组培室无菌化操作规程
无菌实验室操作规程
无菌实验室操作规程一、引言无菌实验室是进行微生物学研究和生物制品生产的重要场所，为了确保实验过程的准确性和结果的可靠性，制定本操作规程。
二、实验室准备1. 实验室应保持清洁整齐，无尘无杂物。
2. 实验室应进行定期消毒，确保无菌环境。
3. 实验室内应有足够的工作空间和储存设施。
三、操作前的准备1. 操作人员应佩戴干净的实验服、手套和口罩。
2. 实验器材和培养基应提前准备好，并进行必要的消毒处理。
3. 检查无菌台、培养箱、超净工作台等设备的工作状态。
四、操作步骤1. 洗手消毒：操作人员应在进入实验室前进行彻底的手部消毒，使用洗手液和消毒剂。
2. 空气净化：启动无菌台、超净工作台等设备，确保工作区域的空气质量。
3. 培养基处理：打开培养基瓶盖时，应用酒精灯或消毒棉球对瓶口进行消毒处理。
4. 无菌操作：在无菌台或超净工作台上进行实验操作，避免与非无菌物品接触。
5. 培养皿接种：用铁鏊或无菌针将微生物接种到培养基上，避免污染。
6. 培养皿密封：用无菌胶带或铝箔将培养皿密封，防止外界的污染。
7. 培养箱操作：将培养皿放入培养箱，设定适当的温度和湿度。
8. 实验结束：实验完成后，关闭设备，清理工作区域，将实验废弃物进行无菌处理。
五、实验室安全1. 操作人员应严格遵守实验室安全规定，如禁止食物和饮料进入实验室。
2. 实验室内应配备紧急处理设备和消防设备，并进行定期检查和维护。
3. 实验室内应设有明显的安全警示标识，提醒人员注意实验室安全。
六、实验记录1. 操作人员应及时、准确地记录实验过程和结果，包括实验日期、操作步骤、使用的试剂和设备等。
2. 实验记录应保存在指定的档案中，便于回顾和追溯实验过程。
七、实验室清洁1. 实验室应定期进行彻底的清洁和消毒，包括工作台、器材、储存设施等。
2. 清洁过程中应使用合适的清洁剂和消毒剂，避免对实验过程和结果产生影响。
八、质量控制1. 实验室应建立质量控制体系，对实验过程和结果进行监控和评估。
无菌实验室操作规程
无菌实验室操作规程一、引言无菌实验室是进行微生物学实验和生物制剂研究的重要场所，为保证实验的准确性和可靠性，必须严格遵守操作规程。
本文将详细介绍无菌实验室的操作规范，包括实验室准备、操作流程、消毒措施和安全注意事项等。
二、实验室准备1. 实验室环境要求无菌实验室应设在干燥、通风良好的地方，温度控制在20-25摄氏度，相对湿度控制在50-60%。
2. 实验室设备和试剂准备（1）准备所需的实验设备，包括培养箱、培养皿、离心机、显微镜等。
（2）准备所需的试剂和培养基，确保其质量符合要求，并按照使用说明正确保存。
三、操作流程1. 个人防护（1）进入实验室前，必须穿戴干净的实验服、手套和口罩，确保个人卫生。
（2）操作过程中，避免触碰面部、眼睛和其他暴露部位，以防止交叉污染。
2. 实验台面消毒（1）每次实验前，用75%乙醇对实验台面进行彻底擦拭消毒。
（2）实验结束后，同样使用75%乙醇对实验台面进行消毒处理。
3. 培养物传递（1）使用无菌技术传递培养物时，必须在无菌实验室的无菌工作台上进行。
（2）在传递培养物之前，先将培养皿或者试管中的盖子取下，然后将传递工具在火焰中消毒，再取出所需的培养物。
4. 培养基制备（1）准备培养基前，要先将使用的培养皿或者试管用高温高压灭菌器进行灭菌处理。
（2）制备培养基时，必须按照配方准确称量试剂，并使用无菌技术进行操作。
5. 显微镜操作（1）使用显微镜前，要先将镜片用无菌棉球蘸取75%乙醇擦拭消毒。
（2）观察完毕后，将显微镜镜片再次进行消毒处理。
四、消毒措施1. 实验室常规消毒（1）每天实验结束后，对实验室内的地面、工作台、设备等进行消毒处理。
（2）使用消毒剂时，要按照说明书的要求正确配制和使用。
2. 垃圾处理（1）实验过程中产生的废弃物，如培养皿、试管等，必须放入专用的生物废弃物容器中。
（2）生物废弃物容器应定期进行高温高压灭菌处理，确保无菌处理。
五、安全注意事项1. 实验室操作时，要注意避免剧烈晃动和碰撞实验设备，以免造成设备损坏或者人身伤害。
无菌实验室操作规程
无菌实验室操作规程一、引言无菌实验室是进行微生物学实验和研究的重要场所，为确保实验结果的准确性和可靠性，必须严格遵守操作规程。
本文档旨在规范无菌实验室的操作流程，确保实验室的无菌环境，保障实验人员的安全。
二、实验室准备1. 实验室设备准备a. 确保实验室内的工作台、试剂架等设备表面干净整洁。
b. 检查实验室内的无菌器材和试剂的有效期，并按照规定进行更换和采购。
c. 确保实验室内的培养基、试剂等储存条件符合要求。
2. 个人准备a. 实验人员应穿戴干净的实验服，佩戴口罩、手套和帽子等个人防护用品。
b. 实验人员应做好手部卫生，洗手后使用消毒剂进行消毒。
三、实验操作流程1. 准备工作a. 打开实验室门前，先进行手部消毒，然后佩戴实验服、口罩、手套和帽子等个人防护用品。
b. 检查工作台面、试剂架等设备表面是否干净，如有污染应及时清洁。
c. 检查无菌器材和试剂的有效期，如有过期应及时更换。
d. 检查培养基、试剂等储存条件是否符合要求，如有问题应及时处理。
2. 开展实验a. 打开无菌柜前，先进行手部消毒，然后佩戴手套。
b. 将所需的培养基、试剂等放置在无菌柜内，确保无菌操作环境。
c. 在无菌柜内进行培养基的制备、菌种的接种等操作，确保操作过程无菌。
d. 注意避免无菌柜内的交叉污染，每次操作前应进行必要的清洁和消毒。
3. 实验后处理a. 实验结束后，关闭无菌柜前，先进行手部消毒，然后将无菌柜内的培养基、试剂等归位。
b. 清洁无菌柜内的工作台面、试剂架等设备表面，确保无菌环境。
c. 将使用过的实验服、口罩、手套和帽子等个人防护用品进行正确处理，避免交叉污染。
d. 对无菌柜进行定期的清洁和消毒，保持其无菌环境。
四、安全注意事项1. 实验人员应定期接受无菌操作培训，熟悉无菌实验室的操作规程和安全注意事项。
2. 在无菌操作过程中，应注意避免身体接触无菌器材和试剂，以防止交叉污染。
3. 实验人员应定期检查个人防护用品的有效性，如有损坏或者过期应及时更换。
组织培养-无菌室操作规程
组织培养-无菌室操作规程1. 无菌室室内温度保持在20-24℃，湿度保持在45-60%；室内应保持清洁，严禁堆放杂物，以防污染；2. 无菌室应备有工作浓度的消毒液，如75%的酒精，0.1%的新洁尔灭溶液，优氯净，碘伏等等；无菌室应定期用适宜的消毒液灭菌清洁，以保证无菌室的洁净度符合要求；3. 需要带入无菌室使用的器械，玻璃器皿等一切物品，均应包扎严密，并应经过适宜的方法灭菌（一般采用高温高压灭菌，1.2个大气压，121-126℃，30分钟）；4. 工作人员进入无菌室前，必须修剪指甲，用肥皂或消毒液洗手消毒，然后在缓冲间更换专用工作服，鞋，帽子，口罩和手套(或用75%的乙醇再次擦拭双手)，方可进入无菌室进行操作；手的清洁流程：（1）取下手上的饰物及手表，调节合适的水流，浸湿双手；（2）取肥皂或适量肥皂液液涂抹双手；（3）按“六部洗手法”顺序搓洗双手：①掌心对掌心，两手并拢相互搓擦；②手心对手背，手指交错相互搓擦（交换）；③掌心相对，手指交叉沿指缝相互搓擦；④用一只手握住另一只手拇指旋转搓擦（交换）；⑤弯曲一手手指各关节，在另一只手掌心旋转搓擦（交换）；⑥指尖在掌心转动搓擦（交换）；（4）浸湿手的前臂部分（手腕至手肘），取肥皂或适量肥皂液液涂抹前臂，用手掌认真搓擦（交换）；（5）流水冲洗，腕部略高于肘部，使污水从指尖流至手腕，防止水流入衣袖。
5. 无菌室使用前须用75%的乙醇擦拭超净工作台台面及四周，必须打开无菌室的紫外灯灭菌30分钟以上，同步开启臭氧消毒机，辅助进行臭氧消毒，同时打开超净工作台紫外灯并开启风扇按钮进行吹风。
紫外灭菌结束后，关闭紫外灯及臭氧消毒机30分钟后才能进入无菌室进行操作；6. 进入超净工作台开始工作前，必须先开启风扇及工作灯，点燃酒精灯，用75%的乙醇认真擦拭双手，之后才能进行工作；7. 操作结束后，应及时清理无菌室，进行清扫：①将使用过的操作工具及废液缸从超净工作台上取出；②先用碘伏消毒液擦拭超净工作台台面及四周，再用75%的乙醇擦拭一遍，使其恢复成使用前状态；③使用新吉尔灭液或碘伏消毒液进行地板擦拭等清洁工作，再用紫外灯辐照灭菌20分钟。
无菌技术操作规程（精选五篇）
无菌技术操作规程（精选五篇）第一篇：无菌技术操作规程无菌技术操作规程一、无菌技术操作原则1、环境要清洁。
进行无菌技术操作前半小时，必须停止清扫地面等工作，避免不必要的人群流动，防止尘埃飞扬。
治疗是每日用紫外线照射消毒一次。
2、进行无菌操作时，衣帽穿戴要整洁。
帽子要把全部头发遮盖，口罩须遮住口鼻，并修剪指甲，洗手。
3、无菌物品与非无菌物品应分别放置，无菌物品不可暴露在空气中，必须存放于无菌包或无菌容器内，无菌包应注明无菌名称，消毒灭菌日期，并按日期先后顺序排放，以便取用，放在固定的地方。
无菌包在未被污染的情况下，可保存7天，过期应重新灭菌。
4、工作人员面向无菌区域，用无菌取无菌物品，手臂须保持在腰部水平以上，不可触及无菌物或跨越无菌区，从无菌容器中取出的物品，虽未使用，也不可放回无菌容器内。
5进行无菌操作时不可面对无菌区讲话、打喷嚏。
怀疑无菌物品被污染，不可使用。
6进行无菌操作时如器械、用物疑有污染或已被污染，即不可使用可，应更换或重新灭菌。
7、一套无菌物品，只能供一个病人用，以免发生交叉感染。
二、准备质量标准1、工作人员着装整洁，洗手、戴口罩、修剪指甲。
2、备齐用物。
3、治疗盘、无菌持物钳或镊，浸泡于消毒液溶液内，无菌溶液、无菌包布、无菌容器及物品、无菌手套、弯盘、75％酒精、无菌棉签。
4、查对无菌物品、灭菌日期及手套好。
5用物排放有序，符合无菌操作要求。
三、操作流程质量标准1、选择清洁、干燥、宽阔的场所进行操作。
2无菌持物钳使用法：无菌持物钳须置于无菌容器内，有效期限4小时；取、放无菌持物钳时，应将盖打开，钳端闭合，不可在盖孔中取、放；如需取远处物品时，应连同容器一起搬移，就地取出无菌物品。
3、无菌包使用法：1）、查看无菌包的名称、灭菌日期，查看化学指示胶带粘贴。
2）、将无菌包放在清洁、干燥处，撕开粘贴。
3）、用拇指和食指先揭开左右两角，最后揭开内角，注意手不可触及包布的内面。
4）、用无菌钳（镊）取出（首先查看化学指示卡是否合格）所需物品，放在事先备好的无菌区域内，剩余部分按原痕包起扎好，并注明开包时间，24小时内可在使用。
无菌操作规程
无菌操作规程无菌操作是在医疗、实验室等领域中进行的一种重要操作。
它的目的是保持环境的无菌状态，防止外界的污染，保证实验结果的可靠性。
本文将介绍无菌操作的一般规程和注意事项，以期帮助读者正确地进行无菌操作。
一、准备工作在进行无菌操作前，需要进行一系列的准备工作。
首先，要确保操作的场所清洁整齐，并保持室温适宜。
其次，要准备好所需的无菌器械和培养基等物品，并对其进行必要的消毒。
再次，要对自己进行全面的消毒，包括洗手、穿戴无菌衣物和戴上无菌手套等。
二、无菌操作步骤1. 打开试验台：在无菌试验台上进行操作时，首先应按照操作规程打开试验台，确保室内的无菌环境。
2. 洗手消毒：在进行无菌操作前，必须进行彻底的洗手消毒。
先用流动水洗手，然后使用无菌洗手液进行洗手，并用流动水彻底冲洗干净。
最后，用无菌酒精进行手部消毒。
3. 穿戴无菌衣物：完成洗手消毒后，接下来要穿戴无菌衣物。
无菌衣物包括无菌帽、无菌口罩、无菌手套和无菌鞋套等。
穿戴时要注意不要碰触到其他物品，以免引入污染源。
4. 开始操作：在穿戴好无菌衣物后，可以开始进行无菌操作了。
操作前要将所需的器械和试剂置于无菌台上，避免污染。
5. 使用无菌器械：在进行无菌操作时，务必使用无菌器械。
无菌器械是经过高温高压灭菌处理的，可以保证其无菌状态。
使用时要注意不要碰触其他非无菌物品，同时注意不要使器械碰撞，以免影响无菌性。
6. 注意无菌培养基的使用：无菌培养基是进行微生物培养的基础，使用前要检查培养基是否有变色、变质等情况，同时要注意不要碰触到其他物品，以免引入污染。
7. 触摸操作：在触摸培养基或其他无菌物品时，要注意手部的无菌性。
当需要触摸无菌物品时，要用无菌手套轻柔地触摸，避免使用指尖接触，以免杂菌附着。
8. 包装无菌物品：当需要将培养基或其他无菌物品包装时，要使用专门的无菌包装袋或容器，并在包装过程中保持手部的无菌性。
三、注意事项1. 避免大面积的污染：在进行无菌操作时，要避免大面积的污染，尽可能将无菌区域与非无菌区域分隔开来，防止跨区域传播。
无菌实验室操作规程
无菌实验室操作规程一、引言无菌实验室是进行微生物学研究和实验的重要场所，为确保实验结果的准确性和可靠性，必须严格遵守无菌实验室操作规程。
本文将详细介绍无菌实验室的操作标准，包括实验室准备、个人卫生、实验器材准备、无菌操作技术等方面的内容。
二、实验室准备1. 实验室环境无菌实验室应保持清洁、干燥和无尘的环境，确保实验操作不受外界污染。
实验室内应定期进行消毒和清洁，保持良好的通风。
2. 实验室设备实验室应配备必要的设备和仪器，如无菌工作台、高温高压灭菌器、培养箱等。
这些设备应定期进行维护和检修，确保其正常运行。
3. 实验室材料实验室应存放一定数量的无菌培养基、培养皿、试管、移液器等实验材料，以备实验需要。
这些材料应在使用前进行灭菌处理，确保无菌操作的可行性。
三、个人卫生1. 穿戴实验服进入无菌实验室前，必须穿戴干净的实验服，并佩戴帽子、口罩和手套。
实验服应定期更换，并保持清洁。
2. 洗手进入无菌实验室前，必须彻底洗手，并使用洗手液进行消毒。
洗手过程中应注意彻底清洗指缝和指甲。
3. 禁止进食进入无菌实验室后，禁止进食、饮水和吸烟。
这些行为可能会引入外界细菌，影响实验结果的准确性。
四、实验器材准备1. 灭菌处理所有进入无菌实验室的器材和材料，包括培养基、培养皿、试管等，必须进行灭菌处理。
常用的灭菌方法有高温高压灭菌、紫外线照射等。
2. 器材摆放实验室内的器材和材料应按照一定的规则摆放，保持整齐。
不同材料之间应有一定的距离，避免交叉污染。
3. 器材标识实验室内的器材和材料应进行明确的标识，包括名称、批号、灭菌日期等信息。
标识应清晰可见，避免混淆和误用。
五、无菌操作技术1. 环境消毒进行无菌操作前，必须对实验室环境进行消毒处理。
可以使用酒精或消毒剂对实验台面、工作台、试验器皿等进行擦拭消毒。
2. 灭菌操作进行无菌操作前，必须对操作台面、手套、工具等进行灭菌处理。
可以使用酒精灯、高温高压灭菌器等设备进行灭菌。
植物组织培养无菌操作技术
无菌操作技术植物组织培养要求严格的无菌条件及无菌操作技术。
无菌操作技术如下：一、接种室的无菌技术无菌操作室或接种室除用甲醛和高锰酸钾按2比1的比例定期熏蒸灭菌，在实验室用甲醛和高锰酸钾封闭消毒器具，不宜进入消毒空间。
消毒后通风换气，等气味散尽后再出入。
使用前用20%新洁尔灭（苯扎溴铵溶液）对接种室内墙壁、地板及设备擦洗，用70%酒精喷雾（使灰尘迅速沉淀），用紫外线灭菌20分钟或更长，照射期间接种室门要关严。
当接种室紫外线消毒期间，工作人员不要处于正消毒的空间内，更不要用眼睛注视紫外灯，也要避免长时间在开着紫外灯的超净工作台内进行操作。
一般在接种室用紫外线消毒后，不要立即进入接种室，此时室内充满高浓度的臭氧，会对人体，尤其是呼吸系统造成伤害。
应在关闭紫外线灯15-20分钟后再进入室内。
二、工作人员的无菌技术工作人员要经常洗头、洗澡、剪指甲，保持个人清洁卫生。
在接种室穿医护用的特制工作衣帽。
工作衣、帽、口罩也要经常清洗，洗净晾干后用纸包好进行高温高压消毒。
工作衣使用前后挂于预备间，并用紫外线照射灭菌。
接种前洗手，最好用肥皂水或新洁尔灭、洗手液等清洗，然后用酒精擦洗或喷洒。
三、接种器械无菌技术接种时首先要用紫外线照射超净工作台面后，用70%酒精喷雾或擦洗工作台面。
工作前送风15-30分钟左右。
首先对器械支架进行灼烧消毒，然后对接种工具如手术剪、手术刀、镊子等进行灼烧消毒，方法一般是用70%酒精浸渍、擦拭或喷洒后再酒精灯上灼烧。
接种工具灼烧后放在器械支架上冷却待用。
接种一定数量材料后，接种器械要重新灼烧灭菌，避免因沾有植物材料或琼脂等引起双重污染和交叉污染。
通常采用两套接种工具，使用一套时，另一套灼烧后冷却。
对于较大的器械如显微镜等，可用70%酒精擦洗表面，然后用紫外线照射灭菌。
继代转接时，要注意对待转接的培养物进行仔细观察挑选，防止将已经污染的培养物继代扩增；放置了很久的试管或三角瓶表面和瓶塞宜用70%酒精棉擦洗。
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无菌操作
一、接种室的消毒
1、每天开始工作前用75%酒精喷雾自己周围环境。
2、一天的工作结束后，值日、值班人员要对培养基储存间、三个接种室、两个培养室及风淋室进行紫外灯及臭氧灭菌20~30min。
3、风淋室两个门随时关紧，灭菌间和储存间之间的门除了放培养基外不得随意开门。
风淋室与接种间之间的门要随时关闭！接种四人间对着的门绝对不允许开！
二、无菌操作要求
1、在一楼换各自的护士鞋。
1、进实验室首先要穿过风淋室吹风，换工作服，换拖鞋，戴好帽子、把头发全部包进去、不许有头发留在外面，之后进入实验室。
2、自己的工作服、帽子一周清洗一次。
口罩要保持干净。
4、必须剪除长指甲，接种时用75%酒精擦洗。
5、接种时禁止谈话并戴上口罩。
6、接种过程尽量减少工作人员在接种室的走动。
三、接种前应做好相应的准备工作
1、超净台紫外灯灭菌20min，值日值班人员提前10min 开台子。
2、打开高温灭菌消毒器，温度达到200℃左右时可以使用。
3、此时将当天或某时间段所需要的原瓶苗、培养基、盘子、一瓶无菌水及放置瓶盖的空框子准备好，待紫外灯关闭5min后进入接种室，
4、将事先准备好的原瓶苗及其他物品放到医用小推车上（有条理的
摆放，便于在操作时使用）。
5、于8：20之前和14:50之前进入操作室超净台前进行接种工作。
四、具体的无菌操作步骤如下：
1、首先要拉下超净台挡风板，隔离人体和无菌苗，减少菌的发生。
2、操作前要用酒精喷壶喷洒超净台并用抹布擦干净。
3、将两把解剖刀和镊子放入灭菌消毒器内进行2~3min灭菌，之后放在灭菌支架上，冷却或不烫手的情况下使用。
每做完一瓶无菌分化材料，都应将刀子镊子进行灭菌，否则会引起交叉污染。
3、器具及用品（盘子、培养基、原瓶苗）用酒精喷壶消毒之后，放在超净工作台面上待用（台内只放无菌器具和用品）。
盘子在酒精消毒后，小心地打开报纸，反扣在台面上，手不要触碰碟子，否则碟子会积聚菌，导致瓶苗污染。
4、操作前要检查好所取苗子是否为无菌苗，在发生真菌性污染（在培养基表面有粉状、毛状菌）、细菌性污染（在培养基表面有油状、浓状菌斑）时要将瓶苗放在一边，不可以打开瓶盖，以免发生超净台环境污染。
5、用镊子夹无菌碟并小心放到酒精灯右前方（忌用手拿碟子）。
6、将消毒后的镊子（左）和刀子（右）架在无菌碟上
7、打开瓶盖对无菌分化苗瓶口进行火焰灭菌（打开的瓶盖右手扔进空框里），左手托着瓶身，瓶口斜对着酒精灯火焰，瓶身由里向外旋转2~3圈即可。
8、用镊子夹分化苗放入无菌碟中。
分化苗多的情况下可以分两次放
入碟内切割。
若不慎把分化苗掉到台面上，可以舍弃或者接入另外的培养瓶中，并做记号。
有时，在接种过程中，不小心把镊子或刀子掉在台面，应进行灭菌后才可以使用。
9、分化苗切分。
在切分过程中，接种刀和镊子始终与碟子呈45°以下夹角，不得大于45°，否则手上的杂菌会掉进无菌碟中引起污染。
人体不和超净台桌面紧挨着，碟子在超净台里，不能到台边上。
10、把切分后的苗接入新的培养基。
打开瓶盖，注意瓶口始终倾斜对着酒精灯火焰，瓶盖倒放在桌面上，手尽量不要在瓶盖上边碰，否则杂菌掉在瓶盖上会引起污染。
11、盖瓶盖。
把瓶盖放到酒精灯火焰上烘烤1~2S，盖上瓶口即可。
12、（1）接种完一瓶时若碟内还有剩余的分化苗，再将其接入新的培养瓶中。
（2）若接不满一瓶时，拧紧瓶盖放置在超净台的一边，下次继续用。
13、完成一个接种过程后，右手把镊子刀子灭菌的同时，左手拿一瓶原瓶苗准备下一个接种环节。
14、接种完毕后清理工作台的废物，保持台面整洁。
15、接种结束后，拿出所有用具、容器，关闭超净台并关闭电源。