实验八 原种与栽培种的制作
实验八 原种与栽培种的制作
实验八原种与栽培种的制作一、实验目的学会原种与栽培种培养基的配制方法，掌握原种与栽培种的接种技术，了解食用菌原种与栽培种制作的工艺流程和制作的基本技能。
二、实验原理原种（二级种）系指由母种移植于固体或液体培养基上繁殖的菌丝体。
栽培种（三级种）系指由原种移植到固体或液体培养基上扩大繁殖的菌丝体。
三、实验所需1. 菌种：母种菌种（杏鲍菇等）2. 材料试剂：棉籽壳、玉米芯、玉米粉、石膏粉、蔗糖、75%酒精等。
3. 仪器用具：超净工作台、高压灭菌锅、台秤、铲子、聚丙烯栽培袋、口环、封口膜、高压橡皮圈、酒精棉瓶、长柄镊子、接种具（钩、锄）、酒精灯、火柴、垫架、标签、笔等。
四、实验内容（1）原种与栽培种培养基配制工艺流程：培养基配料装袋（或装瓶）高压灭菌冷却接种（2）掌握原种与栽培种的接种操作技术超净工作台消毒器械消毒无菌接种菌丝培养（3）培养基配方（用配方1）：配方1：棉籽壳40%，玉米芯50%，玉米粉8%，石膏1%，蔗糖1%。
（平菇，且通用）配方2：棉子壳40%，杂木屑40%，麦麸或米糠18%，石膏1%，过磷酸钙1%。
（姬菇）配方3：杂木屑39％，棉籽壳34％，麦麸或米糠22％，玉米粉3％，石膏1％，过磷酸钙1％。
（猪肚菇）（4）原种、栽培种制作1. 拌料先根据要做原种的数量，算出各种原料的用量，然后称量、混合，先拌干料，后边加水边搅拌，边测试含水量。
2. 含水量测定拌好料后，用手抓一把培养料，捏在手中紧握，手指缝中有水印但以水不往下滴为适，此时含水量为62%~64%。
3. 装袋将拌好的培养料装入原种瓶或塑料袋中，边装边压实（但不得过紧），一直装到瓶（袋）肩处为宜。
4. 擦瓶将瓶（袋）口和瓶（袋）外粘附培养料擦掉，以免接种后感染杂菌。
5. 封口用封口膜包住袋口或用棉塞塞住瓶口，用高压橡皮圈或线绳将袋口或瓶口扎好，准备灭菌。
6. 灭菌灭菌方法同母种的灭菌方法，灭菌条件：0.14Mpa，123℃，至少2-3小时。
种子生产程序(原种＼良种)
（二）三系七圃法（程序图示） 三系七圃法（程序图示） １．程序图示 ２．注意要点
图２－５ 成对回交测交原种生产程序图 保持系 Ｂ 回交圃 Ａ×Ｂ 不育系 Ａ 测交圃 Ａ×Ｒ 恢复系 Ｒ 株行鉴定圃 Ｒ 回交鉴定圃 Ａ×Ｂ 原种圃 Ａ×Ｂ ……………….. ……
测交鉴定圃 ……... （Ａ×Ｒ）Ｆ１ …. 株系鉴定圃 Ｒ
防 杂 保 纯
搞好单株混合选择 严格去杂去劣
加 速 繁 殖
稀播繁殖 剥蘖分植
繁殖
繁殖
作物的繁殖方式有哪些种类， ？作物的繁殖方式有哪些种类，不同繁殖方式的种子生产具有哪些特点 论述引起品种混杂退化的原因有哪些， ？论述引起品种混杂退化的原因有哪些，如何防止品种发生混杂退化
？杂交种的生产利用应具有哪些条件 ？杂交制种的技术要求是什么 ？试比较原种重复繁殖法和循环法有何差异
三系七圃法
注意要点
自始至终抓好保纯工作，着重抓好花期隔离和防止机械混杂， 自始至终抓好保纯工作，着重抓好花期隔离和防止机械混杂，反复进行田间去杂去 劣。收获时，保持系和不育系要分收、分运和分场脱粒。 收获时，保持系和不育系要分收、分运和分场脱粒。 在育性、保持力、恢复度稳定的基础上，以典型性、一致性为选择的重点依据。 在育性、保持力、恢复度稳定的基础上，以典型性、一致性为选择的重点依据。 不育系育性鉴定的重点是单株和株行的鉴定， 不育系育性鉴定的重点是单株和株行的鉴定，凡抽样镜检中发现有染色花粉者一律 淘汰。 淘汰。 为了防止过分选择导致遗传基础的狭窄，每年选留的保持系和恢复系均不要少于10 为了防止过分选择导致遗传基础的狭窄，每年选留的保持系和恢复系均不要少于 不育系不要少于20个 不育系原种圃的回交亲本要用保持系的优系混合种子。 个，不育系不要少于 个，不育系原种圃的回交亲本要用保持系的优系混合种子。 数量性状的选择要根据遗传力的高低加以区别对待，遗传力高的性状要严格选择， 数量性状的选择要根据遗传力的高低加以区别对待，遗传力高的性状要严格选择， 遗传力低的性状在选择时不要过分苛求，一般可采用众数选择法或平均数选择法。 遗传力低的性状在选择时不要过分苛求，一般可采用众数选择法或平均数选择法。 上述两类方法中，前一类方法的生产程序比较复杂，技术性强，生产原种数 上述两类方法中，前一类方法的生产程序比较复杂，技术性强，生产原种数 的生产程序比较复杂 量少，但纯度较高，比较可靠；后一类方法生产程序简便 生产原种数量较多 生产程序简便， 原种数量较多， 量少，但纯度较高，比较可靠；后一类方法生产程序简便，生产原种数量较多，但 纯度和可靠性稍差。各地可根据亲本的纯度状况和自身条件灵活选用。 纯度和可靠性稍差。各地可根据亲本的纯度状况和自身条件灵活选用。一般在三系 混杂退化较为严重的情况下 应采用第一种方法 而在三系混杂退化较轻 的情况下， 第一种方法， 混杂退化较轻时可采用 混杂退化较为严重的情况下，应采用第一种方法，而在三系混杂退化较轻时可采用 第二种方法。 第二种方法。
原种和栽培种的制作流程
原种和栽培种的制作流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
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种子生产程序原种＼良种
制种田
原种生产
图２－６ 三系七圃原种生产程序图
三系七圃法
注意要点
自始至终抓好保纯工作，着重抓好花期隔离和防止机械混杂，反复进行田间去杂去 劣。收获时，保持系和不育系要分收、分运和分场脱粒。 在育性、保持力、恢复度稳定的基础上，以典型性、一致性为选择的重点依据。 不育系育性鉴定的重点是单株和株行的鉴定，凡抽样镜检中发现有染色花粉者一律 淘汰。 为了防止过分选择导致遗传基础的狭窄，每年选留的保持系和恢复系均不要少于10 个，不育系不要少于20个，不育系原种圃的回交亲本要用保持系的优系混合种子。 数量性状的选择要根据遗传力的高低加以区别对待，遗传力高的性状要严格选择， 遗传力低的性状在选择时不要过分苛求，一般可采用众数选择法或平均数选择法。 上述两类方法中，前一类方法的生产程序比较复杂，技术性强，生产原种数 量少，但纯度较高，比较可靠；后一类方法生产程序简便，生产原种数量较多，但 纯度和可靠性稍差。各地可根据亲本的纯度状况和自身条件灵活选用。一般在三系 混杂退化较为严重的情况下，应采用第一种方法，而在三系混杂退化较轻时可采用 第二种方法。
混 合 繁 殖
原种圃
混 合 繁 殖 繁殖
株系圃
原种一代繁殖分系来自比较 选单株，株行比较原种二代
繁殖
株行圃
原种三代
选单株，株行比较
生产田
生产用种
图２－４
循环选择繁殖程序
三年三圃制
两年两圃制
(1)单株(穗)选择 (1)单株(穗)选择 (2) 株(穗)行鉴定 (2) 株(穗)行鉴定 (3)株(穗)系比较 (３)混系繁殖 (4)混系繁殖
三、“三系”亲本原种生产
（一）成对回交测交法 （程序图示） １．单株选择 ２．成对回交与测交 ３．后代鉴定 ４．原种生产
原种和栽培种的制作
原种和栽培种常用培养料
4、麦粒培养料 麦粒97%、碳酸钙1.5%、石膏1.5%。 制法：先把小麦洗干净，浸泡24小时后捞起，加适量水于锅中煮熟，不要 煮破种皮。捞起沥干多余的水分，拌入碳酸钙和石膏。装瓶，灭菌。
培养基的制作
一、原种或栽培种培养料配方：麦粒97%、碳酸钙1.5%、石膏1.5% 。 二、实验用具：天平1台、铝锅1个、电炉1个、750mL的料瓶2个、菌 种袋（28cm×14cm）2个、小铲1把、拌料盆1个、棉花塞2粒、牛皮纸 1张、橡皮筋2个、高压灭菌锅（共用）。
德化鹏祥中学
培养基的制作
4、将装好培养料的菌种瓶（袋）用湿布擦干净，即可放入高压锅内灭 菌。在压力达1.5千克/平方厘米、温度126℃下维持2~2.5小时（也可在 常压下灭菌10~12小时）。
原种的制作
一、实验用具：酒精灯1个、火柴1盒、接种钩1把、酒精棉球（装在广 口瓶中）。
原种的制作
二、实验材料：母种斜面试管1支、原种培养料。
原种和栽培种的制作
德化鹏祥中学
原种和栽培种的制作
原种和栽培种的制作
原种和栽培种的制作
原种是将母种在无菌的条件下转接到装有粪草、木屑、棉籽壳或谷粒等 培养料的菌种瓶进行扩大栽培的菌种，又称二级菌种或瓶装菌种。 栽培种是将原种转接到装有相同或相似培养料的菌种瓶或聚丙烯塑料袋 中进行扩大培育、用于生产的菌种，又称三级菌种、生产种或袋装菌种。
750mL的料瓶
拌料盆 菌种袋
培养基的制作
三、实验材料：麦粒、碳酸钙、石膏。 四、方法步骤： 1、称取麦粒970g、碳酸钙15g、石膏15g。 2、将麦粒洗干净，浸泡24小时。麦粒捞起后，加适量水于锅中煮熟，以不煮破种 皮为宜。捞来自麦粒，沥干，拌入碳酸钙和石膏。
原种和栽培种的制作教程
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培养基的制作
4、将装好培养料的菌种瓶（袋）用湿布擦干净，即可放入高压锅内灭 菌。在压力达1.5千克/平方厘米、温度126℃下维持2~2.5小时（也可在 常压下灭菌10~12小时）。
原种的制作
一、实验用具：酒精灯1个、火柴1盒、接种钩1把、酒精棉球（装在广 口瓶中）。
原种的制作
二、实验材料：母种斜面试管1支、原种培养料。
母种
原种
栽培种
原种和栽培种常用培养料
1、木屑麸fū皮(小麦最外层的表皮，小麦被磨面机加工后，变成面粉和 麸皮两部分，麸fū皮就是小麦的外皮，多数当作饲料使用)培养料 木屑78%、麸fū皮20%、蔗糖1%、石膏1%，料水比1：（1.2~1.5）。 制法：先将蔗糖溶于水中，再将木屑、麸fū皮、石膏充分混匀，然后用已 溶化的糖水搅拌均匀。含水量掌握在以手捏紧，指缝有水渗出但不滴下 为准。装瓶，灭菌。
原种和栽培种的制作
德化鹏祥中学
Hale Waihona Puke 原种和栽培种的制作原种和栽培种的制作
原种和栽培种的制作
原种是将母种在无菌的条件下转接到装有粪草、木屑、棉籽壳或谷粒等 培养料的菌种瓶进行扩大栽培的菌种，又称二级菌种或瓶装菌种。 栽培种是将原种转接到装有相同或相似培养料的菌种瓶或聚丙烯塑料袋 中进行扩大培育、用于生产的菌种，又称三级菌种、生产种或袋装菌种。
栽培种接种
一、实验用具：酒精灯1个、火柴1盒、接种匙1把、酒精棉球10粒、木 架1个。
栽培种接种
二、实验材料：原种瓶、栽培种培养料。
栽培种接种
三、实验步骤： 1、将灭菌后的栽培种培养料搬到无菌室，待温度下降至27℃左右时，置 于接种箱灭菌（40分钟）。 2、用75%的酒精球消毒手和母种试管外壁。 3、点燃酒精灯，在酒精灯火焰上灼烧接种匙，冷却。 4、将原种瓶固定在木架上，在火焰上方拔掉原种瓶棉塞和栽培种培养料上 的棉塞（或塑料盖）。
栽培种菌种制作工艺流程
栽培种菌种制作工艺流程栽培种菌种制作工艺流程主要包括以下几个关键步骤：
1. 母种（一级种）制作：
- 选取优良菌株：首先选择遗传稳定性好、生产性能优良的原始菌株。
- 制作培养基：按照特定配方配制适宜菌种生长的琼脂培养基，高温灭菌后冷却至接种温度。
- 接种操作：无菌条件下，从保存的菌种试管或冷冻管中取出少量菌丝体，接入已冷却的固体培养基平板或斜面中，置于恒温培养箱内培养。
2. 原种（二级种）制作：
- 制作培养料：根据菌种特性和栽培要求，配制适合菌丝生长的固体或半固体培养料，同样进行灭菌处理。
- 接种与培养：待培养料冷却后，在无菌环境中，将长势良好的母种接种到原种培养料中，密封后放置于适宜的温度和湿度条件下培养，让菌丝充分生长发育。
3. 栽培种（三级种）制作：
- 大量制备培养料：根据栽培规模，大量配置含水量、营养成分适宜的栽培种培养料，经高温灭菌后冷却备用。
- 接种与扩大培养：将已发育成熟的原种均匀撒播或插入栽培种培养料中，适当压实并做好保湿措施，继续在适宜条件下进行大规模培养，直至菌丝充满培养料，达到可以用于栽培的标准。
4. 质量检测与保存：
- 在整个制作过程中，要定期检查菌丝生长状况，确保无杂菌污染。
- 栽培种制作完成后，进行质量检测，确认菌种活力、纯度达标后方可用于大面积栽培。
- 对于暂时不用的菌种，应按照相应菌种的保存条件妥善保存，以保持其活性和遗传稳定性。
以上是通用的菌种制作流程，不同种类的食用菌或药用菌可能在培养基配方、培养条件以及接种方式等方面存在一定的差异。
食用菌栽培技术理论教学大纲
《食用菌栽培技术》教学大纲一、课程简介本课程主要内容包括食用菌生物学基础知识和食用菌菌种生产技术，多种食用菌的栽培技术，食用菌的保鲜贮藏与加工、食用菌病虫害的防治等。
二、教学目的和教学方法（一）教学目的：《食用菌栽培》是一门实践性很强的课程，要求在教学中密切联系生产实际，强化实践教学，使学生牢固掌握食用菌的基础理论及生产技术，并能利用其原理对生产技术进行实践及革新。
在教学中利用丰富的教学手段及开展生动活泼的教学活动，培养学生严谨的科学态度，创新精神与分析问题、解决问题的能力，使其具备一定高等专业人才素质及带领农民劳动致富的能力。
（二）教学方法：本课程采用课堂教学形式，利用多媒体教学手段进行课堂讲授，使课堂教授生动反映食用菌的生物学和生产特征。
另外设置60学时实验课，加强学员的感性认识和操作能力。
成绩评定采用考试和考查相结合的方法，百分制计分。
试卷成绩占总成绩的80%；考查根据课堂或实验等平时表现计分，其成绩占总成绩的20%。
三、理论与实验教学学时分配（一）理论教学学时分配（120学时）四、选用教材和主要教学参考书[1] 吕作舟．食用菌栽培学[M]．北京：高等教育出版社，2006[2] 张松．食用菌学[M]．广州：华南理工大学出版社，2000[3] 陈士瑜．食用菌生产大全[M]．北京：农业出版社，1988[4] 李阜棣．农业微生物学实验技术[M]．北京：中国农业出版社，1996[5] 郑其春．食用菌主要病虫害及其防治[M]．北京：中国农业出版社，1995[6] 张金霞．新编食用菌生产技术手册[M]．北京：中国农业出版社，2000五、理论教学内容（一）第一章、绪论主要讲授内容：1、概述(1) 食用菌的概念(2) 是功能性食品2、食用菌产业的前景(1) 原料广泛（2）生效快、效益高（3）市场广阔（4）菌糠再利用价值高3、生产概况与发展趋势(1) 世界生产概况（2）我国生产概况（3）发展趋势教学时数：2学时重点与难点：重点：食用菌的作用及其产业的特点难点：产业的发展趋势思考题（1）你当地的食用菌生产现状如何？有哪些有利及不利的发展条件？（2）试分析我国食用菌生产的有利因素及限制因素有哪些？（二）第二章、食用菌的形态与分类主要讲授内容：1、形态结构与生活史(1)形态结构(2)生活史2、食用菌的分类(1)食用菌在真核生物中的分类位置(2)主要种类3、毒菌教学时数：4学时重点与难点：重点：菌丝体、菌丝的组织体、子实体难点：一级菌丝与二级菌丝、二级菌丝与子实体、担子及担孢子间的异同点思考题（1）在自然条件下，你发现易在何时何地生长野生食用菌，采完后还能再长出吗？为什么？（2）长时间在菇棚内操作，容易产生呼吸道不舒服的感觉，为什么？应怎样避免？（三）第三章、食用菌的生理生态主要讲授内容：1、食用菌的营养（1）营养物质（2）食用菌的生理类型2、食用菌的理化环境（1）温度（2）水分和湿度（3）酸碱度（4）空气（5）光照3、食用菌的生物环境（1）食用菌与微生物（2）食用菌与动物（3）食用菌与植物教学时数：4学时重点与难点：重点：营养条件及环境条件难点：生理类型思考题（1）对温度、空气湿度、空气、光照的需求有何规律？（2）香菇、木耳等菌类为何不用粪草培养料栽培？（3）利用自然条件，栽培食用菌最好是什么季节？（四）第四章、消毒灭菌主要讲授内容：1、物理消毒灭菌（1）热力灭菌（2）紫外线灭菌2、化学消毒灭菌（1）气雾熏蒸法（2）液体消毒灭菌法教学时数： 10学时重点与难点：重点：高压蒸汽灭菌难点：冷空气的排除思考题（1）为何湿热比干热效果好、时间短?（2）高压蒸汽灭菌成败关键是什么?（3）紫外线灭菌应注意哪些问题?（4）何高浓度乙醇杀菌力低?（5）现有酒精灯、紫外线、高压锅、烘箱、甲醛、接种箱、接种工具、培养皿、水，应怎样对号使用?（五）第五章、食用菌菌种生产主要讲授内容：1、菌种概述（1）菌种概念（2）菌种类型（3）菌种生产程序2、菌种生产主要设备（1）配料设备（2）灭菌设备（3）接种设备（4）菌种培养设备（5）母种保藏设备（6）菌种厂的布局3、菌种培养基（1）概述（2）各级菌种的培养基（3）培养基的灭菌4、菌种的接种（1）无菌操作（2）母种的接种（3）原种、栽培种的接种5、菌种培养及质量鉴定（1）菌种培养（2）菌种质量的鉴定6、菌种保藏与复壮（1）菌种保藏（2）菌种复壮教学时数：30学时重点与难点：重点：菌种分离；母种、原种、栽培种的培育。
制原种和栽培种的这些操作步骤,了解一下!
制原种和栽培种的这些操作步骤，了解一下！今天小编和大家一起来了解一下制原种和栽培种都有哪些操作步骤？一起来吧。
（1）首先将物资准备好按照配方称取各种主、辅料。
（2）配制方法木屑麦麸培养基，棉籽壳培养基以及稻草培养基的配制方法基本相似。
在我们配置的时候要将称好的主料倒入拌料机的桶内，接着在将称取的辅料倒入拌料机，再加上石膏粉。
到料的时候应该分散倒入，避免倒在一个方向。
接着再将无机盐类和糖溶入一定量的水，倒入料的四周。
搅拌均匀后就可以装瓶子或者袋子里了。
（3）装瓶和袋的方法要求装有原培养基的容器多是无色的玻璃瓶为主，再培养基中有的用无色玻璃瓶，但多数用的是塑料袋。
首先看看装瓶的操作：培养基配置好将料铲成堆。
在堆料的四周摆放瓶子。
用我们准备好的铁铲向周围瓶子里填满，接着在用手逐瓶或者特制的铁质“L”形铁钩，将培养基向下轻轻的压实。
一边压一边填料。
并将瓶子转动。
这样可以使填料更加均匀。
装料的高度以其瓶肩为最好。
培养基的表面要平整，四周也要紧贴瓶壁，上紧下松，松紧适度，过紧会通气不良，菌丝生长慢，过松生长快，但稀疏无力。
培养基装完之后，用一根直径为1.5cm粗的锥形木棒，在培养基的正中间打个洞。
一直打到瓶底。
这样可以方便接种后菌种向四周蔓延，对于加速菌丝生长有很好的帮助。
打完洞后可以用清水将瓶口内外洗干净。
稍微晾干。
然后再用一层十二厘米乘十二厘米的正方形的聚丙烯塑料薄膜和外面加一层十二厘米乘十二厘米正方形牛皮纸或者报纸盖住瓶口，用橡皮筋扎住平口等待灭菌。
接着我们来说装袋的操作：制菌种中用的塑料袋，多数都会选择17cm乘以33cm乘以0.05cm的聚丙烯塑料折角袋。
有时候也会选用筒料，裁剪成需要的大小。
折角袋装培养基可以选择用手装料或者装袋机装料这两种方法，手工装料的时候我们要将折角拉好。
边装边用手压料是培养基紧贴料袋，表面平整，上紧下松，松紧适度，底部平稳。
培养基装完之后。
在用锥形木棒在培养基中间轻轻的打个洞。
食用菌栽培学实验---食用菌原种和栽培种培养料的制作实验
食用菌原种和栽培种培养料的制作实验一、目的要求掌握常见食用菌原种和栽培种培养基的制作、接种和培养技术。
二、材料与用具(1)材料:优质小麦、棉籽壳、木屑、稻草、玉米面、葡萄糖或蔗糖、右膏粉、碳酸钙等。
(2)用具:电户、大铝锅、大盆、菌种瓶、12cm x 12cm x0.02cm高压聚丙烯塑料膜、线绳、接种箱、超净工作台、酒精灯等。
三、内容与方法(一)培养基的制作1.麦粒原种培养基制作谷粒(如麦粒，玉米粒)南种培养基制作难度较大，但优点很多。
谷粒营养丰富，大小适中，是绝大多数种类食用菌原种制作的最佳原料。
现以小麦原种培养基制作为例，介绍如下。
(1)麦粒培养基配方:常用麦粒培养基配方为小麦99%、石膏粉1%。
(2)制作方法①泡小麦:冬天浸泡24 ~ 48h,隔夜换水;夏天浸泡10~12h,隔友换水，可加人1%石灰浸泡。
泡好后，小麦粒饱胀，用清水漂洗干净，除去杂质。
②煮小麦:煮至充分吸水，无白心，切忌煮开花。
③木腐生菌类一般添加一定量木屑(10%左右)效果更好:木屑可用煮小麦的水拌料，料:水以1:0.5的比例拌和，或酌情处理;可添加木屑干重0. 5%的蔗糖、0. 5%的尿素、1% 的石灰。
④装瓶:将小麦粒捞出后，趁热滩平，使表面多余水分蒸发，然后加人石膏粉或其他辅料拌匀，再将料装至瓶肩处即可。
⑤封瓶口:用两层完整的塑料膜封瓶口并套好皮筋。
⑥灭菌:麦粒菌种一般采用高压灭菌方式。
高压灭黄于126℃左右维持2h即可。
其排冷气，开锅方法同斜面培养基制作。
2.其他原料制作原种和栽培种培养基(1)粪草培养基(适于制作双孢磨菇菌种)配方:粪草(粪:草=6:4, 堆积发酵15 -20d) 90g,，米桃或麸皮8g，碳酸钙1kg，糖1Kg，水适量。
制作方法:先将粪草堆积发酵，发酵时间18d左右，其间加人米糠等辅料，翻准2-3次，晒干，切碎，装瓶，灭菌。
灭菌方法同麦粒培养基。
(2)木屑-米糠培养基(适宜各种木腐生食用菌)配方:阔叶树木屑70%~ 80%，米糠或麸皮20%~28%，碳酸钙1%，蔗糖1%，石膏1%，水调至适量。
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实验八原种与栽培种的制作
一、实验目的
学会原种与栽培种培养基的配制方法，掌握原种与栽培种的接种技术，了解食用菌原种与栽培种制作的工艺流程和制作的基本技能。
二、实验原理
原种（二级种）系指由母种移植于固体或液体培养基上繁殖的菌丝体。
栽培种（三级种）系指由原种移植到固体或液体培养基上扩大繁殖的菌丝体。
三、实验所需
1. 菌种：母种菌种（杏鲍菇等）
2. 材料试剂：棉籽壳、玉米芯、玉米粉、石膏粉、蔗糖、75%酒精等。
3. 仪器用具：超净工作台、高压灭菌锅、台秤、铲子、聚丙烯栽培袋、口环、封口膜、高压橡皮圈、酒精棉瓶、长柄镊子、接种具（钩、锄）、酒精灯、火柴、垫架、标签、笔等。
四、实验内容
（1）原种与栽培种培养基配制
工艺流程：培养基配料装袋（或装瓶）高压灭菌冷却接种
（2）掌握原种与栽培种的接种操作技术
超净工作台消毒器械消毒无菌接种菌丝培养
（3）培养基配方（用配方1）：
配方1：棉籽壳40%，玉米芯50%，玉米粉8%，石膏1%，蔗糖1%。
（平菇，且通用）配方2：棉子壳40%，杂木屑40%，麦麸或米糠18%，石膏1%，过磷酸钙1%。
（姬菇）
配方3：杂木屑39％，棉籽壳34％，麦麸或米糠22％，玉米粉3％，石膏1％，过磷酸钙1％。
（猪肚菇）
（4）原种、栽培种制作
1. 拌料先根据要做原种的数量，算出各种原料的用量，然后称量、混合，先拌干料，后边加水边搅拌，边测试含水量。
2. 含水量测定拌好料后，用手抓一把培养料，捏在手中紧握，手指缝中有水印但以水不往下滴为适，此时含水量为62%~64%。
3. 装袋将拌好的培养料装入原种瓶或塑料袋中，边装边压实（但不得过紧），一直装到瓶（袋）肩处为宜。
4. 擦瓶将瓶（袋）口和瓶（袋）外粘附培养料擦掉，以免接种后感染杂菌。
5. 封口用封口膜包住袋口或用棉塞塞住瓶口，用高压橡皮圈或线绳将袋口或瓶口扎好，准备灭菌。
6. 灭菌灭菌方法同母种的灭菌方法，灭菌条件：0.14Mpa，123℃，至少2-3小时。
7. 接种接种前工作与母种转接相同。
接种时，挑取母种菌培养基一小块，置于原种或栽培种培养基中央孔，随即封口。
8. 菌丝培养接种后的原种，置于25℃的培养室培养。
3~5天后菌丝即可恢复生长，5~7天菌丝开始伸入培养基内。
当菌丝长满瓶（袋）后，即可直接分移栽培种，栽培种菌丝长满面瓶（袋）后，需要养菌1~2周，以增加菌丝量及增强菌丝活力后，再用于生产，还可直接出菇。
五、实验总结。