单链抗体的构建及其在医学上的应用
抗体制备技术的发展和医学应用
抗体制备技术的发展及其医学应用抗体是在对抗原刺激的免疫应答中，B淋巴细胞产生的一类糖蛋白。
它是能与相应抗原特异的结合、产生各种免疫效应（生理效应）的球蛋白。
国际卫生组织将具有抗体活性及化学结构与抗体相似的一类蛋白统一命名为免疫球蛋白，它与抗体都是指同一类蛋白质。
抗体的2条重链和2条轻链根据氨基酸序列变化程度分为V区和C区，其抗原结合特异性主要由V区中高度变异的超变区决定，3 个超变区共同形成1个抗原决定簇互补的表面，故又称为互补决定区( comp lementarity determining region，CDR)。
常规的抗体制备是通过动物免疫并采集抗血清的方法产生的，因而抗血清通常含有针对其他无关抗原的抗体和血清中其他蛋白质成分。
一般的抗原分子大多含有多个不同的抗原决定簇，所以常规抗体也是针对多个不同抗原决定簇抗体的混合物。
即使是针对同一抗原决定簇的常规血清抗体，仍是由不同B细胞克隆产生的异质的抗体组成。
因而，常规血清抗体又称多克隆抗体（polyclonal antibody，PcAb），简称多抗。
多克隆抗体是由多克隆B细胞群产生的、针对多种抗原决定簇的混合抗体。
因为天然抗原是由多种抗原分子组成的，每种抗原分子又含有许多抗原决定簇，每一种抗原决定簇可激活相应的B细胞克隆，进而分化、成熟并合成相应的抗体。
由于常规抗体的多克隆性质，加之不同批次的抗体制剂质量差异很大，使它在免疫化学试验等使用中带来许多麻烦。
因此，制备针对预定抗原的特异性均质的且能保证无限量供应的抗体是免疫化学家长期梦寐以求的目标。
随着杂交瘤技术的诞生，这一目标得以实现。
1 抗体的发展抗体的研究过程经历了免疫血清学研究、单克隆抗体研究和基因工程抗体研究3个不同阶段。
1.1 免疫血清学研究阶段免疫动物产生的抗体是多种抗体的混合物，所以早期制备的抗体是多克隆抗体. 多克隆抗体是人类有目的地利用抗体的第1步，其在生物医学等方面的应用已有上百年的发展历史. 但多克隆抗体具有不均一性，特异性差且动物抗体注入人体会产生严重的过敏反应等特性，限制了其在疾病诊断和治疗中的应用。
抗表皮生长因子受体的单链抗体ER(Fv)的构建及其抗肿瘤活性
抗表皮生长因子受体的单链抗体 ER（ Fv） 的构建及其抗肿瘤活性研究
盛唯瑾，尚伯杨，苗庆芳，甄永苏* （ 中国医学科学院医药生物技术研究所，北京 100050）
摘要： 目的 利用大肠杆菌表达抗表皮生长因子受体（ EGFR） 的单链抗体并对其抗肿瘤活性进行研究。方法 构建含有抗
43. 9% 、46. 7% 和 54. 8% ，与对照组相比存在显著差异。结论 成功地表达了抗 EGFR 单链抗体 ER（ Fv） ，其对肿瘤细胞具有
良好的亲和力和一定的生长抑制作用，为研制靶向 EGFR 的抗体药物提供基础。
关键词： 表皮生长因子受体； 单链抗体； 抗肿瘤
中图分类号： R293
文献标志码： A
Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College，Beijing 100050，China）
ABSTRACT： OBJECTIVE To express single-chain Fv （ scFv） antibody against epidermal growth factor receptor （ EGFR） with Escherichia coli，and study its antitumor activity. METHODS Recombinant plasmids containing scFv gene fragment were constructed and transformed into competent E. coli BL21（ DE3） starTM. The scFv antibody，ER（ Fv） ，was produced after IPTG induction，and then purified with Ni ion affinity chromatography. ELISA was used for measuring the binding efficiency of ER（ Fv） to EGFR，and flow cytometry was applied to assay the binding activity between ER（ Fv-LDP） and tumor cells. The cytotoxicity of ER（ Fv） against tumor cells in vitro was assessed by MTT assay，and the tumor inhibitory effect in vivo was observed in nude mice bearing human epidermoid carcinoma A431 xenograft. RESULTS ER（ Fv） with His-tag was produced in the form of inclusion bodies，and was purified with Ni ion affinity chromatography. Finally 10 mg of purified protein were obtained from 1 L of culture medium. ER（ Fv） possessed powerful
抗体的研制及其在生物医学中的应用11208120杨文清
抗体的研制及其在生物医学中的应用11208120 杨文清抗体药物是以细胞工程技术和基因工程技术为主体的抗体工程技术制备的药物，具有特异性高、性质均一、可针对特定靶点定向制备等优点，在各种疾病治疗，特别是肿瘤治疗领域的应用前景备受关注。
当前，抗体药物的研究与开发已成为生物技术药物领域研究的热点，居近年来所有医药生物技术产品之首。
一、背景历史：1890年Behring和北里柴三郎发现白喉抗毒素,建立了血清疗法,开创了抗体制药。
1937年Tiselius用电泳法将血清蛋白分离为白蛋白、α、β、γ球蛋白，并证明抗体活性主要存在于γ球蛋白组分。
20世纪60年代发现多发性骨髓瘤是浆细胞癌变形成的恶性增殖性疾病。
病人血清中出现同抗体结构类似的球蛋白，统称为免疫球蛋白。
1975年Kohler和Milstein首先利用B淋巴细胞杂交瘤技术制备出单克隆抗体。
单克隆抗体的研究一直是生物医药领域的重要研究内容。
白20世纪90年代中期以来，单克隆抗体和多克隆抗体的基础研究论文产出有所下降，而人源化抗体的研究则不断得到重视(参见图1)。
这说明，单克隆抗体相关生物医学理论的基础研究已经相对成熟，单克隆抗体应用研究则不断发展。
在这一研究发展历程中，人源化抗体和重组多克隆抗体技术的发展促进了抗体药物研究的深入(参见图2)。
其中，人源化抗体是在鼠源单抗应糖体展示技术、酵母展示技术、转基因鼠技术等的发展，使人源性基因工程抗体的获得不再是难题．这又激发了单抗药物的研究热情。
1994年．美国批准第二个抗体药物上市。
之后，抗体药物不断上市。
2006年利用能够产生人类抗体的转基因小鼠XenoMouse技术首个完全人源化单克隆抗体药物Panitumumab上市，标志着人源化抗体技术的发展达到了新的水平。
近年来，随着Symphoge公司的Symplex 和Sympress 等技术的发展．以及由此而生产、用于治疗原发性血小板减少性紫癜(ITP)和新生儿溶血症(HDN)的多克隆抗体药物Sym001(anti—RhD)进入II期临床试验重组多克隆抗体药物研究也呈现出良好的发展态势。
单链抗体在肿瘤治疗中的应用
表 达 产 物 Ｓ Ｆ ： 括 抗 ｐ ｌ 癌 胚 抗 原 （ａｃ ｏ ｍ— ｃｖ 包 ２、 ｃｒ ｅ Ｅ ｎ ｂ ｙ ｎｅａ ｔ ｅ ， Ａ） ｐ ３的 Ｓ Ｆ ； ３ 针 对 细 胞 ｒｏ ｉ ｎｉ ｎ ＣＥ 、 ５ ｇ ｃｖ （）
因子 或受 体 的 Ｓ Ｆ ， 抗 表皮 生 长 因子 （ｐ ｅｍａ ｅｖ如 ｅｉ ｒ ｌ ｄ
链 和重链 可变 区基 因 （ Ｖ ） 过一段 编码 连接肽 Ｖ 通
用 ’ “ 。本 文 对 Ｓ Ｆ ｃ ｖ的 抗 肿 瘤 研 究 作 一 综 述 。
１ ＳＦ ｃ ｖ抗 肿 瘤 研 究 现 状
基 因拼接后 表 达形 成 的 重组 蛋 白 ， 具 有抗 原 结合 是
能 力 的最 小 抗体 片 段 。 由 于 ＳＦ ｃ ｖ分 子 量 小 ， 为 仅
维普资讯
实用 肿 瘤杂 志 ２ ０ ０ ２年
第 １ ７卷
第 ３ 期
・
２ ・ １ ３
单 链 抗 体 在 肿 瘤 治 疗 中 的 应 用
毕 向军 综述 ， 杨冬 华 陈 曼湖 。 ， 审校
（＿ 山医科 大 学第 一 附属 医 院 消 化 科 ， 东 广州 ５０ ８ ；． 南 大 学 医 学 院 第 一附 属 医 院 消 化科 ， 东 广 州 ５０ ３ ） １中 广 １０ ９ ２ 暨 广 １６ ０
single chain antibody fragment(scfv)名词解释
single chain antibody fragment(scfv)名词解释单链抗体（single chain antibody fragment，scFv），是一种重组蛋白，由免疫球蛋白的重链可变区（VH）和轻链可变区（VL）通过一个短的连接肽（通常为15-23个氨基酸残基）连接而成。
scFv具有完整的抗原结合活性，但由于其分子量小、结构简单、稳定性好等特点，因此在生物技术领域具有广泛的应用前景。
scFv的结构特点使其具有以下优势：1. 分子量小：scFv的分子量仅为传统抗体的1/10左右，这使得其在生物体内更容易穿透细胞膜，进入细胞内发挥作用。
此外，小分子量的scFv还有利于提高药物的溶解度和生物利用度。
2. 结构简单：scFv仅由VH和VL两个结构域组成，避免了传统抗体中其他结构域可能带来的不良影响。
同时，scFv的结构相对简单，有利于降低生产成本。
3. 稳定性好：scFv的稳定性主要取决于VH和VL之间的相互作用。
由于VH和VL之间的接触面积较大，且连接肽的长度较短，因此scFv的稳定性通常优于传统抗体。
此外，scFv还可以通过突变技术对其结构进行优化，进一步提高其稳定性。
4. 易于表达和纯化：scFv可以通过原核或真核表达系统进行表达，且表达水平较高。
此外，scFv具有较高的溶解性，可以通过亲和层析等方法进行高效纯化。
5. 灵活性高：scFv可以与其他蛋白质或多肽序列进行融合，形成具有特定功能的融合蛋白。
例如，将scFv与毒素、酶、荧光蛋白等融合，可以实现靶向治疗、生物成像等功能。
scFv在生物技术领域的应用主要包括以下几个方面：1. 诊断试剂：scFv可以作为抗原检测的特异性识别元件，用于制备各种诊断试剂，如ELISA试剂盒、免疫组化染色试剂等。
2. 靶向治疗：scFv可以与药物、毒素、放射性同位素等结合，形成具有靶向杀伤作用的融合蛋白，用于肿瘤、病毒感染等疾病的治疗。
单克隆抗体的制备及应用
单克隆抗体的制备及应用单克隆抗体是由淋巴细胞杂交瘤产生的、只针对复合抗原分子上某一单个抗原决定簇。
单克隆抗体技术(monoclonal antibody technique)：一种免疫学技术，将产生抗体的单个B淋巴细胞同骨髓肿瘤细胞杂交，获得既能产生抗体，又能无限增殖的杂种细胞，并以此生产抗体。
是仅由一种类型的细胞制造出来的抗体，对应于多克隆抗体、多株抗体——由多种类型的细胞制造出来的一种抗体。
1 单克隆抗体的优点与局限性：1.1 单克隆抗体的优点：(1)杂交瘤可以在体外“永久〞地存活并传代，只要不发生细胞株的基因突变，就可以不断地生产高特异性、高均一性的抗体。
(2)可以用相对不纯的抗原，获得大量高度特异的、均一的抗体。
(3)由于可能得到“无限量〞的均一性抗体，所以适用于以标记抗体为特点的免疫学分析方法，如IRMA和ELISA等。
(4)由于单克隆抗体的高特异性和单一生物学功能，可用于体内的放射免疫显像和免疫导向治疗。
总体来说，即：高特异性、高纯度、重复性好、敏感性强、本钱低和可大量生产等。
1.2 单克隆抗体的局限性：(1)单克隆抗体固有的亲和性和局限的生物活性限制了它的应用范围。
由于单克隆抗体不能进行沉淀和凝集反响，所以很多检测方法不能用单克隆抗体完成。
(2)单克隆抗体的反响强度不如多克隆抗体。
(3)制备技术复杂，而且费时费工，所以单克隆抗体的价格也较高。
2 单克隆抗体的制备：单克隆抗体的制备原理：应用细胞杂交技术使骨髓瘤细胞与免疫的淋巴细胞二者合二为一，得到杂种的骨髓瘤细胞。
这种杂种细胞继承两种亲代细胞的特性，它既具有B淋巴细胞合成专一抗体的特性，也有骨髓瘤细胞能在体外培养增殖永存的特性，用这种来源于单个融合细胞培养增殖的细胞群，可制备抗一种抗原决定簇的特异单克隆抗体。
单克隆抗体的制备过程：抗原准备、动物的选择与免疫、细胞融合、选择杂交瘤细胞及抗体检测、杂交瘤的克隆化、杂交瘤细胞的冻存与复苏、单克隆抗体的纯化等步骤。
RP215单链抗体的构建、表达及其生物活性鉴定的开题报告
RP215单链抗体的构建、表达及其生物活性鉴定的
开题报告
一、研究背景与意义
单链抗体是由单个变异段连接桥接的不含Fc片段的适体，具有小分子抗原结合特异性高、生物稳定性高等优点，在抗肿瘤、抗病毒、临床
诊断等领域得到广泛应用。
RP215是一种针对乳腺癌组织中酸性糖蛋白（TAG-72）上的多克隆抗体，其作用机制尚不清楚，但已证实其在肿瘤
治疗中的应用前景广阔。
在RP215多克隆抗体的基础上，研究人员利用
软件模拟、分子克隆等技术获得了相应的单链抗体RP215scFv，但其构建、表达及其生物活性鉴定尚未进行深入研究。
基于以上情况，本研究旨在构建RP215单链抗体，并对其表达和生
物活性进行鉴定，为其在乳腺癌治疗上的应用提供科学依据和实验基础。
二、研究内容和步骤
1. RP215单链抗体的构建
通过软件模拟、分子克隆等技术，构建出RP215单链抗体的DNA序列，并插入到适宜的表达载体中。
2. RP215单链抗体的表达
将构建好的RP215单链抗体载体转染至细胞，并进行培养，收集细
胞上清液并进行纯化、浓缩等步骤，获得纯净的RP215单链抗体。
3. RP215单链抗体的生物活性鉴定
对纯净的RP215单链抗体进行活性鉴定，包括结合ELISA、Western blot、免疫荧光等方法，确定其在抗肿瘤治疗中的生物学特性和效能。
三、研究预期结果
本研究预期获得RP215单链抗体的构建、表达以及其在抗肿瘤治疗中的生物活性鉴定结果，为其在临床应用中提供实验基础和科学依据，对开发针对乳腺癌的新型治疗手段具有重要的理论和实践意义。
单链抗体名词解释
单链抗体名词解释
单链抗体是由单个多肽链构成的抗体分子，是利用基因工程技术制备的一种新型生物工具。
它具备传统多肽链抗体的结构和功能，但具有更小的分子量、更高的渗透性和更便于大规模生产、储存和运输的优势。
在工程单链抗体上，对多肽链抗体进行了精细的分解。
将其中的两个抗体链（即轻链和重链）合并成一个完整的多肽链，形成一个只有一个变异区域的结构简单的分子，从而克服了多肽链抗体作为治疗药物的缺陷，同时还可以引入不同的基因的多种功能模块，增强了多功能单链抗体，并且使其适应不同的 environment.
与多肽链抗体相比，单链抗体具有很多的特点。
单链抗体具有较高的亲和力和特异性。
相对于多肽链抗体而言，单链抗体的小分子体积、低免疫原性和更高的化学稳定性，使其在治疗和诊断方面具有崭新的应用前景。
因此，单链抗体被广泛应用于药物开发、临床治疗和生物诊断等方面。
在药物领域，单链抗体可以用于治疗癌症、自身免疫性疾病、炎症和感染等疾病。
它们还可以被用作特定生物分子的敏感探针或治疗靶点。
在基础研究中，单链抗体可以用于分离和纯化目标蛋白或细胞类型，并发挥重要的研究作用。
随着基因工程技术的不断发展，单链抗体的生产和用途将不断得到改善和拓展。
单链抗体作为一种具有巨大潜力的生物制品，将会在人类健康领域发挥更大的作用。
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#综述#单链抗体的构建及其在医学上的应用*汪希雅综述,余平**审校(中南大学湘雅医学院免疫学系,湖南长沙410078)=摘要>基因工程抗体在疾病诊断、治疗及医学研究等方面都有着广泛的应用。
近几年来,国内外学者对抗体的研究已迈入基因工程抗体阶段,其中单链抗体(single chain F v,scFv)因其具有分子质量小、穿透力强、体内循环半衰期短及排除了Fc段所致的免疫复合物反应等优点,成为基因工程抗体探索领域中的研究热点。
尤其是将scF v应用于医学的研究已取得突破性进展,现就scF v的构建及其在医学上的应用综述如下。
=关键词>单链抗体;构建;应用;综述=中图分类号>R392.11=文献标识码>A=文章编号>167325234(2009)1020790203[J our nal of P a thogen B iology.2009Oct;4(10):790-792.]Construction of single2chain Fv antibody and its application in the medicineWANG Xi2ya,YU Ping(Dep ar tment of I mmunology,Xiangya Med ica l College,Centra l Souther n University, Cha ngsha410078,China)=Abstract>T he genetic engineer ing antibody is widely used in disease diagnosis,tr eat ment and medical resea rch.In re2 cent years,many scholars have taken in the genetic engineering antibody research.And because the single2cha in F v fr ag2 ment(ScFv)has small molecular weight,str ong penetr ating,short half2life in vivo circulation and avoided t he immunity compound response by F c section,it become to a research focus in the genetic engineering antibody.Especially,the medi2 cine applies research of ScF v have obtained br eakthr ough pr ogress.The r eview is given of ScF v constr uction and it s appli2 cation in t he medicine.=Key wor ds>Single2chain F v antibody(scF v);construction;applicat ion;r eview在现代免疫学技术迅速发展的今天,抗体尤其是单链抗体技术所具有的优点,使其被广泛应用于医疗和生物技术领域[1,2]。
抗体的发展大致可分为3个阶段。
第一阶段:以1890年Behr ing和Kit asato发现白喉抗毒素为代表,其特点是利用抗原免疫动物来获取多克隆抗体;第二阶段:以1975年Kohler 和Milstein创建杂交瘤技术制备单克隆抗体(McAb)为代表, McAb具有性质纯、效价高、特异性强、少或无血清交叉反应等特点,已被广泛应用于医学各个领域。
由于人2人杂交瘤技术尚无重大突破,目前用于临床的多均为鼠源性的McAb,后者对人是异物抗原,可能引起人抗鼠抗体反应(H AM A)[3]。
McAb是特异性很强的药物,严重局限了其在人体内的应用[4];第三阶段:以1994年Winter以基因工程方法制备抗体为代表。
这是抗体研究领域出现的又一次技术革命,在此基础上研制出的基因工程抗体保留了天然抗体的特异性和主要生物学活性,去除或减少了无关结构,并赋予抗体分子以新的生物学活性,因而较天然抗体具有更广泛的应用前景。
目前,单链抗体是基因工程抗体研究热点。
1单链抗体的结构与特点1.1单链抗体的结构单链抗体(scF v)是一种新型重组蛋白,它属于基因工程抗体中的一种小分子抗体,仅为完整抗体的六分之一[5],相对分子质量约为27ku[6]。
由轻链可变区(VL)和重链可变区(VH)经14~15个氨基酸的弹性短肽(Linker)首尾连接而成。
由于传统的单克隆抗体存在某些缺陷,如鼠源性单克隆抗体与NK等免疫细胞表面Fc段受体亲和力弱,产生的抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用(ADCC)较弱,且与人补体成分结合能力低,对靶细胞的杀伤能力较弱;鼠源性单克隆抗体在人血循环中的半衰期短,发挥的作用时间亦较短;单克隆抗体还难透过致密组织屏障,使其在靶组织的药物浓度常常低于有效浓度而难发挥作用等。
相反,scFv具有分子质量小、穿透力强的特点,在疾病的临床诊断和治疗方面有着广泛的应用前景。
1.2scFv的特点scFv作为基因工程中抗体中的小分子抗体,有着如下的优点:1)scFv只含有抗体的V区且保持较完整的抗原结合位点;2)scF v缺乏F c段的特性,使之不与非靶细胞结合,且具低免疫原性,有利于作为药物的导向载体而应用于临床靶向治疗;3)scF v分子质量较小,容易穿透致密组织屏障而到达靶组织;4)scF v体内血循环半衰期短,易从血循环中排除[5];5)相对分子质量较小,scFv无需糖基化修饰即可形成有功能的抗体分子,因而可在原核表达系统中广泛表达且易获得[7]。
但scFv也存在缺点:1)因其只能与抗原结合,故不能激活补体而介导相关的细胞免疫;2)scFv仅有一个抗原结合位点,其亲和力、稳定性较单克隆抗体要低,且筛选受到局限,高亲和力、高特异性scFv的筛选较困难;3)scF v结构中所使用的弹性#790 #中国病原生物学杂志J our nal of P a thogen Biology2009年10月第4卷第10期October2009,Vol.4,N o.10***=基金项目>湖南省大学生创新性实验计划资助项目(No.081053373)。
=通讯作者>E2m ail:yu ping1953@=作者简介>汪希雅(1988-),女(汉族),湖南长沙人,主要从事免疫学研究。
E2m ail:wangxiya@短肽可影响抗体构象,其特异性有所改变;4)当scFv表达量超过处理能力时,它会以包含体形式表达,这时则需建立更高效的可溶性表达系统;5)scFv偶联物易被肝肾等组织吸收,造成肝肾功能的损伤。
目前所采取的解决办法是对scFv偶联物的结合界面进行修饰,如改变等电点、对其进行糖基化修饰等[8]。
随着现代免疫学技术的发展,scFv的研制将日趋完善。
2scFv的构建2.1scFv的构建方式首先从杂交瘤细胞、免疫小鼠脾细胞或直接从感染或接触某种抗原的人外周血淋巴细胞中提取抗体轻链、重链可变区mRNA,用逆转录2聚合酶链反应技术将mRNA反转录成cDNA并进行克隆扩增,人工合成一条Lin2 ker,将轻链的C端与重链的N端或重链的C端与轻链的N端连接,这两种连接方式都不影响scF v的特异性和亲和力.然后,将形成的scF v基因构建到合适的表达系统中并进行克隆表达。
2.2scFv库的构建方法scF v可在大肠埃希菌体内、动植物细胞内以及噬菌体内[1]表达,最常用的表达方法是噬菌体展示技术。
噬菌体展示技术,是将scFv可变区基因与单链丝状噬菌体衣壳蛋白基因连接,以融合蛋白的形式表达于噬菌体表面,通过简便的吸附2洗脱2富集的筛选过程,从而分离获得特异性抗体可变区基因的技术[9]。
噬菌体展示技术较经典的杂交瘤细胞系统相比,可直接得到人源抗体,无须免疫系统和免疫步骤,且能在体外对抗体的亲和力和特异性进行改造,因而被广泛采用。
噬菌体抗体库的质量评估决定于抗体库的库容量和抗体库的多样性两个方面。
传统的三片段SOE P CR法组装VH、VL和Linker效率较低,难以保证抗体库的多样性,己经成为高容量抗体库构建的技术瓶颈。
目前,通过采用两片段SOE PCR法可提高组装效率,并能消除库中抗体基因的偏性,增加抗体库的多样性。
进一步提高抗体库容量的方法逐渐得以发展[10,11]。
2.3影响scFv构建的因素scF v的构建主要取决于Linker 的选择、Linker的长度和序列对scF v的表达水平、稳定性和亲和性等有重要作用,而将P CR产物克隆到噬菌体展示载体则是抗体库构建的关键步骤[12],设计理想的Linker序列可表达出较高的活性产物。
理论上,理想的Linker需保证VH和VL在表达系统中等摩尔产生,不干扰VH和VL的自由折叠,使抗原结合位点处于适当的构型,不引起分子动力学的改变,尽可能减少蛋白酶的攻击及防止scFv的聚集等条件。
目前,应用最广泛的Linker是具有刚性结构的重复出现的4个甘氨酸和一个丝氨酸的15肽序列,这种Linker不仅可连接V区的C端与N 端,同时又可拉紧VH和VL而不影响它们之间的相互作用[13]。
3scFv的医学应用3.1scFv在抗肿瘤方面的应用目前,scF v已广泛用于食管癌、卵巢癌、宫颈癌、鼻咽癌、肝癌、胆囊癌、乳腺癌、肺癌、胃癌[14]、膀胱癌[15]、结肠癌[16]以及前列腺癌等研究工作中,如国外科学家利用噬菌体抗体库技术筛选到的前列腺癌特异性scF v(DUP21),用I131标记后在显像时发现前列腺癌的放射性高于正常组织3倍,说明scF v有良好靶向效果[17]。
段红等[18]将构建的scF v2脂质体2阿霉素免疫脂质体用于裸鼠鼻咽癌的治疗,显示对肿瘤有明显的抑制作用,实验组肿瘤体积仅为对照组的三分之一,证明scF v2脂质体2阿霉素免疫脂质体介导肿瘤的治疗具有高特异性、高效性及低毒性。
国内亦有研究表明,人卵巢癌抗原的抗独特型scF v(6B11ScFv)融合IgG1铰链区和CH3区所构成的6B11抗独特型微抗体,免疫小鼠后可刺激BALB/c小鼠脾脏淋巴细胞CD4+T细胞和CD8+T细胞明显升高,说明这种抗体可诱导机体产生特异性体液免疫和细胞免疫反应,为疫苗在临床的应用提供了实验依据[19]。
诸多研究表明,由scF v所形成的融合蛋白具有很好的靶向免疫作用,可透过屏障作用于肿瘤病灶处[20]。
由此可见,scF v在肿瘤的诊断、导向治疗及疫苗研制等方面有着广泛的应用前景。