动物营养研究方法

（2）消化能的测定
1）直接测定 ：根据消化试验结果和结合能 值测定进行
DE = （GE FE）/采食量（kg）
二、 体内消化实验
例如：体重50Kg的猪，每日食入日粮2Kg，含总 能33.47兆焦耳，每日排粪中的总能为8.34兆焦耳，
计算其采食饲料的的消化能。
饲料消化能 = （33.47-8.34）/2 =12.57（兆焦/Kg）
四、尼龙袋法
2、优点：
①工作量小，成本低，一次可以做大批量的饲料 ②可以对饲料营养价值进行排队，取得饲料相对营养价值。
3、缺点：
①孔径大小不好确定。 ②将饲料限制在尼龙袋内，无法充分混合，微生物也 不能进入。 ∴测试结果一般无法与饲料TD相匹配
4、计算公式： 降解率(%)=(袋中初始N-孵化后N)×100/袋中初始N
二、 体内消化实验
例 2: 某饲粮消化实验结果如下,计算CF消化率 饲料CF含量:40% 粪中CF含量: 40% 饲料指示剂添加量:3% 粪中指示剂含量:6%
CF消化率= 100 － 3 × 40 ×100 6 40 = 50
二、 体内消化实验
2）饲料原料：间接测定 二次消化实验
第一次：测定基础饲粮养分消化率
四、尼龙袋法
1、主要用于反刍动物，测定饲料养分的降解率。 操作：将待测饲料装入孔径40-60μ2（14×9cm）的
尼龙袋中，通过瘤胃瘘管放入瘤胃，在一定的时间里4、
8、16、24、48h（精料）， 8、16、24、48、72h（粗饲 料） 取出，冲洗，干燥，恒重。
认为从尼龙袋中透过的饲料是已被消化吸收了的饲料， 将尼龙袋当作是肠道的细胞膜（起滤过作用）。
第十章 动物营养研究方法
内
第一节 第二节 第三节 第四节 第五节 第六节
容
化学分析法 消化实验 代谢试验 平衡实验 饲养实验 化学预测法
第一节
化学分析法
一、营养物质的分析 二、抗营养因子分析
三、动物组织和血液理化成分分析
一、营养物质的分析
概念：应用物理、化学原理和方法对饲料、动
物组织及动物排泄物的某些成分，进行定性、定 量分析。
作用：为判定动物营养状况、动物营养需要和饲料
的营养价值提供基础数据。 分类：营养物质的分析、抗营养因子分析及动物组
织和血液理化成分分析。
一、营养物质的分析
1、概略养分分析
(1)水分
(2)粗蛋白（CP）真蛋白(TP)
(3)粗脂肪（EE） (4)粗纤维（CF） (5)粗灰分 (6)无氮浸出物（NFE）
(3)滴定法
(5)色谱法
(4)原子吸收法
(6)荧光法
(7)电泳
(8)分子生物技术
二、抗营养因子分析
1、概念
抗营养因子是指饲料中本身所有或从 外界进入，影响饲料营养价值和动物生长 的物质。
二、抗营养因子分析
2、种类
（1）影响蛋白质消化 蛋白酶抑制剂、凝集素、皂苷、多酚化合物等 （2）影响矿物元素利用
植酸、草酸、葡萄糖硫苷、棉酚
（3）影响维生素利用
双香豆素、抗维生素B族因子等
二、抗营养因子分析
（4）影响碳水化合物利用
（5）刺激免疫系统的抗营养因子
如:抗原蛋白
（6）综合性抗营养因子 如:水溶性非淀粉多糖。
二、抗营养因子分析
3、意义
分析饲料中抗营养因子的种类和含量，可
指导饲料的合理加工、利用、贮存，如通过
二、 体内消化实验
4）回-直肠吻合术
优点：收粪简便，而且可收集全部粪样； 缺点：手术复杂、成功率低和护理相对麻烦。
回
直 图肠 3 吻 合 术
—
二、 体内消化实验
5）可移动的回-盲瘘管术
优点：手术简单，荷术动物生理影响小；
缺点：仍需要指示剂。
6）屠宰法 7）盲肠切除法 （家禽）
图
可移动的回-盲瘘管术
二、 体内消化实验
3） 优点：在于减少收集全部粪便带来的麻烦，
省时省力，尤其是在收集全部粪便较困难时。
4）缺点：指示剂回收率对消化率影响较大，并且 很难找到回收率很理想的指示物质：分析困难，
较难获得重复性高的测定数据；与全收粪法最后
的缺点相同。
二、 体内消化实验
5）消化率的计算 原理：食入指示剂量=排出指示剂量
第二次：测定新饲粮养分消化率
为减少动物的影响，用二组动物同时实验 新饲粮组成：70-85%基础饲粮+15-30% 被测饲料
二、 体内消化实验
D(％) ＝ 100(A-B) / F＋ B
式中：D为被测饲料养分消化率
A为基础饲粮养分消化率 B为新饲粮养分消化率 F为被测饲料养分占新饲粮该养分的比例。
二、 体内消化实验
二、 体内消化实验
2）间接推算： 根据每日食入的可消化粗蛋白质（X1 ）、可消 化粗脂肪（X2）、可消化粗纤维（X3）、可消化无 氮浸出物（X4）的量（克），用下列回归公式计算 每日食入饲料的消化能（Y千焦）。
二、 体内消化实验
Y（牛）=24.23X1 +34.10X2+18.49X3 +16.99X4 ± 4.18% Y（绵羊）=23.93X1 +37.87X2+18.33X3 +16.99X4±3.77% Y（猪）=24.18X1 +39.41X2+18.41X3 +17.03X4 ± 4.18%
三
体外消化实验
1、概念： 是指摸拟消化道，在体外进行饲料的消化。 2、优点：操作方便，环境条件、处理方法和时间
易控制，更容易标准化。
3、缺点：与动物的生理系列化过程有一定的差异。
4、分类：消化道消化液法和人工消化液法。
三
体外消化实验
人工消化液消化：采用人工制成的消化酶
模拟消化液，主要用于反刍动物瘤胃饲料消化
饲粮指示剂含量 粪中养分含量 养分消化 × ×100 = 100率（%） 粪中指示剂含量 饲粮养分含量
二、 体内消化实验
（3）回肠末端 消化率测定 1）T型瘘管 · 优点：安瘘管后对荷术 动物生理影响小； · 缺点：必须用指示剂， 因不可能收集全部粪尿，由此 取样缺乏代表性，而且较麻烦。
图1、T型瘘管示意图
率/降解率的测定
分两步：先用纤维素分解酶制剂+HCl代替
瘤胃液，再用胃蛋白酶+HCl处理
三
体外消化实验
消化道消化液法：用安装的瘘管收取猪小肠
液（PIF）或牛的瘤胃液。一般用两步法：
反刍动物：瘤胃液消化→胃蛋白酶+HCl消化
→洗净残渣 单胃动物：胃蛋白酶 +HCl 消化→ PH 7.0 条 件下用PIF（小肠液）
第三节
代谢试验
一、概念与目的
二、操作过程
一、概念与目的
目的：测定饲料代谢能及养分代谢率的试验。
测定ME需要进行代谢试验，在消化试验的基础上增加 尿液的收集，反刍动物增加CH4收集。 CH4的收集：E CH4= CH4产量×燃烧值（55.8KJ/g） 收集时需有特殊的装置。如面罩或密封气柜，操作复杂，结
一、营养物质的分析
2、纯养分分析
（1）维生素 （3）微量元素 （5）脂肪酸 （2）矿物质 （4）氨基酸 （6）纯蛋白质
（7）糖等
一、营养物质的分析
3、分析对象
(1)饲料
(2)排泄物（粪、尿、呼出气、皮屑等）
(3)动物组织
(4)血液
(5)整体动物
一、营养物质的分析
4、分析方法
(1)称量法 (2)比色法
养分间互作也影响测定结果。
二、 体内消化实验
3）饲料替代法 原理：被测料替代实际基础饲料的一部分，分别 测定基础饲粮和替代后饲粮的养分。
优点：克服方法2中的参考饲粮或标准饲料的养
分变化造成的影响，而且克服养分不平衡的影响。
缺点：基础饲粮营养平衡，则代入被测饲料后可
能出现不平衡。
二、 体内消化实验
采食量、排粪量难以准确记录；
粪中养分含量受环境影响大； 工作量大。
二、 体内消化实验
(2)指示剂法
1）对指示剂的要求 ①不能被动物消化吸收 ②在饲料中、粪便中能均匀分布 ③有很高的回收率 ④对动物没有毒副作用 2）种类 外源指示剂 ———— 饲料本身不含，人为加入饲料中的指示物 质，一般多用Cr2O3; 内源指示剂————饲料本身含有，不能被动物消化吸收但可 以测定的成分，多用酸性不容灰分（ AIA acid insoluble ash） [2mol 或4mol HCl 不溶]
二、 体内消化实验 代谢笼中装了瘘管的猪
二、 体内消化实验
(4)单一原料消化率测定 1）被测饲料作为全部饲粮
优点：简单，不需要测定参考饲粮，无养分互作的干扰； 缺点：某些饲料适口性差，时间长后可能导致营养缺乏症。
2）被测饲料替代标准饲料法
优点：克服方法1的缺点； 缺点：标准饲料的质量规格很难在各种条件下保持一致，
二、 体内消化实验
表 不同种类的动物的实验期规定 预备实验期 正式实验期 牛、羊 马 猪 家禽* 10-14天 7-10天 5-10天 3-5 天 10-14天 8-10天 6-10天 4-5 天
*一般是进行代谢实验，采用强饲法，实验期为1-2天。
二、 体内消化实验
4、粪的收集和处理
（1）收粪方法：专用消化柜或消化栏、动物肛 门上套收粪袋 （2）粪样处理 1）全粪法：收集全部粪便 2）指示剂法：每天定时收粪 粪样称重，混匀，按总重的1/10-1/50取 样，加硫酸和甲苯，固氮防腐。
离体（in vitro） 离体（in vitro） 消化实验 消化实验
全收粪法
指示剂法
消化道消化液
人工消化液
肛门收粪
回肠收粪
内源指示剂