生物化学实验指导
生物化学实验指导
实验一植物DNA的提取与测定一、目的本实验目的是学习从植物材料中提取和测定DNA的原理和方法，进一步了解DNA的性质。
二、原理细胞中的DNA绝大多数以DNA-蛋白复合物（DNP）的形式存在于细胞核内。
提取DNA时，一般先破碎细胞释放出DNP，再用含少量异戊醇的氯仿除去蛋白质，最后用乙醇把DNA从抽提液中沉淀出来。
DNP与核糖核蛋白（RNP）在不同浓度的电解质溶液中溶解度差别很大，利用这一特性可将二者分离。
以NaCl溶液为例：RNP在0.14 mol/L NaCl中溶解度很大，而DNP在其中的溶解度仅为纯水中的1％。
当NaCl浓度逐渐增大时，RNP的溶解度变化不大，而DNP的溶解则随之不断增加。
当NaCl浓度大于1mol/L时，DNP的溶解度最大，为纯水中溶解度的2倍，因此通常可用1.4 mol/L NaCl提取DNA。
为了得到纯的DNA制品，可用适量的RNase处理提取液，以降解DNA 中搀杂的RNA。
关于植物总DNA的提取主要有两种方法：1．CTAB法：CTAB（十六烷基三甲基溴化铵，hexadecyltrimethylammonium bromide, 简称CTAB）：是一种阳离子去污剂，可溶解细胞膜，它能与核酸形成复合物，在高盐溶液中（0.7 mol/L NaCl）是可溶的，当降低溶液盐的浓度到一定程度（0.3 mol/L NaCl）时从溶液中沉淀，通过离心就可将CTAB与核酸的复合物同蛋白、多糖类物质分开，然后将CTAB与核酸的复合物沉淀溶解于高盐溶液中，再加入乙醇使核酸沉淀，CTAB能溶解于乙醇中。
2．SDS法：利用高浓度的阴离子去垢剂SDS（sodium dodecyl sulfate，十二烷基硫酸钠）使DNA与蛋白质分离，在高温（55～65℃）条件下裂解细胞，使染色体离析，蛋白变性，释放出核酸，然后采用提高盐浓度及降低温度的方法使蛋白质及多糖杂质沉淀，离心后除去沉淀，上清液中的DNA用酚/氯仿抽提，反复抽提后用乙醇沉淀水相中的DNA。
生物化学实验指导
二、结果及讨论
【参考范围】 1、波长的检测：在 529nm ± 1nm 处有最大吸收值为合格。 2、杂光的检测：T% ≤ 5%为合格。 3、比色皿配套：Tmax % – Tmin% ≤ 0. 5% 为合格比色皿配套。 【注意事项】 1、722 型分光光度计的使用方法：选定检测波长，置调节模式为透光率 T，将某一盛装参比介质 的空白比色皿置于光路，打开遮光板，调 0%T，盖上遮光板调 100%T，再将盛装待测液体的比色皿置 于光路，测出 T 值，或置调节模式为吸光度 A，即可测出 A 值。注意每次测定均需重新调 0%T、100%T。 2、在杂光检测中，用于调 0%T 的黑纸片应完好无孔洞，否则会导致假合格现象。 3、使用比色皿时，其盛装液体不能超过总体积的 2/3，也不宜少于 1/2，且在检测前必须用擦镜纸 将比色皿外的液体擦拭干净。
糖标准溶液管：第 2、3 号管。注意稀释后要混匀。
2 号管
3 号管
110mmol/L 葡萄糖液（μl）
100
50
D.W.（μl）
50
50
葡萄糖液浓度（mmol/L）
பைடு நூலகம்
73.33
55
2、再将第 2、3 号管分别取 50μl，加 D.W.50μl 依次作等倍稀释（各 4 管），得到 8 种较低浓度的
葡萄糖标准溶液，稀释方法见下图：
实验一 分光光度计性能检测
【实验目的】 1、掌握分光光度计的性能检测，包括波长检测、杂光检测以及比色皿配对。 2、掌握分光光度计的使用方法。 【实验原理】 1、波长检测：⑴可见光区域的黄光波段比较狭窄，适用于光度计波长的粗测；⑵镨钕滤光片在
生物化学实验指导
《生物化学》实验指导实验室规则一、实验目的生物化学是医学教育中的一门实践性较强的基础学科。
实验教学是过程的重要组成部分，是理论教学的延伸和补充。
实验目的是：1、初步学会生物化学实验的基本操作技能及实验研究的基本方法。
2、熟悉生物化学实验原理，了解一些临床生化检验项目。
3、培养严肃认真的工作方法、实事求是的科学态度、团结协作的工作作风和观察分析、思考、独立解决问题的能力。
二、实验基本要求实验教学包括实验前准备、实验操作、整理实验结果、书写实验报告等环节，为了提高实验效果，实现实验目的，要求学生必须做到以下几点。
（一）实验前1、仔细阅读实验指导，了解实验目的和要求，充分理解实验原理，熟悉实验步骤、操作程序和注意事项。
2、预测实验各个步骤可能得到的结果，对预期实验结果能做出合理的解释。
3、注意和估计实验中可能发生的误差，并制定防止误差的措施。
（二）实验时1、保持实验室肃静，不能进行与实验无关的活动。
2、在教师或实验技术人员的指导下，熟悉仪器的构造、性能及操作规程。
3、实验器材摆放整齐，有条不紊、装置正确。
4、按照实验步骤，严肃认真的循序操作，不能随意更动。
5、爱护公物，注意节省实验器材和药品。
注意安全，严防触电、火灾、酸碱灼伤及中毒事故的发生。
6、仔细、耐心地观察实验田中出现的现象，随时客观的记录实验结果，以免发生错误或遗漏。
实验条件应始终保持一致，如有变动,应加文字说明。
（三）实验后1、整理实验结果，书写实验报告，按时交给指导教师评阅。
2、整理实验仪器和清洗玻璃仪器，关闭仪器、设备和电源。
清点实验器材，办理借还手续。
3、做好实验室清洁卫生工作，关闭水、气阀门，切断电源，关闭门窗，确保安全。
实验一生化实验基本操作一、实验目的通过基本操作训练，学会熟练进行进行玻璃仪器洗涤；吸量管使用；溶液的混合；离心机使用；７２１型分光光度仪使用。
二、实验用品烧杯、试管；吸量管、移液管；旋涡混合（振荡）器、玻璃棒；离心机使用；７２１型分光光度仪三、实验内容及步骤（一）玻璃仪器的洗涤在生化实验中，玻璃仪器洁净与否，是获得准确结果的重要环节。
生物化学实验指导
第一部分生物化学与分子生物学概论本部分的内容为生物化学实验中所涉及的主要原理。
介绍如何正确记录实验过程及书写实验报告的一般规则，是训练学生进行正规实验寻林的重要内容。
普通实验技术包括玻璃仪器的洗涤，洗液的配制，吸量管的使用、混匀的方法以及过滤、离心等一般实验室技术。
实验样品的制备着重讨论在生物化学实验中，血液、尿液样品及组织材料的采集和处理，匀浆制备和组织浸出液制备。
离心分离技术、电泳原理、分光分析、层析分离技术，重点讨论这些重要技术的原理，内容则尽可能简洁扼要，作为具体实验内容的参考。
一.实验记录和实验报告的书写实验是在理论指导下的科学实践，目的在于经过实践掌握科学观察的基本方法和技能，培养学生科学思维、分析判断和解决实际问题的能力。
也是培养探求真知、尊重科学事实和真理的学风，培养科学态度的重要环节。
（一）实验记录记录实验中观察到的现象、结果和数据，及时地记录在激烈路本上。
原始数据必须准确简练、详尽、清楚。
记录时不能夹杂主观因素，在定量实验中观测的数据，如称量物的重量、滴定管的读数、光密度值等，都应设计一定的表格，依据仪器的精确度记录有效数字。
完整的实验记录包括实验日期、实验题目、目的、操作、结果。
（二）实验报告实验结束后，应及时整理和总结实验结果及记录，按照下列顺序写出实验报告：1.实验名称（The title of experiment ）：2.目的（Objective）：3.原理（Principle）：最好使用简式。
4.操作步骤（Operational procedure）：5.实验记录6.计算与结果（Calculation and Results）：7.讨论（Discussion）：对实验方法，实验结果和异常现象进行探讨和评论，以及对于实验设计的认识、体会和建议。
二、普通实验技术（一）玻璃仪器的洗涤与清洁玻璃仪器的洗涤与清洁直接影响实验结果的准确性，因此玻璃仪器的洗涤工作是很重要的。
1.新购置玻璃仪器的清洗新购置来的玻璃仪器表面附着有游离碱质，应先用肥皂水洗刷后再用流水冲洗，浸泡于I－2％HCl中过夜，取出后再用流水冲洗，最后用蒸馏水冲洗2－3次，在干燥箱中烤干或自然晾干，备用。
生物化学实验指导1
生化实验室的一般规则1. 进入实验室应穿着工作服。
留长发的同学应挽短、戴帽。
2. 整洁。
实验台必须洁净，各种仪器放置要有秩序。
实验完毕，必须将仪器洗净、放好，拭净台面，方可离开实验室。
3. 安静。
实验时不可谈笑，如有问题可以小声请教师解答。
4. 废物及废液处理。
实验完的废液应倾入水槽中，并用水冲净。
但浓酸、浓碱及氰化物等不可倒入水槽，应倾入预先准备的废液盆或污物桶中。
少量浓酸、浓碱可直接倾入水槽，然后以大量流水冲净。
火柴梗、废滤纸、棉花等不可扔入水槽，应弃入废物盆或垃圾箱中，以免堵塞水管。
5. 试剂与标准溶液。
取用试剂后，应立即将瓶塞盖好；放回原处。
取用有毒试剂时，须用滴定管或滴管。
取样时，应注意用多少取多少。
如未用完只可弃去，不可倒回瓶中；6. 凡可产生烟雾或有毒气体的实验必须在通风橱中操作。
7. 在用恒温水浴箱保温时，应注意随时盖好箱盖。
调节温度到所需温度后，即不再旋动调温旋扭。
8. 贵重仪器如分光光度计、离心机等必须爱护，使用前应熟读使用方法，记住操作要点，按操作规程工作。
如有问题应请教师帮助，不得自行拆卸检修。
9. 防火。
勿使酒精、乙醚或其它易燃试剂靠近火焰。
若蒸发此类溶液时，应用水浴，不得直火加热，以免发生火灾。
10. 实验前应熟读实验指导，记住要点。
实验时应仔细操作并注意观察现象及结果，及时记录。
生化实验的基本操作-1-一、玻璃器皿的洗涤玻璃器皿的洗涤在生物化学实验中是一项重要的工作。
实验性质不同所采取的洗涤方法也不同。
例如研究酶制备的反应时，组织匀浆对金属的污染是非常敏感的，至于细菌的悬浮液对少量的金属可能不敏感，但少量的维生素和其它有机物质则有较大的影响。
一般氧化剂洗液如重铬酸洗液不能有效地除去油脂、硫酸钡等污迹。
因此污迹不同所应采用的洗涤试剂和方法也不同。
如可用汽油或洗涤剂（洗衣粉液或洗洁净）除去油脂，用酸性硫代硫酸钠溶液或热草酸除去氧化性污迹MnO2等，用40％尿素除去附着管内壁的血凝块等。
20170328修订-生物化学实验指导书(2017) (1)
《生物化学》实验指导书2017年03月28日修订目录实验一生物化学实验常用仪器设备及使用实验二甲醛滴定法实验三糖的定量：3，5－二硝基水杨酸比色法实验四粗脂肪提取和含量测定实验五血清蛋白的醋酸纤维薄膜电泳实验六动物组织中脱氧核糖核酸的制备及测定实验一生物化学实验常用仪器设备及使用一、生物化学实验须知1．实验室规则(1) 实验课必须提前5 分钟到实验室,不迟到,不早退，应自觉遵守课堂纪律。
(2) 使用仪器、药品、试剂和各种物品必须注意节约, 应特别注意保持药品和试剂的纯净, 严防混杂污染。
(3) 实验台、试剂药品架必须保持整洁, 仪器药品摆放井然有序。
实验完毕,需将药品、试剂排列整齐, 仪器洗净倒置放好, 实验台面抹拭干净, 经教师验收仪器后, 方可离开实验室。
(4) 使用和洗涤仪器时, 应小心谨慎, 防止损坏仪器。
使用精密仪器时, 应严格遵守操作规程, 发现故障应立即报告教师, 不要自己动手检修。
(5) 在实验过程中要听从教师的指导, 严肃认真地按操作规程进行实验, 并简要、准确地将实验结果和数据记录在实验记录本上。
课后写出实验报告, 由课代表收齐交给教师。
(6)仪器损坏时, 应如实向教师报告, 真填写损坏仪器登记表, 然后补偿一定金额。
(7)每次实验课安排同学轮流值日, 值日生要负责当天实验的卫生和安全检查。
2．实验记录实验课前应认真预习实验内容，将实验名称、实验原理、实验内容和步骤等简单扼要写在记录本上。
实验记录本要标明页码，不能随意撕掉任何一页。
实验中使用的试剂纯度和终浓度以及使用的仪器类型等都要记录清楚。
实验中观察到的现象、结果和得出的数据，应及时直接记在记录本上，绝对不可以随意记在单片纸上。
原始记录必须准确、简练、清楚。
3．实验报告的书写实验结束后,应及时整理和总结实验结果, 写出实验报告。
（1）标题标题应包括实验名称、实验时间、实验室名称、实验组号、实验者及同组者姓名、实验室条件。
（2）实验目的（3）实验原理应简述基本原理，不要完全照抄实验指导书。
生物化学实验指导
生物化学实验指导李峰李荣张建平编湖南文理学院生命科学系前言生物化学实验是以生物为研究对象，利用生物化学的原理和方法，阐明生物体内化学分子的结构与化学反应的机理，从分子水平探讨生命现象的本质，并为人类服务的一门实验科学，是生物科学、农学、动物科学专业、生命学科相关专业本科生及与湖南省中学生物学教师及科技人员重要的专业基础技术。
它是在植物生物学、动物生物学、微生物学等普通生物学实验有比较全面了解及一定基础训练基础上开设的实验技术。
旨在培养具有现代生物学知识，掌握现代生物化学技术的创新人才培养具有现代生物学知识前沿、掌握现代生物学基本技术，具有综合设计、创新实验能力的创新人才。
《生物化学实验指导》是熊大胜教授主持的“生物学基础实验‘531’课程体系研究”的实验教材之一。
生物化学实验模块按生物化学及生化大实验的实验功能构建，承担《生物化学实验》及《生物化学与分子生物学大实验》。
生物化学实验模块以提高学生应用生物化学原理和方法，解决生产实践中的实际问题为目标，改革以往生物化学实验教学大纲，从加强基础的观点出发，侧重于学生基本技能，综合能力，创新能力三个层次的培养，同时也注意增加一些新近发展起来的重要的生物化学研究方法和技术。
生物化学实验模块共包括15个实验。
实验注重加强学生基本技能的培养，使学生掌握蛋白质和核酸的基本结构及组分鉴定方法；掌握蛋白质性质的综合测定，了解蛋白质沉淀和变性等重要概念；掌握最常用的蛋白质制备、分离和纯化过程和方法；通过淀粉酶的提取，活性测定以及淀粉酶动力学分析实验，加深对酶的特性认识；进一步熟悉掌握微量滴定法的基本操作技术；注重培养学生综合能力，通过氨基酸的分离，学习纸层析法的基本原理及操作，掌握氨基酸含量的测定方法；掌握核酸的提取过程以及核酸含量和纯度的测定技术；熟悉掌握电泳技术的基本原理和操作技术；血糖的定量测定和脂肪酸的β－氧化实验，掌握有关物质代谢中生理生化指标的测定方法；在生化大实验中开设了《总RNA的提取及鉴定》和《半定量RT-PCR检测基因的表达差异》两个综合性大实验；本实验模块还开设了为期6周的选修开放项目《基因的克隆、鉴定及生物信息学分析》（创新实验），使学生更好的将基础知识与专业技术衔接。
生物化学实验指导
生物化学实验指导生物化学实验是探索生命奥秘的重要手段，通过实验操作，我们能够更深入地理解生物体内的化学反应和物质代谢过程。
本实验指导将帮助您顺利完成生物化学实验，提高实验技能和科学素养。
一、实验前的准备（一）了解实验目的在进行每个实验之前，务必清楚地知道实验的目的是什么。
这将有助于您在实验过程中保持专注，并理解实验结果的意义。
（二）预习实验内容认真阅读实验教材和相关的参考资料，熟悉实验的原理、步骤和注意事项。
如果有不明白的地方，可以向老师或同学请教。
（三）准备实验用品根据实验要求，准备好所需的仪器、试剂和材料。
检查仪器是否完好，试剂是否过期，并确保材料的质量和数量符合实验要求。
二、实验安全（一）个人防护在实验过程中，要穿戴好实验服、手套和护目镜等防护用品，以保护自己免受化学试剂和生物样本的伤害。
了解所使用化学试剂的性质和危险特性，遵守化学品的储存、使用和处理规定。
避免直接接触有毒、有害和腐蚀性试剂，如果不慎接触，应立即用大量清水冲洗，并寻求医疗帮助。
（三）生物安全对于涉及生物样本的实验，要遵循生物安全操作规范，防止感染和交叉污染。
在处理微生物、细胞和组织样本时，要在无菌条件下进行，并妥善处理废弃物。
（四）防火防爆实验室中严禁烟火，要熟悉灭火器和紧急喷淋装置的位置和使用方法。
对于易燃易爆的试剂和气体，要严格按照操作规程使用和储存。
三、常用仪器的使用（一）移液器移液器是定量移取液体的常用工具。
使用前要根据所需移液量选择合适的移液器和吸头，并进行校准。
移液时要保持垂直，缓慢按下和释放按钮，避免产生气泡。
（二）离心机离心机用于分离不同密度的物质。
使用前要平衡样品，选择合适的转速和离心时间。
离心结束后，要等离心机完全停止转动后再打开盖子，以免发生危险。
分光光度计用于测定溶液中物质的浓度。
使用前要进行仪器校准，选择合适的波长和比色皿。
测量时要确保比色皿清洁，溶液无气泡和杂质。
（四）pH 计pH 计用于测量溶液的酸碱度。
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《生物化学》实验指导实验室规则一、实验目的生物化学是医学教育中的一门实践性较强的基础学科。
实验教学是过程的重要组成部分，是理论教学的延伸和补充。
实验目的是：1、初步学会生物化学实验的基本操作技能及实验研究的基本方法。
2、熟悉生物化学实验原理，了解一些临床生化检验项目。
3、培养严肃认真的工作方法、实事求是的科学态度、团结协作的工作作风和观察分析、思考、独立解决问题的能力。
二、实验基本要求实验教学包括实验前准备、实验操作、整理实验结果、书写实验报告等环节，为了提高实验效果，实现实验目的，要求学生必须做到以下几点。
（一）实验前1、仔细阅读实验指导，了解实验目的和要求，充分理解实验原理，熟悉实验步骤、操作程序和注意事项。
2、预测实验各个步骤可能得到的结果，对预期实验结果能做出合理的解释。
3、注意和估计实验中可能发生的误差，并制定防止误差的措施。
（二）实验时1、保持实验室肃静，不能进行与实验无关的活动。
2、在教师或实验技术人员的指导下，熟悉仪器的构造、性能及操作规程。
3、实验器材摆放整齐，有条不紊、装置正确。
4、按照实验步骤，严肃认真的循序操作，不能随意更动。
5、爱护公物，注意节省实验器材和药品。
注意安全，严防触电、火灾、酸碱灼伤及中毒事故的发生。
6、仔细、耐心地观察实验田中出现的现象，随时客观的记录实验结果，以免发生错误或遗漏。
实验条件应始终保持一致，如有变动,应加文字说明。
（三）实验后1、整理实验结果，书写实验报告，按时交给指导教师评阅。
2、整理实验仪器和清洗玻璃仪器，关闭仪器、设备和电源。
清点实验器材，办理借还手续。
3、做好实验室清洁卫生工作，关闭水、气阀门，切断电源，关闭门窗，确保安全。
实验一生化实验基本操作一、实验目的通过基本操作训练，学会熟练进行进行玻璃仪器洗涤；吸量管使用；溶液的混合；离心机使用；７２１型分光光度仪使用。
二、实验用品烧杯、试管；吸量管、移液管；旋涡混合（振荡）器、玻璃棒；离心机使用；７２１型分光光度仪三、实验内容及步骤（一）玻璃仪器的洗涤在生化实验中，玻璃仪器洁净与否，是获得准确结果的重要环节。
洁净的玻璃仪器内壁应十分明亮光洁，无水珠附着在玻壁上。
（二）吸量管的使用1．刻度吸量管的正确使用方法用右手拇指和中指夹住管身，将吸量管的尖端伸入试液深处，左手持洗耳球把试液吸入管内至高过刻度以上时，迅速用右手食指按住吸量管的上口，以控制试液的泄放。
吸液后应尽量使吸量管保持垂直，使右眼与刻度等高，稍微轻抬食指或轻轻转动吸量管，使试液面缓慢降落，至管内试液弯月面的最低点与吸量管的刻度线相齐为止。
然后将吸量管插到需加试剂的容器中，让尖端与容器内壁靠紧，松开食指让液体流出。
液体流完后再等15秒钟，捻动一下吸量管后移去（如需吹的吸量管，则吹出尖端的液体后再捻转一下吸量管移去）。
2．定量吸液器的使用方法(微量加样器)：1)选择适当的吸液器：吸液前先把吸嘴套在吸引管上，套上后要轻轻旋紧一下，以保证结合严密。
2)持法：右手四指（除大拇指外）并拢握住吸液器外壳（使外壳突起部分搭在食指近端），大拇指轻轻放在吸液器的按钮上。
3)取样(吸液)：用大拇指按下按钮到第一停止点，以排出一定容量的空气，随后把吸嘴尖浸入取样液内，徐徐松开大拇指，让按钮慢慢自行复原，取样即告完成。
4)排液：将吸液器的吸嘴尖置于加样容器壁上，用大拇指慢慢地将按钮按下到第一停止点，停留1秒钟（粘性较高的溶液停留时间应适当延长）。
然后再把按钮按到第二停止点上，让吸嘴沿管壁向上滑动。
当吸嘴尖与容器壁或溶液离开时，方可释放按钮，使其恢复到初始位置。
5)吸液器用后应及时取下吸嘴。
将吸嘴用自来水冲洗后浸入盛水的容器内（以防干涸），待实验结束后集中仔细清洗。
（三）溶液混匀1．混匀的方法1)使盛器作离心运动。
2)左手持试管上端，用右手指轻击试管下半部，使管内溶液作旋转运动。
3)利用旋涡混合（振荡）器混匀。
4)不得已时可用干燥清洁的玻璃棒搅匀。
（四）离心机使用1．TGL-20M台式离心机使用方法操作程序：1）把离心机放置于平面桌或平面台上，四只橡胶机脚应坚实接触平面，目测使之平衡，用手轻摇一下离心机，检查离心机是否放置平稳。
2）打开门盖，将离心管放入转子体内，离心管必须成偶数对称放入（离心管试液应称量加入），注意把转子体上螺钉旋紧，并重新检查试管是否对称放入、螺钉是否旋紧。
3）关上门盖，注意一定要使门盖锁紧，完毕用手检查门盖是否关紧。
4）插上电源插座，按下电源开关。
5）设置转子号、转速、温度、时间：（五）分光光度仪使用721型1）721分光光度计使用前应预热20分钟，做样之前应对比色皿成套性进行校正，减小测量误差。
2）波长选择置于所要分析物相对应的波长值，3）打开比色皿盖进行调零调整面板0旋钮进行零点调整。
4）将空白放入比色皿盒后盖上比色皿盖，调整100旋钮进行100%调整。
5）然后逐一拉出样品进行比色分析。
四、实验报告与内容（略）五、注意事项（一）使用刻度吸量管的注意事项：1)选择适当规格的吸量管：吸量管的最大容积应等于或略大于所需容积（ml数）。
2)仔细看清吸量管的刻度情况：刻度是否包括吸量管尖端的液体？读数方向是从上而下，还是从下而上？3)拿吸量管时，刻度一定要面向自己，以便读数。
4)吸取试剂时应注意三点：一是先吹去吸量管内可能存在的残留液体，二是将吸量管插入试剂液面深部(以免吸液过程中因液面降低而吸入空气产生气泡或管内试剂进入洗耳球)，三是使用洗耳球(不可直接用口吸)。
5)按吸量管上口时应该用食指，不能用拇指。
6)吸取粘滞性大的液体(如血液、血浆、血清等)时，除选用合适的吸管(奥氏管)外，应注意拭净管尖附着的液体，尽量减慢放液速度(用食指压力控制)，待液体流尽后吹出管尖残留的最后一滴液体。
使用的吸量管应干净、干燥无水。
如急用而又有水时，可用少量欲取试剂冲洗3次，以免试剂被稀释。
（二）溶液混匀注意事项：1)防止盛器内的液体溅出或被污染。
2)严禁用手指堵塞管口或瓶口震荡混匀。
六、思考题1、吸取某标准液0.75ml，应选用ml的吸管移取。
2、去油污能力最强的洗液是。
3、配制0.4M NaOH溶液1000ml，需NaOH 克。
4、配制0.5M HCL 400ml，需1M HCL溶液毫升。
一、实验目的通过接触尿蛋白定性实验，初步学会判断和了解肾脏功能是否出现问题及问题的严重性二、实验原理在含有蛋白质的尿液中另磺柳酸时，可产生白色沉淀。
是磺柳酸的酸离子可与蛋白质碱性基团结合，生成不溶性蛋白盐深沉。
三、实验用品与试剂配制尿杯、试管、滴管、20%磺柳酸溶液四、实验内容及步骤1、采集尿液标本：用尿杯采集自己的尿液标本备用。
2、取试管一支，加入清晰的尿液24滴，然后加入20%磺柳酸溶液2滴，轻轻摇匀，一分钟后观察结果。
3、结果记录和判断：尿蛋白定性实验是尿常规检查中必做的一项实验，是诊断肾脏疾病和病变的重要常规指标之一。
尿蛋白定性试验常通过半定量方式或加号方式检测尿液中排出的蛋白质的多少，用于判断和了解肾脏功能是否出现问题及问题的严重性，其结果可用阴性‘—’、微量‘±’、1--4个加号‘+’‘++’‘+++’‘++++’表示，也可用数值表示，加号越多或数值越高则尿蛋白越多。
五、实验报告与内容此次实验结果为六、注意事项收集中段尿七、思考题试讨论尿蛋白定性实验临床意义一、实验目的学会验证蛋白质呈色反应、沉淀反应及等电点的实验操作。
二、实验原理蛋白质分子中的氨基酸是以肽键连接的，因此蛋白质具有缩二脲反应。
由于蛋白质分子中含有自由氨基，可与茚三酮试剂作用生成紫蓝色化合物，称茚三酮反应。
以上呈色反应可用于检验蛋白质。
在蛋白质溶液中加入中性盐时，蛋白质即沉淀，这种过程称为盐析。
盐析包括：（1）大量电解质破坏蛋白质的水化层而出现沉淀；（2）电解质中和了蛋白质分子的电荷而沉淀。
中性盐能否沉淀各种蛋白质决定于中性盐的浓度、蛋白质的种类、溶液的pH、以及蛋白质胶体颗粒的大小。
颗粒大的比颗粒小的容易析出，如球蛋白多在半饱和(NH4)2SO4溶液中析出，而清蛋白则常在饱和(NH4)2SO4溶液中析出。
极性较大的有机溶剂，对水的亲和力较大，可破坏蛋白质的水化层使其沉淀；当溶液的pH值大于蛋白质的等电点时，蛋白质带负电荷，可与重金属离子结合成蛋白盐沉淀；在溶液的pH值小于蛋白质的等电点时，蛋白质带正电荷，可与酸根离子结合成蛋白盐沉淀。
蛋白质解离成两性离子时，溶液的pH值称该蛋白质的等电点。
酪蛋白溶液在等电点时很不稳定，可以发生沉淀。
所以，可以根据相对浊度来测定酪蛋白的等电点的近似值。
三、实验用品与试剂配制1、蒸馏水2、10% 鸡蛋白溶液 (v / v )3、0.2 %茚三酮乙醇液4、固体(NH4)2SO45、0.5% NaOH溶液6、0.5% 硫酸锌溶液7、10% 三氯乙酸溶液8、0.01 mol/L 醋酸9、0.1 mol/L醋酸 10、1.0mol/L醋酸11、饱和(NH4)2SO4溶液：称取377 g硫酸铵溶于20℃500ml的蒸馏水中。
硫酸铵在20℃水中的溶解度为754g/L水。
配制时需称取稍过量的硫酸铵使溶液中有少量固体存在，同时可加热助溶。
12、0.5%酪蛋白醋酸钠溶液：称取纯酪蛋白0.25g，置于50ml容量瓶内，准确地加蒸馏水20 ml及1mol/L NaOH 5ml，摇匀，使酪蛋白溶解，然后准确地加1mol/L醋酸液5ml，最后用蒸馏水稀释至刻度。
13、滴管、试管和试管架、记号笔。
四、实验内容及步骤（一）茚三酮反应取小试管1支，加10 %鸡蛋白溶液4滴，蒸馏水10滴和0.2 %茚三酮乙醇液6滴，混匀，在沸水浴中加热5～10分钟，待冷却后观察溶液的颜色变化。
（二）沉淀反应⒈盐析：取10%鸡蛋白溶液4ml于小试管中，再加入4ml 饱和(NH4)2SO4溶液，混匀，静置20分钟后，则球蛋白全部析出。
离心（2000转/分钟）5分钟，取上清液1ml加固体(NH4)2SO4约0.5g 使之饱和，边加边振摇至溶液出现浑浊，再向浑浊液（应不含硫酸铵结晶颗粒）加1.5～2.0ml蒸馏水，观察结果。
⒉重金属盐沉淀蛋白质：取试管1支，加入10%鸡蛋白溶液1ml，及0.5%NaOH溶液1滴混匀，再加入0.5%硫酸锌溶液6滴，观察结果。
⒊三氯乙酸沉淀蛋白质：取试管1支，加入10%鸡蛋白溶液1ml，然后再加入10%三氯乙酸溶液3～5滴，观察沉淀的生成。
（三）蛋白质等电点的测定：⒈取5个大试管，编号，按下表准确加入试剂，混匀。
⒉各试管加入酪蛋白醋酸钠溶液时，应随加随摇（切勿在各管加完后才摇），观察各管浊度。
静置10～30分钟后，比较各管浊度，用（＋）多少表示其浑浊程度。
沉淀最多而上清液最透明的试管的pH值，即为酪蛋白的等电点。
为什么？五、实验报告与内容（一）茚三酮反应结果（二）沉淀反应结果（三）蛋白质等电点的测定沉淀最多而上清液最透明的试管的pH值= ，即为酪蛋白的等电点。