. 强还原性： 6. 糖类的性质 7. UV：λmax = 243nm
2 维生素A的分析
4.1 结构与性质 4.2 鉴别试验 4.3 杂质检查 4.4 含量测定
2.1 结构与性质 2.2 鉴别试验 2.3 杂质检查 2.4 含量测定
3 维生素B1的分析 3.1 结构与性质 3.2 鉴别试验 3.3 含量测定
5 维生素E的分析
5.1 结构与性质 5.2 鉴别试验 5.3 杂质检查 5.4 含量测定
pKa = 4.17
pKa = 11.57
18
二 维生素C：鉴别方法
主讲人：谢智勇 专 业：药学本科 课 程：药物分析学 教研室：药物分析与质量评价实验室
维生素A的分析
维生素（vitamins）：
维生素是维持人体正常生理机能所必需的生物 活性物质，人体不能合成维生素。
如果人体缺少某种维生素，就会引起维生素 缺乏症，而影响人体的正常生理机能。
-CO2
H C CHOH 3 CH2OH
O （戊糖）
-H2O
50℃
O CHO
(糠醛)
N CH
O （蓝色）
N H
(吡咯)
N
（三） UV (BP)
0.01 mol/L HCl
l max 243nm
H lmax 245nm OH- lmax 265nm
17
维生素C的分析：结构与性质
C6H2OH H *C OH
5
O
*4
1O
32
HO
OH
1. 溶解性：易溶于水 2. 旋光性：4个光学异构体 3. 水解性：强碱性下水解 4. 酸性：能与碱呈盐 5. 强还原性： 6. 糖类的性质 7. UV：λmax = 243nm
2 维生素A的分析
4.1 结构与性质 4.2 鉴别试验 4.3 杂质检查 4.4 含量测定
2.1 结构与性质 2.2 鉴别试验 2.3 杂质检查 2.4 含量测定
3 维生素B1的分析 3.1 结构与性质 3.2 鉴别试验 3.3 含量测定
5 维生素E的分析
5.1 结构与性质 5.2 鉴别试验 5.3 杂质检查 5.4 含量测定
pKa = 4.17
pKa = 11.57
18
二 维生素C：鉴别方法
药物分析维生素类药物的分析
在方法验证的基础上，可构建维生素类药物分析的评价指 标体系，包括定量限、检测限、回收率、重复性、稳定性 等指标，以全面评价分析方法的性能。
持续改进方向和目标设定
持续改进方向
针对维生素类药物分析过程中存在的问题和 不足，可进一步改进样品前处理方法、优化 分析条件、提高检测灵敏度等，以不断提高 分析结果的准确性和可靠性。
数据处理和结果表达技巧分享
数据处理
对HPLC和UV-Vis法得到的数据进行整理、归纳和统计 分析，包括峰面积、保留时间、浓度等参数的计算和 处理。
结果表达
将分析结果以图表形式呈现，如色谱图、标准曲线图、 含量分布图等，使结果更加直观、易于理解。同时，对 分析结果进行解释和说明，提出改进意见和建议。
在选择维生素类药物的标准品时，应确保其 纯度高、稳定性好，且具有代表性。同时， 应关注标准品的来源和溯源性。
使用注意事项
在使用标准品时，需按照规定的条件进行保 存和使用，避免污染和降解。此外，应定期 对标准品进行复验和更新。
检测方法验证及评价指标体系构建
要点一
检测方法验证
要点二
评价指标体系构建
为确保维生素类药物分析方法的准确性和可靠性，需进行 方法学验证，包括专属性、线性、范围、准确度、精密度 等指标的考察。
质量控制体系建立及实施情况介绍
质量控制体系
为确保维生素类药物分析结果的准确性和可靠性，需建立全面的质量控制体系，包括样 品采集、前处理、分析测试、数据处理等各个环节。
实施情况
目前，质量控制体系已在多个实验室得到广泛应用，有效提高了维生素类药物分析的准 确性和一致性。
标准品选择与使用注意事项
标准品选择
通过对该维生素类药物的定性、定量分析，评估其质量 稳定性和一致性，为药物研发、生产和监管提供科学依 据。
《药物分析》维生素类药物的分析 ppt课件
R=
C
C15H31
2-Cis Neovitamin Aa 2,6-dicis Isovitamin Ab 4-Cis Neovitamin Ab H2 Vit A1 Vit A2 2,4-dicis Neovitamin Ac 去H2O Vit A1 Vit A3 6-Cis Isovitamin Aa 2 ppt课件
精密称取Vit A滴剂0.06126g(标示量50000 I.U./g)，置于25ml量瓶中，加环已烷至刻 度，精密吸取2ml置于另一25ml量瓶中，加 环已烷至刻度，并混匀，置石英比色皿中， 以环已烷为空白，分别于以下波长处测得 吸收度值，试求此滴剂中Vit A为标示量的 百分含量：
λ(nm) 300 316
按WHO规定 VA acetate 效价(I.U./g) 2.907×106 VA alcohol 3.33×106
1g pure VA acetate ≈ 2.907×106I.U.
ppt课件 4
1% 1% E E1 (328 nm) 1530 1cm (325 nm) 1820 cm (环已烷) (异丙醇)
若 A328计算含量
A328 (校正) - A328 100% 在±3%范围，则仍以 A328 A328 (校正) - A328 100% 在-15%～-3%范围， A328 A328 (校正) - A328 100% ＞3%，或＜-15%， A328
ppt课件 7
若 则以A325(校正)计算含量 若 则采用第二法
Vit A含量表示 I.U.(international Unit) 国际单位 效价(I.U./g)
按WHO规定 效价(I.U./g) VA acetate 2.907×106 VA alcohol 3.33×106
药物分析 第09章 维生素类药物的分析
ChP 片剂、注射剂
g/100ml
E11c%m = 421 A = ECL
（每片）相当于标示量的%=
E 1 1c % A m 10W 0稀 1 释 平 标 度 均 示 1 片 量 0% 0
g
稀释倍数 稀1释度
规格 g/片
（三） 硅钨酸重量法
1、 重量法特点
准确度高 灵敏度低 操作繁琐 设备简单
（三） 其他反应
S元素反应
V iN t B a N O P a H A b S c P b
HA N O3 g N AO g 白 C N H N lH H OO
K 2 HH + 4 g I淡[黄 B ]H 2H4g
I 2 H + K I 红 [B 色 ]H I2 I
硅 H 钨 + 酸白
色[B]2SiO2OH2
12WO 34H2O
苦 H +酮 酸 白 色 扇 形
橙红色
强氧化剂
H3C
CH3 O
O O
H3C HO
HNO3
CH3 O
CH3
CH3 C16H33
生育酚
CH3 C16H33
生育红（橙红色）
（二） 三氯化铁－联吡啶反应
VitE
K△OH
生育酚
Fe 3
[O]
对 生育醌
Fe 2 联吡啶 红色
H3C
CH3 O
CH3 C16H33
2×337.27
3479.22
换 算 2 因 M V数 i1t B 233 .27 70.19 M 沉淀34.2729
3、 测定方法
药物分析-14维生素类药物的分析
§14 维生素类药物的分析·脂溶性维生素：VitA、D2、D3、E、K1等·水溶性维生素：VitB族（B1、B2、B6、B12）、VitC、叶酸、烟酸、烟酰胺一、维生素A中国药典收载的维生素A是指人工合成的维生素A醋酸酯结晶加精制植物油制成的油溶液。
（一）结构与性质1.具有一个共轭多烯侧链的环己烯·具有UV吸收·存在多种立体异构化合物2.不稳定性（1）易发生脱氢、脱水、聚合反应·脱氢维生素A（A2），脱水维生素A（A3）效价低于维生素A ·鲸醇（维生素A醇的二聚体）无生物活性（2）共轭多烯侧链易被氧化维生素A应凉暗处保存，充氮气或加抗氧剂★3.与三氯化锑发生呈色反应4.溶解性不溶于水，乙醇中微溶；易溶于有机溶剂和植物油等（二）鉴别试验1.三氯化锑反应条件: 无水（SbCl3水解），无醇（和碳正离子作用使其电荷消失）。
2.UV法（BP2003）VitA有一个吸收峰，盐酸催化下加热30s生成脱水VitA，有三个吸收峰，且红移（向长波长位移）。
3.TLC法·BP 对照品法（供试品与不同VitA酯类），显色剂：三氯化锑·USP 规定斑点颜色和Rf值，显色剂：磷钼酸（氧化剂）12（三）含量测定 ★1.三点校正法 （1）原理①杂质的吸收在310~340nm 波长范围内呈一条直线，且随波长的增大吸收度减小；②物质对光的吸收具有加和性。
（2）波长的选择λ1为VitA 的λmax ；λ2、λ3为分别在λ1的两侧各选一点 ①等波长差法——VitA 醋酸酯nm 12340316328=∆λλλλ，、、)2(52.3340316328328A A A A --=（校正）②等吸收比法——VitA 醇33431032576A A A == 334310325325260.4555.2815.6A A A A --=（校正）（3）测定方法①直接测定法（等波长差法）——高纯度维生素A 醋酸酯 Ⅰ核对λmax/329~326max 328改用造化法与规定值比较求否是−→−−→−∈A A nm i λ Ⅱ计算吸收度比及比值差规定吸光度比值-328/A A iⅢ判断差值是否超过±0.02，确定用A 或A 校正%15%3)3%%,15(]%3,%3[32802.032832832802.0计算用改用皂化法＜或＞计算用计算用、计算无超过（校正）（校正）有超过A f f A f A f f A −−−−→−→-+→--∈→+-∈→−−−−→−±±)2(52.3340316328328A A A A --=（校正）%100328328328⨯-=A A A f （校正）Ⅳ求（样品）%11cm E lc AE cm ⨯=)%(%11（样品）·注意：（纯品）（样品）%11%11cm cm E E ≠，c 为混合样品的浓度。
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环氧化物 VitA醛 VitA酸
二、 鉴别试验 （一） 三氯化锑反应
VitA SbCl 3 蓝 色 紫 红
CHCl3
条件 无水无醇
+
CH2
-
SbCl5 RCOO
蓝色
+
CH2
-
SbCl5 RCOO
紫红
（二） UV法 （BP（2000））
VitA 无水乙醇 HC l 去 水VitA
TLC、HPLC、制备衍生物测熔 点
三、杂质检查
维生素D2中麦角甾醇的检查：加洋 地黄皂苷溶液，混合，放置18h不得 发生浑浊或沉淀。 前维生素D的光照产物
四、含量测定方法
中国药典（2000年版）采用正相高效液相色谱法测 定维生素D的含量，定量方法为内标法，内标物为邻 苯二甲酸二甲酯，该法分为三个方法。 固定相：硅胶 流动相：正己烷-正戊醇（997：3）
试液C。 制备对照液：对照品储备液：稀释、加热。 2．含量测定：在第一法的色谱条件下，交替精密进样
对照液和供试液，按外标法定量。
第三节 维生素E
O
HO
苯并－二氢吡喃醇
第九章
维生素类药物的 分析
基本要求 概 述
维生素A 维生素D 练习与思考
维生素E
维生素B1 维生素C
基本要求
一、掌握维生素类药物的结构特点与分析方法之间的关 系。
二、掌握维生素类药物的鉴别原理与方法。 三、掌握三点校正法测定维生素A的原理、测定方法与 计算方法。 四、掌握维生素D的HPLC含量测定法和维生素E的GC含 量测定法。 五、掌握维生素B1非水溶液滴定法与维生素C碘量法的 测定原理、方法与注意事项。 六、熟悉本类药物其他的含量测定方法。 七、熟悉本类药物杂质检查方法。 八、了解维生素A三点校正法的推导过因子：
A S /m S f1 = --------
A r /m r
f2 =（A S m r- f1 m S A r1）/（A r1 m S）
3．含量测定：
mi=（f1 Ai1+ f 2 A i2）m S /A S
第二法：用于有杂质的干扰的情况，步骤如下： 1．皂化处理：皂化、乙醚提取、洗涤提取液、蒸除乙
H
CH3
CH3 H
CH3 CH3
CH2
HO
H
H
维生素D3
开环的甾体：具有甾类化合物的显色反 应，可用于鉴别。 手性碳原子：具有旋光性，可用于鉴别。
多烯：可进行紫外检测。
二、鉴别试验
1. 显色反应
醋酐--硫酸反应 绿 三氯化锑反应
D2 黄 红 D3 黄 红
橙红色渐变粉红
紫绿 紫、蓝绿
三氯化铁反应 橙黄色
维生素A醛 维生素A酸
三点校正法（法定方法） 1. 原理： （1）杂质的吸收在310~340nm
波长范围内呈一条直线，且随 波长的增大吸收度减小； （2）物质对光的吸收具有加和性。
2. 波长的选择： （1） 1
VitA的max（328nm） （2） 2 3
分别在1的两侧各选一点
A
A
λ2 λ1 λ3 nm
λ2 λ1 λ3 nm
第一法 等波长差法
328 316 340 328 = 测12定nm对象 VitA醋酸酯
第二法 等吸收比法
6 7
A1
A2
A3
1=325nm, 2=310nm, 3=334nm
测定对象 VitA醇
（（二二）） 三氯化锑比色法 标准曲线法
概述
维生素： 是维持人体正常代谢机能
所必需的 微量营养物资。 人体不能合成维生素。
分类
按溶解度分
脂溶性 水溶性
VitA、D2、D3、 E、K1 等
VitB族(B1、B2、B6、B12) VitC、叶酸、烟酸、泛酸等。
第一节 维生素A
R:
-H
维生素A醇
-COCH3 维生素A醋酸酯 -COC15H31 维生素A棕榈酸酯
一、 结构与性质
（一） 为一个具有共轭多烯侧链的 环己烯
具有UV吸收 存在多种立体异构化合物
易发生脱氢、脱水、聚合反应 VitA2 VitA3
鲸醇
（二）共轭多烯侧链 易被氧化
VitA 紫外线、O2、氧化剂
环
氧
化
物
[O]
VitA VitA
醛 酸
△或有金属离子存在时氧化↑
醚、制备供试液A。 2．净化：供试液A经液相色谱分离，准确收集含有维
生素D及前维生素D混合物的全部流出液，制 备成供试液B。 固定相：ODS 流动相：甲醇-乙腈-水（50：50：2） 3．含量测定：取供试液B按第一法测定。
第三法：用于经第二法处理后仍有杂质的干扰的情况。 步骤如下： 1．制备供试液：取供试液A，净化，水浴加热，得供
△
λmax为326nm 一个吸收峰
λmax为350～390nm 三个吸收峰
VitA
↓
CH2
去水VitA（VitA3）
（三） TLC法
BP 杂质对照品法 显色剂 三氯化锑
USP 显色剂 磷钼酸 规定斑点颜色和Rf值
三、 含量测定
（一） UV法
立体异构体 氧化降解产物 合成中间体
维生素A2 维生素A3 环氧化物
二氯丙醇和乙酰氯反应 绿色
2. 比旋度鉴别
溶剂 浓度 比旋度值
维生素D2 无水乙醇
40mg/ml
维生素D3 无水乙醇
5mg/ml
+102.5°～+107.5° +105°～+112°
注意事项：应于容器开启30分钟内取样， 在溶液配制后30分钟内测定。
3.区别反应：
以96%乙醇为溶剂，加乙醇和85%硫酸， D2 显红色，在570nm处有最大吸收，D3显黄色， 在44.其9他5方n法m：处有最大吸收。
VitA + SbCl3 蓝色
λmax 618nm～620nm
优点 简便 快速
呈色不稳定 （5 ~ 10s内）
水分干扰
SbCl 3 H2O SbOCl
缺点
与标准曲线温差≤1℃
专属性差 三氯化锑有腐蚀性
第二节 维生素D
一、结构与性质
H
CH3
CH3 H
CH3
CH3
H
CH3
CH2
HO
H
H
维生素D2
第一法：用于无维生素A醇及其它杂质的干扰的情况， 步骤如下： 1．系统适用性试验：测定重复性和分离度。
Vit D3对照品
90℃ 1h
冷却 环己烷 254nm 365nm
前Vit D 3 反式Vit D3
Vit D3 HPLC 速甾醇D 3
Vit D3 峰： 重复性 RSD小于2.0%
前Vit D 3 与反式Vit D 3 峰 Vit D3 与速甾醇 D3 峰